KR100266929B1

KR100266929B1 - 약학적 라이신-함유 폴리펩티드 조성물 및 그의 사용방법

Info

Publication number: KR100266929B1
Application number: KR1019940701386A
Authority: KR
Inventors: 로렌스알.그린
Original assignee: 스퍼징 피터; 사이트란 리미티드
Priority date: 1991-10-28
Filing date: 1992-10-28
Publication date: 2000-09-15
Also published as: AU2915592A; EP0613375A4; JPH07503705A; ES2217255T3; CA2122024A1; EP0613375A1; AU665789B2; ATE260672T1; EP0613375B1; HK1013622A1; DK0613375T3; WO1993008816A1; DE69233315T2; DE69233315D1

Abstract

본 발명은 일반식 -L-Glx-L-Glx-L-Lys-(여기서 Glx는 Gln 또는 Glu이다)을 갖는 펩티드 및/또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 활성 성분으로서 포함하는 약학적 조성물을 환자에게 투여함을 포함하는 면역결핍, 면역억제 또는 기능항진 면역상태의 치료 및 그러한 상태에서의 기회 감염증의 예방 및 치료를 위한 약학적 조성물 및 방법에 관한 것이다.

Description

[발명의 명칭]

약학적 라이신-함유 폴리펩티드 조성물 및 그의 사용방법

[발명의 상세한 설명]

본 발명은 펩티드 약학 조성물 및 그의 용도, 특히, -L-Glx-L-Glx-L-Lys-의 아미노 서열을 포함하는 펩티드에 관한 것이다. 상기 펩티드 조성물은 면역억제 상태 및 후천성 면역 결핍증(acquired immune deficiency syndrome: AIDS)과 관련된 면역억제 상태에서의 기회 감염증(opportunistic infections)의 치료에 유용하다.

[발명의 배경]

본 발명은 부분적으로는, 특정 펩티드 조성물, 특히 펜타펩티드가 면역억제 상태에서의 기회 감염증의 예방 및 치료와 면역 결핍 상태, 특히 AIDS의 효과적인 치료에 효과적임을 밝힌것에 근거한다. 이와 같이 비교적 작은 화합물이 넓은 범위의 활성을 나타내기 때문에 이 사실은 매우 예기치않은 것으로 생각된다. 더욱이, 본 발명에 따른 펩티드의 사용으로부터 어떠한 심각한 부작용도 발견되지않았다. 이러한 펩티드의 단순한 성질 때문에, 본 발명의 펩티드는 제조하기가 비교적 저렴하다. 본원에서 사용된 용어 "면역조절체(immunomodulater)" 및 "면역조절(immunomodulating)"은 측정가능한 혈액 파라미터 및/또는 환자의 감염 또는 질병에 대한 강화된 저항력으로 입증되는, 면역계를 강화시키거나 복구시키는 작용 및 조직을 치료하는 능력을 포함한다. 따라서, 면역조절은 면역 결핍 상태 (예를들어, 흉선의 제거에 기인한) 및/또는 면역 억제 상태 (예를들어, 복사선에 노출되어 생기는)에 의한 면역계의 강화를 포함한다. 더욱이, 본 발명은 만일 면역 상태의 지수가 비정상적으로 상승되면, 혈액 파라미터 및 기타의 면역상태 지수를 강하시킴으로써 면역계를 조절한다. 본 발명은 면역결핍, 면역억제 또는 그 자체로 상승된 면역 상태를 치료하여 면역계 강화에 의해 간접적으로 감염, 질병 또는 상처를 치료하는 것 뿐만 아니라 감염 및 질병에 대한 예방을 제공하는 치료방법을 포함한다.

따라서, 본 발명의 목적은 광범위한 면역조절 활성뿐만 아니라 감염의 치료, 대사 과정의 강화 및 많은 기타의 용도와 같은 그 외의 용도에 활성을 갖는 펩티드의 약학 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 하나의 목적은 AIDS와 같은 면역억제 및 면역결핍 상태의 치료 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 AIDS와 같은 면역억제 및 면역결핍 상태에서의 기회 감염증을 예방하고 치료하는 방법을 제공하는 것이다.

