KR100238894B1

KR100238894B1 - 시클로 펩티드

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Publication number: KR100238894B1
Application number: KR1019930022666A
Authority: KR
Inventors: 알프레트용시크; 귄터홀제만; 브룬힐데펠딩-하버만; 프레드리히리프만; 가이도멜쩌; 비이테디에펜바하; 호르스트케슬러; 롤란드하우스너; 요헨베르무쓰
Original assignee: 플레믹 크리스티안; 메르크 파텐트 게엠베하
Priority date: 1992-11-06
Filing date: 1993-10-29
Publication date: 2000-01-15
Also published as: PL177772B1; SK280597B6; EP0596350A1; RU2129563C1; PL300935A1; JP3681764B2; KR940011479A; TW340849B; ES2105041T3; DE4237456A1; ATE154037T1; NO934003D0; GR3024550T3; EP0596350B1; UA43822C2; AU5039993A; CZ286170B6; NO309864B1; SK121793A3; HU215600B

Abstract

본 발명은 하기 일반식(Ⅰ)로 표시되는 시클로펩티드와 그의 염을 제공한다.

시클로-(A-B-C-D-Arg) (Ⅰ)

(상기식에서, A및 B는 각기 독립하여 Ala, Asn, Asp, Arg, Cys, Gln, Glu, Gly, His,Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr 또는 Val이고, C는 Asp 또는 Asp(O-C_1-4-알킬)이며, D는 Gly 또는 Ala이고, 상기 식중 아미노산 라디칼 2종이상은 D-형태로 존재한다.)

본 발명의 화합물은 인테그린 억제제로서 작용하고, 특히 순환계질병의 예방과 치료 및 종양치료에 사용할 수 있다.

Description

시클로 펩티드

본 발명은 하기 일반식(Ⅰ)로 표시되는 신규한 시클로펩티드와 그의 염에 관한 것이다.

시클로-(A-B-C-D-Arg) (Ⅰ)

(상기식에서, A 및 B는 각기 독립하여 Ala, Asn, Asp, Arg, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr 또는 Val이고, C는 Asp 또는 Asp(O-C_1-4-알킬)이며, D는 Gly 또는 Ala이고, 상기 식중 아미노산 라디칼 2종 이상은 D-형태로 존재한다.)

유사한 화합물들은 문헌(Pharmazie, 40 (8), 532-5, (1985))에 공지되어 있다.

본 발명의 목적은 유용한 특성을 가지는 화합물, 특히 약물의 제조에 사용할 수 있는 신규한 화합물을 발견하는 데에 있다.

본 발명자들은 일반식(Ⅰ)로 표시되는 화합물 및 그의 염이 유용한 특성을 갖고 있는 것을 알게 되었다. 특히, 이들 화합물은 β₃-인테그린 수용체와 리간드와의 상호작용을 억제하는, 인테그린 억제제로서 작용한다. 이와 같은 작용은, 예를 들어 공지된 방법(J.W.Smith et al. in J. Bioi. Chem. 265, 12267-12271 (1990))에 의해 입증할 수 있다. 더욱이, 이러한 화합물은 소염작용을 나타낸다. 이러한 모든 작용효과는 문헌에 공지되어 있는 방법으로 입증할 수 있다.

본 발명의 화합물은 인간 및 수의학에 있어서, 특히 순환계 질병, 혈전증, 심근경색증, 동맥경화증, 염증, 중풍, 협심증, 종양, 골연화장해(특히, 혈관형성술 후의 골다공증, 맥관형성증, 재협착증)의 예방과 치료를 위한 약제학적 활성 화합물로서 사용할 수 있다.

상기 및 하기에서 언급한 아미노산 라디칼에 대한 약어는 다음과 같은 아미노산 라티칼을 나타낸다 :

Ala 알라닌

Asn 아스파라긴

Asp(OR) 아스파르트산(β-에스테르)

Arg 아르기닌

Cys 시스테인

Gln 글루타민

Glu 글루탐산

Gly 글리신

His 히스티딘

Ile 이소류신

Leu 류신

Lys 리신

Met 메티오닌

Phe 페닐알라닌

Pro 프롤린

Ser 세린

Thr 트레오닌

Trp 트립토판

Tyr 티로신

Val 발린

또한, 하기한 약어의 뜻은 다음과 같다 :

