BR112020025721A2 - Anticorpos que visam a gp120 do hiv e métodos de uso - Google Patents

Anticorpos que visam a gp120 do hiv e métodos de uso Download PDF

Info

Publication number
BR112020025721A2
BR112020025721A2 BR112020025721-4A BR112020025721A BR112020025721A2 BR 112020025721 A2 BR112020025721 A2 BR 112020025721A2 BR 112020025721 A BR112020025721 A BR 112020025721A BR 112020025721 A2 BR112020025721 A2 BR 112020025721A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
seq
nos
antibody
antigen
days
Prior art date
Application number
BR112020025721-4A
Other languages
English (en)
Inventor
Mini Balakrishnan
Nathan D. Thomsen
Helen Yu
Xue Zhang
Brian A. Carr
Magdeleine S. Hung
Manu Kanwar
Craig S. Pace
Doug Rehder
Matthew Robert Schenauer
Loredana Serafini
Heather Theresa Stephenson
Original Assignee
Gilead Sciences, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gilead Sciences, Inc. filed Critical Gilead Sciences, Inc.
Publication of BR112020025721A2 publication Critical patent/BR112020025721A2/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
    • C07K16/1045—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV
    • C07K16/1063—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV env, e.g. gp41, gp110/120, gp160, V3, PND, CD4 binding site
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/54—F(ab')2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

anticorpos que têm como alvo a gp120 do hiv, método de produção e uso dos mesmos, ácidos nucleicos, vetores de expressão,composições farmacêuticas e uso das mesmas, nanopartícula lipídica, receptor de antígeno quimérico, e células hospedeiras. a presente invenção refere-se a anticorpos que se ligam à gp120 do hiv e neutralizam o hiv. também são apresentados métodos de uso de tais anticorpos isolados ou em combinação com outros agentes terapêuticos para tratar ou prevenir uma infecção por hiv.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ANTICORPOS QUE TÊM COMO ALVO A GP120 DO HIV, MÉTODO DE PRODUÇÃO E USO DOS MESMOS, ÁCIDOS NUCLEICOS, VETORES DE EXPRESSÃO, COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS E USO DAS MESMAS, NANOPARTÍCULA LIPÍDICA, RECEPTOR DE ANTÍGENO QUIMÉRICO, E CÉLULAS HOSPEDEIRAS". Referência Cruzada a Pedidos Relacionados
[001] Este pedido reivindica o benefício nos termos do artigo 35 U.S.C. § 119(e) do pedido provisório US n° 62/693,642, depositado em 3 de julho de 2018 e do pedido provisório US n° 62/810,191, depositado em 25 de fevereiro de 2019, cuja íntegra encontra-se aqui incorporada a título de referência para todos os fins. Listagem de Sequências
[002] O presente pedido inclui uma Listagem de Sequências que fora apresentada por via eletrônica no formato ASCII e está aqui incorporada em sua íntegra a título de referência. A referida cópia no formato ASCII, criada em 10 de junho de 2019, tem o nome 1232_P2F_SL.txt e tem 899.216 bytes de tamanho. Campo
[003] A presente invenção refere-se a anticorpos e fragmentos de ligação a antígenos dos mesmos para o tratamento e/ou a prevenção de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Antecedentes
[004] A infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) e doenças relacionadas são um grande problema de saúde pública em todo do mundo. A maioria das terapias atualmente aprovadas para infecção pelo HIV visa a transcriptase reversa viral, as enzimas protease, e a integrase. Ainda assim a resistência do HIV a esses fármacos existentes, a toxicidade de longo prazo, e a falta de complacência dos pacientes aos regimes de dosagem diária foram associados a essas terapias. Portanto, é importante descobrir e desenvolver novos anticorpos anti-HIV com propriedades vantajosas adequadas para usos terapêuticos.
[005] O documento WO 2012/158948 descreve anticorpos humanos anti-HIV derivados de células B de memória de doadores infectados com HIV, que são capazes de inibir a infecção pela espécie HIV-1 de uma pluralidade de clados. Anticorpos anti-HIV também estão descritos, por exemplo, nos documentos WO 2005/058963, WO 2013/090644, WO 2014/063059 e EP 0690132B1. O uso terapêutico dos anticorpos pode ser limitado devido a sua cobertura viral intra-pacientes, sua farmacocinética, sua poliespecificidade, e outras propriedades. Por conseguinte, são necessários novos anticorpos anti-HIV para usos terapêuticos. Sumário
[006] A presente invenção apresenta composições para o tratamento ou a prevenção de HIV. Mais especificamente, neste pedido são apresentados anticorpos que se ligam à glicoproteína gp120 (gp120) do envelope (Env) do vírus da imunodeficiência humana (HIV). Este pedido apresenta anticorpos anti-HIV e fragmentos de ligação a antígenos dos mesmos, incluindo anticorpos anti-HIV amplamente neutralizantes e fragmentos de ligação a antígenos dos mesmos, composições farmacêuticas contendo tais anticorpos e fragmentos dos mesmos, e métodos de uso destes anticorpos e fragmentos dos mesmos no tratamento e na prevenção de infecções por HIV.
[007] Em um aspecto, este pedido apresenta um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga à glicoproteína gp120 do envelope do vírus da imunodeficiência humana-1 (HIV-1). O anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma região variável de cadeia pesada (VH)
compreendendo regiões determinantes de complementaridade (CDRs) da VH e uma região variável de cadeia leve (VL) compreendendo CDRs da VL.
Em algumas modalidades, as CDRs da VH e as CDRs da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 159, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 160, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 161, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 162, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 163, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 138, 164, 140, 141, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 159, 138, 164, 140, 141, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 165, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 166, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 167, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 168, e 142, respectivamente; SEQ ID NOs.: 137, 138, 154, 140, 141, e 142, respectivamente, ou SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 570, 141, e 142, respectivamente.
Em alguns casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende na região de estrutura 3 (framework region 3 - FR3) da VH na posição correspondente a 74a, 74b, 74c, e 74d (numeração de Kabat) a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 453 ou SEQ ID NO: 627. Em algumas, as CDRs da VH e as CDRs da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, em que o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende na região de estrutura 3 (FR3) da VH na posição correspondente a 74a, 74b, 74c, e 74d (numeração de Kabat) a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 627. Em alguns casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende a FR3 da
VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASWDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 628) ou RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629). Em algumas, as CDRs da VH e as CDRs da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, em que o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASFDFDTFSF- YMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629).
[008] Em um outro aspecto, as CDRs da VH e as CDRs da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; ou SEQ ID NOs.: 153, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente. Em certos casos, a VH deste anticorpo tem uma ou mais de: histidina na posição 3, serina na posição 5, glutamina na posição 72, tirosina na posição 76, valina na posição 82c, isoleucina na posição 89 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em certos casos, a VL deste anticorpo tem uma ou mais de: arginina na posição 14, alanina na posição 60, valina na posição 83, e isoleucina na posição 98 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em alguns casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende na região de estrutura 3 (FR3) da VH na posição correspondente a 74a, 74b, 74c, e 74d (numeração de Kabat) a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 453 ou SEQ ID NO: 627. Em alguns casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos:
RVSLTRHASWDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 628) ou RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende na região de estrutura 3 (FR3) da VH na posição correspondente a 74a, 74b, 74c, e 74d (numeração de Kabat) a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 627. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629), e compreende a VL compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 278. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477, e compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629), e compreende a VL compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 278.
[009] Os anticorpos acima podem compreender ainda uma VH com um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, ou 18) dos seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): valina na posição 5, ácido glutâmico na posição 10, lisina na posição 12, lisina na posição 23, asparagina na posição 28, arginina na posição 30,
tirosina na posição 32, treonina na posição 68, metionina na posição 69, histidina na posição 72, fenilalanina na posição 76, alanina na posição 78, serina na posição 82a, arginina na posição 82b, treonina na posição 89, tirosina na posição 99, glutamina na posição 105, ou metionina na posição 108. Em certas modalidades, o anticorpo pode compreender ainda uma VH com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 72 e tirosina na posição 99 (por exemplo, asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 73 e tirosina na posição 98, em que as posições dos aminoácidos estão dadas em relação à SEQ ID NO: 477). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreendem uma VH com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 72 e tirosina na posição 99 (por exemplo, asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 73 e tirosina na posição 98, em que as posições dos aminoácidos estão dadas em relação à SEQ ID NO: 477). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreendem uma VH com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 72, fenilalanina na posição 74a e tirosina na posição 99 (por exemplo, asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 73, fenilalanina na posição 76 e tirosina na posição 98, em que as posições dos aminoácidos estão dadas em relação à SEQ ID NO: 477). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e compreende uma VH com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 72 e tirosina na posição 99 (por exemplo, asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 73 e tirosina na posição 98, em que as posições dos aminoácidos estão dadas em relação à SEQ ID NO: 477). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e compreende uma VH com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 72, fenilalanina na posição 74a e tirosina na posição 99 (por exemplo, asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 73, fenilalanina na posição 76 e tirosina na posição 98, em que as posições dos aminoácidos estão dadas em relação à SEQ ID NO: 477).
[0010] Em algumas modalidades, a VL compreende um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10) dos seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): arginina na posição 18, lisina na posição 39, prolina na posição 40, treonina na posição 56, serina na posição 65, treonina na posição 72, serina na posição 76, serina na posição 77, treonina na posição 99, glicina na posição 99, asparagina na posição 103, ou isoleucina na posição 106. Em outras modalidades, a VL compreende um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10) dos seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): arginina na posição 18, alanina na posição 19, serina na posição 65, treonina ou histidina na posição 72, lisina na posição 74, serina na posição 76, serina na posição 77, fenilalanina na posição 98, ou glicina na posição 99. Em certas modalidades, a VL compreende uma alanina na posição 19 (numeração de Kabat). Em ainda outras modalidades, a
VH compreende um ou mais dos seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): histidina na posição 72, fenilalanina na posição 76, ou fenilalanina na posição 74a.
Em outras modalidades, a VL compreende um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8) dos seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): arginina na posição 18, alanina na posição 19, serina na posição 65, treonina na posição 72, serina na posição 76, serina na posição 77, fenilalanina na posição 98, ou glicina na posição 99. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e compreende uma VH com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 72, fenilalanina na posição 76, e fenilalanina na posição 74a, e tirosina na posição 99 (por exemplo, asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 73, fenilalanina na posição 76 e tirosina na posição 98, em que as posições dos aminoácidos estão dadas em relação à SEQ ID NO:
477). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e compreende a VL with uma alanina na posição 19 (numeração de Kabat). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e compreende uma VH com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 72, fenilalanina na posição 76, e fenilalanina na posição 74a, e tirosina na posição 99, e compreende a VL com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): alanina na posição 19.
[0011] Em certas modalidades, a VL compreende uma sequência de aminoácidos apresentada em qualquer uma das SEQ ID NOs.: 332 a 342. Em alguns casos, o anticorpo compreende uma região Fc da IgG1 humana. Em certas modalidades, a região Fc da IgG1 humana é IgG1m17 (SEQ ID NO: 348).
[0012] O anticorpo acima ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende ainda uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): (i) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330; (ii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iv) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (v) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; ou (vi) leucina na posição 243, prolina na posição 292, leucina na posição 300, isoleucina na posição 305, leucina na posição 396, leucina na posição 428, e serina na posição 434. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende ainda uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236,
leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição
434. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e compreende ainda uma região Fc da IgG1 humana. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e compreende ainda uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278 e compreende ainda uma região Fc da IgG1 humana. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142,
respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278 e compreende ainda uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434.
[0013] Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma região constante da cadeia leve Kappa humana. Em alguns casos, a região constante da cadeia leve Kappa humana é Km3 (SEQ ID NO:351). Em uma certa modalidade, a região constante da cadeia leve Kappa humana é Km3 (SEQ ID NO: 351). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e compreende ainda a região constante da cadeia leve Kappa humana Km3 (SEQ ID NO: 351). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos
96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278 e compreende ainda a região constante da cadeia leve Kappa humana Km3 (SEQ ID NO: 351). Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278 e compreende ainda uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434, e a região constante da cadeia leve Kappa humana Km3 (SEQ ID NO: 351).
[0014] Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos tem uma meia-vida sérica melhorada, estendida, ampliada ou aumentada em um mamífero (por exemplo, em um primata não humano, em um ser humano) comparado a outros anticorpos anti- HIV, tal como o Anticorpos A. Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos tem uma meia-vida sérica em um ser humano de pelo menos cerca de 3 dias, por exemplo, pelo menos cerca de 4 dias, pelo menos cerca de 5 dias, pelo menos cerca de 6 dias, pelo menos cerca de 7 dias, pelo menos cerca de 8 dias, pelo menos cerca de 9 dias, pelo menos cerca de 10 dias, pelo menos cerca de 12 dias, pelo menos cerca de 14 dias, pelo menos cerca de 16 dias, pelo menos cerca de 18 dias, pelo menos cerca de 20 dias, pelo menos cerca de 21 dias, pelo menos cerca de 24 dias, pelo menos cerca de 28 dias, pelo menos cerca de 30 dias, ou mais. Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos tem uma potência de destruição de células infectadas pelo HIV melhorada, ampliada ou aumentada comparado a outros anticorpos anti-HIV, tal como o Anticorpos A. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e tem uma meia-vida sérica melhorada, estendida, ampliada ou aumentada em um mamífero (por exemplo, em um primata não humano, em um ser humano) comparado a outros anticorpos anti-HIV, tal como o Anticorpos A. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e tem uma potência de destruição de células infectadas pelo HIV melhorada, ampliada ou aumentada comparado a outros anticorpos anti-HIV, tal como o Anticorpos A
[0015] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um anticorpo que se liga à glicoproteína gp120 do Envelope do HIV-1. O anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; ou SEQ ID NOs.: 153, 138, 154, 140, 141, e 142, respectivamente. O anticorpo compreende uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): (i) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330; (ii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iv) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (v) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; ou (vi) leucina na posição 243, prolina na posição 292, leucina na posição 300, isoleucina na posição 305, leucina na posição 396, leucina na posição 428, e serina na posição 434. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, em que o anticorpo compreende uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434.
[0016] Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma cadeia leve compreendendo uma alanina na posição 19 (numeração de Kabat). Em algumas modalidades, o anticorpo compreende na região de estrutura 3 (FR3) da VH nas posições correspondentes a 74a, 74b, 74c, e 74d (numeração de Kabat) a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO:453 ou SEQ ID NO: 627. Em certas modalidades, o anticorpo compreende na região de estrutura 3 (FR3) da VH nas posições correspondentes a 74a, 74b, 74c, e 74d (numeração de Kabat) a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO:
627. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASWDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 628) ou RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629). Em algumas modalidades, o anticorpo compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629). Em algumas modalidades, o anticorpo compreende uma sequência de aminoácidos apresentada em qualquer uma das SEQ ID NOs.: 332 a 342. Em alguns casos, o anticorpo compreende uma VH e uma VL tendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 223, respectivamente. Em alguns casos, o anticorpo compreende uma VH e uma VL tendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 220 e 276, respectivamente. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL tendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente. Em outras modalidades, a região Fc da IgG1 humana é IgG1m17 (SEQ ID NO: 348). Em algumas modalidades, o anticorpo compreende uma região constante da cadeia leve Kappa humana. Em certos casos, a região constante da cadeia leve Kappa humana é Km3 (SEQ ID NO: 351).
[0017] Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos tem uma meia-vida sérica melhorada, estendida, ampliada ou aumentada em um mamífero (por exemplo, em um primata não humano, em um ser humano) comparado a outros anticorpos anti-HIV, tal como o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B.
Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos tem uma meia-vida sérica em um ser humano de pelo menos cerca de 3 dias, por exemplo, pelo menos cerca de 4 dias, pelo menos cerca de 5 dias, pelo menos cerca de 6 dias, pelo menos cerca de 7 dias, pelo menos cerca de 8 dias, pelo menos cerca de 9 dias, pelo menos cerca de 10 dias, pelo menos cerca de 12 dias, pelo menos cerca de 14 dias, pelo menos cerca de 16 dias, pelo menos cerca de 18 dias, pelo menos cerca de 20 dias, pelo menos cerca de 21 dias, pelo menos cerca de 24 dias, pelo menos cerca de 28 dias, pelo menos cerca de 30 dias, ou mais.
Em algumas modalidades, o anticorpo tem uma potência de destruição de células infectadas pelo HIV melhorada, aumentada ou ampliada comparado a outros anticorpos anti-HIV tal como o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B.
Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, em que o anticorpo compreende uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): leucina na posição 428, e serina na posição 434, e tem uma meia-vida sérica melhorada, estendida, ampliada ou aumentada em um mamífero (por exemplo, em um primata não humano, em um ser humano) comparado a outros anticorpos anti-HIV, tal como o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B.
Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, em que o anticorpo compreende uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU):
ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, e tem uma potência de destruição de células infectadas pelo HIV melhorada, ampliada ou aumentada comparado a outros anticorpos anti-HIV, tal como o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B.
[0018] Em ainda um outro aspecto, a invenção apresenta um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígenos do mesmo, compreendendo uma região variável de cadeia pesada (VH) e uma região variável de cadeia leve (VL), em que a VH e a VL compreendem as sequências de aminoácidos apresentadas, respectivamente: (1) SEQ ID NOs.: 184 e 223; (2) SEQ ID NOs.: 185 e 223; (3) SEQ ID NOs.: 182 e 225; (4) SEQ ID NOs.: 185 e 225; (5) SEQ ID NOs.: 186 e 223; (6) SEQ ID NOs.: 187 e 223; (7) SEQ ID NOs.: 188 e 223; (8) SEQ ID NOs.: 189 e 223; (9) SEQ ID NOs.: 190 e 223; (10) SEQ ID NOs.: 191 e 223; (11) SEQ ID NOs.: 192 e 223; (12) SEQ ID NOs.: 193 e 223; (13) SEQ ID NOs.: 194 e 223; (14) SEQ ID NOs.: 195 e 223; (15) SEQ ID NOs.: 196 e 223; (16) SEQ ID NOs.: 197 e 223; (17) SEQ ID NOs.: 198 e 223; (18) SEQ ID NOs.: 199 e 223; (19) SEQ ID NOs.: 200 e 223; (20) SEQ ID NOs.: 201 e 223; (21) SEQ ID NOs.: 202 e 223; (22) SEQ ID NOs.: 203 e 223; (23) SEQ ID NOs.: 204 e 223; (24) SEQ ID NOs.: 205 e 223; (25) SEQ ID NOs.: 206 e 223; (26) SEQ ID NOs.: 207 e 223; (27) SEQ ID NOs.: 208 e 223; (28) SEQ ID NOs.: 209 e 223; (29) SEQ ID NOs.: 182 e 226; (30) SEQ ID NOs.: 182 e 227; (31) SEQ ID NOs.: 182 e 229; (32) SEQ ID NOs.: 182 e 230; (33) SEQ ID NOs.: 182 e 231; (34) SEQ ID NOs.: 182 e 232; (35) SEQ ID NOs.: 182 e 233; (36) SEQ ID NOs.: 182 e 234; (37) SEQ ID NOs.: 182 e 235; (38) SEQ ID NOs.: 182 e 236; (39) SEQ ID NOs.: 182 e 237; (40) SEQ ID NOs.: 182 e 238; (41) SEQ ID NOs.: 182 e 239; (42) SEQ ID NOs.: 182 e 240; (43) SEQ ID NOs.: 182 e 241; (44) SEQ ID NOs.: 182 e 242; (45) SEQ ID NOs.: 182 e
243; (46) SEQ ID NOs.: 182 e 244; (47) SEQ ID NOs.: 182 e 245; (48) SEQ ID NOs.: 182 e 246; (49) SEQ ID NOs.: 182 e 247; (50) SEQ ID NOs.: 182 e 248; (51) SEQ ID NOs.: 182 e 249; (52) SEQ ID NOs.: 182 e 250; (53) SEQ ID NOs.: 182 e 251; (54) SEQ ID NOs.: 182 e 252; (55) SEQ ID NOs.: 182 e 253; (56) SEQ ID NOs.: 210 e 238; (57) SEQ ID NOs.: 211 e 238; (58) SEQ ID NOs.: 212 e 238; (59) SEQ ID NOs.: 210 e 240; (60) SEQ ID NOs.: 211 e 240; (61) SEQ ID NOs.: 212 e 240; (62) SEQ ID NOs.: 213 e 223; (63) SEQ ID NOs.: 214 e 223; (64) SEQ ID NOs.: 215 e 223; (65) SEQ ID NOs.: 216 e 223; (66) SEQ ID NOs.: 217 e 223; (67) SEQ ID NOs.: 218 e 223; (68) SEQ ID NOs.: 182 e 254; (69) SEQ ID NOs.: 213 e 254; (70) SEQ ID NOs.: 214 e 254; (71) SEQ ID NOs.: 215 e 254; (72) SEQ ID NOs.: 216 e 254; (73) SEQ ID NOs.: 217 e 254; (74) SEQ ID NOs.: 218 e 254; (75) SEQ ID NOs.: 182 e 255; (76) SEQ ID NOs.: 213 e 255; (77) SEQ ID NOs.: 214 e 255; (78) SEQ ID NOs.: 215 e 255; (79) SEQ ID NOs.: 216 e 255; (80) SEQ ID NOs.: 217 e 255; (81) SEQ ID NOs.: 218 e 255; (82) SEQ ID NOs.: 182 e 256; (83) SEQ ID NOs.: 213 e 256; (84) SEQ ID NOs.: 214 e 256; (85) SEQ ID NOs.: 215 e 256; (86) SEQ ID NOs.: 216 e 256; (87) SEQ ID NOs.: 217 e 256; (88) SEQ ID NOs.: 218 e 256; (89) SEQ ID NOs.: 182 e 257; (90) SEQ ID NOs.: 213 e 257; (91) SEQ ID NOs.: 214 e 257; (92) SEQ ID NOs.: 215 e 257; (93) SEQ ID NOs.: 216 e 257; (94) SEQ ID NOs.: 217 e 257; (95) SEQ ID NOs.: 218 e 257; (96) SEQ ID NOs.: 182 e 258; (97) SEQ ID NOs.: 213 e 258; (98) SEQ ID NOs.: 214 e 258; (99) SEQ ID NOs.: 215 e 258; (100) SEQ ID NOs.: 216 e 258; (101) SEQ ID NOs.: 217 e 258; (102) SEQ ID NOs.: 218 e 258; (103) SEQ ID NOs.: 182 e 259; (104) SEQ ID NOs.: 213 e 259; (105) SEQ ID NOs.: 214 e 259; (106) SEQ ID NOs.: 215 e 259; (107) SEQ ID NOs.: 216 e 259; (108) SEQ ID NOs.: 217 e 259; (109) SEQ ID NOs.: 218 e 259; (110) SEQ ID NOs.: 182 e 260; (111) SEQ ID NOs.: 182 e 261; (112) SEQ ID NOs.: 182 e
262; (113) SEQ ID NOs.: 182 e 263; (114) SEQ ID NOs.: 182 e 264; (115) SEQ ID NOs.: 182 e 265; (116) SEQ ID NOs.: 182 e 266; (117) SEQ ID NOs.: 182 e 267; (118) SEQ ID NOs.: 182 e 268; (119) SEQ ID NOs.: 182 e 269; (120) SEQ ID NOs.: 182 e 270; (121) SEQ ID NOs.: 182 e 271; (122) SEQ ID NOs.: 182 e 272; (123) SEQ ID NOs.: 219 e 273; (124) SEQ ID NOs.: 191 e 274; (125) SEQ ID NOs.: 182 e 275; (126) SEQ ID NOs.: 220 e 277; (127) SEQ ID NOs.: 182 e 278; (128) SEQ ID NOs.: 182 e 279; (129) SEQ ID NOs.: 182 e 280; (130) SEQ ID NOs.: 182 e 281; (131) SEQ ID NOs.: 182 e 282; (132) SEQ ID NOs.: 221 e 228; (133) SEQ ID NOs.: 221 e 283; (134) SEQ ID NOs.: 182 e 284; (135) SEQ ID NOs.: 221 e 285; (136) SEQ ID NOs.: 182 e 286; (137) SEQ ID NOs.: 221 e 287; (138) SEQ ID NOs.: 221 e 288; (139) SEQ ID NOs.: 221 e 289; (140) SEQ ID NOs.: 182 e 290; (141) SEQ ID NOs.: 221 e 291; (142) SEQ ID NOs.: 182 e 292; (143) SEQ ID NOs.: 221 e 293; (144) SEQ ID NOs.: 221 e 294; (145) SEQ ID NOs.: 221 e 295; (146) SEQ ID NOs.: 182 e 296; (147) SEQ ID NOs.: 221 e 297; (148) SEQ ID NOs.: 182 e 298; (149) SEQ ID NOs.: 221 e 299; (150) SEQ ID NOs.: 221 e 300; (151) SEQ ID NOs.: 221 e 301; (152) SEQ ID NOs.: 182 e 302; (153) SEQ ID NOs.: 221 e 303; (154) SEQ ID NOs.: 182 e 304; (155) SEQ ID NOs.: 221 e 305; (156) SEQ ID NOs.: 182 e 306; (157) SEQ ID NOs.: 182 e 307; (158) SEQ ID NOs.: 182 e 308; (159) SEQ ID NOs.: 182 e 309; (160) SEQ ID NOs.: 220 e 310; (161) SEQ ID NOs.: 220 e 311; (162) SEQ ID NOs.: 182 e 228; (163) SEQ ID NOs.: 465 e 276; (164) SEQ ID NOs.: 466 e 276; (166) SEQ ID NOs.: 182 e 479; (167) SEQ ID NOs.: 465 e 479; (168) SEQ ID NOs.: 466 e 479; (169) SEQ ID NOs.: 182 e 480; (170) SEQ ID NOs.: 465 e 480; (171) SEQ ID NOs.: 466 e 480; (172) SEQ ID NOs.: 182 e 481; (173) SEQ ID NOs.: 182 e 482; (174) SEQ ID NOs.: 465 e 482; (175) SEQ ID NOs.: 466 e 482; (176) SEQ ID NOs.: 182 e 483; (177) SEQ ID NOs.: 182 e 484; (178) SEQ ID NOs.: 465 e
484; (179) SEQ ID NOs.: 466 e 484; (180) SEQ ID NOs.: 182 e 485; (181) SEQ ID NOs.: 182 e 486; (182) SEQ ID NOs.: 465 e 486; (183) SEQ ID NOs.: 466 e 486; (184) SEQ ID NOs.: 182 e 487; (185) SEQ ID NOs.: 182 e 488; (186) SEQ ID NOs.: 465 e 488; (187) SEQ ID NOs.: 466 e 488; (188) SEQ ID NOs.: 182 e 489; (189) SEQ ID NOs.: 465 e 489; (190) SEQ ID NOs.: 466 e 489; (191) SEQ ID NOs.: 182 e 491; (192) SEQ ID NOs.: 465 e 491; (193) SEQ ID NOs.: 466 e 491; (194) SEQ ID NOs.: 182 e 492; (195) SEQ ID NOs.: 465 e 492; (196) SEQ ID NOs.: 466 e 492; (197) SEQ ID NOs.: 182 e 493; (198) SEQ ID NOs.: 182 e 494; (199) SEQ ID NOs.: 465 e 494; (200) SEQ ID NOs.: 466 e 494; (201) SEQ ID NOs.: 182 e 277; (202) SEQ ID NOs.: 465 e 277; (203) SEQ ID NOs.: 466 e 277;(204) SEQ ID NOs.: 182 e 495; (205) SEQ ID NOs.: 465 e 495; (206) SEQ ID NOs.: 466 e 495; (207) SEQ ID NOs.: 182 e 496; (208) SEQ ID NOs.: 465 e 496; (209) SEQ ID NOs.: 466 e 496; (210) SEQ ID NOs.: 182 e 497; (211) SEQ ID NOs.: 465 e 497; (212) SEQ ID NOs.: 466 e 497; (213) SEQ ID NOs.: 182 e 498; (214) SEQ ID NOs.: 182 e 499; (215) SEQ ID NOs.: 465 e 499; (216) SEQ ID NOs.: 466 e 499; (217) SEQ ID NOs.: 182 e 500; (218) SEQ ID NOs.: 182 e 501; (219) SEQ ID NOs.: 465 e 501; (220) SEQ ID NOs.: 466 e 501; (221) SEQ ID NOs.: 182 e 502; (222) SEQ ID NOs.: 182 e 503; (223) SEQ ID NOs.: 182 e 504; (224) SEQ ID NOs.: 182 e 505; (225) SEQ ID NOs.: 182 e 506; (226) SEQ ID NOs.: 182 e 507; (227) SEQ ID NOs.: 182 e 508; (228) SEQ ID NOs.: 182 e 509; (229) SEQ ID NOs.: 182 e 510; (230) SEQ ID NOs.: 182 e 511; (231) SEQ ID NOs.: 182 e 512; (232) SEQ ID NOs.: 182 e 513; (233) SEQ ID NOs.: 182 e 514; (234) SEQ ID NOs.: 182 e 515; (235) SEQ ID NOs.: 467 e 223; (236) SEQ ID NOs.: 468 e 223; (237) SEQ ID NOs.: 469 e 223; (238) SEQ ID NOs.: 470 e 223; (239) SEQ ID NOs.: 471 e 223; (240) SEQ ID NOs.: 472 e 223; (241) SEQ ID NOs.: 473 e 223;(242) SEQ ID NOs.: 474 e 223; (243) SEQ ID NOs.: 475 e
223; (244) SEQ ID NOs.: 476 e 223; (245) SEQ ID NOs.: 182 e 516; (246) SEQ ID NOs.: 182 e 276; (247) SEQ ID NOs.: 182 e 569; (248) SEQ ID NOs.: 477 e 223; (249) SEQ ID NOs.: 477 e 278; (250) SEQ ID NOs.: 477 e 292; ou (251) SEQ ID NOs.: 478 e 276.
[0019] Em algumas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 275, respectivamente. Em outras modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 278, respectivamente. Em algumas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 223, respectivamente. Em outras modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 292, respectivamente. Em certas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 465 e 276, respectivamente. Em outras modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 466 e 276, respectivamente. Em certas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 491, respectivamente. Em algumas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 465 e 491, respectivamente. Em outras modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 466 e 491, respectivamente. Em certas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 493, respectivamente. Em algumas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 220 e 276, respectivamente. Em outras modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 516, respectivamente. Em outras modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 276, respectivamente. Em outras modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 182 e 569, respectivamente. Em algumas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 477 e 223, respectivamente. Em algumas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente. Em algumas modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 477 e 292, respectivamente. Em outras modalidades, a VH e a VL compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 478 e 276, respectivamente.
[0020] Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 181-221 e 465-478 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 222- 311, 479-516 e 569. Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%,
pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278.
[0021] Em algumas modalidades, o anticorpo compreende ainda uma região Fc da IgG1 humana. Em alguns casos, a região Fc da IgG1 humana é IgG1m17 (SEQ ID NO:348). Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): (i) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330; (ii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iv) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (v) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; ou (vi) leucina na posição 243, prolina na posição 292, leucina na posição 300, isoleucina na posição 305, leucina na posição 396, leucina na posição 428, e serina na posição 434. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende uma região constante da cadeia leve Kappa humana. Em certos casos, a região constante da cadeia leve Kappa humana é Km3 (SEQ ID NO: 351).
[0022] Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos tem uma meia-vida sérica melhorada, estendida,
ampliada ou aumentada em um mamífero (por exemplo, em um primata não humano, em um ser humano) comparado a outros anticorpos anti-HIV, tal como o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B. Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos tem uma meia-vida sérica em um ser humano de pelo menos cerca de 3 dias, por exemplo, pelo menos cerca de 4 dias, pelo menos cerca de 5 dias, pelo menos cerca de 6 dias, pelo menos cerca de 7 dias, pelo menos cerca de 8 dias, pelo menos cerca de 9 dias, pelo menos cerca de 10 dias, pelo menos cerca de 12 dias, pelo menos cerca de 14 dias, pelo menos cerca de 16 dias, pelo menos cerca de 18 dias, pelo menos cerca de 20 dias, pelo menos cerca de 21 dias, pelo menos cerca de 24 dias, pelo menos cerca de 28 dias, pelo menos cerca de 30 dias, ou mais. Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos tem uma potência de destruição de células infectadas pelo HIV melhorada, ampliada ou aumentada comparado a outros anticorpos anti-HIV tal como o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B.
[0023] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um anticorpo compreendendo uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia pesada e a cadeia leve compreendem qualquer uma das sequências de aminoácidos mostradas nas Tabelas X e XI, respectivamente.
[0024] Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 2 e 49, respectivamente. Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 2 e 100, respectivamente. Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 42 e 101, respectivamente. Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 2 e 103, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 2 e 117, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 517 e 101, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 518 e 101, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 2 e 542, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 517 e 542, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 518 e 542, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 2 e 544, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 2 e 567, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 2 e 568, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 529 e 49, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 529 e 103, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 529 e 117, respectivamente.
Em algumas modalidades, a cadeia pesada e a cadeia leve têm a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs.: 530 e 101, respectivamente.
Em algumas modalidades, anticorpo compreende uma cadeia pesada (HC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 1-47 e 517-530 e uma cadeia leve (LC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 48- 136 e 531-567. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma cadeia pesada (HC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica à sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 529 e uma cadeia leve (LC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 103. Em algumas modalidades, pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, ou mais, Sítios de N-glicosilação ligados em uma VL são sialilados.
Em algumas modalidades, os sítios de N-glicosilação ligados em uma VL têm uma ocupação de ácido siálico (por exemplo, um glicano compreendendo um ou dois resíduos ácido siálico terminais) de pelo menos 40%, pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, ou mais.
[0025] Em um aspecto relacionado, é apresentado um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga à glicoproteína gp120 do envelope do vírus da imunodeficiência humana-1 (HIV-1), o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreendendo (i) uma região variável de cadeia pesada (VH) compreendendo regiões determinantes de complementaridade 1-3 da VH (CDRs 1-3) e (ii) uma região variável de cadeia leve (VL) compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: (i) SEQ ID NOs.: 159, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (ii) SEQ ID NOs.: 137, 160, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (iii) SEQ ID NOs.: 137, 161, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (iv) SEQ ID NOs.: 137, 162, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (v) SEQ ID NOs.: 137, 163, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (vi) SEQ ID NOs.: 137, 138, 164, 140, 141, e 142, respectivamente; (vii) SEQ ID NOs.: 159, 138, 164, 140, 141, e 142, respectivamente; (viii) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 165, e 142, respectivamente; (ix) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 166, e 142, respectivamente; (x) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 167, e 142, respectivamente; (xi) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 168, e 142, respectivamente; (xii) SEQ ID NOs.: 137, 138, 154, 140, 141, e 142, respectivamente, ou (xiii) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e em que pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, ou mais, Sítios de N- glicosilação ligados em uma VL são sialilados. Em certas modalidades, é apresentado um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga à glicoproteína gp120 do envelope do vírus da imunodeficiência humana-1 (HIV-1), o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreendendo (i) uma região variável de cadeia pesada (VH) compreendendo regiões determinantes de complementaridade 1-3 da VH (CDRs 1-3) e (ii) uma região variável de cadeia leve (VL) compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e em que pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, ou mais, Sítios de N- glicosilação ligados em uma VL são sialilados.
Em certas modalidades, é apresentado um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga à glicoproteína gp120 do envelope do vírus da imunodeficiência humana-1 (HIV-1), o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreendendo (i) uma região variável de cadeia pesada (VH) compreendendo regiões determinantes de complementaridade 1-3 da VH (CDRs 1-3) e (ii) uma região variável de cadeia leve (VL) compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, em que compreende uma VH com os seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 72, fenilalanina na posição 76, e fenilalanina na posição 74a, e tirosina na posição 99 (por exemplo, asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, histidina na posição 73, fenilalanina na posição 76 e tirosina na posição 98, em que as posições dos aminoácidos estão dadas em relação à SEQ ID NO: 477), e em que pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, ou mais, Sítios de N-glicosilação ligados em uma VL são sialilados.
Em algumas modalidades, os sítios de N-glicosilação ligados em uma VL têm uma ocupação de ácido siálico (por exemplo, um ou dois resíduos ácido siálico terminais) de pelo menos 40%, pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, ou mais. Em algumas modalidades, a asparagina na posição aminoacídica 72 da VL de acordo com a numeração de Kabat (N72) é sialilada. Em algumas modalidades, os sítios de N-glicosilação ligados sialilados em uma VL compreendem de 1 a 5 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 4 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 3 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 2 resíduos ácido siálico. Em algumas modalidades, a VL é sialilada com ácido N- acetilneuramínico (NANA). Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas biantenárias. Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas complexas de N-glicano ligado. Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas híbridas de N-glicano ligado.
[0026] Em um outro aspecto, é apresentado um anticorpo biespecífico compreendendo: um primeiro braço de ligação a antígenos que se liga à gp120, o primeiro braço de ligação a antígenos compreendendo: (i) as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL; ou (ii) a VH e a VL de qualquer uma das reivindicações 1 a 63; e um segundo braço de ligação a antígenos que se liga a um segundo antígeno. Em certas modalidades, é apresentado um anticorpo biespecífico compreendendo: um primeiro braço de ligação a antígenos que se liga à gp120, o primeiro braço de ligação a antígenos compreendendo as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL apresentadas nas SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e um segundo braço de ligação a antígenos que se liga a um segundo antígeno. Em certas modalidades, é apresentado um anticorpo biespecífico compreendendo: um primeiro braço de ligação a antígenos que se liga à gp120, o primeiro braço de ligação a antígenos compreendendo a VH e a VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas SEQ ID NOs: 477 e 278, respectivamente, e um segundo braço de ligação a antígenos que se liga a um segundo antígeno.
Em algumas modalidades, o segundo antígeno é selecionado do grupo que consiste em CD3, FcγRI (CD64), FcγRII (CD32), FcγRIII (CD16); CD89, CCR5, CD4, gp41, receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR2DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 2 (KIR2DL2), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 3 (KIR2DL3), receptor similar à lectina de células exterminadoras C1 (KLRC1), receptor similar à lectina de células exterminadoras C2 (KLRC2), receptor similar à lectina de células exterminadoras C3 (KLRC3), receptor similar à lectina de células exterminadoras C4 (KLRC4), receptor similar à lectina de células exterminadoras D1 (KLRD1), receptor similar à lectina de células exterminadoras K1 (KLRK1), receptor desencadeador da citotoxicidade natural 3 (NCR3 ou NKp30), receptor desencadeador da citotoxicidade natural 2 (NCR2 ou NK-p44), receptor desencadeador da citotoxicidade natural 1 (NCR1 ou NK-p46), CD226 (DNAM-1), molécula de célula T citotóxica e reguladora (CRTAM ou CD355), membro da família moléculas de ativação linfocítica sinalizadora 1 (SLAMF1), CD48 (SLAMF2), antígeno linfocitário 9 (LY9 ou SLAMF3), CD244 (2B4 ou SLAMF4), CD84 (SLAMF5), membro da família SLAM
6 (SLAMF6 ou NTB-A), membro da família SLAM 7 (SLAMF7 ou CRACC), CD27 (TNFRSF7), semaforina 4D (SEMA4D ou CD100), e CD160 (NK1), e um segundo epítopo da gp120.
[0027] A invenção também apresenta uma composição farmacêutica compreendendo um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos descrito neste pedido, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
[0028] Em certas modalidades, a composição farmacêutica compreende ainda um segundo agente (por exemplo, um ou mais agentes adicionais) para tratar uma infecção por HIV. Em alguns casos, a composição farmacêutica compreende ainda um agente de reversão da latência (LRA) ou um agente imunoestimulador, por exemplo, um agonista de um receptor toll-like (TLR), por exemplo, um agonista de TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, e/ou TLR10. Em algumas modalidades, o LRA é um agonista de TLR7 ou um agonista de TLR8. Em certos casos, o agonista de TLR7 é selecionado do grupo que consiste em vesatolimod, imiquimod, e resiquimod. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende ainda um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende ainda um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo não compete com o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos, descrito neste pedido, para se ligar à gp120. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, compete com ou compreende domínios variáveis da VH e da VL de um anticorpo amplamente neutralizante (bNAb) contra HIV. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp120 selecionada do grupo que consiste em: (i) terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332; (ii) segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env; (iii) interface gp120/gp41; ou (iv) face silenciosa da gp120. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp120 na terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em GS-9722, PGT-121.60, PGT-121.66, PGT-121, PGT-122, PGT-123, PGT-124, PGT-125, PGT-126, PGT-128, PGT-130, PGT-133, PGT-134, PGT- 135, PGT-136, PGT-137, PGT-138, PGT-139, 10-1074, VRC24, 2G12, BG18, 354BG8, 354BG18, 354BG42, 354BG33, 354BG129, 354BG188, 354BG411, 354BG426, DH270.1, DH270.6, PGDM12, VRC41.01, PGDM21, PCDN-33A, BF520.1 e VRC29.03. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp120 na segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PG9, PG16, PGC14, PGG14, PGT-142, PGT-143, PGT-144, PGT-145, CH01, CH59, PGDM1400, CAP256, CAP256-VRC26.08, CAP256- VRC26.09, CAP256-VRC26.25, PCT64-24E e VRC38.01. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos se liga a um epítopo ou região da gp120 na interface gp120/gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PGT-151,
CAP248-2B, 35O22, 8ANC195, ACS202, VRC34 e VRC34.01. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp120 silent face e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC-PG05 e SF12. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp41 na região proximal da membrana (MPER). Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp41 na região proximal da membrana (MPER) e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em 10E8, 10E8v4, 10E8- 5R-100cF, 4E10, DH511.11P, 2F5, 7b2, e LN01. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região do peptídeo de fusão da gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC34 e ACS202. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende uma VH e uma VL de PGT121.60 ou PGT121.66. Em certos casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende uma VH e uma VL de SEQ ID NO: 443 e/ou SEQ ID NO: 447. Em outros casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende uma VH na SEQ ID NO: 454 e uma VL na SEQ ID NO:
455. Em ainda outros casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende uma VH na SEQ ID NO: 454 e uma VL na SEQ ID NO:
456.
[0029] Em um outro aspecto, o pedido apresenta ácidos nucleicos, nucleotídeos, ou polinucleotídeos codificando um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos descrito neste pedido. Em algumas modalidades, o ácido nucleico ou ácidos nucleicos compreendem DNA, cDNA ou mRNA. Em algumas modalidades, o ácido nucleico ou ácidos nucleicos codificam uma VH selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 181-221 e 465-478 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 572-581; e codificam uma VL selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 222-311, 479-516 e 569 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 582-595. Em algumas modalidades, o ácido nucleico ou ácidos nucleicos codificam uma HC selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 1-47 e 517-530 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 596-605; e codificam uma LC selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 48-136 e 531-567 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 606-619. Em um outro aspecto, o pedido apresenta um vetor de expressão ou vetores de expressão compreendendo o ácido nucleico ou ácidos nucleicos operacionalmente ligados a uma sequência reguladora. Em algumas modalidades, o vetor de expressão ou vetores de expressão compreendem um vetor plasmídico ou um vetor viral. São ainda apresentadas composições farmacêuticas compreen- dendo o ácido nucleico ou ácidos nucleicos, ou o vetor de expressão ou vetores de expressão, descritos neste pedido, e um veículo farmaceuticamente aceitável. São ainda apresentadas nanopartículas lipídicas compreendendo o ácido nucleico ou ácidos nucleicos, ou o vetor de expressão ou vetores de expressão, descritos neste pedido.
[0030] Em ainda um outro aspecto, o pedido apresenta uma célula hospedeira, ou população de células hospedeiras, compreendendo o ácido nucleico ou ácidos nucleicos, ou o vetor de expressão ou vetores de expressão, descritos neste pedido. Em algumas modalidades, a célula ou população de células compreende uma célula eucariótica. Em algumas modalidades, a célula ou população de células compreende uma célula de mamífero, uma célula humana, uma célula de hamster, uma célula de inseto, uma célula vegetal ou uma célula de levedura. Em algumas modalidades, a célula de mamífero é uma célula de ovário de hamster chinês (CHO) ou uma célula humana, por exemplo, uma célula de rim embrionário humano ou uma célula B humana. Em algumas modalidades, a célula sialila predominantemente sítios de N-glicosilação ligados nos domínios variáveis (Fv) das moléculas de ligação a antígenos expressas, por exemplo, anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos expressos.
Em algumas modalidades, a célula sialila pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, ou mais, sítios de N-glicosilação ligados nos domínios variáveis (Fv) de anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos expressos. Em algumas modalidades, a célula sialila pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, ou mais, Sítios de N-glicosilação ligados em uma VL de anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos expressos. Em algumas modalidades, a asparagina na posição aminoacídica 72 da VL de acordo com a numeração de Kabat (N72) é sialilada. Em algumas modalidades, os sítios de N-glicosilação ligados sialilados em uma VL compreendem de 1 a 5 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 4 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 3 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 2 resíduos ácido siálico. Em algumas modalidades, a VL é sialilada com ácido N-acetilneuramínico (NANA). Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas biantenárias. Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas complexas de N-glicano ligado. Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas híbridas de N-glicano ligado.
[0031] Em ainda um outro aspecto, são apresentados neste pedido fragmentos de ligação a antígenos dos anticorpos descritos neste pedido. Em algumas modalidades, os fragmentos de ligação a antígenos são selecionados do grupo que consiste em um fragmento scFv, sc(Fv)2, Fab, F(ab)2, Fab', F(ab')2, Facb ou Fv. É ainda apresentado um receptor de antígeno quimérico (CAR) incluindo um fragmento de ligação a antígenos de um anticorpo descrito neste pedido. Em certas modalidades, o CAR é expresso em uma célula T, uma célula B, um macrófago ou uma célula NK. Ainda descrito encontra-se uma células T CAR incluindo um CAR descrito neste pedido. Em certas modalidades, a célula T é uma célula T CD4+, uma célula T CD8+, ou uma combinação das mesmas. Em certas modalidades, a célula é administrada a um indivíduo. Em certas modalidades, a célula é autóloga. Em certas modalidades, a célula é alogênica.
[0032] Em ainda um outro aspecto, é apresentado neste pedido um método para a produção de um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo descrito neste pedido. O método envolve cultivar a célula hospedeira em uma cultura de células e isolar o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos da cultura de células. Em certos casos, o método envolve ainda formular o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos em uma composição farmacêutica estéril para administração a um indivíduo humano.
[0033] Em um outro aspecto, o pedido apresenta um método para o tratamento ou a prevenção de HIV em um indivíduo humano com necessidade do mesmo. O método envolve administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo, ou de uma composição farmacêutica descrita neste pedido.
[0034] Em algumas modalidades, o método compreende ainda administrar ao indivíduo um segundo agente (por exemplo, um ou mais agentes adicionais) para tratar uma infecção por HIV. Em alguns casos, o método compreende administrar ao indivíduo um agonista de TLR7. Em certos casos, o agonista de TLR7 é selecionado do grupo que consiste em vesatolimod, imiquimod, e resiquimod. Em algumas modalidades, o método compreende ainda administrar ao indivíduo um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV.
Em algumas modalidades, o método compreende ainda administrar um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo não compete com o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos, descrito neste pedido, para se ligar à gp120. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, compete com ou compreende domínios variáveis da VH e da VL de um anticorpo amplamente neutralizante (bNAb) contra HIV.
Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp120 selecionada do grupo que consiste em: (i) terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332; (ii) segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env; (iii) interface gp120/gp41; ou (iv) face silenciosa da gp120. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp120 na terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em GS-9722, GS-9722, PGT-121.60, PGT-121.66, PGT-121, PGT-122, PGT-123, PGT-124, PGT-125, PGT-126, PGT- 128, PGT-130, PGT-133, PGT-134, PGT-135, PGT-136, PGT-137, PGT-138, PGT-139, 10-1074, VRC24, 2G12, BG18, 354BG8, 354BG18, 354BG42, 354BG33, 354BG129, 354BG188, 354BG411, 354BG426, DH270.1, DH270.6, PGDM12, VRC41.01, PGDM21, PCDN-33A, BF520.1 e VRC29.03. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp120 na segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PG9, PG16, PGC14, PGG14, PGT-142, PGT-143, PGT-144, PGT-145, CH01, CH59, PGDM1400, CAP256, CAP256-VRC26.08, CAP256-VRC26.09, CAP256- VRC26.25, PCT64-24E e VRC38.01. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos se liga a um epítopo ou região da gp120 na interface gp120/gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PGT-151, CAP248-2B, 35O22, 8ANC195, ACS202, VRC34 e VRC34.01. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp120 silent face e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC-PG05 e SF12. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp41 na região proximal da membrana (MPER). Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região da gp41 na região proximal da membrana (MPER) e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em 10E8, 10E8v4, 10E8-5R-100cF, 4E10, DH511.11P, 2F5, 7b2, e LN01. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a um epítopo ou região do peptídeo de fusão da gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC34 e ACS202. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende uma VH e uma VL de PGT121.60 ou PGT121.66. Em certos casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende uma VH e uma VL de SEQ ID NO: 443 e/ou SEQ ID NO: 447. Em outros casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende uma VH na SEQ ID NO: 454 e uma VL na SEQ ID NO: 455. Em ainda outros casos, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende uma VH na SEQ ID NO: 454 e uma VL na SEQ ID NO:456. Em algumas modalidades, o anticorpo ou fragmentos de ligação a antígenos, descritos neste pedido, são coadministrados a um indivíduo humano com uma vacina anti-HIV. Em v’rias modalidades, a vacina anti-HIV compreende uma vacina viral. Em certas modalidades, a vacina viral é de um vírus selecionado do grupo que consiste em um arenavírus, um adenovírus, um poxvírus, e um rabdovírus.
[0035] Em um outro aspecto, o pedido refere-se a um método para inibição do HIV em um indivíduo humano com necessidade do mesmo. O método envolve administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo, ou de uma composição farmacêutica descrita neste pedido.
[0036] A menos que definido em contrário, todos os termos técnicos e científicos usados neste relatório têm o mesmo significado que aquele comumente conhecido pelo especialista na técnica à qual esta invenção pertence. Embora métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles descritos neste pedido possam usados na prática ou testagem da presente invenção, os métodos e materiais exemplificativos estão descritos abaixo. Todas as publicações, pedidos de patente, patentes, e outras referências mencionadas neste pedido estão aqui incorporadas em sua íntegra a título de referência. Em caso de conflito, o presente pedido, inclusive as definições, prevalecem. Os materiais, métodos, e exemplos são apenas ilustrativos e não se destinam a serem limitativos. Breve Descrição dos Desenhos
[0037] A Figura 1 ilustra os resultados de um ensaio com o repórter de ADCC conduzido no painel de estresse do anticorpo A-1. A amostra estressada a 37 °C em tampão de formulação pH 5,9 por seis semanas apresentou uma grande redução na atividade em relação às outras amostras.
[0038] A Figura 2 ilustra a cinética de oxidação de W74a ao longo do tempo segundo medida no painel de estresse. Losângo: Anticorpo A-1, 25°C, pH 5,9. Círculo vazio: Anticorpo A-1, 37°C, pH 5,9. Triângulo vazio: Anticorpo A-1, 37°C, pH 7,4. O grau de oxidação é mais alto na amostra de pH 5,9 estressada a 37°C por 6 semanas, sugerindo que a oxidação de W74a pode ser a fonte da perda de potência observada nessas condições. Além da significativa oxidação no W74a da cadeia pesada observada em condições de pH 5,9, uma percentagem constante de desamidação na posição N26 da cadeia leve foi observado nos construtos resultantes da cultura de células e aumentou ainda mais em condições de pH 7,4.
[0039] A Figura 3 ilustra a cinética de desamidação em N26 ao longo do tempo segundo medido no painel de estresse (inclusive oxidação para ácido aspártico, isoácido aspártico, e aspartil succinimida intermediária). Losângo: Anticorpo A-1, 25°C, pH 5,9. Círculo vazio: Anticorpo A-1, 37°C, pH 5,9. Triângulo vazio: Anticorpo A-1, 37°C, pH 7,4. O grau de desamidação foi mais alto na amostra de pH 7,4 estressada a 37°C por 6 semanas.
[0040] A Figura 4 ilustra uma representação em gráfico de pontos do perfil de neutralização de sete variantes de mAb. Foram rastreados anticorpos contra um painel de HIV-1 derivado de 152 pacientes pseudotipificados com Env de clones virais (n=133) e isolados (n=19) de plasma subtipo B. Cada ponto representa a IC95 de neutralização para um vírus. Entre parênteses (extensão/IC95 média). Extensão representa a % de vírus neutralizados com uma IC95 ≤50 mg/mL. Valores médios da IC95 calculados usando vírus com IC95 ≤50 mg/mL. (1) Anticorpo A-1 (89%/2.66 µg/mL); (2) 1.1.90-1 (86%/2.59 µg/mL); (3) 1.1.64-1 (92%/2.25 µg/mL); (4) 1.1.10-1 (86%/1.93 µg/mL); (5) 1.52.1-1 (83%/3.66 µg/mL); (6) 1.52.90 (78%/4.42 µg/mL); (7)
1.1.138-1 (82%/2.59 µg/mL).
[0041] A Figura 5 ilustra uma representação em gráfico de pontos do perfil de neutralização de três mAbs. Foram rastreados anticorpos contra um painel de HIV-1 derivado de 142 pacientes pseudotipifi- cados com Env de isolados de plasma subtipo B. Entre parênteses (extensão/IC95 média), definido da mesma maneira que para a Figura
4. Cada ponto representa a IC95 de neutralização para um vírus. (1) Anticorpo A (87%/1.72 µg/mL); (2) Anticorpo A-1 (87%/1.09 µg/mL); (3)
1.52.64-1 (86%/2.0 µg/mL).
[0042] A Figura 6 ilustra que mutações no Fc da IgG1 Fc que aumentam a atividade de destruição de células efetoras (por exemplo, ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330 de acordo com a numeração EU (DEAL)) podem diminuir a meia-vida sérica in vivo. Tal meia-vida sérica reduzida pode ser parcial ou totalmente revertida também pela incorporação de mutações no Fc da IgG1 Fc que aumentam a ligação de FcRn (por exemplo, leucina na posição 428, e serina na posição 434 de acordo com a numeração EU (LS)). Estão representados perfis farmacocinéticos normalizados de doses ilustrativas para PGT121-WT (círculo), PGT121-DEAL (triângulo), PGT121.60 (quadrado), PGT121-LS (losângo), e A-1 (círculo cheio) administrados IV a macacos cinomolgos naïves (n=3). Cada símbolo é a concentração sérica medida média (± SD).
[0043] A Figura 7 ilustra perfis farmacocinéticos para o Anticorpo A (triangulo), Anticorpo A-1 Lote 14 (círculo), Anticorpo A-1 Lote 22 (triângulo vazio), Anticorpo A-1 Lote 3 (círculo vazio), Anticorpo A-1 Lote 10 (quadrado), e Anticorpo A-1 Lote 7 (quadrado vazio) depois de administração intravenosa (IV) a macacos cinomolgos naïves (n=3). Cada símbolo é a concentração sérica medida média (± SD).
[0044] A Figura 8 ilustra os perfis de concentração sérica média (± SD)-tempo de três lotes de 1.52.64-1 depois de administração IV a macacos cinomolgos naïves machos e fêmeas (n=3). O Lote 4 (quadrado vazio) foi administrado como um bolo IV lento 0.5 mg/kg, ao passo que o Lote 18-PP21 (círculo vazio) e o Lote 14525-32 (círculo) foram administrados a 30 mg/kg via uma infusão IV por 30 minutos. Cada símbolo é a concentração sérica medida média (± SD). Descrição Detalhada
[0045] Este pedido apresenta anticorpos que visam o vírus da imunodeficiência humana (HIV). Os anticorpos descritos neste pedido se ligam à proteína gp120 (gp120) do envelope (Env) do HIV. Em algumas modalidades, estes são anticorpos neutralizantes de HIV. Em certas modalidades, estes anticorpos neutralizam amplamente o HIV.
[0046] HIV-1 é a principal família do HIV e é responsável por 95% de todas as infecções ao redor do mundo. O HIV-2 é encontrado principalmente em alguns poucos países da África Ocidental. Os vírus HIV são divididos em grupos específicos, M, N, O e P, dos quais M é o "maior" grupo e é responsável pela maioria dos casos de HIV/AIDS no mundo. Com base em sua sequência genética, o Grupo M é ainda subdividido em subtipos (também denominados clados) com prevalência em localicações geográficas distintas.
[0047] Um "subtipo" ou "clado" do Grupo M "subtipo" ou "clado" é um subtipo do Grupo M de HIV-1 definido por dados da sequência genética. Exemplos de subtipos do Grupo M incluem os Subtipos A-K. Sabe-se que alguns dos subtipos são mais virulentos ou são resistentes a medicamentos diferentes. Existem também "formas recombinantes circulantes" ou CRFs derivadas da recombinação entre vírus de subtipos diferentes, a cada um dos quais é atribuído um número. CRF12_BF, por exemplo, é uma recombinação entre os subtipos B e F. O subtipo A é comum na África Ocidental. O subtipo B é a forma dominante na Europa, nas Américas, Japão, Tailândia, e Austrália. O subtipo C é a forma dominante na África do Sul, África Oriental, Índia, Nepal, e partes da China. O subtipo D geralmente só é visto na África Oriental e Central. O subtipo E nunca fora identificado como um não recombinante, somente recombinado com o subtipo A como CRF01_AE. O subtipo F foi encontrado na África Central, América do Sul e Europa Oriental. O subtipo G (e o CRF02_AG) foi encontrado na África e Europa Central. O subtipo H está limitado à África Central. O subtipo I foi originalmente usado para descrever uma cepa que agora é designada por CRF04_cpx, com o cpx indicando uma recombinação "complexa" de vários subtipos. O subtipo J é principalmente encontrado na África do Norte, Central e Ocidental, e no Caribe. O subtipo K está limitado à República Democrática do Congo e Camarões Franceses. Estes subtipos às vezes são ainda divididos em sub-subtipos tais como A1 e A2 ou F1 e F2. Em 2015, a cepa CRF19, contatou-se que um recombinante do subtipo A, subtipo D, e subtipo G, com uma protease subtipo D estava fortemente associado à evolução rápida para AIDS em Cuba.
[0048] Este pedido apresenta anticorpos neutralizantes (por exemplo, Abs amplamente neutralizante) que visa o polipeptídeo gp120 na superfície de células infectadas com HIV. Sem querermos nos ater a qualquer hipótese, anticorpos neutralizantes contra proteínas do envelope viral podem proporcionar defesa imunológica adaptativa contra exposição ao HIV-1 bloqueando a infecção de células suscetíveis. Larga neutralização indica que os anticorpos podem neutralizar isolados de HIV-1 oriundos de diferentes clados. Assim sendo, os anticorpos abrangidos por esta invenção atividade de ligação intra-clados. Glicoproteína gp120 do envelope do HIV
[0049] A glicoproteína gp120 do envelope (ou gp120) é uma glicoproteína de 120 kDa que faz parte da camada externa do HIV. Ela se apresenta como espíulas da membrana viral consistindo em três moléculas de gp120 ligadas entre si e ancoradas à membrana pela proteína gp41. A gp120 é essencial para a infecção viral uma vez que ela facilita a entrada do HIV na célula hospedeira através de sua interação com receptores de superfície celular. Estes receptores incluem DC-SIGN, Heparana Sulfato Proteoglicano, o receptor CD4, o receptor 5 de quimiocina de motivo C-C (CCR5) e receptor 4 de quimiocina de motivo C-X-C (CXCR4). A ligação ao CD4 em células T auxiliares induz o início de uma cascata de mudanças conformacionais na gp120 e na gp41 que levam à fusão do vírus com a membrana da célula hospedeira.
[0050] A gp120 é codificada pelo gene env do HIV. O gene env codifica um produto gênico de cerca de 850 aminoácidos. O produto primário do env é a proteína gp160, que é clivada para gp120 (cerca de 480 aminoácidos) e gp41 (cerca de 345 aminoácidos) no retículo endoplasmático pela protease furina celular.