상기 및 기타 목적들은 하기의 기술 및 첨부된 특허 청구 범위에 의해 명백해질 것이다.

[바람직한 실시 태양의 기술]

본 발명에 따른 실시 태양은 표준 규정 (여기서, 처음 명명된 아미노산은 아미노 말단이고, 마지막 명명된 아미노산은 카복실 말단이다)을 사용한 하기 일반식 (I)을 포함하는 펩티드 조성물이다:

R'-Glx-Glx-Lys-R" (I)

상기식에서,

R'는 Thr-Ala-, Thr-Pro-, Ser-Ala-, Ser-Pro-, Ser-Ser-, Met-Leu-Thr-Ala- 또는 Leu-Thr-Ala-이고;

R"는 -H, -Ala, -Ala-Ala 또는 -Ala-Val이고;

Glx는 Glu 또는 Gln이며;

모든 아미노산은 L-배위이다.

본 발명에 따른 바람직한 실시 태양은 하기 일반식 (Ⅱ) (R"=H인 일반식 (I))의 펜타펩티드를 포함하는 약학적 제제이다:

R'-Glx-Glx-Lys (Ⅱ)

상기식에서,

R'은 Thr-Ala-, Thr-Pro-, Ser-Ala, Ser-Pro- 또는 Ser-Ser- 이다.

바람직한 종류는 Thr-Pro-Glx-Glx-Lys이고, Glx=Glu인 것이 특히 바람직하다.

R"=H인 종은 자유 C-말단 카복실 그룹을 가리킨다.

본 발명에 따라 유용한 기타의 특히 바람직한 종류는 하기와 같은 일반식 (I)에 따른 펩티드이다:

R' = Met-Leu-Thr-Ala- 및 R" = -Ala;

R' = Leu-Thr-Ala- 및 R" = -Ala;

R' = Leu-Thr-Ala- 및 R" = -Ala-Ala;

R' = Leu-Thr-Ala- 및 R" = -Ala-Val.

본 발명에 따른 펩티드는 활성 성분이 혈류로 흡수되도록 하는 임의의 편리한 제형일 수 있다. 근육내로 및 비강내로 적용되는 형태가 바람직하다. 근육내 투여를 위한 바람직한 활성 성분의 용량비는 성인에 대해 1회 투여량이 약 50 내지 약 100 ㎍(전체 치료에서 300 내지 1000 ㎍); 1세 이하의 유아는 1회 투여량이 약 10 ㎍이고, 1 내지 3세의 유아는 1회 투여량이 약 10 내지 20㎍이고, 4 내지 6세의 유아는 1회 투여량이 약 20 내지 30㎍이고, 7 내지 14세의 아동은 1회 투여량이 약 50 ㎍이다. 전술한 모든 투여량은 면역 결핍 수준에 따라서, 3 내지 10일 간의 치료에 유용하다. 상기 치료는 경우에따라, 일반적으로 1 내지 6 개월 내에서 반복할 수있다. 면역결핍 또는 면역억제 환자의 기회 감염증에 대한 예방 용도를 위해, 성인에 대한 근육내로 및/또는 비강내로의 1 일 투여량은 약 50 내지 10 ㎍이고, 3 내지 5일 동안의 치료의 아동에 대한 1회 용량은 10 내지 50 ㎍이다.

외부 감염의 치료를 위해서는, 상기 펩티드는 1일 투여량으로 약 10 ㎍ (4 내지 10일 동안) 투여하거나 또는 약 4 내지 5일 동안 1일에 2회 약 5㎍을 감염 부위에 도포한다.

상기 펩티드의 약 0.001 내지 0.01 중량%의 치료상 유효한 면역증진량의 활성 성분을 주사 용액으로 근육내로 이용할 수 있다. 정제, 캡슐 또는 좌약의 형태로 제조할 경우에는 정제, 좌약 또는 캡슐당 약 0.1mg의 활성 성분이 존재하는 것이 바람직하다. 그러한 형태에 있어서, 캡슐, 좌약 또는 정제는 충진제, 녹말, 글루코즈 등과 같은 기타 통상적 부형제 또는 비히클을 함유할 수 있다.