BOC 3차-부톡시카르보닐

CBZ 벤질옥시카르보닐

DCCI 디시클로헥실카르보디이미드

DMF 디메틸포름아미드

EDCI N-에틸-N'-(3-디메틸아미노프로필)-카르보디이미드염산염

Et 에틸

FMOC 9-플루오레닐메톡시카르보닐

HOBt 1-히드록시벤조트리아졸

Me 메틸

Mtr 4-메톡시-2, 3, 6-트리메틸페닐술포닐

OBut 3차-부틸 에스테르

OMe 메틸 에스테르

OEt 에틸 에스테르

POA 페녹시아세틸

TFA 트리플루오로아세트산

상기한 아미노산이 여러 에난티오머 형태로 존재할 경우, 상기 및 하기에 기술한 이들 모든 형태와 이의 혼합물(예를 들어, DL-형)이 예를 들면 일반식(Ⅰ)의 화합물의 성분으로서 포함된다.

본 발명은 또한, 특허청구의 범위 제1항에 따른 일반식(Ⅰ)의 화합물 또는 이의 염중 하나를 제조하는 방법에 있어서, 그의 작용성 유도체중 하나로부터 가용매 분해제 또는 가수소분해제로 처리하여 유리시키거나, 또는 하기 일반식(Ⅱ)의 펩티드 또는 이러한 펩티드의 반응성 유도체를 고리화제로 처리하고/하거나 일반식(Ⅰ)의 염기성 또는 산성화합물을 산 또는 염기로 처리함으로써 이의 염중의 하나로 전환시키는 것을 특징으로 하는 제조방법에 관한 것이다.

H-Z-OH (Ⅱ)

(상기식에서, Z는 -A-B-C-D-Arg-, -B-C-D-Arg-A-, -C-D-Arg-A-B, -D-Arg-A-B-C 또는 -Arg-A-B-C-D- 이다.)

상기 및 하기한 라디칼 A, B, C, D 및 Z는 달리 언급되지 않는한 상기 일반식(Ⅰ) 및 (Ⅱ)에서 정의한 바와 같다.

상기 식들 중에서 알킬기로는 메틸, 에틸, 이소프로필 또는 3차-부틸기가 바람직하다.

A기로는 Val이 바람직하고, 특히 D-Val이 바람직하다. B기로는 Phe가 바람직하고, 특히 D-Phe가 바람직하다. C기로는 Asp가 바람직하고, 특히 D-Asp가 바람직하다. D기로는 Gly가 바람직하다.

따라서, 본 발명은 특히 일반식(Ⅰ)의 화합물에 관한 것으로, 여기에서 언급된 라디칼 중 적어도 하나는 상기한 바람직한 정의중의 하나이다.

바람직한 화합물 그룹은 일반식(Ⅰ)에 상응하는 부일반식(Ia)로 표시할 수 있으며, 단 부일반식(Ia)에 있어서, A는 D-Val, B는 Phe, C는 Asp 및 D는 Gly 또는 Ala이다.

이와 달리, 일반식(Ⅰ)의 화합물 및 이의 제조용 출발물질은 문헌[예를 들어, Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie(Methods of Organic Chemistry), Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart와 같은 표준 작업서]에 기술된 바와 같은 공지된 방법을 사용하여, 특히 상기 반응에 적합하고, 공지되어 있는 반응조건하에서 제조된다. 또한, 이 문헌에 좀더 상세히 기술되지 않은 공지된 변형방법을 사용할 수도 있다.

출발물질은, 필요시 반응혼합물로부터 분리하지 않고, 즉시 계속 반응시켜 일반식(Ⅰ)의 화합물이 생성되도록 동일 반응계에서 형성시킬 수도 있다.

일반식(Ⅰ)의 화합물은 가용매분해, 특히 가수분해, 또는 가수소분해에 의해 이의 작용성 유도체로부터 유리시켜 얻을 수 있다.

가용매분해 또는 가수소분해를 위한 바람직한 출발물질로는 1종 이상의 유리 아미노 및/또는 히드록시기 대신에 적당한 보호 아미노 및/또는 히드록시기를 함유하는 것이고, N원자에 결합된 수소원자 대신에 아미노보호기를 함유하는 출발물질, 예를 들어 일반식(Ⅰ)에 상응하지만, NH₂기 대신에 NHR'기를 함유하는 출발물질(여기에서, R'는 아미노보호기, 즉 BOC또는 CBZ이다.)이 바람직하다.

이외에, 히드록시기의 수소원자 대신에 히드록시 보호기를 함유하는 출발물질, 예를 들어 일반식(Ⅰ)에 상응하지만, 히드록시페닐기 대신에 R" O-페닐기를 함유하는 출발물질(여기에서, R"은 히드록시보호기이다.)이 바람직하다.