[0051] A sequência de aminoácidos de um polipeptídeo de gp160 exemplificado do clone WITO do HIV está apresentada abaixo (a alça hipervariável V3 está em negrito e o potencial sítio de N-glicosilação ligado em N322 está em negrito e sublinhado):
MKVMGTKKNYQHLWRWGIMLLGMLMMSSAAEQLWVTVYYGVPVW REANTTLFCASDAKAYDTEVHNVWATHACVPTDPNPQEVVMGNVTE DFNMWKNNMVEQMHEDIISLWDQSLKPCVKLTPLCVTLHCTNVTISS TNGSTANVTMREEMKNCSFNTTTVIRDKIQKEYALFYKLDIVPIEGKNT NTSYRLINCNTSVITQACPKVSFEPIPIHYCAPAGFAILKCNNKTFNGK GPCRNVSTVQCTHGIKPVVSTQLLLNGSLAEEDIIIRSENFTNNGKNIIV QLKEPVKINCTRPGNNTRRSINIGPGRAFYATGAIIGDIRKAHCNISTE QWNNTLTQIVDKLREQFGNKTIIFNQSSGGDPEVVMHTFNCGGEFFY CNSTQLFNSTWFNNGTSTWNSTADNITLPCRIKQVINMWQEVGKAM YAPPIRGQIDCSSNITGLILTRDGGSNSSQNETFRPGGGNMKDNWRS ELYKYKVVKIEPLGIAPTRAKRRVVQREKRAVTLGAVFLGFLGAAGST MGAASLTLTVQARLLLSGIVQQQSNLLRAIEAQQHMLQLTVWGIKQL QARVLAIERYLKDQQLLGIWGCSGKLICTTTVPWNTSWSNKSYDYIW NNMTWMQWEREIDNYTGFIYTLIEESQNQQEKNELELLELDKWASL WNWFNITNWLWYIKLFIMIIGGLVGLRIVCAVLSIVNRVRQGYSPLSFQ TRLPNPRGPDRPEETEGEGGERDRDRSARLVNGFLAIIWDDLRSLCL
FSYHRLRDLLLIVARVVEILGRRGWEILKYWWNLLKYWSQELKNSAV SLLNVTAIAVAEGTDRVIEIVQRAVRAILHIPTRIRQGFERALL (SEQ ID NO: 343)
[0052] A sequência de aminoácidos de um polipeptídeo de gp120 exemplificativo está apresentada abaixo (a alça hipervariável V3 está em negrito e o potencial sítio de N-glicosilação ligado em N322 está em negrito e sublinhado):
AEQLWVTVYYGVPVWREANTTLFCASDAKAYDTEVHNVWATHACV PTDPNPQEVVMGNVTEDFNMWKNNMVEQMHEDIISLWDQSLKPCV KLTPLCVTLHCTNVTISSTNGSTANVTMREEMKNCSFNTTTVIRDKIQ KEYALFYKLDIVPIEGKNTNTSYRLINCNTSVITQACPKVSFEPIPIHYC APAGFAILKCNNKTFNGKGPCRNVSTVQCTHGIKPVVSTQLLLNGSL AEEDIIIRSENFTNNGKNIIVQLKEPVKINCTRPGNNTRRSINIGPGRAF YATGAIIGDIRKAHCNISTEQWNNTLTQIVDKLREQFGNKTIIFNQSSG GDPEVVMHTFNCGGEFFYCNSTQLFNSTWFNNGTSTWNSTADNITL PCRIKQVINMWQEVGKAMYAPPIRGQIDCSSNITGLILTRDGGSNSSQ
NETFRPGGGNMKDNWRSELYKYKVVKIEPLGIAPTRAKRRVVQREK R (SEQ ID NO: 344)
[0053] A sequência de aminoácidos de um outro polipeptídeo de gp120 exemplificativo (vide, bioafrica.net/proteomics/ENV- GP120prot.html) está apresentada abaixo (a alça hipervariável V3 está em negrito e o potencial sítio de N-glicosilação ligado em N322 está em negrito e sublinhado):
TEKLWVTVYY GVPVWKEATT TLFCASDAKA YDTEVHNVWA THACVPTDPN PQEVVLVNVT ENFNMWKNDM VEQMHEDIIS LWDQSLKPCV KLTPLCVSLK CTDLKNDTNT NSSSGRMIME KGEIKNCSFN ISTSIRGKVQ KEYAFFYKLD IIPIDNDTTS YKLTSCNTSV ITQACPKVSF EPIPIHYCAP AGFAILKCNN KTFNGTGPCT NVSTVQCTHG IRPVVSTQLL LNGSLAEEEV VIRSVNFTDN AKTIIVQLNT SVEINCTRPN NNTRKRIRIQ RGPGRAFVTI GKIGNMRQAH CNISRAKWNN TLKQIASKLR EQFGNNKTII FKQSSGGDPE IVTHSFNCGG EFFYCNSTQL FNSTWFNSTW STEGSNNTEG SDTITLPCRI KQIINMWQKV GKAMYAPPIS GQIRCSSNIT GLLLTRDGGN SNNESEIFRP
GGGDMRDNWR SELYKYKVVK IEPLGVAPTK AKRRVVQREK R (SEQ ID NO: 345)
[0054] A diversidade genômica entre isolados independentes do vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1), em menor grau entre isolados sequenciais provenientes dos mesmos pacientes, e mesmo em um único isolado de um paciente é um atributo bastante conhecido do HIV-1. Embora esta heterogeneidade de sequências esteja distribuída por todo o genoma, a maior parte da heterogeneiade está localizada no gene env. Comparação das sequências de aminoácidos previstas de diversos isolados diferentes mostrou que a heterogeneidade de sequências está conglomerada em cinco regiões hipervariáveis (designadas V1 a V5) da glicoproteína de superfície, gp120. A região V3, apesar de ter um comprimento de apenas 35 aminoácidos, apresenta considerável variabilidade de sequência. Apesar desta variabilidade, a região V3 inclui determinantes que medeiam interações com células CD4+. O aumento na variabilidade de gp120 resulta em níveis mais altos de replicação viral, sugerindo um aumento da adequação viral nos indivíduos infectados por variantes diversas do HIV-1. Sem querermos nos ater à teoria, os níveis mais altos de replicação viral podem ser atribuídos à pressão da resposta imunológica do hospedeiro (por exemplo, escape contra a resposta imunológica) e/ou à adaptação de cada hospedeiro individual para maximizar a taxa de replicação do vírus. Variabilidade em potenciais sítios de N-glicosilação ligados (PNGSs) também resulta em maior adequação viral. Os PNGSs posibilitam a ligação de carboidratos de cadeia longa às regiões variáveis altas da gp120. Assim sendo, o número e a localização exata dos PNGSs no env devem afetar a adequação do vírus, ou a capacidade de replicação de cada variante do vírus, proporcionando mais ou menos sensibilidade à resposta imunológica do hospedeiro, particularmente os anticorpos neutralizantes.
[0055] Uma sequência de consenso da região V3 da gp120 (Milich et al., J. Virol., 67(9):5623-5634 (1993)) está apresentada abaixo: CTRPNNNTRKSIHIGPGRAFYTTGEIIGDIRQAHC (SEQ ID NO: 346).
[0056] Variantes de anticorpos descritos neste pedido ligam-se ao sítio de ligação do CD4 (CD4bs) da gp120 do HIV. O sítio de ligação do CD4 (CD4bs) envolve sítios estruturalmente conservados localizados na β1-α1, alça D, β20-β21 (folha de ponte) e β24-α5 da gp120, que determinam a ligação do CD4 e estão envolvidas nos epítopos dos anticorpos direcionados para CD4bs (Qiao, et al., Antiviral Res. 2016
Aug;132:252-61). O CD4bs da gp120 forma epítopos conformacionais reconhecidos por anticorpos anti-CD4bs envolvendo um ou mais resíduos aminoácidos selecionados dentre Thr278, Asp279, Ala281, Thr283, Asp368, Trp427, Glu460, Ser461, Glu462, Leu452, Leu453 e Arg476. Os resíduos aminoácidos e a numeração das posições estão apresentados para o isolado HXB2 subtipo B do HIV-1, que corresponde aos resíduos 1-511 de NCBI Ref Seq No. NP_057856.1, provido abaixo. Os resíduos Thr278, Asp279, Asn280, Ala281, Thr283, Asp368, Trp427, Leu452, Leu453, Gly459, Glu464, Ser465, Glu466, Ile467, Gly472, Gly473 e Arg476, que podem contribuir para os CD4bs de gp120, estão em negrito e sublinhados:
MRVKEKYQHLWRWGWRWGTMLLGMLMICSATEKLWVTVYYGVPVW KEATTTLFCASDAKAYDTEVHNVWATHACVPTDPNPQEVVLVNVTENF NMWKNDMVEQMHEDIISLWDQSLKPCVKLTPLCVSLKCTDLKNDTNT NSSSGRMIMEKGEIKNCSFNISTSIRGKVQKEYAFFYKLDIIPIDNDTTSY KLTSCNTSVITQACPKVSFEPIPIHYCAPAGFAILKCNNKTFNGTGPCTN VSTVQCTHGIRPVVSTQLLLNGSLAEEEVVIRSVNFTDNAKTIIVQLNTS VEINCTRPNNNTRKRIRIQRGPGRAFVTIGKIGNMRQAHCNISRAKWNN TLKQIASKLREQFGNNKTIIFKQSSGGDPEIVTHSFNCGGEFFYCNSTQ LFNSTWFNSTWSTEGSNNTEGSDTITLPCRIKQIINMWQKVGKAMYAP
PISGQIRCSSNITGLLLTRDGGNSNNESEIFRPGGGDMRDNWRSELYK YKVVKIEPLGVAPTKAKRRVVQREKR (SEQ ID NO: 571).
[0057] Modelos tridimensionais representando resíduos aminoácidos que contribuem para os CD4bs de gp120 estão apresentados por exemplo, em Canducci, et al., Retrovirology. 2009 Jan 15;6:4; Falkowska, et al., J Virol. 2012 Apr;86(8):4394-403; e Li, et al., J. Virol. 2012 Oct;86(20):11231–41; Gristick, et al., Nat Struct Mol Biol. 2016 Oct;23(10):906-915; Kwon, et al., Nat Struct Mol Biol. 2015 Jul;22(7):522-31; Liu, et al., Nat Struct Mol Biol. 2017 Apr;24(4):370- 378; Chen, et al., Science. 2009 Nov 20;326(5956):1123-7 e Lyumkis,
et al., Science. 2013 Dec 20;342(6165):1484-90. Em algumas modalidades, as variantes de anticorpo descritas neste pedido competem com anti-CD4bs anticorpos b12, CH103, 1NC9, 12A12, VRC01, VRC07-523, N6, 3BNC117, NIH45-46 e/ou PGV04 (VRC- PG04) para se ligar à gp120 CD4bs. Em algumas modalidades, as variantes de anticorpo descritas neste pedido ligam-se a um epítopo sobreposto ou idêntico ao epítopo ligado pelos anticorpos anti-CD4bs b12, CH103, 1NC9, 12A12, VRC01, VRC07-523, N6, 3BNC117, NIH45-46 e/ou PGV04 (VRC-PG04). Anticorpos anti-gp120
[0058] Este pedido apresenta anticorpos anti-gp120. Em certas modalidades, estes anticorpos ligam-se a antígenos do HIV-1 expressos na superfície celular e eliminar ou destroem a célula infectada.
[0059] Em certas modalidades, estes anticorpos são anticorpos neutralizantes (por exemplo, monoclonais) que visam o HIV-1. Um "anticorpo neutralizante" é um anticorpo que neutraliza a capacidade do HIV para iniciar e/ou perpetuar uma infecção em um hospedeiro e/ou em células alvo in vitro. O pedido apresenta anticorpos monoclonais humanos neutralizantes, em que o anticorpo reconhece um antígeno do HIV, por exemplo, um polipeptídeo gp120. Em certas modalidades, um "anticorpo neutralizante" pode inibir a entrada do vírus HIV-1, por exemplo, SF162 e/ou JR-CSF, com um índice de neutralização >1.5 ou >2.0 (Kostrikis LG et al., J. Virol.,70(1): 445-458 (1996)).
[0060] Em algumas modalidades, estes anticorpos são amplamente anticorpos neutralizantes (por exemplo, monoclonais) que visam o HIV-1. Por "anticorpos amplamente neutralizantes" se entende anticorpos que neutralizam mais de uma espécie do vírus HIV-1 (de diversos clados e cepas diferentes em um clado) em um ensaio de neutralização. Um anticorpo amplamente neutralizante pode neutralizar pelo menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou mais cepas diferentes do HIV-1, as cepas pertencendo ao mesmo clado ou a clados diferentes. Em algumas modalidades, um anticorpo amplamente neutralizante pode neutralizar múltiplas espécies do HIV-1 pertencentes a pelo menos 2, 3, 4, 5, ou 6 clados diferentes. Em certas modalidades, a concentração inibitória do anticorpo pode ser inferior a cerca de 0.0001 µg/mL, inferior a cerca de 0.001 µg/mL, inferior a cerca de 0.01 µg/mL, inferior a cerca de 0.1 µg/mL, inferior a cerca de 0.5 µg/mL, inferior a cerca de 1.0 µg/mL, inferior a cerca de 5 µg/mL, inferior a cerca de 10 µg/mL, inferior a cerca de 25 µg/mL, inferior a cerca de 50 µg/mL, ou inferior a cerca de 100 µg/mL para neutralizar cerca de 50% do vírus de entrada no ensaio de neutralização.
[0061] Em certas modalidades, estes anticorpos apresentam uma atividade ampla e potente e se enquadram no grupo de anticorpos com sítio de ligação agonistísticos altamente ativos anti-CD4 (HAADs). Tais anticorpos mimetizam a ligação da proteína do receptor de CD4 do hospedeiro à gp120. Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compreendem na região variável de sua cadeia pesada triptofano na posição 50; asparagina na posição 58; arginina na posição 71; e triptofano na posição 100 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compreendem na região variável de sua cadeia leve triptofano ou fenilalanina na posição 67; e ácido glutâmico na posição 96 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compreendem na região variável de sua cadeia leve triptofano na posição 67 e ácido glutâmico na posição 96 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em certos casos, a região variável da cadeia leve inclui um sítio de N-glicosilação ligado na região de estrutura 3. Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compreendem na região variável de sua cadeia pesada triptofano na posição 50; asparagina na posição 58; arginina na posição 71; e triptofano na posição 100; e compreendem na região variável de sua cadeia leve triptofano ou fenilalanina na posição 67; e ácido glutâmico na posição 96 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compreendem na região variável de sua cadeia pesada triptofano na posição 50; asparagina na posição 58; arginina na posição 71; e triptofano na posição 100; e compreendem na região variável de sua cadeia leve triptofano na posição 67 e ácido glutâmico na posição 96 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compreendem CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreendem ainda na região variável de sua cadeia pesada triptofano na posição 50; asparagina na posição 58; arginina na posição 71; e triptofano na posição 100; e compreendem na região variável de sua cadeia leve triptofano na posição 67 e ácido glutâmico na posição 96 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compreendem CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreendem ainda na região variável de sua cadeia leve triptofano na posição 67 e ácido glutâmico na posição 96 (numeração da posição de acordo com Kabat). Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compreendem CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreendem ainda na região variável de sua cadeia pesada triptofano na posição 50; asparagina na posição 58; arginina na posição 71; e triptofano na posição 100; e compreendem na região variável de sua cadeia leve triptofano na posição 67 e ácido glutâmico na posição 96 (numeração da posição de acordo com Kabat) e na região variável de sua cadeia leve triptofano na posição 67 e ácido glutâmico na posição 96 (numeração da posição de acordo com Kabat).
[0062] HAADs exemplificativos incluem os anticorpos descritos neste pedido assim como aqueles descritos em Scheid et al., Science, 333:1633-1637 (2011); e West et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, E2083-E2090 (2012). Estudos já mostraram que o Anticorpo A e o Anticorpo B pertencem à mesma linhagem de células B de um paciente e diferem em quatro posições aminoacídicas nas regiões variáveis da sua cadeia leve e em dez posições aminoacídicas nas regiões variáveis da sua cadeia pesada (Scheid et al., 2011). Anticorpos exemplificativos incluem, porém sem limitação, Anticorpo A, Anticorpo B, e um anticorpo compreendendo a cadeia pesada do Anticorpo A e a cadeia leve do Anticorpo B.
[0063] A Tabela I apresenta as regiões determinantes de complementaridade (CDRs) da região variável da cadeia pesada e da região variável da cadeia leve do Anticorpo A e do Anticorpo B de acordo com as definições de Kabat, Chothia, e IMGT. Tabela I. CDRs do Anticorpo A e do Anticorpo B Anticorpo Kabat Chothia IMGT
A CDR VH-CDR1 DYFIH GYNIRDY GYNIRDYF (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 143) (SEQ ID NO: 149) VH-CDR2 WINPKTGQPNNPRQFQG PKTG INPKTGQP (SEQ ID NO: 138) (SEQ ID NO: 144) (SEQ ID NO: 150)
Anticorpo Kabat Chothia IMGT
A CDR VH-CDR3 QRSDYWDFDV RSDYWDFD ARQRSDYWDFDV (SEQ ID NO: 139) (SEQ ID NO: 145) (SEQ ID NO: 151) VL-CDR1 QANGYLN NGY GY (SEQ ID NO: 140) (SEQ ID NO: 146) (SEQ ID NO: 152) VL-CDR2 DGSKLER DGS DGS (SEQ ID NO: 141) (SEQ ID NO: 147) (SEQ ID NO: 147) VL-CDR3 QVYEF YE QVYEF (SEQ ID NO: 142) (SEQ ID NO: 148) (SEQ ID NO: 142) Anticorpo B Kabat Chothia IMGT
CDR VH-CDR1 DHFIH GYKISDH GYKISDHF (SEQ ID NO: 153) (SEQ ID NO: 155) (SEQ ID NO: 157) VH-CDR2 WINPKTGQPNNPRQF PKTG INPKTGQP QG (SEQ ID NO: 144) (SEQ ID NO: 150) (SEQ ID NO: 138) VH-CDR3 QRSDFWDFDV RSDFWDFD ARQRSDFWDFDV (SEQ ID NO: 154) (SEQ ID NO: 156) (SEQ ID NO: 158) VL-CDR1 QANGYLN NGY GY (SEQ ID NO: 140) (SEQ ID NO: 146) (SEQ ID NO: 152) VL-CDR2 DGSKLER DGS DGS (SEQ ID NO: 141) (SEQ ID NO: 147) (SEQ ID NO: 147) VL-CDR3 QVYEF YE QVYEF (SEQ ID NO: 142) (SEQ ID NO: 148) (SEQ ID NO: 142)
[0064] As regiões determinantes de complementaridade (CDRs) dos anticorpos exemplificativos do presente pedido estão mostradas abaixo: as CDRs de acordo com a definição de Kabat (Tabelas II e V), de acordo com a definição de Chothia (Tabelas III e VI), e de acordo com a definição de IMGT (Tabelas IV e VII). Anticorpos compreendendo as CDRs listadas abaixo estão abrangidos pelo presente pedido.
[0065] Em certas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo deste pedido, além de incluir as seis CDRs do Anticorpo A ou do Anticorpo B de acordo com a definição de Kabat, de Chothia, ou de IMGT apresentados abaixo também incluem triptofano (W) ou fenilalanina (F) na posição 74a de Kabna, ácido aspártico (D) na posição 74b de Kabna, fenilalanina (F) na posição 74c de Kabna, e ácido aspártico (D) na posição 74d de Kabna; isto é, a sequência WDFD (SEQ ID NO: 453) ou a sequência FDFD (SEQ ID NO: 627) na região de estrutura 3 de sua VH ou domínio da cadeia pesada. Em certas modalidades, os anticorpos anti- gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo deste pedido, além de incluir as seis CDRs do Anticorpo A, também incluem fenilalanina (F) na posição 74a de Kabna, ácido aspártico (D) na posição 74b de Kabna, fenilalanina (F) na posição 74c de Kabna, e ácido aspártico (D) na posição 74d de Kabna; isto é, a sequência FDFD (SEQ ID NO: 627) na região de estrutura 3 de sua VH ou domínio da cadeia pesada. Estudos cristalográficos já demonstraram que a região de estrutura 3 nas posições de número 74a, 74b, 74c e 74d de Kabna fazem parte do parátopo das variantes de anticorpos descritas neste pedido, fazendo contato direto com o alvo do antígeno, gp120. Vide, por exemplo, Lee, et al., Immunity (2017) 46(4): 690–702 (Figura 1G, resíduo de identificação W71d); Klein, et al., Cell. (2013) 153(1):126-38 (Figures 4 e 5); e Zhou, et al., (2013) Immunity (2013) 39 245-258 (Tabela 1); diagramas de fitas das estruturas cristalizadas de 5V8L, 5V8M, 4JPV e 4LSV podem ser vistos em rcsb.org. Tabela II. Definições das CDR (Kabat) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
DYFIH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 141) NO: 142) 138)
Tabela II. Definições das CDR (Kabat) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
DYFMH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 159) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 141) NO: 142) 138)
DYFIH WINPKWGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 141) NO: 142) 160)
DYFIH WINPKGGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 141) NO: 142) 161)
DYFIH WINPKAGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 141) NO: 142) 162)
DYFIH WINPKHGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 141) NO: 142) 163)
DYFIH WINPKTGQP QRTDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 164) 140) NO: 141) NO: 142) 138)
DYFMH WINPKTGQP QRTDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 159) (SEQ ID NO: 164) 140) NO: 141) NO: 142) 138)
DYFIH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DASKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 165) NO: 142) 138)
DYFIH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSNLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 166) NO: 142) 138)
Tabela II. Definições das CDR (Kabat) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
DYFIH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLET QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 167) NO: 142) 138)
DYFIH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DASNLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 168) NO: 142) 138)
DHFIH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 153) (SEQ ID NO: 139) 140) NO: 141) NO: 142) 138)
DYFIH WINPKTGQP QRSDFWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 154) 140) NO: 141) NO: 142) 138)
DYFIH WINPKTGQP QRSDFWDFDV QATGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 154) 570) NO: 141) NO: 142) 138) Tabela III. Definições das CDR (Chothia) dos Anticorpos VH-CDR1 VH- VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3 CDR2
GYNIRDY PKTG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO:143) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 144)
GYNIRDY PKWG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO:143) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 169)
GYNIRDY PKGG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: 143) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 170)
GYNIRDY PKAG RSDYWDFD NGY DGS YE
Tabela III. Definições das CDR (Chothia) dos Anticorpos VH-CDR1 VH- VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3 CDR2 (SEQ ID NO: 143) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 171)
GYNIRDY PKHG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: 143) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 172)
GYNIRDY PKTG RTDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: 143) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 173) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 144)
GYNIRDY PKTG RSDYWDFD NGY DAS YE (SEQ ID NO: 143) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 174) NO: 148) 144)
GYKIRDY PKTG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: 459) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 144)
GYNISDY PKTG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: 460) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 144)
GYNIRDH PKTG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: 461) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 145) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 144)
GYNIRDY PKTG RSDFWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: 143) (SEQ (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID ID NO: 156) NO: 146) NO: 147) NO: 148) 144) Tabela IV. Definições das CDR (IMGT) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
GYNIRDYF INPKTGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 149) NO: 150) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
Tabela IV. Definições das CDR (IMGT) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
GYNIRDYF INPKWGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 149) NO: 175) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
GYNIRDYF INPKGGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 149) NO: 176) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
GYNIRDYF INPKAGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 149) NO: 177) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
GYNIRDYF INPKHGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 149) NO: 178) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
GYNIRDYF INPKTGQP ARQRTDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 179) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 149) NO: 150) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
GYNIRDYF INPKTGQP ARQRSDYWDFDV GY DAS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 149) NO: 150) NO: 152) NO: 180) NO: 142)
GYKIRDYF INPKTGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 462) NO: 150) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
GYNISDYF INPKTGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 463) NO: 150) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
GYNIRDHF INPKTGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 464) NO: 150) NO: 152) NO: 147) NO: 142)
GYNIRDYF INPKTGQP ARQRSDFWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 158) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 149) NO: 150) NO: 152) NO: 147) NO: 142) Tabela V. Definições das CDR (Kabat) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
DYFIH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 137) (SEQ ID NO: 139) NO: 140) NO: 141) NO: 142 138)
Tabela V. Definições das CDR (Kabat) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
DHFIH WINPKTGQP QRSDYWDFDV QANGYLN DGSKLER QVYEF (SEQ ID NNPRQFQG (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 153) (SEQ ID NO: 139) NO: 140) NO: 141) NO: 142 138) Tabela VI. Definições das CDR (Chothia) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
GYNIRDY PKTG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID 143) NO: 144) 145) 146) 147) NO: 148)
GYKIRDH PKTG RSDYWDFD NGY DGS YE (SEQ ID NO: (SEQ ID (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID NO: (SEQ ID 457) NO: 144) 145) 146) 147) NO: 148) Tabela VII. Definições das CDR (IMGT) dos Anticorpos VH-CDR1 VH-CDR2 VH-CDR3 VL-CDR1 VL-CDR2 VL-CDR3
GYNIRDYF INPKTGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: NO: 149) NO: 150) NO: 152) NO: 147) 142)
GYKIRDHF INPKTGQP ARQRSDYWDFDV GY DGS QVYEF (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: 151) (SEQ ID (SEQ ID (SEQ ID NO: NO: 458) NO: 150) NO: 152) NO: 147) 142)
[0066] O presente pedido abrange anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo que incluem as seis CDRs de cada um dos anticorpos descritos neste pedido (vide, por exemplo, Tabelas I- VII). Em certas modalidades, um ou mais destes anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo também incluem triptofano (W) ou fenilalanina (F) na posição 74a de Kabna, ácido aspártico (D) na posição 74b de Kabna, fenilalanina (F) na posição 74c de Kabna, e ácido aspártico (D) na posição 74d de Kabna. Deve ficar entendido que esta invenção também abrange anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo compreendendo as CDRs de acordo com qualquer outra definição de CDR (por exemplo, definição de Honegger, definição melhorada de Chothia, definição de AbM, definição de contato, vide, por exemplo,
www.bioinf.org.uk/abs/#cdrdef) dos anticorpos anti-HIV descritos neste pedido. Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm capacidade de destruição melhorada de células T CD4 alvo infectadas pelo HIV-1 em relação ao Anticorpo A e/ou ao Anticorpo B. Em certas modalidades, anticorpos compreendendo VH e VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente, ou HC e LC compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas SEQ ID NOs.: 529 e 103, respectivamente, têm capacidade de destruição melhorada de células T CD4 alvo infectadas pelo HIV-1 em relação ao Anticorpo A e/ou ao Anticorpo B. Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma EC50 de 0.05 a 2 µg/mL em ensaios de ADCC de destruição mediada por células NK de células infectadas pelo HIV (por exemplo, células infectadas pelo HIV- 1). Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido possuem um EC50 de 0.05 a
1.5 µg/mL. Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma EC50 de 0.05 a
1.0 µg/mL. Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma EC50 de 0.05 a
0.85 µg/mL. Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma EC50 de 0.05 a
0.75 µg/mL. Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma EC50 de 0.05 a
0.5 µg/mL. Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma EC50 de 0.05 a
0.3 µg/mL. Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma EC50 de 0.07 a
0.2 µg/mL.
[0067] As sequências de aminoácidos da região variável da cadeia pesada (VH) e da região variável da cadeia leve (VL) dos anticorpos exemplificativos do pedido de apresentação estão mostradas nas Tabelas VIII e IX, respectivamente. As sequências de aminoácidos da VH e da VL dos controles usados em alguns ensaios desta invenção (por exemplo, Anticorpo C e Anticorpo D) também estão incluídas. Tabela VIII. Sequências de VH SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia ID NO Pesada (VH) 181 C QVRLSQSGGQMKKPGDSMRISCRASGYEFINCPINWIRLAPGKR
PEWMGWMKPRWGAVSYARQLQGRVTMTRDMYSETAFLELRSL
TSDDTAVYFCTRGKYCTARDYYNWDFEHWGQGTPVTVSS 182 A-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 183 D-1 QVRLSQSGGQMKKPGDSMRISCRASGYEFINCPINWIRLAPGKR
PEWMGWMKPRHGAVSYARQLQGRVTMTRDMYSETAFLELRSL
TSDDTAVYFCTRGKYCTARDYYNWDFEHWGQGTPVTVSS 184 1v2-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTYSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 185 1.2.1-1 QVQLLQSGAEVKKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTMVTVSS 186 1.3.1-1 QVSLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 187 1.4.1-1 QVQLVQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 188 1.5.1-1 QVQLVQSGAAVTKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 189 1.6.1-1 QVQLLQSGAEVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS
Tabela VIII. Sequências de VH SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia ID NO Pesada (VH) 190 1.7.1-1 QVQLLQSGAEVKKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 191 1.8.1-1 QVQLVQSGAEVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 192 1.9.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 193 1.10.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFMHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 194 1.11.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFMHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSAYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 195 1.15.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKWGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 196 1.16.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKGGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 197 1.17.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKAGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 198 1.18.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKHGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 199 1.19.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTLTRHASWDFDTFSFYMD
LKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 200 1.20.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTMTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 201 1.21.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRDASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS
Tabela VIII. Sequências de VH SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia ID NO Pesada (VH) 202 1.22.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASTFSFYMDLKAL
RSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 203 1.24.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFSM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 204 1.25.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLSRLRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 205 1.26.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTATYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 206 1.27.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRTDYWDFDVWGSGTQVTVSS 207 1.28.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTATYFCARQRTDYWDFDVWGSGTQVTVSS 208 1.29.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGQGTQVTVSS 209 1.30.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTMVTVSS 210 1.12.15-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWVRQAPGQG
LQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYMDL
KALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 211 1.13.15-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFMHWVRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 212 1.14.15-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFMHWVRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSAYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 213 1.31.1-1 QVQLVQSGAEVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTATYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS
Tabela VIII. Sequências de VH SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia ID NO Pesada (VH) 214 1.32.1-1 QVQLVQSGAEVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRTDYWDFDVWGSGTQVTVSS 215 1.33.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTLTRHASWDFDTFSFYMD
LKALRSDDTATYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 216 1.34.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTLTRHASWDFDTFSFYMD
LKALRSDDTAVYFCARQRTDYWDFDVWGSGTQVTVSS 217 1.35.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFMHWWRQAPG
QGLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTMTRHASWDFDTFSFY
MDLSRLRSDDTATYFCARQRTDYWDFDVWGQGTMVTVSS 218 1.36.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFMHWWRQAPG
QGLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTMTRHASWDFDTFSAY
MDLSRLRSDDTATYFCARQRTDYWDFDVWGQGTMVTVSS 219 1.37.51-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTYSFYM
DLSRLRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGQGTMVTVSS 220 B-1 QVHLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYKISDHFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRQASWDFDTYSFYM
DLKAVRSDDTAIYFCARQRSDFWDFDVWGSGTQVTVSS 221 1.41.5-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGQGTMVTVSS 465 2.2.1-1 QVHLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYKIRDHFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKAVRSDDTAIYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 466 2.3.1-1 QVHLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKAVRSDDTAIYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 467 1.42.1-1 QVHLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 468 1.43.1-1 QVQLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS
Tabela VIII. Sequências de VH SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia ID NO Pesada (VH) 469 1.44.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYKIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 470 1.45.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNISDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 471 1.46.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDHFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 472 1.47.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRQASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 474 1.49.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKAVRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 475 1.50.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAIYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 476 1.51.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM
DLKALRSDDTAVYFCARQRSDFWDFDVWGSGTQVTVSS 477 1.52.64-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASFDFDTFSFYMD
LKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS 478 2.4.1-1 QVHLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYKIRDHFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASFDFDTFSFYMD
LKAVRSDDTAIYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSS Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 222 C EIVLTQSPGTLSLSPGETAIISCRTSQYGSLAWYQQRPGQAPRLVI
YSGSTRAAGIPDRFSGSRWGPDYNLTISNLESGDFGVYYCQQYE
FFGQGTKVQVDIK 223 A-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 224 D-1 SLTQSPGTLSLSPGETAIISCRTSQYGSLAWYQQRPGQAPRLVIY
SGSTRAAGIPDRFSGSRWGPDYNLTISNLESGDFGVYYCQQYEF
FGQGTKVQVDIK 225 1.1.2-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTKVDIK 226 1.1.3-1 EIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 227 1.1.4-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 228 1.1.5-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 229 1.1.6-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DASKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 230 1.1.7-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSNLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 231 1.1.8-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DASNLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 232 1.1.9-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLETGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 233 1.1.10-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 234 1.1.11-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 235 1.1.12-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 236 1.1.13-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 237 1.1.14-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSGSGTDFTFTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 238 1.1.15-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
FVPGTRLDLK 239 1.1.16-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VGPGTRLDLK 240 1.1.17-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 241 1.1.18-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VSPGTRLDLK 242 1.1.19-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VTPGTRLDLK 243 1.1.20-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTNLDLK 244 1.1.21-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VGPGTNLDLK 245 1.1.22-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VSPGTNLDLK 246 1.1.23-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VTPGTNLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 247 1.1.24-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRVDLK 248 1.1.25-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTNVDLK 249 1.1.26-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDIK 250 1.1.27-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRVDIK 251 1.1.28-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTNVDIK 252 1.1.29-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VGPGTNVDIK 253 1.1.30-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VTPGTNVDIK 254 1.1.31-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTNLDLK 255 1.1.32-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
TPGTRLDLK 256 1.1.33-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSNLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTNLDIK 257 1.1.34-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSNLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
TPGTRLDIK 258 1.1.35-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSNLETGVPSRFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV GPGTNLDIK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 259 1.1.36-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSNLETGVPSRFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
TPGTNLDIK 260 1.1.37-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTFTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 261 1.1.38-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYSLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 262 1.1.39-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYSFTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 263 1.1.40-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYALTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 264 1.1.41-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYAFTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 265 1.1.42-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLKR 266 1.1.43-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHFTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 267 1.1.44-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYQLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 268 1.1.45-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYQFTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 269 1.1.46-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLKINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 270 1.1.47-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNFKINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 271 1.1.48-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLAINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 272 1.1.49-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNFAINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 273 1.37.51-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLETGVPSRFSGSRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 274 1.8.52-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 275 1.1.54-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 276 B-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
IVPGTRLDLK 277 2.1.2-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
IVPGTRLDLK 278 1.1.64-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 279 1.1.67-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 280 1.1.72-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 281 1.1.75-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 282 1.1.78-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 283 1.41.81-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 284 1.1.82-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 285 1.41.83-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 286 1.1.84-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 287 1.41.85-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 288 1.41.86-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 289 1.41.87-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 290 1.1.88-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 291 1.41.89-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 292 1.1.90-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 293 1.41.91-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 294 1.41.92-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 295 1.41.93-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 296 1.1.94-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 297 1.41.95-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 298 1.1.96-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 299 1.41.97-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 300 1.41.98-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 301 1.41.99-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 302 1.1.100-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 303 1.41.101- DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY 1 DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 304 1.1.102-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 305 1.41.103- DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY 1 DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 306 1.1.110-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGTRRGQDYIFSINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 307 1.1.111-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRFGQDYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 308 1.1.112-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRFGQKYQLSINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 309 1.1.113-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRFGQDYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 310 2.1.3-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRFGQDYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI
VPGTRLDLK 311 2.1.4-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRFGQDYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI
VPGTRLDLK 479 3.1.8-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
IVPGTRLDLK 480 3.1.9-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 481 1.1.115-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 482 3.1.10-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI
VPGTRLDLK 483 1.1.116-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 484 3.1.11-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI
VPGTRLDLK 485 1.1.117-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 486 3.1.12-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYILTINNLQPEDVATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 487 1.1.118-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYILTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 488 3.1.13-1 DIQMTQSPSSLSARVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGSRWGQEYILTISSLQPEDVATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 489 3.1.14-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
IVPGTRLDLK 491 3.1.5-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
IVPGTRLDLK 492 3.1.15-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 493 1.1.119-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLK 494 3.1.7-1 DIQMTQSPSSLSARVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDVATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 495 3.1.16-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
IVPGTRLDLK 496 3.1.17-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 497 3.1.18-1 DIQMTQSPSSLSARVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDVATYFCQVYEF
FGPGTRLDLK 498 1.1.120-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQDYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 499 3.1.19-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQDYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI
VPGTRLDLK 500 1.1.121-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRFGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 501 3.1.20-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRFGQEYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI
VPGTRLDLK 502 1.1.122-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYVLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 503 1.1.123-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYLLTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 504 1.1.124-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYMLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 505 1.1.125-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYALTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 506 1.1.126-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYSLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 507 1.1.127-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYFLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 508 1.1.128-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGTRWGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 509 1.1.129-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRRGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 510 1.1.130-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRYGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLK
Tabela IX. Sequência de VL SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Região Variável da Cadeia Leve ID NO (VL) 511 1.1.131-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGTRWGQDYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLK 512 1.1.132-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 513 1.1.133-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 514 1.1.134-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDVATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 515 1.1.135-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEFI
VPGTRLDLK 569 1.1.138-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQATGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF
VVPGTRLDLK 516 1.1.104-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLK
[0068] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 181- 221 e 465-478 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em
SEQ ID NOs: 222-311, 479-516 e 569. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma VH selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 181-221 e 465-478, e uma VL selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 222-311, 479-516 e 569.
[0069] Quando se compara duas sequências de polinucleotídeos e de polipeptídeos, diz-se que duas sequências são "idênticas" se a sequência de nucleotídeos ou de aminoácidos nas duas sequências for a mesma quando alinhada para correspondência máxima, como descrito abaixo. Comparações entre duas sequências são tipicamente realizadas por comparação das sequências ao longo de uma janela de comparação para identificar e comparar regiões locais com similaridade de sequências. Uma "janela de comparação", conforme usado neste pedido, refere-se a um segmento de pelo menos cerca de 20 posições contíguas, usualmente 30 a cerca de 75, 40 a cerca de 50, no qual a sequência pode ser comparada com uma sequência de referência com o mesmo número de posições contíguas depois de as sequências serem alinhadas de forma ótima.
[0070] O alinhamento de sequências para comparação pode ser efetuado com a ajuda do programa Megalign na suite Lasergene do software de bioinformática (DNASTAR, Inc., Madison, WI), usando parâmetros de default. Este programa inclui diversos esquemas de alinhamento descritos nas seguintes referências: Dayhoff, M.O. (1978) A model of evolutionary change in proteins - Matrices for detecting distant relationships. In Dayhoff, M.O. (ed.) Atlas of Protein Sequence and Structure, National Biomedical Research Foundation, Washington DC Vol. 5, Suppl. 3, pp. 345-358; Hein J. (1990) Unified Approach to Alignment and Phylogenes pp. 626-645 Methods in Enzymology vol. 183, Academic Press, Inc., San Diego, CA; Higgins, D.G. e Sharp, P.M. (1989) CABIOS 5: 151-153; Myers, E.W. and
Muller W. (1988) CABIOS 4:11-17; Robinson, E.D. (1971) Comb. Theor 77: 105; Santou, N. Nes, M. (1987) Mol. Biol. Evol. 4:406-425; Sneath, P.H.A. e Sokal, R.R. (1973) Numerical Taxonomy - the Principles and Practice of Numerical Taxonomy, Freeman Press, San Francisco, CA; Wilbur, W.J. and Lipman, D.J. (1983) Proc. Natl. Acad., Sci. USA 80:726-730.
[0071] Alternativamente, o alinhamento de sequências para comparação pode ser efetuado pelo algoritmo de identidade local de Smith and Waterman (1981) Add. APL. Math 2:482, pelo algortimo de alinhamento de identidade de Needleman and Wunsch (1970) J. Mol. Biol. 48:443, pela busca por métodos de similaridade de Pearson and Lipman (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 2444, por implementações computerizadas desses algoritmos (GAP, BESTFIT, BLAST, FASTA, e TFASTA no Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group (GCG), 575 Science Dr., Madison, WI), ou por inspeção.
[0072] Um exemplo de algoritmos que são adequados para determinar a percentagem de identidade de sequência e a similaridade de sequências são os algoritmos BLAST e BLAST 2.0, que estão descritos em Altschul et al. (1977) Nucl. Acids Res. 25:3389-3402 e em Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410, respectivamente. BLAST e BLAST 2.0 podem ser usados, por exemplo, com os parâmetros descritos neste pedido, para determinar a percentagem de identidade de sequência para os polinucleotídeos e polipeptídeos descritos neste pedido. O software para fazer as análisses BLAST se encontra disponível ao público no National Center for Biotechnology Information.
[0073] Em um exemplo ilustrativo, escores cumulativos podem ser calculados usando, para sequências de nucleotídeos, os parâmetros M (escore de recompensa para um par de resíduos coincidentes; sempre >0) e N (escore de penalidade para resíduos não coincidentes; sempre <0). A extensão dos hits da palavra em cada direção é interrompida quando: o escore de alinhamento cumulativo recua de uma quantidade X a partir do seu valor máximo obtido; o escore cumulativo chega a zero ou menos, devido ao acúmulo de um ou mais alinhamentos de resíduos de escore negativo; ou chega-se ao fim de qualquer das sequências. Os parâmetros W, T e X do algoritmo BLAST determinam a sensibilidade e a velocidade do alinhamento. O programa BLASTN (para sequências de nucleotídeos) usa como defaults um comprimento de palavra (W) de 11, e expetativa (E) de 10, e os alinhamentos das matrizes de escores BLOSUM62 (vide Henikoff and Henikoff (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 10915), (B) de 50, expectativa (E) de 10, M=5, N=-4 e uma comparação dos dois cordões.
[0074] Para sequências de aminoácidos, pode ser usada uma matriz de escores para calcular o escore cumulativo. A extensão dos hits da palavra em cada direção é interrompida quando: A extensão dos hits da palavra em cada direção é interrompida quando: o escore de alinhamento cumulativo recua de uma quantidade X a partir do seu valor máximo obtido; o escore cumulativo chega a zero ou menos, devido ao acúmulo de um ou mais alinhamentos de resíduos de escore negativo; ou chega-se ao fim de qualquer das sequências. Os parâmetros W, T e X do algoritmo BLAST determinam a sensibilidade e a velocidade do alinhamento.
[0075] Em uma abordagem, a "percentagem de identidade de sequência" é determinada por comparação de duas sequências alinhadas de forma ótima ao longo de uma janela de comparação de pelo menos 20 posições, em que a porção da sequência de polinucleotídeos ou de polipeptídeos na janela de comparação pode compreender adições ou deleções (isto é, vazios) de 20 por cento ou menos, normalmente 5 a 15 por cento, ou 10 a 12 por cento, em relação às sequências de referência (que não compreendem adições ou deleções) para alinhamento das duas sequências. A percentagem é calculada determinando-se o número de posições nas quais ocorrem bases de ácido nucleico ou resíduos aminoácidos idênticos em ambas as sequências para dar o número de posições coincidentes, dividindo o número de posições coincidentes pelo número total de posições na sequência de referência (isto é, o tamanho da janela) e multiplicando-se os resultados por 100 para dar a percentagem de identidade de sequência.
[0076] Também estão abrangidos por este pedido anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo que incluem a VH de qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a VH de qualquer um dentre Anticorpo A-1, Anticorpo 1.1.64-1, Anticorpo 1.90-1, Anticorpo 2.2.1- 1, Anticorpo 2.3.1-1, Anticorpo 3.1.5-1, Anticorpo 2.2.5-1, Anticorpo
2.3.5-1, Anticorpo 1.1.119-1, Anticorpo 1.1.104-1, Anticorpo 1.52.64- 1, Anticorpo 2.4.1-1, Anticorpo 1.1.54-1, ou Anticorpo 2-1. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a VH do Anticorpo 1.52.64-1.
[0077] Abrangidos por este pedido são anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo que incluem a VL de qualquer um dos anticorpos descritos acima. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a VL de qualquer um dentre Anticorpo A-1, Anticorpo 1.1.64-1, Anticorpo 1.1.90-1, Anticorpo 2.2.1-1, 2.3.1-1, Anticorpo 3.1.5-1, Anticorpo 2.2.5-1, 2.3.5-1, Anticorpo 1.1.119-1, Anticorpo 1.1.104-1, Anticorpo 1.52.64-1, Anticorpo 2.4.1-1,
Anticorpo 1.1.54-1, ou Anticorpo B-1-1. Também estão abrangidos anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo que incluem a VH e a VL de qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a VH e VL de qualquer um dentre Anticorpo A-1, Anticorpo 1.1.64-1, Anticorpo
1.1.90-1, Anticorpo 2.2.1-1, Anticorpo 2.3.1-1, Anticorpo 3.1.5-1, Anticorpo 2.2.5-1, Anticorpo 2.3.5-1, Anticorpo 1.1.119-1, Anticorpo
1.1.104-1, Anticorpo 1.52.64-1, Anticorpo 2.4.1-1, Anticorpo 1.1.54- 1, ou Anticorpo B-1. Também estão abrangidos por este pedido os anticorpos compreendendo as CDRs de qualquer uma das sequências da VL e/ou da VH precedentes.
[0078] Em certos casos, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo compreende além da sequência de aminoácidos da VH de qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido, uma região constante da cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos abaixo com 0 a 10 (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10) substituições aminoacídicas:
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNT KVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY
KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHY TQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 437);
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNT KVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY
KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHY TQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 438);
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNT KVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPEEKTISKAKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY
KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHY TQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 439);
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNT KVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPEEKTISKAKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY
KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHY TQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 440);
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNT KVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY
KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHY TQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 441); ou
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNT KVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLLPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPPEEQYNSTL RVVSILTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK
TTPLVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYT QKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 442).
[0079] Em certas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo compreendem a sequência de aminoácidos da VH apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma região constante da cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 438 com 0 a 10 (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10) substituições aminoacídicas.
[0080] As sequências de aminoácidos da cadeia pesada e da cadeia leve dos anticorpos exemplificativos do presente pedido estão mostradas nas Tabelas X e XI, respectivamente. A sequência de aminoácidos da cadeia pesada e da cadeia leve dos anticorpos de controle usados em inúmerosdos ensaios deste pedido (por exemplo, Anticorpo C e Anticorpo D-1) também estão incluídas. Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 1 C QVRLSQSGGQMKKPGDSMRISCRASGYEFINCPINWIRLAPGKR
PEWMGWMKPRWGAVSYARQLQGRVTMTRDMYSETAFLELRSL TSDDTAVYFCTRGKYCTARDYYNWDFEHWGQGTPVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTK VDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNS TYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEA LHNHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 2 A-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 3 A QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEAL
HNHYTQKSLSLSPGK 4 D-1 QVRLSQSGGQMKKPGDSMRISCRASGYEFINCPINWIRLAPGKR
PEWMGWMKPRHGAVSYARQLQGRVTMTRDMYSETAFLELRSL TSDDTAVYFCTRGKYCTARDYYNWDFEHWGQGTPVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTK VDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNS TYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEA LHSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 5 1v2-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTYSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 6 1.2.1-1 QVQLLQSGAEVKKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTMVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 7 1.3.1-1 QVSLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 8 1.4.1-1 QVQLVQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 9 1.5.1-1 QVQLVQSGAAVTKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 10 1.6.1-1 QVQLLQSGAEVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 11 1.7.1-1 QVQLLQSGAEVKKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 12 1.8.1-1 QVQLVQSGAEVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 13 1.9.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 14 1.10.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFMHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 15 1.11.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFMHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSAYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 16 1.15.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKWGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 17 1.16.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKGGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 18 1.17.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKAGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 19 1.18.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKHGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 20 1.19.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTLTRHASWDFDTFSFYMD LKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVD KKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTP EVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPRE PQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEN NYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALH
SHYTQKSLSLSPGK 21 1.20.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTMTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 22 1.21.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRDASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 23 1.22.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASTFSFYMDLKAL RSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKGPSVFP LAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVE PKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTC VVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREPQV YTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYK TTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHY
TQKSLSLSPGK 24 1.24.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFSM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 25 1.25.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLSRLRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 26 1.26.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTATYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 27 1.27.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRTDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 28 1.28.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTATYFCARQRTDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 29 1.29.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGQGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 30 1.30.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTMVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 31 1.12.15-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWVRQAPGQG
LQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYMDL KALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKGPS VFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVH TFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDK KVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPE VTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYR VVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENN YKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHS HYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 32 1.13.15-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFMHWVRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 33 1.14.15-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFMHWVRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSAYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 34 1.31.1-1 QVQLVQSGAEVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTATYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 35 1.32.1-1 QVQLVQSGAEVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRTDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 36 1.33.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTLTRHASWDFDTFSFYMD LKALRSDDTATYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVD KKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTP EVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPRE PQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEN NYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALH
SHYTQKSLSLSPGK 37 1.34.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTLTRHASWDFDTFSFYMD LKALRSDDTAVYFCARQRTDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVD KKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTP EVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPRE PQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEN NYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALH SHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 38 1.35.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFMHWWRQAPG
QGLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTMTRHASWDFDTFSFY MDLSRLRSDDTATYFCARQRTDYWDFDVWGQGTMVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTK VDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNS TYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEA
LHSHYTQKSLSLSPGK 39 1.36.1-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFMHWWRQAPG
QGLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVTMTRHASWDFDTFSAY MDLSRLRSDDTATYFCARQRTDYWDFDVWGQGTMVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTS GVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTK VDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISR TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNS TYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEA
LHSHYTQKSLSLSPGK 40 1.37.51-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTYSFYM DLSRLRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGQGTMVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 41 A-2 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEAL
HNHYTQKSLSLSPGK 42 B-1 QVHLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYKISDHFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRQASWDFDTYSFYM DLKAVRSDDTAIYFCARQRSDFWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 43 A-3 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPEEKTISKAKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEA LHSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 44 A-4 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPEEKTISKAKGQP REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQP ENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEA
LHSHYTQKSLSLSPGK 45 A-5 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 46 A-6 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLLPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPPEEQYNSTL RVVSILTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENN YKTTPLVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHS HYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 47 1.41.5-1 QVQLVQSGAEVKKPGASVRVSCKASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGQGTMVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 517 2.2.1-1 QVHLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYKIRDHFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKAVRSDDTAIYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 518 2.3.1-1 QVHLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKAVRSDDTAIYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 519 1.42.1-1 QVHLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 520 1.43.1-1 QVQLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 521 1.44.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYKIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 522 1.45.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNISDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 523 1.46.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDHFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 524 1.47.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRQASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 526 1.49.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKAVRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL
HSHYTQKSLSLSPGK 527 1.50.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAIYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVD KKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTP EVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPRE PQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEN NYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALH
SHYTQKSLSLSPGK 528 1.51.1-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYM DLKALRSDDTAVYFCARQRSDFWDFDVWGSGTQVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNST YRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPR EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPE NNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEAL HSHYTQKSLSLSPGK
Tabela X. Sequências de Cadeias Pesadas SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada
ID NO 529 1.52.64-1 QVQLLQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYNIRDYFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASFDFDTFSFYMD LKALRSDDTAVYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVD KKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTP EVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPRE PQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEN NYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALH
SHYTQKSLSLSPGK 530 2.4.1-1 QVHLSQSGAAVTKPGASVRVSCEASGYKIRDHFIHWWRQAPGQ
GLQWVGWINPKTGQPNNPRQFQGRVSLTRHASFDFDTFSFYMD LKAVRSDDTAIYFCARQRSDYWDFDVWGSGTQVTVSSASTKGP SVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGV HTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVD KKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTP EVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPRE PQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEN NYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALH
SHYTQKSLSLSPGK Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 48 C EIVLTQSPGTLSLSPGETAIISCRTSQYGSLAWYQQRPGQAPRLVI
YSGSTRAAGIPDRFSGSRWGPDYNLTISNLESGDFGVYYCQQYE FFGQGTKVQVDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNF YPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSK
ADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 49 A-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 50 D-1 SLTQSPGTLSLSPGETAIISCRTSQYGSLAWYQQRPGQAPRLVIY
SGSTRAAGIPDRFSGSRWGPDYNLTISNLESGDFGVYYCQQYEF FGQGTKVQVDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFY PREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKA
DYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 51 1.1.3-1 EIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 52 1.1.4-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 53 1.1.5-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 54 1.1.6-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DASKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 55 1.1.7-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSNLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 56 1.1.8-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DASNLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 57 1.1.9-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLETGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 58 1.1.10-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 59 1.1.11-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 60 1.1.12-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 61 1.1.13-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 62 1.1.14-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSGSGTDFTFTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 63 1.1.15-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 64 1.1.16-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 65 1.1.17-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 66 1.1.18-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VSPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 67 1.1.19-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VTPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 68 1.1.20-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTNLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 69 1.1.21-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VGPGTNLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 70 1.1.22-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VSPGTNLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 71 1.1.23-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VTPGTNLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 72 1.1.24-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRVDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 73 1.1.25-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTNVDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 74 1.1.26-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 75 1.1.27-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRVDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 76 1.1.28-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTNVDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 77 1.1.29-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VGPGTNVDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 78 1.1.30-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VTPGTNVDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 79 1.1.31-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTNLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 80 1.1.32-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV TPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 81 1.1.33-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSNLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTNLDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREA KVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEK
HKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 82 1.1.34-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSNLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV TPGTRLDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREA KVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEK
HKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 83 1.1.35-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSNLETGVPSRFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV GPGTNLDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREA KVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEK
HKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 84 1.1.36-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSNLETGVPSRFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV TPGTNLDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREA KVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEK HKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 85 1.1.37-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTFTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 86 1.1.38-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYSLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 87 1.1.39-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYSFTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 88 1.1.40-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYALTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 89 1.1.41-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYAFTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 90 1.1.42-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 91 1.1.43-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHFTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 92 1.1.44-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYQLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 93 1.1.45-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYQFTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 94 1.1.46-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLKINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 95 1.1.47-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNFKINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 96 1.1.48-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLAINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 97 1.1.49-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNFAINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 98 1.37.51-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLETGVPSRFSGSRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 99 1.8.52-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 100 1.1.54-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 101 B-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDVATYFCQVYEF IVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 102 2.1.2-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDVATYFCQVYEF IVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 103 1.1.64-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 104 1.1.67-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 105 1.1.72-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 106 1.1.75-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 107 1.1.78-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 108 1.41.81-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 109 1.1.82-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 110 1.41.83-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 111 1.1.84-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 112 1.41.85-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 113 1.41.86-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 114 1.41.87-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 115 1.1.88-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 116 1.41.89-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 117 1.1.90-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 118 1.41.91-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYNLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 119 1.41.92-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 120 1.41.93-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 121 1.1.94-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 122 1.41.95-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 123 1.1.96-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 124 1.41.97-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 125 1.41.98-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 126 1.41.99-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDIATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 127 1.1.100-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 128 1.41.101- DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY 1 DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFV
VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 129 1.1.102-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 130 1.41.103- DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQKPGKAPKLLIY 1 DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF
GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 131 1.1.110-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGTRRGQDYIFSINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 132 1.1.111-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRFGQDYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 133 1.1.112-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRFGQKYQLSINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 134 1.1.113-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRFGQDYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 135 2.1.3-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRFGQDYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 136 2.1.4-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRFGQDYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 531 3.1.8-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDVATYFCQVYEF IVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 532 3.1.9-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDVATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 533 1.1.115-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 534 3.1.10-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 535 1.1.116-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 536 3.1.11-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 537 1.1.117-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 538 3.1.12-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYILTINNLQPEDVATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 539 1.1.118-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYILTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 540 3.1.13-1 DIQMTQSPSSLSARVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGSRWGQEYILTISSLQPEDVATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 541 3.1.14-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDVATYFCQVYEF IVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 542 3.1.5-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDVATYFCQVYEF IVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 543 3.1.15-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDVATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 544 1.1.119-1 DIQMTQSPSSLSASVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 545 3.1.7-1 DIQMTQSPSSLSARVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGSRWGQEYTLTISSLQPEDVATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 546 3.1.16-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDVATYFCQVYEF IVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 547 3.1.17-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYHLTINNLQPEDVATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 548 3.1.18-1 DIQMTQSPSSLSARVGDRATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGSRWGQEYHLTISSLQPEDVATYFCQVYEF FGPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 549 1.1.120-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQDYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 550 3.1.19-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQDYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 551 1.1.121-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRFGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 552 3.1.20-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRFGQEYILTINNLQPEDVATYFCQVYEFI VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 553 1.1.122-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYVLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 554 1.1.123-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYLLTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 555 1.1.124-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYMLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 556 1.1.125-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYALTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 557 1.1.126-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYSLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 558 1.1.127-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYFLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 559 1.1.128-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGTRWGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 560 1.1.129-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRRGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 561 1.1.130-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRYGQEYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 562 1.1.131-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGTRWGQDYILTINNLQPEDIATYFCQVYEFV VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Tabela XI. Sequências de Cadeias Leves SEQ Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Leve
ID NO 563 1.1.132-1 DIQMTQSPSSLSARVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 564 1.1.133-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPARFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 565 1.1.134-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDVATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 566 1.1.135-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEFI VPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE
KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 568 1.1.138-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQATGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYNLTINNLQPEDIATYFCQVYEF VVPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPR EAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 567 1.1.104-1 DIQMTQSPSSLSASVGDTATITCQANGYLNWYQQRRGKAPKLLIY
DGSKLERGVPSRFSGRRWGQEYTLTINNLQPEDIATYFCQVYEFF GPGTRLDLKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
[0081] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma cadeia pesada (HC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%,
pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 1-47 e 517-530 e uma cadeia leve (LC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 48-136 e 531-
567. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma HC selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 1-47 e 517-530, e uma LC selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 48-136 e 531-567. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido têm uma cadeia pesada (HC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica à sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 529 e uma cadeia leve (LC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica à sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 103. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 descritos neste pedido have a HC with a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 529, e a LC with a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 103.
[0082] Estão abrangidos por este pedido anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo que incluem a cadeia pesada de qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a cadeia pesada de qualquer um dentre Anticorpo A-1, Anticorpo 1.1.64-1, Anticorpo 1.1.90-1, Anticorpo 2.2.1- 1, Anticorpo 2.3.1-1, Anticorpo 3.1.5-1, Anticorpo 2.2.5-1, Anticorpo
2.3.5-1, Anticorpo 1.1.119-1, Anticorpo 1.1.104-1, Anticorpo 1.52.64-1, Anticorpo 2.4.1-1, Anticorpo 1.1.54-1, ou Anticorpo B-1. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a cadeia pesada do Anticorpo 1.52.64-1.
[0083] Estão abrangidos por este pedido anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo que incluem a cadeia leve de qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a cadeia leve de qualquer um dentre Anticorpo A-1, Anticorpo 1.1.64-1, Anticorpo 1.1.90-1, Anticorpo 2.2.1-1, Anticorpo
2.3.1-1, Anticorpo 3.1.5-1, Anticorpo 2.2.5-1, Anticorpo 2.3.5-1, Anticorpo 1.1.119-1, Anticorpo 1.1.104-1, Anticorpo 1.52.64-1, Anticorpo 2.4.1-1, Anticorpo 1.1.54-1, ou Anticorpo B-1. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a cadeia leve do Anticorpo 1.52.64-1.
[0084] Também estão abrangidos anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo que incluem a cadeia pesada e a cadeia leve de qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a cadeia pesada e a cadeia leve de qualquer um dentre Anticorpo A-1, Anticorpo 1.1.64-1, Anticorpo
1.1.90-1, Anticorpo 2.2.1-1, Anticorpo 2.3.1-1, Anticorpo 3.1.5-1, Anticorpo 2.2.5-1, Anticorpo 2.3.5-1, Anticorpo 1.1.119-1, Anticorpo
1.1.104-1, Anticorpo 1.52.64-1, Anticorpo 2.4.1-1, Anticorpo 1.1.54-1, ou Anticorpo B-1. Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação à gp120 do mesmo inclui a cadeia pesada e a cadeia leve do Anticorpo 1.52.64-1.
[0085] Também estão abrangidos por este pedido anticorpos anti- gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 do mesmo que incluem qualquer uma das substituições aminoacídicas na VH e/ou na VL mostradas acima.