상기 펩티드는 메리필드 고체상 펩티드 합성 기술(Merrifield solid state peptide synthesis technique)을 포함하는 통상적 펩티드 합성에 의하여 수득될 수 있다. 예를들어, 아미노산과 Glx의 활성화된 에스테르의 측쇄 보호된 유도체를, 고체상에 C-말단이 결합된 측-그룹 보호된 L-Lys와 반응시킨다. α-아미노 보호 그룹을 제거한 후, 다음의 아미노산을 첨가한다. 펩티드의 절단, 보호 그룹의 제거에는 정제, 동결건조, 겔 정제법 및 목적 화합물을 수득하는 유사한 방법을 이용한다.

본 발명에 따른 약학 제제의 활성 폴리펩티드 성분은 유리된 펩티드이거나 또는 나트륨, 칼륨, 암모늄 또는 아연 염과 같은 수용성 약학적으로 허용가능한 염의 형태일 수 있다. 상기 펩티드는 항생제, 인터페론, 마취제 등과 같은 조성물에 독립적으로 활성을 나타내는 기타 활성 물질과 함께 투여할 수 있다.

본 발명에 따른 가장 바람직한 제형은 약 0.001 내지 0.01 중량% (용매 1㎖당 0.0001-0.001 mg/체중kg, 또는 10-100 ㎍의 활성물질)를 함유하는 근육내로의 주사를 위한 용액이다. 상기 주사형의 약학적으로 허용가능한 비히클은 0.9% 수성 염화 나트륨, 증류수, 노보카인 용액, 링게르액, 글루코즈 용액 등과 같은 임의의 약학적으로 허용가능한 용매일 수 있다. 본 발명에 따른 펩티드 함유 조성물은 장관의 투여에 적합한 (즉, 정맥 주사, 피하 주사, 근육 주사) 공존 가능한 약물로 투여될 수 있다. 제제는 멸균화와 같은 통상적 약학적 처리를 하거나 방부제, 안정화제, 습윤제 등과 같은 보조제를 함유할 수 있다.

본 발명에 따른 약학제제는 면역억제 및 면역결핍 상태에서의 기회감염증을 예방하고 치료하기 위해, 이러한 상태를 치료하는데 효과가 높음이 입증되어 있다.

또한 본 발명의 범위는 펩티드의 약학적으로 허용되는 염, 예를들면 나트륨 또는 칼륨, 또는 유기 강 염기 예를들면 구아니딘을 포함한다.

본 발명에 따른 펩티드 함유 조성물은 면역 기능의 회복 및 자극에 활성이 있다. 따라서 이들은 상기 기재된 바와 같이 면역 강화 효과량으로 면역억제된 대상의 기회감염증을 치료하는데 유용하다.

본 발명에 따른 펩티드 조성물도 또한 가축, 모피 동물 및 가금의 발육부진을 예방 및 치료하기 위한 면역조절제로서 수의 진료에 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물을 사용하여 치료할 수 있는 기회감염증은 호흡 질환, 인플루엔자, 에이즈, 화상, 상처 기타 개방성 궤양, 발진(알레르기 반응에 의한), 태양에 의한 화상, 국부 외상(연고), 습진, 건선 등이다. 더우기, 본 발명에 따른 조성물은 면역억제 또는 면역결핍 상태, 예를들면 골절, 손상 치은 질환, 부인과 감염증, 림프하부 감염증 등을 치유하는데 사용할 수 있다. 또한 조성물을 사용하여 면역결핍 상태를 향상시켜 미생물 항생제에 대한 감성을 증가시키고 기타 유형의 치료에 대한 환자의 반응성을 향상시킬 수 있다.

본 발명의 조성물은 조혈(homopoiesis) 감소와 관련된 상태 및 질환의 치료 및 예방에 유용하다. 일반적으로, 상기 조성물은 염증성 감염증 및 중독증에 의해 수반될 수 있는 기타 질환을 비롯하여 1차 또는 급성 또는 만성 질환에 의한 면역억제 및 면역결핍 상태를 치료하고 예방하는데 유용하다.