출발물질의 분자내에서는 동일하거나 상이한 여러개의 보호 아미노 및/또는 히드록시기가 존재할 수 있다. 존재하는 보호기가 서로 상이할 경우에는, 대부분 이들 보호기는 선택적으로 제거될 수 있다.

"아미노 보호기"란 일반적으로 공지되어 있고, 화학반응으로부터 아미노기를 보호(차폐)하는데 적합하나, 목적하는 화학반응이 분자의 다른 위치에서 수행된 후에는 용이하게 제거될 수 있는 기를 말한다. 이러한 형태의 전형적인 보호기로는, 특히 비치환되거나 치환된 아실, 아릴, 아르알콕시메틸 또는 아르알킬기를 들 수 있다. 아미노보호기는 목적하는 반응(또는 일련 반응)이 진행된 후에 제거되기 때문에, 보호기의 특성 및 크기는 그다지 중요하지 않지만, 탄소수 1내지 20, 특히 1내지 8을 갖는 것이 바람직하다. "아실기"란 본 발명의 방법과 관련하여 넓은 의미로 이해되어져야 한다. 이러한 아실기로는 지방족, 방향성지방족, 방향족 또는 헤테고리형 카르복실산 또는 술폰산으로부터 유도된 아실기를 포함하고, 특히 알콕시카르보닐, 아릴옥시카르보닐기를 포함하고, 더욱이 아르알콕시카르보닐기를 포함한다. 이러한 형태의 아실기로는 아세틸, 프로피오닐 또는 부티릴기와 같은 알칸오일; 페닐아세틸기와 같은 아르알칸오일; 벤조일 또는 톨루일기와 같은 아로일; POA기와 같은 아릴옥시알칸오일; 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐, 2,2,2-트리클로로에톡시카르보닐, BOC, 2-요오도에톡시카르보닐기와 같은 알콕시카르보닐; CBZ("카르보벤즈옥시"), 4-메톡시벤질옥시카르보닐, FMOC기와 같은 아르알킬옥시카르보닐; 및 Mtr기와 같은 아릴술포닐기를 예로 들 수 있다. 바람직한 아미노보호기로는 BOC 및 Mtr기가 있고, 이외에 CBZ, FMOC, 벤질 및 아세틸기가 있다.

"히드록시 보호기"란 일반적으로 공지되어 있으며, 화학반응으로부터 히드록시기를 보호하는데 적합하나 목적하는 화학반응이 분자의 다른 위치에서 수행된 후에는 용이하게 제거될 수 있는 기를 말한다. 이러한 형태의 전형적인 보호기로는 상기한 비치환되거나 치환된 아릴, 아르알킬 또는 아실기를 들 수 있고, 이외에도 알킬기를 들 수 있다. 히드록시 보호기는 목적하는 반응 또는 일련 반응이 진행된 후에 제거되기 때문에, 보호기의 특성 및 크기는 그다지 중요하지 않지만, 탄소수 1-20, 특히 1 내지 10을 갖는 것이 바람직하다. 히드록시 보호기로는 벤질, p-니트로벤조일, p-톨루엔술포닐 및 아세틸기가 그중 바람직하고, 벤질 및 아세틸기가 특히 바람직하다. 아스파르트산 및 글루탐산중의 COOH기는 이의 3차-부틸 에스테르(예를 들어, Asp(OBut))의 형태로 보호하는 것이 바람직하다.

출발물질로서 사용되는 일반식(Ⅰ)의 화합물의 작용성유도체는 예를 들어 상기한 표준작업서 및 특허 출원에 기술된 바와 같은 아미노산 및 펩티드합성의 통상적인 방법에 의해 제조할 수 있고, 또한 예를 들어 메리필드 고체상 방법(참조, B.F. Gysin and R.B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 94, 3102 et Seq.(1972))에 의해 제조할 수도 있다.