[0086] Em algumas modalidades, a cadeia pesada variável de qualquer um dos anticorpos anti-gp120 desta invenção está ligada a uma região constante da cadeia pesada compreendendo um domínio CH1 e uma região de dobradiça. Em algumas modalidades, a cadeia pesada variável de qualquer um dos anticorpos anti-gp120 desta invenção está ligada a uma região constante da cadeia pesada compreendendo um domínio CH3. Em certas modalidades, a cadeia pesada variável de qualquer um dos anticorpos anti-gp120 desta invenção está ligada a uma região constante da cadeia pesada compreendendo um domínio CH1, região de dobradiça, e domínio CH2 da IgG4 e um domínio CH3 (por exemplo, da IgG1, IgG2, IgG3, ou IgG4). Em alguns casos, a cadeia pesada variável de qualquer um dos anticorpos anti-gp120 desta invenção está ligada a uma região constante da cadeia pesada compreendendo um domínio CH1, região de dobradiça, domínio CH2, e um domínio CH3 da IgG1, IgG2, IgG3, ou IgG4. Em certas modalidades, a cadeia pesada variável de qualquer um dos anticorpos anti-gp120 desta invenção está ligada a uma região constante da cadeia pesada compreendendo um domínio CH1, domínio CH2, e um domínio CH3 da IgG1 (por exemplo, IgG1 humana, por exemplo, alótipo IgG1m3) e uma região de dobradiça da IgG3 (por exemplo, uma região de dobradiça da IgG3 "aberta" designada "IgG3 C-" no documento WO 2017/096221 (vide, por exemplo, Fig. 2A deste pedido PCT)). Espera-se que esta região de dobradiça da IgG3 apresente flexibilidade melhorada do braço Fab e capacidade de cobrir uma distância de 200A° que é suficiente para interações intra-triméricas. Em certas modalidades, tal anticorpo quimérico contém uma ou mais mutações adicionais na região constante da cadeia pesada que aumentam a estabilidade do anticorpo quimérico. Em certas modalidades, a região constante da cadeia pesada inclui substituições que modificam as propriedades do anticorpo (por exemplo, aumentam a função efetora, melhoram a farmacocinética, aumentam ou diminuem a ligação ao receptor Fc, aumentam ou diminuem a glicosilação, aumentam ou diminuem a a ligação ao C1q, aumentam a meia-vida).
[0087] Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 é um anticorpo IgG (por exemplo, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4). Em uma modalidade, o anticorpo é IgG1 humana. Em uma outra modalidade, o anticorpo é IgG2 humana. Em algumas modalidades, o anticorpo tem uma região constante de cadeia pesada quimérica (por exemplo, tendo as regiões CH1, de dobradiça, e CH2 da IgG4 humana e a região CH3 da IgG1 humana). Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e o anticorpo é IgG1 humana. Em certas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 têm uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%,
pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e o anticorpo é IgG1 humana.
[0088] Anticorpos IgG existem em vários alótipos e isoalótipos. Em certas modalidades, os anticorpos da presente invenção incluem uma cadeia pesada da IgG1 tendo um alótipo de G1m1; nG1m2; G1m3; G1m17,1; G1m17,1,2; G1m3,1; ou G1m17. Cada um desses alótipos ou isoalótipos caracteriza-se pelos seguintes resíduos aminoácidos nas posições indicadas na região constante da cadeia pesada da IgG1 (Fc) (numeração EU): G1m1: D356, L358; nG1m1: E356, M358; G1m3: R214, E356, M358, A431; G1m17,1: K214, D356, L358, A431; G1m17,1,2: K214, D356, L358, G431; G1m3,1: R214, D356, L358, A431; e G1m17: K214, E356, M358, A431. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e o anticorpo tem uma cadeia pesada da IgG1 tendo um alótipo de G1m1; nG1m2; G1m3; G1m17,1; G1m17,1,2; G1m3,1; ou G1m17. Em certas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 têm uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e o anticorpo tem uma cadeia pesada da IgG1 tendo um alótipo de G1m1; nG1m2; G1m3; G1m17,1; G1m17,1,2; G1m3,1; ou G1m17.
[0089] Em uma modalidade, qualquer uma das VHs de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido é diretamente ligada a, ou ligada via uma sequência de aminoácidos interveniente (por exemplo, um ligante G-S), a uma sequência da IgG1m3 do tipo selvagem apresentada abaixo (resíduos determinantes do alótipo representativos estão indicados em negrito).
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT SGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPE VTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTL PPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVL
DSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS PGK (SEQ ID NO: 347).
[0090] Em uma outra modalidade, qualquer uma das VHs de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido é diretamente ligada a, ou ligada via uma sequência de aminoácidos interveniente (por exemplo, um ligante G-S), a uma sequência da IgG1m17 do tipo selvagem apresentada abaixo (resíduos determinantes do alótipo representativos estão indicados em negrito).
[0091] IgG1m17:
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT SGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKV DKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPE VTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTL PPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVL DSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS
PGK (SEQ ID NO: 348).
[0092] Em certas modalidades, a VH de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido é diretamente ligada a, ou ligada via uma sequência de aminoácidos interveniente (por exemplo, um ligante G- S), a uma sequência da IgG1m17 com 1 a 10 (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10) substituições aminoacídicas na SEQ ID NO:348 (por exemplo, substituições feitas para melhorar a função efetora e/ou para aumentar a meia-vida). Substituições aminoacídicas exemplificativas na região Fc (de, por exemplo, IgG1 tal como IgG1m17) incluem S239D, I332E, G236A, A330L, M428L, N434S; S239D, I332E, G236A, A330L; S239D, I332E M428L, N434S; S239D, I332E, A330L, M428L, N434S; F243L, R292P, Y300L, V305I, P396L, M428L, N434S; e S239D, I332E, G236A, A330L.
[0093] Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 é um anticorpo IgG1 humana/Kappa humano. Em algumas modalidades, os anticorpos desta invenção compreendem uma cadeia leve Kappa tendo um alótipo selecionado dentre Km1; Km1,2; ou Km3. Cada um desses alótipos caracteriza-se pelos seguintes resíduos aminoácidos nas posições indicadas na cadeia leve (numeração EU): Km1: V153, L191; Km1,2: A153, L191; e Km3: A153, V191. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e compreende uma cadeia leve Kappa tendo um alótipo selecionado dentre Km1; Km1,2; ou Km3. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142,
respectivamente e compreende uma cadeia leve Kappa tendo an allotipo Km3. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e é um anticorpo IgG1 humana/Kappa humano, tal como uma IgG1/Km3 humana. Em certas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 têm uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e é um anticorpo IgG1 humana/Kappa humano, tal como uma IgG1/Km3 humana.
[0094] Em certas modalidades, um anticorpo anti-gp120 desta invenção compreende a uma cadeia leve Kappa humana compreendendo qualquer uma das seguintes sequência de aminoácidos, nas quais os resíduos determinantes do alótipo representativos estão indicados em negrito: Km1:
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNVL
QSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKLYACEVTHQG LSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 349); Km1,2:
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNAL
QSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKLYACEVTHQG LSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 350); ou Km3:
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNAL
QSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQG LSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 351).
[0095] Em uma modalidade, um anticorpo anti-gp120 desta invenção compreende uma cadeia leve Kappa humana, Km3. Em uma modalidade específica, a VL de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido é diretamente ligada a, ou ligada via uma sequência de aminoácidos interveniente (por exemplo, um ligante G-S), a uma sequência de Km3 humana do tipo selvagem (SEQ ID NO:351). Em certas modalidades, a VL de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido é diretamente ligada a, ou ligada via uma sequência de aminoácidos interveniente (por exemplo, um ligante G-S), a uma sequência de Km3 humana mutante tendo 1 a 5 (isto é, 1, 2, 3, 4, 5) substituições aminoacídicas na SEQ ID NO:351.
[0096] Em certas modalidades, o anticorpo anti-gp120 é um anticorpo IgG1 humana/anticorpo lambda humano. Cada anticorpo humano individual inclui entre sete e onze genes diferentes da cadeia leve lambda, que codificam cadeias leves selecionadas dentre Lambda1, Lambda2, Lambda3, Lambda4, Lambda5, Lambda6, e Lambda7. Em certas modalidades, os anticorpos da presente invenção compreendem uma cadeia leve lambda selecionada dentre Lambda1, Lambda2, Lambda3, Lambda4, Lambda5, Lambda6, e Lambda7. Em algumas modalidades, um anticorpo descrito neste pedido compreende uma cadeia leve lambda compreendendo qualquer uma das seguintes sequência de aminoácidos, nas quais resíduos determinantes de lambda representativos estão indicados em negrito:
Lambda1:
GQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGS
PVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEG STVEKTVAPTECS (SEQ ID NO: 352); Lambda2:
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSS
PVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEG STVEKTVAPTECS (SEQ ID NO: 353); Lambda3:
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSS
PAKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHKSYSCQVTHEG STVEKTVAPTECS (SEQ ID NO: 354); ou Lambda7:
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLVSDFYPGAVTVAWKADG
SPVKVGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCRVTHE GSTVEKTVAPAECS (SEQ ID NO: 355).
[0097] Em uma modalidade, o anticorpo anti-gp120 é um anticorpo IgG1m17 humana/Km3 humana. As regiões constantes (leves e/ou pesadas) podem incluir 1 a 10 (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10) substituições aminoacídicas (por exemplo, substituições feitas para melhorar a função efetora e/ou para aumentar a meia-vida). Em algumas modalidades, os anticorpos são afucosilados. Em algumas modalidades, os anticorpos compreendem um ou mais marcadores. Em certas modalidades, o um ou mais marcadores compreendem um marcador avidina. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e é um anticorpo IgG1m17 humana/Km3 humana. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e é um anticorpo IgG1m17 humana/Km3 humana, em que a região constante da cadeia pesada inclui 1 a 10 substituições aminoacídicas.
Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente e é um anticorpo IgG1m17 humana/Km3 humana, em que a região constante da cadeia pesada inclui as seguintes substituições aminoacídicas em relação à SEQ ID NO: 348: S239D, I332E, G236A, A330L, M428L, N434S.
Em certas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 têm uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e é um anticorpo IgG1 humana/Kappa humano, tal como uma IgG1 humana/Km3 humana, em que a região constante da cadeia pesada inclui as seguintes substituições aminoacídicas em relação à SEQ ID NO: 348: S239D, I332E, G236A, A330L, M428L, N434S.
Em certas modalidades, estas substituições melhora a função efetora.
Em certas modalidades, estas substituições aumentam a meia-vida. Em certas modalidades, estas substituições melhoram a função efetora e aumentam a meia-vida.
[0098] Em certas modalidades, o anticorpo que se liga à gp120 compreende uma sequência de aminoácidos de uma VH de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido e de uma VL de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido. Sequências de aminoácidos de VH e VL exemplificativas de um anticorpo anti-gp120 incluem as sequências apresentadas nas SEQ ID NOs: 182 e 223, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 275, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 278, respectivamente; SEQ ID NOs.: 182 e 292, respectivamente; SEQ ID NOs: 220 e 276, respectivamente; SEQ ID NOs: 465 e 276, respectivamente; SEQ ID NOs: 466 e 276, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 491, respectivamente; SEQ ID NOs: 465 e 491, respectivamente; SEQ ID NOs.: 466 e 491, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 493, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 516, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 276, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 569, respectivamente; SEQ ID NOs: 477 e 223, respectivamente; SEQ ID NOs: 477 e 278, respectivamente; SEQ ID NOs: 477 e 292, respectivamente; e SEQ ID NOs: 478 e 276, respectivamente. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente. Em certas modalidades, cada um destes anticorpos são anticorpos IgG1m17 humana/Km3 humana. Em certas modalidades, estes anticorpos compreendem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 348 e/ou 351. Em alguns casos, estes anticorpos incluem até 10 (por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10) substituições aminoacídicas (por exemplo, substituições feitas para melhorar a função efetora e/ou para aumentar a meia-vida) within SEQ ID NO: 348 e/ou 351, respectivamente. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs: 348 e 351 com 1 a 10 substituições na sequência de aminoácidos na SEQ ID NO: 348 e/ou 351. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs: 348 e 351 com 1 a 10 substituições na sequência de aminoácidos na SEQ ID NO: 348. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs: 348 e 351, com as seguintes substituições aminoacídicas na SEQ ID NO: 348: S239D, I332E, G236A, A330L, M428L, N434S.
Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e é um anticorpo IgGm17/Km3 humana.
Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e o anticorpo compreende a uma cadeia leve Kappa humana compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 351 e uma cadeia pesada da IgG1 tendo um alótipo com a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 348. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente, e compreende a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs: 348 e 351 com 1 a 10 substituições na sequência de aminoácidos na SEQ ID NO: 348 e/ou
351. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente, e compreende a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs: 348 e 351 com 1 a 10 substituições na sequência de aminoácidos na SEQ ID NO: 348. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente, e compreende a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs: 348 e 351, com as seguintes substituições aminoacídicas na SEQ ID NO: 348: S239D, I332E, G236A, A330L, M428L, N434S. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente, e é um anticorpo IgGm17/Km3 humana. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente, e o anticorpo compreende a uma cadeia leve Kappa humana compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 351 e uma cadeia pesada da IgG1 tendo um alótipo com a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 348.
[0099] Em certas modalidades, o anticorpo que se liga à gp120 compreende uma sequência de aminoácidos de uma cadeia pesada de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido e uma cadeia leve de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido. Sequências da cadeia pesada e da cadeia leve exemplificativas de um anticorpo anti- gp120 incluem as sequências apresentadas nas SEQ ID NOs: 2 e 49, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 100, respectivamente; SEQ ID NOs: 42 e 101, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 103, respectivamente; SEQ ID NOs: 517 e 101, respectivamente; SEQ ID NOs: 518 e 101, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 542, respectivamente; SEQ ID NOs: 517 e 542, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 117, respectivamente; SEQ ID NOs: 518 e 542, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 544, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 567, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 568, respectivamente; SEQ ID NOs: 529 e 49, respectivamente; SEQ ID NOs: 529 e 103, respectivamente; SEQ ID NOs: 529 e 117, respectivamente; e SEQ ID NOs: 530 e 101, respectivamente. Em certas modalidades, o anticorpo que se liga à gp120 compreende uma cadeia pesada com a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 529 e uma cadeia leve com a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 103.
[00100] Os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido podem ser feitos, por exemplo, por preparação e expressão de ácidos nucleicos que codificm as sequências de aminoácidos do anticorpo. Anticorpos Multiespecíficos
[00101] Em um outro aspecto, este pedido apresenta anticorpos multiespecíficos. Anticorpos multiespecíficos são anticorpos que ligam a dois ou mais epítopos diferentes (por exemplo, anticorpos biespecíficos, anticorpos trivalentes, anticorpos tetravalentes). Os anticorpos anti-gp120 podem ser compostos de anticorpos multiespecíficos. Os anticorpos multiespecíficos podem ter sítios de ligação a pelo menos um outro antígeno ou a um outro epítopo que não seja ligado pelo sítio de ligação do anticorpo anti-gp120 do anticorpo multiespecífico. O anti-gp120 compreendendo anticorpo multiespecífico pode incluir um domínio de dimerização e três ou mais (por exemplo, três, quatro, cinco, seis) sítios de ligação a antígenos. Um domínio de dimerização exemplificativo compreende (ou consiste em) uma região Fc. Um anti-gp120 compreendendo anticorpo multiespecífico pode compreender (ou consistir em) três a cerca de oito (isto é, três, quatro, cinco, seis, sete, oito) sítios de ligação a antígenos. O anticorpo multiespecífico opcionalmente compreende pelo menos uma cadeia polipeptídica (por exemplo, duas cadeias polipeptídicas, três cadeias polipeptídicas), em que as cadeias polipeptídicas compreendem três ou mais domínios variáveis. Por exemplo, as cadeias polipeptídicas podem compreender, por exemplo, VD1-(X1)n-VD2-(X2)n-Fc, ou VD1-(X1)n-VD2-(X2)n-VD3-(X3)n -Fc, em que VD1 é um primeiro domínio variável, VD2 é um segundo domínio variável, VD3 é um terceiro domínio variável, Fc é uma cadeia polipeptídica de uma região Fc, X1, X2, e X3 representam um espaçador aminoácido ou peptídico, e n é 0 ou 1. Em certos casos, cada um dos domínios variáveis podem ser um scFv. Anticorpos multiespecíficos podem ser facilmente produzidos por expressão recombinante de ácido nucleico codificando as cadeias polipeptídicas do anticorpo. Anticorpos Biespecíficos
[00102] Em um aspecto, o anticorpo multiespecífico é um anticorpo biespecífico. Anticorpos biespecíficos são anticorpos que possuem especificidades de ligação para dois epítopos diferentes. Um anticorpo biespecífico tem dois "braços". Um braço do anticorpo biespecífico liga-se a um epítopo e o outro braço liga-se a outro epítopo. Em uma modalidade, um braço do anticorpo biespecífico liga-se a um primeiro antígeno e o outro braço do anticorpo biespecífico liga-se a um segundo antígeno. Em uma outra modalidade, os dois braços do anticorpo biespecífico ligam-se a dois epítopos diferentes do mesmo antígeno (por exemplo, gp120).
[00103] Em um aspecto, este pedido apresenta um anticorpo biespecífico que se liga especificamente à gp120 e se liga especificamente a um segundo antígeno. Em certas modalidades, o segundo antígeno é uma molécula desencadeadora em um leucócito de modo a focar e localizar os mecanismos de defesa celular para a célula infectada. Em alguns casos, o segundo antígeno é uma molécula de receptor de células T (por exemplo, CD3, CD4); receptores Fc para IgG (FcγR), tais como FcγRI (CD64), FcγRII (CD32), FcγRIII (CD16); CD89; um antígeno de HIV-1 (por exemplo, gp41); CCR5; um membro da família KIR, tal como receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR2DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 2 (KIR2DL2), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 3 (KIR2DL3); um membro da família NKG2 tal como receptor similar à lectina de células exterminadoras C1 (KLRC1), receptor similar à lectina de células exterminadoras C2 (KLRC2), receptor similar à lectina de células exterminadoras C3 (KLRC3), receptor similar à lectina de células exterminadoras C4
(KLRC4), receptor similar à lectina de células exterminadoras D1 (KLRD1), receptor similar à lectina de células exterminadoras K1 (KLRK1); um receptor desencadeador da citotoxicidade natural tal como receptor desencadeador da citotoxicidade natural 3 (NCR3 ou NKp30), receptor desencadeador da citotoxicidade natural 2 (NCR2 ou NK-p44), receptor desencadeador da citotoxicidade natural 1 (NCR1 ou NK-p46), CD226 (DNAM-1), molécula de célula T citotóxica e reguladora (CRTAM ou CD355); um membro da família SLAM tal como membro da família moléculas de ativação linfocítica sinalizadora 1 (SLAMF1), CD48 (SLAMF2), antígeno linfocitário 9 (LY9 ou SLAMF3), CD244 (2B4 ou SLAMF4), CD84 (SLAMF5), um membro da família SLAM 6 (SLAMF6 ou NTB-A), um membro da família SLAM 7 (SLAMF7 ou CRACC); CD27 (TNFRSF7), semaforina 4D (SEMA4D ou CD100), ou CD160 (NK1). Em certas modalidades, o segundo braço do anticorpo biespecífico liga-se a um epítopo diferente da gp120.
[00104] Em uma outra modalidade, uma molécula de anticorpo biespecífico desta invenção inclui um anticorpo de domínio variável duplo (DVD-Ig), onde cada cadeia leve e cada cadeia pesada contém dois domínios variáveis in tandem através de uma ligação peptídica curta (Wu et al., Generation and Characterization of a Dual Variable Domain Immunoglobulin (DVD-Ig™) Molecule, In: Antibody Engineering, Springer Berlin Heidelberg (2010)). Em algumas modalidades, o anticorpo biespecífico é um fragmento (Fab')2 biespecífico quimicamente ligado. Em outras modalidades, o anticorpo biespecífico compreende um Tandab (isto é, uma fusão de dois diacorpos de cadeia única resultando em um anticorpo biespecífico tetravalente que possui dois sítios de ligação para cada um dos antígenos alvo). Em certas modalidades, o anticorpo biespecífico é um flexicorpo, que uma combinação de scFvs com um diacorpo resultando em uma molécula multivalente. Em ainda uma outra modalidade, o anticorpo biespecífico compreende uma molécula "dock and lock", baseada no "domínio de dimerização e atracagem" na Proteína Quinase A, que, quando aplicado a Fabs, pode produzir uma proteína de ligação biespecífica trivalente consistindo em dois fragmentos Fab idênticos ligados a um fragmento Fab diferente. Em um outro caso, os anticorpos biespecíficos desta invenção compreendem uma "molécula escorpião", compreendendo, por exemplo, dois scFvs fusionados a ambos os terminais de um braço Fab humano. Em ainda uma outra modalidade, o anticorpo biespecífico esta invenção compreende um diacorpo.
[00105] Classes exemplficativas de anticorpos biespecíficos incluem, porém sem limitação, moléculas similares à IgG com domínios de complementaridade CH3 para forçar a heterodimerização; moléculas de fusão de IgG, em que anticorpos IgG de comprimento integral são fusionadas a um fragmento Fab extra ou a partes fragmento Fab; moléculas de fusão de Fc, em que moléculas de Fv de cadeia única ou diacorpos estabilizados são fusionadas a domínios constantes da cadeia pesada, regiões Fc ou partes da mesma; moléculas de fusão de Fab, em que fragmentos Fab diferentes são fusionados um ao outro; moléculas de direcionamento duplo similares à IgG recombinante, em que os dois lado da molécula contêm o fragmento Fab ou parte do fragmento Fab de pelo menos dois anticorpos diferentes; anticorpos baseados em scFv e baseados em diacorpo e anticorpos de cadeia pesada (por exemplo, anticorpos de domínio, nanocorpos) em que moléculas de Fv de cadeia única diferentes ou diacorpos diferentes ou anticorpos de cadeia pesada diferentes (por exemplo, anticorpos de domínio, nanocorpos) são fusionados um ao outro ou a uma outra proteína ou molécula carreadora.
[00106] Exemplos de anticorpos biespecíficos de fusão de Fab incluem, porém sem limitação, F(ab)2 (Medarex/AMGEN), Dual-Action ou Bis-Fab (Genentech), Dock-and-Lock (DNL) (ImmunoMedics), Bivalent Bispecific (Biotecnol) e Fab-Fv (UCB-Celltech).
[00107] Exemplos de anticorpos baseados em scFv, baseados em diacorpor e anticorpos de domínio incluem, porém sem limitação, Engajador Biespecífico de Células T (BITE) (Micromet, Tandem Diabody (Tandab) (Affimed), Tecnologia de Redirecionamento de Dupla Afinidade (DART) (MacroGenics), Diacorpo de Cadeia Única (Academic), anticorpos TCR-like (AIT, ReceptorLogics), Fusão de ScFv com Albumina Sérica Humana (Merrimack) e COMBODY (Epigen Biotech), nanocorpos de direcionamento duplo (Ablynx), e anticorpos de domínio único de cadeia pesada de direcionamento duplo. Fragmentos de Ligação a Antígenos
[00108] Esta invenção abrange fragmentos de ligação a antígenos dos anticorpos anti-gp120 descritos neste pedido. Fragmentos de ligação a antígenos de anticorpos (por exemplo, scFv, sc(Fv)2, Fab, F(ab)2, Fab’, F(ab’)2, Facb, e Fv) podem ser preparados, por exemplo, por métodos recombinantes ou por digestão proteolítica de anticorpos intatos. Por exemplo, fragmentos de anticorpos podem ser obtidos por tratamento do anticorpo inteiro com uma enzima tal como papaína, pepsina, ou plasmina. A digestão de anticorpos inteiros com papaína produz fragmentos F(ab)2 ou Fab; a digestão de anticorpos inteiros com pepsina produz F(ab’)2 ou Fab’; e a digestão de anticorpos inteiros com plasmina produz fragmentos Facb.
[00109] Alternativamente, fragmentos de anticorpos podem ser produzidos de forma recombinante. Por exemplo, ácidos nucleicos codificando os fragmentos de anticorpos de interesse podem ser construídos, introduzidos em um vetor de expressão, e expressos em células hospedeiras adequadas. Vide, por exemplo, Co, M.S. et al., J. Immunol., 152:2968-2976 (1994); Better, M. e Horwitz, A.H., Methods in Enzymology, 178:476-496 (1989); Plueckthun, A. and Skerra, A., Methods in Enzymology, 178:476-496 (1989); Lamoyi, E., Methods in Enzymology, 121:652-663 (1989); Rousseaux, J. et al., Methods in
Enzymology, (1989) 121:663-669 (1989); e Bird, R.E. et al., TIBTECH, 9:132-137 (1991)). Fragmentos de anticorpos podem ser expressos em e secretados de E. coli, permitindo assim a fácil produção de grandes quantidades desses fragmentos. Fragmentos de anticorpos podem ser isolados a partir de bibliotecas de fagos de anticorpos. Alternativamente, fragmentos Fab'-SH podem ser recuperados diretamente de E. coli e quimicamente acoplados para formar fragmentos F(ab)2 (Carter et al., Bio/Technology, 10:163-167 (1992)). De acordo com uma outra abordagem, fragmentos F(ab')2 podem ser isolados diretamente de culturas de células hospedeiras recombinantes. Fragmentos Fab e F(ab')2 com meia-vida in vivo aumentada compreendendo um resíduo de epítopo de ligação ao receptor de resgate estão descritos na Patente US N° 5,869,046. Minicorpos
[00110] Também estão abrangidos por este pedido minicorpos que se ligam à gp120. Minicorpos incluem diacorpos, (scFv) de cadeia única, e (Fv)2 de cadeia única (sc(Fv)2).
[00111] Um "diacorpo" é um minicorpo bivalente construídos por fusão de genes (vide, por exemplo, Holliger, P. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 90:6444-6448 (1993); EP 404,097; WO 93/11161). Diacorpos são dímeros compostos de duas cadeias polipeptídicas. O domínio da VL e o domínio da VH de cada cadeia polipeptídica do diacorpo são ligados por ligantes. O número de resíduos aminoácidos que constituem um ligante pode variar entre 2 e 12 resíduos (por exemplo, 3-10 resíduos ou cinco ou cerca de cinco resíduos). Os ligantes dos polipeptídios em um diacorpo são tipicamente curtos demais para permitir que a VL e a VH se liguem uma à outra. Assim sendo, a VL e a VH codificadas na mesma cadeia polipeptídica não podem formar um fragmento da região variável de cadeia única, mas ao contrário formam um dímero com um fragmento da região variável de cadeia única diferente. Como resultado, um diacorpo possui dois sítios de ligação a antígenos.
[00112] Um scFv é um anticorpo de polipeptídio de cadeia única obtido por ligação da VH e da VL com um ligante (vide, por exemplo, Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 85:5879-5883 (1988); e Plickthun, "The Pharmacology of Monoclonal Antibodies" Vol.113, Ed Resenburg and Moore, Springer Verlag, New York, pp. 269-315, (1994)). A ordem das VHs e das VLs a serem ligadas não é particularmente limitada, e elas podem ser dispostas em qualquer ordem. Exemplos de disposições incluem: [VH] ligante [VL]; ou [VL] ligante [VH]. A região V da cadeia H e a região V da cadeia L em um scFv podem ser derivadas de qualquer anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo descrito neste pedido.
[00113] Um sc(Fv)2 é um minicorpo no qual duas VHs e duas VLs são ligadas por um ligante para formar uma cadeia única (Hudson, et al., J. Immunol. Methods, (1999), 231: 177-189). Um sc(Fv)2 pode ser preparado, por exemplo, por união de scFvs com a ligante. Os sc(Fv)2 da presente invenção incluem anticorpos de preferência nos quais duas VHs e duas VLs estão dispostas na ordem de: VH, VL, VH, e VL ([VH] ligante [VL] ligante [VH] ligante [VL]), iniciando a partir do terminal N de um polipeptídio de cadeia única; no entanto, a ordem das duas VHs e das duas VLs não está limitada à disposição acima, e elas podem ser dispostas em qualquer ordem. Exemplos de disposições estão apresentados abaixo: [VL] ligante [VH] ligante [VH] ligante [VL] [VH] ligante [VL] ligante [VL] ligante [VH] [VH] ligante [VH] ligante [VL] ligante [VL] [VL] ligante [VL] ligante [VH] ligante [VH] [VL] ligante [VH] ligante [VL] ligante [VH]
[00114] Normalmente, são necessários três ligantes quando quatro regiões variáveis do anticorpo são ligadas; os ligantes usados podem ser idênticos ou diferentes. Não há qualquer limitação particular quanto aos ligantes que ligam as regiões VH e VL dos minicorpos. Em algumas modalidades, o ligante é um ligante peptídico. Qualquer peptídeo de cadeia única arbitrário compreendendo cerca de três a 25 resíduos (por exemplo, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18) pode ser usado como um ligante. Exemplos de tais ligantes peptídicos incluem: Ser; Gly Ser; Gly Gly Ser; Ser Gly Gly; Gly Gly Gly Ser (SEQ ID NO: 427); Ser Gly Gly Gly (SEQ ID NO: 428); Gly Gly Gly Gly Ser (SEQ ID NO: 429); Ser Gly Gly Gly Gly (SEQ ID NO: 430); Gly Gly Gly Gly Gly Ser (SEQ ID NO: 431); Ser Gly Gly Gly Gly Gly (SEQ ID NO: 432); Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ser (SEQ ID NO: 433); Ser Gly Gly Gly Gly Gly Gly (SEQ ID NO: 434); (Gly Gly Gly Gly Ser)n (SEQ ID NO: 435), em que n é um número inteiro igual a um ou mais; e (Ser Gly Gly Gly Gly)n (SEQ ID NO: 436), em que n é um número inteiro igual a um ou mais.
[00115] Em certas modalidades, o ligante é um composto sintético (agente de reticulação químico). Exemplos de agentes de reticulação que se encontram disponíveis no mercado incluem N-hidroxisauccinimida (NHS), disuccinimidilsuberato (DSS), bis(sulfossuccinimidil)suberato (BS3), ditiobis(succinimidilpropionato) (DSP), ditiobis(sulfossucci- nimidilpropionato) (DTSSP), etilenoglicol bis(succinimidilsuccinato) (EGS), etilenoglicol bis(sulfossuccinimidilsuccinato) (sulfo-EGS), dissuccinimidil tartarato (DST), disulfosuccinimidil tartarato (sulfo-DST), bis[2- (succinimido-oxicarboniloxi)etil]sulfona (BSOCOES), e bis[2- (sulfossuccinimidooxicarboniloxi)etil]sulfona (sulfo-BSOCOES).
[00116] A sequência de aminoácidos da VH ou da VL nos minicorpos pode incluir modificações tais como substituições, deleções, adições, e/ou inserções. Por exemplo, a modificação pode estar em uma ou mais das CDRs do anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo. Em certas modalidades, a modificação envolve uma, duas, ou três substituições aminoacídicas em uma ou mais CDRs do domínio da VH e/ou da VL do minicorpo anti-gp120. Tais substituições são feitas para melhorar a ligação e/ou a atividade funcional do minicorpo anti-gp120. Em outras modalidades, um, dois, ou três aminoácidos das CDRs do anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo podem ser deletados ou adicionados contanto que haja ligação à gp120 e/ou atividade funcional quando a VH e a VL forem associadas.
[00117] Em algumas modalidades, os anticorpos e fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, não compreendem um peptídeo sinal. Em algumas modalidades, os anticorpos e fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, compreendem um peptídeo sinal N-terminal. O peptídeo sinal pode ser um peptídeo sinal endógeno (por exemplo, proveniente de uma proteína imunoglobulina nativa ou do tipo selvagem), ou de um polipeptídio heterólogo (por exemplo, uma proteína não de imunoglobulina). Em algumas modalidades, o peptídeo sinal heterólogo é proveniente de uma proteína secretada, por exemplo, uma proteína sérica, uma imunoglobulina ou uma citocina. Em algumas modalidades, o peptídeo sinal é proveniente de um peptídeo sinal da albumina sérica (por exemplo, tendo a sequência de aminoácidos KWVTFISLLFLFSSAYS (SEQ ID NO: 620). Em algumas modalidades, o peptídeo sinal compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em MDPKGSLSWRILLFLSLA- FELSYG (SEQ ID NO: 621), MSVPTQVLGLLLLWLTDARC (SEQ ID NO: 622), METDTLLLWVLLLWVPGSTG (SEQ ID NO: 623), MKWVTFISLLFLFSSAYS (SEQ ID NO: 624), MRCLAEFLGLLVL- WIPGAIG (SEQ ID NO: 625), e MDPKGSLSWRILLFLSLAFELSYG (SEQ ID NO: 626). O peptídeo sinal pode ser desenhado para ser removido por clivagem, por exemplo, depois de secreção a partir da célula, para formar uma proteína de fusão madua. Um peptídeo sinal da albumina sérica humana modificado para secretar proteínas em células que podem ser úteis na expressão das presentes proteínas de fusão está descrito, por exemplo, em Attallah, et al., Protein Expr Purif. (2017) 132:27-33. Orientação adicional para seleção de sequências de peptídeos sinal para uso na expressão dos anticorpos antibodies e fragmentos de ligação a antígenos do mesmo descritos neste pedido está descrita, por exemplo, em Kober, et al., Biotechnol Bioeng. (2013) 110(4):1164-73; Gibson, et al., Biotechnol Bioeng. 2017 Sep;114(9):1970-1977; Lin, et al., Biotechnol J. 2017 Sep;12(9). doi:
10.1002/biot.201700268 (PMID 28727292); Ramezani, et al., Protein Expr Purif. 2017 Jul;135:24-32; e Haryadi, et al., PLoS One. 2015 Feb 23;10(2):e0116878. Conforme apropriado, a cadeia pesada e a cadeia leve, ou fragmentos de ligação a antígenos das mesmas, podem ter os mesmos peptídeos sinal ou peptídeos sinal diferentes quando expressos como proteínas individuais. Modificações no Fc
[00118] Em certas modalidades, os anticorpos desta invenção incluem uma ou mais modificações na sequência de aminoácidos na região constante da cadeia pesada (Fc) em relação à sequência de aminoácidos da IgG1m17 (isto é, SEQ ID NO: 348). Em certas modalidades, os anticorpos desta invenção incluem uma ou mais modificações na sequência de aminoácidos na região constante da cadeia pesada (Fc) em relação a outros anticorpos anti-HIV tais como o Anticorpo A ou o Anticorpo B. Em algumas modalidades, essas modificações aumentam a estabilidade ou aumentam a afinidade de ligação do anticorpo modificado em relação ao Anticorpo A ou ao Anticorpo B. Em certas modalidades, essas modificações aumentam a estabilidade ou aumentam a função efetora do anticorpo modificado em relação ao Anticorpo A ou ao Anticorpo B.
Em algumas modalidades, algumas dessas modificações melhoram a farmacocinético do anticorpo em relação ao Anticorpo A ou ao Anticorpo B.
Em certas modalidades, algumas dessas modificações aumentam a meia-vida do anticorpo em relação ao Anticorpo A ou ao Anticorpo B.
Em outras modalidades, algumas dessas modificações aumentam a função efetora do anticorpo e melhoram a farmacocinética do anticorpo em relação ao Anticorpo A ou ao Anticorpo B.
Em outras modalidades, algumas dessas modificações aumentam a função efetora do anticorpo e aumentam a meia-vida do anticorpo em relação ao anticorpo A ou ao Anticorpo B.
Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo as CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo as CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma região constante da cadeia pesada com uma ou mais modificações na sequência de aminoácidos em relação à SEQ ID NO: 348. Em certas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 têm uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278. Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente, e compreende uma região constante da cadeia pesada com uma ou mais modificações na sequência de aminoácidos em relação à SEQ ID NO: 348. Em algumas modalidades, essas substituições melhoram a função efetora. Em algumas modalidades, essas substituições aumentam a meia-vida. Em algumas modalidades, essas substituições melhoram a função efetora e aumentam a meia-vida.
[00119] Em certas modalidades, a uma ou mais modifications são selecionadas dentre as seguintes substituições aminoacídicas no Fc (numeração EU) ou combinações das mesmas: L234F; L235E; G236A; S239D; F243L; D265E; D265A; S267E; H268F; R292P; N297Q; N297A; S298A; S324T; I332E; S239D; A330L; L234F; L235E; P331S; F243L; Y300L; V305I; P396L; S298A; E333A; K334A; E345R; L235V; F243L; R292P; Y300L; P396L; M428L; E430G; N434S; G236A, S267E, H268F, S324T, e I332E; G236A, S239D, e I332E; S239D, A330L, I332E; L234F, L235E, e P331S; F243L, R292P, Y300L, V305I, e P396L; G236A, H268F, S324T, e I332E; S239D, H268F, S324T, e I332E; S298A, E333A, e K334A; L235V, F243L, R292P, Y300L, e P396L; S239D, I332E; S239D, S298A, e I332E; G236A, S239D, I332E, M428L, e N434S; G236A, S239D, A330L, I332E, M428L, e N434S; S239D, I332E, G236A e A330L; M428L e N4343S; M428L, N434S; G236A, S239D, A330L, e I332E; e G236A e I332E. Em certas modalidades, uma, duas, três, quatro, ou mais substituições aminoacídicas são introduzidas em uma região Fc para alterar (por exemplo, aumentar) a função efetora do anticorpo. Por exemplo, essas substituições ficam localizadas em posições selecionadas do grupo que consiste nos resíduos aminoácidos 236, 239, 330 e 332 (de acordo com a numeração EU). Estas posições podem ser substituídas por um resíduo aminoácido diferente para que o anticorpo apresente uma função efetora melhorada.
Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH compreendendo CDRs 1-3 da VH e uma VL compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL têm as sequências apresentadas em: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma região constante da cadeia pesada com as seguintes modificações (numeração EU) em relação à SEQ ID NO: 348: S239D, I332E, G236A, A330L, M428L, N434S.
Em certas modalidades, os anticorpos anti-gp120 ou fragmentos de ligação à gp120 têm uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278, e compreende uma região constante da cadeia pesada com as seguintes modificações (numeração EU) em relação à SEQ ID NO: 348: S239D, I332E, G236A, A330L, M428L, N434S.
Em certas modalidades, o anticorpo compreende uma VH e uma VL compreendendo as sequências de aminoácidos apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente, e compreende uma região constante da cadeia pesada com as seguintes modificações (numeração EU) em relação à SEQ ID NO: 348: S239D, I332E, G236A, A330L, M428L, N434S.
Em algumas modalidades, estas substituições melhoram a função efetora.
Em algumas modalidades, estas substituições aumentam a meia-vida.
Em algumas modalidades,
estas substituições melhoram a função efetora e aumentam a meia- vida.
[00120] Em certos casos, os anticorpos do presente pedido compreendem mutações que aumentam ou melhyoram a função efetora através da melhora da ligação do Fc aos FcγRs de ativação. Em alguns casos, os anticorpos do presente pedido compreendem mutações que aumentam a meia-vida farmacocinética do anticorpo.
[00121] Mutações que aumentam a meia-vida de um anticorpo são conhecidas na literatura. Em uma modalidade, a região constante de um anticorpo descrito neste pedido compreende uma substituição de metionina por tirosina na posição 252 (numeração EU), uma substituição de serina por treonina na posição 254 (numeração EU), e uma substituição de treonina por ácido glutâmico na posição 256 (numeração EU). Vide, por exemplo, Patente US N° 7,658,921. Este tipo de mutante, designado "mutante YTE" apresenta uma meia-vida quatro vezes maior em relação às versões do tipo selvagem do mesmo anticorpo (Dall’Acqua t al., J Biol Chem, 281: 23514-24 (2006); Robbie et al., Antimicrob Agents Chemotherap., 57(12):6147-6153 (2013)). Em certas modalidades, um anticorpo compreende um domínio constante de IgG compreendendo uma, duas, três ou mais substituições aminoacídicas de resíduos aminoácidos nas posições 251-257, 285- 290, 308-314, 385-389, e 428-436 (numeração EU). Em outras modalidades, um anticorpo descrito neste pedido compreende as mutações T250Q e M428L (numeração EU). Em outras modalidades, um anticorpo descrito neste pedido (por exemplo, Duobodies®) compreende as mutações H433K e N434F (numeração EU). Anticorpos Conjugados
[00122] Quaisquer dos anticorpos descritos neste pedido podem ser anticorpos conjugados que são ligados a várias moléculas incluindo substâncias macromoleculares tais como polimeros (por exemplo,
copolímeros de polietileno glicol (PEG), polietilenimina (PEI) modificada com PEG (PEI-PEG), ácido poliglutâmico (PGA) (N-(2- hidroxipropil) metacrilamid (HPMA)), ácido hialurônico, materiais radioativos (por exemplo, 90Y, 131I, 125I, 35S, 3H, 121In, 99Tc), substâncias fluorescentes (por exemplo, fluoresceína e rodamina), substâncias luminescentes (por exemplo, luminol), Qdots, haptenos, enzimas (por exemplo, glucose oxidase), metal chelates, biotina, avidina, e fármacos.
[00123] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo descritos neste pedido são conjugados a um agente citotóxico, por exemplo, para ser distribuído para uma célula infectada pelo HIV e destruir a mesma. Em várias modalidades, o agente citotóxico é um composto orgânico pequeno ou um ácido nucleico inibitório, por exemplo, um RNA inibitório curto (siRNA), um microRNA (miRNA). Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo descritos neste pedido são conjugados a um agente citotóxico selecionado do grupo que consiste em monometil auristatina E (MMAE), monometil auristatina F (MMAF), uma calicheamicina, ansamitocina, maitansina ou um análogo da mesma (por exemplo, mertansina/emtansina (DM1), ravtansina/soravtansina (DM4)), uma antraciclina (por exemplo, doxorubicina, daunorubicina, epirubicina, idarubicina), o agente de reticulação de DNA à base de pirrolobenzodiazepina (PBD) SC-DR002 (D6.5), duocarmicina, um inibidor de microtúbulos (MTI) (por exemplo, um taxano, um alcaloide da vinca, uma epotilona), uma pirrolobenzodiazepina (PBD) ou dímero da mesma, uma duocarmicina (A, B1, B2, C1, C2, D, SA, CC-1065), e uma exotoxina de Pseudomonas.
[00124] Os anticorpos conjugados descritos acima podem ser preparados por meio de modificações químics nos anticorpos ou nas formas de baixo peso molecular dos mesmos descritos neste pedido. Métodos para modificação de anticorpos são bastante conhecidos na literatura (por exemplo, US 5,057,313 e US 5,156,840). Ácidos Nucleicos
[00125] Esta invenção também apresenta um polinucleotídeo ou polinucleotídeos codificando um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos descrito neste pedido, vetores compreendendo tais polinucleotídeos, e células hospedeiras (por exemplo, células de mamífero incluindo células de hamster ou céluls humanas, células vegetais, células de leveduras, células bacterianas, incluindo células de E. coli) compreendendo tais polinucleotídeos ou vetores de expressão. Neste pedido estão apresentados polinucleotídeos compreendendo sequências de nucleotídeos codificando qualquer um dos anticorpos apresentados neste pedido, assim como vetores compreendendo tais sequências de polinucleotídeos, por exemplo, vetores de expressão para expressão eficiente dos mesmos em células hospedeiras, por exemplo, células de mamífero.
[00126] Em um outro aspecto, este pedido apresenta polinucleotídeos ou moléculas de ácido nucleico codificando um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo de acordo com a invenção. Em algumas modalidades, as moléculas de ácido nucleico codificam a cadeia leve de um anticorpo (ou de um fragmento do mesmo) ou a cadeia leve de um anticorpo (ou de um fragmento do mesmo), ou ambas do presente pedido. Em outras modalidades, o ácido nucleico é um DNA, um cDNA, ou um mRNA. Em algumas outras modalidades, a molécula de anticorpo é códon-otimizada para melhorar a expressão em uma célula hospedeira.
[00127] Em um aspecto, este pedido apresenta polinucleotídeos compreendendo sequências de nucleotídeos codificando a VH, a VL, ou a VH e a VL dos anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos que se ligam à gp120. Em certos casos, a VH e a VL possuem os aminoácidos apresentados, respectivamente, nas SEQ ID NOs.: 182 e 275; 182 e 278; 182 e 279; 182 e 280; 182 e 281; 182 e 282; 182 e 292; 182 e 304; 182 e 307; 182 e 309; 220 e 310; ou 220 e 311.
[00128] Em um outro aspecto, neste pedido são apresentados polinucleotídeos compreendendo uma sequência de nucleotídeos codificando as CDRs, a cadeia leve, ou a cadeia pesada de um anticorpo descrito neste pedido. Os polinucleotídeos podem compreender sequências de nucleotídeos codificando uma cadeia leve ou um domínio variável da cadeia leve compreendendo as CDRs da VL dos anticorpos descritos neste pedido (vide, por exemplo, Tabelas acima). Os polinucleotídeos podem compreender sequências de nucleotídeos codificando uma cadeia pesada ou um domínio variável da cadeia pesada compreendendo as CDRs da VH dos anticorpos descritos neste pedido (vide, por exemplo, Tabelas acima). Em uma modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica uma cadeia leve variável ou uma cadeia leve com as CDRs da VL compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs: 140, 141, e 142, respectivamente. Em uma outra modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica uma cadeia pesada variável ou uma cadeia pesada com as CDRs da VH compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NOs: 137, 138, e 139, respectivamente. Em uma modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica um domínio da VL compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO:275, 278, 279, 280, 281, 282, 292, 304, 307, 309, 310 ou 311. Em uma outra modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica um domínio da VH compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO:182 ou 220. Em ainda uma outra modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO:49, 100, 101, 103, 104, 105, 106, 107, 117, 129, 132, 134, 135, ou 136. Em uma outra modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 2 ou 42. Em uma modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica um domínio da VL compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 278. Em uma outra modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica um domínio da VH compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 477. Em ainda uma outra modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 103. Em uma outra modalidade, um polinucleotídeo descrito neste pedido codifica uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 529.
[00129] Em algumas modalidades, o ácido nucleico ou ácidos nucleicos codificam uma VH selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 181-221 e 465-478 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 572-581; e codificam uma VL selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 222-311, 479-516 e 569 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em
SEQ ID NOs: 582-595.
[00130] Em algumas modalidades, o ácido nucleico ou ácidos nucleicos codificam uma HC selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 1-47 e 517-530 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 596-605; e codificam uma LC selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 48-136 e 531-567 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 606-619.
[00131] Em algumas modalidades, a molécula ou moléculas de ácido nucleico códon-otimizado para aumentar a expressão em uma célula hospedeira desejada, por exemplo, em células humanas, células de mamífero, células de leveduras, células vegetais, ou células bacterianas, por exemplo, células de E. coli. Por conseguinte, neste pedido são apresentados polinucleotídeos codificando um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos, descrito neste pedido, em que os polinucleotídeos são códon-otimizados, compreendem substituição de sequências sinal heterólogas, e/ou têm os elementos de instabilidade do mRNA eliminados. Métodos para gerar ácidos nucleicos códon- otimizados podem ser realizados por adaptação dos métodos descritos, por exemplo, nas Patentes US N° 5,965,726; 6,174,666; 6,291,664; 6,414,132; e 6,794,498. O uso de códons preferido para expressão de um anticorpo ou fragmentos de ligação a antígenos em células hospedeiras desejadas está apresentado, por exemplo, em kazusa.or.jp/codon/; e genscript.com/tools/codon-frequency-table.
[00132] Polinucleotídeos ilustrativos codificando a VH e a VL dos anticorpos anti-gp120 e fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido, códon-otimizados para melhor expressão em uma célula hospedeira de mamífero, estão apresentados nas Tabelas XII e XIII. Polinucleotídeos ilustrativos codificando a HC e a LC dos anticorpos anti-gp120 e fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido, códon-otimizados para melhor expressão em uma célula hospedeira de mamífero, estão apresentados nas Tabelas XIV e XV.
[00133] Conforme apropriado, em certas modalidades, a extremidade 3ʹ do polinucleotídeo ou polinucleotídeos codificando os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido, compreendem múltiplos códons de terminação em tandem, por exemplo, dois ou mais TAG em tandem ("âmbar"), TAA ("ocre") ou códons de terminação TGA ("opala" ou "cor de ferrugem"). Os múltiplos códons de terminação em tandem podem ser os mesmos ou difeentes. Nas modalidades em que o polinucleotídeo é um mRNA, a extremidade 3ʹ do polinucleotídeo pode compreender uma cauda poli-A.
[00134] Também estão abrangidos por este pedido polinucleotídeos codificando um anticorpo anti-gp120 ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo, um anticorpo anti-CD3 ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo, um anticorpo anti- CD16 ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo, ou um anticorpo anti-CD89 ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que são otimizados por otimização por códons, substituição com sequências sinal heterológas, e eliminação de elementos de instabilidade do mRNA instability elements. Métodos para gerar ácidos nucleicos otimizados podem ser realizados por adaptação dos métodos descritos, por exemplo, nas Patentes US N° 5,965,726; 6,174,666; 6,291,664; 6,414,132; e 6,794,498.