본 발명의 조성물은 모든 종류의 빈혈, 예를들면 철 겹핍 빈혈, 힘(heme) 합성 질환과 관련이 있는 빈혈, 용혈성 및 무형성 빈혈, 및 1차 및 2차 빈혈을 비롯하여 혈액 손실, 혈액 형성 질환 또는 혈액 파괴 확대로 인한 빈혈을 치료하고 예방하는데 특히 유용하다. 철 결핍 빈혈은 생리, 위장관 출혈, 객혈, 혈뇨, 혈액투석, 흡수장애, 감염증, 선천성 철 결핍증, 규정식 철 결핍증 및 유아기, 사춘기, 임신 및 유즙 중 증가된 철 필요조건에 의한 만성 빈혈을 포함한다. 또한 빈혈은 유전성인 용혈성 빈혈 예를들면 구상적혈구증, 유구적혈구증 및 타원적혈구증과 같은 적색 세포막 이상에 관련된 빈혈, 적혈구 효소 결핍(글루코스-6-포스페이트 탈수소효소 결핍, 파이루베이트 키나제 결핍 등)에 관련된 빈혈 및 헤모글로빈 쇄의 이상구조 및 합성에 관련된 빈혈(예: 탈라세미아, 겸상 적혈구 질환 등)을 포함한다. 또한 적혈구계 골수 세포에 대한 항체 공격의 증후군, 신체 돌연변이, 발작성 야간 혈색소뇨증으로 인한 적색 세포막 변화와 관련된 빈혈, 기계적 적색 세포 손상(인공 밸브)과 관련된 빈혈, 화학적 적색 세포 손상(용혈성 독, 납 등)과 관련된 빈혈, 비타민 E 결핍과 관련된 빈혈, 열적 적색 세포 손상 및 기생충(말라리아 포함)에 관련된 빈혈, 감염 및 비기능항진증과 관련이 있는 경우 용혈성 빈혈을 치료할 수 있다. 또한 빈혈은 거대적아구 빈혈, 예를들면 비타민 B12 결핍증, 아디슨/악성 빈혈, 위암, 장 질환(장 종양, 스프루우, 회장말단염), 위장 수술(위장문합술, 맹관증후군, 회장 절제 등)에 관련된 빈혈을 포함한다. 비타민 B12 소비 및 골수에 대한 이들의 영향의 증가에 의한 빈혈은 예를들면 장내 기생충증 (열두조충증), 간질환(간염, 경변증 등) 및 혈아구증에 의해 야기된다.

기타 빈혈은 장 질환(장 수술, 장 흡수장애), 장기간 약물 투여(항경련제 등), 규정식 부족, 증가된 엽산 요구량(유아기, 사춘기, 임신, 유즙분비), 용혈성 빈혈, 건선, 엽산염의 과잉 손실(혈액투석, 복막투석) 및 불완전한 엽산염 합성(간질환, 알콜중동즉, 항엽산제)과 관련된 엽산 결핍증에 의해 야기될 수 있다.

또한 본 발명은 위중한 복합 면역결핍증, 디죠지(DiGeorge) 증후군, 비스코트-알드리치(Wiskott-Aldrich) 증후군 및 만성 점액 피부 칸디다증과 같은 T-세포 면역결핍증 치료에 유용하다.

본 발명에 따른 펩티드는 또한 골수 기능부전증(무형성 빈혈 포함)이 나타나는 질환, 예를들면 방사선, 화학 약제(벤젠, 트리니트로 톨루엔, 살충제 등), 골수 세포에 대한 항체, 유전적 인자(판코니 빈혈) 또는 바이러스성 간염과 같은 감염증과 관련된 질환을 치료하고 예방하는데 유용하다.