일반식(Ⅰ)의 화합물을 이의 작용성 유도체로부터 유리시키는 방법은 사용된 보호기에 따라, 예를 들면 TFA 또는 과염소산과 같은 강산을 사용하여 수행하거나, 또한 염산 또는 황산과 같은 다른 강무기산 또는 트리클로로아세트산과 같은 강 유기카르복실산, 또는 벤젠- 또는 p-톨루엔술폰산과 같은 술폰산을 사용하여 수행한다. 추가로, 불활성용매가 상기 반응에 존재하게 할 수 있지만, 반드시 필요한 것은 아니다. 적합한 불활성 용매로는 유기용매가 바람직한데, 예를 들어 아세트산과 같은 카르복실산, 테트라히드로푸란 또는 디옥산과 같은 에테르, DMF와 같은 아미드, 티클로로메탄과 같은 할로겐화탄화수소를 들 수 있고, 이외에도 메탄올, 에탄올 또는 이소프로판올과 같은 알코올 및 물을 들 수 있다.

이 밖에, 상기한 용매의 혼합용매를 사용하는 것도 적합하다. TFA는 다른 용매를 첨가하지 않고 과량으로 사용하는 것이 바람직하며, 과염소산은 아세트산과 70% 과염소산 9:1 비율의 혼합용매 형태로 사용하는 것이 바람직하다. 분해를 위한 반응온도는 약 0 내지 약 50℃, 바람직하게는 15 내지 30℃(실온)이다.

BOC, OBut 및 Mtr기는 예를 들어, 디클로로메탄중 TFA을 사용하여 제거할 수 있거나 디옥산중 약 3 내지 5N HCl을 15 내지 30℃에서 사용하여 바람직하게 제거할 수 있고, FMOC기는 DMF중 디메틸아민, 디에틸아민 또는 피페리딘 약 5 내지 50% 용액을 15 내지 30℃에서 사용하여 제거할 수 있다.

가수소분해에 의해 제거할 수 있는 보호기(예를 들어, CBZ 또는 벤질기)는 예를 들어 촉매(예를 들어, 팔라듐, 바람직하게는 카본과 같은 담체상의 팔라듐과 같은 귀금속촉매)존재하에 수소로 처리함으로써 제거할 수 있다. 이 경우, 적합한 용매로는 상기한 용매, 특히 메탄올 또는 에탄올과 같은 알코올, 또는 DMF와 같은 아미드를 예로 들 수 있다. 일반적으로, 가수소분해는 약 0 내지 100℃의 온도 및 약 1내지 200바아의 압력, 바람직하게는 20 내지 30℃의 온도 및 1 내지 10바아의 압력에서 수행한다. CBZ기의 가수소분해는 예를 들어 메탄올 중 5 내지 10%의 Pd-C상에서 또는 메탄올/DMF중 Pd-C상에서 포름산 암모늄(H₂대신에 사용함)을 20~30℃에서 사용하여 용이하게 수행한다.

일반식(Ⅰ)의 화합물은 또한 펩티드 합성 조건하에 일반식(Ⅱ)의 화합물의 고리화에 의해 얻을 수 있다. 이 경우, 상기 반응은 문헌[Houben-Weyl, loc cit. volume 15/Ⅱ, 페이지 1-806 (1974)]에 기술된 바와 같은 펩티드 합성의 통상적인 방법에 의해 수행하는 것이 바람직하다.

반응은 탈수제[예를 들어 DCCI 또는 EDCI와 같은 카르보디이미드, 이외에 프로판포스폰산 무수물(참조, Angew. Chem. 92, 129(1980)), 디페닐포스포릴아지드 또는 2-에톡시-N-에톡시카르보닐-1,2-디히드로퀴놀린]존재하에, 불활성용매(예를 들어, 디클로로메탄과 같은 할로겐화탄화수소, 테트라히드로푸란 또는 디옥산과 같은 에테르, DMF 또는 디메틸아세트아미드와 같은 아미드, 아세토니트릴과 같은 니트릴), 또는 이들 용매의 혼합용매하에, 약 -10 내지 40℃, 바람직하게는 0 내지 30℃의 온도에서 수행하는 것이 바람직하다. 분자간 펩티드 결합전에 분자내 고리화를 촉진하기 위해서는 희석된 용액중에서 실시하는 것이 바람직하다(희석원리).

화합물(Ⅱ) 대신에, 이들 물질의 적합한 반응성 유도체, 예를 들어 반응성기가 보호기에 의해 중간체적으로 차폐된 유도체를 반응에 사용할 수도 있다. 일반식(Ⅱ)의 아미노산 유도체는 예를 들어, HOBt 또는 N-히드록시숙신이미드의 첨가에 의해 동일계내의 반응중에 바람직하게 형성되는 이들의 활성 에스테르의 형태로 사용할 수 있다.

일반적으로, 일반식(Ⅱ)의 출발물질들은 신규하다. 이들 출발물질은 공지된 방법, 예를 들어 상기한 펩티드 합성방법 및 보호기의 제거방법에 의해 제조할 수 있다.