[00135] Em algumas modalidades, o um ou mais polinucleotídeos codificando os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos, descritos neste pedido, são formulados ou encapsulados em uma nanopartícula lipídica (LNP). Conforme usado neste pedido, o termo "nanopartícula lipídica" refere-se a uma ou mais nanopartículas esféricas com um diâmetro médio entre cerca de 10 e cerca de 1000 nanômetros, e que compreendem uma matriz de núcleo lipídico sólido que pode solubilizar moléculas lipofílicas. Em certas modalidades, o núcleo lipídico é estabilizado por tensoativos (por exemplo, emulsificantes), e pode compreender um ou mais dentre triglicerídeos (por exemplo, triestearina), diglicerídeos (por exemplo, baenato de glicerol), monoglicerídeos (por exemplo, monoestearato de glicerol), ácidos graxos (por exemplo, ácido esteárico), esteroides (por exemplo, colesterol), e ceras (por exemplo, palmitato de cetila), incluindo combinações dos mesmos. Nanopartículas lipídicas estão descritas, por exemplo, em Petrilli et al., Curr Pharm Biotechnol. 15:847-55, 2014; e nas Patentes US N° 6,217,912; 6,881,421; 7,402,573; 7,404,969; 7,550,441; 7,727,969; 8,003,621; 8,691,750; 8,871,509; 9,017,726; 9,173,853; 9,220,779; 9,227,917; e 9,278,130, cada uma delas estando aqui incorporada em sua íntegra a título de referência. Moléculas de mRNA encapsuladas em LNP codificando um anticorpo amplamente neutralizantes, estão descritas, por exemplo, em Pardi, et al., Nat Commun. (2017) 8:14630. Em certas modalidades, o um ou mais polinucleotídeos codificando os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos, descritos neste pedido, são formulados ou encapsulados em uma LNP composta de um lipídio catiônico ionizável/fosfatidilclina/colesterol/lipídio PEG, por exemplo, em razões molares de cerca de 50:10:38.5:1.5 mol mol-1, respectivamente. TABELA XII – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO REGIÕES VARIÁVEIS DA CADEIA PESADA (VH) SEQ ID Sequência de polinucleotídeos codificando VH NO: 572 CAGGTGCAGTTGTTGCAGTCTGGCGCCGCTGTTACAAAGCCTGGCGC
TTCTGTTAGAGTGTCCTGCGAGGCCTCCGGCTACAACATCAGAGACTA CTTCATCCACTGGTGGCGGCAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAATGGG TCGGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGT TCCAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTGGGACTTCGAC ACCTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCCTGAGATCCGACGATACC GCCGTGTACTTCTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGAT
GTGTGGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCT 573 CAGGTGCAGCTGCTGCAGTCTGGCGCCGCTGTGACAAAACCAGGCGC
TTCTGTGCGGGTGTCCTGCGAGGCCAGCGGCTACAACATCCGGGACT ACTTCATTCACTGGTGGCGCCAGGCCCCTGGACAGGGACTGCAGTGG GTGGGATGGATCAACCCCAAGACCGGCCAGCCCAACAACCCCAGACA GTTCCAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCAGCTGGGACTTCG ACACCTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCCTGCGGAGCGACGATA CCGCCGTGTACTTCTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTC
GACGTGTGGGGCAGCGGCACCCAAGTGACCGTGTCATCT 574 CAGGTGCAGTTGTTGCAGTCTGGCGCCGCTGTTACAAAGCCTGGCGC
TTCTGTTAGAGTGTCCTGCGAGGCCTCCGGCTACAACATCAGAGACTA CTTCATCCACTGGTGGCGGCAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAATGGG TCGGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGT TCCAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTTCGACTTCGACA CCTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCCTGAGATCCGACGATACCG CCGTGTACTTCTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGACTTCGATG
TGTGGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCT 575 CAGGTGCAGCTGCTGCAGTCTGGCGCCGCTGTGACAAAACCAGGCGC
TTCTGTGCGGGTGTCCTGCGAGGCCAGCGGCTACAACATCCGGGACT ACTTCATTCACTGGTGGCGCCAGGCCCCTGGACAGGGACTGCAGTGG GTGGGATGGATCAACCCCAAGACCGGCCAGCCCAACAACCCCAGACA GTTCCAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCAGCTTCGACTTCG ACACCTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCCTGCGGAGCGACGATA CCGCCGTGTACTTCTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTC GACGTGTGGGGCAGCGGCACCCAAGTGACCGTGTCATCT
TABELA XII – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO REGIÕES VARIÁVEIS DA CADEIA PESADA (VH) SEQ ID Sequência de polinucleotídeos codificando VH NO: 576 CAGGTCCACTTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTGACAAAGCCTGGCGCT
TCTGTCAGAGTGTCTTGCGAGGCCTCTGGCTACAAGATCCGGGACCAC TTTATCCACTGGTGGCGACAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAGTGGGT CGGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGTT CCAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTGGGACTTCGACA CCTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACC GCTATCTACTTTTGCGCCAGACAGAGATCCGACTACTGGGATTTCGAT
GTGTGGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCT 577 CAGGTCCACCTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTTACAAAACCAGGCGCC
TCTGTTAGAGTGTCTTGCGAGGCCAGCGGCTACAAGATCAGGGACCA CTTTATTCACTGGTGGCGCCAGGCTCCAGGACAGGGACTTCAATGGGT CGGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCCAGACAGTT CCAGGGCAGAGTGTCTCTGACAAGACACGCCAGCTGGGACTTCGACA CCTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACC GCCATCTATTTTTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGAT
GTGTGGGGCAGCGGCACCCAAGTGACAGTCTCTTCT 578 CAGGTCCACTTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTGACAAAGCCTGGCGCT
TCTGTCAGAGTGTCTTGCGAGGCCTCTGGCTACAAGATCCGGGACCAC TTTATCCACTGGTGGCGACAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAGTGGGT CGGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGTT CCAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTTCGACTTCGACAC CTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACCG CTATCTACTTTTGCGCCAGACAGAGATCCGACTACTGGGACTTCGATG
TGTGGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCT 579 CAGGTCCACCTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTTACAAAACCAGGCGCC
TCTGTTAGAGTGTCTTGCGAGGCCAGCGGCTACAAGATCAGGGACCA CTTTATTCACTGGTGGCGCCAGGCTCCAGGACAGGGACTTCAATGGGT CGGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCCAGACAGTT CCAGGGCAGAGTGTCTCTGACAAGACACGCCAGCTTCGACTTCGACA CCTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACC GCCATCTATTTTTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGAT GTGTGGGGCAGCGGCACCCAAGTGACAGTCTCTTCT
TABELA XII – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO REGIÕES VARIÁVEIS DA CADEIA PESADA (VH) SEQ ID Sequência de polinucleotídeos codificando VH NO: 580 CAGGTCCACTTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTGACAAAGCCTGGCGCT
TCTGTCAGAGTGTCTTGCGAGGCCTCCGGCTACAACATCCGGGACTAC TTTATCCACTGGTGGCGGCAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAATGGGT CGGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGTT CCAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTGGGACTTCGACA CCTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACC GCTATCTACTTTTGCGCCAGACAGAGATCCGACTACTGGGATTTCGAT
GTGTGGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCT 581 CAGGTCCACCTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTTACAAAACCAGGCGCC
TCTGTTAGAGTGTCTTGCGAGGCCAGCGGCTACAACATCCGGGACTAC TTTATTCACTGGTGGCGCCAGGCTCCAGGACAGGGACTTCAATGGGTC GGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCCAGACAGTTC CAGGGCAGAGTGTCTCTGACAAGACACGCCAGCTGGGACTTCGACAC CTTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACCG CCATCTATTTTTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGATG
TGTGGGGCAGCGGCACCCAAGTGACAGTCTCTTCT TABELA XIII – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO REGIÕES VARIÁVEIS DA CADEIA LEVE (VL) SEQ ID Sequência de polinucleotídeos codificando VL NO: 582 GACATCCAGATGACCCAGAGCCCTTCCTCTTTATCCGCTAGCGTCGGC
GATACCGTGACCATCACATGCCAAGCTAACGGCTACCTCAACTGGTAC CAGCAGCGGAGGGGAAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACGACGGCTC CAAGCTGGAGAGGGGAGTGCCTTCCCGGTTCAGCGGAAGGAGGTGG GGACAAGAATACAATTTAACCATCAACAATTTACAGCCCGAGGACATCG CTACCTACTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCGTGGTGCCCGGCACTCGTC
TGGATCTGAAG 583 GACATCCAGATGACCCAGAGCCCTAGCAGCCTGAGCGCCAGCGTGGG
CGATACCGTGACCATTACCTGCCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTA TCAGCAGCGGAGAGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACGACGGCA GCAAGCTGGAAAGAGGCGTGCCCAGCAGATTCAGCGGCAGAAGATGG GGCCAGGAGTACAACCTGACCATCAACAACCTGCAGCCCGAGGATAT CGCCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCGTGGTGCCCGGCACAC GGCTGGACCTGAAA
TABELA XIII – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO REGIÕES VARIÁVEIS DA CADEIA LEVE (VL) SEQ ID Sequência de polinucleotídeos codificando VL NO: 584 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCTCTGTGGGC
GATACCGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTAT CAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTC CAAACTGGAAAGAGGCGTGCCCTCTCGGTTCTCTGGCAGAAGATGGG GCCAAGAGTACAACCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGATATCG CCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCGTGGTGCCTGGCACAAGAC
TGGACCTGAAG 585 GATATTCAGATGACACAGAGCCCCAGTAGCCTGAGCGCCAGCGTGGG
CGACACCGCAACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTATCTGAACTGGTA TCAACAGAGGAGGGGCAAGGCCCCCAAGCTCCTGATATACGACGGCA GCAAGCTGGAGAGGGGCGTTCCCAGCCGCTTCAGCGGCAGGAGGTG GGGCCAGGAGTACAACCTTACAATCAACAACCTGCAGCCCGAGGACAT CGCCACCTATTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCGTGGTGCCCGGCACCAG
GCTGGACCTGAAG 586 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCTCTGTGGGC
GACAGAGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTAT CAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTC CAAACTGGAAAGAGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTAGATGGG GCCAAGAGTACAACCTGACCATCTCCAGCCTCCAGCCTGAGGATATCG CCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGAC
TGGACCTGAAG 587 GATATTCAGATGACACAGAGCCCCAGTAGCCTGAGCGCCAGCGTGGG
CGACAGAGCAACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTATCTGAACTGGTA TCAACAGAGAAGGGGCAAGGCCCCCAAGCTCCTGATATACGACGGCA GCAAGCTGGAGAGGGGCGTTCCCAGCCGCTTCAGCGGCTCAAGGTG GGGCCAGGAGTACAACCTTACAATCTCATCCCTGCAGCCCGAGGACAT CGCCACCTATTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCTTCGGACCCGGCACCAG
GCTGGACCTGAAG 588 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCAGAGTGGGC
GACACCGTGACAATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTAT CAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTC CAAACTGGAAAGAGGCGTGCCCGCTAGATTCTCCGGCAGAAGATGGG GCCAAGAGTACAACCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGACGTG GCCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCATCGTGCCCGGCACCAGA CTGGACCTGAAG
TABELA XIII – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO REGIÕES VARIÁVEIS DA CADEIA LEVE (VL) SEQ ID Sequência de polinucleotídeos codificando VL NO: 589 GATATTCAGATGACACAGAGCCCCAGTAGCCTGAGCGCCCGCGTGGG
CGACACCGTGACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTATCTGAACTGGTA TCAACAGAGGAGGGGCAAGGCCCCCAAGCTCCTGATATACGACGGCA GCAAGCTGGAGAGGGGCGTTCCCGCACGCTTCAGCGGCAGGAGGTG GGGCCAGGAGTACAACCTTACAATCAACAACCTGCAGCCCGAGGACG TCGCCACCTATTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCATCGTGCCCGGCACCA
GGCTGGACCTGAAG 590 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCTCTGTGGGC
GATACCGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTAT CAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTC CAAACTGGAAAGAGGCGTGCCCTCTCGGTTCTCTGGCAGAAGATGGG GCCAAGAGTACACCCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGATATCG CCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGAC
TGGACCTGAAG 591 GACATCCAGATGACACAGAGCCCTAGCAGCCTGTCTGCCAGCGTGGG
AGATACCGCCACAATTACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTA TCAGCAGCGGAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCA GCAAGCTGGAAAGAGGCGTGCCCAGCAGATTCAGCGGCAGAAGATGG GGCCAAGAGTACACCCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGATATT GCCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGA
CTGGACCTGAAG 592 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCTCTGTGGGC
GACAGAGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTAT CAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTC CAAACTGGAAAGAGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTAGATGGG GCCAAGAGTACACCCTGACCATCTCTAGCCTGCAGCCTGAGGATATCG CCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGAC
TGGACCTGAAG 593 GACATCCAGATGACACAGAGCCCTAGCAGCCTGTCTGCCTCTGTGGG
CGATAGAGCCACAATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTA TCAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCA GCAAACTGGAAAGAGGCGTGCCAAGCAGATTCAGCGGCTCTAGATGG GGCCAAGAGTACACCCTGACCATCTCTAGCCTGCAGCCTGAGGATATC GCCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGA CTGGACCTGAAA
TABELA XIII – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO REGIÕES VARIÁVEIS DA CADEIA LEVE (VL) SEQ ID Sequência de polinucleotídeos codificando VL NO: 594 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCAGAGTGGGC
GATACCGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTAT CAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTC CAAACTGGAAAGAGGCGTGCCCGCTAGATTCTCCGGCAGAAGATGGG GCCAAGAGTACACCCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGACGTG GCCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCATCGTGCCCGGCACCAGA
CTGGACCTGAAG 595 GATATTCAGATGACACAGAGCCCCAGTAGCCTGAGCGCCCGCGTGGG
CGACACCGCGACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTATCTGAACTGGTA TCAACAGAGGAGGGGCAAGGCCCCCAAGCTCCTGATATACGACGGCA GCAAGCTGGAGAGGGGCGTTCCCGCACGCTTCAGCGGCAGGAGGTG GGGCCAGGAGTACACCCTTACAATCAACAACCTGCAGCCCGAGGACG TCGCCACCTATTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCATCGTGCCCGGCACCA GGCTGGACCTGAAG TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: 596 CAGGTGCAGTTGTTGCAGTCTGGCGCCGCTGTTACAAAGCCTGGCGCT
TCTGTTAGAGTGTCCTGCGAGGCCTCCGGCTACAACATCAGAGACTACT TCATCCACTGGTGGCGGCAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAATGGGTCG GATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGTTCC AGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTGGGACTTCGACACCT TCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCCTGAGATCCGACGATACCGCCG TGTACTTCTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGATGTGTG GGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGACC CTCTGTGTTCCCTCTGGCTCCTTCCAGCAAGTCTACCTCTGGTGGAACC GCTGCTCTGGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTTCCTGAGCCTGTGACA GTGTCCTGGAACTCTGGTGCTCTGACCTCCGGCGTGCACACATTTCCA GCTGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCTCTGTCCTCTGTCGTGACC GTGCCTTCTAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACC ACAAGCCTTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGTCCT GCGACAAGACCCACACCTGTCCTCCATGTCCTGCTCCAGAACTGCTGG CTGGCCCCGATGTCTTTCTGTTCCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGAT GATCTCTCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCTCA CGAGGATCCCGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGT TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC) SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: GCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACTCCACCTA CAGAGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGG CAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCTCTGCCTGA GGAAAAGACCATCTCTAAGGCTAAGGGCCAGCCTCGCGAGCCTCAGGT TTACACACTGCCTCCATCTCGGGAAGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCA CTGACCTGCCTCGTGAAGGGCTTCTACCCTTCCGATATCGCCGTGGAAT GGGAGTCCAATGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACAACCCCTCCTG TGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTCCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGA CAAGTCTCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCTTGTAGTGTGCTGCA CGAGGCCCTGCACTCCCACTATACCCAGAAGTCTCTGTCTCTGAGCCC
CGGCAAA 597 CAGGTGCAGCTGCTGCAGTCTGGCGCCGCTGTGACAAAACCAGGCGCT
TCTGTGCGGGTGTCCTGCGAGGCCAGCGGCTACAACATCCGGGACTAC TTCATTCACTGGTGGCGCCAGGCCCCTGGACAGGGACTGCAGTGGGTG GGATGGATCAACCCCAAGACCGGCCAGCCCAACAACCCCAGACAGTTC CAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCAGCTGGGACTTCGACACC TTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCCTGCGGAGCGACGATACCGCC GTGTACTTCTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGACGTG TGGGGCAGCGGCACCCAAGTGACCGTGTCATCTGCTAGCACCAAGGG CCCCAGCGTGTTCCCTCTGGCCCCTAGCAGCAAGAGCACATCTGGCGG AACAGCCGCCCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTTCCCGAGCCCGT GACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCTCTGACAAGCGGCGTGCACACCTT TCCAGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACTCTCTGAGCAGCGTCGT GACAGTGCCCAGCAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGT GAACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAA GAGCTGCGACAAGACCCACACCTGTCCCCCTTGTCCTGCCCCCGAACT GCTGGCTGGCCCTGACGTGTTCCTGTTCCCCCCAAAGCCCAAGGACAC CCTGATGATCAGCCGGACCCCCGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGT GTCCCACGAGGACCCTGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGT GGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACAG CACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACAGTGCTGCACCAGGACTGGCT GAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCCCT GCCCGAGGAAAAGACCATCTCTAAGGCCAAGGGACAGCCCCGCGAGC CCCAGGTGTACACACTGCCTCCAAGCCGGGAAGAGATGACCAAGAACC AGGTGTCCCTGACCTGTCTCGTGAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATTG CCGTGGAATGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCA TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC) SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: CCCCCCCTGTGCTGGACAGCGACGGCTCATTCTTCCTGTACAGCAAGC TGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGTA GCGTGTTGCATGAGGCTCTGCACAGCCACTACACGCAGAAGAGCCTCT
CCCTGTCTCCGGGTAAA 598 CAGGTGCAGTTGTTGCAGTCTGGCGCCGCTGTTACAAAGCCTGGCGCT
TCTGTTAGAGTGTCCTGCGAGGCCTCCGGCTACAACATCAGAGACTACT TCATCCACTGGTGGCGGCAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAATGGGTCG GATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGTTCC AGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTTCGACTTCGACACCT TCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCCTGAGATCCGACGATACCGCCG TGTACTTCTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGACTTCGATGTGT GGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGAC CCTCTGTGTTCCCTCTGGCTCCTTCCAGCAAGTCTACCTCTGGTGGAAC CGCTGCTCTGGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTTCCTGAGCCTGTGAC AGTGTCCTGGAACTCTGGTGCTCTGACCTCCGGCGTGCACACATTTCCA GCTGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCTCTGTCCTCTGTCGTGACC GTGCCTTCTAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACC ACAAGCCTTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGTCCT GCGACAAGACCCACACCTGTCCTCCATGTCCTGCTCCAGAACTGCTGG CTGGCCCCGATGTCTTTCTGTTCCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGAT GATCTCTCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCTCA CGAGGATCCCGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGT GCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACTCCACCTA CAGAGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGG CAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCTCTGCCTGA GGAAAAGACCATCTCTAAGGCTAAGGGCCAGCCTCGCGAGCCTCAGGT TTACACACTGCCTCCATCTCGGGAAGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCA CTGACCTGCCTCGTGAAGGGCTTCTACCCTTCCGATATCGCCGTGGAAT GGGAGTCCAATGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACAACCCCTCCTG TGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTCCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGA CAAGTCTCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCTTGTAGTGTGCTGCA CGAGGCCCTGCACTCCCACTATACCCAGAAGTCTCTGTCTCTGAGCCC CGGCAAA TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: 599 CAGGTGCAGCTGCTGCAGTCTGGCGCCGCTGTGACAAAACCAGGCGCT
TCTGTGCGGGTGTCCTGCGAGGCCAGCGGCTACAACATCCGGGACTAC TTCATTCACTGGTGGCGCCAGGCCCCTGGACAGGGACTGCAGTGGGTG GGATGGATCAACCCCAAGACCGGCCAGCCCAACAACCCCAGACAGTTC CAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCAGCTTCGACTTCGACACC TTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCCTGCGGAGCGACGATACCGCC GTGTACTTCTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGACGTG TGGGGCAGCGGCACCCAAGTGACCGTGTCATCTGCTAGCACCAAGGG CCCCAGCGTGTTCCCTCTGGCCCCTAGCAGCAAGAGCACATCTGGCGG AACAGCCGCCCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTTCCCGAGCCCGT GACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCTCTGACAAGCGGCGTGCACACCTT TCCAGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACTCTCTGAGCAGCGTCGT GACAGTGCCCAGCAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGT GAACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAA GAGCTGCGACAAGACCCACACCTGTCCCCCTTGTCCTGCCCCCGAACT GCTGGCTGGCCCTGACGTGTTCCTGTTCCCCCCAAAGCCCAAGGACAC CCTGATGATCAGCCGGACCCCCGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGT GTCCCACGAGGACCCTGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGT GGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACAG CACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACAGTGCTGCACCAGGACTGGCT GAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCCCT GCCCGAGGAAAAGACCATCTCTAAGGCCAAGGGACAGCCCCGCGAGC CCCAGGTGTACACACTGCCTCCAAGCCGGGAAGAGATGACCAAGAACC AGGTGTCCCTGACCTGTCTCGTGAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATTG CCGTGGAATGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCA CCCCCCCTGTGCTGGACAGCGACGGCTCATTCTTCCTGTACAGCAAGC TGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGTA GCGTGTTGCATGAGGCTCTGCACAGCCACTACACGCAGAAGAGCCTCT
CCCTGTCTCCGGGTAAA 600 CAGGTCCACTTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTGACAAAGCCTGGCGCT
TCTGTCAGAGTGTCTTGCGAGGCCTCTGGCTACAAGATCCGGGACCAC TTTATCCACTGGTGGCGACAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAGTGGGTC GGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGTTC CAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTGGGACTTCGACACC TTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACCGCT ATCTACTTTTGCGCCAGACAGAGATCCGACTACTGGGATTTCGATGTGT TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC) SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: GGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGAC CCTCTGTGTTCCCTCTGGCTCCTTCCAGCAAGTCTACCTCTGGTGGAAC CGCTGCTCTGGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTTCCTGAGCCTGTGAC AGTGTCCTGGAACTCTGGTGCTCTGACCTCCGGCGTGCACACATTTCCA GCTGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCTCTGTCCTCTGTCGTGACC GTGCCTTCTAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACC ACAAGCCTTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGTCCT GCGACAAGACCCACACCTGTCCTCCATGTCCTGCTCCAGAACTGCTGG CTGGCCCCGATGTCTTTCTGTTCCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGAT GATCTCTCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCTCA CGAGGATCCCGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGT GCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACTCCACCTA CAGAGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGG CAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCTCTGCCTGA GGAAAAGACCATCTCTAAGGCTAAGGGCCAGCCTCGCGAGCCTCAGGT TTACACACTGCCTCCATCTCGGGAAGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCA CTGACCTGCCTCGTGAAGGGCTTCTACCCTTCCGATATCGCCGTGGAAT GGGAGTCCAATGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACAACCCCTCCTG TGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTCCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGA CAAGTCTCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCTTGTAGTGTGCTGCA CGAGGCCCTGCACTCCCACTATACCCAGAAGTCCCTGTCTCTGTCCCCT
GGCAAA 601 CAGGTCCACCTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTTACAAAACCAGGCGCC
TCTGTTAGAGTGTCTTGCGAGGCCAGCGGCTACAAGATCAGGGACCAC TTTATTCACTGGTGGCGCCAGGCTCCAGGACAGGGACTTCAATGGGTC GGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCCAGACAGTTC CAGGGCAGAGTGTCTCTGACAAGACACGCCAGCTGGGACTTCGACACC TTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACCGCC ATCTATTTTTGCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGATGTGT GGGGCAGCGGCACCCAAGTGACAGTCTCTTCTGCTAGCACCAAGGGCC CCAGCGTGTTCCCTCTGGCCCCTAGCAGCAAGAGCACATCTGGCGGAA CAGCCGCCCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTTCCCGAGCCCGTGA CCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCTCTGACAAGCGGCGTGCACACCTTTC CAGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACTCTCTGAGCAGCGTCGTGA CAGTGCCCAGCAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGA ACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGA TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC) SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: GCTGCGACAAGACCCACACCTGTCCCCCTTGTCCTGCCCCCGAACTGC TGGCTGGCCCTGACGTGTTCCTGTTCCCCCCAAAGCCCAAGGACACCC TGATGATCAGCCGGACCCCCGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGT CCCACGAGGACCCTGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGG AAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACAGCA CCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACAGTGCTGCACCAGGACTGGCTGA ACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCCCTGC CCGAGGAAAAGACCATCTCTAAGGCCAAGGGACAGCCCCGCGAGCCC CAGGTGTACACACTGCCTCCAAGCCGGGAAGAGATGACCAAGAACCAG GTGTCCCTGACCTGTCTCGTGAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATTGCC GTGGAATGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACC CCCCCTGTGCTGGACAGCGACGGCTCATTCTTCCTGTACAGCAAGCTG ACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGTAGC GTGTTGCATGAGGCTCTGCACAGCCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCC
CTGTCTCCGGGTAAA 602 CAGGTCCACTTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTGACAAAGCCTGGCGCT
TCTGTCAGAGTGTCTTGCGAGGCCTCTGGCTACAAGATCCGGGACCAC TTTATCCACTGGTGGCGACAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAGTGGGTC GGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGTTC CAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTTCGACTTCGACACC TTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACCGCT ATCTACTTTTGCGCCAGACAGAGATCCGACTACTGGGACTTCGATGTGT GGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGAC CCTCTGTGTTCCCTCTGGCTCCTTCCAGCAAGTCTACCTCTGGTGGAAC CGCTGCTCTGGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTTCCTGAGCCTGTGAC AGTGTCCTGGAACTCTGGTGCTCTGACCTCCGGCGTGCACACATTTCCA GCTGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCTCTGTCCTCTGTCGTGACC GTGCCTTCTAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACC ACAAGCCTTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGTCCT GCGACAAGACCCACACCTGTCCTCCATGTCCTGCTCCAGAACTGCTGG CTGGCCCCGATGTCTTTCTGTTCCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGAT GATCTCTCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCTCA CGAGGATCCCGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGT GCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACTCCACCTA CAGAGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGG CAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCTCTGCCTGA TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC) SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: GGAAAAGACCATCTCTAAGGCTAAGGGCCAGCCTCGCGAGCCTCAGGT TTACACACTGCCTCCATCTCGGGAAGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCA CTGACCTGCCTCGTGAAGGGCTTCTACCCTTCCGATATCGCCGTGGAAT GGGAGTCCAATGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACAACCCCTCCTG TGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTCCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGA CAAGTCTCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCTTGTAGTGTGCTGCA CGAGGCCCTGCACTCCCACTATACCCAGAAGTCCCTGTCTCTGTCCCCT
GGCAAA 603 CAGGTCCACCTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTTACAAAACCAGGCGCCTC
TGTTAGAGTGTCTTGCGAGGCCAGCGGCTACAAGATCAGGGACCACTTTA TTCACTGGTGGCGCCAGGCTCCAGGACAGGGACTTCAATGGGTCGGATG GATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCCAGACAGTTCCAGGGC AGAGTGTCTCTGACAAGACACGCCAGCTTCGACTTCGACACCTTCAGCTT CTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACCGCCATCTATTTTT GCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGATGTGTGGGGCAGCGG CACCCAAGTGACAGTCTCTTCTGCTAGCACCAAGGGCCCCAGCGTGTTCC CTCTGGCCCCTAGCAGCAAGAGCACATCTGGCGGAACAGCCGCCCTGGG CTGCCTCGTGAAGGACTACTTTCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACT CTGGCGCTCTGACAAGCGGCGTGCACACCTTTCCAGCCGTGCTGCAGAG CAGCGGCCTGTACTCTCTGAGCAGCGTCGTGACAGTGCCCAGCAGCTCT CTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCAGCAACAC CAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGAGCTGCGACAAGACCCACACC TGTCCCCCTTGTCCTGCCCCCGAACTGCTGGCTGGCCCTGACGTGTTCCT GTTCCCCCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGGACCCCCGAA GTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCCCACGAGGACCCTGAAGTGAAGT TCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCC TAGAGAGGAACAGTACAACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACA GTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGT CCAACAAGGCCCTGCCCCTGCCCGAGGAAAAGACCATCTCTAAGGCCAA GGGACAGCCCCGCGAGCCCCAGGTGTACACACTGCCTCCAAGCCGGGA AGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTCGTGAAAGGCTTCT ACCCCAGCGACATTGCCGTGGAATGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAA CAACTACAAGACCACCCCCCCTGTGCTGGACAGCGACGGCTCATTCTTCC TGTACAGCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGT GTTCAGCTGTAGCGTGTTGCATGAGGCTCTGCACAGCCACTACACGCAGA AGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: 604 CAGGTCCACTTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTGACAAAGCCTGGCGCT
TCTGTCAGAGTGTCTTGCGAGGCCTCCGGCTACAACATCCGGGACTAC TTTATCCACTGGTGGCGGCAGGCTCCAGGACAGGGATTGCAATGGGTC GGATGGATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCTAGACAGTTC CAGGGCAGAGTGTCCCTGACCAGACACGCCTCTTGGGACTTCGACACC TTCAGCTTCTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACCGCT ATCTACTTTTGCGCCAGACAGAGATCCGACTACTGGGATTTCGATGTGT GGGGCTCTGGCACCCAAGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGAC CCTCTGTGTTCCCTCTGGCTCCTTCCAGCAAGTCTACCTCTGGTGGAAC CGCTGCTCTGGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTTCCTGAGCCTGTGAC AGTGTCCTGGAACTCTGGTGCTCTGACCTCCGGCGTGCACACATTTCCA GCTGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCTCTGTCCTCTGTCGTGACC GTGCCTTCTAGCTCTCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACC ACAAGCCTTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGTCCT GCGACAAGACCCACACCTGTCCTCCATGTCCTGCTCCAGAACTGCTGG CTGGCCCCGATGTCTTTCTGTTCCCTCCAAAGCCTAAGGACACCCTGAT GATCTCTCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCTCA CGAGGATCCCGAAGTGAAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGT GCACAACGCCAAGACCAAGCCTAGAGAGGAACAGTACAACTCCACCTA CAGAGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGATTGGCTGAACGG CAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGTCCAACAAGGCCCTGCCTCTGCCTGA GGAAAAGACCATCTCTAAGGCTAAGGGCCAGCCTCGCGAGCCTCAGGT TTACACACTGCCTCCATCTCGGGAAGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCA CTGACCTGCCTCGTGAAGGGCTTCTACCCTTCCGATATCGCCGTGGAAT GGGAGTCCAATGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACAACCCCTCCTG TGCTGGACTCCGACGGCTCATTCTTCCTGTACTCCAAGCTGACAGTGGA CAAGTCTCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCTCTTGTAGTGTGCTGCA CGAGGCCCTGCACTCCCACTATACCCAGAAGTCCCTGTCTCTGTCCCCT
GGCAAA 605 CAGGTCCACCTGTCTCAATCTGGCGCCGCTGTTACAAAACCAGGCGCCTC
TGTTAGAGTGTCTTGCGAGGCCAGCGGCTACAACATCCGGGACTACTTTA TTCACTGGTGGCGCCAGGCTCCAGGACAGGGACTTCAATGGGTCGGATG GATCAACCCTAAGACCGGCCAGCCTAACAACCCCAGACAGTTCCAGGGC AGAGTGTCTCTGACAAGACACGCCAGCTGGGACTTCGACACCTTCAGCTT CTACATGGACCTGAAGGCCGTGCGGAGCGACGACACCGCCATCTATTTTT GCGCCAGACAGAGAAGCGACTACTGGGATTTCGATGTGTGGGGCAGCGG TABELA XIV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA PESADA (HC) SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO HC NO: CACCCAAGTGACAGTCTCTTCTGCTAGCACCAAGGGCCCCAGCGTGTTCC CTCTGGCCCCTAGCAGCAAGAGCACATCTGGCGGAACAGCCGCCCTGGG CTGCCTCGTGAAGGACTACTTTCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACT CTGGCGCTCTGACAAGCGGCGTGCACACCTTTCCAGCCGTGCTGCAGAG CAGCGGCCTGTACTCTCTGAGCAGCGTCGTGACAGTGCCCAGCAGCTCT CTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCAGCAACAC CAAGGTGGACAAGAAGGTGGAACCCAAGAGCTGCGACAAGACCCACACC TGTCCCCCTTGTCCTGCCCCCGAACTGCTGGCTGGCCCTGACGTGTTCCT GTTCCCCCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGGACCCCCGAA GTGACCTGCGTGGTGGTGGATGTGTCCCACGAGGACCCTGAAGTGAAGT TCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCC TAGAGAGGAACAGTACAACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACA GTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAGGTGT CCAACAAGGCCCTGCCCCTGCCCGAGGAAAAGACCATCTCTAAGGCCAA GGGACAGCCCCGCGAGCCCCAGGTGTACACACTGCCTCCAAGCCGGGA AGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTCGTGAAAGGCTTCT ACCCCAGCGACATTGCCGTGGAATGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAA CAACTACAAGACCACCCCCCCTGTGCTGGACAGCGACGGCTCATTCTTCC TGTACAGCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGT GTTCAGCTGTAGCGTGTTGCATGAGGCTCTGCACAGCCACTACACGCAGA AGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA TABELA XV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA LEVE (LC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO LC NO: 606 GACATCCAGATGACCCAGAGCCCTTCCTCTTTATCCGCTAGCGTCGGCGA
TACCGTGACCATCACATGCCAAGCTAACGGCTACCTCAACTGGTACCAGC AGCGGAGGGGAAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACGACGGCTCCAAGCT GGAGAGGGGAGTGCCTTCCCGGTTCAGCGGAAGGAGGTGGGGACAAGA ATACAATTTAACCATCAACAATTTACAGCCCGAGGACATCGCTACCTACTT CTGCCAAGTTTACGAGTTCGTGGTGCCCGGCACTCGTCTGGATCTGAAGA GGACCGTGGCCGCCCCCTCCGTGTTCATCTTTCCCCCTTCCGACGAGCA GCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGTGGTGTGTTTACTGAACAACTTCTACC CTCGTGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCTTTACAGTCCGG CAACTCCCAAGAATCCGTGACCGAGCAAGATAGCAAGGACTCCACCTACT CCCTCTCCAGCACTTTAACTTTATCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAG GTGTACGCTTGTGAGGTGACCCACCAAGGTCTGTCCTCCCCCGTGACAAA GTCCTTCAATCGGGGCGAGTGT TABELA XV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA LEVE (LC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO LC NO: 607 GACATCCAGATGACCCAGAGCCCTAGCAGCCTGAGCGCCAGCGTGGG
CGATACCGTGACCATTACCTGCCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTA TCAGCAGCGGAGAGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACGACGGCA GCAAGCTGGAAAGAGGCGTGCCCAGCAGATTCAGCGGCAGAAGATGG GGCCAGGAGTACAACCTGACCATCAACAACCTGCAGCCCGAGGATATC GCCACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCGTGGTGCCCGGCACACGG CTGGACCTGAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGC CATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAAC GCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGC AAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCA GACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGC
CTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT 608 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCTCTGTGGGCG
ATACCGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTATCA GCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTCCAA ACTGGAAAGAGGCGTGCCCTCTCGGTTCTCTGGCAGAAGATGGGGCCA AGAGTACAACCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGATATCGCCACA TACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCGTGGTGCCTGGCACAAGACTGGAC CTGAAGAGAACCGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCATCTG ACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCTTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACA ACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAATGCCC TGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGG ACTCTACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCTAAGGCCGACTA CGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGACTGTC
TAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACAGAGGCGAGTGT 609 GATATTCAGATGACACAGAGCCCCAGTAGCCTGAGCGCCAGCGTGGGC
GACACCGCAACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTATCTGAACTGGTAT CAACAGAGGAGGGGCAAGGCCCCCAAGCTCCTGATATACGACGGCAG CAAGCTGGAGAGGGGCGTTCCCAGCCGCTTCAGCGGCAGGAGGTGGG GCCAGGAGTACAACCTTACAATCAACAACCTGCAGCCCGAGGACATCG CCACCTATTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCGTGGTGCCCGGCACCAGGCT GGACCTGAAGCGGACCGTGGCCGCCCCCAGCGTGTTCATCTTCCCTCC CAGCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGC TGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACA ACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTGACCGAGCAGGAC TCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAG GCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCA GGGACTGTCTAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGC TABELA XV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA LEVE (LC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO LC NO: 610 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCTCTGTGGGCG
ACAGAGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTATCA GCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTCCAA ACTGGAAAGAGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTAGATGGGGCCA AGAGTACAACCTGACCATCTCCAGCCTCCAGCCTGAGGATATCGCCAC ATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGACTGGAC CTGAAGAGAACAGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCATCTG ACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCTTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACA ACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAATGCTC TCCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGG ACTCTACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCTAAGGCCGACTA CGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGACTGTC
TAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACAGAGGCGAGTGT 611 GATATTCAGATGACACAGAGCCCCAGTAGCCTGAGCGCCAGCGTGGGC
GACAGAGCAACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTATCTGAACTGGTAT CAACAGAGAAGGGGCAAGGCCCCCAAGCTCCTGATATACGACGGCAGC AAGCTGGAGAGGGGCGTTCCCAGCCGCTTCAGCGGCTCAAGGTGGGG CCAGGAGTACAACCTTACAATCTCATCCCTGCAGCCCGAGGACATCGC CACCTATTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCTTCGGACCCGGCACCAGGCTG GACCTGAAGCGGACCGTGGCCGCCCCCAGCGTGTTCATCTTCCCTCCC AGCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCT GAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAA CGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTGACCGAGCAGGACT CCAAGGACAGCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGG CCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAG
GGACTGTCTAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGC 612 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCAGAGTGGGC
GACACCGTGACAATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTAT CAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTCC AAACTGGAAAGAGGCGTGCCCGCTAGATTCTCCGGCAGAAGATGGGGC CAAGAGTACAACCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGACGTGGCC ACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCATCGTGCCCGGCACCAGACTG GACCTGAAGAGAACAGTTGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCTT CCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACAGCTTCTGTCGTGTGCCTGCTGA ACAACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAATG CCCTGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCA AGGACTCTACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCTAAGGCCGA CTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGACT GTCTAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACAGAGGCGAGTGT TABELA XV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA LEVE (LC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO LC NO: 613 GATATTCAGATGACACAGAGCCCCAGTAGCCTGAGCGCCCGCGTGGGC
GACACCGTGACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTATCTGAACTGGTAT CAACAGAGGAGGGGCAAGGCCCCCAAGCTCCTGATATACGACGGCAG CAAGCTGGAGAGGGGCGTTCCCGCACGCTTCAGCGGCAGGAGGTGGG GCCAGGAGTACAACCTTACAATCAACAACCTGCAGCCCGAGGACGTCG CCACCTATTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCATCGTGCCCGGCACCAGGCT GGACCTGAAGCGGACCGTGGCCGCCCCCAGCGTGTTCATCTTCCCTCC CAGCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGC TGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACA ACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTGACCGAGCAGGAC TCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAG GCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCA
GGGACTGTCTAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGC 614 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCTCTGTGGGCG
ATACCGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTATCA GCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTCCAA ACTGGAAAGAGGCGTGCCCTCTCGGTTCTCTGGCAGAAGATGGGGCCA AGAGTACACCCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGATATCGCCAC ATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGACTGGAC CTGAAGAGAACAGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCATCTG ACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCTTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACA ACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAATGCCC TGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGG ACTCTACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCTAAGGCCGACTA CGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGACTGTC
TAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACAGAGGCGAGTGT 615 GACATCCAGATGACACAGAGCCCTAGCAGCCTGTCTGCCAGCGTGGGA
GATACCGCCACAATTACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTATC AGCAGCGGAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCAGC AAGCTGGAAAGAGGCGTGCCCAGCAGATTCAGCGGCAGAAGATGGGG CCAAGAGTACACCCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGATATTGCC ACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGACTGG ACCTGAAGAGAACAGTGGCCGCTCCTAGCGTGTTCATCTTCCCACCTTC CGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACAGCCTCTGTCGTGTGCCTGCTGAA CAACTTCTACCCCAGAGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGC CCTGCAGAGCGGCAATAGCCAAGAGAGCGTGACCGAGCAGGACAGCA AGGACTCTACCTACTCTCTGAGCAGCACCCTGACACTGAGCAAGGCCG ACTACGAGAAGCACAAAGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCACCAGGGCC TTTCTAGCCCTGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGT TABELA XV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA LEVE (LC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO LC NO: 616 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCTCTGTGGGCG
ACAGAGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTATCA GCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTCCAA ACTGGAAAGAGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTAGATGGGGCCA AGAGTACACCCTGACCATCTCTAGCCTGCAGCCTGAGGATATCGCCAC ATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGACTGGAC CTGAAGAGAACAGTGGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCATCTG ACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCTTCTGTCGTGTGCCTGCTGAACA ACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAATGCCC TGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAAGG ACTCTACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCTAAGGCCGACTA CGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGACTGTC
TAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACAGAGGCGAGTGT 617 GACATCCAGATGACACAGAGCCCTAGCAGCCTGTCTGCCTCTGTGGGC
GATAGAGCCACAATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTAT CAGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCAGC AAACTGGAAAGAGGCGTGCCAAGCAGATTCAGCGGCTCTAGATGGGGC CAAGAGTACACCCTGACCATCTCTAGCCTGCAGCCTGAGGATATCGCC ACATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCTTCGGCCCTGGCACCAGACTGG ACCTGAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATC TGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAAT AACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCC CTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAG GACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGAC TACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTG
AGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT 618 GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCTCTGTCTGCCAGAGTGGGC
GATACCGCTACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTACCTGAACTGGTATC AGCAGAGAAGAGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGACGGCTCCA AACTGGAAAGAGGCGTGCCCGCTAGATTCTCCGGCAGAAGATGGGGCC AAGAGTACACCCTGACCATCAACAACCTGCAGCCTGAGGACGTGGCCA CATACTTTTGCCAGGTGTACGAGTTCATCGTGCCCGGCACCAGACTGG ACCTGAAGAGAACAGTTGCCGCTCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCTTC CGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACAGCTTCTGTCGTGTGCCTGCTGAA CAACTTCTACCCTCGGGAAGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAATGC CCTGCAGTCCGGCAACTCCCAAGAGTCTGTGACCGAGCAGGACTCCAA GGACTCTACCTACAGCCTGTCCTCCACACTGACCCTGTCTAAGGCCGA CTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCATCAGGGACT GTCTAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACAGAGGCGAGTGT TABELA XV – POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO A CADEIA LEVE (LC)
SEQ ID SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS CODIFICANDO LC NO: 619 GATATTCAGATGACACAGAGCCCCAGTAGCCTGAGCGCCCGCGTGGGC
GACACCGCGACCATCACCTGTCAGGCCAACGGCTATCTGAACTGGTAT CAACAGAGGAGGGGCAAGGCCCCCAAGCTCCTGATATACGACGGCAG CAAGCTGGAGAGGGGCGTTCCCGCACGCTTCAGCGGCAGGAGGTGGG GCCAGGAGTACACCCTTACAATCAACAACCTGCAGCCCGAGGACGTCG CCACCTATTTCTGCCAAGTTTACGAGTTCATCGTGCCCGGCACCAGGCT GGACCTGAAGCGGACCGTGGCCGCCCCCAGCGTGTTCATCTTCCCTCC CAGCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGC TGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACA ACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTGACCGAGCAGGAC TCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAG GCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCA
GGGACTGTCTAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGC Vetores e Células Hospedeiras
[00136] Este pedido também abrange vetores compreendendo um ácido(s) nucleico(s) descrito(s) neste pedido. Um vetor pode ser de qualquer tipo, por exemplo, um vetor recombinante tal como um vetor de expressão. Vetores incluem, porém sem limitação, plasmídeos, cosmídeos, cromossomas artificiais bacterianos (BAC) e cromossomas artificiais de leveduras (YAC) e vetores derivados de bacteriofatos ou vírus de plantas ou de animais (inclusive de seres humano). Os vetores pondem compreender uma origem de replicação reconhecida pela célula hospedeira proposta e, no caso de vetores de expressão, regiões promotoras e outras regiões reguladoras reconhecidas pela célula hospedeira. Em modalidades adicionais, um vetor compreende um polinucleotídeo codificando um anticorpo da invenção operacionalmente ligado a um promoltor e opcionalmente elementos reguladores adicionais. Determinados vetores são capazes de replicação autônoma em um hospedeiro no qual eles são introduzidos (por exemplo, vetores tendo uma origem de replicação bacteriana podem replicar-se em bactérias). Outros vetores podem ser integrados no genoma de um hospedeiro por ocasião da introdução no hospedeiro, e dessa forma são replicados junto om o genoma do hospedeiro. Vetores incluem, porém sem limitação, aqueles adequados para produção recombinante dos anticorpos descritos neste pedido.
[00137] A escolha do vetor é dependente dos procedimentos recombinantes seguidos e do hospedeiro usado. A introdução de vestores em células hospedeiras pode ser efetuada, inter alia, transfecção com fosfato de cálcio, infecção com vírus, transfecção mediada por DEAE-dextrana, transfecção com lipofectamina ou eletroporação. Os vetores podem ser de reaplicação autonôma ou podem replicar-se junto com o cromossoma no qual eles foram integrados. Em certas modalidades, os vetores contêm um ou mais marcadores selecionáveis. A escolha dos marcadores pode depender das células hospedeiras escolhidas. Estes incluem, porém sem limitação, canamicina, neomicina, puromicina, higromicina, zeocina, gene da timidina quinase do vírus do herpes simples (HSV-TK), e gene da di-hidrofolato redutase de camundongo (dhfr). Vetores compreendendo uma ou mais moléculas de ácido nucleico codificando os anticorpos descritos neste pedido, operacionalmente ligadas a uma ou mais moléculas de ácido nucleico codificando proteínas ou peptídeos que podem ser usados para isolar os anticorpos, também estão cobertas pela invenção. Essas proteínas ou peptídeos incluem, porém sem limitação, glutationa-S-transferase, proteína de ligação à maltose, poli-histidina de ligação a metais, proteína fluorescente verde, luciferase e beta-galactosidase.
[00138] Em outras modalidades, o vetor usado é pcDNA™3.1+ (ThermoFisher, MA).
[00139] A invenção também apresenta células hospedeiras compreendendo um ácido nucleico ou um vetor descrito neste pedido. Qualquer uma de uma variedade de células hospedeiras pode ser usada. Em uma modalidade, a célula hospedeira é uma célula procariótica, por exemplo, E. coli. Em uma outra modalidade, a célula hospedeira é uma célula eucariótica, por exemplo, uma célula de levedura, uma célula vegetal (por exemplo, uma célula vegetal de tabaco), ou uma célula de mamífero, tal como uma célula de ovário de hamster chinês (CHO) (por exemplo, CHO-S, ®, CHO-K1, CHO-K1a, CHO DG44, ExpiCHOTM), células COS, células BHK, células NSO ou células de melanoma de Bowes. Exemplos de células hospedeiras humanas são, inter alia, células HeLa, 911, AT1080, A549, 293 e HEK293 (por exemplo, HEK293E, HEK293T, Expi293™). Além disso, os anticorpos (por exemplo, scFv’s) podem ser expressos em uma célula de levedura tal como Pichia (vide, por exemplo, Powers et al., J Immunol Methods. 251:123-35 (2001)), Hanseula, ou Saccharomyces. A produção de anticorpos em plantas de tabaco transgênicas e células vegetais cultivadas está descrita, por exemplo, em Sacks, et al., Plant Biotechnol J. (2015) 13(8):1094-105; Klimyuk, et al., Curr Top Microbiol Immunol. (2014) 375:127-54 e Cramer, et al., Curr Top Microbiol Immunol. (1999) 240:95-118.
[00140] Em algumas modalidades, a célula hospedeira sialila predominantemente sítios de N-glicosilação ligados com as regiões variáveis de um domínio de ligação a antígenos de imunoglobulina. Em algumas modalidades, os polinucleotídeos codificando um anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são expressos em uma célula hospedeira que sialila pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, ou mais, sítios de N-glicosilação ligados nos domínios variáveis (Fv, particularmente VL) de anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos expressos do mesmo.
Em algumas modalidades, a célula sialila pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, ou mais, Sítios de N- glicosilação ligados em uma VL de anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos expressos.
Em algumas modalidades, os sítios de N-glicosilação ligados em uma VL têm uma ocupação de ácido siálico (por exemplo, um glicano compreendendo um ou dois resíduos ácido siálico terminais) de pelo menos 40%, pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, ou mais.
Conforme usado neste pedido, "occupação" refere-se à percentagem do tempo em que um glicano é preso a um sítio de glicosilação de aminoácido previsto.
Em algumas modalidades, a asparagina na posição aminoacídica 72 da VL de acordo com a numeração de Kabat (N72) é sialilada.
Em algumas modalidades, os sítios de N-glicosilação ligados sialilados em uma VL compreendem de 1 a 5 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 4 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 3 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 2 resíduos ácido siálico.
Células hospedeiras humanas e de hamster sialilam predominantemente com ácido N-acetilneuramínico (NANA). Em algumas modalidades, as VLs são sialiladas ou predominantemente sialiladas com ácido N-acetilneuramínico (NANA). Células hospedeiras de camundongo sialilam predominantemente com ácido N-glicolilneuramínico (NGNA). Em algumas modalidades, as VLs são sialiladas ou predominantemente sialiladas com ácido N- acetilneuramínico (NGNA). Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas biantenárias.
Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas complexas de N-glicano ligado (por exemplo, podem conter praticamente qualquer número dos outros tipos de sacarídeos,
inclusive mais do que as duas N-acetilglucosaminas originais). Em algumas modalidades, os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas híbridas de N-glicano ligado (por exemplo, podem conter resíduos manose em um lado da ramificação, enquanto que o outo lado, uma N-acetilglucosamina, inicia uma ramificação complexa).
[00141] O termo "molécula de ácido nucleico" refere-se a uma forma polimérica de nucleotídeos e inclui tanto cordões sense quanto cordões anti-sense de RNA, cDNA, DNA genômico, e formas sintéticas e polímeros mistos dos acima. Conforme usado neste pedido, o termo molécula de ácido nucleico pode ser intercambiável com o termo polinucleotídeo. Em algumas modalidades, um nucleotídeo refere-se a um ribonucleotídeo, desoxinucleotídeo ou a uma modificada de qualquer um dos tipos de nucleotídeo, e combinações dos mesmos. Os termos também incluem, porém sem limitação, formas de cordão simples e de cordão duplo de DNA. Além disso, um polinucleotídeo, por exemplo, um cDNA ou mRNA, pode incluir um ou ambos os nucleotídeos de ocorrência natural e modificados ligados um ao outro por ligações nucleotídicas de ocorrência natural e/ou de ocorrência não natural. As moléculas de ácido nucleico podem ser modificadas quimicamente ou bioquimicamente ou podem conter bases nucleotídicas não naturais ou derivatizdas, como será percebido pelos especialistas na técnica. Tais modificações incluem, por exemplo, marcadores, metilação, substituição de um ou mais dos nucleotídeos de ocorrência natural por um análogo, modificações internucleotídicas tais como ligações não carregadas (por exemplo, metil fosfonatos, fosfotriésteres, fosforamidatos, carbamatos, etc.), ligações carregadas (por exemplo, fosforotioatos, fosforoditionatos, etc.), porções pendentes (por exemplo, polipeptídios), intercaladores (por exemplo, acridina, psoraleno, etc.), quelantes, alquilantes, e ligações modificadas (por exemplo, ácidos nucleicos alfa anoméricos, etc.).
Também se entende que o termo acima inclui qualquer conformação topológica, incluindo conformações de cordão simples, de cordão duplo, parcialmente duplexadas, triplex, tipo grampo de cabelo, circulares e encadeadas. Uma referência a uma sequência de ácidos nucleicos abrange seu complemento, a menos que especificado em contrário. Assim, uma menção a uma molécula de ácido nucleico tendo uma sequência particular deve ser entendida como abrangendo seu cordão complementar, com sua sequência de complementaridade. O termo também inclui ácidos nucleicos códon-otimizados.
[00142] O termo "operacionalmente ligado" refere-se a dois ou mais elementos da sequência de ácidos nucleicos que normalmente estão fisicamente ligados e estão em uma relação funcional um com outro. Por exemplo, um promotor está operacionalmente ligado a uma sequência codificadora se o promotor também for capaz de iniciar ou regular a transcrição ou a expressão de uma sequência codificadora, em cujo ncaso, a sequência codificadora deve ser entendida como estando "sob o controle" do promotor.
[00143] Uma "substituição", conforme usado neste pedido, denota a substituição de um ou mais aminoácidos ou nucleotídeos por aminoácidos ou nucleotídeos diferentes, respectivamente.
[00144] Um ácido nucleico "isolado" refere-se a uma molécula de ácido nucleico que fora separada de um componente do seu ambiente natural. Um ácido nucleico isolado inclui uma molécula de ácido nucleico contida em células que normalmente contêm a molécula de ácido nucleico, mas a molécula de ácido nucleico está presente extracromossomicamente ou em uma localização cromossômica que é diferente de sua localização cromossômica natural. "Ácido nucleico isolado codificando um anticorpo ou fragmento do mesmo" refere-se a uma ou mais moléculas de ácido nucleico codificando a cadeia pesada e a cadeia leve do anticorpo (ou fragmentos do mesmo), incluindo tais moléculas de ácido nucleico em um único vetor ou em vetores separados, e tais moléculas de ácido nucleico presentes em um ou mais locais em uma célula hospedeira.
[00145] O termo "vetor", conforme usado neste pedido, refere-se a uma molécula de ácido nucleico capaz de propagar um outro ácido nucleico ao qual ela está ligada. O termo inclui o vetor como uma estrutura de ácido nucleico autorreplicante assim como o vetor incorporado no gemona de uma célula hospedeira na qual ele fora introduzido. Alguns vetores são adequados para distribuir a molécula de ácido nucleico ou o polinucleotídeo do presente pedido. Certos vetores são capazes de direcionar a expressão de ácidos nucleicos aos quais eles estão operacionalmente ligados. Tais vetores são chamados neste pedido de vetores de expressão.
[00146] Os termos "célula hospedeira", "linhagem de célula hospedeira", e "cultura de célula hospedeira" são usados intercam- biavelmente e referem-se a células nas quais um ácido nucleico exógeno fora introduzido, incluindo a progênie de tais células. Células hospedeiras incluem "transformantes" e "células transformadas", que incluem a célula transformada primária e a progênie derivada da mesma independente do número de passagens. A progênie pode ser completamente idêntica em termos de teor de ácido nucleico às células parentais, mas podem conter mutações. As progênies mutantes que têm a mesma função ou atividade biológica que aquela encontrada ou selecionada na célula originalmente transformada estão incluídas neste pedido.
[00147] Uma polinucleotídeo "variante", conforme usado neste pedido, é um polinucleotídeo que tipicamente difere de um polinucle- otídeo especificamente descrito neste pedido em uma ou mais substituições, deleções, adições e/ou inserções. Tais variantes podem ser de ocorrência natural ou podem ser geradas sinteticamente, por exemplo, por modificação de uma ou mais das sequências de polinucleotídeos da invenção e avaliação de uma ou mais atividades biológicas do polipeptídio codificado descrito neste pedido e/ou usando qualquer uma de inúmeras técnicas bastante conhecidas na literatura.
[00148] O termo "variante" também pode se referir a qualquer molécula de ocorrência natural ou geneticamente modificada compre- endendo um ou mais mutações nucleotídicas ou aminoacídicas.
[00149] É ainda apresentado um receptor de antígeno quimérico (CAR) incluindo um fragmento de ligação a antígenos de um anticorpo descrito neste pedido. Em certas modalidades, o CAR é expresso em uma célula T ou em uma célula NK. É ainda apresentada uma célula T CAR incluindo um CAR descrito neste pedido. Em certas modalidades, a célula T é uma célula T CD4+, uma célula T CD8+, ou uma combinação das mesmas. Em certas modalidades, a célula é administrada a um indivíduo. Em certas modalidades, a célula é autóloga. Em certas modalidades, a célula é alogênica. Métodos de Produção de Anticorpos
[00150] Anticorpos monoespecíficos que se ligam à gp120 e anticorpos biespecíficos que se ligam à gp120 e à CD3 humana (por exemplo, CD3ε humana ou CD3δ humana) ou à gp120 e à CD89 podem ser produzidos por qualquer método conhecido na literatura para a síntese de anticorpos, por exemplo, por síntese química ou por técnicas de expressão recombinante.
[00151] Métodos para fazer anticorpos monoespecíficos são bastante conhecidos na literatura. Métodos para fazer anticorpos biespecíficos estão descritos, por exemplo, nas Patentes US N° 5,731,168; 5,807,706; 5,821,333; e nas Publicações de Pedido de Patente N° 2003/020734 e 2002/0155537. Anticorpos tetravalentes biespecíficos, e métodos para fazer os mesmos estão descritos, por exemplo, nos documentos WO 02/096948 e WO 00/44788, cujas íntegras encontram-se aqui incorporada a título de referência. Além disso, outras publicações referentes a confecção de anticorpos biespecíficos incluem os documentos WO 91/00360, WO 92/08802, WO92/05793, e WO 93/17715; Tutt et al., J. Immunol. 147:60-69 (1991); Patentes US N° 4,474,893; 4,714,681; 4,925,648; 5,573,920; 5,601,819 e 9,212,230; e Kostelny et al., J. Immunol. 148:1547-1553 (1992).
[00152] Um outro método exemplificativo para produzir anticorpos biespecíficos é a tenologia "knobs-into-holes" (Ridgway et al., Protein Eng., 9:617-621 (1996); WO 2006/028936). O problema de malpareamento das cadeias pesadas da Ig que é um obstáculo importante para a produção de anticorpos biespecídicos é reduzido nesta tecnologia por meio da mutação de aminoácidos seletos formando a interface dos domínios CH3 na IgG. Em posições no domínio CH3 nas quais duas cadeias pesadas interagem diretamente, um aminoácido com uma cadeia lateral pequena (hole) é introduzido na sequência de uma cadeia pesada e um aminoácido com uma cadeia lateral grande (knob) é introduzido no local no resíduo interatuante correspondente na outra cadeia pesada. Em alguns casos, os anticorpos da invenção possuem cadeias de imunoglobulina nas quais os domínios CH3 foram modificados por mutação de aminoácidos seletos que interagem na interface entre dois polipeptídios de modo a formar preferivelmente um anticorpo biespecífico. Os anticorpos biespecíficos podem ser compostos de cadeias de imunoglobulina da mesma subclasse ou de subclasses diferentes. Em um exemplo, um anticorpo biespecífico que se liga à gp120 e CD3 compreende uma mutação T366W (numeração EU) na "cadeia de knobs" e mutações T366S, L368A, Y407V (numeração EU) na "cadeia de holes". Em certas modalidades, uma ponte dissulfeto adicional intercadeias é introduzida entre os domínios CH3 por, por exemplo, introdução de uma mutação Y349C na "cadeia de knobs" e uma mutação E356C ou uma mutação S354C na "cadeia de holes". Em certas modalidades, mutações R409D, K370E são introduzidas na na "cadeia de knobs" e mutações D399K, E357K na "cadeia de holes". Em outras modalidades, mutações Y349C, T366W são introduzidas em uma das cadeias e mutações E356C, T366S, L368A, Y407V na cadeia correspondente. Em algumas modalidades, mutações Y349C, T366W são introduzidas em uma das cadeias e mutações S354C, T366S, L368A, Y407V na cadeia correspondente. Em algumas modalidades, mutações Y349C, T366W são introduzidas em uma das cadeias e mutações S354C, T366S, L368A, Y407V na cadeia correspondente. Em ainda outras modalidades, Y349C, T366W mutations são introduzidas em uma das cadeias e mutações S354C, T366S, L368A, Y407V cadeia correspondente (todas numerações EU).
[00153] Um outro método exemplificativo para a produção de anticorpos biespecíficos é através do uso da plataforma de Engajadores Biespecíficos de Células T (BiTEs®). BiTEs são feitos pela fusão genética de um primeiro scFv (por exemplo, um scFv que se liga à gp120) a um segundo scFv (por exemplo, um scFv que se ligaa à CD3 humana) via um ligando peptídico flexível (por exemplo, GGGGS (SEQ ID NO: 429)). Vide, por exemplo, Staerz et al., Nature, 314:628-631 (1985); Mack et al., PNAS, 92:7021-7025 (1995); Huehls et al., Immunol. Cell Biol., 93:290-296 (2015).
[00154] Um outro método exemplificativo para a produção de anticorpos biespecíficos é através do uso da plataforma de Redirecionamento de Dupla Afinidde (DART). Esta tecnologia baseia- se no formato de diacorpo de Holliger et al. (PNAS, 90:6444-6448 (1993)) e melhorou ainda mais a estabilidade e o pareamento ótima das cadeias VH e VL (Johnson et al., J Mol. Biol., 399:436-449 (2010); Sung et al., J Clin Invest., 125(11): 4077-4090 (2015)).
[00155] Ainda um outro método exemplificativo para a produção de anticorpos biespecíficos é através do uso da plataforma de Anticorpos Híbridos Trifuncionais - Triomab®. Esta plataforma emprega uma construção quimérica constituída da metade de dois anticorpos de comprimento inteiro de isótipos diferentes, IgG2a de camundongo e IgG2b de rato. Esta tecnologia conta com associações de pareamento das cadeias pesada/leve preferenciais para a espécie. Vide Lindhofer et al., J Immunol., 155:219-225 (1995).
[00156] Um outro método exemplificativo para a produção de anticorpos biespecíficos é através do uso da plataforma TandAb®. Esta tecnologia baseia-se no conceito de diacorpo, mas é desenhada como uma cadeia polipeptídica única VH1-VL2-VH2-VL1 compre- endendo ligantes curtos para prevenir o pareamento intracadeias. A dimerização da cabeça para a cauda desta cadeia única resulta na formação de um homodímero tetravalente (Kipriyanov et al., J Mol. Biol., 293:41-56 (1999)).
[00157] Ainda um outro método para produzir anticorpos biespecíficos é através da tecnologia CrossMab. CrossMab são anticorpos quiméricos constituídos das metades de dois anticorpos de comprimento inteiro. Para o pareamento correto das cadeias, ele combina duas tecnologias: (i) a knob-into-hole que favorece um pareamento correto entre as duas cadeias pesadas; e (ii) uma permuta entre a cadeia pesada e a cadeia leve de um dos dois Fabs para introduzir uma assimetria que evita o malpareamento da cadeia leve. Vide Ridgway et al., Protein Eng., 9:617-621 (1996); Schaefer et al., PNAS, 108:11187-11192 (2011). CrossMabs pode combinar dois ou mais domínios de ligação a antígenos para visar dois ou mais alvos ou para introduzir bivalência em um alvo tal como o formato 2:1.
[00158] Os anticorpos desta invenção podem ser produzidos em células bacterianas ou eucarióticas. Os anticorpos também podem ser produzidos em células eucarióticas tais como linhagens de células transformadas (por exemplo, linhagens de células baseadas em CHO ou linhagens de células de CHO-origem (por exemplo, CHO-S, CHO DG44, ExpiCHOTM, linhagem de células GS-/- CHO modificadas com CHOZN® ZFN, CHO-K1, CHO-K1a), 293E, 293T, COS, NIH3T3). Além disso, os anticorpos (incluindo fragmentos dos anticorpos, por exemplo, Fabs, scFv’s) podem ser expressos em uma célula de levedura tal como Pichia (vide, por exemplo, Powers et al., J Immunol Methods. 251:123-35 (2001)), Hanseula, ou Saccharomyces. Em uma modalidade, os anticorpos descritos neste pedido são produzidos em uma linhagem de células CHO cell line, por exemplo, uma linhagem de células CHO-S, CHO DG44, ExpiCHOTM, CHOZN®, CHO-K1 ou CHO-K1a. Para produzir o anticorpo de interesse, um polinucleotídeo codificando o anticorpo é construído, introduzido em um vetor de expressão, e em seguida expresso em células hospedeiras adequadas. Técnicas tradicionais da biologia molecular são usadas para preparar o vetor de expressão recombinante, transfectar as células hospedeiras, selecionar os transformantes, cultivar as células hospedeiras, e recuperar o anticorpo.
[00159] Se o anticorpo for para ser expresso em células bacterianas (por exemplo, E. coli), o vetor de expressão deve ter características que permitam a amplificação do vetor nas células bacterianas. Adicionalmente, quando E. coli tal como JM109, DH5α, HB101, ou XL1-Blue é usada como hospedeiro, o vetor deve ter um promotor, por exemplo, um promotor lacZ (Ward et al., 341:544-546 (1989), um promotor araB (Better et al., Science, 240:1041-1043 (1988)), ou um promotor T7 que possa permitir a expressão eficiente em E. coli. Exemplos de tais vetores incluem, por exemplo, vetores da série M13, vetores da série pUC, pBR322, pBluescript, pCR-Script, pGEX-5X-1 (Pharmacia), "sistema QIAexpress" (QIAGEN), pEGFP, e pET (quando este vetor de expressão é usado, o hospedeiro é de preferência BL21 expressando T7 RNA polimerase). O vetor de expressão pode conter uma sequência sinal para secreção o anticorpo. Para produção no periplasma de E. coli, a sequência sinal pelB (Lei et al., J. Bacteriol., 169:4379 (1987)) pode ser usada como a sequência sinal para a secreção do ácido nucleico heterólogo. Para expressão bacteriana, métodos de lcoreto de cálcio ou métods de eletroporação podem ser usados para introduzir o vetor de expressão na célula bacteriana.
[00160] Se o anticorpo for para ser expresso em células animais tais como células CHO, CHO-S, CHO DG44, CHOZN®, ExpiCHOTM, CHO-K1, CHO-K1a, COS, e NIH3T3, o vetor de expressão inclui um promotor necessário para expressão nessas células, por exemplo, um promotor SV40 (Mulligan et al., Nature, 277:108 (1979)), um promotor MMLV-LTR, um promotor EF1α (Mizushima et al., Nucleic Acids Res., 18:5322 (1990)), ou um promotor CMV. Além da sequência de ácidos nucleicos codificando a imunoglobulina ou o domínio da mesma, os vetores de expressão recombinantes podem carregar sequências adicionais, tais como sequências que regulam a replicação do vetor em células hospedeiras (por exemplo, origens de replicação) e genes de marcadores selecionávies. O gene de marcador selecionável facilita a seleção das células hospedeiras nas quais o vetor fora introduzido (vide, por exemplo, Patentes US N° 4,399,216, 4,634,665 e 5,179,017). Por exemplo, tipicamente o gene de marcador selecionável confere resistência a fármacos, tais como G418, higromicina, ou metotrexato em uma célula hospedeira na qual o vetor fora introduzido. Exemplos de vetores com marcadores selecionáveis incluem pMAM, pDR2, pBK-RSV, pBK-CMV, pOPRSV, e pOP13.
[00161] Em uma modalidade, os anticorpos são produzidos em células de mamífero. Células de mamífero hospedeiras exemplificativas para expressar um anticorpo incluem células de ovário de hamster chinês (células CHO, incluindo, por exemplo, células CHO- S, CHO DG44, ExpiCHOTM, CHOZN®, CHO-K1 ou CHO-K1a) (incluindo células dhfr– CHO, descritas em Urlaub and Chasin (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220, usadas com um marcador selecionável DHFR, por exemplo, como descrito em Kaufman e Sharp (1982) Mol. Biol. 159:601-621), células 293 de rim embrionário humano (por exemplo, 293, 293E, 293T), células COS, células NIH3T3, células B humanas, linhagens de células linfocíticas, por exemplo, células NS0 de mieloma e células SP2, e uma célula de um animal transgênico, por exemplo, um mamífero transgênico. Por exemplo, em algumas modalidades, a célula é uma célula epitelial mamária.
[00162] Em um sistema exemplificativo para expressão de anticorpos, vetores de expressão recombinantes codificando a cadeia pesada do anticorpo e a cadeia leve do anticorpo de um anticorpo desta in são introduzidos em células dhfr– CHO por transfecção mediada por fosfato de cálcio. Em uma modalidade específica, as células dhfr– CHO são células da linhagem de células DG44, tal como DG44i (vide, por exemplo, Derouaz et al., Biochem Biophys Res Commun., 340(4):1069- 77 (2006)). Nos vetores de expressão recombinantes, cada um dos genes da cadeia pesada e da cadeia leve do anticorpo é operacionalmente ligado a elementos intensificadores/reguladores do promotor (por exemplo, derivados de SV40, CMV, adenovírus entre outros, tais como um elemento intensificador de CMV/regulador do promotor dAdMLP ou um elemento intensificador de SV40/regulador do promotor AdMLP) para induzir altos níveis de transcrição dos genes. Os vetores de expressão recombinantes também carregam um gene DHFR, que possibilita a seleção de células CHO que foram transfectadas com o vetor por meio de seleção com metotrexato/amplificação. As células hospedeiras transformantes selecionadas são cultivadas para permitir a expressão da cadeia pesada e da cadeia leve do anticorpo e o anticorpo é recuperado do meio de cultura.
[00163] Os anticorpos também podem ser produzidos por um animal transgênico. Por exemplo, a Patente US N° 5,849,992 descreve um método para a expressão de um anticorpo na glândula mamária de um mamífero transgênico. É construído um transgene qque inclui um promotor específico do leite e ácidos nucleicos codificando o anticorpo de interesse e uma sequência sinal para secreção. O leito produzido pelas fêmeas de tais mamíferos transgênicos inclui, secretado no mesmo, o anticorpo de interesse. O anticorpo pode ser purificado a partir do leito ou, para algumas aplicações, usado diretamente. Também são apresentados animas compreendendo um ou mais dos ácidos nucleicos descritos neste pedido.
[00164] Os anticorpos da presente invenção podem ser isolados de dentro ou de fora (tal como do meio) da célula hospedeira e purifiados como anticorpos substancialmente puros e homogêneos. Métodos para isolamento e purificação comumente usados para a purificação de anticorpos podem ser usados para o isolamento e a purificação dos anticorpos, e não se limitam a qualquer método particular. Os anticorpos podem ser isolados e purificados por seleção e combinação apropriadas, por exemplo, cromatografia em coluna, filtração, ultrafiltração, dessalinização, precipitação em solvente, extração com solvente, destilação, imunoprecipitação, eletroforese em SDS- poliacrilamida gel, focalização isoelétrica, diálise, e recristalização. Cromatografia inclui, por exemplo, cromatografia por afinidade, cromatografia de troca iônica, cromatografia hidrófoba, filtração em gel, cromatografia em fase reversa, e cromatografia de adsorção (Strategies for Protein Purification and Characterization: A Laboratory Course Manual. Ed Daniel R. Marshak et al., Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1996). A cromatografia pode ser realizada por cromatografia em fase líquida tal como HPLC e FPLC. As colunas usadas para cromatografia por afinidade incluem coluna de proteína A e coluna de proteína G. Exemplos de colunas que usam a coluna de proteína A incluem Hyper D, POROS, e Sepharose FF (GE Healthcare Biosciences). A presente invenção também inclui anticorpos que são altamente purificados por meio desses métodos de purificação. Composições Farmacêuticas
[00165] Este pedido também inclui composições farmacêuticas compreendendo um anticorpo descrito neste pedido, ou um polinucleotídeo codificando um anticorpo descrito neste pedido, e um diluente, veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável. Em certas modalidades, a composição farmacêutica compreende uma quanti- dade terapeuticamente eficaz do anticorpo ou do polinucleotídeo.
[00166] Vários diluentes, veículos, e excipientes farmaceuticamente aceitáveis, e técnicas para a preparação e uso das composições farmacêuticas serão identificados pelos versados na técnica à luz da presente invenção. Composições farmacêuticas e diluentes, carrieadores, e excipientes farmaceuticamente aceitáveis ilustrativos também estão descritos em Remington: The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. (Lippincott, Williams & Wilkins 2003); Loyd V. Allen Jr (Editor), "Remington: The Science and Practice of Pharmacy," 22nd Edition, 2012, Pharmaceutical Press; Brunton, Knollman and Hilal- Dandan, "Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics," 13th Edition, 2017, McGraw-Hill Education / Medical; McNally and Hastedt (Editors), "Protein Formulation and Delivery, 2nd Edition, 2007, CRC Press; Banga, "Therapeutic Peptides and Proteins: Formulation, Processing, and Delivery Systems," 3rd Edition, 2015, CRC Press; Lars Hovgaard, Frokjaer and van de Weert (Editors), "Pharmaceutical Formulation Development of Peptides and Proteins," 2nd Edition, 2012, CRC Press; Carpenter and Manning (Editors),
"Rational Design of Stable Protein Formulations: Theory and Practice," 2002, Springer (Pharmaceutical Biotechnology (Book 13)); Meyer (Editor), "Therapeutic Protein Drug Products: Practical Approaches to Formulation in the Laboratory, Manufacturing, and the Clinic, 2012, Woodhead Publishing; e Shire, "Monoclonal Antibodies: Meeting the Challenges in Manufacturing, Formulation, Delivery and Stability of Final Drug Product, 2015, Woodhead Publishing.