일반적으로, 본 발명에 따른 펩티드는 선천적 상태 및 방사선 또는 기타 세포독성 인자 및 약제에 의해 생긴 상태를 비롯하여 여러 유형의 림프구감소증, 백혈구감소증 및 혈구감소증을 치료하고 예방하는데 유용하다. 치료될 수 있는 기타 상태는 출혈성 질병체질, 혈우병, 혈소판감소증, 자반형, 출혈성 혈관염, DC, 유전성 출혈성 모세관혈관 확장증을 포함한다.

상처 진행, 및 세포의 독성 및 감염증 손상을 비롯하여 조직 및 일체성 회복을 수반하는 상태 및 질환에서 기관 및 조직 재생도 또한 본 발명에 따른 펩티드를 사용하여 촉진시킬 수 있다. 또한, 중독증 (또는 조직 신진대사 장애)을 수반하는 만성질환에 투병하거나 또는 새롭거나 극심한 환경조건에의 적응을 돕기 위해 회복 도중에 면역계 및 기타 방위를 본 발명에 따른 펩티드에 의해 촉진시킬 수 있다. 또한 항생제 및 항종양제를 비롯한 약제의 사용에 관련되거나 또는 치료방법 예를들면 방사선 및 외과에 관련된 면역결핍증도 본 발명에 따른 펩티드를 사용하여 완화시킬 수 있다.

또한 특정 감염증, 예를들면 결핵증, 매독 및 통풍 뿐만 아니라 종양 질환 및 기생충 질환(예: 기생충증)도 치료할 수 있다. 또한 급성 및 만성 독성도 치료할 수 있다.

세포증식억제성 인자(방사선 요법, 세포독성 약제, 세포독성 부작용이 있는 약제[예: 클로람페니콜, 클로르프로마진 등])로부터 생긴 무과립구증을 치료할 수 있다. 전신성 질환(SLE, 간염 등) 또는 약제(설프아미드, 바르비투레이트, 아미노피리딘 등)와 같은 화합물의 영향하에 항 백혈구 항체 형성에 의해 생긴 면역 무과립구증도 치료하고 예방할 수 있다.

감염성 질환(장티푸스, 야토병, 브루셀라병), 바이러스성질환(간염, 인플루엔자, 볼거리, 감염성 단핵세포증가증), 원생동물(말라리아), 화학 및 물리약제(방사선, 약제), 특이체질 약물반응, 비기능항진증(간 질환, 축적증), 콜라겐-혈관 질환(SLE), 삼한 엽산 또는 B12 결핍증 및 체외 순환과 폐 미소순환 질환과 관련된 호증구감소증을 비롯하여 호증구감소증을 수반하는 상태 및 질환을 치료할 수 있다.

조혈(거대적아구 빈혈 및 골수형성이상 증후군), 혈액희석, 비기능항진증 및 면역 파괴에 의한 범혈구감소증도 또한 치료할 수 있다.

2차 면역결핍증 예를들면 바이러스성 감염증(HIV, 홍역, 거대세포바이러스, 엡스타인-바르 바이러스), 비장절제술, 화상, 상 교합, 상처 치유 진행, 면역억제제(항생제, 코르티코스테로이드, 항대사물질등), 방사선, 미숙, 당뇨병, 단백질-손실 상태, 신증 증후군, 장염 및 노화를 치료할 수 있다.

1차 B-세포 면역결핍증, 예를들면 선택적 IgA 결핍증, 선택적 IgM결핍증, 선택적 IgG 아류 결핍증, X-연관 무감마 글로불린혈증 및 가변성 저감마글로불린혈증을 치료할 수 있다.

결과적으로, 본 발명에 따른 펩티드는 외과, 부인과 및 ENT 화농성 질환을 치료하는데 사용할 수 있다.

[실시예 1]

건강한 기니 피그의 면역계에 미치는 효과

수컷 기니 피그를 하기 시험에 사용한다. 동물 대부분을 5일동안 펜타펩티드(선형 단량체 Glx=Glu) ㎍/kg 을 1일 1회 투여(근육내)하여 치료한다. 대조용 동물들은 정상 식염 0.5㎖를 1일 1회(근육내) 투여하여 치료한다.