일반적으로, 일반식 R'-Z-OR"(예를 들어, BOC-Z-OMe 또는 BOC-Z-OEt)의 보호 펜타펩티드 에스테르를 개시적으로 합성하고 일차 가수분해에 의해 일반식 R'-Z-OH (예를 들어, BOC-Z-OH)의 산을 얻은 후 보호기 R'를 제거함으로써 일반식 H-Z-OH (Ⅱ)의 유리 펩티드를 얻는다.

일반식(Ⅰ)의 염기는 산을 사용하여 적당한 산부가염으로 전환시킬 수 있다. 상기 반응을 위한 적합한 산은 특히 생리학적으로 허용가능한 염을 생성하는 산이다. 따라서, 사용할 수 있는 무기산으로는 황산; 질산; 염산 또는 브롬산과 같은 할로겐화수소산; 오르토인산과 같은 인산; 및 술팜산을 들 수 있고, 이외에 유기산, 특히 지방족, 지환족, 방향성 지방족, 방향족 또는 헤테고리형 단일- 또는 다염기성 카르복실산, 술폰산 또는 황산, 예를 들면 아세트산, 프로피온산, 피발산, 디에틸아세트산, 말론산, 숙신산, 피멜산, 푸마르산, 말레산, 락트산, 타르타르산, 말산, 벤조산, 살리실산, 2- 또는 3-페닐프로피온산, 시트르산, 글루콘산, 아스코르브산, 니코틴산, 이소니코틴산, 메탄- 또는 에탄술폰산, 에탄디술폰산, 2-히드록시에탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌-모노- 및 -디술폰산, 및 라우릴황산을 들 수 있다. 생리학적으로 허용 불가능한 산과의 염(예를 들어, 피크르산염)은 일반식(Ⅰ)의 화합물을 분리 및/또는 정제를 위해 사용할 수 있다.

반면에, 일반식(Ⅰ)의 산은 염기와의 반응에 의해 생리학적으로 허용가능한 금속 또는 암모늄 염중 하나로 전환시킬 수 있다. 상기한 반응에 사용하는 적합한 염으로는 나트륨염; 칼륨염; 마그네슘염; 칼슘염; 암모늄염; 또한 치환된 암모늄염, 예를 들어 디메틸-, 디에틸- 또는 디이소프로필암모늄염, 모노에탄올-, 디에탄올- 또는 트리에탄올암모늄염, 시클로헥실- 또는 디시클로헥실암모늄염, 디벤질에틸렌디암모늄염; 더욱이 N-메틸-D-글루카민과의 염 또는 아르기닌 또는 리신과의 염을 예로 들 수 있다.

일반식(Ⅰ)의 신규 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염은 1종 이상의 부형제 또는 보조제와 함께, 필요시 1종이상의 다른 활성 화합물과 함께 적합한 투여 형태로 전환시킴으로써 약제학적 제형의 제조에 사용할 수 있다. 따라서, 수득된 제형은 인간 또는 수의학에서 약물로서 사용할 수 있다. 적합한 부형제물질로는 장내(예를 들어, 경구 또는 직장), 비경구(예를 들어, 정맥주사) 또는 국부(예를 들어, 국소, 피부, 눈, 코)투여 또는 흡입식 분무형태로 투여하기에 적합하고, 신규 화합물과 반응하지 않는 유기 또는 무기물질인데, 예를 들어 물 또는 수성 등장성 염수 용액, 저급알코올, 식물성 오일, 벤질 알코올, 폴리에틸렌글리콜, 글리세롤 트리아세테이트 및 기타 지방산 글리세리드, 젤라틴, 소야 레시틴, 락토오스 또는 전분과 같은 탄수화물, 마그네슘 스테아레이트, 탈크, 셀룰로오스 및 와셀린을 들 수 있다. 경구투여에는 특히 정제, 제피정, 캅셀제, 시럽제, 액제 또는 드롭제가 사용되고; 필름정제 및 위액-저항 제피물 또는 캅셀외피를 갖는 캅셀제가 특히 유익하다. 좌제는 직장투여에 사용되고, 비경구투여에는 액제, 바람직하게는 오일성 또는 수성 용액, 이외에 현탁액, 에멀젼 또는 삽입제가 사용된다. 액제는 예를 들어 점안제의 형태로 사용할 수 있고, 이외에 예를 들어 현탁액, 에멀젼, 유제, 연고제 또는 정제는 국소 투여용으로 적합하다. 흡입식 분무제로서 투여하기 위해서는 프로펠란트가스 또는 프로펠란트 가스혼합물(예를 들어, CO₂또는 클로로플루오로탄화수소)중에 용해 또는 현탁된 활성화합물을 함유하는 분무제를 사용할 수 있다. 여기에서, 활성 화합물은 미세분말 형태로 사용하는 것이 바람직하며, 1종 이상의 생리학적으로 허용가능한 용매, 예를 들어 에탄올을 추가로 함유시킬 수 있다. 흡입식 액제는 통상적인 흡입기를 이용하여 투여할 수 있다. 또한 본 발명의 신규 화합물은 동결건조할 수도 있으며, 얻어진 동결건조물은 예를 들어, 주사용 제제의 제조에 사용할 수 있다. 상기 주사용 제제는 순간 주입 또는 연속 주입(예를 들어, 정맥내, 맥관내, 피하 또는 척추강내)으로 투여할 수 있다. 상기한 제제는 멸균하고/하거나, 보존제, 안정제 및/또는 습윤제, 에멜젼화제, 삼투압에 영향을 주는 염, 완충물질, 착색제 및/또는 향미제를 보조제로서 함유할 수 있다. 이들 제제는 필요시 1종 이상의 다른 활성 화합물, 예를 들어 1종 이상의 비타민을 함유할 수도 있다.