[00167] Em algumas modalidades, cada veículo, diluente ou excipiente é "aceitável" no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da composição farmacêutica e não prejudicial ao indivíduo. Geralmente, o veículo farmaceuticamente aceitável é uma solução aquosa de pH tamponado. Alguns exemplos de materiais que podem servir como veículos, diluentes ou excipientes farmacêutica- mente aceitáveis incluem: água estéril; tampões, por exemplo, solução salina tamponada com fosfato; açúcares, tais como lactose, glucose, trehalose e sacarose; amidos, tais como amido de milho e amido de batata; celulose, e seus derivados, tais como carboximetil celulose sódica, etil celulose e acetato de celulose; tragacanto em pó; malte; gelatina; talco; excipientes, tais como manteiga de cacau e ceras para supositório; óleos, tais como óleo de amendoim, óleo de algodão, óleo de açafrão, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de soja; glicóis, tal como propileno glicol; polióis, tais como glicerina, sorbitol, manitol e polietileno glicol; ésteres, tais como oleato de etila e laurato de etila; agar; agentes tamponantes, tais como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; ácido algínico; água livre de pirogênio; solução salina isotônica; solução de Ringer; álcool etílico; soluções tamponantes à base de fosfato; aminoácidos (por exemplo, aminoácidos carregados incluindo, porém sem limitação, aspartato, asparagina, glutamato, glutamina, histidina, lisina); e outras substâncias compatíveis atóxicas empregadas em formulações farmacêuticas. Agentes umectantes, emulsificantes e lubrificantes, tais como lauril sulfato de sódio e estearato de magnésio, assim como agentes colorantes, agentes de liberação, agentes de revestimento, agentes edulcorantes, flavorizantes e aromatizantes, conservantes e antioxidantes também podem estar presentes nas composições.
[00168] A formulação e os métodos de distribuição das compo- sições farmacêuticas geralmente serão adaptados de acordo com o local e a doença a serem tratados. Formulações exemplificativas incluem, porém sem limitação, aquelas adequadas para administração parenteral, por exemplo, administração intravenosa, intra-arterial, intramuscular, ou subcutânea, incluindo formulações encapsuladas em micelas, lipossomas ou cápsulas de liberação de fármacos (agentes ativos incorporados em um revestimento biocompatível desenhado para liberação lenta); formulações ingeríveis; formulações para uso tópico, tais como cremes, pomadas e géis; e outras formulações tais como inalantes, aerossóis e sprays. Métodos de Uso
[00169] Este pedido apresenta métodos para o tratamento ou a prevenção de uma infecção por HIV ou de uma doença ou distúrbio relacionado em um indivíduo com necessidade do mesmo (por exemplo, um indivíduo humano), compreendendo apresentar a um indivíduo com necessidade do mesmo uma quantidade eficaz de um anticorpo ou anticorpos descritos neste pedido, ou um polinucleotídeo codificando o anticorpo ou anticorpos. Conforme usado neste pedido, o termo "quantidade eficaz" no contexto da administração de uma terapia a um indivíduo refere-se à quantidade de uma terapia que atinge um efeito profilático ou terapêutico desejado. O polinucleotídeo pode estar presente em um vetor, por exemplo, um vetor viral. Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio relacionado é causado pela infecção com HIV. Em outras modalidades, a doença ou distúrbio é a síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS). Em certas modalidades, o indivíduo é um mamífero infectado com HIV virologicamente suprimido, ao passo que em outras modalidades, o indivíduo é um mamífero infectado com HIV naïve para tratamento.
Em certas modalidades, um indivíduo naïve para tratamento apresenta uma carga viral entre 103 e 105 cópias/ml, e em certas modalidades, um indivíduo virologicamente suprimido apresenta uma carga viral < 50 copies/ml.
Em uma outra modalidade, o indivíduo é um mamífero, por exemplo, um ser humano.
Em certas modalidades, o indivíduo fora diagnostica com uma infecção por HIV, por exemplo, infecção por HIV- 1 ou HIV-2, ou uma doença ou distúrbio relacionado, por exemplo, AIDS, ou é considerado em risco de desenvolver uma infecção por HIV, por exemplo, uma infecção por HIV-1 ou HIV-2, ou uma doença ou distúrbio relacionado, por exemplo, AIDS.
Indivíduos em risco de desenvolver doenças ou distúrbios relacionados ao HIV incluem pacientes que estiveram em contato com uma pessoa infectada ou que foram expostos ao HIV de alguma forma.
A administração de um agente profilático pode ocorrer antes da manifestação de sintomas característicos de uma doença ou distúrbio relacionado ao HIV, para que a doença ou distúrbio seja prevenido, ou, alternativamente, tenha sua evolução retardada.
Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente.
Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos
96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma sequência de VH apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma sequência de VL apresentada na SEQ ID NO: 278. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma cadeia pesada que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 529 e uma cadeia leve que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 103. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma sequência da cadeia pesada apresenta na SEQ ID NO: 529 e uma sequência da cadeia leve apresentada na SEQ ID NO: 103.
[00170] Também são apresentados métodos para a prevenção ou inibição de um aumento no título do vírus HIV, na replicação do vírus,
na proliferação do vírus ou na quantidade de um DNA viral HIV, DNA proviral do HIV, ou proteína viral do HIV em um indivíduo (por exemplo, um indivíduo humano). Em uma modalidade, o método compreende apresentar ao indivíduo com necessidade do mesmo uma quantidade de um anticorpo ou anticorpos (ou de seus fragmentos de ligação a antígenos) descritos neste pedido, ou de um polinucleotídeo codificando o anticorpo ou anticorpos (ou seus fragmentos de ligação a antígenos), eficaz para prevenir um aumento no título do vírus HIV, na replicação do vírus, ou na quantidade de uma proteína do HIV de uma ou mais cepas ou isolados do HIV no indivíduo. Em certas modalidades, o método compreende ainda medir a quantidade de DNA ou proteína viral ou proviral do HIV em um ou mais instantes, por exemplo, antes e depois de o indivíduo ser apresentado a um anticorpo ou anticorpos da presente invenção. Métodos e biomarcadores para determinar a quantidade de DNA ou proteína viral ou proviral do HIV em um indivíduo são conhecidos e encontram-se disponíveis na literatura, e estão descritos, por exemplo, em Siliciano, J.D. et al., Curr Opin. HIV AIDS, 5(6):491-7 (2010), e Rouzioux, C. et al., Curr Opin HIV AIDS, 8(3):170-5 (2013).
[00171] Em certos aspectos, um anticorpo ou anticorpos da presente invenção podem ser usados, por exemplo, em métodos para a inibição de determinados vírus tais como os isolados de HIV descritos neste pedido, para a inibição profilática ou prevenção de infecções por certos vírus tais como os isolados de HIV descritos neste pedido, para a detecção certos vírus tais como os isolados de HIV descritos neste pedido em uma amostra, para a inibição de certos vírus tais como os isolados de HIV descritos neste pedido, ou para o diagnóstico de certos vírus tais como os isolados de HIV descritos neste pedido.
[00172] Para tratamento in vivo de um indivíduo mamífero, por exemplo, seres humanos, o indivíduo pode receber uma composição farmacêutica compreendendo um anticorpo ou antibodies descritos neste pedido. Quando usado para terapia in vivo, um anticorpo ou antibodies descritos neste pedido são tipicamente administrados ao paciente em quantidades terapeuticamente eficazes (isto é, quantidades que eliminam ou reduzem a carga viral e/ou o reservatório viral do paciente). Os anticorpos são administrados a um indivíduo mamérifo, por exemplo, um ser humano, por meio de métodos conhecidos, tais como, porém, sem limitação, administração intravenosa, por exemplo, como um bolo ou por infusão contínua por um período de tempo, por via intramuscular, intraperitoneal, intracerebroespinhal, subcutânea, intra-articular, intrassinovial, intratecal, oral, tópica, ou inalação. Os anticorpos podem ser administrados por via parenteral, quando possível, ao sítio da célula alvo, ou por via intravenosa. Em uma modalidade, a administração do anticorpo ou anticorpos ao indivíduo é feita por uma via intravenosa. Em uma outra modalidade, a amdo do anticorpo ou anticorpos ao indivíduo é feita por uma via subcutânea. Em modalidades adicionais, as composições farmacêuticas da invenção são administradas a um indivíduo por via sistêmica, parenteral, ou local.
[00173] Em certas modalidades, a presente invenção apresenta um método para o tratamento uma infecção por HIV, compreendendo administrar a um indivíduo humano com necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo ou anticorpos descritos neste pedido. Em algumas modalidades, a presente invenção apresenta um método para a prevenção de uma infecção por HIV, compreendendo administrar a um indivíduo humano com necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo ou anticorpos descritos neste pedido. Terapia Combinada
[00174] Em certas modalidades, este pedido apresenta um método para o tratamento (por exemplo, incluindo supressão de longo prazo ou prolongada) ou para a prevenção de uma infecção por HIV em um indivíduo humano tendo, ou em risco de contrarir, uma infecção por HIV.
O método compreende administrar ao indivíduo humano uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo ou anticorpos descritos neste pedido, ou de uma composição farmacêutica do mesmo, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais (por exemplo, um dois, três, um oudois, ou um a três) agentes terapêuticos adicionais.
Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente.
Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma sequência de VH apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma sequência de VL apresentada na SEQ ID NO: 278. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma cadeia pesada que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 529 e uma cadeia leve que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 103. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma sequência da cadeia pesada apresentada na SEQ ID NO: 529 e uma sequência da cadeia leve apresentada na SEQ ID NO: 103. Em uma modalidade, é apresentado para o tratamento de uma infecção por HIV em um indivíduo humano tendo ou em risco de contrair a infecção, o método compreendendo administrar ao indivíduo humano uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo ou anticorpos descritos neste pedido, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais (por exemplo, um, dois, três, um ou dois, ou um a três) agentes terapêuticos adicionais.
Em algumas modalidades, depois de uma ou mais administrações do anticorpo ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, opcionalmente com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, o indivíduo não apresenta sintomas de HIV ou AIDS na ausência do tratamento anti-retroviral (ART) por pelo menos 6 meses, pelo menos 1 ano, pelo menos 2 anos, pelo menos 3 anos, ou mais.
Em algumas modalidades, depois de uma ou mais administrações da molécula de ligação, o indivíduo apresenta uma carga viral de cópias/ml de sangue inferior a 500, por exemplo, inferior a 400, inferior a 300, inferior a 200, inferior a 100, inferior a 50, na ausência do tratamento anti-retroviral (ART) por pelo menos 6 meses, pelo menos 1 ano, pelo menos 2 anos, pelo menos 3 anos, ou mais.
[00175] Múltiplos estudos clínicos agora mostraram que o tratamento de indivíduos infectados com HIV com anticorpos amplamente neutralizantes (bNAbs) individuais leva à supressão temporária de vírus sensíveis, seguida por um rápido desenvolvimento de vírus resistentes - muitos dos quais parecem ser variantes virais pré-existentes raras.
[00176] Foi previamente demonstrado que o Anticorpo A e o Anticorpo B neutralizam 96% dos 118 vírus de clados cruzados testados in vitro (Scheid et al., Science, 333: 1633-1637 (2011)). Os ensaios clínicos mostraram que muitos pacientes infectados pelo HIV que receberam o tratamento com anticorpo apresentaram clones resistentes pré-existentes raros, mesmo quando seus isolados de HIV plasmático pareciam ser sensíveis ao anticorpo (Caskey et al., Nature, 522:487-491 (2016); Scheid et al., Nature, 535:556-560 (2016)). Estes resultados sugeriram que o Anticorpo A pode ser amplo quando testado contra isolados de HIV coletados de diferentes pacientes (amplitude inter-pacientes), e ainda assim pode não neutralizar 100% dos isolados virais em pacientes individuais (amplitude intra- pacientes).
[00177] Um anticorpo conhecido como 10-1074, parte da linhagem PGT121 e coletado do mesmo doador e com amplitude neutralizante similar, também foi testado em ensaios clínicos (Mouquet et al., PNAS, 109:E3268-3277 (2012); Caskey et al., Nature Medicine, 23:185-191 (2017)). O 10-1074 originalmente mostrou neutralizar aproximada-
mente 66% dos 60 vírus testados a uma IC50 abaixo de 50 µg/mL (Mouquet et al., PNAS (supra)). Os ensaios com 10-1074 mostraram que em muitos pacientes que receberam terapia com o 10-1074, haviam clones resistentes, mesmo quando os isolados de HIV plasmático pareciam ser sensíveis ao anticorpo (Caskey et al. Nature Medicine (supra)). Estes dados sugerem que muitos pacientes podem abrigar variantes virais pré-existentes raras que são resistentes ao 10-
1074. Estas variantes com resistência ao 10-1074 apresentaram resistência cruzada correlacionada ao PGT121, consistente com uma estreita relação evolutiva entre 10-1074 e PGT121. No entanto, praticamente todos os vírus resistentes isolados durante o ensaio clínico do 10-1074 eram sensíveis à neutralização pelo Anticorpo A (Caskey et al. (supra). Estes dados sugerem que a terapia combinada com anticorpos, usando bNAbs complementares, pode possibilitar uma cobertura viral intrapaciente mais completa.
[00178] As combinações de bNAb podem alcançar uma cobertura viral intrapaciente completa. Em algumas modalidades, a terapia combinada inclui um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido e um outro anticorpo bNAbs anti-HIV (isto é, um anticorpo neutralizante que neutraliza múltiplas cepas virais do HIV-1). Vários bNAbs são conhecidos na literatura e podem ser usados nesta invenção. Exemplos incluem, porém sem limitação, aqueles descritos nas Patentes US N° 8673307, 9,493,549, 9,783,594, WO2014/063059, WO2012/158948, WO2015/117008, e PCT/US2015/41272, e WO2017/096221, incluindo os anticorpos 12A12, 12A21, NIH45-46, bANC131, 8ANC134, IB2530, INC9, 8ANC195. 8ANC196, 10-259, 10- 303, 10-410, 10- 847, 10-996, 10-1074, 10-1121, 10-1130, 10-1146, 10-1341, 10-1369, e 10-1074GM. Exemplos adicionais incluem aqueles descritos em Klein et al., Nature, 492(7427): 118-22 (2012), Horwitz et al., Proc Natl Acad Sci U S A, 110(41): 16538-43 (2013), Scheid, et al., Science, 333 : 1633-1637 (2011), Scheid, et al., Nature, 458:636-640 (2009), Eroshkin et al, Nucleic Acids Res., 42 (Database issue):Dl 133-9 (2014), Mascola et al., Immunol Rev., 254(l):225-44 (2013), tal como 2F5, 4E10, M66.6, CAP206-CH12, 10E81 (sendo que todos se ligam ao MPER de gp41); PG9, PG16, CH01-04 (sendo que todos se ligam ao V1V2-glicano), 2G12 (sendo que todos se ligam ao glicano do domínio externo); b12, HJ16, CH103-106, VRC01-03, VRC- PG04, 04b, VRC-CH30-34, 3BNC62, 3BNC89, 3BNC91, 3BNC95, 3BNC104, 3BNC176, e 8ANC131 (sendo que todos se ligam ao sítio de ligação do CD4).
[00179] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são combinados ou coadministrados com um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo (por exemplo, um segundo anticorpo amplamente neutralizante não competitivo (bNAb)) que se liga a um epítopo ou região da gp120 selecionada do grupo que consiste em: (i) terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332; (ii) segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env; (iii) interface gp120/gp41; ou (iv) face silenciosa da gp120. Os epítopos ou regiões da gp120 precedentes ligados por anticorpos amplamente neutralizantes estão descritos, por exemplo, em McCoy, Retrovirology (2018) 15:70; Sok e Burton, Nat Immunol. 2018 19(11):1179-1188; Possas, et al., Expert Opin Ther Pat. 2018 Jul;28(7):551-560; e Stephenson e Barouch, Curr HIV/AIDS Rep (2016) 13:31–37, cujas íntegras encontram-se aqui incorporadas a título de referência para todos os fins.
[00180] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são combinados ou coadministrados com um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo (por exemplo, um segundo anticorpo amplamente neutralizante não competitivo (bNAb)) que se liga a um epítopo ou região da gp120 na terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em GS-9722, PGT-121.60, PGT-121.66, PGT-121, PGT-122, PGT-123, PGT-124, PGT-125, PGT-126, PGT-128, PGT-130, PGT-133, PGT- 134, PGT-135, PGT-136, PGT-137, PGT-138, PGT-139, 10-1074, VRC24, 2G12, BG18, 354BG8, 354BG18, 354BG42, 354BG33, 354BG129, 354BG188, 354BG411, 354BG426, DH270.1, DH270.6, PGDM12, VRC41.01, PGDM21, PCDN-33A, BF520.1 e VRC29.03. Anticorpos adicionais amplamente neutralizantes que se ligam à gp120 na terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332 e que podem ser usados como o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo estão descritos, por exemplo, nos documentos WO 2012/030904; WO 2014/063059; WO 2016/149698; WO 2017/106346; WO 2018/075564, WO 2018/125813 e WO 2018/237148, cujas íntegras encontram-se aqui incorporadas a título de referência para todos os fins.
[00181] Em algumas modalidades, a terapia combinada inclui um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido e um outro anticorpo anti-HIV (por exemplo, GS-9722, PGT-121.60, PGT-121.66, PGT-121, PGT-122, PGT-123, PGT-124, PGT-133, ou PGT-134) tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que qualquer um dos anticorpos das Tabelas 1 e 2 do documento US2017/0190763A1. Estas versões melhoradas ou otimizadas do PGT121 apresentam propriedades melhoradas similares a fármacos, imunogenicidade reduzida, ADCC aumentada, e propriedades farmacocinéticas adequadas. Foi demonstrado que tais anticorpos se ligam à glicoproteína do envelope do HIV expressa na superfície de um vírion ou de células infectadas, e medeiam tanto a neutralização direta do vírus como a potente destruição dessas células por células NK, monócitos e PBMC. Esta propriedade permite que os anticorpos tratem infecções por HIV através da neutralização do vírus, e também que destruam e eliminem células infectadas pelo HIV de forma latente nos indivíduos infectados, levando potencialmente a uma cura esterilizante para o HIV.
[00182] Em uma modalidade, a terapia combinada inclui um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido e um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que o anticorpo tendo as sequências abaixo: Cadeia Pesada QMQLQESGPGLVKPSETLSLTCSVSGASISDSYWSWIRRSPG (VH sublinhada) KGLEWIGYVHKSGDTNYNPSLKSRVHLSLDTSKNQVSLSLTG
VTAADSGKYYCARTLHGRRIYGIVAFNEWFTYFYMDVWGTGT QVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEP VTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGT QTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLAG PDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQ VSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSF
FLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSPG K (SEQ ID NO: 443) CDR1 pesada DSYWS (SEQ ID NO: 444) Kabat
CDR2 pesada YVHKSGDTNYNPSLKS (SEQ ID NO: 445) Kabat CDR3 pesada TLHGRRIYGIVAFNEWFTYFYMDV (SEQ ID NO: 446) Kabat Cadeia Leve SDISVAPGETARISCGEKSLGSRAVQWYQHRAGQAPSLIIYNN (VL sublinhada) QDRPSGIPERFSGSPDSRPGTTATLTITSVEAGDEADYYCHIW
DSRVPTKWVFGGGTTLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANK ATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNK
YAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (SEQ ID NO: 447) CDR1 leve GEKSLGSRAVQ (SEQ ID NO: 448) Kabat CDR2 leve NNQDRPS (SEQ ID NO: 449) Kabat CDR3 leve HIWDSRVPTKWV (SEQ ID NO: 450) Kabat
[00183] Em uma modalidade, a terapia combinada inclui um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido e um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves de outros anticorpos anti-HIV adicionais tais como aqueles descritos no documento US2017/0190763. Em certas modalidades, os anticorpos anti-HIV adicionais compreendem um anticorpo compreendendo a cadeia VH (ou pesada) e a cadeia VL (ou leve) apresentadas abaixo:
[00184] Cadeia Pesada (VH sublinhada):
QMQLQESGPGLVKPSETLSLTCSVSGASISDSYWSWIRRSPGKGLE WIGYVHKSGDTNYNPSLKSRVHLSLDTSKNQVSLSLTGVTAADSGKY YCARTLHGRRIYGIVAFNEWFTYFYMDVWGTGTQVTVSSASTKGPS VFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPK SCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDV SHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQD WLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMT
KNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 454)
[00185] Cadeia Leve (VL sublinhada):
SDISVAPGETARISCGEKSLGSRAVQWYQHRAGQAPSLIIYNNQDRP SGIPERFSGSPDY RPGTTATLTITSVEAGDEADYYCHIWDSRVPTKWVFGGGTTLTVLGQ PKAAPSVTLFPPS SEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQS
NNKYAASSYLSLT PEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS (SEQ ID NO: 455)
[00186] Em uma modalidade, a terapia combinada inclui um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido e um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves de um outro anticorpo anti-HIV, cuja cadeia pesada tem a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO:40 e cuja cadeia leve tem a sequência apresentada abaixo:
[00187] Cadeia Leve (VL sublinhada):
SDISVAPGETARISCGEKSLGSRAVQWYQHRAGQAPSLIIYNNQDRP SGIPERFSGSPDF RPGTTATLTITSVEAGDEADYYCHIWDSRVPTKWVFGGGTTLTVLGQ PKAAPSVTLFPPS SEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQS
NNKYAASSYLSLT PEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS(SEQ ID NO: 456)
[00188] Em uma modalidade, a terapia combinada inclui um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que qualquer um dos anticorpos descritos neste pedido e um anticorpo tendo as mesmas CDRs, VH, VL, VH e VL, cadeia pesada, cadeia leve, ou cadeias pesadas e leves que o anticorpo descrito abaixo: Designação do PGT121.42 hIgG1/hLambda Clone Cadeia Pesada QMQLQESGPGLVKPSETLSLTCSVSGASISDSYWSWIRRSP (VH sublinhada) GKGLEWIGYVHKSGDTNYNPSLKSRVHLSLDTSKNQVSLSL
SSVTAADSGKYYCARTLHGRRIYGIVAFNEWFTYFYMDVWG KGTQVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYF PEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS SLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPE LLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLN GKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREE MTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVL
DSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYTQK SLSLSPGK (SEQ ID NO: 451) CDR1 pesada DSYWS (SEQ ID NO: 444) Kabat CDR2 pesada YVHKSGDTNYNPSLKS (SEQ ID NO: 445) Kabat CDR3 pesada TLHGRRIYGIVAFNEWFTYFYMDV (SEQ ID NO: 446) Kabat Cadeia Leve SDISVAPGETARISCGEKSLGSRAVQWYQHRAGQAPSLIIYN (VL sublinhada) NQDRPSGIPERFSGSPDSPFGTTATLTITSVEAGDEADYYCHI
WDSRVPTKWVFGGGTTLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQA NKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSN
NKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTE CS (SEQ ID NO: 452) CDR1 leve Kabat GEKSLGSRAVQ (SEQ ID NO: 448) CDR2 leve Kabat NNQDRPS (SEQ ID NO: 449) CDR3 leve Kabat HIWDSRVPTKWV (SEQ ID NO: 450)
[00189] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são combinados ou coadministrados com um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo (por exemplo, um segundo anticorpo amplamente neutralizante não competitivo (bNAb)) que se liga a um epítopo ou região da gp120 na segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PG9, PG16, PGC14, PGG14, PGT-142, PGT-143, PGT- 144, PGT-145, CH01, CH59, PGDM1400, CAP256, CAP256- VRC26.08, CAP256-VRC26.09, CAP256-VRC26.25, PCT64-24E e VRC38.01. Anticorpos amplamente neutralizantes adicionais que se ligam à gp120 na segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env e que podem ser usados como o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo estão descritos, por exemplo, nos documentos WO 2010/107939; WO 2012/030904; WO 2018/075564 e WO 2018/125813, cujas íntegras encontram-se aqui incorporadas a título de referência para todos os fins.
[00190] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são combinados ou coadministrados com um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo (por exemplo, um segundo anticorpo amplamente neutralizante não competitivo (bNAb)) que se liga a um epítopo ou região da gp120 na interface gp120/gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PGT-151, CAP248- 2B, 35O22, 8ANC195, ACS202, VRC34 e VRC34.01. Anticorpos amplamente neutralizantes adicionais que se ligam à gp120 na interface gp120/gp41 e which can be used as o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo estão descritos, por exemplo, nos documentos WO 2011/038290; WO 2012/030904 e WO2017/079479, cujas íntegras encontram-se aqui incorporadas a título de referência para todos os fins.
[00191] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são combinados ou coadministrados com um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo (por exemplo, um segundo anticorpo amplamente neutralizante não competitivo (bNAb)) que se liga a um epítopo ou região da the gp120 silent face e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC-PG05 e SF12. See, por exemplo, Schoofs, et al., "Broad and Potent Neutralizing Antibodies Recognize the Silent Face of the HIV Envelope," Immunity (2019) May
14. pii: S1074-7613(19)30194-3 (PMID 31126879).
[00192] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são combinados ou coadministrados com um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo (por exemplo, um segundo anticorpo amplamente neutralizante não competitivo (bNAb)) que se liga a um epítopo ou região da gp41 na região proximal da membrana (MPER). Anticorpos amplamente neutralizantes adicionais que se ligam à gp41 no MPER e que podem ser usados como o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo estão descritos, por exemplo, nos documentos WO 2011/034582; WO 2011/038290; WO 2011/046623 e WO 2013/070776, cujas íntegras encontram-se aqui incorporadas a título de referência para todos os fins.
[00193] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são combinados ou coadministrados com um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo (por exemplo, um segundo anticorpo amplamente neutralizante não competitivo (bNAb)) que se liga a um epítopo ou região da gp41 na região proximal da membrana (MPER) e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em 10E8, 10E8v4, 10E8-5R-100cF, 4E10, DH511.11P, 2F5, 7b2, e LN01.
[00194] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, descritos neste pedido, são combinados ou coadministrados com um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo (por exemplo, um segundo anticorpo amplamente neutralizante não competitivo (bNAb)) que se liga a um epítopo ou região do peptídeo de fusão da gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC34 e ACS202.
[00195] Anticorpos amplamente neutralizantes adicionais which can be used as a second therapeutic agent in a combination therapy estão descritos, por exemplo, nas Patentes US N° 8,673,307; 9,493,549; 9,783,594; e WO 2012/154312; WO2012/158948; WO 2013/086533; WO 2013/142324; WO2014/063059; WO 2014/089152, WO 2015/048462; WO 2015/103549; WO 2015/117008; WO2016/014484; WO 2016/154003; WO 2016/196975; WO 2016/149710; WO2017/096221; WO 2017/133639; WO 2017/133640, cujas íntegras encontram-se aqui incorporadas a título de referência para todos os fins. Exemplos adicionais incluem aqueles descritos em Sajadi, et al., Cell. (2018) 173(7):1783-1795; Sajadi, et al., J Infect Dis. (2016) 213(1):156-64; Klein et al., Nature, 492(7427): 118-22 (2012), Horwitz et al., Proc Natl Acad Sci U S A, 110(41): 16538-43 (2013), Scheid, et al., Science, 333 : 1633-1637 (2011), Scheid, et al., Nature, 458:636- 640 (2009), Eroshkin et al, Nucleic Acids Res., 42 (Database issue):Dl 133-9 (2014), Mascola et al., Immunol Rev., 254(l):225-44 (2013), such as 2F5, 4E10, M66.6, CAP206-CH12, 10E8, 10E8v4, 10E8-5R-100cF, DH511.11P, 7b2, e LN01 (sendo que todos se ligam ao MPER da gp41); PG9, PG16, CH01-04 (all of which bind V1V2-glycan), 2G12 (que se liga ao glicano do domínio externo), cujas íntegras encontram- se aqui incorporadas a título de referência para todos os fins.
[00196] Sequências de aminoácidos exemplificativas da VH e da VL de um anticorpo anti-gp120 desta invenção que são usadas na terapia combinada incluem as sequências apresentadas nas SEQ ID NOs: 182 e 275, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 278, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 279, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 280, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 281, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 282, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 292, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 304, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 307, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 309, respectivamente; SEQ ID NOs: 182 e 310, respectivamente; SEQ ID NOs: 220 e 310, respectivamente; SEQ ID NOs: 477 e 223, respectivamente; SEQ ID NOs: 477 e 278, respectivamente; SEQ ID NOs: 477 e 292, respectivamente; e SEQ ID NOs: 220 e 311, respectivamente. Em certas modalidades, as sequências de aminoácidos da VH e da VL de um anticorpo anti-gp120 used in a terapia combinada are as sequências apresentadas nas SEQ ID NOs: 477 e 278, respectivamente. Em certas modalidades, o braço do anticorpo biespecífico que se liga à gp120 compreende uma sequência de aminoácidos de uma cadeia pesada de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido. Em certas modalidades, o braço do anticorpo biespecífico que se liga à gp120 compreende uma sequência de aminoácidos de uma cadeia leve de um anticorpo anti-gp120 descrito neste pedido. Sequências da cadeia pesada e da cadeia leve exemplificativas de um anticorpo anti-gp120 desta invenção que são usadas na terapia combinada incluem as sequências apresentadas nas SEQ ID NOs: 2 e 49, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 100, respectivamente; SEQ ID NOs: 42 e 101, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 103, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 104, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 105, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 106, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 107, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 117, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 129, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 132, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 134, respectivamente; SEQ ID NOs: 2 e 569, respectivamente; SEQ ID NOs: 42 e 135, respectivamente; SEQ ID NOs: 529 e 49, respectivamente; SEQ ID NOs: 529 e 103, respectivamente; SEQ ID NOs: 529 e 117, respectivamente; e SEQ ID NOs: 42 e 136, respectivamente. Em certas modalidades, as sequências da cadeia pesada e da cadeia leve de um anticorpo anti-gp120 usado na terapia combinada são as sequências apresentadas nas SEQ ID NOs: 529 e 103, respectivamente.
[00197] Em uma modalidade, são apresentadas composições farmacêuticas compreendendo um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, em combinação com um ou mais (por exemplo, um, dois, três, um ou dois, ou um a três) agentes terapêuticos adicionais, e um veículo, diluente, ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
[00198] Em certas modalidades, a presente invenção apresenta um método para o tratamento de uma infecção por HIV, compreendendo administrar a um paciente com necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo descrito neste pedido, ou de uma composição farmacêutica do mesmo, em combinação com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais agentes terapêuticos adicionais que são adequados para o tratamento de uma infecção por HIV.
[00199] Em certas modalidades, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com um, dois, três, quatro, ou mais agentes terapêuticos adicionais. Em certas modalidades, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com dois agentes terapêuticos adicionais. Em outras modalidades, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com three agentes terapêuticos adicionais. In further embodiments, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com quatro agentes terapêuticos adicionais. O um, dois, três, quatro, ou mais agentes terapêuticos adicionais podem ser agentes terapêuticos diferentes selecionados da mesma classe de agentes terapêuticos, e/ou eles podem ser selecionados de classes diferentes de agentes terapêuticos.
[00200] Em certas modalidades, um anticorpo descrito neste pedido é administrado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Coadministração de um anticorpo descrito neste pedido com um ou mais agentes terapêuticos adicionais geralmente refere-se à administração simultânea ou sequencial de um composto descrito neste pedido e um ou mais agentes terapêuticos adicionais, de modo que quantidades terapeuticamente eficazes do anticorpo descrito neste pedido e do um ou mais agentes terapêuticos adicionais estejam ambas presentes no corpo do paciente. Quando administrada sequencialmente, tal combinação pode ser administrada em duas ou mais administrações.
[00201] Coadministração inclui administração de dosagens unitárias dos anticorpos descritos neste pedido ntes ou depois da administração de dosagens unitárias de um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Por exemplo, o anticorpo descrito neste pedido pode ser administrado dentro de segundos, minutos, ou horas depois da administração do um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Em algumas modalidades, primeiro é administrada uma dose unitária de um anticorpo descrito neste pedido, seguida pela administração de uma dose unitária de um ou mais agentes terapêuticos adicionais dentro segundos ou minutos. Alternativamente, primeiro é administrada uma dose unitária de um ou mais agentes terapêuticos adicionais é administrado, seguida pela administração de uma dose unitária de um anticorpo descrito neste pedido dentro segundos ou minutos. Em outras modalidades, primeiro é administrada uma dose unitária de um anticorpo descrito neste pedido, seguida, depois de um período de horas (por exemplo, 1-12 horas), pela administração de uma dose unitária de um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Em ainda outras modalidades, primeiro é administrada uma dose unitária de um ou mais agentes terapêuticos adicionais, seguida, depois de um período de horas (por exemplo, 1-12 horas), pela administração de uma dose unitária de um anticorpo descrito neste pedido.
[00202] Em certas modalidades, um anticorpo descrito neste pedido é combinado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais em uma forma de dosagem unitária para administração simultânea a um paciente, por exemplo, como uma forma de dosagem sólida para administração oral.
[00203] Em certas modalidades, um anticorpo desta invenção é formulado como um líquido, que pode opcionalmente conter um ou mais agentes terapêuticos adicionais úteis para o tratamento de HIV. Em certas modalidades, o líquido pode conter um outro princípio ativo para o tratamento de HIV, tal como um outro anticorpo anti-HIV ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo, um inibidor da protease do HIV, um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV, um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV, um inibidor da integrase do HIV, um inibidor da integrase do sítio não catalítico (ou alostérico) do HIV, um potencializador farmacocinético, e combinações dos mesmos.
[00204] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um agente de reversão da latência (LRA), por exemplo, um agonista de um receptor toll-like (TLR), por exemplo, um agonista de TLR1 (NCBI Gene ID: 7096), TLR2 (NCBI Gene ID: 7097), TLR3 (NCBI Gene ID: 7098), TLR4 (NCBI Gene ID: 7099), TLR5 (NCBI Gene ID: 7100), TLR6 (NCBI Gene ID: 10333), TLR7 (NCBI Gene ID: 51284), TLR8 (NCBI Gene ID: 51311), TLR9 (NCBI Gene ID: 54106), e/ou TLR10 (NCBI Gene ID: 81793). Em algumas modalidades, o LRA é um agonista de TLR7. Em outras modalidades, o agente terapêutico adicional é um agente de reversão da latência (LRA), por exemplo, um agonista de TLR8. Exemplos de agonists de TLR incluem, porém sem limitação, Vesatolimod. Exemplos adicionais incluem, porém sem limitação, os compostos descritos na Patente US N° No. 8,367,670 e os compostos descritos na Publicação do Pedido de Patente US N° 2016/0289229. Em uma modalidade, o anticorpo da presente invenção pode ser combinado com um agonista de TLR7 tal como Vesatolimod. Em uma outra modalidade, o anticorpo da presente invenção pode ser combinado com um agonista de TLR8, por exemplo, GS-9688. Em uma modalidade, o agente terapêutico adicional é um modulador de TLR. Moduladores de TLR podem incluir moduladores de TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11, TLR12, e TLR13. Exemplos de moduladores de TLR3 incluem rintatolimod, poly-ICLC, RIBOXXON®, Apoxxim, RIBOXXIM®, IPH-33, MCT-465, MCT-475, e ND-1.1. Exemplos de moduladores de TLR7 incluem GS-9620, GSK-2245035, imiquimod, resiquimod, DSR-6434, DSP-3025, IMO-4200, MCT-465,
MEDI-9197, 3M-051, SB-9922, 3M-052, Limtop, TMX-30X, TMX-202, RG-7863, RG-7795, e os compostos descritos nos documentos US20100143301 (Gilead Sciences), US20110098248 (Gilead Sciences), e US20090047249 (Gilead Sciences). Exemplos de moduladores de TLR8 incluem GS-9688, motolimod, resiquimod, 3M-051, 3M-052, MCT-465, IMO-4200, VTX-763, VTX-1463, e os compostos descritos nos documentos US20140045849 (Janssen), US20140073642 (Janssen), WO2014/056953 (Janssen), WO2014/076221 (Janssen), WO2014/128189 (Janssen), US20140350031 (Janssen), WO2014/023813 (Janssen), US20080234251 (Array Biopharma), US20080306050 (Array Biopharma), US20100029585 (Ventirx Pharma), US20110092485 (Ventirx Pharma), US20110118235 (Ventirx Pharma), US20120082658 (Ventirx Pharma), US20120219615 (Ventirx Pharma), US20140066432 (Ventirx Pharma), US20140088085 (Ventirx Pharma), US20140275167 (Novira Therapeutics), e US20130251673 (Novira Therapeutics). Exemplos de moduladores de TLR9 incluem BB-001, BB-006, CYT-003, IMO-2055, IMO-2125, IMO-3100, IMO-8400, IR-103, IMO-9200, agatolimod, DIMS-9054, DV-1079, DV-1179, AZD-1419, leftolimod (MGN-1703), litenimod, e CYT-003-QbG10.
[00205] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um agonista da DExD/H-box helicase 58 (DDX58; também conhecida como RIG-I, RIG1, RIGI, RLR-1, SGMRT2; NCBI Gene ID: 23586). Um agonista de RIG-I ilustrativo é KIN1148, descrito por Hemann, et al., J Immunol May 1, 2016, 196 (1 Supplement) 76.1. Agonistas de RIG-I adicionais estão descritos, por exemplo, nos documentos Elion, et al., Cancer Res. (2018) 78(21):6183-6195; e Liu, et al., J Virol. (2016) 90(20):9406-19. Agonistas de RIG-I encontram-se comercialmente disponíveis, por exemplo, na Invivogen (invivogen.com).
[00206] Em certas modalidades, tais formulações são adequadas para uma única dose diária.
[00207] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional pode ser um agente anti-HIV. Em alguns casos, o agente terapêutico adicional pode ser inibidores da protease do HIV, inibidores da transcriptase reversa não análogos de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV, inibidores da transcriptase reversa análogos de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV, inibidores da integrase do HIV, inibidores da integrase do sítio não catalítico (ou alostérico) do HIV, inibidores da entrada do HIV, inibidores da maturação do HIV, inibidores do capsídeo do HIV, inibidores da Tat ou Rev do HIV, imunomoduladores (por exemplo, immunoestimuladores), agentes imunoterapêuticos, conjugados anticorpo-fármaco, modificadores de genes, editores de genes (tais como CRISPR/Cas9, nucleases dedo-de-zinco, nucleases resientes, nucleases sintéticas, TALENs), terapias celulares (tais como células T do receptor de antígeno quimérico, CAR-T, e receptores de células T geneticamente modificadas, TCR-T, terapias com células T autólogas), agentes de reversão da latência, compostos que visam o capsídeo do HIV, imunoterapias, inibidores da posfatidilinositol 3- quinase (PI3K), anticorpos contra HIV, anticorpos biespecíficos e proteínas terapêuticas "similares a anticorpo", inibidores da proteína matricial p17 do HIV, antagonistas da IL-13, moduladores da peptidil- prolil cis-trans isomerase A, inibidores da dissulfeto isomerase proteica, antagonistas do receptor do complemento C5a, inibidor da DNA metiltransferase, moduladores do gene vif do HIV, antagonistas da dimerização do Vif, inibidores do fator de infectividade viral do HIV- 1, inibidores da proteína TAT, moduladores do Nef do HIV-1, moduladores tirosina quinase Hck, inibidores da quinase-3 de linhagens mistas (MLK-3), inibidores da união do HIV-1, inibidores da proteína Rev, antagonistas da integrina, inibidores das nucleoproteínas, moduladores do fator de união, moduladores da proteína 1 contendo o domínio COMM, inibidores da ribonuclease H do HIV, moduladores da retrociclina, inibidores da CDK-9, inibidores da não integrina 1 de captura de ICAM-3 dendrítico, inibidores da proteína GAG do HIV, inibidores da proteína POL do HIV, moduladores do fator H do Complemento, inibidores da ubiquitina ligase, inibidores da desoxicitidina quinase, inibidores da quinase ciclina-dependente, estimuladores da proproteína convertase PC9, inibidores da RNA helicase DDX3X ATP-dependente, inibidores do complexo de incorporação da transcriptase reversa, inibidores da G6PD e NADH- oxidase, potencializadores farmacocinéticos, terapia genética contra HIV, vacinas contra HIV, e combinações dos mesmos.
[00208] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é selecionado do grupo que consiste na combinação de fármacos para HIV, outras fármacos para o tratamento de HIV, inibidores da protease do HIV, inibidores da transcriptase reversa do HIV, inibidores da integrase do HIV, inibidores da integrase do sítio não catalítico (ou alostérico) do HIV, inibidores da entrada (fusão) do HIV, inibidores da maturação do HIV, agentes de reversão da latência, inibidores do capsídeo, imunoterapias, inibidores da PI3K, anticorpos contra HIV, anticorpos biespecíficos, e proteínas terapêuticas "similares a anticorpo", e combinações dos mesmos. Combinação de Fármacos
[00209] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com uma combinação de fármacos para HIV. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 278. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma sequência de VH apresentada na SEQ ID NO: 477 e uma sequência de VL apresentada na SEQ ID NO: 278. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende CDRs de VH e CDRs de VL tendo as sequências apresentadas nas: SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, e compreende uma cadeia pesada que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 529 e uma cadeia leve que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, tal como 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO: 103. Em certas modalidades, o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo compreende uma sequência da cadeia pesada apresentada na SEQ ID NO: 529 e uma sequência da cadeia leve apresentada na SEQ ID NO: 103. Exemplos de combinação de fármacos que podem ser empregadas com um anticorpo desta invenção incluem ATRIPLA® (efavirenz, tenofovir disoproxil fumarato, e entricitabina); COMPLERA® (EVIPLERA®; rilpivirina, disoproxil fumarato de tenofovir, e entricitabina); STRIBILD® (elvitegravir, cobicistat, disoproxil fumarato de tenofovir, e entricitabina); TRUVADA® (disoproxil fumarato de tenofovir e entricitabina; TDF+FTC); DESCOVY® (tenofovir alafenamida e entricitabina); ODEFSEY® (tenofovir alafenamida, entricitabina, e rilpivirina); GENVOYA® (tenofovir alafenamida, entricitabina, cobicistat, e elvitegravir); darunavir, tenofovir alafenamida hemifumarate, entricitabina, e cobicistat; efavirenz, lamivudina, e disoproxil fumarato de tenofovir; lamivudina e disoproxil fumarato de tenofovir; tenofovir e lamivudina; tenofovir alafenamida e entricitabina; hemifumarato de tenofovir alafenamida e entricitabina; hemifumarato de tenofovir alafenamida, entricitabina, e rilpivirina; hemifumarato de tenofovir alafenamida, entricitabina, cobicistat, e elvitegravir; COMBIVIR® (zidovudina e lamivudina; AZT+3TC); EPZICOM® (LIVEXA®; sulfato de abacavir e lamivudina; ABC+3TC); KALETRA® (ALUVIA®; lopinavir e ritonavir); TRIUMEQ® (dolutegravir, abacavir, e lamivudina); TRIZIVIR® (sulfato de abacavir, zidovudina, e lamivudina; ABC+AZT+3TC); atazanavir e cobicistat; sulfato de atazanavir e cobicistat; sulfato de atazanavir e ritonavir; darunavir e cobicistat; dolutegravir e rilpivirina; dolutegravir e cloridrato de rilpivirina; dolutegravir, sulfato de abacavir, e lamivudina; lamivudina, nevirapina, e zidovudina; raltegravir e lamivudina; doravirina, lamivudina, e disoproxil fumarato de tenofovir; doravirina, lamivudina, e tenofovir disoproxil; dolutegravir + lamivudina, lamivudina + abacavir + zidovudina, lamivudina + abacavir, lamivudina + disoproxil fumarato de tenofovir, lamivudina + zidovudina + nevirapina, lopinavir + ritonavir, lopinavir + ritonavir + abacavir + lamivudina, lopinavir + ritonavir + zidovudina + lamivudina, tenofovir + lamivudina, e disoproxil fumarato de tenofovir + entricitabina + cloridrato de rilpivirina, lopinavir , ritonavir, zidovudina e lamivudina; Vacc-4x e romidepsina; e APH-0812. Outros Fármacos para HIV
[00210] Exemplos de outros fármacos para o tratamento de HIV que podem ser combinadas com um anticorpo desta invenção incluem acemannan, alisporivir, BanLec, deferiprone, Gamimune, metence- falina, naltrexona, Prolastina, REP 9, RPI-MN, VSSP, H1viral, SB-728- T, ácido 1,5-dicafeoilquínico, rHIV7-shl-TAR-CCR5RZ, terapia genética usando AAV-eCD4-Ig, terapia genética usando MazF, BlockAide, ABX- 464, AG-1105, APH-0812, BIT-225, CYT-107, HGTV-43, HPH-116, HS-10234, IMO-3100, IND-02, MK-1376, MK-2048, MK-4250, MK- 8507, MK-8591, NOV-205, PA-1050040 (PA-040), PGN-007, SCY-635, SB-9200, SCB-719, TR-452, TEV-90110, TEV-90112, TEV-90111, TEV-90113, RN-18, Immuglo, e VIR-576. Inibidores da Protease do HIV
[00211] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor da protease do HIV. Exemplos de inibidores da protease do HIV que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem amprenavir, atazanavir, brecanavir, darunavir, fosamprenavir, fosamprenavir calcium, indinavir, indinavir sulfate, lopinavir, nelfinavir, mesilato de nelfinavir, ritonavir, saquinavir, mesilato de saquinavir, tipranavir, DG-17, TMB-657 (PPL-100), T-169, BL-008, MK-8122, TMB-607, e TMC-310911. Inibidores da Transcriptase Reversa do HIV
[00212] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor não análogo de nucleosídeos ou nucleotídeos. Exemplos de inibidores da transcriptase reversa não análogos de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem dapivirina, delavirdina, mesilato de delavirdina, doravirina, efavirenz, etravirina, lentinano, nevirapina, rilpivirina, ACC- 007, AIC-292, KM-023, PC-1005, e elsulfavirina (VM-1500.).
[00213] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor análogo de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV. Exemplos de inibidores da transcriptase reversa análogos de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem adefovir, adefovir dipivoxil, azvudina, entricitabina, tenofovir, tenofovir alafenamida, fumarato de tenofovir alafenamida, hemifumarato de tenofovir alafenamida, tenofovir disoproxil, disoproxil fumarato de tenofovir, disoproxil hemifumarato de tenofovir, VIDEX® e VIDEX EC® (didanosina, ddl), abacavir, sulfato de abacavir, alovudina, apricitabina, censavudina, didanosina, elvucita- bina, festinavir, fosalvudine tidoxil, CMX-157, dapivirina, doravirina, etravirina, OCR-5753, disoproxil orotato de tenofovir, fozivudina tidoxil, lamivudina, fosfazida, estavudina, zalcitabina, zidovudina, rovafovir etalafenamida (GS-9131), GS-9148, MK-8504, MK-8591, MK-858, VM- 2500 e KP-1461. Inibidores da Integrase do HIV
[00214] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor da integrase do HIV. Exemplos de inibidores da integrase do HIV que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem elvitegravir, curcumina, derivados de curcumina, ácido chicórico, derivados de ácido chicórico, ácido 3,5-dicafeoilquínico, derivados de ácido 3,5-dicafeoilquínico, ácido aurintricarboxílico,
derivados de ácido aurintricarboxílico, éster fenetílico de ácido cafeico, derivados de éster fenetílico de ácido cafeico, tirffostina, derivados de tirffostina, quercetina, derivados de quercetina, raltegravir, dolutegravir, JTK-351, bictegravir, AVX-15567, cabotegravir (injetável de ação prolongada), derivados de diceto quinolin-4-1, inibidor da integrase- LEDGF, ledginas, M-522, M-532, NSC-310217, NSC-371056, NSC- 48240, NSC-642710, NSC-699171, NSC-699172, NSC-699173, NSC- 699174, ácido estilbenodissulfônico, T-169, VM-3500 e cabotegravir.
[00215] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor da integrase do sítio não catalítico, ou alostérico, do HIV (NCINI). Exemplos de inibidores da integrase do sítio não catalítico, ou alostérico, do HIV (NCINI) que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem CX-05045, CX-05168, e CX-14442. Inibidores da Entrada do HIV
[00216] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor da entrada HIV. Exemplos de inibidores da entrada (fusão) do HIV que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem cenicriviroc, inibidores do CCR5, inibidores da gp41, inibidores da ligação da CD4, inibidores da gp120, e inibidores da CXCR4.
[00217] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor do CCR5. Exemplos de inibidores do CCR5 que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem aplaviroc, vicriviroc, maraviroc, cenicriviroc, leronlimab (PRO-140), adaptavir (RAP-101), nifeviroc (TD-0232), anticorpos biespecíficos anti- GP120/CD4 ou CCR5, B-07, MB-66, polipeptídio C25P, TD-0680, e vMIP (Haimipu).
[00218] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor da gp41. Exemplos de inibidores da gp41 que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem albuvirtida, enfuvirtida, BMS-986197, enfuvirtida biobetter, enfuvirtida biosimilar, inibidores da fusão do HIV-1 (P26-Bapc), ITV-1, ITV-2, ITV-3, ITV-4, trímero de PIE-12 e sifuvirtida.
[00219] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor da ligação da CD4. Exemplos de inibidores da ligação da CD4 que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem ibalizumab e análogos de CADA.
[00220] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor da gp120. Exemplos de inibidores da gp120 que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem Radha-108 (receptol) 3B3-PE38, BanLec, nanomedicina à base de bentonita, fostemsavir trometamina, IQP-0831, e BMS-663068
[00221] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor do CXCR4. Exemplos de inibidores do CXCR4 que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem plerixafor, ALT- 1188, peptídeo N15, e vMIP (Haimipu).
[00222] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com a HIV maturation inhibitor. Exemplos de HIV maturation inhibitors que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem BMS- 955176, GSK-3640254 e GSK-2838232. Agentes de Reversão da Latência
[00223] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um agente de reversão da latência (LRA). Exemplos de agentes de reversão da latência que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem agonistas do receptor toll-like (TLR) (incluindo agonistas de TLR7, por exemplo, agonistas de GS-9620 e TLR8, por exemplo, GS-9688), inibidores da histona desacetilase (HDAC), inibidores do proteassoma tais como velcade, ativadores da proteína quinase C (PKC), inibidores de Smyd2, inibidores do BET- bromodomínio 4 (BRD4), ionomicina, antagonistas de IAP (inibidor das proteínas da apoptote, tal como APG-1387, LBW-242), miméticos de SMAC (incluindo TL32711, LCL161, GDC-0917, HGS1029, AT-406), PMA, SAHA (ácido suberanilo-hidroxâmico, ou suberoil, anilida, e ácido hidroxâmico), NIZ-985, anticorpos moduladores da IL-15 (incluindo IL-15, proteínas de fusão IL-15 e agonistas do receptor de IL-15, por exemplo, ALT-803), JQ1, disulfiram, anfotericina B, e inibidores da ubiquitina tais como análogos de largazole, APH-0812, e GSK-343. Exemplos de inibidores de HDAC incluem romidepsina, vorinostat, e panobinostat. Exemplos de ativadores de PKC incluem indolactam, prostratina, ingenol B, e DAG-lactonas. Agonistas do Receptor Toll-Like (TLR)
[00224] Em várias modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um agonista de um receptor toll-like (TLR), por exemplo, um agonista de TLR1 (NCBI Gene ID: 7096), TLR2 (NCBI Gene ID: 7097), TLR3 (NCBI Gene ID: 7098), TLR4 (NCBI Gene ID: 7099), TLR5 (NCBI Gene ID: 7100), TLR6 (NCBI Gene ID: 10333), TLR7 (NCBI Gene ID: 51284), TLR8 (NCBI Gene ID: 51311), TLR9 (NCBI Gene ID: 54106), e/ou TLR10 (NCBI Gene ID: 81793). Exemplos de agonistas de TLR7 que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, AL- 034, DSP-0509, GS-9620 (vesatolimod), LHC-165, TMX-101 (imiquimod), GSK-2245035, resiquimod, DSR-6434, DSP-3025, IMO-
4200, MCT-465, MEDI-9197, 3M-051, SB-9922, 3M-052, Limtop, TMX- 30X, TMX-202, RG-7863, RG-7854, RG-7795, e os compostos descritos nos documentos US20100143301 (Gilead Sciences), US20110098248 (Gilead Sciences), e US20090047249 (Gilead Sciences), US20140045849 (Janssen), US20140073642 (Janssen), WO2014/056953 (Janssen), WO2014/076221 (Janssen), WO2014/128189 (Janssen), US20140350031 (Janssen), WO2014/023813 (Janssen), US20080234251 (Array Biopharma), US20080306050 (Array Biopharma), US20100029585 (Ventirx Pharma), US20110092485 (Ventirx Pharma), US20110118235 (Ventirx Pharma), US20120082658 (Ventirx Pharma), US20120219615 (Ventirx Pharma), US20140066432 (Ventirx Pharma), US20140088085 (Ventirx Pharma), US20140275167 (Novira Therapeutics), e US20130251673 (Novira Therapeutics). Um agonista de TLR7/TLR8 que pode ser coadministrado é NKTR-262, telratolimod e BDB-001. Exemplos de agonistas de TLR8 que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, E-6887, IMO-4200, IMO-8400, IMO-9200, MCT-465, MEDI-9197, motolimod, resiquimod, GS-9688, VTX-1463, VTX-763, 3M-051, 3M-052, e os compostos descritos nos documentos US20140045849 (Janssen), US20140073642 (Janssen), WO2014/056953 (Janssen), WO2014/076221 (Janssen), WO2014/128189 (Janssen), US20140350031 (Janssen), WO2014/023813 (Janssen), US20080234251 (Array Biopharma), US20080306050 (Array Biopharma), US20100029585 (Ventirx Pharma), US20110092485 (Ventirx Pharma), US20110118235 (Ventirx Pharma), US20120082658 (Ventirx Pharma), US20120219615 (Ventirx Pharma), US20140066432 (Ventirx Pharma), US20140088085 (Ventirx Pharma), US20140275167 (Novira Therapeutics), e US20130251673 (Novira Therapeutics). Exemplos de agonistas de TLR9 que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, AST-008, cobitolimod,
CMP-001, IMO-2055, IMO-2125, litenimod, MGN-1601, BB-001, BB- 006, IMO-3100, IMO-8400, IR-103, IMO-9200, agatolimod, DIMS-9054, DV-1079, DV-1179, AZD-1419, lefitolimod (MGN-1703), CYT-003, CYT-003-QbG10, tilsotolimod e PUL-042. Exemplos de agonistas de TLR3 incluem rintatolimod, poli-ICLC, RIBOXXON®, Apoxxim, RIBOXXIM®, IPH-33, MCT-465, MCT-475, e ND-1.1. Exemplos de agonistas de TLR4 incluem G-100, e GSK-1795091. Inibidores da Histona Desacetilase (HDAC)
[00225] Em várias modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido, são combinados com um inibidor de uma histona desacetilase, por exemplo, histona desacetilase 9 (HDAC9, HD7, HD7b, HD9, HDAC, HDAC7, HDAC7B, HDAC9B, HDAC9FL, HDRP, MITR; Gene ID: 9734). Exemplos de inibidores da HDAC incluem, porém sem limitação, abexinostat, ACY- 241, AR-42, BEBT-908, belinostat, CKD-581, CS-055 (HBI-8000), CUDC-907 (fimepinostat), entinostat, givinostat, mocetinostat, panobinostat, pracinostat, quisinostat (JNJ-26481585), resminostat, ricolinostat, romidepsin, SHP-141, ácido valproico (VAL-001), vorinostat, tinostamustine, remetinostat, entinostat. Inibidores do Capsídeo
[00226] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor do capsídeo. Exemplos de inibidores do capsídeo que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem inibidores da polimerização do capsídeo ou compostos que rompem o capsídeo, inibidor do nucleocapsídeo p7 do HIV (NCp7) tal como azodicarbonamida, inibidores da proteína do capsídeo p24 do HIV, GS-6207, AVI-621, AVI-101, AVI-201, AVI-301, e a série AVI-CAN1-
15. Imunoterapias
[00227] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com uma imunoterapia. Exemplos de imunoterapias que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem moduladores de receptores toll-like (TLR) (por exemplo, agonistas) tais como agonistas de TLR1, TLR 2, TLR 3, TLR 4, TLR 5, TLR 6, TLR 7, TLR 8, TLR 9, TLR 10, TLR 11, TLR 12, e/ou TLR 13; moduladores da proteína 1 da morte celular programada (PD-1); moduladores do ligante 1 da morte programada (PD-L1); agonistas de IL-15 (por exemplo, ALT-803); DermaVir; interleucina-7; plaquenil (hidroxicloroquina); proleucina (aldesleucina, IL-2); interferon alfa; interferon alfa-2b; interferon alfa- n3; interferon alfa peguilado; interferon gama; hidroxiureia; micofenolato mofetil (MPA) e seu derivado éster de micofenolato mofetil (MMF); ribavirina; rintatolimod, polímero polietilenoimina (PEI); gepon; IL-12; WF-10; VGV-1; MOR-22; BMS-936559; CYT-107, proteína de fusão interleucina-15/Fc, AM-0015, ALT-803, NIZ-985, NKTR-255, normferon, peginterferon alfa-2a, peginterferon alfa-2b, interleucina-15 recombinante, RPI-MN, GS-9620, GS-9688, moduladores de STING, moduladores de RIG-I, moduladores de NOD2, SB-9200, e IR-103.
[00228] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um agonista de TLR. Exemplos de agonistas de TLR incluem, porém sem limitação: vesatolimod (GS-9620), lefitolimod, tilsotolimod, rintatolimod, DSP-0509, AL-034, G-100, cobitolimod, AST-008, motolimod, GSK- 1795091, GSK-2245035, VTX-1463, GS-9688, LHC-165, BDB-001, RG-7854, e telratolimod. Moduladores da Proteína de Receptores de Ponto de Verificação Imunológica
[00229] Em várias modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido, são combinados com um ou mais bloqueadores ou inibidores de proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica inibitórios e/ou com um ou mais estimuladores, ativadores ou agonistas de uma ou mais proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica estimuladores. O bloqueio ou a inibição de pontos de verificação imunológica inibitórios pode regular de forma positiva a ativação de células T ou de células NK e prevenir o escape imunológico das células infectadas. A ativação ou estimulação de pontos de verificação imunológica estimuladores pode aumentar o efeito dos inibidores de pontos de verificação imunológica em terápicos contra infecções. Em várias modalidades, as proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica regulam as respostas de células T (por exemplo, revisado em Xu, et al., J Exp Clin Cancer Res. (2018) 37:110). Em várias modalidades, as proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica regulam as respostas de células NK (por exemplo, reviewed in Davis, et al., Semin Immunol. (2017) 31:64–75 e Chiossone, et al., Nat Rev Immunol. (2018) 18(11):671-688).