시험변수: 임상적 혈액 검사, 리소좀 양이온성 시험에 의한 비특이적 내성; :"활성" T-림프구 및 전체 T-림프구(E-RFC), B-림프구(EAC-RFC)는 혈액, 흉선, 림프절, 비장 및 적색 골수에서 측정 한다. 혈액 림프구 기능 활성은 ConA를 사용하여 백혈구 유주(migration) 억제(LMI)에 의해 검사한다. 흉선, 비장, 림프절, 골수 및 부신의 조직 검사를 수행한다. 이러한 모든 검사는 치료 개시 후 10일 및 20일에 수행한다.

펩티드는 흉선 및 골수에서 림프구 세포 증식 및 분화를 촉진시키고; 우세한 T-림프구 자극이 관찰된 후 T- 및 B-림프구 둘다의 자극이 관찰된다. 펩티드 때문에 림프절, 비장 및 특히 골수에서 유사 분열 활성이 증가한다.

[실시예 2]

면역계에 미치는 효과

수컷 기니 피그를 하기 시험에 사용한다.

기니 피그를 총 1Gy의 방사선에 노출시킨다. 타겟-피부거리-70cm; 노출시간-2'48" 장치: 180kV; 15mA; 필터 0.5Gu 치료: 5일동안 1일 1회 1㎍ 활성 성분/kg(근육내).

대조용 치료: 정상 식염 0.5㎖를 근육내에 5일동안 1일 1회 투여한다.

백혈구 및 림프구 양은 방사선 조사 후 주기적으로 말초성 혈액에서 측정한다.

펩티드는 혈액 림프구 세포 증식을 자극하여 그 결과 백혈구 및 림프구 양을 회복시켰다.

두번째 시험에서, 수컷 기니 피그를 사용하고 동일한 양생법을 따른다.

방사선을 조사한 것과 조사하지 않은 2개의 대조용이 있다. 변수들은 방사선 조사후 8일 및 21일에 각각 평가한다.

시험변수: 임상적 혈액 검사, 리소좀 양이온성 시험에 의한 비특이적 내성; "활성" T-림프구 및 전체 T-림프구(E-REC), B-림프구 (EAC-RFC)는 혈액, 흉선, 림프절, 비장 및 적색 골수에서 측정 한다. 혈액 림프구 기능 활성은 ConA를 사용하여 백혈구 유주 억제(LMI)로 검사한다. 흉선, 비장, 림프절, 골수 및 부신의 조직 검사를 수행한다.

방사선을 조사한 동물에게 펩티드를 사용하여 초기에 T-림프구의 성숙 및 말초 면역기관으로의 유주를 가속화시킨다. 본 연구의 이후 단계에서, 효과는 면역계의 증추기관과 말초기관 둘다의 증식 및 분화의 향상에 있어서 보다 명백해진다.

[실시예 3]

흉선절제한 기니 피그에 미치는 효과

모델: 흉선절제술(흉선제거): 잡종 수컷 기니 피그

치료: 10일 동안 1일 1회 근육내에 1㎍ 활성성분/kg 투여

대조용 치료: 근육내에 정상 식염 0.5㎖를 10일 동안 1일 1회 투여(흉선 절제한 것과 가장-수술한 2개의 대조용이 있다).

변수는 치료 개시 후 15일에 측정한다.

시험변수: 임상적 혈액 검사, "활성" T-림프구 및 전체 림프구(E-RFC), B-림프구(EAC-RFC)는 혈액, 흉선, 림프절, 비장 및 적색 골수에서 측정한다.

흉선절제한 동물에 있어서 펩티드를 사용하면 림프구 세포분화를 자극하지 않고 도리어 어느 정도 이를 억제한다.

[실시예 4]

T- 및 B-림프구의 표면 수용체의 발현에 미치는 효과

모델: A. 본 실험은 단백 분해 후 또는 심한 2차 면역결핍증 후 림프구의 표면 수용체의 회복을 연구한 것이다. 기니 피그로부터 얻은 흉선 림프구를 트립신화한 후 래빗 적혈구 와 로제트-형성 능력(E--RFC)을 평가한다. 상기 세포를 1, 10 및 100㎍/㎖ 농도의 펩티드로 항온처리한다. 펩티드로 항온처리하지 않은 흉선림프구(트립신화시키지 않음) 및 트립신화한 흉선림프구인 2개의 대조용 샘플이 있다.

