JPWO2020247854A5

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Publication number: JPWO2020247854A5
Application number: JP2021571682A
Authority: JP
Publication date: 2023-06-12

Claims

式ＶＨ１－Ｌ１－ＶＨ２－Ｌ２－ＶＬ１－Ｌ３－ＶＬ２を有するアミノ酸配列を含むポリペプチド鎖を含む二重特異性結合構築物であって、ＶＨ１及びＶＨ２は、免疫グロブリン重鎖可変領域を含み、ＶＬ１及びＶＬ２は、免疫グロブリン軽鎖可変領域を含み、且つＬ１、Ｌ２及びＬ３は、リンカーであり、Ｌ１は、少なくとも１０個のアミノ酸であり、Ｌ２は、少なくとも１５個のアミノ酸であり、及びＬ３は、少なくとも１０個のアミノ酸であり、Ｌ１又はＬ３は、プロテアーゼ切断部位を含み、前記二重特異性結合構築物は、Ｔ細胞である免疫エフェクター細胞及び癌細胞である標的細胞に結合することができる、二重特異性結合構築物であって、
前記エフェクター細胞は、ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）－ＣＤ３複合体の一部であるエフェクター細胞タンパク質を発現し、
前記二重特異性結合構築物は、少なくとも１つのシステインクランプを更に含み、及び
前記システインクランプは、ＶＨ１及びＶＬ１サブユニット、ＶＨ２及びＶＬ２サブユニット又はｓｃＦｃサブユニット間の連結を促進する位置にある、
二重特異性結合構築物。
式ＶＨ１－Ｌ１－ｓｃＦｃ_{サブドメイン１}－Ｌ２－ＶＨ２－Ｌ３－ＶＬ１－Ｌ４－ｓｃＦｃ_{サブドメイン２}－Ｌ５－ＶＬ２を有するアミノ酸配列を含むポリペプチド鎖を含む二重特異性結合構築物であって、ＶＨ１及びＶＨ２は、免疫グロブリン重鎖可変領域を含み、ＶＬ１及びＶＬ２は、免疫グロブリン軽鎖可変領域を含み、ｓｃＦｃは、免疫グロブリン重鎖定常ドメイン－２のサブドメイン１又はサブドメイン２及び免疫グロブリン重鎖定常ドメイン－３を含み、且つＬ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４及びＬ５は、リンカーであり、Ｌ１は、少なくとも１０個のアミノ酸であり、Ｌ２は、少なくとも１０個のアミノ酸であり、Ｌ３は、少なくとも１５個のアミノ酸であり、Ｌ４は、少なくとも１０個のアミノ酸であり、及びＬ５は、少なくとも１０個のアミノ酸であり、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ４及びＬ５は、少なくとも５個のアミノ酸のプロテアーゼ切断部位を更に含み、前記二重特異性結合構築物は、Ｔ細胞である免疫エフェクター細胞及び癌細胞である標的細胞に結合することができる、二重特異性結合構築物であって、
前記エフェクター細胞は、ヒトＴ細胞受容体（ＴＣＲ）－ＣＤ３複合体の一部であるエフェクター細胞タンパク質を発現し、
前記二重特異性結合構築物は、少なくとも１つのシステインクランプを更に含み、及び
前記システインクランプは、ＶＨ１及びＶＬ１サブユニット、ＶＨ２及びＶＬ２サブユニット又はｓｃＦｃサブユニット間の連結を促進する位置にある、
二重特異性結合構築物。
前記プロテアーゼ切断部位は、Ｌ１及びＬ３の両方に存在する、請求項１に記載の二重特異性結合構築物。
半減期延長部分を更に含む、請求項１に記載の二重特異性結合構築物であって、
前記半減期延長部分は、好ましくは追加のリンカー及びヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４抗体をコードする単鎖免疫グロブリンＦｃ領域（ｓｃＦｃ）を含む、
二重特異性結合構築物。
前記追加のリンカーは、プロテアーゼ切断部位を含む、請求項４に記載の二重特異性結合構築物。
前記ｓｃＦｃポリペプチド鎖は、Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ）の結合性を阻害する１つ以上の改変及び／又は半減期を延長する１つ以上の改変を含む、請求項５に記載の二重特異性結合構築物。
前記ＶＨ１、ＶＨ２、ＶＬ１及びＶＬ２は、全て異なる配列を有する、請求項１又は２に記載の二重特異性結合構築物であって、好ましくは
ａ．ＶＨ１配列は、配列番号６５若しくは６７を含み、及びＶＬ１配列は、配列番号６６若しくは６８を含み、及びＶＨ２配列は、配列番号７５若しくは７７を含み、及びＶＬ２配列は、配列番号７６若しくは７８を含むか、又は
ｂ．ＶＨ１配列は、配列番号７５若しくは７７を含み、及びＶＬ１配列は、配列番号７６若しくは７８を含み、及びＶＨ２配列は、配列番号６５若しくは６７を含み、及びＶＬ２配列は、配列番号６６若しくは６８を含む、
二重特異性結合構築物。
追加のリンカー（Ｌ０）で前記ＶＨ１に連結された追加の部分を更に含み、Ｌ０は、長さが少なくとも５個のアミノ酸である、請求項１又は２に記載の二重特異性結合構築物であって、
好ましくは前記追加の部分は、ＣＤ３ε、又はヒト血清アルブミン－リンカー－ＣＤ３ _{（ａ．ａ．１～６）} 、又はヒト血清アルブミン－リンカー－ＣＤ３ _{（ａ．ａ．１～２７）} 、又はｓｃＦＣ－リンカー－ＣＤ３εであり、
好ましくは、Ｌ０は、プロテアーゼ部位を更に含む、
二重特異性結合構築物。
前記リンカーは、異なる長さである、又は同じ長さである、請求項１又は２に記載の二重特異性結合構築物。
Ｌ１及びＬ２は同じ長さである、Ｌ１及びＬ３は同じ長さである、又はＬ２及びＬ３は同じ長さである、請求項１に記載の二重特異性結合構築物。
Ｌ１のアミノ酸配列は、少なくとも１０個のアミノ酸長であり、Ｌ２のアミノ酸配列は、少なくとも１５個のアミノ酸長であり、及びＬ３のアミノ酸配列は、少なくとも１５個のアミノ酸長である、請求項１に記載の二重特異性結合構築物。
請求項１又は２に記載の二重特異性結合構築物をコードする核酸。
請求項１２に記載の核酸を含むベクター。
請求項１３に記載のベクターを含む宿主細胞。
請求項１又は２に記載の二重特異性結合構築物を製造する方法であって、（１）前記二重特異性結合構築物を発現するための条件下で宿主細胞を培養することと、（２）細胞集団又は細胞培養液上清から前記二重特異性結合構築物を回収することとを含み、前記宿主細胞は、請求項１又は２に記載の二重特異性結合構築物をコードする１つ以上の核酸を含む、方法。
癌を治療するための医薬の製造における、請求項１又は２に記載の二重特異性結合構築物の使用であって、好ましくは、化学療法剤、非化学療法の抗悪性腫瘍剤及び／又は放射線が、前記二重特異性結合構築物の投与と同時に、その前に又はその後に患者に投与される、使用。
請求項１又は２に記載の二重特異性結合構築物を含む薬学的組成物。