[00230] Exemplos de proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica incluem, porém sem limitação, CD27, CD70; CD40, CD40LG; CD47, CD48 (SLAMF2), "containing" 2 do domínio de transmembrana e imunoglobulina (TMIGD2, CD28H), CD84 (LY9B, SLAMF5), CD96, CD160, MS4A1 (CD20), CD244 (SLAMF4); CD276 (B7H3); inibidor 1 da ativação de células T contendo o domínio de V- set (VTCN1, B7H4); receptor imunorregulador de V-set (VSIR, B7H5, VISTA); membro 11 da superfamília de imunoglobulinas (IGSF11, VSIG3); ligante 1 do receptor 3 da citoxicidade de células exterminadores naturais (NCR3LG1, B7H6); HERV-H LTR-associating 2 (HHLA2, B7H7); co-estimuladores de células T induzíveis (ICOS, CD278); ligante de co-estimuladores de células T induzíveis (ICOSLG,
B7H2); membro 4 da superfamília de receptores de TNF (TNFRSF4, OX40); membro 4 da superfamília de TNF (TNFSF4, OX40L); TNFRSF8 (CD30), TNFSF8 (CD30L); TNFRSF10A (CD261, DR4, TRAILR1), TNFRSF9 (CD137), TNFSF9 (CD137L); TNFRSF10B (CD262, DR5, TRAILR2), TNFRSF10 (TRAIL); TNFRSF14 (HVEM, CD270), TNFSF14 (HVEML); CD272 (linfócitos B e T associados (BTLA)); TNFRSF17 (BCMA, CD269), TNFSF13B (BAFF); TNFRSF18 (GITR), TNFSF18 (GITRL); sequência A relacionada ao polipeptídio MHC classe I (MICA); sequência B relacionada ao polipeptídio MHC classe I (MICB); CD274 (CD274, PDL1, PD-L1); morte celular programada 1 (PDCD1, PD1, PD-1); proteína 4 associada a linfócitos T citotóxicos (CTLA4, CD152); CD80 (B7-1), CD28; molécula 2 de adesão celular à nectina (NECTIN2, CD112); CD226 (DNAM-1); molécula de adesão celular ao receptor do poliovírus (PVR) (PVR, CD155); "containing" do domínio da imunoglobulina relacionado com PVR (PVRIG, CD112R); imunorreceptor de células T com domínios de Ig e ITIM (TIGIT); "containing" 4 do domínio da imunoglobulina e mucina de células T (TIMD4; TIM4); receptor celular 2 do vírus da hepatite A (HAVCR2, TIMD3, TIM3); galectina 9 (LGALS9); "activating" 3 de linfócitos (LAG3, CD223); membro da família moléculas de ativação linfocítica sinalizadora 1 (SLAMF1, SLAM, CD150); antígeno linfocitário 9 (LY9, CD229, SLAMF3); membro da família SLAM 6 (SLAMF6, CD352); membro da família SLAM 7 (SLAMF7, CD319); proteína 1 de ligação ao UL16 (ULBP1); proteína 2 de ligação ao UL16 (ULBP2); proteína 3 de ligação ao UL16 (ULBP3); transcrito precoce 1E de ácido retinoico (RAET1E; ULBP4); transcrito precoce 1G de ácido retinoico (RAET1G; ULBP5); transcrito precoce 1L de ácido retinoico (RAET1L; ULBP6); "activating" 3 de linfócitos (CD223); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR, CD158E1);
receptor similar à lectina de células exterminadoras C1 (KLRC1, NKG2A, CD159A); receptor similar à lectina de células exterminadoras K1 (KLRK1, NKG2D, CD314); receptor similar à lectina de células exterminadoras C2 (KLRC2, CD159c, NKG2C); receptor similar à lectina de células exterminadoras C3 (KLRC3, NKG2E); receptor similar à lectina de células exterminadoras C4 (KLRC4, NKG2F); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR2DL1); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 2 (KIR2DL2); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 3 (KIR2DL3); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1); receptor similar à lectina de células exterminadoras D1 (KLRD1); e membro da família SLAM 7 (SLAMF7).
[00231] Em várias modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido, são combinados com um ou mais bloqueadores ou inibidores de uma ou mais proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica inibitórios de células T. Proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica inibitórios de células T ilustrativos incluem, porém sem limitação, CD274 (CD274, PDL1, PD-L1); ligante 2 da morte celular programada 1 (PDCD1LG2, PD-L2, CD273); morte celular programada 1 (PDCD1, PD1, PD-1); proteína 4 associada a linfócitos T citotóxicos (CTLA4, CD152); CD276 (B7H3); inibidor 1 da ativação de células T contendo o domínio de V-set (VTCN1, B7H4); receptor imunorregulador de V-set (VSIR, B7H5, VISTA); membro 11 da superfamília de imunoglobulinas (IGSF11, VSIG3); TNFRSF14 (HVEM, CD270), TNFSF14 (HVEML); CD272 (associado a linfócitos B e T (BTLA)); "containing" do domínio de imunoglobulina relacionado com PVR (PVRIG, CD112R); imunorreceptor de células T com domínios de Ig e ITIM (TIGIT); "activating" 3 de linfócitos (LAG3, CD223); receptor celular 2 do vírus da hepatite A (HAVCR2, TIMD3, TIM3); galectina 9 (LGALS9); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR, CD158E1); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR2DL1); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 2 (KIR2DL2); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 3 (KIR2DL3); e receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1). Em várias modalidades, as proteínas de fusão FLT3L-Fc, homodímeros, heterodímeros, polinucleotídeos, vetores, LNPs e/ou composições farmacêuticas, descritos neste pedido, são combinados com um ou mais agonistas ou ativdores de uma ou mais proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica estimuladores.
Proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica estimuladores ilustrativos incluem, porém sem limitação, CD27, CD70; CD40, CD40LG; coestimuladores de células T induzíveis (ICOS, CD278); ligante coestimuladores de células T induzíveis (ICOSLG, B7H2); membro 4 da superfamília de receptores de TNF (TNFRSF4, OX40); membro 4 da superfamília de TNF (TNFSF4, OX40L); TNFRSF9 (CD137), TNFSF9 (CD137L); TNFRSF18 (GITR), TNFSF18 (GITRL); CD80 (B7-1), CD28; nectin cell adhesion molecule 2 (NECTIN2, CD112); CD226 (DNAM-1); CD244 (2B4, SLAMF4), molécula de adesão celular ao receptor do poliovírus (PVR) (PVR, CD155). Vide, por exemplo, Xu, et al., J Exp Clin Cancer Res. (2018) 37:110.
[00232] Em várias modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido, são combinados com um ou mais bloqueadores ou inibidores de uma ou mais proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica inibitórios de células NK.
Proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica inibitórios de células NK ilustrativos incluem, porém sem limitação, receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR, CD158E1); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR2DL1); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 2 (KIR2DL2); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 3 (KIR2DL3); receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1); receptor similar à lectina de células exterminadoras C1 (KLRC1, NKG2A, CD159A); e receptor similar à lectina de células exterminadoras D1 (KLRD1, CD94). Em várias modalidades, as proteínas de fusão FLT3L-Fc, homodímeros, heterodímeros, polinucleotídeos, vetores, LNPs e/ou composições farmacêuticas, descritos neste pedido, são combinados com um ou mais agonistas ou aticadores de proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica estimuladores de células NK.
Proteínas ou receptores de pontos de verificação imunológica estimuladores de células NK ilustrativos incluem, porém sem limitação, CD16, CD226 (DNAM-1); CD244 (2B4, SLAMF4); receptor similar à lectina de células exterminadoras K1 (KLRK1, NKG2D, CD314); membro da família SLAM 7 (SLAMF7). Vide, por exemplo, Davis, et al., Semin Immunol. (2017) 31:64–75; Fang, et al., Semin Immunol. (2017) 31:37-54; e Chiossone, et al., Nat Rev Immunol. (2018) 18(11):671-688.
[00233] Em algumas modalidades, o um ou mais inibidores de pontos de verificação imunológica compreende um inibidor proteináceo (por exemplo, anticorpo ou fragmento do mesmo, ou mimético de anticorpo) de PD-L1 (CD274), PD-1 (PDCD1) ou CTLA4. Em algumas modalidades, o um ou mais inibidores de pontos de verificação imunológica compreendem um inhibidor de molécula orgânica pequena de PD-L1 (CD274), PD-1 (PDCD1) ou CTLA4.
[00234] Exemplos de inibidores de CTLA4 que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, ipilimumab, tremelimumab, BMS-986218, AGEN1181, AGEN1884, BMS-986249, MK-1308, REGN-4659, ADU-1604, CS-1002, BCD-145, APL-509, JS- 007, BA-3071, ONC-392, AGEN-2041, JHL-1155, KN-044, CG-0161, ATOR-1144, PBI-5D3H5, BPI-002, assim como os inibidores multiespecíficos FPT-155 (CTLA4/PD-L1/CD28), PF-06936308 (PD-1/ CTLA4), MGD-019 (PD-1/CTLA4), KN-046 (PD-1/CTLA4), MEDI-5752 (CTLA4/PD-1), XmAb-20717 (PD-1/CTLA4), e AK-104 (CTLA4/PD-1).
[00235] Exemplos de inibidores de PD-L1 (CD274) ou PD-1 (PDCD1) que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, pembrolizumab, nivolumab, cemiplimab, pidilizumab, AMP- 224, MEDI0680 (AMP-514), spartalizumab, atezolizumab, avelumab, durvalumab, BMS-936559, CK-301, PF-06801591, BGB-A317 (tislelizumab), GLS-010 (WBP-3055), AK-103 (HX-008), AK-105, CS- 1003, HLX-10, MGA-012, BI-754091, AGEN-2034, JS-001 (toripalimab), JNJ-63723283, genolimzumab (CBT-501), LZM-009, BCD-100, LY-3300054, SHR-1201, SHR-1210 (camrelizumab), Sym- 021, ABBV-181, PD1-PIK, BAT-1306, (MSB0010718C), CX-072, CBT- 502, TSR-042 (dostarlimab), MSB-2311, JTX-4014, BGB-A333, SHR- 1316, CS-1001 (WBP-3155, KN-035, IBI-308 (sintilimab), HLX-20, KL- A167, STI-A1014, STI-A1015 (IMC-001), BCD-135, FAZ-053, TQB- 2450, MDX1105-01, GS-4224, GS-4416, INCB086550, MAX10181,
assim como os inibidores multiespecíficos FPT-155 (CTLA4/PD- L1/CD28), PF-06936308 (PD-1/ CTLA4), MGD-013 (PD-1/LAG-3), FS- 118 (LAG-3/PD-L1) MGD-019 (PD-1/CTLA4), KN-046 (PD-1/CTLA4), MEDI-5752 (CTLA4/PD-1), RO-7121661 (PD-1/TIM-3), XmAb-20717 (PD-1/CTLA4), AK-104 (CTLA4/PD-1), M7824 (PD-L1/TGFβ-EC domain), CA-170 (PD-L1/VISTA), CDX-527 (CD27/PD-L1), LY- 3415244 (TIM3/PDL1), e INBRX-105 (4-1BB/PDL1).
[00236] Em algumas modalidades, o inibidor de molécula pequena de CD274 ou PDCD1 é selecionado do grupo que consiste em GS- 4224, GS-4416, INCB086550 e MAX10181. Em algumas modalidades, o inibidor de molécula pequena de CTLA4 compreende BPI-002.
[00237] Em várias modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com anticorpos anti-TIGIT, tais como BMS-986207, RG-6058, AGEN-1307 Agonistas ou Ativadores dos Membros da Superfamília de Receptores de TNF (TNFRSF)
[00238] Em várias modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um agonista de um ou mais membros da superfamília de receptores de TNF (TNFRSF), por exemplo, um agonista de um ou mais dentre TNFRSF1A (NCBI Gene ID: 7132), TNFRSF1B (NCBI Gene ID: 7133), TNFRSF4 (OX40, CD134; NCBI Gene ID: 7293), TNFRSF5 (CD40; NCBI Gene ID: 958), TNFRSF6 (FAS, NCBI Gene ID: 355), TNFRSF7 (CD27, NCBI Gene ID: 939), TNFRSF8 (CD30, NCBI Gene ID: 943), TNFRSF9 (4-1BB, CD137, NCBI Gene ID: 3604), TNFRSF10A (CD261, DR4, TRAILR1, NCBI Gene ID: 8797), TNFRSF10B (CD262, DR5, TRAILR2, NCBI Gene ID: 8795), TNFRSF10C (CD263, TRAILR3, NCBI Gene ID: 8794), TNFRSF10D (CD264, TRAILR4, NCBI Gene ID: 8793), TNFRSF11A (CD265, RANK, NCBI Gene ID: 8792), TNFRSF11B (NCBI Gene ID: 4982), TNFRSF12A (CD266,
NCBI Gene ID: 51330), TNFRSF13B (CD267, NCBI Gene ID: 23495), TNFRSF13C (CD268, NCBI Gene ID: 115650), TNFRSF16 (NGFR, CD271, NCBI Gene ID: 4804), TNFRSF17 (BCMA, CD269, NCBI Gene ID: 608), TNFRSF18 (GITR, CD357, NCBI Gene ID: 8784), TNFRSF19 (NCBI Gene ID: 55504), TNFRSF21 (CD358, DR6, NCBI Gene ID: 27242), e TNFRSF25 (DR3, NCBI Gene ID: 8718).
[00239] Exemplos de anticorpos anti-TNFRSF4 (OX40) que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, MEDI6469, MEDI6383, MEDI0562 (tavolixizumab), MOXR0916, PF-04518600, RG-7888, GSK-3174998, INCAGN1949, BMS-986178, GBR-8383, ABBV-368, e aqueles descritos nos documentos WO2016179517, WO2017096179, WO2017096182, WO2017096281, e WO2018089628.
[00240] Example anti-TNFRSF5 (CD40) antibodies que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, RG7876, SEA-CD40, APX-005M e ABBV-428.
[00241] Em algumas modalidades, o anticorpo anti-TNFRSF7 (CD27) varlilumab (CDX-1127) é que é coadministrados.
[00242] Exemplos de anticorpos anti-TNFRSF9 (4-1BB, CD137) que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, urelumab, utomilumab (PF-05082566), AGEN2373 e ADG-106.
[00243] Exemplos de anticorpos anti-TNFRSF18 (GITR) que podem ser coadministrados incluem, porém sem limitação, MEDI1873, FPA- 154, INCAGN-1876, TRX-518, BMS-986156, MK-1248, GWN-323, e aqueles descritos nos documentos WO2017096179, WO2017096276, WO2017096189, e WO2018089628. Em algumas modalidades, um anticorpo, ou fragmento do mesmo, que visa concomitantemente TNFRSF4 (OX40) e TNFRSF18 (GITR) é que é co-administrado. Tais anticorpos estão descritos, por exemplo, nos documentos WO2017096179 e WO2018089628.
Engajadores Bi- e Tri-específicos de Células Exterminadoras Naturais
[00244] Em várias modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido, são combinados com um engajador biespecífico de células NK (BiKE) ou com um engajador triespecífico de células NK (TriKE) (por exemplo, não tendo um Fc) ou com um anticorpo biespecífico (por exemplo, tendo um Fc) contra um receptor de ativação de células NK, por exemplo, CD16A, receptores de lectina tipo C (CD94/NKG2C, NKG2D, NKG2E/H e NKG2F), receptores de citotoxicidade natural (NKp30, NKp44 e NKp46), receptor similar à lectina tipo C de células exterminadoras (NKp65, NKp80), receptor de Fc FcγR (que medeia a citotoxicidade celular anticorpo-dependente), receptores da família SLAM (por exemplo, 2B4, SLAM6 e SLAM7), receptores imunoglobulina-like de células exterminadoras (KIR) (KIR-2DS e KIR-3DS), DNAM-1 e CD137 (41BB). Anticorpos biespecíficos anti-CD16 ilustrativos, BiKEs ou TriKEs que podem ser coadministrados incluem AFM26 (BCMA/CD16A) e AFM-13 (CD16/CD30). Conforme apropriado, as moléculas biespecíficas de ligação anti-CD16 podem ter ou não um Fc. BiKEs e TriKEs estão descritos, por exemplo, em Felices, et al., Methods Mol Biol. (2016) 1441:333–346; Fang, et al., Semin Immunol. (2017) 31:37-54. Exemplos de um engajador triespecífico de células NK (TRiKE) incluem OXS-3550, e CD16-IL-15-B7H3 TriKe. Inibidores da Fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K)
[00245] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um inibidor da PI3K. Exemplos de inibidores da PI3K que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem idelalisib, alpelisib, buparlisib, orotato de CAI, copanlisib, duvelisib, gedatolisib, neratinib, panulisib, perifosine, pictilisib, pilaralisib, puquitinib mesylate, rigosertib, rigosertib sódico, sonolisib, taselisib, AMG-319, AZD-8186,
BAY-1082439, CLR-1401, CLR-457, CUDC-907, DS-7423, EN-3342, GSK-2126458, GSK-2269577, GSK-2636771, INCB-040093, LY- 3023414, MLN-1117, PQR-309, RG-7666, RP-6530, RV-1729, SAR- 245409, SAR-260301, SF-1126, TGR-1202, UCB-5857, VS-5584, XL- 765, e ZSTK-474. Antagonistas de alfa-4/beta-7
[00246] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com antagonista de alfa-4/beta-7. Exemplos de antagonistas da integrina alfa-4/beta-7 que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem PTG-100, TRK-170, abrilumab, etrolizumab, carotegrast metil, e vedolizumab.
[00247] Exemplos de anticorpos contra HIV, anticorpos biespecíficos, e proteínas terapêuticas "tipo-anticorpo" que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem DARTs®, DUOBODIES®, BITES®, XmAbs®, TandAbs®, derivados de Fab, bNAbs (anticorpos amplamente neutralizantes de HIV-1), BMS- 936559, TMB-360, e aqueles que visam a gp120 ou a gp41 do HIV, moléculas recrutadores de anticorpos que visam o HIV, anticorpos monoclonais anti-CD63, anticorpos anti-GB vírus C, anti-GP120/CD4, anticorpos biespecíficos contra CCR5, anticorpos de domínio único anti-nef, anticorpo anti-Rev, anticorpos anti-CD18 derivados de camelídeo, anticorpos anti-ICAM-1 derivados de camelídeo, DCVax- 001, anticorpos direcionados para gp140, anticorpos terapêuticos contra HIV à base de gp41, mAbs recombinantes humanos (PGT-121), ibalizumab, Immuglo, MB-66. Exemplos dos mesmos que visam o HIV dessa forma incluem bavituximab, UB-421, C2F5, 2G12, C4E10, C2F5+C2G12+C4E10, 8ANC195, 3-BNC-117, 3BNC117-LS, 3BNC60, D1D2, 10-1074, 10-1074-LS, GS-9722, DH411-2, BG18, PGT145, PGT121, PGT122, PGT-151, PGT-133, PGT-134, PGT-135, PGT-128,
MDX010 (ipilimumab), DH511, DH511-2, N6, N6LS, N49P6, N49P7, N49P7.1, N49P9, N49P11, N60P1.1, N60P25.1, N60P2.1, N60P31.1, N60P22, NIH 45-46, PG9, PG16, 2Dm2m, 4Dm2m, 6Dm2m, PGDM1400, MDX010 (ipilimumab), VRC01, VRC-01-LS, A32, 7B2, 10E8, VRC-07-523, VRC07-523LS, 10E8VLS, 3810109, 10E8v4, IMC- HIV, iMabm36, eCD4-Ig, IOMA, CAP256-VRC26.25, DRVIA7,VRC- HIVMAB080-00-AB, VRC-HIVMAB060-00-AB, P2G12, VRC07 e SF12. Exemplos de anticorpos biespecíficos e triespecíficos contra HIV incluem MGD014, TMB-biespecífico, SAR-441236, VRC-01/PGDM- 1400/10E8v4, 10E8.4/iMab, 10E8v4/PGT121-VRC01. Exemplos de bnABs distribuídos in vivo tais como AAV8-VRC07; anticorpo VRC01 anti-HIV codificando mRNA; e 3BNC117 codificando células B geneticamente modificadas (Hartweger et al, J. Exp. Med. (2019), 1301). Potencializadores Farmacocinéticos
[00248] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um potencializador farmacocinético. Exemplos de potencializadores farmacocinéticos que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem cobicistat e ritonavir. Agentes terapêuticos adicionais
[00249] Exemplos de agentes terapêuticos adicionais que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem os compostos descritos nos documentos WO 2004/096286 (Gilead Sciences), WO 2006/015261 (Gilead Sciences), WO 2006/110157 (Gilead Sciences), WO 2012/003497 (Gilead Sciences), WO 2012/003498 (Gilead Sciences), WO 2012/145728 (Gilead Sciences), WO 2013/006738 (Gilead Sciences), WO 2013/159064 (Gilead Sciences), WO 2014/100323 (Gilead Sciences), US 2013/0165489 (University of Pennsylvania), US 2014/0221378 (Japan Tobacco), US
2014/0221380 (Japan Tobacco), WO 2009/062285 (Boehringer Ingelheim), WO 2010/130034 (Boehringer Ingelheim), WO 2013/006792 (Pharma Resources), US 20140221356 (Gilead Sciences), US 20100143301 (Gilead Sciences) e WO 2013/091096 (Boehringer Ingelheim). Vacinas contra HIV
[00250] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com uma vacina contra HIV. Em várias modalidades, a vacina contra HIV provoca uma resposta de células T. Vacinas ilustrativas que podem ser combinadas com os anticorpos e fragementos dos mesmos descritos neste pedido incluem, porém sem limitação, vacinas virais vetorizadas (por exemplo, arenavírus, adenovírus, poxvírus, rabdovírus) assim como vacinas baeadas em ácidos nucleicos (por exemplo, DNA, RNA e RNA autorreplicante). Em algumas modalidades, a vacina anti-HIV compreende um ou mais imunógenos de vacina polipeptídica. Exemplos de vacinas contra HIV que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem vacinas peptídicas, vacinas à base de proteína de subunidade recombinante, vacinas à base de vetores vivos, vacinas à base de DNA, vacinas peptídicas derivadas de CD4, combinações de vacinas, vacinas à base de vetor adenoviral, vacinas adenovirais de Chimp (por exemplo, ChAdOX1, ChAd68, ChAd3 etc), vacinas à base de coxsackievírus, vacinas à base de adenovírus de gorila, vacinas à base de arenavírus vaccines (LCMV, Pichinde), vacinas à base do vírus do sarampo, vacinas à base do vírus varicela-zoster, vacinas à base do vírus parainfluenza humana 3 (PIV3), vacinas à base do poxvírus (vírus da vacínia modificado Ankara (MVA), as cepas NYVAC, e as cepas ALVAC); vacinas à base de rabdovírus, tais como VSV e marabavírus; vacinas à base de alfavírus, tais como vírus da Floresta Semliki, vírus da encefalite equina venezuelana e vírus Sindbis; (vide Lauer, Clinical e Vaccine Immunology, (2017), DOI: 10.1128/CVI.00298-16); vacinas terapêuticas à base de mRNA formulado com LNP; vacinas à base de RNA autorreplicante/RNA auto-amplificante formuladas com LNP, rgp120 (AIDSVAX), ALVAC HIV (vCP1521)/AIDSVAX B/E (gp120) (RV144), vacina à base de gp120 monomérica HIV-1 subtipo C, Remune, ITV-1, Contre Vir, Ad5-ENVA-48, DCVax-001 (CDX-2401), Vacc-4x, Vacc-C5, VAC-3S, adenovírus-5 recombinante de DNA multiclados (rAd5), vacina à base de rAd5 gag-pol env A/B/C, Pennvax-G, Pennvax-GP, Pennvax-G/MVA-CMDR, vacina à base de HIV-TriMix-mRNA, HIV-LAMP-vax, Ad35, Ad35-GRIN, NAcGM3/VSSP ISA-51, vacinas adjuvantadas com poli-ICLC, TatImmune, GTU- multiHIV (FIT-06), gp140[delta]V2.TV1+MF-59, vacina à base de rVSVIN HIV-1 gag, vacina à base de SeV-Gag, AT-20, DNK-4, ad35- Grin/ENV, TBC-M4, HIVAX, HIVAX-2, NYVAC-HIV-PT1, NYVAC-HIV- PT4, DNA-HIV-PT123, rAAV1-PG9DP, GOVX-B11, GOVX-B21, TVI- HIV-1, Ad-4 (Ad4-env Clade C+Ad4-mGag), Paxvax, EN41-UGR7C, EN41-FPA2, PreVaxTat, AE-H, MYM-V101, CombiHIVvac, ADVAX, MYM-V201, MVA-CMDR, DNA-Ad5 gag/pol/nef/nev (HVTN505), MVATG-17401, ETV-01, CDX-1401, rcAD26.MOS1.HIV-Env, vacina à base de Ad26.Mod.HIV, vacina mosaica à base de Ad26.Mod.HIV + MVA + gp140, AGS-004, AVX-101, AVX-201, PEP-6409, SAV-001, ThV-01, TL-01, TUTI-16, VGX-3300, IHV-001, e vacina à base de partículas similares a vírus tal como a vacina à base de pseudovírion, CombiVICHvac, vacina à base da fusão LFn-p24 B/C, vacina de DNA à base de GTU, vacina de gag/pol/nef/env DNA do HIV, vacina anti- TAT HIV, vacina à base de polipeptídios conjugados, vacinas à base de células dendríticas (por exemplo, tal como DermaVir), vacina de DNA à base de gag, GI-2010, vacina à base de gp41 HIV-1, vacina contra HIV (adjuvante PIKA), vacinas à base de peptídeos híbridos do epítopo I i-key/MHC classe II, ITV-2, ITV-3, ITV-4, LIPO-5, vacina à base de Env multiclados, vacina à base de MVA, Pennvax-GP, vacina à base de gag do HIV de vetor de HCMV deficiente em pp71, vacina à base de peptídeo recombinante (infecção por HIV), NCI, vacina à base de rgp160 HIV, vacina à base de RNActive HIV, SCB-703, vacina à base de Tat Oyi, TBC-M4, vacina terapêutica contra HIV, UBI HIV gp120, Vacc-4x + romidepsina, vacina à base de polipeptídio gp120 variante, vacina à base de rAd5 gag-pol env A/B/C, DNA.HTI e MVA.HTI, VRC-HIVDNA016-00-VP + VRC-HIVADV014-00-VP, INO- 6145, JNJ-9220, gp145 C.6980; vacina à base de eOD-GT8 60mer, PD-201401, env (vacina à base de A, B, C, A/E)/gag (C) DNA, vacina à base da proteína gp120 (A,B,C,A/E), PDPHV-201401, Ad4- EnvCN54, vacina à base de EnvSeq-1 Envs HIV-1 (adjuvantada com GLA-SE), HIV p24gag pri, vacina à base de DNA do plasmídio me- boost, vacina à base de vetor de arenavírus (Vaxwave, TheraT), regime de vacinas à base de MVA-BN HIV-1, UBI HIV gp120, vacinas profiláticas à base de mRNA, e TBL-1203HI. Terapia combinada para controle de natalidade (contraceptivo)
[00251] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com um regime de controle de natilidade ou contraceptivo. Agentes terapêuticos usados para controle de natalidade (contraceptivos) que podem ser combinados com um anticorpo desta invenção incluem acetato de ciproterona, desogestrel, dienogest, drospirenona, valerato de estradiol, etinil estradiol, etinodiol, etonogestrel, levomefolato, levonorgestrel, linestrenol, acetato de medroxiprogesterona, mestranol, mifepristona, misoprostol, acetato de nomegestrol, norelgestromina, noretindrona, noretinodrel, norgestimato, ormeloxifeno, acetato de segestersona, acetato de ulipristal, e quaisquer combinações dos mesmos.
[00252] Em uma modalidade, um anticorpo descrito neste pedido, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é combinado com um, dois, três, quatro ou mais agentes terapêuticos adicionais selecionados dentre ATRIPLA® (efavirenz, disoproxil fumarato de tenofovir, e entricitabina); COMPLERA® (EVIPLERA®; rilpivirina, disoproxil fumarato de tenofovir, e entricitabina); STRIBILD® (elvitegravir, cobicistat, disoproxil fumarato de tenofovir, e entricitabina); TRUVADA® (disoproxil fumarato de tenofovir e entricitabina; TDF +FTC); DESCOVY® (tenofovir alafenamida e entricitabina); ODEFSEY® (tenofovir alafenamida, entricitabina, e rilpivirina); GENVOYA® (tenofovir alafenamida, entricitabina, cobicistat, e elvitegravir); adefovir; adefovir dipivoxil; cobicistat; entricitabina; tenofovir; tenofovir disoproxil; disoproxil fumarato de tenofovir; tenofovir alafenamida; hemifumarato de tenofovir alafenamida; TRIUMEQ® (dolutegravir, abacavir, e lamivudina); dolutegravir, sulfato de abacavir, e lamivudina; raltegravir; raltegravir e lamivudina; maraviroc; enfuvirtide; ALUVIA® (KALETRA®; lopinavir e ritonavir); COMBIVIR® (zidovudina e lamivudina; AZT+3TC); EPZICOM® (LIVEXA®; sulfato de abacavir e lamivudina; ABC+3TC); TRIZIVIR® (sulfato de abacavir, zidovudina, e lamivudina; ABC+AZT+3TC); rilpivirina; cloridrato de rilpivirina; sulfato de atazanavir e cobicistat; atazanavir e cobicistat; darunavir e cobicistat; atazanavir; sulfato de atazanavir; dolutegravir; elvitegravir; ritonavir; sulfato de atazanavir e ritonavir; darunavir; lamivudina; prolastin; fosamprenavir; fosamprenavir cálcio efavirenz; etravirina; nelfinavir; mesilato de nelfinavir; interferon; didanosine; stavudine; indinavir; sulfato de indinavir; tenofovir e lamivudina; zidovudina; nevirapina; saquinavir; mesilato de saquinavir; aldesleucina; zalcitabina; tipranavir; amprenavir; delavirdina; mesilato de delavirdina; Radha-108 (receptol); lamivudina e disoproxil fumarato de tenofovir; efavirenz, lamivudina, e disoproxil fumarato de tenofovir; fosfazida; lamivudina, nevirapina, e zidovudina; abacavir; e sulfato de abacavir.
[00253] Em algumas modalidades, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV e um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeos do HIV. Em uma outra modalidade específica, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV, e um composto inibitório da protease do HIV. Em uma modalidade adicional, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV, um inibidor da transcriptase reversa não análogo de nucleosídeos do HIV, e um potencializador farmacocinético. Em certas modalidades, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com pelo menos um inibidor da transcriptase reversa análogo de nucleosídeos do HIV, an integrase inhibitor, e um potencializador farmacocinético. Em uma outra modalidade, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com dois inibidores da transcriptase reversa análogos de nucleosídeos ou nucleotídeos do HIV.
[00254] Em uma certa modalidade, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com sulfato de abacavir, tenofovir, tenofovir disoproxil, disoproxil fumarato de tenofovir, tenofovir disoproxil hemifumarato, tenofovir alafenamida, ou hemifumarato de tenofovir alafenamida.
[00255] Em uma outra modalidade, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com tenofovir, tenofovir disoproxil, disoproxil fumarato de tenofovir, tenofovir alafenamida, ou hemifumarato de tenofovir alafenamida.
[00256] Em ainda uma outra modalidade, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com um primeiro agente terapêutico adicional selecionado do grupo que consiste em sulfato de abacavir, tenofovir, tenofovir disoproxil, disoproxil fumarato de tenofovir, tenofovir alafenamida, e hemifumarato de tenofovir alafenamida, e um agente terapêutico adicional selecionado do grupo que consiste em entricitabina e lamivudina.
[00257] Em uma outra modalidade, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com um primeiro agente terapêutico adicional selecionado do grupo que consiste em tenofovir, tenofovir disoproxil, disoproxil fumarato de tenofovir, tenofovir alafenamida, e hemifumarato de tenofovir alafenamida, e um segundo agente terapêutico adicional, em que o segundo agente terapêutico adicional é entricitabina.
[00258] Em algumas modalidades, um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, é combinado com um primeiro agente terapêutico adicional (um contraceptivo) selecionado do grupo que consiste em acetato de ciproterona, desogestrel, dienogest, drospirenona, valerato de estradiol, etinil estradiol, etinodiol, etonogestrel, levomefolato, levonorgestrel, linestrenol, acetato de medroxiprogesterona, mestranol, mifepristona, misoprostol, acetato de nomegestrol, norelgestromina, noretindrona, noretinodrel, norgestimato, ormeloxifeno, acetato de segestersona, acetato de ulipristal, e quaisquer combinações dos mesmos. Terapia Genética e Terapia Celular
[00259] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenosdescritos neste pedido são combinados com um regime de terapia genética ou terapia celular. Terapia genética e terapia celularincluem, porém sem limitação, modificação genética para silienciar um gene; abordagens genéticas para destruir diretamente as células infectadas; a infusão de células imunes desenhadas para substituir a maior do sistema imunológico próprio do paciente para aumentar a resposta imunológica a células infectadas, ou ativar o sistema imunológico próprio do paciente para destruir as células infectadas, ou encontrar e destruir as células infectadas; abordagens genéticas para modificar a atividade celular para alterar ainda mais a responsividade imune endógena contra a infecção. Exemplos de terapia com células dendríticas incluem AGS-004. Agentes de edição do gene CCR5 incluem SB-728T. Inibidores do gene CCR5 incluem Cal-1. Em algumas modalidades, células T CD4- positivas expressando C34-CCR5/C34-CXCR4 são co-administradas com os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo descritos neste pedido. Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos são coadministrados com terapia de células T autológas transduzidas por AGT ou terapia com o gene AAV-eCD4-Ig. Editores de Genes
[00260] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenosdescritos neste pedido são combinados com um editor de gene, por exemplo, um editor de gene direcionado para HIV. Em várias modalidades, o sistema de edição de genoma pode ser selecionado do grupo que consiste em: um complexo CRISPR/Cas9, um complexo dedo-de-zinco nuclease, um complexo TALEN, um complexo de endonucleases residentes, e um complexo meganucleases. Umm sistema CRISPR/Cas9 vetorizado para HIV ilustrativo inclui, porém sem limitação, EBT-101. Terapia com células T CAR
[00261] Em algumas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenosdescritos neste pedido podem ser coadministrados com uma população de células efetoras imunes geneticamente modificadas para expressar um receptor de antígeno quimérico (CAR), em que o CAR compreende um domínio de ligação ao antígeno do HIV. O antígeno de HIV inclui uma proteína do envelope do HIV ou uma porção da mesma, gp120 ou uma porção da mesma, um sítio de ligação à CD4 na gp120, o sítio de ligação induzida por CD4 na gp120, N glicano na gp120, a V2 da gp120, a região proximal da membrana na gp41. A célula efetora imune é uma célula T ou uma célula NK. Em algumas modalidades, a célula T é uma célula T CD4+, uma célula T CD8+, ou uma combinação das mesmas. As células podem ser autólogas ou alogênicas. Exemplos de CAR-T do HIV incluem terapia com células VC-CAR-T, CMV-N6-CART, anti-CD4 CART, células- tronco hematopoiéticas autólogas geneticamente modificadas para expressar um CD4 CAR e o peptídeo C46. Terapia com células T TCR
[00262] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenosdescritos neste pedido são combinados com uma população de células T TCR. As células T TCR são geneticamente modificadas para visar peptídeos derivados do HIV presentes na superfície das células infectadas pelo vírus. Terapia com células B
[00263] Em certas modalidades, os anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos descritos neste pedido são combinados com uma população de células B geneticamente modificadas para expressar anticorpos amplamente neutralizantes, tal como 3BNC117 (Hartweger, et al, J. Exp. Med. 2019, 1301, Moffett, et al., Sci. Immunol. 4, eaax0644 (2019) 17 May 2019). Kits
[00264] Esta invenção também abrange kits compreendendo um ou mais anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos, descritos neste pedido, ou conjugados dos mesmos. Em um exemplo, esta invenção apresenta uma embalagem ou kit farmacêutico compreendendo um ou mais recipientes (por exemplo, frascos, ampoles) preenchidos com um ou mais dos ingredientes das composições farmacêuticas descritos neste pedido, tal como um ou mais anticorpos apresentados neste pedido. Em alguns casos, os kits contêm uma composição farmacêutica descrita neste pedido. Em uma modalidade, são apresentados kits compreendendo um anticorpo descrito neste pedido, ou uma composição farmacêutica do mesmo, em combinação com um ou mais (por exemplo, um, dois, três, um ou dois, ou um a três) agentes terapêuticos adicionais (tais como descritos acima)
[00265] Em algumas modalidades, os kits compreendem uma ou mais doses unitárias dos anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos, ou do polinucleotídeo ou polinucleotídeos, em um ou mais recipientes. Em algumas modalidades, os kits compreendem um ou mais doses unitárias dos anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos e um segundo agente (por exemplo, um ou mais agentes adicionais) para tratar uma infecção por HIV in separate recipientes. Em algumas modalidades, os kits compreendem ainda um ou mais doses unitárias de um agonista de receptores toll-like (TLR). Em algumas modalidades, o agonista de TLR é um agonista de TLR7 ou um agonista de TLR8. Em algumas modalidades, o agonista de TLR7 é selecionado do grupo que consiste em vesatolimod, imiquimod, e resiquimod. Em algumas modalidades, os kits compreendem um ou mais doses unitárias dos anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos, descritos neste pedido, e um ou mais doses unitárias de um segundo, terceiro ou quarto anticorpo anti-HIV, ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, em que o segundo, terceiro ou quarto anticorpos anti-HIV, ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo, ligam-se a epítopos ou regiões da gp120 selecionados do grupo que consiste em: (i) terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332; (ii) segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env; (iii) interface gp120/gp41; ou (iv) face silenciosa da gp120. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo anti-HIV ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo, liga-se à terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo anti-HIV compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em GS-9722, PGT-121, PGT-122, PGT-123, PGT-124, PGT-125, PGT-126, PGT-128, PGT-130, PGT- 133, PGT-134, PGT-135, PGT-136, PGT-137, PGT-138, PGT-139, 10- 1074, VRC24, 2G12, BG18, 354BG8, 354BG18, 354BG42, 354BG33, 354BG129, 354BG188, 354BG411, 354BG426, DH270.1, DH270.6, PGDM12, VRC41.01, PGDM21, PCDN-33A, BF520.1 e VRC29.03. Em algumas modalidades, o segundo anticorpo anti-HIV ou fragmentos de ligação a antígenos do mesmo compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em GS-9722 e PGT-121. Em algumas modalidades, os kits compreendem duas ou mais doses unitárias, em que as doses unitárias são as mesmas. Em algumas modalidades, os kits compreendem duas ou mais doses unitárias, em que as doses unitárias são diferentes.
[00266] Opcionalmente associado a tais recipientes pode haver um aviso na forma prescrita por algum órgão governamental regulador da produção, uso ou comercialização de fármacos ou produtos biológicos, sendo que este aviso reflete a aprovação do órgão regulador da produção, uso ou comercialização para administração em seres humanos.
Exemplos
[00267] Os exemplos a seguir são oferecidos para ilustrar as várias modalidades e não devem ser interpretados como limitativos do escopo do presente pedido. Na medida em que são mencionados materiais específicos, isto é feito simplesmente com fins ilustrativos e não se destina a limitar o presente pedido. A pessoa versada na técnica consegue desenvolver meios ou reagentes equivalentes sem uso de capacidade inventiva e sem se afastar do escopo do presente pedido. Exemplo 1: Atividade de ADCC do Anticorpo A
[00268] A ADCC de células T CD4+ alvo infectadas com HIV pelos anticorpos foi analisada in vitro usando células CEM.NKr.CCR5+Luc+ infectadas com HIV e células efetoras NK humanas primáras de doadores saudáveis independentes.
[00269] O estudo incluiu tanto vírus sensíveis ao PGT121 quanto vírus resistentes ao PGT121 e anticorpos tendo modificações para o Fc (Fc-modificado) do Anticorpo A. Tabela 1 resume a potência de destruição e a eficácia dos Anticorpos A, A-1, A-2, A-3, A-4, A-5 e A-6, quando analisados na presença de 5 mg/mL de IgG sérica humana e usando células NK humanas primárias de três doadores humanos independentes e células CEM.NKr.CCR5+Luc+ infectados com os isolados virais 92US712 ou 92US657. Tabela 1. Atividade de ADCC Células infectadas com 92US712 ID: A A-2 A-1 A-3 A-4 A-5 A-6 Doador de NK 1 48 76 77 77 78 79 68 Emax (%) Doador de NK 2 7 60 62 59 61 61 54 Doador de NK 3 27 60 62 67 64 66 51 Doador de NK 1 2,23 0,18 0,19 0,07 0,20 0,19 0,27 EC50 Doador de NK 2 >100 0,08 0,09 0,08 0,13 0,08 0,54 (µg/mL) Doador de NK 3 3,63 0,20 0,16 0,20 0,40 0,09 0,18
Células infectadas com 92US657 ID: A A-2 A-1 A-3 A-4 A-5 A-6 Doador de NK 1 2 59 58 49 52 58 54 Emax (%) Doador de NK 2 0 51 50 49 53 61 53 Doador de NK 3 0 56 52 56 50 61 52 Doador de NK 1 >100 0,54 0,74 0,68 0,60 0,57 3,93 EC50 Doador de NK 2 >100 0,81 0,55 0,67 1,21 0,83 1,21 (µg/mL) Doador de NK 3 >100 1,13 0,37 1,39 1,64 0,76 3,21 EC50 registrado como >100 μg/mL para respostas à dose com Emax < 10%
[00270] Os anticorpos Fc-modificados apresentaram destruição aumentada das células T CD4 alvo infectadas com HIV-1 em comparação ao Anticorpo A in vitro por células NK humanas primárias de doadores independentes e células alvo infectadas com diferentes isolados virais (Tabela 1). Destruição mínima mediada pelo Anticorpo A (Emax <10%) com células NK primárias de alguns doadores, enquanto que com células NK de outros doadores foi detectável. Comparado ao Anticorpo A, os anticorpos Fc-modificados apresentaram potência aumentada (EC50) e destruição mácima (Emax) das células infectadas com HIV, conforme observado nos ensaios de ADCC realizadas com células NK humanas primárias de três doadores saudáveis indepen- dentes (Tabela 1). O aumento observado na potência variou de cerca de 10 a 40 vezes com os doadores nos quais o Anticorpo A foi ativo. Foi gerado um painel de 22 culturas de células alvo infectadas infectando-se células CEM.NKr.CCR5+Luc+ com 22 clones virais únicos resistentes à neutralização (por exemplo, destruição de células infectdas) por PGT121.60 (vide documento WO 2017/106346). A atividade de ADCC e a amplitudde do Anticorpo A-1 e do Anticorpo PGT121.60 foram avaliadas contra esse painel de células alvo infectadas usando células efetoras NK humanas primárias de doadores saudáveis na ausência de IgG sérica competititva. 86% (19/22) das culturas de células alvo infectadas resistentes à ADCC por PGT121.60 foram destruídas pelo Anticorpo A-1 (Emax >30%). A ADCC mediada pelo Anticorpo A-1 das células infectadas com cepas de HIV que eram resistentes ao PGT121.60. Os resultados desta avaliação estão resumidos na Tabela 2. Tabela 2. Destruição de células infectadas de PGT121.60 resistentes pelo Anticorpo A-1 e pelo Anticorpo PGT121.60. Os números representam a ADCC Emax (%) média fde dois doadores.
ADCC Emax (%) Vírus PGT121.60 Anticorpo A-1 VS001 1,0 26,8 VS002 2,0 22,9 VS003 3,0 44,4 VS004 4,0 31,7 VS007 9 45 VS008 22 60 VS010 10 69 VS011 8,0 34,6 VS017 9,0 40,5 VS023 10,0 0,8 VS026 11,0 31,3 VS029 12,0 1,5 VS030 13,0 39,3 VS032 14,0 29,1 VS033 15,0 31,1 VS034 16,0 40,6 VS038 17,0 36,1 VS042 18,0 39,6 VS044 19,0 31,4 VS046 20,0 41,9 VS049 21,0 7,8
ADCC Emax (%) Vírus PGT121.60 Anticorpo A-1 VS052 22,0 34,0
[00271] A citotoxicidade celular anticorpo-dependente também foi avaliada usando-se células T CD4+ primárias infectadas com HIV como células alvo e células NK primárias autólogas, monócitos e neutrófilos como células efetoras.
[00272] As células NK, os monócitos e as células T CD4+ foram isolados de PBMCs obtidas de doadores saudáveis, ao passo que os neutrófilos foram isoladoas do sangue total de doadores saudáveis. Células T CD4+ totais foram infectadas ("spinfected") na ausência de ativação de células T para manter baixos os níveis de expressão de antígenos da superfície celular e mimetizar potencialmente os níveis de expressão de antígeno nas células T CD4+ infectadas de forma latente. Os isolados virais usados foram 8176 e 92US076 (sensível à neutralização pelo anticorpo A) e 8398 (resistente à neutralização pelo anticorpo A). Os ensaios foram realizados na presença de 1 mg/ml IgG sérica humana inespecífica que compete com mAbs efetores pela ligação ao FcγR. A destruição anticorpo-dependente foi medida pela redução em células T p24+ CD4 por citometria de fluxo.
[00273] Os valores da AUC de destruição, EC50 (µg/mL) e Emax (%)estão apresentados nas Tabelas 3-11. Tabela 3. AUC de destruição por células NK AUC (NK) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 0117 49 108 103 168 8176 3594 18 142 139 205 0117 26 116 78 18 302076 3594 28 76 101 26 0117 20 4 0 203 8398 3594 0 6 15 211
Tabela 4. EC50 de destruição por células NK EC50 (NK) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 0117 >100 1,101 0,949 0,246 8176 3594 >100 0,518 1,350 0,051 0117 >100 1,701 7,602 100,000 302076 3594 >100 2,613 3,114 72,050 0117 >100 >100 >100 0,339 8398 3594 >100 >100 >100 0,220 Tabela 5. Emax de destruição por células NK Emax (NK) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 0117 <20 56 54 65 8176 3594 <20 62 69 62 0117 <20 68 69 20 302076 3594 <20 49 64 45 0117 <20 <20 <20 79 8398 3594 <20 <20 <20 81 Tabela 6. AUC de destruição por monócitos AUC (Monócitos) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 0117 0 83 87 122 8176 3594 17 141 159 157 0117 24 54 61 24 302076 3594 138 166 158 108 0117 0 0 4 53 8398 3594 0 13 4 186 Tabela 7. EC50 de destruição por monócitos EC50 (Monócitos) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 0117 >100 0,402 0,490 0,232 8176 3594 >100 0,309 0,202 0,010 302076 0117 10,570 6,514 7,236 >100
EC50 (Monócitos) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 3594 0,006 0,062 0,088 0,019 0117 >100 >100 >100 0,728 8398 3594 >100 >100 >100 0,201 Tabela 8. Emax de destruição por monócitos Emax (Monócitos) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 0117 <20 34 35 44 8176 3594 <20 47 57 40 0117 24 46 47 20 302076 3594 33 49 54 30 0117 <20 <20 <20 25 8398 3594 <20 <20 <20 67 Tabela 9. AUC de destruição por neutrófilos AUC (Neutrófilos) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 92132 41 74 89 125 8176 92602 21 47 45 71 Tabela 10. EC50 de destruição por neutrófilos EC50 (Neutrófilos) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 92132 >100 0,231 0,307 0,012 8176 92602 >100 1,097 0,199 0,232 Tabela 11. Emax de destruição por neutrófilos Emax (Neutrófilos) Vírus Doador A A-1 1.52.64-1 PGT121.60 92132 <20 29 37 34 8176 92602 <20 23 <20 25
[00274] Os resultados apresentados nas Tabelas 3-11 demonstram que, consistente com a ADCC mediada por NK de células CEM, os mAbs Fc-geneticamente modificados (1.52.64-1, A-1 e PGT121.60) também apresentaram destruição aumentada de células T CD4 primárias infectadas com HIV por células NK, monócitos e neutrófilos em comparação com o Anticorpo A. Exemplo 2: Operação de Anticorpos
[00275] As sequências do Anticorpo A e Anticorpo B foram comparados com a linhagem germinativa humana, revelando diversas mutações, inserções e deleções tanto dentro quanto fora das CDRs. Em resumo, uma região contígua do malpareamento da linhagem germinativa foi identificada na região de estrutura 3 da cadeia pesada (HC FR3) na posição 72-78 da cadeia pesada (HC). Quatro inserções de aminoácidos foram identificadas entre a posição 74 e 75 na HC FR3. Uma deleção da linhagem germinativa foi identificada na CDR L1 nas posições 27-30 da cadeia leve (LC). Uma região contígua do malpareamento da linhagem germinativa foi identificada na região de estrutura 3 da cadeia leve (LC FR3) na posição 65-77. Um motivo de glicosilação de consenso N72 ligado foi identificado na LC FR3 na posição 72-74. Uma deleção da linhagem germinativa na CDR L3 foi identificada na posição 92-95. Dois resíduos que são altamente conservados nas cadeias leves da IgG humana (F98 e G99) foram mutados tanto no Anticorpo A quanto no Anticorpo B.
[00276] Foram conduzidos estudos de espectrometria de massa de ExpiCHO expressa no Anticorpo A para determinar se havia glicosilação em LC na posição 72-74. Ensaios de estresse aceletado e potência foram conduzidos para verificar se havia riscos químicos (por exemplo, oxidação, desamidação etc.) presentes no anticorpo A ou suas variantes. Devido ao alto grau de hipermutação somática, foi realizado um mapeamento de epítopos de células T da sequência primária para identificar motivos potencialmente imunogênicos. Adicionalmente, uma operação iterativa de engenharia de proteínas foi conduzida com a finalidade de gerar novos anticorpos sem o motivo de glicosilação N72 e/ou com uma correspondência geral mais próxima com a linha germinativa humana. Sem querermos nos ater a quaisquer teorias, esta operação pode produzir novos anticorpos que tenham propriedades desenadas incluindo, porém sem limitação, um risco de imunogenicidade reduzido, potência e amplitudade de neutralização do HIV igual ou melhor a do Anticorpo A ou Anticorpo B, e/ou propriedades biofísicas e de desenvolvimento aprimoradas.