펩티드는 10㎍/㎖ 농도에서 가장 활성이 있다. 생물학적 활성 78.9% (로제트-형성 능력 회복율)

B. B-림프구는 연쇄상구균 및 포도상구균 피부 질환이 있는 환자로부터 얻으며 이는 매우 현저한 2차 면역결핍증을 나타낸다. 펩티드로 항온처리하기 전과 후에 Ig-수용체를 운반하는 세포수를 측정한다(인간 Ig 에 대한 FITC-표지화된 면적을 이용).

1㎍/㎖ 농도의 펩티드는 상이한 유형의 Ig-수용체 운반 세포수를 상당히 증가시킨다.

[실시예 5]

적혈구생성 효과

본 시험은 후출혈성 빈혈(후안와동으로부터의 수혈로 인한 급성 혈액 손실) 및 페닐하이드라진 하이드로클로라이드(120mg 활성성분/kg 30 Balb/c-마우스 및 30 CBA-마우스)에 의해 유도된 용혈성 빈혈을 연구한 것이다.

5일 동안 빈혈증을 모델링한 후 3시간 및 1일에 100 및 150㎍/kg 의 펩티드를 복강내에 주사한다.

시험변수: RBC, 백혈구, 망상적혈구, Hb, Hct

1. 후출혈성 빈혈증의 경우, 발병후 수일내에 시험 변수들의 가장 명백한 변화가 있다: 대조용에 비해 적혈구 하락, 망상적혈구상승, 백혈구도 또한 증가한다. 투여 6일후 RBC 계수는 7.1mln/㎖까지 상승하고, Hb 양 및 플라즈마/형성된 요소 정량 회복이 보다 신속하다. 150㎍/kg 의 펩티드가 효과적이다.

2. 용혈성 페닐하이드라진-유도된 빈혈의 경우, 가장 명백한 혈액억제는 약물투여 개시 후 수일내에 일어난다. RBC는 하락하고, Hb는 감소하며 망상 적혈구는 증가한다. 약물 투여한지 수일 후에 적혈구가 증가하여 유지된다. 따라서, 펩티드는 상이하게 발생되는 빈혈증에서의 적혈구증가에 효과가 있다.

[실시예 6]

콜로니-형성 활성에 대한 영향

본 시험은 대식세포 전구체를 연구한 것이다. 사용한 배양 세포는 기니-피그 척수유핵세포이다. 1.0, 0.001, 0.00001 및 0.0000001㎍/㎖ 농도로 펩티드를 배양 세포에 가한다.

펩티드는 0.0000001㎍/㎖ 농도에서부터 거대세포 전구체콜로니-형성 활성을 촉진시킨다.

[실시예 7]

혈액자극 효과

본 시험은 175mg/kg의 양으로 5-플루오로우라실을 복강내 주사함으로써 유도된 혈액억제를 연구한 것이다(172마리 수컷 CBA-마우스). 치료: 5일동안 5-FU를 주사한 후 4일 후부터 펩티드를 0.00001, 0.001, 0.01, 0.1, 1.0mg/kg 양으로 투여한다.

대조용 치료: 5일동안 정상 식염을 복강내 투여

시험변수: 말초 혈액 계수 및 골수 분화계수.

펩티드는 조혈의 활성 회복을 촉진시킨다. 이로 인해 백혈구 및 모든 CBC 변수가 정상화된다. 골수에서, 펩티드로 인해 모든 조혈의 세포충실성 정상화가 회복된다. 페비드는 0.001mg/kg부터 활성이 있다.

본 발명의 취지 및 범주를 벗어나지 않고 본 발명을 유추, 개선 및 변형시킬 수 있음은 물론이다. 이러한 유추 및 개선은 본 발명의 범위 및 첨부된 특허청구범위내에서 고려된다.