본 발명에 따른 물질은 일반적으로 다른 공지된 시판 펩티드와 유사하게 투여할 수 있지만, 특히 미국특허 US-A-4,472,305호에 기술된 화합물과 유사하게, 바람직하게는 투여용량단위당 약 0.05 내지 500mg, 특히 0.5 내지 100mg으로 투여할 수 있다. 1일 투여량을 체중 kg당 약 0.01 내지 약 2mg이 바람직하다. 그러나, 각 의도된 환자에 대한 특정 투여량은 다양한 요인, 예를 들어 사용된 특정 화합물의 활성, 나이, 체중, 일반적인 건강상태, 성별, 비용, 투여시간 및 투여경로 및 배출속도, 약물 병용 및 치료할 질병의 심각도에 따라 달라진다. 비경구 투여가 바람직하다.

상기 및 하기한 모든 온도는 ℃이다. 다음 실시예에서 "통상적인 반응 마무리"란 물을 가하고, 필요시 혼합물을 중화시킨 후, 에테르 또는 디클로로메탄으로 추출시키고, 유기층을 분리시키고, 황산나트륨상에서 건조시키고, 여과 및 증발시키고, 잔류물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피 및/또는 결정화에 의해 정제하는 것을 말한다. RT는 선택된 B(250-4.7㎛)칼럼(Lichrosorb RP Column)상에서의 HPLC에 대한 머무른 시간(분)이며, 용리액은 물중 0.3% TFA; 1㎖/분에서 50분 이내의 0~80용량%의 이소프로판올 농도구배이며, 215nm에서 작동 및 검출된다. M⁺는 질량 스펙트럼의 분자피크로서 고속 원자 충격법에 의해 얻어진다.

[실시예 1]

30mg의 시클로-(D-Val-L-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-D-Arg(Mtr))[하기 실시예 2에 제공된 방법에 의해 H-D-Arg(Mtr)-D-Val-L-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-OH의 고리화에 의해 얻어짐]을 840㎕의 TFA, 170㎕의 디클로로메탄 및 85㎕의 티오페놀중에 녹인 용액을 20℃에서 2시간동안 방치하고, 이어서 37℃에서 감압농축 시키고, 물로 희석한 다음 동결-건조시켰다. 세파덱스(Sephadex) G10상에서 아세트산/물(1:1)로 겔 여과시킨 다음, 리크로소브(LiChrosorb) RP8칼럼상에서 0.3% TFA/물 중의 이소프로판올 농도구배를 사용하여 예비된 HPLC로 정제하여, 시클로-(D-Val-L-Phe-D-Asp-Gly-D-Arg)을 얻었다(RT 17.9, M⁺575).

다음 화합물도 유사한 방법으로 수득한다:

시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-D-Arg(Mtr))로부터

시클로 -(D-Val-D-Phe-D-Asp-Gly-D-Arg)을 수득한다(RT 18.5; M⁺575).

시클로-(D-Val-D-Phe-L-Asp(OBut)-Gly-D-Arg(Mtr))로부터

시클로-(D-Val-D-Phe-L-Asp-Gly-D-Arg)을 수득한다(RT 19.3; M⁺575).