[00277] A Tabela 12 apresenta as SEQ ID NOs das CDRs da VH e da VL (de acordo com a definição de Kabat) dos anticorpos anti-gp120 descritos neste pedido. Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3 A-1 137 138 139 140 141 142 A 137 138 139 140 141 142 1v2-1 137 138 139 140 141 142
1.2.1-1 137 138 139 140 141 142
1.1.2-1 137 138 139 140 141 142
1.2.2-1 137 138 139 140 141 142
1.3.1-1 137 138 139 140 141 142
1.4.1-1 137 138 139 140 141 142
1.5.1-1 137 138 139 140 141 142
1.6.1-1 137 138 139 140 141 142
1.7.1-1 137 138 139 140 141 142
1.8.1-1 137 138 139 140 141 142
1.9.1-1 137 138 139 140 141 142
1.10.1-1 159 138 139 140 141 142
1.11.1-1 159 138 139 140 141 142
1.15.1-1 137 160 139 140 141 142
1.16.1-1 137 161 139 140 141 142
1.17.1-1 137 162 139 140 141 142
1.18.1-1 137 163 139 140 141 142
1.19.1-1 137 138 139 140 141 142
1.20.1-1 137 138 139 140 141 142
Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3
1.21.1-1 137 138 139 140 141 142
1.22.1-1 137 138 139 140 141 142
1.24.1-1 137 138 139 140 141 142
1.25.1-1 137 138 139 140 141 142
1.26.1-1 137 138 139 140 141 142
1.27.1-1 137 138 164 140 141 142
1.28.1-1 137 138 164 140 141 142
1.29.1-1 137 138 139 140 141 142
1.30.1-1 137 138 139 140 141 142
1.1.3-1 137 138 139 140 141 142
1.1.4-1 137 138 139 140 141 142
1.1.5-1 137 138 139 140 141 142
1.1.6-1 137 138 139 140 165 142
1.1.7-1 137 138 139 140 166 142
1.1.8-1 137 138 139 140 168 142
1.1.9-1 137 138 139 140 167 142
1.1.10-1 137 138 139 140 141 142
1.1.11-1 137 138 139 140 141 142
1.1.12-1 137 138 139 140 141 142
1.1.13-1 137 138 139 140 141 142
1.1.14-1 137 138 139 140 141 142
1.1.15-1 137 138 139 140 141 142
1.1.16-1 137 138 139 140 141 142
1.1.17-1 137 138 139 140 141 142
1.1.18-1 137 138 139 140 141 142
1.1.19-1 137 138 139 140 141 142
1.1.20-1 137 138 139 140 141 142
1.1.21-1 137 138 139 140 141 142
1.1.22-1 137 138 139 140 141 142
1.1.23-1 137 138 139 140 141 142
1.1.24-1 137 138 139 140 141 142
1.1.25-1 137 138 139 140 141 142
Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3
1.1.26-1 137 138 139 140 141 142
1.1.27-1 137 138 139 140 141 142
1.1.28-1 137 138 139 140 141 142
1.1.29-1 137 138 139 140 141 142
1.1.30-1 137 138 139 140 141 142
1.12.15-1 137 138 139 140 141 142
1.13.15-1 137 138 139 140 141 142
1.14.15-1 137 138 139 140 141 142
1.12.17-1 137 138 139 140 141 142
1.13.17-1 137 138 139 140 141 142
1.14.17-1 137 138 139 140 141 142
1.31.1-1 137 138 139 140 141 142
1.32.1-1 137 138 139 140 141 142
1.33.1-1 137 138 139 140 141 142
1.34.1-1 137 138 164 140 141 142
1.35.1-1 159 138 164 140 141 142
1.36.1-1 159 138 164 140 141 142
1.1.31-1 137 138 139 140 141 142
1.31.31-1 137 138 139 140 141 142
1.32.31-1 137 138 139 140 141 142
1.33.31-1 137 138 139 140 141 142
1.34.31-1 137 138 164 140 141 142
1.35.31-1 159 138 164 140 141 142
1.36.31-1 159 138 164 140 141 142
1.1.32-1 137 138 139 140 141 142
1.31.32-1 137 138 139 140 141 142
1.32.32-1 137 138 139 140 141 142
1.33.32-1 137 138 139 140 141 142
1.34.32-1 137 138 164 140 141 142
1.35.32-1 159 138 164 140 141 142
1.36.32-1 159 138 164 140 141 142
1.1.33-1 137 138 139 140 166 142
Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3
1.31.33-1 137 138 139 140 166 142
1.32.33-1 137 138 139 140 166 142
1.33.33-1 137 138 139 140 166 142
1.34.33-1 137 138 164 140 166 142
1.35.33-1 159 138 164 140 166 142
1.36.33-1 159 138 164 140 166 142
1.1.34-1 137 138 139 140 166 142
1.31.34-1 137 138 139 140 166 142
1.32.34-1 137 138 139 140 166 142
1.33.34-1 137 138 139 140 166 142
1.34.34-1 137 138 164 140 166 142
1.35.34-1 159 138 164 140 166 142
1.36.34-1 159 138 164 140 166 142
1.1.35-1 137 138 139 140 166 142
1.31.35-1 137 138 139 140 166 142
1.32.35-1 137 138 139 140 166 142
1.33.35-1 137 138 139 140 166 142
1.34.35-1 137 138 164 140 166 142
1.35.35-1 159 138 164 140 166 142
1.36.35-1 159 138 164 140 166 142
1.1.36-1 137 138 139 140 166 142
1.31.36-1 137 138 139 140 166 142
1.32.36-1 137 138 139 140 166 142
1.33.36-1 137 138 139 140 166 142
1.34.36-1 137 138 164 140 166 142
1.35.36-1 159 138 164 140 166 142
1.36.36-1 159 138 164 140 166 142
1.1.37-1 137 138 139 140 141 142
1.1.38-1 137 138 139 140 141 142
1.1.39-1 137 138 139 140 141 142
1.1.40-1 137 138 139 140 141 142
1.1.41-1 137 138 139 140 141 142
Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3
1.1.42-1 137 138 139 140 141 142
1.1.43-1 137 138 139 140 141 142
1.1.44-1 137 138 139 140 141 142
1.1.45-1 137 138 139 140 141 142
1.1.46-1 137 138 139 140 141 142
1.1.47-1 137 138 139 140 141 142
1.1.48-1 137 138 139 140 141 142
1.1.49-1 137 138 139 140 141 142
1.37.51-1 137 138 139 140 141 142
1.8.52-1 137 138 139 140 141 142
1.1.54-1 137 138 139 140 141 142 A-2 137 138 139 140 141 142 B-1 153 138 154 140 141 142
2.1.2-1 153 138 154 140 141 142
1.1.64-1 137 138 139 140 141 142
1.1.67-1 137 138 139 140 141 142
1.1.72-1 137 138 139 140 141 142
1.1.75-1 137 138 139 140 141 142
1.1.78-1 137 138 139 140 141 142 A-3 137 138 139 140 141 142 A-4 137 138 139 140 141 142 A-5 137 138 139 140 141 142 A-6 137 138 139 140 141 142
1.41.5-1 137 138 139 140 141 142
1.41.81-1 137 138 139 140 141 142
1.1.82-1 137 138 139 140 141 142
1.41.83-1 137 138 139 140 141 142
1.1.84-1 137 138 139 140 141 142
1.41.85-1 137 138 139 140 141 142
1.41.86-1 137 138 139 140 141 142
1.41.87-1 137 138 139 140 141 142
1.1.88-1 137 138 139 140 141 142
Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3
1.41.89-1 137 138 139 140 141 142
1.1.90-1 137 138 139 140 141 142
1.41.91-1 137 138 139 140 141 142
1.41.92-1 137 138 139 140 141 142
1.41.93-1 137 138 139 140 141 142
1.1.94-1 137 138 139 140 141 142
1.41.95-1 137 138 139 140 141 142
1.1.96-1 137 138 139 140 141 142
1.41.97-1 137 138 139 140 141 142
1.41.98-1 137 138 139 140 141 142
1.41.99-1 137 138 139 140 141 142
1.1.100-1 137 138 139 140 141 142
1.41.101-1 137 138 139 140 141 142
1.1.102-1 137 138 139 140 141 142
1.41.103-1 137 138 139 140 141 142
1.1.110-1 137 138 139 140 141 142
1.1.111-1 137 138 139 140 141 142
1.1.112-1 137 138 139 140 141 142
1.1.113-1 137 138 139 140 141 142
2.1.3-1 153 138 154 140 141 142
2.1.4-1 153 138 154 140 141 142
2.2.1-1 137 138 139 140 141 142
2.3.1-1 153 138 139 140 141 142
3.1.8-1 137 138 139 140 141 142
2.2.8-1 137 138 139 140 141 142
2.3.8-1 153 138 139 140 141 142
3.1.9-1 137 138 139 140 141 142
2.2.9-1 137 138 139 140 141 142
2.3.9-1 153 138 139 140 141 142
1.1.115-1 137 138 139 140 141 142
3.1.10-1 137 138 139 140 141 142
2.2.10-1 137 138 139 140 141 142
Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3
2.3.10-1 153 138 139 140 141 142
1.1.116-1 137 138 139 140 141 142
3.1.11-1 137 138 139 140 141 142
2.2.11-1 137 138 139 140 141 142
2.3.11-1 153 138 139 140 141 142
1.1.117-1 137 138 139 140 141 142
3.1.12-1 137 138 139 140 141 142
2.2.12-1 137 138 139 140 141 142
2.3.12-1 153 138 139 140 141 142
1.1.118-1 137 138 139 140 141 142
3.1.13-1 137 138 139 140 141 142
2.2.13-1 137 138 139 140 141 142
2.3.13-1 153 138 139 140 141 142
3.1.14-1 137 138 139 140 141 142
2.2.14-1 137 138 139 140 141 142
2.3.14-1 153 138 139 140 141 142
3.1.5-1 137 138 139 140 141 142
2.2.5-1 137 138 139 140 141 142
2.3.5-1 153 138 139 140 141 142
3.1.15-1 137 138 139 140 141 142
2.2.15-1 137 138 139 140 141 142
2.3.15-1 153 138 139 140 141 142
1.1.119-1 137 138 139 140 141 142
3.1.7-1 137 138 139 140 141 142
2.2.7-1 137 138 139 140 141 142
2.3.7-1 153 138 139 140 141 142
3.1.2-1 137 138 139 140 141 142
2.2.2-1 137 138 139 140 141 142
2.3.2-1 153 138 139 140 141 142
3.1.16-1 137 138 139 140 141 142
2.2.16-1 137 138 139 140 141 142
2.3.16-1 153 138 139 140 141 142
Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3
3.1.17-1 137 138 139 140 141 142
2.2.17-1 137 138 139 140 141 142
2.3.17-1 153 138 139 140 141 142
3.1.18-1 137 138 139 140 141 142
2.2.18-1 137 138 139 140 141 142
2.3.18-1 153 138 139 140 141 142
1.1.120-1 137 138 139 140 141 142
3.1.19-1 137 138 139 140 141 142
2.2.19-1 137 138 139 140 141 142
2.3.19-1 153 138 139 140 141 142
1.1.121-1 137 138 139 140 141 142
3.1.20-1 137 138 139 140 141 142
2.2.20-1 137 138 139 140 141 142
2.3.20-1 153 138 139 140 141 142
1.1.122-1 137 138 139 140 141 142
1.1.123-1 137 138 139 140 141 142
1.1.124-1 137 138 139 140 141 142
1.1.125-1 137 138 139 140 141 142
1.1.126-1 137 138 139 140 141 142
1.1.127-1 137 138 139 140 141 142
1.1.128-1 137 138 139 140 141 142
1.1.129-1 137 138 139 140 141 142
1.1.130-1 137 138 139 140 141 142
1.1.131-1 137 138 139 140 141 142
1.1.132-1 137 138 139 140 141 142
1.1.133-1 137 138 139 140 141 142
1.1.134-1 137 138 139 140 141 142
1.1.135-1 137 138 139 140 141 142
1.1.138-1 137 138 139 570 141 142
1.42.1-1 137 138 139 140 141 142
1.43.1-1 137 138 139 140 141 142
1.44.1-1 137 138 139 140 141 142
Tabela 12. SEQ ID NOs das CDRs da VH e da CL dos Anticorpos Nome do Anticorpo VHCDR1 VHCDR2 VHCDR3 VLCDR1 VLCDR2 VLCDR3
1.45.1-1 137 138 139 140 141 142
1.46.1-1 153 138 139 140 141 142
1.47.1-1 137 138 139 140 141 142
1.49.1-1 137 138 139 140 141 142
1.50.1-1 137 138 139 140 141 142
1.51.1-1 137 138 154 140 141 142
1.1.104-1 137 138 139 140 141 142 3-1 137 138 139 140 141 142
1.52.1-1 137 138 139 140 141 142
1.52.64-1 137 138 139 140 141 142
1.52.90 137 138 139 140 141 142
2.4.1-1 153 138 139 140 141 142
[00278] A Tabela 13 apresenta as SEQ ID NOs da VH, VL, cadeia pesada e cadeia leve dos anticorpos anti-gp120 descritos neste pedido. Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC B 181 222 1 48 A-1 182 223 2 49 A 182 223 3 49 C-1 183 224 4 50 1v2-1 184 223 5 49
1.2.1-1 185 223 6 49
1.1.2-1 182 225 2 50
1.2.2-1 185 225 6 50
1.3.1-1 186 223 7 49
1.4.1-1 187 223 8 49
1.5.1-1 188 223 9 49
1.6.1-1 189 223 10 49
1.7.1-1 190 223 11 49
Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC
1.8.1-1 191 223 12 49
1.9.1-1 192 223 13 49
1.10.1-1 193 223 14 49
1.11.1-1 194 223 15 49
1.15.1-1 195 223 16 49
1.16.1-1 196 223 17 49
1.17.1-1 197 223 18 49
1.18.1-1 198 223 19 49
1.19.1-1 199 223 20 49
1.20.1-1 200 223 21 49
1.21.1-1 201 223 22 49
1.22.1-1 202 223 23 49
1.24.1-1 203 223 24 49
1.25.1-1 204 223 25 49
1.26.1-1 205 223 26 49
1.27.1-1 206 223 27 49
1.28.1-1 207 223 28 49
1.29.1-1 208 223 29 49
1.30.1-1 209 223 30 49
1.1.3-1 182 226 2 51
1.1.4-1 182 227 2 52
1.1.5-1 182 228 2 53
1.1.6-1 182 229 2 54
1.1.7-1 182 230 2 55
1.1.8-1 182 231 2 56
1.1.9-1 182 232 2 57
1.1.10-1 182 233 2 58
1.1.11-1 182 234 2 59
1.1.12-1 182 235 2 60
1.1.13-1 182 236 2 61
1.1.14-1 182 237 2 62
1.1.15-1 182 238 2 63
Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC
1.1.16-1 182 239 2 64
1.1.17-1 182 240 2 65
1.1.18-1 182 241 2 66
1.1.19-1 182 242 2 67
1.1.20-1 182 243 2 68
1.1.21-1 182 244 2 69
1.1.22-1 182 245 2 70
1.1.23-1 182 246 2 71
1.1.24-1 182 247 2 72
1.1.25-1 182 248 2 73
1.1.26-1 182 249 2 74
1.1.27-1 182 250 2 75
1.1.28-1 182 251 2 76
1.1.29-1 182 252 2 77
1.1.30-1 182 253 2 78
1.12.15-1 210 238 31 63
1.13.15-1 211 238 32 63
1.14.15-1 212 238 33 63
1.12.17-1 210 240 31 65
1.13.17-1 211 240 32 65
1.14.17-1 212 240 33 65
1.31.1-1 213 223 34 49
1.32.1-1 214 223 35 49
1.33.1-1 215 223 36 49
1.34.1-1 216 223 37 49
1.35.1-1 217 223 38 49
1.36.1-1 218 223 39 49
1.1.31-1 182 254 2 79
1.31.31-1 213 254 34 79
1.32.31-1 214 254 35 79
1.33.31-1 215 254 36 79
1.34.31-1 216 254 37 79
Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC
1.35.31-1 217 254 38 79
1.36.31-1 218 254 39 79
1.1.32-1 182 255 2 80
1.31.32-1 213 255 34 80
1.32.32-1 214 255 35 80
1.33.32-1 215 255 36 80
1.34.32-1 216 255 37 80
1.35.32-1 217 255 38 80
1.36.32-1 218 255 39 80
1.1.33-1 182 256 2 81
1.31.33-1 213 256 34 81
1.32.33-1 214 256 35 81
1.33.33-1 215 256 36 81
1.34.33-1 216 256 37 81
1.35.33-1 217 256 38 81
1.36.33-1 218 256 39 81
1.1.34-1 182 257 2 82
1.31.34-1 213 257 34 82
1.32.34-1 214 257 35 82
1.33.34-1 215 257 36 82
1.34.34-1 216 257 37 82
1.35.34-1 217 257 38 82
1.36.34-1 218 257 39 82
1.1.35-1 182 258 2 83
1.31.35-1 213 258 34 83
1.32.35-1 214 258 35 83
1.33.35-1 215 258 36 83
1.34.35-1 216 258 37 83
1.35.35-1 217 258 38 83
1.36.35-1 218 258 39 83
1.1.36-1 182 259 2 84
1.31.36-1 213 259 34 84
Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC
1.32.36-1 214 259 35 84
1.33.36-1 215 259 36 84
1.34.36-1 216 259 37 84
1.35.36-1 217 259 38 84
1.36.36-1 218 259 39 84
1.1.37-1 182 260 2 85
1.1.38-1 182 261 2 86
1.1.39-1 182 262 2 87
1.1.40-1 182 263 2 88
1.1.41-1 182 264 2 89
1.1.42-1 182 265 2 90
1.1.43-1 182 266 2 91
1.1.44-1 182 267 2 92
1.1.45-1 182 268 2 93
1.1.46-1 182 269 2 94
1.1.47-1 182 270 2 95
1.1.48-1 182 271 2 96
1.1.49-1 182 272 2 97
1.37.51-1 219 273 40 98
1.8.52-1 191 274 12 99
1.1.54-1 182 275 2 100 A-2 182 223 41 49 B-1 220 276 42 101
2.1.2-1 220 277 42 102
1.1.64-1 182 278 2 103
1.1.67-1 182 279 2 104
1.1.72-1 182 280 2 105
1.1.75-1 182 281 2 106
1.1.78-1 182 282 2 107 A-3 182 223 43 49 A-4 182 223 44 49 A-5 182 223 45 49
Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC A-6 182 223 46 49
1.41.5-1 221 228 47 53
1.41.81-1 221 283 47 108
1.1.82-1 182 284 2 109
1.41.83-1 221 285 47 110
1.1.84-1 182 286 2 111
1.41.85-1 221 287 47 112
1.41.86-1 221 288 47 113
1.41.87-1 221 289 47 114
1.1.88-1 182 290 2 115
1.41.89-1 221 291 47 116
1.1.90-1 182 292 2 117
1.41.91-1 221 293 47 118
1.41.92-1 221 294 47 119
1.41.93-1 221 295 47 120
1.1.94-1 182 296 2 121
1.41.95-1 221 297 47 122
1.1.96-1 182 298 2 123
1.41.97-1 221 299 47 124
1.41.98-1 221 300 47 125
1.41.99-1 221 301 47 126
1.1.100-1 182 302 2 127
1.41.101-1 221 303 47 128
1.1.102-1 182 304 2 129
1.41.103-1 221 305 47 130
1.1.110-1 182 306 2 131
1.1.111-1 182 307 2 132
1.1.112-1 182 308 2 133
1.1.113-1 182 309 2 134
2.1.3-1 220 310 42 135
2.1.4-1 220 311 42 136
2.2.1-1 465 276 517 101
Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC
2.3.1-1 466 276 518 101
3.1.8-1 182 479 2 531
2.2.8-1 465 479 517 531
2.3.8-1 466 479 518 531
3.1.9-1 182 480 2 532
2.2.9-1 465 480 517 532
2.3.9-1 466 480 518 532
1.1.115-1 182 481 2 533
3.1.10-1 182 482 2 534
2.2.10-1 465 482 517 534
2.3.10-1 466 482 518 534
1.1.116-1 182 483 2 535
3.1.11-1 182 484 2 536
2.2.11-1 465 484 517 536
2.3.11-1 466 484 518 536
1.1.117-1 182 485 2 537
3.1.12-1 182 486 2 538
2.2.12-1 465 486 517 538
2.3.12-1 466 486 518 538
1.1.118-1 182 487 2 539
3.1.13-1 182 488 2 540
2.2.13-1 465 488 517 540
2.3.13-1 466 488 518 540
3.1.14-1 182 489 2 541
2.2.14-1 465 489 517 541
2.3.14-1 466 489 518 541
3.1.5-1 182 491 2 542
2.2.5-1 465 491 517 542
2.3.5-1 466 491 518 542
3.1.15-1 182 492 2 543
2.2.15-1 465 492 517 543
2.3.15-1 466 492 518 543
Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC
1.1.119-1 182 493 2 544
3.1.7-1 182 494 2 545
2.2.7-1 465 494 517 545
2.3.7-1 466 494 518 545
3.1.2-1 182 277 2 102
2.2.2-1 465 277 517 102
2.3.2-1 466 277 518 102
3.1.16-1 182 495 2 546
2.2.16-1 465 495 517 546
2.3.16-1 466 495 518 546
3.1.17-1 182 496 2 547
2.2.17-1 465 496 517 547
2.3.17-1 466 496 518 547
3.1.18-1 182 497 2 548
2.2.18-1 465 497 517 548
2.3.18-1 466 497 518 548
1.1.120-1 182 498 2 549
3.1.19-1 182 499 2 550
2.2.19-1 465 499 517 550
2.3.19-1 466 499 518 550
1.1.121-1 182 500 2 551
3.1.20-1 182 501 2 552
2.2.20-1 465 501 517 552
2.3.20-1 466 501 518 552
1.1.122-1 182 502 2 553
1.1.123-1 182 503 2 554
1.1.124-1 182 504 2 555
1.1.125-1 182 505 2 556
1.1.126-1 182 506 2 557
1.1.127-1 182 507 2 558
1.1.128-1 182 508 2 559
1.1.129-1 182 509 2 560
Tabela 13. SEQ ID NOs das VH, VL, cadeias pesadas (HC) e cadeias leves (LC) de anticorpos anti-gp120 Nome do Anticorpo VH VL HC LC
1.1.130-1 182 510 2 561
1.1.131-1 182 511 2 562
1.1.132-1 182 512 2 563
1.1.133-1 182 513 2 564
1.1.134-1 182 514 2 565
1.1.135-1 182 515 2 566
1.1.138-1 182 569 2 568
1.42.1-1 467 223 519 49
1.43.1-1 468 223 520 49
1.44.1-1 469 223 521 49
1.45.1-1 470 223 522 49
1.46.1-1 471 223 523 49
1.47.1-1 472 223 524 49
1.49.1-1 474 223 526 49
1.50.1-1 475 223 527 49
1.51.1-1 476 223 528 49
1.1.104-1 182 516 2 567 3-1 182 276 2 101
1.52.1-1 477 223 529 49
1.52.64-1 477 278 529 103
1.52.90 477 292 529 117
2.4.1-1 478 276 530 101 Exemplo 3: Análise por Espectrometria de Massa
[00279] O Anticorpo A-1 foi transitoriamente expresso em células ExpiCHO e proteína-A purificada por meio de métodos tradicionais. A amostra foi desnaturada e reduzida com o uso de 4 M de cloridrato de guanidine e 50 mM de DTT (concentrações finais) e aquecimento por 20 minutos a 60°C. A amostra foi dessalinizada online à medida que a cadeia pesada e a cadeia leve eram separadas em uma coluna de cromatografia em fase reversa de BEH C4 antes de ser infusionada na fornte de um espectrômetro de massa híbrido por tempo de voo
Waters Synapt G2Si. Pacotes de pico de proteína com cargas múltiplas foram deconvoluídos usando o algoritmo de deconvolução de entropia máxima. Os resultados mostram que a cadeia leve do Anticorpo A foi glicosilada. O espectro de massa observado da cadeia leve revela a presença de uma modificação G0-glicano com heterogeneidade de massa adicional associada ao glicano. Esta observação é consistente com a presença de um motivo de glicosilação de consenso N72 no domínio da VL do Anticorpo A (NLT), e com estruturas cristalinas prévias do Anticorpo A mostrando glicosilação nesta posição (Zhou et al., Immunity, 39:245-258 (2013); Klein et al., Cell, 153:126-138 (2013)). Exemplo 4: Perda de Potência Induzida por Estresse Acelerado
[00280] Para identificar riscos químicos, um estudo de estabilidade térmica acelerada (painel de estresse) foi realizado para A-1. O anticorpo foi estressado em pH 5,9 a 25° C e 37°C (estresse de formulação) e em pH 7,4 a 37°C (simulação de estresse fisiológico). Amostras foram coletadas e congeladas em T0, e por mais 2, 4, e 6 semanas. Amostras selecionadas foram rastreadas quanto à perda de potência induzida pelo estresse antes da realização de outros métodos. O ensaio de potência empregado para as amostras estressadas A-1 foi o ensaio de repórter de ADCC que utiliza uma célula repórter que expressa luciferase quando os de receptores FcγRIIIa em sua superfície celular são amarrados por meio de um Fc de mAb funcional e domínios Fab a uma célula alvo. A célula alvo no ensaio expressa a glicoproteína do Env do HIV à qual o A-1 Fab se liga. A luciferase converte estequiometricamente a luz produtora de excesso do substrato luminescente medida no ensaio. As curvas de resposta são indicativas da potência do anticorpo.
[00281] Como mostrado na Figura 1, as perdas de potência mais significativas para A-1 ocorreram nas condições de pH 5,9. Em seguida fizemos o mapeamento de peptídeos no painel de estresse para identificar modicações químicas induzidas pelo estresse que levassem à perda de atividade em pH 5,9. Adicionalmente, fizemos mapas dos peptídeos nas amostras estressadas em pH 7,4 para identificar modificações que pudessem estar sujeitas a ocorrer em condições fisiológicas similares.
[00282] As amostras do painel de estresse com o anticorpo A-1 foram desnaturadas, reduzidas, e alquiladas com iodoacetamida antes da digestão com a endoproteinase Lys-C. Os digestos proteicos foram subsequentemente analisados por LC em fase reversa-MS/MS em um espectrômetro de massa Thermo Q-Exactive HF. Os mapas de peptídeos foram analisados com a ajuda dos softwares Thermo Pepfinder e Xcalibur, enquanto que as listas de íons foram ainda analisadas no Microsoft Excel. Como nossos dados do repórter de ADCC sugeriam a maior parte das perdas significativas de potência nas condições de pH 5,9, pesquisam as listas de íons para modificações ocorrendo ao longo do tempo, mas que eram únicas para condições de pH 5,9. A modificação mais significativa induzida por estresse e dependente do tempo única para as condições de pH 5,9 foi a oxidação do triptofano 76 na cadeia pesada do mAb observada no peptídeo T55GQPNNPRQFQGRVSLTRHASWDFDTFSFYMDLK88 (T55-K88) (SEQ ID NO: 630) como adições de oxigênio (+15.99 Da) e ainda conversão em quinurenina (+3.99 Da). Para a quantificação relativa destas conversões as intensidades máximas dos resultados das listas de íon Pepfinder para as duas variantes oxidadas foram somados e então comparados com a soma de todas as intensidades máximas do peptídeo T55-K88 modificado e não modificado. Os resultados somados resultantes do peptídeo oxidado para as várias condições de estresse estão apresentados na Figura 2. Foi com base nesses estudos que identificamos a oxidação do W74a (Kabat,
inserção de FR3) como um potencial risco para a estabilidade farmacêutica do anticorpo A-1.
[00283] Além da significativa oxidação na cadeia pesada W74a observada nas condições de pH 5,9, foram observados aproximadamente 8-9% de desamidação na posição N26 da cadeia cadeia leve dos construtos em T0 e ainda mais alta em condições de incubação em pH 7,4. A percentagem de desamidação informada reflete a combinação de asparagina desamidada para ácido aspártico (+0.98 Da), isoácido aspártico (+0.98), e aspartil succinimida (-17.03 Da) e foram observadas no peptídeo D1IQMTQSPSSLSASVGDTVTITCQANGY- LNWYQQRRGK38 (SEQ ID NO: 631) da cadeia leve. Os resultados estão apresentados na Figura 3.
[00284] Embora faça parte do esqueleto do anticorpo, o resíduo W74a da cadeia pesada é encontrado na alça de inserção de esqueleto incomum que faz parte do parátopo do anticorpo, e assim faz contato direto com a gp120 do HIV (Lee et al. 2017. Immunity 46: 690-702). O resíduo N26 da cadeia leve faz parte de um motivo de risco de desamidação NG na CDR1 que é formanda por uma deleção incomum da linhagem germinativa no A-1. Assim como o W74a, o N26 faz parte do parátopo e é previsto que ele faça contato com elementos da gp120do HIV. Com base em modelos estruturais disponíveis, em seguida desenhamos um painel de 15 mutantes desenhados para remover o sítio de oxidação do W74a e o motivo de desamidação do N26. As mutações foram rastreadas em ensaios de neutralização do HIV (vide Exemplo 10) para identificar uma variante que removesse o W74a, porém com impacto mínimo na potência amplitude de neutralização do anticorpo A-1. Exemplo 5: Mapeamento de Epítopos de Células T
[00285] Para avaliar a imunogenicidade e identifica epítpopos de células T imunodominantes, o Ensaio de Mapeamento de Epítopos de Células T "Antitope Epi-Screen" foi usado para rastrear peptídeos 15-mer sobrepostos cobrindo toda a sequência do Fv da LC e da HC do Anticorpo A. A resposta do doador de fundo (n=50 doadores) do ensaio foi de 8%, e respostas >10% seriam consideradas positivas neste ensaio. Os resultados do mapeamento de epítopos de células T na HC e na LC do Anticorpo A identificaram um único peptídeo GDTVTITCQANGYLN (SEQ ID NO: 320), contendo um suposto epítopo de células T com uma taxa de resposta do doador de 18% na cadeia leve do Anticorpo A.
[00286] A previsão computacional do núcleo 9-mer usando o algoritmo iTope de antítopos identificou VTITCQANG (SEQ ID NO: 321) como o potencial núcleo 9-mer de ligação ao MHCII no epítopo, com o resíduo V19 sendo a posição de âncora P1. O C-terminal deste epítopo se sobrepõe aos resíduos de linhagem não germinativa na CDR L1 que sabidamente fazem contato com o antígeno gp120 segundo observado em estruturas cocristalinas. Para evitar o rompimento da ligação do antígeno via reversão da linhagem germinativa da CDR L1, este epítopo foi removido por introdução da mutação LC V19A na posição de âncora P1. Exemplo 6: Caracterização dos Anticorpos
[00287] Escaneamento e mutagênese combinatorial foram usados para gerar anticorpos adicionais para avaliar o impacto biofísico e funcional de reversões linhagem germinativa e remoção do glicano no Anticorpo A. Foram realizados ensaios ELISA de ponto único na concentração EC50 para o Anticorpo A-1 para cada um dos três antígenos únicos da gp120 do HIV no formato de 384 poços e normalizados para controles de placa ensaios de DSF foram paralelamente conduzidos para avaliar o impacto das mutações na temperatura de fusão (Tm) do Fab. Os resultados estão apresentados na Tabela 14.
Tabela 14. Caracterização do Anticorpo por ELISA e por DSF ELISA ELISA gp120 ELISA ELISA DSF Fab Anticorpo gp120 Bal SHIV SF162 gp120 CAAN BSA Tm (°C) (A450) P3 (A450) (A450) (A450) A-1 0,91 0,94 1,06 0,06 79,69
1.2.2-1 0,91 0,97 0,80 0,06 79,65
1.2.1-1 0,93 1,02 1,01 0,07 79,35
1.3.1-1 0,97 1,13 0,94 0,06 77,85
1.4.1-1 1,04 1,19 0,96 0,06 78,90
1.5.1-1 0,92 1,15 1,07 0,06 82,02
1.6.1-1 0,95 1,10 0,90 0,06 78,27
1.7.1-1 0,98 1,08 1,04 0,06 79,56
1.8.1-1 0,86 0,94 0,90 0,06 78,77
1.9.1-1 1,08 1,23 0,98 0,06 82,40
1.10.1-1 0,95 1,03 0,94 0,06 78,23
1.11.1-1 0,93 0,57 0,75 0,09 71,14
1.15.1-1 0,87 1,24 1,38 0,06 71,14
1.16.1-1 0,92 0,90 0,87 0,07 72,77
1.17.1-1 0,84 0,31 0,70 0,06 71,27
1.18.1-1 0,97 1,36 1,18 0,07 71,39
1.19.1-1 0,85 0,96 0,93 0,06 80,03
1.20.1-1 0,89 0,91 0,80 0,06 77,78
1.21.1-1 0,87 0,82 0,77 0,07 78,28
1.22.1-1 1,03 0,78 0,87 0,06 77,15 1v2-1 1,03 1,29 1,00 0,08 79,28
1.24.1-1 0,98 1,09 0,90 0,06 75,02
1.25.1-1 1,07 1,03 1,16 0,06 77,16
1.26.1-1 0,81 0,94 1,00 0,06 78,54
1.27.1-1 0,86 0,86 0,86 0,07 75,28
1.28.1-1 1,05 0,99 0,99 0,06 76,03
1.29.1-1 1,03 0,98 1,08 0,06 80,04
1.30.1-1 0,81 1,03 1,05 0,06 79,17
1.1.2-1 0,95 1,01 0,93 0,06 78,54
1.1.3-1 0,97 0,97 1,00 0,07 79,29
1.1.4-1 0,96 1,07 1,09 0,06 79,42
ELISA ELISA gp120 ELISA ELISA DSF Fab Anticorpo gp120 Bal SHIV SF162 gp120 CAAN BSA Tm (°C) (A450) P3 (A450) (A450) (A450)
1.1.5-1 0,90 0,93 0,90 0,06 78,41
1.1.6-1 0,91 0,41 0,46 0,07 78,92
1.1.7-1 0,95 1,02 1,00 0,06 78,89
1.1.8-1 1,01 0,37 0,50 0,06 79,40
1.1.9-1 0,98 1,09 0,93 0,07 77,81
1.1.10-1 0,94 1,02 1,10 0,06 78,89
1.1.11-1 0,92 0,93 1,03 0,06 78,64
1.1.12-1 1,05 1,13 1,02 0,06 78,52
1.1.13-1 0,94 0,97 1,11 0,06 78,77
1.1.14-1 Baixo Rendimento/Sem Expressão
1.1.15-1 0,93 0,79 0,79 0,06 79,02
1.1.16-1 1,06 1,05 0,99 0,06 80,77
1.1.17-1 1,02 1,07 0,90 0,06 85,20
1.1.18-1 0,92 0,94 0,92 0,06 80,66
1.1.19-1 1,03 1,12 1,05 0,06 80,36
1.1.20-1 0,94 1,01 0,95 0,07 77,90
1.1.21-1 0,98 1,03 0,99 0,06 81,78
1.1.22-1 0,88 1,04 1,02 0,06 80,53
1.1.23-1 0,90 1,07 0,95 0,06 81,66
1.1.24-1 0,88 0,97 0,98 0,06 80,15
1.1.25-1 0,90 1,01 0,92 0,07 78,65
1.1.26-1 0,96 1,09 1,07 0,06 79,03
1.1.27-1 0,97 1,10 0,99 0,06 77,78
1.1.28-1 0,98 1,09 0,93 0,06 77,65
1.1.29-1 0,91 0,90 1,01 0,06 79,17
1.1.30-1 0,90 0,98 0,86 0,06 80,67
1.12.15-1 0,69 0,53 0,63 0,06 78,41
1.13.15-1 0,70 0,52 0,60 0,06 76,41
1.14.15-1 Baixo Rendimento/Sem Expressão
1.12.17-1 0,90 0,75 0,84 0,06 82,67
1.13.17-1 1,02 0,69 0,78 0,06 79,04
ELISA ELISA gp120 ELISA ELISA DSF Fab Anticorpo gp120 Bal SHIV SF162 gp120 CAAN BSA Tm (°C) (A450) P3 (A450) (A450) (A450)
1.14.17-1 0,89 0,24 0,43 0,10 73,15
1.31.1-1 0,82 0,87 0,92 0,06 79,67
1.32.1-1 0,93 0,91 0,83 0,06 75,03
1.33.1-1 0,88 0,96 0,98 0,06 83,28
1.34.1-1 0,83 0,79 0,90 0,07 79,15
1.35.1-1 0,84 0,80 0,87 0,07 75,77
1.36.1-1 1,13 0,59 0,75 0,18 69,63
1.1.31-1 0,87 0,87 0,96 0,06 78,64
1.31.31-1 0,98 0,97 1,02 0,07 79,15
1.32.31-1 0,95 0,66 0,90 0,07 75,01
1.33.31-1 0,92 0,89 1,18 0,07 82,44
1.34.31-1 0,91 0,77 0,92 0,06 78,64
1.35.31-1 1,05 0,68 0,99 0,07 75,39
1.36.31-1 Baixo Rendimento/Sem Expressão
1.1.32-1 0,93 0,89 1,04 0,06 81,07
1.31.32-1 0,98 0,91 1,04 0,06 81,40
1.32.32-1 0,89 0,70 0,90 0,08 77,52
1.33.32-1 0,98 0,98 1,13 0,07 85,42
1.34.32-1 0,93 0,69 0,97 0,06 81,78
1.35.32-1 0,96 0,58 1,01 0,06 77,27
1.36.32-1 0,96 0,18 0,50 0,07 71,26
1.1.33-1 0,87 0,84 0,94 0,07 78,40
1.31.33-1 0,89 0,74 0,86 0,06 78,27
1.32.33-1 0,93 0,71 0,68 0,06 74,27
1.33.33-1 1,09 0,97 1,06 0,07 81,78
1.34.33-1 1,10 0,82 1,04 0,06 77,15
1.35.33-1 0,90 0,65 0,91 0,06 74,64
1.36.33-1 Baixo Rendimento/Sem Expressão
1.1.34-1 0,90 0,83 0,96 0,06 79,02
1.31.34-1 0,76 0,82 0,86 0,06 79,27
1.32.34-1 0,81 0,71 0,86 0,06 77,15
1.33.34-1 0,95 0,82 0,95 0,06 82,66
ELISA ELISA gp120 ELISA ELISA DSF Fab Anticorpo gp120 Bal SHIV SF162 gp120 CAAN BSA Tm (°C) (A450) P3 (A450) (A450) (A450)
1.34.34-1 0,89 0,70 0,88 0,06 80,03
1.35.34-1 1,00 0,58 0,85 0,06 77,27
1.36.34-1 1,01 0,15 0,43 0,07 71,01
1.1.35-1 0,96 0,72 0,75 0,08 77,65
1.31.35-1 0,90 0,61 0,77 0,06 78,14
1.32.35-1 0,89 0,50 0,59 0,06 74,46
1.33.35-1 1,03 0,71 0,81 0,07 82,03
1.34.35-1 0,94 0,56 0,77 0,06 78,02
1.35.35-1 0,88 0,42 0,67 0,06 74,51
1.36.35-1 0,89 0,16 0,36 0,06 66,88
1.1.36-1 0,93 0,72 0,88 0,06 79,02
1.31.36-1 1,06 0,93 0,90 0,06 79,40
1.32.36-1 0,92 0,62 0,64 0,06 75,51
1.33.36-1 0,94 0,88 0,82 0,06 83,15
1.34.36-1 0,94 0,77 0,71 0,07 77,69
1.35.36-1 0,85 0,56 0,67 0,06 75,39
1.36.36-1 1,12 0,14 0,34 0,06 68,38
[00288] Os resultados indicaram que algumas reversões da linhagem germinativa e modificações combinatoriais afetaram a ligação da gp120 e/ou a estabilidade térmica do Fv. Com base nesses dados, foram conduzidas múltiplas rodadas de engenharia genética. A mutação V19A (que podem remover o epítopo de célula T previsto mostrado acima) e mutações feitas na posição N72 da cadeia leve (numeração de Kabat) (que podem remover o Fv glicano ligado em N72) foramm combinadas com outras mutações com a finalidade de identificar um anticorpo com propriedades funcionais e biofísicas aprimoradas. Os anticorpos resultados foram caracterizados por análise do título de expressão, análise da poliespecificidade, e/ou ensaios de neutralização do HIV. Exemplo 7: Análise do Título de Expressão dos Anticorpos sem o
Motivo de Glicosilação
[00289] Ao se expressar e purificar uma proteína para a operação de rastreamento por ELISA e por DSF, foi observado um título de expressão reduzido para os anticorpos que não possuíam o motivo de glicosilação. Foram geradas mutações adicionais para identificar anticorpos com expressão de proteína aumentada.
[00290] Os anticorpos foram expressos em células Expi293F™ com a ajuda do sistema Expifectamine™293 seguindo o protocolo do fabricante (ThermoFisher Scientific, MA). A transfecção foi realizada em uma escala de 30 ml em 50 ml de SeptaVent™ (Optimum Processing, CA). Em resumo, foi usado por transfecção um total de 30 µg de cadeia pesada e de cadeia leve (a razão de HC:LC é 2:3) expressando plasmídios. DNA diluído em OptiMEM foi adicionado ao reagente Expifectamina™293 diluída para permitir a formação de um complexo. Depois de 20 minutos de incubação à temperatura ambiente, o complexo reagente DNA foi adicionado a 28 mL de células semeadas a 2,5 milhões/mL. A cultura foi incubada a 37°C em 8% de CO2 com agitação a 250 rpm por quatro dias. O sobrenadante clarificado foi coletado por centrifugação a 500x g por 15 minutos. Os anticorpos foram purificados pelo manipulador de líquidos Hamilton STAR (Hamilton, NV) usando Phytips (PhyNexus, CA) pré- acondicionadas com 160 µL da resina MaSelectSuRe (GE Healthcare, NJ). Cada volume de 30 mL transfectado foi purificado usando 3 Phytips. Depois da captura do anticorpo, a resina foi lavada com 1 x PBS antes de ser eluída com 100 mM de acetato de Na pH 3,5. A amostra eluída foi neutralizada com 1/10 do volume de Tris 1M pH 8,0. As amostras foram armazenadas a 4°C por uma noite. A placa de eluição foi centrifugada a 1000x g por 10 minutos para remover o precipitado, se houvesse. A concentração da eluição clarificada foi determinada medindo-se sua absorvência em A280. O título de cada um dos anticorpos está expresso da seguinte maneira (mg/L): [concentração (mg/mL) x volume de eluição (mL) * 1000]/ 30 mL. As mutações nos sítios de glicosilação e o título de expressão estão resumidos na Tabela 15. Tabela 15. Mutações nos sítios de glicosilação e o título de expressão Anticorpo Título (mg/L) A-1 243
1.1.10-1 148
1.1.37-1 104
1.1.38-1 113
1.1.39-1 93
1.1.40-1 133
1.1.41-1 104
1.1.42-1 158
1.1.43-1 124
1.1.44-1 70
1.1.45-1 77
1.1.46-1 136
1.1.47-1 45
1.1.48-1 65
1.1.49-1 27
[00291] Os resultados na Tabela 15 demonstram que todos os anticorpos que não possúíam o motivo de consenso de glicosilação "NLT" apresentaram título de expressão reduzido. Isto sugere que a remoção do glicano ligado em N72 pode ter um efeito negativo na expressão da proteína. Os resultados também demonstram que a reversão da linhagem germinativa L73F reduz de forma sistêmica o título de expressão. Entre as mutações testadas, N72H, N72T e T74K apresentaram o título de expressão mais alto e foram levadas para análise posterior. Exemplo 8: Exibição em Mamíferos
[00292] Para identificar mutações que eliminam o Fab glicano porém mantendo a ligação ao Env do HIV, aumentar o título de expressão, e/ou reduzir a poliespecificidade, uma biblioteca de mutações combinatoriais da cadeia leve foi desenhada e construída usando um conjunto de oligos triméricos (GenScript) variados em 6 sítios, incluindo R65, W67, E70, N72, L73, e T74. A biblioteca de cadeias leves sintetizada abrigando ~18.000 anticorpos foi subclonada em um vetor pcDNA5/FRT modificado (Invitrogen), contendo a cadeia pesada do anticorpo A fusionada com um domínio transmembranar PDGFR humano no C-terminal.
[00293] Para exibir os anticorpos em células estavelmente transfectadas, o vetor de expressão foi co-transfectado com pOG44 em células Flp-In -CHO seguindo as instruções do fabricante (R758– 07, Invitrogen). As células transfectadas foram selecionadas e então mantidas em meio de cultura suplementado com higromicina. A exibição dos anticorpos e a ligação ao Env do HIV foram analisadas por FACS sendo seguidas anti-IgG humana (Fcγ specific) e por coloração do BG505.SOSSIP do HIV (J. Virol., 89(10):5318-29 (2015)). As células coletadas depois da separação de FACS foram expandidas para extração de DNA e subsequente análise de sequenciamento por PCR para identificar as mutações recuperadas. Mais de cem clones foram selecionados para sequenciamento antes e depois da separação de FACS. As sequências recuperadas de duas rodadas consecutivas de separação de FACS foram em seguida examinadas.
[00294] Os resultados mostraram que anticorpos com uma sequência de TRRGQQYNLT (SEQ ID NO: 332), RRWGQNYNFT (SEQ ID NO: 333), TRRGQDYIFS (SEQ ID NO: 334), RRRGQDYILA
(SEQ ID NO: 335), RRRGQNYTFT (SEQ ID NO: 336), RRFGQDYILT (SEQ ID NO: 337), TRFGQNYSLQ (SEQ ID NO: 338), ou TRRGQNYTLA (SEQ ID NO: 339), TRRGQQYTLP (SEQ ID NO: 340), TRRGQDYILA (SEQ ID NO: 341), ou SRFGQKYQLS (SEQ ID NO: 342) na região FR3 da LC apresentavam níveis de expressão desejáveis e conservavam a afinidade de ligação ao HIV BG505.SOSSIP. As mutações na SEQ ID NO:334, SEQ ID NO:337 e SEQ ID NO: 342 foram incorporadas nos Anticorpos 1.1.110-1,
1.1.111-1, 1.1.113-1, 2.1.3-1, 2.1.4-1 e 1.1.112-1. Exemplo 9: Avaliação da Poliespecificidade
[00295] A poliespecificidade dos anticorpos terapêuticos pode afetar adversamente as propriedades farmacocinéticas e apre- sentam possíveis problemas de segurança. Já foi demonstrado que o Anticorpo A é polirreativo para DNA de cordão duplo e lipopolissacarídeo em um ensaio ELISA com um painel de quatro antígenos (Science, 333(6049):1633–1637 (2011)). O risco de poliespecificidade dos anticorpos avaliados nesta invenção foi testado em múltiplos ensaios incluindo ensaios com anticorpo antinuclear (Genes Immun., 13(5): 399–410 (2012)), anticardiolipina (Hum Antibodies, 14(3-4): 59–67 (2005)), ELISA de partículas anti- baculovirais (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 114(5):944-949 (2017)), e ensaios de ligação a células HEK-293 e HEp2 baseados em FACS (J. Virol., 88(21):12669-82 (2014)). Para comparar a poliespeci- ficidade, o Anticorpo C e o Anticorpo D, dois bNAbs poliespecíficos (J. Virol., 88(21):12669-82 (2014)), foram usados como controles positivos; e uma amostra clínica de Rituximab (Myoderm Medical Supply) foi usada como referência para baixo risco de poliespecificidade. Os artigos testados foram diluídos até 1 µM em ensaios ELISA, e os valores de OD450 foram normalizados para o controle (sem anticorpo) para calcular a variação proporcional. Nos ensaios de ligação de células, células HEK293 ou HEp2 foram permeabilizadas e então incubadas com os artigos testados diluídos seriadamente. As amostras coloridas forma analisadas por FACS, e a MFI (intensidade de fluorescência média) foi normalizada somente para o controle colorido do anticorpo secundário anti-IgG-Fcγ humana. Os sinais de ligação relativos foram plotados contra as concentrações dos anticorpos, e ajustados para a curva não linear de respostas. A ligação inespecífica de células de cada anticorpo testado foi representada pela AUC (área sob a curva) de ligação.
[00296] Três mutantes individuais com o N72 glicano removido (via mutagênese pontual) apresentaram o título de expressãoa mais alto (Tabela 5). Para avaliar a contritruiçãoi dos mesmos para a poliespecificidade do A-1, os mutantes foram testados em ensaios ELISA de anticorpo antinuclear (ANA) e anticardiolipina como descrito acima. Os resultados de dois ensaios independentes estão apresentados na Tabela 16. Estes resultados sugerem que a remoção do N72 glicano pode levar a aumentos na poliespecificidade. Entre as mutações testadas, as mutações N72T e N72H apresentam os escores de poliespecificidade mais baixos. Tabela 16: Avaliação da Poliespecificidade ANA Anticardiolipina mAb (1 µM) (OD450 Normalizado) (OD450 Normalizado) C 24,5 26,5 15,6 17,2 A-1 2,3 2,6 1,6 1,5
1.1.10-1 8,3 8,2 2,5 2,2
1.1.42-1 4,0 3,7 2,3 2,0
1.1.46-1 11,8 10,1 4,4 3,7 Rituximab 1,5 1,3
[00297] Anticorpos com N72T, V19A e outras mutações selecionadas com base na análise funcional apresentada na Tabela 14 e na Tabela 23 foram testados em ensaios ELISA de ANA e anticardiolipina para avaliação da poliespecificidade. Os resultados destas análises estão apresentados na Tabela 17. Tabela 17. Avaliação da Poliespecificidade de anticorpos com a mutação N72T ANA Anticardiolipina mAb (1 µM) (OD450 Normalizado) (OD450 Normalizado) A 1,9 1,2 A-1 2,7 1,4
1.1.10-1 5,7 1,7
1.33.32-1 4,9 7,7
1.1.54-1 3,0 1,6
1.37.51-1 4,0 6,2
1.8.52-1 5,6 1,7 C 22,5 4,4 D-1 14,6 7,7 Rituximab 1,3 1,0
[00298] Os resultados na Tabela 17 demonstram todos os anticorpos sem o N72 glicano apresentaram poliespecificidade aumentada em comparação com o Anticorpo A-1. O Anticorpo 1.1.54, que contém as mutações N72T e V19A, apresentou poliespecificidade reduzida em comparação com o Anticorpo 1.1.10, que continha apenas a mutação N72T. Isto sugere que a mutação V19A, que foi introduzida para remover um epítopo de célula T, pode ter benefícios inesperados na redução da poliespecificidade dos anticorpos descritos neste pedido.
[00299] Para identificar anticorpos com poliespecificidade reduzida, um painel combinatorial com 32 membros composto por 5 conjuntos de mutações para o Anticorpo A-1 (Tabela 18) foi testado em ensaios
ELISA com ANA, anticardiolipina, e ensaios de ligação a HEK293 e HEp2 como descrito acima. Tabela 18. Mutações usadas para gerar uma biblioteca combinatorial com 32 membros Conjunto de Mutações na HC Mutações na LC Mutações Conjunto 1 Nenhuma V19A Conjunto 2 Nenhuma N72H Conjunto 3 Nenhuma V98F, V99G Conjunto 4 Nenhuma T18R, R65S, N76S, N77S Conjunto 5 L5V, A10E, T12K, E23K, S105Q, Q108M R39K, R40P
[00300] Os resultados dos ensaios foram resumidos e comparados usando escores de poliespecificidade (escores P) que foram calculados como a razão de cada anticorpo testado para o rituximab em cada ensaio (Tabela 19). Os valores médios do escore P foram usados para classificar o risco de poliespecificidade dos anticorpos testados. Para analisar estatisticamente a contribuição de cada mutação no banco de dados combinatorial, comparações pareadas foram feitas para cada anticorpo combinatorial na presença ou na ausêntica dos conjuntos de mutações relacionados na Tabela 19. No contexto do painel de anticorpos combinatoriais com 32 membros testado neste pedido, foram conduzidas 16 comparações independentes para cada um dos cinco conjuntos de mutações testados. Tabela 19. Escores de Poliespecificidade (escore P) de Anticorpos Combinatoriais Anticardio- Ligação à Ligação Desvio mAb ANA Média lipina HEK293 à HEp2 padrão A-1 2,8 3,2 1,3 1,5 3,7 2,2 3,5 2,6 1
1.1.17-1 1,8 1,8 1,2 1,1 2,5 1,6 2,7 1,8 0,5
Anticardio- Ligação à Ligação Desvio mAb ANA Média lipina HEK293 à HEp2 padrão
1.1.42-1 n/a 4,3 n/a 1,9 6 n/a 5 4,3 1,5
1.1.64-1 2 1,9 1,2 1,1 2,4 1,6 2,5 1,8 0,5
1.1.67-1 2,3 2,5 1,2 1,4 2,8 1,9 2,6 2,1 0,6
1.1.72-1 n/a 4,7 n/a 1,4 4 n/a 3,9 3,5 1,2
1.1.75-1 3,2 3,3 1,7 1,7 3,8 2,3 4,4 2,9 1
1.1.78-1 3,4 3,5 1,8 1,4 2,9 2,6 3,4 2,7 0,8
1.41.5-1 n/a 5 n/a 3,7 7,2 n/a 4,9 5,2 1,3
1.41.81-1 4,3 4,5 2,7 3,4 6,1 2 4,6 3,9 1,3
1.1.82-1 3 2,9 1,2 1,2 3,7 1,6 2,9 2,4 0,9
1.41.83-1 4,2 4,5 4,1 5,3 4,9 2,1 3,9 4,1 0,9
1.1.84-1 2,2 2,4 1,3 1,2 2,3 1,7 2 1,9 0,5
1.41.85-1 3,3 3,5 3,3 3,2 3,7 1,6 3,2 3,1 0,6
1.41.86-1 5,1 6,2 3 3,8 4,1 1,8 4 4 1,3
1.41.87-1 3,3 3,4 3,5 3,7 3,2 1,9 2,9 3,1 0,6
1.1.88-1 1,6 1,8 1,2 1,2 3,7 1,5 2,4 1,9 0,8
1.41.89-1 1,9 1,9 1,9 2,2 6,3 1,7 4,4 2,9 1,6
1.1.90-1 1,5 1,2 1,2 0,9 3,7 1 2,3 1,7 0,9
1.41.91-1 2,9 3,1 3,6 6,2 2,5 2,1 2,9 3,3 1,2
1.41.92-1 n/a 15,7 n/a 11,2 5,8 n/a 5,4 9,5 4,2
1.41.93-1 n/a 9,5 n/a 9,8 5,1 n/a 5,4 7,4 2,2
1.1.94-1 6,2 7,7 4,7 4,9 3,4 3,2 3,3 4,8 1,6
1.41.95-1 10,2 14,8 8,9 9,2 6,5 3,8 5,4 8,4 3,4
1.1.96-1 4,7 6,1 2,4 2,7 2,4 2,8 2,8 3,4 1,3
1.41.97-1 5,4 6,5 5,4 7,3 4,5 3,9 4,1 5,3 1,2
1.41.98-1 5,9 8 4,6 5,9 3,9 3,3 4 5,1 1,5
1.41.99-1 6,4 6,9 6,1 9,2 7,8 3,2 4,6 6,3 1,9
1.1.100-1 4,6 4,2 2 2,1 4,7 1,7 2,7 3,1 1,2
1.41.101- 1 5,6 7,2 5,5 6,8 8,7 3,2 4,8 6 1,7
1.1.102-1 3,3 4 1,8 1,7 4,5 2,8 2,6 3 1
1.41.103- 1 3,6 4,6 5,9 5,3 6,8 4,4 4 5 1 C 17,6 14,7 3,8 8,3 13,1 8,6 6,9 10,4 4,5 D-1 8,7 10,4 1,9 3,3 7,3 7,1 4 6,1 2,8 Rituximab 1 1 1 1 1 1 1,1 1 0
[00301] Para cada uma das 16 combinações pareadas, o escore P médio nos sete ensaios mostrados na Tabela 19 foi comparado por meio de um teste T pareado. Os resultados mostraram um aumento na poliespecificidade devido à introdução da mutação N72H na cadeia leve bem como devido à introdução das murações Set 5. Os resultados mostraram uma redução na poliespecificidade devido à introdução da mutação V19A ou das mutações V98F+V99G na cadeia leve. Uma redução modesta, porém, não estatisticamente significativa, na poliespecificidade foi observada por ocasião da introdução das mutações Set 4. Consistente com esta análise estatística, o anticorpo com o escore poliespecificidade médio mais baixo foi o Anticorpo
1.1.90, que incorporou a mutação V19A, as mutações V98F+V99G, e as mutações Set 4.
[00302] Os anticorpos A-1 e B-1 foram em seguida comparados em ensaios de poliespecificidade. Adicionalmente, os anticorpos com as seguintes mutações foram testados em várias combinações: N72T, N72H, V19A, V98F+V99G, as mutações Set 4, ou as mutações identificadas na SEQ ID NO: 37. Os anticorpos foram testados em ELISA de partículas baculovirais (BVO) e os resultados estão resumidos na Tabela 20. Os artigos testados foram analisados na concentração de 1 µM em duplicata em cada experimento e o escore de BVP foi calculado como a razão de OD450 para fundo sem mAb. Tabela 20. Escores de BVP mAb média SD n A 10,9 1,1 2 A-1 9,4 0,7 6
1.1.10-1 13,9 n/a 1
1.1.42-1 9,7 1,1 2
1.1.111-1 22,1 2,0 4
1.1.113-1 11,9 n/a 1 mAb média SD n
1.1.90-1 2,5 0,6 2 B-1 2,7 0,9 3
2.1.2-1 47,1 n/a 1
2.1.3-1 8,2 n/a 1
2.1.4-1 7,7 n/a 1 D-1 29,2 9,7 4 C 44,2 10,2 4 Rituximab 4,0 0,5 4
[00303] Os resultados na Tabela 20 mostram que o Anticorpo B-1 apresentou poliespecificidade reduzida em comparação com o Anticorpo A-1. Assim como o Anticorpo A, a remoção do N72 glicano usando a mutação N72H no Anticorpo 1.1.42 ou no Anticorpo 2.1.2 resultou em um aumento na poliespecificidade. A incorporação das mutações descobertas por meio de exibição em mamíferos no Anticorpo 1.1.111 pode aumentar a poliespecificidade, ao passo que a incorporação das mesmas mutações no Anticorpo 2.1.3 pode reduzir a poliespecificidade em comparação com a mutação N72H. A adição da mutação V19A (por exemplo, Anticorpo 1.1.113 ou Anticorpo 2.1.4) pode baixar sistematicamente a poliespecificidade em ambos os casos.
[00304] Um painel adicional de 96 anticorpos foi gerado para identificar anticorpos com amplitude e potência de neutralização aumentadas e, de forma ideal, faltando o glicano ligado em N72. Este painel testou os efeitos dos conjuntos 1, 3 e 4 de mutações (Tabela 18) assim como várias mutações N72 e mutações derivadas de exibição em mamíferos no contenxto de domínios variáveis de anticorpo derivados do Anticorpo A ou combinando elementes de ambos os Anticorpo A e Anticorpo B. A biblioteca também incluía uma operação de mutagênese por varredura, onde cada aminoácido diferente no Anticorpo A e no Anticorpo B foi testado individualmente no contexto do Anticorpo A. O painel foi produzido por meio de métodos de alto rendimento e analisada por ELISA de BVP de alto rendimento normalizado para variações na concentração de amostra. Os resultados deste ensaio estão apresentados na Tabela 21. Tabela 21: Escores de BVP mAb Escore BVP Normalizado A-1 5,5 3-1 3,7
2.2.1-1 5,5
2.3.1-1 3,5
1.1.64-1 7,2
3.1.8-1 3,8
2.2.8-1 13,7
2.3.8-1 10,8
1.1.67-1 5,0
3.1.9-1 8,2
2.2.9-1 15,7
2.3.9-1 9,0
1.1.115-1 15,0
3.1.10-1 6,0
2.2.10-1 25,8
2.3.10-1 13,6
1.1.116-1 27,1
3.1.11-1 14,6
2.2.11-1 34,4
2.3.11-1 19,1
1.1.117-1 18,7
3.1.12-1 15,2
2.2.12-1 35,7
2.3.12-1 24,3 mAb Escore BVP Normalizado
1.1.118-1 13,1
3.1.13-1 19,4
2.2.13-1 15,2
2.3.13-1 12,5
1.1.10-1 10,8
3.1.14-1 12,5
2.2.14-1 26,4
2.3.14-1 6,0
1.1.54-1 8,3
3.1.5-1 7,0
2.2.5-1 13,2
2.3.5-1 6,3
1.1.104-1 7,8
3.1.15-1 8,1
2.2.15-1 25,3
2.3.15-1 12,2
1.1.119-1 12,9
3.1.7-1 8,4
2.2.7-1 15,5
2.3.7-1 9,1
1.1.42-1 7,7
3.1.2-1 7,4
2.2.2-1 26,0
2.3.2-1 11,3
1.1.75-1 14,6
3.1.16-1 13,4
2.2.16-1 33,9
2.3.16-1 18,0
1.1.78-1 10,4
3.1.17-1 14,4
2.2.17-1 39,6 mAb Escore BVP Normalizado
2.3.17-1 25,6
1.1.102-1 7,4
3.1.18-1 11,9
2.2.18-1 26,5
2.3.18-1 15,4
1.1.120-1 14,2
3.1.19-1 14,1
2.2.19-1 32,1
2.3.19-1 24,4
1.1.121-1 8,4
3.1.20-1 6,7
2.2.20-1 22,7
2.3.20-1 13,2
1.1.122-1 12,5
1.1.123-1 10,0
1.1.124-1 8,9
1.1.125-1 8,6
1.1.126-1 9,8
1.1.127-1 13,9
1.1.128-1 12,0
1.1.129-1 16,8
1.1.130-1 13,8
1.1.131-1 8,3
1.1.111-1 17,1 B-1 7,0
1.1.90-1 7,2
1.1.132-1 12,3
1.1.133-1 12,1
1.1.134-1 7,1
1.1.135-1 11,3
1.42.1-1 13,9 mAb Escore BVP Normalizado
1.43.1-1 12,6
1.44.1-1 22,2
1.45.1-1 1,8
1.46.1-1 10,0
1.47.1-1 8,8
1.49.1-1 11,9
1.50.1-1 8,0
1.51.1-1 8,1 A-1 8,1
[00305] Os resultados para duas corridas de produção separadas do Anticorpo A-1, mostradas na primeira e na última linha da Tabela 21, apresentaram escores de BVP entre 5,5 e 8.1. Os anticorpos incorporando mutações em N72 apresentaram escores de BVP sistematicamente mais altos, o que foi consistente com os resultados acima demonstrando que a remoção do glicano ligado em N72 pode levar à poliespecificidade aumentada. Anticorpos selecionados sem N72 e incorporando a cadeia leve ou as cadeias pesadas (ou mutantes derivados destas cadeias) do anticorpo B, tal como os Anticorpos 3.1.10-1, 2.3.14-1, 1.1.54-1, 3.1.5-1, e 2.3.5-1, não apresentaram escores aumentados no ELISA de BVP em relação ao Anticorpo A-1.
[00306] Um painel adicional de 12 anticorpos com glicano ligado em N72 ou sem glicano foi produzido para avaliar ainda o papel do glicano na poliespecificidade. Alguns anticorpos foram produzidos tanto em células Expi293 como em células CHO-S. As mutações que podem diminuir apoliespecificidade, identificadas nos ensaios acima, foram incorporadas neste painel. Os resultados deste ensaio estão apresentados na Tabela 22. Os anticorpos conservando o motivo de glicosilação ligado em N72 da cadeia leve N72 apresentaram escolres de BVP relativamente mais baixos que os anticorpos sem o motivo de glicosilação ligado em N72. Tabela 22: Escores de BVP. N>=3 para cada anticorpo Linhagem de Glicano ligado em N72 Nome Escore BVP células Expi293 2,2 A-1 CHO-S 7,7 Expi293 2,0
1.1.64-1 CHO-S 6,6 Expi293 2,4 Sim 1.52.64-1 CHO-S 2,6
1.1.90-1 Expi293 1,7
2.2.101 Expi293 12,8
2.4.1-1 Expi293 5,2
2.3.1-1 Expi293 5,3
1.1.104-1 ExpiCHO 8,8
1.1.119-1 ExpiCHO 6,0 ExpiCHO 3,3 Não 3.1.5-1 CHO-S 12,0
2.2.5-1 Expi293 32,5
2.3.5-1 Expi293 3,6 Exemplo 10: Ensaio de Neutralização do HIV
[00307] Para avaliar a amplitude de reconhecimento de antígenos para anticorpos, ensaios de neutralização do HIV foram realizados usando uma variedade de isolados e clones do vírus. A potência de neutralização do HIV (expressa como IC50 emin µg/mL) dos anticorpos foi medida no ensaio baseado em células repórteres CEM-NKr-CCR5-Luc (Trkola et al., (1999), J. Virol., 73(11):8966-74) contra um painel de vírus subtipo B competentes para replicação que incluía isolados e clones amplificados de amostras de plasma dos pacientes (NIH AIDS Reagent Program) e a cepa HIV-1 BaL adaptada em laboratório.
Tabela 23. Potência de Neutralização do HIV Potência de Neutralização do Vírus (µg/mL) Anticorpo CHO77 Bal 92US657 8320 A-1 0,12 0,16 1,31 0,31
1.2.2-1 0,12 0,23 1,38 0,70
1.3.1-1 0,08 0,26 1,84 0,37
1.4.1-1 0,04 0,21 1,35 0,28
1.5.1-1 0,14 0,26 0,85 0,50
1.6.1-1 0,10 0,39 1,32 0,62
1.7.1-1 0,10 0,51 1,10 0,54
1.8.1-1 0,09 0,04 1,88 0,59
1.9.1-1 0,17 0,20 1,39 0,50
1.15.1-1 0,10 0,17 1,42 0,31
1.18.1-1 0,10 0,12 1,78 0,33
1.21.1-1 0,17 0,11 2,51 0,59
1.22.1-1 0,95 >20 11,3 13,2 1v2-1 0,07 0,08 0,88 0,28
1.25.1-1 0,12 0,17 1,46 0,23
1.26.1-1 0,11 0,06 0,93 0,38
1.27.1-1 0,13 0,54 0,56 0,58
1.28.1-1 0,10 0,11 1,63 0,38
1.29.1-1 0,09 0,14 1,33 0,41
1.30.1-1 0,06 0,15 0,93 0,39
1.1.2-1 0,14 0,20 0,62 0,78
1.1.4-1 0,12 0,10 1,44 0,35
1.1.5-1 0,12 0,21 1,93 0,63
1.1.10-1 0,07 0,10 0,60 0,33
1.1.11-1 0,13 0,09 1,17 0,39
1.1.12-1 0,12 0,06 1,64 0,50
1.1.13-1 0,09 0,19 1,43 0,45
1.1.17-1 0,10 0,08 1,27 0,52
1.1.19-1 0,12 0,09 0,90 0,34
Potência de Neutralização do Vírus (µg/mL) Anticorpo CHO77 Bal 92US657 8320
1.1.26-1 0,13 0,07 1,49 0,45
1.1.27-1 0,10 0,12 1,25 0,53
1.14.15-1 >20 >20 >20 >20
1.33.1-1 0,17 0,11 0,95 0,77
1.33.32-1 0,08 0,09 0,83 0,35
1.34.32-1 0,11 0,31 1,47 0,54
1.36.35-1 0,32 >20 5,37 3,82
1.36.36-1 0,30 >20 2,07 3,84
[00308] Alguns anticorpos não apresentaram perda de função nos ensaios ELISA (Tabela 14), mas apresentaram potência reduzida nos ensios de neutralização do HIV (Tabela 23). Diversos anticorpos não mostraram alteração na atividade de neutralização do vírus ou apresentaram ganhos pequenos na potência de neutralização. Tabela 24. Potência de Neutralização do HIV em Anticorpos Incorporando Mutações Potência de Neutralização do Vírus (ug/mL) Anticorpo BaL 92US727 92HT593 92US657 92US712 302076 A 0,063 7,81 0,019 2,63 0,104 0,183 A-1 0,037 6,08 0,013 2,160 0,085 0,145
1.1.10-1 0,021 >20 0,013 1,83 0,088 0,131
1.1.42-1 0,030 >20 0,046 2,14 0,078 0,157
1.33.32-1 0,063 >20 0,010 1,39 0,062 0,077
1.1.54-1 0,062 11,4 0,011 1,50 0,076 0,114
1.37.51-1 0,053 >20 0,014 2,58 0,149 0,112
1.8.52-1 0,076 >20 0,015 2,81 0,141 0,202
[00309] Como mostrado na Tabela 24, anticorpos sem o N72 glicano apresentaram potência reduzida na neutralização do vírus 92US727. O anticorpo 1.1.54-1 (V19A +N72T) apresentou potência de neutralização aumentada para o vírus 92US727 em comparação com o Anticorpo 1.1.10-1 (que continha N72T). Isto sugere que, combinada com a mutação N72T, a V19A pode reduzir a poliespecificidade e aumentar a potência de neutralização em vírus selecionados.