Claims

효과량의 하기 일반식을 갖는 실질적으로 정제된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 약학적으로 허용가능한 비히클을 포함하는, 면역결핍, 면역억제 또는 상승된 면역 상태를 치료하기 위한

약학 조성물:

R'-Glx-Glx-Lys-R"

상기 식에서,

Glx는 Glu 또는 Gln이고;

R' 는 Thr-Ala-, Thr-Pro-, Ser-Ala-, Ser-Pro-, Ser-Ser- 및 Leu-Thr-Ala-로 이루어진 군으로부터 선택된 제 1 아미노산 서열이고;

R" 는 -H, 또는 -Ala, -Ala-Ala 및 -Ala-Val으로 이루어진 군으로부터 선택된 제 2 아미노산 서열이고;

모든 아미노산은 L-배위이다.
제1항에 있어서, 화합물이 나트륨, 칼륨, 암모늄, 구아니디늄 및 아연으로 이루어진 군으로부터 선택된 약학적으로 허용가능한 염인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 화합물이 Thr-Pro-Glu-Glu-Lys 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 화합물이 Thr-Pro-Glx-Glx-Lys 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 약학 조성물.
제1항에 있어서, 화합물이 Thr-Pro-Gln-Gln-Lys 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 약학 조성물.
하기 일반식을 갖는, 5개 이상의 아미노산의 실질적으로 정제된 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:

R'-Glx-Glx-Lys-R"

상기 식에서,

Glx는 Glu 또는 Gln이고;

R' 는 Thr-Ala-, Thr-Pro-, Ser-Ala-, Ser-Pro-, Ser-Ser- 및 Leu-Thr-Ala-로 이루어진 군으로부터 선택된 제 1 아미노산 서열이고;

R" 는 -H, 또는 -Ala, -Ala-Ala 및 -Ala-Val으로 이루어진 군으로부터 선택된 제 2 아미노산 서열이고;

모든 아미노산은 L-배위이다.
제6항에 있어서, Thr-Pro-Glx-Glx-Lys 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 화합물.
제6항에 있어서, Thr-Pro-Glu-Glu-Lys 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 화합물.
제6항에 있어서, Thr-Pro-Gln-Gln-Lys 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 화합물.
제6항에 있어서, R" 가 -H인 화합물.
제6항에 있어서, R' 가 Thr-Pro-인 화합물.
제6항에 있어서, Leu-Thr-Ala-Glx-Glx-Lys-Ala, Leu-Thr-Ala-Glx-Glx-Lys-Ala-Ala, Leu-Thr-Ala-Glx-Glx-Lys-Ala-Val 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 화합물.
제6항 내지 제9항 및 제10항 내지 제12항중 어느 한 항에 있어서, 나트륨, 칼륨, 암모늄, 구아니디늄 및 아연으로 이루어진 군으로부터 선택된 약학적으로 허용가능한 염인 화합물.
제1항에 있어서, 화합물이 Leu-Thr-Ala-Glx-Glx-Lys-Ala, Leu-Thr-Ala-Glx-Glx-Lys-Ala-Ala, Leu-Thr-Ala-Glx-Glx-Lys-Ala-Val 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염인 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 화합물 0.001 내지 0.01중량%를 포함하는 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 비히클이 수용액인 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 약학적으로 허용가능한 비히클이 비경구투여용인 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 정제, 캡슐 또는 좌약 형태인 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 화합물의 투여량이 10 내지 50 ㎍인 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 화합물의 투여량이 50 내지 100 ㎍인 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 면역억제 또는 면역결핍성 면역 상태의 치료를 위한 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 상승된 면역 상태의 치료를 위한 약학 조성물.
제1항 내지 제5항 및 제14항중 어느 한 항에 있어서, 면역억제 또는 면역결핍 상태와 관련된 기회감염증을 치료하기 위한 약학 조성물.
제21항에 있어서, 면역억제 또는 면역결핍성 면역 상태가 AIDS인 약학 조성물.
제21항에 있어서, 면역억제 또는 면역결핍성 면역 상태가 림프구감소증 또는 호중구감소증인 약학 조성물.