시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp(OBut)-L-Ala-D-Arg(Mtr))로부터

시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp-L-Ala-D-Arg)을 수득한다(RT 20.3; M⁺589).

시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-L-Arg(Mtr))로부터

시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-L-Arg)을 수득한다(RT 21.4; M⁺589)

시클로-(D-Val-D-Phe-L-Asp(OBut)-Gly-L-Arg(Mtr))로부터

시클로-(D-Val-D-Phe-L-Asp-Gly-L-Arg)을 수득한다.

시클로-(L-Val-D-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-L-Arg(Mtr))로부터

시클로-(L-Val-D-Phe-D-Asp-Gly-L-Arg)을 수득한다.

시클로-(D-Val-L-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-L-Arg(Mtr))로부터

시클로-(D-Val-L-Phe-D-Asp-Gly-L-Arg)을 수득한다.

시클로-(L-Val-D-Phe-L-Asp(OBut)-Gly-D-Arg(Mtr))로부터

시클로-(L-Val-D-Phe-L-Asp-Gly-D-Arg)을 수득한다.

시클로-(D-Val-L-Phe-L-Asp(OBut)-Gly-D-Arg(Mtr))로부터

시클로-(D-Val-L-Phe-L-Asp-Gly-D-Arg)을 수득한다.

시클로-(L-Val-L-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-D-Arg(Mtr))로부터

시클로-(L-Val-L-Phe-D-Asp-Gly-D-Arg)을 수득한다.

시클로-(L-Val-D-Phe-L-Asp(OBut)-D-Ala-L-Arg(Mtr))로부터

시클로-(L-Val-D-Phe-L-Asp-D-Ala-L-Arg)을 수득한다.

시클로-(D-Val-L-Phe-L-Asp(OBut)-D-Ala-L-Arg(Mtr))로부터

시클로-(D-Val-L-Phe-L-Asp-D-Ala-L-Arg)을 수득한다.

시클로-(L-Val-L-Phe-D-Asp(OBut)-D-Ala-L-Arg(Mtr))로부터

시클로-(L-Val-L-Phe-D-Asp-D-Ala-L-Arg)을 수득한다.

시클로-(L-Val-L-Phe-L-Asp(OBut)-D-Ala-D-Arg(Mtr))로부터

시클로-(L-Val-L-Phe-L-Asp-D-Ala-D-Arg)을 수득한다.

[실시예 2]

80mg의 H-L-Arg-D-Val-D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-ONa[FMOC-L-Arg-D-Val-D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-O-Wang(여기에서, O-Wang은 메리필드(Merrifield)합성에 사용되는 -4-옥시메틸 페녹시메틸 폴리스티렌기로서 이중 1%와 p-디비닐벤젠이 가교 결합된 것이다)은 모르폴린을 사용하여 FMOC가 제거되고, TFA/디클로메탄(1:1)을 사용하여 폴리머로부터 펜타펩티드를 제거하여 얻어짐]을 8㎖의 DMF에 녹인 용액을 72㎖의 디클로로메탄으로 희석시키고, 34㎎의 미세분말의 NaHCO₃로 처리하였다. 드라이아이스/아세톤 중에서 냉각시킨 후, 34㎕의 디페닐포스포릴 아지드를 가한 다음, 20℃에서 16시간동안 방치시킨 후, 디클로로메탄을 37℃에서 제거시켰다. 잔류액을 겔-여과(이소프로판올/물(8:2)중에서 세파덱스 G10 칼럼)하고, 이어서 이소프로판을 농도구배로 폴리머 칼럼(미쯔비시 MCI CHP-20P)상에서 물중에서 크로마토그래피하였다. 시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-L-Arg)을 얻었다(RT 21.4, M⁺589).

하기 실시예는 약제학적 제형에 관한 것이다.

[실시예 A : 주사용 바이알]

100g의 일반식(Ⅰ)의 시클로펩티드와 5g의 제2인산나트륨을 3ℓ의 2차 증류수에 녹인 용액을 2N 염산을 사용하여 pH 6.5로 조절하고, 멸균 여과하며, 주사용 바이알에 충전하고, 멸균조건하에 동결 건조하며, 바이알을 멸균방법으로 밀봉하였다. 각각의 바이알은 5mg의 활성화합물을 함유한다.

