JPWO2022114207A5 - - Google Patents
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Claims (15)
- 特許微生物寄託センターに受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ－０３３０９として国際寄託されているエンテロバクター ロジェンカンピ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｒｏｇｇｅｎｋａｍｐｉｉ）ＮｒＴ７－１由来のＬ－ラムノースイソメラーゼであって、ＳＤＳ－ＰＡＧＥで測定したサブユニットの分子質量が４７ｋＤａであり、下記（Ａ）および（Ｂ）の基質特異性と下記（Ｃ）および（Ｄ）の理化学的性質を有する、Ｌ－ラムノースイソメラーゼ。
（Ａ）アルドースのＣ１のＣＨＯ基とＣ２のＯＨ基を認識して反応し、Ｃ１のＣＨＯ基をＯＨ基に、Ｃ２のＯＨ基をＣＯ基に変換するか、あるいは、ケトースのＣ１のＯＨ基とＣ２のＣＯ基を認識して反応し、Ｃ１のＯＨ基をＣＨＯ基に、Ｃ２のＣＯ基をＯＨ基に変換するイソメラーゼ活性を有する。
（Ｂ）Ｌ－ラムノース、Ｌ－リキソース、Ｌ－マンノース、Ｄ－アロース、Ｄ－リボース、およびＬ－タロースに対して反応性を有する。
（Ｃ）反応至適ｐＨは８である。
（Ｄ）反応至適温度は８０℃である。 - 以下の（ａ）または（ｂ）に記載のタンパク質。
（ａ）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるタンパク質。
（ｂ）配列番号１で表されるアミノ酸配列と９０％以上の同一性を有するアミノ酸配列からなり、下記（Ａ）および（Ｂ）のＬ－ラムノースイソメラーゼ活性を有するタンパク質（ただし、８２番目のアミノ酸がアラニンであるタンパク質を除く）。
（Ａ）アルドースのＣ１のＣＨＯ基とＣ２のＯＨ基を認識して反応し、Ｃ１のＣＨＯ基をＯＨ基に、Ｃ２のＯＨ基をＣＯ基に変換するか、あるいは、ケトースのＣ１のＯＨ基とＣ２のＣＯ基を認識して反応し、Ｃ１のＯＨ基をＣＨＯ基に、Ｃ２のＣＯ基をＯＨ基に変換するイソメラーゼ活性を有する。
（Ｂ）Ｌ－ラムノース、Ｌ－リキソース、Ｌ－マンノース、Ｄ－アロース、Ｄ－リボース、およびＬ－タロースに対して反応性を有する。 - 請求項２に記載のタンパク質をコードするＤＮＡ。
- 以下の（ａ）または（ｂ）に記載のＤＮＡ。
（ａ）配列番号２で表される塩基配列からなるＤＮＡ。
（ｂ）配列番号２で表される塩基配列と９０％以上の同一性を有する塩基配列からなり、下記（Ａ）および（Ｂ）のＬ－ラムノースイソメラーゼ活性を有するタンパク質をコードするＤＮＡ（ただし、８２番目のアミノ酸がアラニンであるタンパク質をコードするＤＮＡを除く）。
（Ａ）アルドースのＣ１のＣＨＯ基とＣ２のＯＨ基を認識して反応し、Ｃ１のＣＨＯ基をＯＨ基に、Ｃ２のＯＨ基をＣＯ基に変換するか、あるいは、ケトースのＣ１のＯＨ基とＣ２のＣＯ基を認識して反応し、Ｃ１のＯＨ基をＣＨＯ基に、Ｃ２のＣＯ基をＯＨ基に変換するイソメラーゼ活性を有する。
（Ｂ）Ｌ－ラムノース、Ｌ－リキソース、Ｌ－マンノース、Ｄ－アロース、Ｄ－リボース、およびＬ－タロースに対して反応性を有する。 - 請求項３または４に記載のＤＮＡを含有する組換えベクター。
- 請求項５に記載の組換えベクターにより形質転換された形質転換宿主細胞。
- 請求項１に記載のＬ－ラムノースイソメラーゼを生産する、特許微生物寄託センターに受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ－０３３０９として国際寄託されているエンテロバクター ロジェンカンピ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｒｏｇｇｅｎｋａｍｐｉｉ）ＮｒＴ７－１。
- 請求項１に記載のＬ－ラムノースイソメラーゼ、または請求項２に記載のタンパク質が担体に固定化されている、固定化タンパク質。
- 請求項１に記載のＬ－ラムノースイソメラーゼが菌体破砕物中に存在する粗酵素の状態で、または請求項２に記載のタンパク質が形質転換宿主細胞の、菌体破砕物中に存在する粗タンパク質の状態で担体に固定化されている、固定化タンパク質。
- 前記担体が、イオン交換樹脂または合成吸着剤である請求項８または９に記載の固定化タンパク質。
- 請求項１に記載のＬ－ラムノースイソメラーゼを生産するエンテロバクター属微生物、または請求項６に記載の形質転換宿主細胞を培地中で培養し、微生物菌体中に当該Ｌ－ラムノースイソメラーゼを蓄積させ、これを採取するＬ－ラムノースイソメラーゼの製造方法。
- 前記培地がＬ－ラムノースを添加した無機塩培地である、請求項１１に記載のＬ－ラムノースイソメラーゼの製造方法。
- アルドースまたはケトースから選ばれる１種以上を含有する溶液に、請求項１に記載のＬ－ラムノースイソメラーゼ、請求項２に記載のタンパク質、または請求項８ないし１０いずれかに記載の固定化タンパク質を作用させて、対応するケトースまたはアルドースを生成せしめ、これを採取することを特徴とするケトースまたはアルドースの製造方法。
- Ｄ－アロースまたはＤ－アルロースから選ばれる１種以上を含有する溶液に、請求項１に記載のＬ－ラムノースイソメラーゼ、請求項２に記載のタンパク質、または請求項８ないし１０のいずれかに記載の固定化タンパク質を作用させて、対応するＤ－アルロースまたはＤ－アロースを生成せしめ、これを採取することを特徴とするＤ－アルロースまたはＤ－アロースの製造方法。
- Ｄ－アロースまたはＤ－アルロースから選ばれる１種以上を含有する溶液に、Ｌ－ラムノースイソメラーゼ活性を有するタンパク質を作用させて、対応するＤ－アルロースまたはＤ－アロースを生成せしめ、これを採取することを特徴とするＤ－アルロースまたはＤ－アロースの製造方法であって、該タンパク質が、配列番号１で表されるアミノ酸配列と９０％以上の同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつ下記（Ａ）および（Ｂ）のＬ－ラムノースイソメラーゼ活性を有するタンパク質である、Ｄ－アルロースまたはＤ－アロースの製造方法。
（Ａ）アルドースのＣ１のＣＨＯ基とＣ２のＯＨ基を認識して反応し、Ｃ１のＣＨＯ基をＯＨ基に、Ｃ２のＯＨ基をＣＯ基に変換するか、あるいは、ケトースのＣ１のＯＨ基とＣ２のＣＯ基を認識して反応し、Ｃ１のＯＨ基をＣＨＯ基に、Ｃ２のＣＯ基をＯＨ基に変換するイソメラーゼ活性を有する。
（Ｂ）Ｌ－ラムノース、Ｌ－リキソース、Ｌ－マンノース、Ｄ－アロース、Ｄ－リボース、およびＬ－タロースに対して反応性を有する。
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