[실시예 B : 좌 제]

20g의 일반식(Ⅰ)의 활성화합물을 100g의 소야 레시틴과 1, 400g의 코코아 버터로 용융시킨 혼합물을 몰드에 붓고, 냉각시켰다. 각각의 좌제는 20mg의 활성화합물을 함유한다.

[실시예 C : 액제]

1g의 일반식(Ⅰ)의 활성화합물, 9.38g의 NaH₂PO₄·2H₂O, 28.48g의 Na₂HPO₄·12H₂O 및 0.1g의 염화 벤즈알코늄의 용액을 940㎖의 2차 증류수로 제조하였다. 상기 액제를 pH 6.8로 조절하고, 1ℓ로 채우고, 복사에 의해 멸균하였다. 이 액제는 점안제의 형태로 사용할 수 있다.

[실시예 D : 연고제]

500mg의 일반식(Ⅰ)의 활성화합물을 무균조건하에 99.5g의 황색 와셀린과 혼합하여 연고제를 제조한다.

[실시예 E : 정제]

100g의 일반식(Ⅰ)의 시클로펩티드, 1kg의 락토오스, 600g의 미세결정 셀룰로오스, 600g의 옥수수전분, 100g의 폴리비닐피롤리돈, 80g의 탈크와 10g의 스테아르산 마그네슘의 혼합물을 각각의 정제가 10mg의 활성화합물을 함유하도록 통상적인 방법으로 압착한다.

[실시예 F : 제피정]

정제를 실시예 E에 기술한 바와 같이 압착하고, 이어서 슈크로오스, 옥수수 전분, 탈크, 트라가간트 및 착색제로 이루어진 제피물을 사용하여 통상의 방법으로 제피한다.

[실시예 G : 캅셀제]

경질 젤라틴 캅셀에 일반식(Ⅰ)의 활성화합물을 통상적인 방법으로 충전한다. 각각의 캅셀은 5mg의 활성화합물을 함유한다.

[실시예 H : 흡입 분무제]

14g의 일반식(Ⅰ)의 활성화합물을 10ℓ의 등장성 NaCl 용액중에서 용해시키고, 이 용액을 펌프기구가 함유된 시판의 분무제용기에 충전한다. 이 용액은 입과 코로 분무할 수 있다. 1회 분무량(약 0.1㎖)는 약 0.14mg의 복용량에 상당한다.

Claims

하기 일반식(Ⅰ)로 표시되는 시클로펩티드와 그의 염.

시클로-(A-B-C-D-Arg) (Ⅰ)

(상기식에서, A 및 B는 각기 독립하여 Ala, Asn, Asp, Arg, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr 또는 Val이고, C는 Asp 또는 Asp(O-C_1-4-알킬)이며, D는 Gly 또는 Ala이고, 상기 식중 아미노산 라디칼 2종 이상은 D-형태로 존재한다.)
시클로-(D-Val-L-Phe-Asp-Gly-D-Arg).
시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp-Gly-L-Arg).
시클로-(D-Val-D-Phe-L-Asp-Gly-D-Arg).
시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp-L-Ala-D-Arg).
시클로-(D-Val-D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-L-Arg).
제1항에 따른 일반식(Ⅰ)로 표시되는 화합물 또는 이의 염중 하나를 제조하는 방법에 있어서, 그의 작용성 유도체중 하나로부터 가용매분해제 또는 가수소분해제로 처리하여 유리시키거나, 또는 하기 일반식(Ⅱ)의 펩티드와 이러한 펩티드의 반응성 유도체를 고리화제로 처리하고/하거나 일반식(Ⅰ)의 염기성 또는 산성 화합물을 산 또는 염기와 처리함으로써 이의 염중의 하나로 전환시키는 것을 특징으로 하는 제조방법.

H-Z-OH (Ⅱ)

(상기식에서, Z는 -A-B-C-D-Arg-, -B-C-D-Arg-A-, -C-D-Arg-A-B-, -D-Arg-A-B-C- 또는 -Arg-A-B-C-D이다.)
제1항에 따른 일반식(Ⅰ)로 표시되는 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염중의 하나를 적어도 하나의 고체, 액체 또는 반액체 부형제 또는 보조제와 함께 적합한 투여 형태로 전환시킴을 특징으로 하는 약제학적 제형의 제조방법.
제1항에 따른 일반식(Ⅰ)로 표시되는 1종이상의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염중 하나를 함유하는 것을 특징으로 하는 약제학적 제형.
약물의 제조를 위하여 사용되는 제1항에 따른 일반식(Ⅰ)로 표시되는 화합물 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염.