Tabela 25. Potência de Neutralização do HIV em Anticorpos Usando um Painel Expandido de Vírus Vírus Potência de Neutralização do Vírus (ug/mL)
A-1 1.1.54-1 1.37.51-1 1.1.42-1 7467 0,07 0,06 0,06 0,07 302076 0,10 0,08 0,06 0,09 CH058 0,10 0,14 0,09 0,1 92US712 0,11 0,09 0,13 0,09 92HT593 0,12 0,06 0,12 0,05 7015 0,14 0,14 0,10 0,11 BaL 0,15 0,13 0,82 0,07 RHPA 0,16 0,16 0,09 0,15 1489 0,16 0,22 0,26 0,21 WITO 0,26 0,22 0,11 0,07 8176 0,28 0,18 0,18 0,16 8318 0,38 0,31 0,37 0,24 7576 0,46 0,32 0,34 0,4 8339 0,52 0,32 0,29 0,39 7051 0,61 0,52 0,49 0,29 8089 0,67 0,57 1,14 0,73 8106 1,03 0,82 0,97 0,92 8359 1,56 1,19 1,51 1,2 92US657 1,81 3,45 3,39 2,97 92US727 1,82 9,65 50,33 33,7 8117 1,93 1,12 0,92 1,17 CH077 2,45 1,63 2,29 1,80 CH106 2,71 3,05 2,8 1,30 REJO 2,88 1,93 3,04 2,82
Vírus Potência de Neutralização do Vírus (ug/mL) A-1 1.1.54-1 1.37.51-1 1.1.42-1 THRO 3,1 1,81 1,28 2,33 1413 3,84 2,8 2,45 2,88 8320 4,07 2,61 4,09 2,55 7103 4,82 3,03 2,28 3,23 8134 5,08 7,19 6,97 8,71 7141 5,35 8,93 51,0 23,2 8110 7,09 5,29 4,14 5,97 7714 8,96 6,78 4,33 8,71 1003 23,0 15,35 12,6 17,7 7595 24,6 18,9 16,17 18,02 8339 >200 >200 >200 >200 8398 >200 >200 >200 >200 7406 >200 >200 >200 >200 7552 >200 >200 >200 >200 7007 >200 >200 >200 >200
[00310] Entre os anticorpos avaliados neste ensaio, o Anticorpo
1.1.54 contendo as mutações N72T e V19A apresentaram a potência de neutralização mais alta (Tabela 25). Tabela 26. Potência de Neutralização do HIV de Anticorpos Selecionados Vírus A-1 1.1.110-1 1.1.111-1 1.1.112-1 1.1.90-1 1.1.64-1 CH106 1,29 1,33 1,42 1,31 1,69 0,99 1413 2,04 3,69 2,79 2,05 3,55 2,35 BaL 0,05 0,11 0,13 0,12 0,13 0,08 92HT593 0,34 0,50 0,52 0,56 0,68 0,35 92US657 0,70 0,69 0,79 0,74 1,17 0,79 302076 0,13 0,25 0,18 0,28 0,16 0,15
Vírus A-1 1.1.110-1 1.1.111-1 1.1.112-1 1.1.90-1 1.1.64-1
7015 0,68 0,77 0,73 0,75 1,03 0,60 8117 1,13 1,35 1,09 1,45 1,14 1,13 8339 >50 >50 >50 31,4 >50 >50 92US727 1,62 >50 35,19 30,3 3,80 0,79 92US712 0,08 0,06 0,06 0,07 0,06 7141 2,10 >50 27,09 2,41 1,99 7007 >50 >50 >50 >50 >50 8134 0,36 1,29 0,87 1,05 0,29 8318 0,15 0,23 0,19 0,21 0,23 7596 15,9 14,9 11,6 11,54 16,19 7103 0,95 1,00 0,69 1,13 1,01 8359 0,40 0,35 0,41 0,58 0,48 8110 2,63 3,85 2,19 1,65 2,62 7595 4,38 3,97 3,59 3,71 4,48 REJO 0,03 0,03 0,05 0,07 0,04 CH058 0,04 0,04 0,04 0,05 0,03 CH077 0,03 0,03 0,05 0,10 0,03 RHPA 0,19 0,20 0,16 0,16 0,09 WITO 0,12 0,08 0,06 0,07 0,13 7714 4,20 2,65 3,78 3,76 7,48 THRO 6,84 6,77 6,20 7,42 9,60 CH040 4,86 6,86 16,1 9,57 18,59 8089 0,32 1,30 0,60 0,47 0,32 1489 0,09 0,08 0,10 0,24 0,13 7467 0,03 0,03 0,04 0,06 0,03 7352 >50 >50 >50 >50 40,1 8320 0,28 0,26 0,25 0,39 0,37 1003 1,25 1,35 1,17 1,92 1,25 1012 1,24 1,65 1,43 1,40 1,40 8398 >50 >50 >50 >50 >50
Vírus A-1 1.1.110-1 1.1.111-1 1.1.112-1 1.1.90-1 1.1.64-1 7576 0,38 0,50 0,32 0,36 0,41 7051 0,21 0,25 0,19 0,19 0,23 8176 0,18 0,18 0,19 0,24 0,24 8106 0,57 0,61 0,61 0,89 1,08 7552 27,24 >50 >50 >50 16,1
[00311] A potência de neutralização do HIV foi testada em anticorpos seletos identificados por meio de exposição em mamíferos (Anticorpos 1.1.110, 1.1.111 e 1.1.112) e aqueles que apresentaram poliespecificidade reduzida (Anticorpos 1.1.90 e 1.1.64). Perda de potência foi observada contra os vírus 92US727 e 7141 para os anticorpos identificados por exibição em mamíferos (Tabela 26). Tabela 27. Potência de Neutralização do HIV para Anticorpos Seletos Vírus B-1 2.1.3-1 2.1.4-1 A-1 1.1.54-1 1.1.90-1 1.1.111-1 1.1.113-1 92US712 0,10 0,20 0,11 0,10 0,07 0,09 0,08 0,07 8318 0,11 0,24 0,21 0,11 0,32 0,57 0,48 0,14 92HT593 0,35 0,30 0,33 0,41 0,26 0,39 0,29 0,24 RHPA 0,09 0,07 0,05 0,12 0,03 0,15 0,08 0,05 7051 0,41 0,42 0,46 0,52 0,23 0,44 0,32 0,41 8320 0,27 0,28 0,23 0,42 0,29 0,34 0,30 0,28 7576 0,24 0,49 0,55 0,34 0,48 0,41 0,26 0,28 7015 1,12 0,89 0,59 1,17 0,40 0,41 0,48 0,44 92US657 0,53 0,42 0,38 0,52 0,45 0,48 0,40 0,40 CH106 1,51 1,01 0,91 0,91 0,90 1,00 0,86 0,59 1413 2,51 2,78 2,16 2,17 1,72 1,94 2,33 3,67 7141 1,67 13,76 6,78 2,45 1,61 2,24 29,81 27,85 92US727 2,13 14,34 7,27 2,01 11,18 2,17 >50 >50 7595 1,24 1,35 1,19 1,73 1,62 1,76 1,31 1,78 CH040 0,14 0,47 0,36 0,57 >50 22,06 3,71 0,15 THRO 5,32 6,56 4,97 6,30 5,47 10,62 8,58 9,39 7552 26,02 >50 >50 16,55 6,22 27,82 >50 >50 8339 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 7007 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 8398 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50
[00312] Os resultados de neutralização do HIV mostrados na Tabela 27 sugerem que a remoção do N72 glicano (2.1.3-1, 2.1.4-1,
1.1.54-1, 1.1.111-1, e 1.1.113-1) pode resultar em perda de sensibiliddae de neutralização para vírus seletos (isto é, 7141, 92US727) em comparação com anticorpos conservando o N72 glicano (Anticorpos B-1, A-1, 1.1.90-1).
[00313] Os anticorpos testados no ELISA de BVP de alto rendimento mostrados na Tabela 21 foram examinados em um ensaio de neutralização do HIV contra 4 vírus. Os resultados deste estudo estão apresentados na Tabela 28. Tabela 28. Potência de Neutralização do HIV Valores da IC50 de Neutralização (µg/mL) para o Vírus Indicado mAb 92US712 92US727 7141 VS001 A-1 0,13 3,8 3 0,18 3-1 0,11 3,92 4,03 0,1
2.2.1-1 0,05 ~6-11 1,61 0,1
2.3.1-1 0,13 ~4-12 2,65 0,2
1.1.64-1 0,05 0,55 0,64 0,05
3.1.8-1 0,12 1,15 3,51 0,11
2.2.8-1 0,07 3,38 1,6 0,07
2.3.8-1 0,07 1,72 1,64 0,15
1.1.67-1 0,1 8,1 3,76 0,15
3.1.9-1 0,11 3,54 4,35 0,16
2.2.9-1 0,06 13,1 1,75 0,15
2.3.9-1 0,09 11,1 2,56 0,22
1.1.115-1 0,08 >50 10,1 0,75
3.1.10-1 0,34 >50 44,8 2,24
2.2.10-1 0,05 >50 4,31 0,79
Valores da IC50 de Neutralização (µg/mL) para o Vírus Indicado mAb 92US712 92US727 7141 VS001
2.3.10-1 0,09 >50 15,3 0,94
1.1.116-1 0,12 >36 14,6 0,44
3.1.11-1 0,07 >44 8,7 0,57
2.2.11-1 0,04 >50 2,65 0,4
2.3.11-1 0,07 >50 11,2 0,83
1.1.117-1 0,09 >50 16,9 3,03
3.1.12-1 0,11 >41 24,5 2,41
2.2.12-1 0,04 >50 7,08 2,1
2.3.12-1 0,09 >50 23,8 1,92
1.1.118-1 0,18 >50 20,2 2,4
3.1.13-1 0,1 >21 13,2 0,56
2.2.13-1 0,08 >50 3,8 1,48
2.3.13-1 0,14 >38 15,5 1,5
1.1.10-1 0,12 45 5,43 0,17
3.1.14-1 0,12 >27 6,42 0,19
2.2.14-1 0,06 >50 2,26 0,21
2.3.14-1 0,11 35,3 5,23 0,21
1.1.54-1 0,16 >50 7,08 0,32
3.1.5-1 0,14 >17 9,8 0,23
2.2.5-1 0,05 >50 2,34 0,13
2.3.5-1 0,05 >50 3,52 0,19
1.1.104-1 0,12 >50 5,13 0,45
3.1.15-1 0,12 >33 9,1 0,49
2.2.15-1 0,03 >50 1,99 0,37
2.3.15-1 0,1 >50 5,93 0,85
1.1.119-1 0,08 >50 6,92 0,39
Valores da IC50 de Neutralização (µg/mL) para o Vírus Indicado mAb 92US712 92US727 7141 VS001
3.1.7-1 0,09 >50 5,65 0,3
2.2.7-1 0,04 >50 1,58 0,27
2.3.7-1 0,07 >50 5,08 0,47
1.1.42-1 0,29 >50 >50 0,9
3.1.2-1 0,09 >50 21,9 0,73
2.2.2-1 0,04 >50 2,06 0,44
2.3.2-1 0,1 >50 14,6 0,88
1.1.75-1 0,08 >50 11,3 0,5
3.1.16-1 0,29 >43 39 2,15
2.2.16-1 0,05 >50 3,38 0,78
2.3.16-1 0,09 >50 10,2 0,72
1.1.78-1 0,1 >50 29,5 3,3
3.1.17-1 0,1 >50 25,5 2,21
2.2.17-1 0,05 >50 6,28 4,38
2.3.17-1 0,08 >50 31,3 4,54
1.1.102-1 0,14 >50 22,7 3
3.1.18-1 0,24 >9,8 >9,8 3,52
2.2.18-1 0,09 >34 5,04 2,51
2.3.18-1 0,16 >23 >23 2,37
1.1.120-1 0,2 >32,9 17,8 0,88
3.1.19-1 0,1 >50 23,9 0,57
2.2.19-1 0,06 >50 4,83 1,04
2.3.19-1 0,09 >50 12 0,48
1.1.121-1 0,1 >37 28,7 1,3
3.1.20-1 0,06 >50 22,1 0,95
2.2.20-1 0,05 >50 4,01 1,25
Valores da IC50 de Neutralização (µg/mL) para o Vírus Indicado mAb 92US712 92US727 7141 VS001
2.3.20-1 0,08 >50 15,9 1,23
1.1.122-1 0,13 >42,4 6,79 0,32
1.1.123-1 0,09 >43,8 11,2 0,23
1.1.124-1 0,14 >25,4 9,87 0,3
1.1.125-1 0,12 >50 7,69 0,37
1.1.126-1 0,12 >50 6,49 0,35
1.1.127-1 0,16 >23 5,78 0,18
1.1.128-1 0,17 >28,3 9,5 0,67
1.1.129-1 0,15 >29,7 >29,7 2,09
1.1.130-1 0,21 >27,3 16,7 1,67
1.1.131-1 0,15 >31,9 16,4 0,57
1.1.111-1 0,13 >50 >50 3,24 B-1 0,13 2,57 1,43 0,29
1.1.90-1 0,12 8,72 2,65 0,2
1.1.132-1 0,12 2,26 3,39 0,14
1.1.133-1 0,14 2,27 3,38 0,16
1.1.134-1 0,14 4,23 3,15 0,22
1.1.135-1 0,22 5,61 4 0,31
1.42.1-1 0,13 0,98 2,34 0,11
1.43.1-1 0,08 3,35 2,42 0,1
1.44.1-1 0,06 ~7-12 1,43 0,13
1.45.1-1 9,8 >50 >50 27,6
1.46.1-1 0,17 1,68 2,44 0,24
1.47.1-1 0,11 1,17 2,48 0,24
1.49.1-1 0,14 2,41 2,98 0,26
1.50.1-1 0,08 0,92 2,54 0,14
Valores da IC50 de Neutralização (µg/mL) para o Vírus Indicado mAb 92US712 92US727 7141 VS001
1.51.1-1 0,1 2,67 3,5 0,22 A-1 0,13 4,8 2,9 0,2
[00314] Todos os anticorpos carregando mutações na posição N72 apresentam perda de função do vírus 92US727. O anticorpo com a potência média mais alta foi o Anticorpo 1.1.64. Alguns anticorpos apresentaram aumentos na potência de neutralização média em relaçã ao Anticorpo A-1. Entre os anticorpos contendo a mutação N72T com escores de ELISA de BVP reduzidos, o Anticorpo 2.3.5 também apresentou maior potência nos ensaios de neutralização do HIV.
[00315] Ensaios de neutralização adicionais foram conduzidos em um painel de variantes desenhadas para remover o motivo de oxidação W74a da cadeia pesada e o motivo de desamidação N26 da cadeia leve no domínio variável de A-1. Os resultados da avaliação estão apresentados nas Tabelas 29 e 30. Os resultados mostram que muitas variantes apresentaram perda de função, ao passo que variantes seletas conservaram potência mais similar ao A-1. Tabela 29: Resultados de neutralização do HIV para variantes de A-1 desenhadas para remover riscos químicos Vírus Risco Nome do VS003 VS046 VS001 VS026 VS052 US657 VS043 VS004 Abordado Anticorpo Nenhum A-1 0,03 0,03 0,08 0,26 0,38 0,86 1,47 3,42
1.1.136-1 0,03 0,04 0,20 0,76 0,38 0,92 1,57 >100
1.1.137-1 0,03 0,05 0,16 0,43 0,35 0,78 1,65 >100
1.1.138-1 0,06 0,04 0,18 0,35 0,46 0,54 1,41 39,24 Cadeia
1.1.139-1 0,03 0,05 0,36 0,94 0,51 0,54 1,37 >100 Leve N26
1.1.140-1 0,03 0,04 0,17 0,56 0,47 0,51 2,82 94,28
1.1.141-1 0,02 0,04 0,25 0,69 0,51 0,38 1,30 >100
1.1.142-1 0,02 0,03 0,20 0,48 0,56 0,44 1,42 >100
Vírus Risco Nome do VS003 VS046 VS001 VS026 VS052 US657 VS043 VS004 Abordado Anticorpo
1.1.143-1 0,05 0,05 0,40 3,85 0,92 0,82 2,05 89,88
1.1.144-1 0,03 0,05 0,38 1,07 0,66 0,38 1,29 >100
1.52.1-1 0,05 0,06 0,21 0,48 0,54 0,69 1,39 9,90
1.53.1-1 0,06 0,05 0,18 0,49 0,57 0,72 1,44 14,10 Cadeia 0,08 0,06 0,55 0,59 0,75 1,27 1,94 36,15
1.54.1-1 Pesada
1.55.1-1 0,08 0,07 0,49 0,83 1,08 1,39 2,48 34,00 W74a
1.56.1-1 0,09 0,07 0,49 0,72 0,87 1,28 1,51 21,80 0,06 0,09 0,65 0,91 1,21 2,43 2,47 56,68
1.57.1-1 Tabela 30: Resultados de neutralização do HIV para variantes de A-1 selecionadas em um painel viral expandido IC50 média Anticorpo 1.1.136- 1.1.137- 1.1.138- 1.1.140- 1.1.142- 1.52.1- 1.53.1- (µg/mL) A-1 1 1 1 1 1 1 1 US657(1) 0,864 0,92 0,78 0,55 0,55 0,51 0,44 0,73 VS003 0,027 0,03 0,03 0,06 0,03 0,02 0,04 0,06 VS046 0,029 0,04 0,05 0,04 0,04 0,03 0,05 0,05 VS001 0,080 0,20 0,16 0,18 0,17 0,20 0,21 0,18 VS026 0,259 0,76 0,43 0,35 0,56 0,48 0,48 0,50 VS052 0,381 0,38 0,35 0,45 0,47 0,56 0,54 0,56 VS043 1,466 1,57 1,65 1,41 2,82 1,42 1,39 1,44 VS004 3,419 >100 >100 39,24 >100 >100 9,90 14,10 US657(2) 0,336 0,30 0,31 0,42 0,46 0,59 0,82 0,65 VS002 0,024 0,02 0,03 0,03 0,03 0,02 0,05 0,05 VS011 0,147 0,19 0,18 0,25 025 0,37 0,33 0,34 VS017 0,443 2,14 1,75 2,02 2,13 2,87 3,01 3,03 VS030 1,614 2,49 2,86 2,81 3,28 3,61 4,86 3,54 VS032 0,256 0,27 0,28 0,25 0,20 0,17 0,27 0,25 VS033 0,207 0,15 0,20 0,19 0,09 0,08 0,27 0,11 VS034 0,358 0,54 0,40 0,45 0,23 0,33 0,28 0,45 VS038 0,210 0,22 0,18 0,12 0,28 0,34 0,40 0,18 VS039 0,121 0,10 0,07 0,07 0,05 0,07 0,17 0,15 VS042 3,171 3,37 2,23 1,73 2,01 1,72 4,54 3,42
IC50 média Anticorpo 1.1.136- 1.1.137- 1.1.138- 1.1.140- 1.1.142- 1.52.1- 1.53.1- (µg/mL) A-1 1 1 1 1 1 1 1 VS044 0,312 0,73 0,39 0,36 0,06 0,07 0,16 0,12 VS053 0,530 1,83 0,88 1,52 1,61 1,17 1,07 0,87
[00316] Em seguida, variantes seletivas de A-1 foram avaliadas quanto ao impacto das mutações na amplitude e na potência de neutralização, usando-se o ensaio de neutralização do HIV PhenoSense™ HIV (Monogram Biosciences; see also, Richman, et al., Proc Natl Acad Sci USA. (2003) 100(7):4144-9, Whitcomb, et al., Antimicrob Agents Chemother. (2007) 51(2):566-75), usando vírus repórteres pseudotipificados com envelopes derivados de vírus de pacientes (Tabela 31). O painel compreendia 152 vetores de Env no total (um vetor por paciente), com 133 vetores clonais e 19 isolados (representando as quasiespécies na amostra de plasma). Em resumo, os pseudovírus foram incubados com diluições seriadas 1 para 5 do anticorpo por 1 hora a 37°C e em seguida foram usados para infectar células U87 expressando CD4, CCR5 e CXCR4 (CD4+/CCR5+/CXCR4+/U87). A capacidade de um anticorpo para neutralizar a infectividade do HIV foi avaliada medindo-se a atividade de luciferase 72 horas após incubação das células com o vírus. Controles de vírus e de anticorpo foram empregados para monitorar o desempenho placa por placa em uma corrida e possibilitar a comparação das corridas ao longo to tempo. Todos os anticorpos de teste foram rastreados contra um painel de controle de vírus consistindo em HIV-1 NL4.3 (CXCR4-trópico), JRCSF (CCR5-trópico), e MLV (controle de não especificidade para HIV). Uma amostra de plasma HIV+ amplamente neutralizante serviu de controle de anticorpo. Embora algumas mutações tivessem um impacto mais sutil na atividadse, induzindo seja uma leve redução ou um leve aumento na atividade, outras mutações induziram uma perda considerável na amplitude de neutralização (Tabela 31 e Figura 4).
Tabela 31: A potência e a amplitude de neutralização de anticorpos seletos foram avaliadas contra 152 vírus subtipo B derivados de pacientes obtidos a partir de plasma pre-ART. Nome Amplitude a IC95 média, Média geométrica µg/mL b da IC95, µg/mL b A-1 89 % 2,66 3,06
1.1.90-1 86 % 2,59 3,01
1.1.64-1 92 % 2,25 2,70
1.1.10-1 86 % 1,93 2,53
1.52.1-1 83 % 3,66 4,33
1.52.90-1 78 % 4,42 4,56
1.1.138-1 82 % 2,59 2,96 a Amplitude representa a % de vírus neutralizados com uma IC95 ≤ 50 μg/mL b Valores medianos e média geométrica de IC95 calculados usando apenas vírus com IC95 ≤ 50 μg/mL
[00317] Os dados de neutralização mostrados acima foram combinados com os resultados do rastreamento de poliespecificidade (Exemplo 9) e do rastreamento de imunogenicidade (Exemplo 11) com a finalidade de desenhar um painel de 12 variantes líderes. O painel de 12 anticorpos expressos em Expi293 testado no ELISA de BVP mostrado na Tabela 22 foi em seguida examinado em um ensaio de neutralização do HIV cotra um painel expandido de vírus. Os resultados para os anticorpos conservando o glicano ligado em N72 estão apresentados na Tabela 32, ao passo que os resultados para os anticorpos sem glicano ligado em N72 estão apresentados na Tabela
33. Tabela 32: Potência de Neutralização do HIV de 7 anticorpos conservando o glicano ligado em N72 testados usando um painel expandido de vírus
Potência de Neutralização do Vírus (µg/mL) Vírus 1.1.64- 1.52.64- 1.1.90- 2.2.1- 2.4.1- 2.3.1- A-1 1 1 1 1 1 1 1003 1,79 2,97 3,29 1,17 1,61 3,62 1,87 1012 1,41 1,41 1,71 2,92 3,70 3,38 1,55 1413 5,31 4,22 7,79 2,07 4,13 5,04 5,28 1489 0,12 0,16 0,17 0,22 0,26 0,16 0,18 7015 0,53 0,65 0,98 0,63 0,47 0,54 0,63 7051 0,79 2,05 0,82 0,83 0,97 1,18 0,52 7103 0,76 1,56 1,09 1,75 1,72 1,31 0,94 7141 2,32 1,82 30,02 2,66 3,93 4,82 1,62 7467 0,04 0,06 0,07 0,05 0,03 0,05 0,06 7552 12,04 >80 50,05 >80 39,62 37,05 20,69 7576 0,69 0,39 1,46 1,42 0,70 1,40 0,92 7595 4,88 1,71 7,34 10,46 9,72 5,06 8,50 7714 4,20 ND ND ND ND ND ND 8106 2,72 3,31 8,15 4,54 2,46 4,25 3,12 8110 3,64 6,74 7,04 3,16 3,62 5,14 3,48 8117 0,86 1,77 2,18 1,47 0,94 2,58 2,08 8134 1,57 0,60 3,66 3,78 1,52 1,05 2,27 8176 0,26 0,66 0,34 0,27 0,30 0,33 0,30 8318 0,27 0,33 0,42 0,39 0,36 0,40 0,31 8320 2,20 2,89 3,82 3,22 3,88 6,69 2,88 302076 0,08 0,08 0,11 0,08 0,07 0,13 0,10 92HT593 0,27 0,37 0,25 0,22 0,17 0,37 0,29 92US657 0,38 0,42 0,48 0,40 0,25 0,34 0,36 92US712 0,06 0,06 0,13 0,05 0,05 0,07 0,06 92US727 2,43 1,12 5,47 8,61 4,84 13,74 2,02 CHO77 0,04 0,04 0,12 0,06 0,02 0,08 0,03 REJO 0,01 0,02 0,02 0,04 0,01 0,02 0,02
Potência de Neutralização do Vírus (µg/mL) Vírus 1.1.64- 1.52.64- 1.1.90- 2.2.1- 2.4.1- 2.3.1- A-1 1 1 1 1 1 1 THRO 2,80 3,87 3,11 2,04 2,17 4,17 3,96 VS001 0,06 0,06 0,11 0,10 0,08 0,18 0,07 VS004 2,66 2,43 4,74 3,21 2,84 6,08 1,92 VS017 0,70 0,91 2,01 1,08 0,84 3,91 0,88 VS026 0,11 0,17 0,23 0,20 0,13 0,27 0,13 VS030 2,04 2,60 7,98 7,40 2,51 5,20 6,38 VS039 0,12 0,09 0,27 0,14 0,03 0,11 0,06 VS042 2,53 2,33 4,44 1,88 0,89 2,00 1,11 VS043 0,79 0,85 1,30 1,11 1,01 1,16 0,97 VS044 0,18 0,16 0,38 0,26 0,13 0,25 0,16 VS046 0,04 0,04 0,05 0,03 0,03 0,05 0,03 VS049 39,54 32,19 >100 >100 2,89 >100 4,86 VS052 0,28 0,45 0,61 0,64 0,24 0,50 0,33 Tabela 33: Potência de Neutralização do HIV de 5 anticorpos sem o glicano ligado em N72 testados usando um painel expandido de vírus Potência de Neutralização do Vírus (µg/mL) Vírus
1.1.104-1 1.1.119-1 3.1.5-1 2.2.5-1 2.3.5-1 1003 1,44 0,91 1,02 0,78 1,06 1012 2,87 1,06 1,19 0,98 1,63 1413 4,34 4,52 4,30 3,62 3,79 1489 0,28 0,17 0,16 0,11 0,14 7015 0,67 1,08 1,16 0,95 1,89 7051 1,32 1,89 1,27 3,51 4,46 7103 1,82 1,16 0,91 0,78 1,05 7141 6,57 4,98 3,31 1,75 2,41 7467 0,06 0,19 0,12 0,07 0,09
Potência de Neutralização do Vírus (µg/mL) Vírus
1.1.104-1 1.1.119-1 3.1.5-1 2.2.5-1 2.3.5-1 7552 >80 >80 >80 >80 >80 7576 1,10 0,60 0,55 0,58 0,61 7595 8,47 3,07 3,56 2,94 3,07 7714 ND 1,93 1,50 0,80 1,47 8106 2,80 1,44 1,45 0,94 1,44 8110 4,19 2,37 1,81 1,10 1,82 8117 1,22 1,66 1,02 0,75 1,06 8134 6,07 3,44 2,78 1,74 1,52 8176 0,16 0,27 0,30 0,20 0,33 8318 0,32 0,42 0,36 0,33 0,41 8320 4,34 1,47 1,33 1,21 1,48 302076 0,10 0,08 0,06 0,06 0,06 92HT593 0,28 0,15 0,16 0,11 0,17 92US657 0,36 0,30 0,27 0,15 0,24 92US712 0,04 0,03 0,06 0,04 0,05 92US727 10,55 43,70 11,98 16,74 9,32 CHO77 0,03 0,02 0,04 0,02 0,04 REJO 0,02 0,03 0,02 0,01 0,02 THRO 4,27 2,80 2,70 1,22 2,34 VS001 0,34 0,37 0,10 0,10 0,13 VS004 4,80 6,02 1,55 3,22 2,77 VS017 2,33 2,75 1,03 0,77 0,70 VS026 0,19 0,14 0,10 0,06 0,10 VS030 7,90 4,96 6,86 4,22 6,23 VS039 0,10 0,13 0,12 0,06 0,15 VS042 2,33 2,19 1,94 1,21 1,56
Potência de Neutralização do Vírus (µg/mL) Vírus
1.1.104-1 1.1.119-1 3.1.5-1 2.2.5-1 2.3.5-1 VS043 1,49 0,81 0,54 0,41 0,79 VS044 0,28 0,20 0,16 0,12 0,17 VS046 0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 VS049 >100 >100 20,37 10,85 36,15 VS052 0,27 0,39 0,31 0,20 0,31
[00318] Os resultados nas Tabelas 32 e 33 mostram que todas as 12 variantes de anticorpo testadas possuem valores de potência de neutalização do vírus similares ao painel expandido de vírus. Um subconjunto de variantes também foi avaliado quanto à neutralização e quanto à potência de neutralização por meio do ensaio de neutralização Phenosense, usando um painel de 141 vírus repórteres pseudotipificados com envelopes derivados do vírus subtipo B dos pacientes (Tabela 34 e Figura 5). Cada vetor de envelope compreendia isolados coletados como amostras de um paiente. As variantes apresentaram potência e amplitude de neutralização equiparáeis. Tabela 34: Atividade de Neutralização de Variantes de mAb avaliadas contra HIV-1 pseudotipificado com Env de isolados de plasma do subtipo B A A-1 1.52.64-1 Amplitude a 87 % 87 % 86 % média IC95 média, µg/mL b 1,72 1,93 2,00 Média geométrica da IC95, µg/mL b 2,26 2,23 2,94 a Amplitude representa a % de vírus neutralizados com an IC95 ≤ 50 μg/mL b Valores medianos e média geométrica de IC95 calculados usando apenas vírus com IC95 ≤ 50 μg/mL
Exemplo 11: Proliferação de células T de moléculas inteiras in vitro e liberação de IL2
[00319] As respostas do hospedeiro ao anticorpo anti-fármaco (ADA) podem ter impacto negativo na eficácia e na farmacocinética de anticorpos terapêuticos e os complexos imunes resultantes podem apresentar problemas de segurança (Pratt KP. 2018. Antibodies. 7:19, Krishna M e Nadler SG. 2016. Front. Immunol. 7:21). Como resultado, ensaios de proliferação de células T in vitro e de liberação de IL2 tais como EpiScreen™ (Abzena Ltd.) foram desenvolvidos para avaliar o risco imunogênico global dos bioterápicos. O EpiScreen™ mede a liberação de IL2 induzida por bioterápico via o ensaio do ponto imunoabsorvente ligado à enzima (ELISpot) e a proliferação de células T via incorporação de 3H-timidina em culturas de PMBC primárias depletadas de células T CD8+ obtidas de 50 doadores selecionados para representar alótipos de HLA expressos entre a população mundial. Uma proteína altamente imunogênica tal como hemocianina de lapa com perfuração (KLH) induzirá tanto a liberação de IL2 quanto a proliferação de células T em >80% dos doadores, bioterápicos aprovados tais como Alemtuzumab e Infliximab com altas taxas de imunogenicidade clínica induzirão índices de resposta em 25%-40% dos doadores, ao passo que bioterápicos com baixo risco imunogênico tipicamente apresentam índices de resposta do doador ≤10%. Foi demonstrado que os índices de resposta do doador no EpiScreen™ estão correlacionados com índices ADA clínicos (Baker e Jones 2007. Curr. Opin. Drug Discov. Devel. 10: 219-227).
[00320] A Tabela 35 mostra os resultados do ensaio EpiScreen™ para um painel de bNAbs anti-gp120 que foram expressos transitoriamente em células Expi293 e purificados usando proteína A e cromatografia de exclusão por tamanho. Também estão mostrados o anticorpo A33 e KLH como controles positivos. Em contraste com as proteínas imunogênicas de controle positivo, muitos dos anticorpos anti-gp120 testados, incluindo o A-1, apresentaram taxas de prolifeação de células T extraordinariamente altas, mas índices de liberação de IL2 relativamente baixos. Estes dados sugerem que na ausência de um alvo, o A-1 e outros bNAbs anti-gp120 podem estimular diretamente a incorporação de 3H-timidina em PBMCs humanas primárias in vitro via um mecanismo desconhecido. Este mecanismo desconhecido, doravante denominado "atividade fora do alvo" poderia apresentar riscos de segurança se transladado in vivo. Tabela 35: Resultados do EpiScreen™ para 10 Abs anti-gp120 expressos em Expi293™ testados em PBMCs de 50 doadores. Linhagem das Incorporação Liberação Nome 3H + IL2 Lote # células de de 3H- de IL2 do Ab (%) expressão timidina (%) (%) E 3 Expi293™ 16 6 4 A-1 3 Expi293™ 32 6 6 F 4 Expi293™ 60 10 10 G 4 Expi293™ 60 8 8 H 4 Expi293™ 50 14 12 I 3 Expi293™ 56 16 10 J 4 Expi293™ 6 14 4 K 4 Expi293™ 16 6 2 E-7 2 Expi293™ 14 10 2 E-6 2 Expi293™ 10 8 2 A33 NA NA 20 22 14 KLH NA NA 90 82 80
[00321] Os índices de resposta (%) indicam a percentagem de 50 doadores apresentando respostas nos ensaios indicados.
[00322] A cadeia pesada e a cadeia leve dos anticorpos E, F, G, H, I, J, K, L, L-1, E-6 e E-7 estão apresentadas na Tabela 36.
TABELA 36 - ANTICORPOS DE COMPARAÇÃO / CONTROLE Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada Sequência de do Ab (HC) Aminoácidos da Cadeia Leve
E EVQLVESGGGLVKAGGSLILSCGVSNFRISAHTMN DVVMTQSPSTLSASVG WVRRVPGGGLEWVASISTSSTYRDYADAVKGRFT DTITITCRASQSIETWL VSRDDLEDFVYLQMHKMRVEDTAIYYCARKGSDRL AWYQQKPGKAPKLLIY SDNDPFDAWGPGTVVTVSPASTKGPSVFPLAPSS KASTLKTGVPSRFSGS KSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG GSGTEFTLTISGLQFD VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNV DFATYHCQHYAGYSAT NHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG FGQGTRVEIKRTVAAP PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEV SVFIFPPSDEQLKSGTA KFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLT SVVCLLNNFYPREAKV VLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQ QWKVDNALQSGNSQE PREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDI SVTEQDSKDSTYSLSS AVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV TLTLSKADYEKHKVYA
DKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG CEVTHQGLSSPVTKSF K (SEQ ID NO: 632) NRGEC (SEQ ID NO: 643)
F EVQLVQSGTQMKEPGASVTISCVTSGYEFVEILINW YIGVTQSPAILSVSLGE VRQVPGRGLEWMGWMNPRGGGVNYARQFQGKV RVTLSCKTSQAITPRHL TMTRDVYRDTAYLTLSGLTSGDTAKYFCVRGRSCC VWHRQKGGQAPSLVM GGRRHCNGADCFNWDFQHWGQGTLVIVSPASTK TGTSERASGIPDRFIGS GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTV GSGTDFTLTITRLEAED SWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS FAVYYCQCLEAFGQGT SLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTC KLEIKRTVAAPSVFIFP PPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCV PSDEQLKSGTASVVCL VVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQY LNNFYPREAKVQWKV NSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLP DNALQSGNSQESVTE EEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLT QDSKDSTYSLSSTLTL CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSD SKADYEKHKVYACEVT
GSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSH HQGLSSPVTKSFNRGE YTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 633) C (SEQ ID NO: 644)
TABELA 36 - ANTICORPOS DE COMPARAÇÃO / CONTROLE Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada Sequência de do Ab (HC) Aminoácidos da Cadeia Leve
G EVQLVQSGTQMKEPGASVTISCVTSGYEFVEILINW EIVLTQSPGTLSLSPGE VRQVPGRGLEWMGWMNPRGGGVNYARQFQGKV TAIISCRTSQYGSLAWY TMTRDVYRDTAYLTLSGLTSGDTAKYFCVRGKSCC QQRPGQAPRLVIYSGS AGRRFCGPTDCYNWDFAHWGQGTLVIVSPASTKG TRAAGIPDRFSGSRW PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVS GPDYNLTISNLESGDF WNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSS GVYYCQQYEFFGQGT LGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCP KVQVDIKRTVAAPSVFI PCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVV FPPSDEQLKSGTASVV VDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYN CLLNNFYPREAKVQW STYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPE KVDNALQSGNSQESV EKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTC TEQDSKDSTYSLSSTL LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDG TLSKADYEKHKVYACE
SFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYT VTHQGLSSPVTKSFNR QKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 634) GEC (SEQ ID NO: 645)
H QVRLSQSGGQMKKPGDSMRISCRASGYEFINCPIN EIVLTQSPGTLSLSPGE WIRLAPGKRPEWMGWMKPRGGAVSYARQLQGRV TAIISCRTSQYGSLAWY TMTRDMYSETAFLELRSLTSDDTAVYFCTRGKYCT QQRPGQAPRLVIYSGS ARDYYNWDFEHWGQGTPVTVSSASTKGPSVFPLA TRAAGIPDRFSGSRW PSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT GPDYNLTISNLESGDF SGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYIC GVYYCQQYEFFGQGT NVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELL KVQVDIKRTVAAPSVFI AGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHED FPPSDEQLKSGTASVV PEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVS CLLNNFYPREAKVQW VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKA KVDNALQSGNSQESV KGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFY TEQDSKDSTYSLSSTL PSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYS TLSKADYEKHKVYACE
KLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLS VTHQGLSSPVTKSFNR LSPGK (SEQ ID NO: 635) GEC (SEQ ID NO: 646)
TABELA 36 - ANTICORPOS DE COMPARAÇÃO / CONTROLE Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada Sequência de do Ab (HC) Aminoácidos da Cadeia Leve
I RVQLVESGGGVVQPGKSVRLSCVVSDFPFSKYPM DIVMTQTPLSLSVTPG YWVRQAPGKGLEWVAAISGDAWHVVYSNSVQGR QPASISCKSSESLRQS FLVSRDNVKNTLYLEMNSLKIEDTAVYRCARMFQE NGKTSLYWYRQKPGQ SGPPRLDRWSGRNYYYYSGMDVWGQGTTVTVSS SPQLLVFEVSNRFSGV ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPE SDRFVGSGSGTDFTLR ISRVEAEDVGFYYCMQ PVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVT SKDFPLTFGGGTKVDL VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDK KRTVAAPSVFIFPPSDE THTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPE QLKSGTASVVCLLNNF VTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPR YPREAKVQWKVDNAL EEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNK QSGNSQESVTEQDSK ALPLPEEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKN DSTYSLSSTLTLSKADY
QVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP EKHKVYACEVTHQGLS VLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLHE SPVTKSFNRGEC (SEQ ALHSHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 636) ID NO: 647)
J QEQLVESGGGVVQPGGSLRLSCLASGFTFHKYGM QSALTQPASVSGSPG HWVRQAPGKGLEWVALISDDGMRKYHSDSMWGR QTITISCNGTSSDVGGF VTISRDNSKNTLYLQFSSLKVEDTAMFFCAREAGG DSVSWYQQSPGKAPK PIWHDDVKYYDFNDGYYNYHYMDVWGKGTTVTVS VMVFDVSHRPSGISNR SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFP FSGSKSGNTASLTISGL EPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVV HIEDEGDYFCSSLTDR TVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCD SHRIFGGGTKVTVLGQ KTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMISRTP PKAAPSVTLFPPSSEE EVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKP LQANKATLVCLISDFYP REEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSN GAVTVAWKADSSPVK KALPLPEEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTK AGVETTTPSKQSNNKY NQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTP AASSYLSLTPEQWKSH
PVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVLH RSYSCQVTHEGSTVEK EALHSHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 637) TVAPTECS (SEQ ID NO: 648)
K QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGNSFSNHDV EVVITQSPLFLPVTPGE HWVRQATGQGLEWMGWMSHEGDKTGLAQKFQG AASLSCKCSHSLQHST RVTITRDSGASTVYMELRGLTADDTAIYYCLTGSKH GANYLAWYLQRPGQT RLRDYFLYNEYGPNYEEWGDYLATLDVWGHGTAV PRLLIHLATHRASGVPD TVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKD RFSGSGSGTDFTLKIS RVESDDVGTYYCMQG YFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLS LHSPWTFGQGTKVEIK
TABELA 36 - ANTICORPOS DE COMPARAÇÃO / CONTROLE Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada Sequência de do Ab (HC) Aminoácidos da Cadeia Leve
SVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPK RTVAAPSVFIFPPSDE SCDKTHTCPPCPAPELLAGPDVFLFPPKPKDTLMIS QLKSGTASVVCLLNNF RTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAK YPREAKVQWKVDNAL TKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCK QSGNSQESVTEQDSK VSNKALPLPEEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREE DSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLS MTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY SPVTKSFNRGEC (SEQ
KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSC ID NO: 649) SVLHEALHSHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 638)
L QVQLVQSGGQMKKPGESMRISCRASGYEFIDCTL EIVLTQSPGTLSLSPGE NWIRLAPGKRPEWMGWLKPRGGAVNYARPLQGR TAIISCRTSQYGSLAWY VTMTRDVYSDTAFLELRSLTVDDTAVYFCTRGKNC QQRPGQAPRLVIYSGS DYNWDFEHWGRGTPVIVSSASTKGPSVFPLAPSS TRAAGIPDRFSGSRW KSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG GPDYNLTISNLESGDF VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNV GVYYCQQYEFFGQGT NHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG KVQVDIKRTVAAPSVFI PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEV FPPSDEQLKSGTASVV KFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLT CLLNNFYPREAKVQW VLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQ KVDNALQSGNSQESV PREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDI TEQDSKDSTYSLSSTL AVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV TLSKADYEKHKVYACE
DKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG VTHQGLSSPVTKSFNR K (SEQ ID NO: 639) GEC (SEQ ID NO: 650) L-1 QVQLVQSGGQMKKPGESMRISCRASGYEFIDCTL EIVLTQSPGTLSLSPGE
NWIRLAPGKRPEWMGWLKPRGGAVNYARPLQGR TAIISCRTSQYGSLAWY VTMTRDVYSDTAFLELRSLTVDDTAVYFCTRGKNC QQRPGQAPRLVIYSGS DYNWDFEHWGRGTPVIVSSASTKGPSVFPLAPSS TRAAGIPDRFSGSRW KSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG GPDYNLTISNLESGDF VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNV GVYYCQQYEFFGQGT NHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG KVQVDIKRTVAAPSVFI PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEV FPPSDEQLKSGTASVV KFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLT CLLNNFYPREAKVQW VLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQ KVDNALQSGNSQESV PREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDI TEQDSKDSTYSLSSTL AVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV TLSKADYEKHKVYACE DKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG VTHQGLSSPVTKSFNR
TABELA 36 - ANTICORPOS DE COMPARAÇÃO / CONTROLE Nome Sequência de Aminoácidos da Cadeia Pesada Sequência de do Ab (HC) Aminoácidos da Cadeia Leve K (SEQ ID NO: 640) GEC (SEQ ID NO: 651) E-6 EVQLVESGGGLVKAGGSLILSCGVSNFRISAHTMN DVVMTQSPSTLSASVG
WVRRVPGGGLEWVASISTSSTYRDYADAVKGRFT DTITITCRASQSIETWL VSRDDLEDFVYLQMHKMRVEDTAIYYCARKGSDRL AWYQQKPGKAPKLLIY SDNDPFDAWGPGTVVTVSPASTKGPSVFPLAPSS KASTLKTGVPSRFSGS KSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG GSGTEFTLTISGLQFD VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNV DFATYHCQHYAGYSAT NHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG FGQGTRVEIKRTVAAP PSVFLLPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEV SVFIFPPSDEQLKSGTA KFNWYVDGVEVHNAKTKPPEEQYNSTLRVVSILTV SVVCLLNNFYPREAKV LHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQP QWKVDNALQSGNSQE REPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA SVTEQDSKDSTYSLSS VEWESNGQPENNYKTTPLVLDSDGSFFLYSKLTVD TLTLSKADYEKHKVYA
KSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSPGK CEVTHQGLSSPVTKSF (SEQ ID NO: 641) NRGEC (SEQ ID NO: 652) E-7 EVQLVESGGGLVKAGGSLILSCGVSNFRISAHTMN DVVMTQSPSTLSASVG
WVRRVPGGGLEWVASISTSSTYRDYADAVKGRFT DTITITCRASQSIETWL VSRDDLEDFVYLQMHKMRVEDTAIYYCARKGSDRL AWYQQKPGKAPKLLIY SDNDPFDAWGPGTVVTVSPASTKGPSVFPLAPSS KASTLKTGVPSRFSGS KSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSG GSGTEFTLTISGLQFD VHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNV DFATYHCQHYAGYSAT NHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELVG FGQGTRVEIKRTVAAP GPSVFLLPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPE SVFIFPPSDEQLKSGTA VKFNWYVDGVEVHNAKTKPPEEQYNSTLRVVSVL SVVCLLNNFYPREAKV TVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKG QWKVDNALQSGNSQE QPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSD SVTEQDSKDSTYSLSS IAVEWESNGQPENNYKTTPLVLDSDGSFFLYSKLT TLTLSKADYEKHKVYA
VDKSRWQQGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSP CEVTHQGLSSPVTKSF GK (SEQ ID NO: 642) NRGEC (SEQ ID NO: 653)
[00323] Para entender melhor a inesperada atividade fora do alvo do A-1, conduzimos um segundo ensaio EpiScreen em A-1 e nas variantes descritas neste pedido sem o motivo de glicosilação ligando em N72 na cadeia leve de A-1. Para determinar se as alterações na composição do glicano ligado N72 expressão-hospedeiro-dependente (Exemplo 14, abaixo) poderiam ter algum impacto na atividade fora do alvo de A-1, proteínas para o segundo ensaio EpiScreen foram expressão na linhagem de células ExpiCHO™ e não na linhagem de células Expi293™. Os resultados deste ensaio EpiScreen™ estão apresentados na Tabela
37. O anticorpo A-1 expresso na linhagem de células ExpiCHO apresentou taxas de proliferação de células T mais baixas (16%) que o A- 1 expresso nas células Expi293 (32%), sugerindo que a linhagem de células de expressão e alterações associadas na composição do glicando ligado em N72 podem ter algum impacto na suposta atividade fora do alvo observada noi EpiScreen™. De forma inesperada, todas as variantes do anticorpo A-1 sem o sítio de glicosilação ligado em N72 na cadeia leve do anticorpo apresentaram taxas de proliferação de células T muito mais altas. Os resultados sugerem que a composição do Fab glicano ligado em N72 pode desempenhar um papel na modulação da atividade de proliferação de células T fora do alvo, mas que a remoção do Fab glicano ligado em N72 potencializa a atividade fora do alvo. Tabela 37: Resultados do EpiScreen™ para 7 Abs anti-gp120 expressos em ExpiCHO™ testados em PBMCs de 50 doadores. Linhagem das Incorporação Liberação 3H + Nome Lote # células de de 3H- de IL2 IL2 expressão timidina (%) (%) (%) A-1 6 ExpiCHO™ 16 6 4
1.1.10-1 2 ExpiCHO™ 32 6 6
1.1.42-1 2 ExpiCHO™ 60 10 10
1.33.32- 3 ExpiCHO™ 60 8 8 1
1.1.54-1 2 ExpiCHO™ 50 14 12
1.37.51- 2 ExpiCHO™ 56 16 10 1
Linhagem das Incorporação Liberação 3H + Nome Lote # células de de 3H- de IL2 IL2 expressão timidina (%) (%) (%)
1.8.52-1 2 ExpiCHO™ 6 14 4 A33 NA NA 16 6 2 KLH NA NA 14 10 2
[00358] Os índices de resposta (%) indicam a percentagem de 50 doadores apresentando respostas nos ensaios indicados.
[00359] Como o ensaio EpiScreen™ mede a incorporação de 3H- timidina em culturas de PBMC primárias, é possível que na ausência de liberação de IL2, as atividades fora do alvo observadas para A-1 e variantes do mesmo pudessem envolver a proliferação de qualquer tipo de célula presente nas PBMCs (por exemplo, proliferação de células B em vez de proliferação cassete de expressão células T). Para determinar se o A-1 derivado de ExpiCHO™ e uma variante do mesmo sem o glicano em N72 estimulavam a proliferação de células T, depois disso conduzimos um ensaio EpiScreen™ usando ou PBMCs depletadas de células T CD8+ ou PBMCs depletadas de células T CD8+ e CD4+ coletadas dos mesmos 10 doadores. Para um controle negativo, selecionados o anticorpo L derivado de Expi293, que previamente apresentara baixos índices de resposta do doador no EpiScreen™ (vide, por exemplo, o documento WO 2017/106346). Os resultados deste ensaio estão apresentados na Tabela 38. Os resultados mostram nitidamente que as taxas de incorporação de 3H-timidina são reduzidas na ausência de células T CD4+. Estes dados mostram que a atividade fora do alvo observada para A-1 e variantes do mesmo é dependente da presença de células T. Como o HIV infecta e estabelece um reservatório latente nas células T, a proliferação de células T induzida pelo anticorpo anti-gp120 fora do alvo poderia expandir em potencial o reservatório de HIV-1, e seria, portanto, indesejável como parte de uma estratégia de cura do HIV destinada a depletar o reservatório de HIV-1.
Tabela 38: Resultados do EpiScreen™ para 3 Abs anti-gp120 testados em PBMCs de 10 doadores na presença (+CD4) ou ausência (-CD4) de células T CD4+. Incorporação Linhagem das Incorporação de 3H- Nome Lote # células de de 3H-timidina timidina -CD4 expressão +CD4 (%) (%) A-1 6 ExpiCHO™ 40 0
1.1.54-1 2 ExpiCHO™ 40 10 L 3 Expi293™ 0 0
[00359] Os índices de resposta (%) indicam a percentagem de 10 doadores apresentando respostas nos ensaios indicados.
[00360] Como descrito mais adiante no Exemplo 15, a composição molecular do glicano da cadeia leve ligado em N72 do A-1 e a farmacocinética resultante podem mudar drasticamente dependendo do hospedeiro da expressão e do teor de sialilação resultante do Fab vlicano ligado em N72 da cadeia leve. Com base nos resultados dos ensaios EpiScreen apresentados nas Tabelas 35 a 38, lançamos a hipótese que a composição molecular do glicano ligado em N72 da cadeia leve de A-1 poderia ter algum impacto na atividade de proliferação de células T fora do alvo observada descrita neste pedido. Para testar esta ideia, em seguida conduzimos um EpiScreen com 10 doadores medindo a proliferação de células T usando ou A-1 derivado de ExpiCHO ou CHO-S ou variantes do mesmo. Como descrito nos Exemplos 14 e 15, o A-1 derivado de CHO-S tem um teor de sialiação de N72-glicano significativamente mais alto que o material derivado de Expi293 ™ ou ExpiCHO ™. Os resultados deste EpiScreen estão apresentados na Tabela 39. Os anticorpos A-1 e 1.1.90-1 expressos na linhagem de células CHO-S não apresentaram proliferação de células T fora do alvo. Embora o número de doadores neste ensaio fosse pequeno, estes dados sugeriram que a linhagem de célulsas de expresão de A-1 e a composição do glicano ligado em N72 da cadeia leve associada poderiam modular não só a farmacocinético, mas modular também a atividade fora do alvo observada no ensaio EpiScreen™ Tabela 39: Resultados da proliferação de células T no EpiScreen™ para 6 Abs anti-gp120 expressos em ExpiCHO™ ou em CHO-S testados em PBMCs de 10 doadores. Linhagem das Incorporação de Nome Lote # células de 3H-timidina (%) expressão
1.1.54-1 6 ExpiCHO™ 40 L-1 2 CHO-S 20
1.1.111-1 2 CHO-S 30
1.1.90-1 3 CHO-S 0 B-1 2 CHO-S 20 A-1 18 CHO-S 0 Exenatide NA NA 40 KLH NA NA 60
[00361] Os índices de resposta (%) indicam a percentagem de 50 doadores apresentando respostas nos ensaios indicados.
[00362] Com base nos resultado preliminares mostrados na Tabela 39, depois disso conduzimos um EpiScreen™ com 50 doadores em um painel de 7 anticorpos anti-gp120 incluindo o A-1 e variantes do mesmo expressos em linhagens de células ExpiCHO ou CHO-S. Os resultados deste ensaio estão apresentados na Tabela 40 e demonstram que o A-1 apresenta proliferação de células T e liberação de IL2 muito baixas quando geradas usando linhagens de células CHO-S que incorporam um alto nível de ácido siálico no sítio de glicosilação da cadeia leve ligado em N72 (vide exemplos 14-15). Os resultados demonstram ainda que variantes selecionadas do A-1 possuem índices de proliferação de células T ainda mais reduzidos quando produzidas e testadas da mesma maneira. Tabela 40: Resultados do EpiScreen™ para 7 Abs anti-gp120 testados em PBMCs de 50 doadores. Linhagem das Incorporação Liberação 3H + IL2 Nome Lote # células de de 3H- de IL2 (%) expressão timidina (%) (%)
1.1.64-1 5 CHO-S 36 6 2 A-1 27 CHO-S 10 0 0
1.52.64-1 3 CHO-S 4 4 0
3.1.5-1 3 CHO-S 28 6 4
2.3.5-1 3 CHO-S 28 2 0
1.1.10-1 3 ExpiCHO™ 22 10 4 L-1 7 CHO-S 12 4 2 Exenatide NA NA 38 20 10 KLH NA NA 98 94 92
[00363] Os índices de resposta (%) indicam a percentagem de 50 doadores apresentando respostas nos ensaios indicados. Exemplo 12: Ensaios de Ligação in vitro
[00364] A farmacocinética (PK) e a farmacodinâmica (PD) dos terápicos à base de anticorpos é mediada pela ligação específica a proteínas alvo via os domínios variáveis e/ou pela ligação aos receptores Fc-gama (FcγR) em células imunes inatas, receptor Fc neonatal (FcRn) em células endoteliais e proteína C1q circulante do complemento (Nimmerjahn e Ravetch. 2008. Nat. Rev. Immunol. 8:34- 47, Rogers et al. 2014. Immunol. Res. 59:203-210, Kuo TT and Aveson VG. 2011. MAbs 3:422-430). A engenharia genética do domínio variável ou do domínio Fc do anticorpo pode impactar a ligação a esses receptores e influenciar a PK e a PD. Assim sendo, avaliamos a afinidade relativa de anticorpos selecionados descritos neste pedido using usando uma variedade de ensaios de ligação in vitro comuns incluindo ressonância de plasmon de superfície (SPR) e ensaio imunoabsorvente ligado à enzima (ELISA).
[00365] As constantes de dissociação de ligação (KD) in vitro de anticorpos selecionados descritos neste pedido para receptores de ligação ao Fc (FcγRs, FcRn) de seres humanos e macacos cinomolgos (cyno) foram determinados por meio do biossensor de ressonância de plasmon de superfície (SPR) Biacore 4000, e chips sensores C1 ou CM4 (GE Healthcare). FcRn humano biotinilado foi adquirido na Immunitrack. FcRn de macaco cinomolgo biotinilado e FcγRIIIB-NA1 e FcγRIIIB-NA2 humanos foram adquiridos na Acro Biosystems. FcγRIIA-167H, FcγRIIA-167R, FcγRIIIA-176F, FcγRIIIA- 176V, FcγRIIB/C, e FcγRI humanos, e FcγRI, FcγRIIA, FcγRIIB e FcγRIII de macaco cinomolgo foram adquiridos na R&D systems.
[00366] Para ensaios de ligação ao FcRn humano, 600 RU de estreptavidina foi acoplado via amina a um chip sensor C1 usando acoplamento NHS/EDC tradicional. O tampão de imobilização foi PBS+0,005% de Tween 20, pH 7,4. A estreptavidina foi preparada a 50 µg/ml em 10 mM de NaAc pH 4,5. As etapas de ativação, acoplamento, e bloqueio foram operadas por 10 minutos, cada uma a 10 µl/min. FcRn humano biotinilado foi capturado até cerca de 20 unidades relativas (RU). Amostras de mAb A-1, A e 1.52.64-1 foram testadas quanto à ligação à superfície do FcRn usando uma série de concentrações duplicadas até 1 µM. Os dados foram coletados em pH 6,0 e pH 7,4 em triplicata. Os dados de resposta no estado estacionário foram ajustados a uma isoterma de ligação simples.
[00367] FcγRIIA e FcγRIIIA humanos foram acoplados via amina em 4 densidades diferentes (cerca de 100 RU, cerca de 250 RU, cerca de 375 RU e cerca de 725 RU) em um chip sensor CM4. As três amostras de mAb foram testadas quanto à ligação em tampão de corrida PBS pH 7,4 + Tween20 (0,005%) em uma série de diluições 1 para dois até 1 µM. Cada série de concentrações de mAb foi testada duas vezes em cada uma das 4 superfícies de densidades do receptor gerando 8 conjuntos de dados para cada interação. Os dados de resposta no estado estacionário foram ajustados a uma isoterma de ligação simples.
[00368] FcRIIB/C humano foi acoplado via amina a um chip sensor CM4 em três níveis diferentes (50, 400 e 800 RU). Os três mAbs foram testados usando 2 µM como a concentração mais alta em uma série de diluições um para dois. A série de concentrações foi operada em triplicata para cada anticorpo através das superfícies de baixa, média e alta densidade do receptor. Os dados de resposta no estado estacionário foram ajustados a uma isoterma de ligação simples.
[00369] Para determinar as afinidades de ligação ao FcγRIIIB humano, cada anticorpo de teste foi acoplado via amina a um chip sensor CM4 em duas densidades (cerca de 100 RU e cerca de 800 RU). Amostras de FcγRIIIB humano foram testadas quanto à ligação usando uma série de concentrações duplicadas até 0,5 µM. Os dados de resposta no estado estacionário foram ajustados a uma isoterma de ligação simples.
[00370] Para determinar as afinidades de ligação ao FcγRI humano, cada anticorpo de teste foi acoplado via amina a um chip sensor CM4 em duas densidades (cerca de 100 RU e cerca de 800 RU). FcγRI humano foi testado quanto à ligação usando uma série de titulações em duas etapas (3 nM e 30 nM). As respostas foram ajustadas a um modelo cinético simples.
[00371] Para determinar as afinidades de ligação ao FcRn de macaco cinomolgo, 600 RU de estreptavidina foram acoplados via amina a um chip sensor C1 usando acoplamento NHS/EDC tradicional. O tampão de imobilização foi PBS+0,005% de Tween 20, pH 7,4. A estreptavidina foi preparada a 50 µg/ml em 10 mM de NaAc pH 4,5. As etapas de ativação, acoplamento, e bloqueio foram operadas por 10 minutos, cada uma a 10 µl/min. FcRn cyno biotinilado foi capturado até cerca de 20 RU. Os anticorpos foram testados quanto à ligação à superfície do FcRn usando uma série de concentrações duplicadas até 1 µM. Os dados foram coletados em pH 6,0 e pH 7,4 em triplicata. Os dados de resposta no estado estacionário foram ajustados a uma isoterma de ligação simples.
[00372] Para determinar as afinidades de ligação aos FcγRIIA, FcγRIIB, FcγRIII e FcγRI de macaco cinomolgo cada anticorpo de teste foi acoplado via amina a um chip sensor CM4 em duas densidades (cerca de 100 RU e cerca de 800 RU). FcγRIIA e FcγRIIB cyno foram testados em uma série de concentrações duplicadas até 1 µM. FcγRIII foi testado em uma série de concentrações duplicadas até 500 nM. FcγRI cyno foi testado quanto à ligação usando uma titulação em duas etapas (3 nM e 30 nM). Os dados de resposta para FcγRIIA, FcγRIIB, FcγRIII no estado estacionário foram ajustados a uma isoterma de ligação simples. As respostas para o FcγRI foram ajustadas a um modelo cinético simples.
[00373] Todo o conjunto de constantes de ligação determinadas por ressonância de plasmon de superfície (SPR) estão apresentados na Tabela 41. Os dados mostram que variantes do anticorpo A com domínios Fc geneticamente modificados apresentam afinidade de ligação aumentada para proteínas FcγR e FcRn humanas e cyno. Tabela 41: Constantes de Ligação (KD) ao Receptor Fc Determinadas por SPR Alelo tipo receptor Fc A A-1 1.52.64-1 0,107 ± 0,040 0,002 ± 0,002 0,0012 ± FcγRI Humano nM nM 0,0005 nM 0,038 ± 0,016 0,005 ± 0,004 0,005 ± 0,003 FcγRI Cyno nM nM nM FcγRIIA-167H Humano 1,8 ± 0,5 µM 131 ± 22 nM 221 ± 21 nM FcγRIIA-167R Humano 3 ± 1 µM 130 ± 9 nM 199 ± 21 nM
Alelo tipo receptor Fc A A-1 1.52.64-1 FcγRIIA Cyno 2000 ± 1000 nM 1100 ± 80 nM 1180 ± 60 nM FcγRIIB Humano 11 ± 0,8 µM 1,6 ± 0,2 µM 1,9 ± 0,2 µM FcγRIIB Cyno 895 ± 50 nM 240 ± 9 nM 280 ± 32 nM FcγRIIIA – 176V Humano 670 ± 40 nM 59 ± 4 nM 67 ± 6 nM FcγRIIIA – 176F Humano 2,3 ± 0,6 µM 52 ± 4 nM 63 ± 5 nM FcγRIIIB – NA1 Humano 2000 ± 1000 nM 59 ± 9 nM 64 ± 15 nM FcγRIIIB – NA2 Humano 1500 ± 400 nM 56 ± 18 nM 55 ± 14 nM FcγRIII Cyno 200 ± 70 nM 7,1 ± 0,7 nM 8 ± 2 nM FcRn Humano pH 7,4 42 ± 1 µM 1,7 ± 0,3 µM 1,12 ± 0,08 µM FcRn Humano pH 6,0 485 ± 43 nM 38 ± 3 nM 49 ± 5 nM FcRn Cyno pH 7,4 12,8 ± 0,4 µM 4,3 ± 0,4 µM 5,3 ± 0,2 µM FcRn Cyno pH 6,0 1100 ± 100 nM 16 ± 2 nM 22 ± 2 nM
[00374] Um ELISA de ligação dose resposta foi conduzido para determinar a afinidade de ligação relativa ao C1q dos anticorpos descritos neste pedido. Para a realização deste ensaio, uma placa Maxisorp de 384 poços foi revestida com 25 µl de solução de anticorpo a 5 µg/mL em PBS pH 7,4 por uma noite a 4°C. As placas foram então bloqueadas com 75 µL de BSA 1% em PBS por 2 horas e lavadas 4 vezes com PBS + 0,05% de Tween 20 (PBST). Em seguida, 25 µL de uma diluição seriada 1 para três da proteína C1q humana em PBS+5% BSA foram adicionados às placas. As placas foram incubadas com agitação a 600 rpm por uma hora, lavadas 4 vezes com PBST e em seguida 25 µL de anticorpo policlonal anti-C1q conjugado a HRP foram adicionados em PBS+5% de BSA. As placas foram incubadas com agitação a 600 rpm por 15 minutos, lavadas 8 vezes com PBST e então desenvolvidas usando o substrato 3,3′,5,5′-tetrametilbenzidina (TMB) e resfriadas bruscamente com HCl. A absorvência a 450nM foi lida em uma leitora de placas spectramax m5 e os valores de EC50 foram determinados usando um ajuste de dose resposta de 4 parâmetros.
[00375] Os valores médios da EC50 para o ELISA de ligação ao C1q foram calculados a partir de três ensaios independentes e estão apresentados na Tabela 42. Tabela 42: Valores de EC50 de ligação ao C1q determinados por ELISA (n=3 ensaios) Anticorpo EC50 de ligação ao C1q (nM) A 2,2 ± 1,2 nM A-1 > 100 nM
1.52.64-1 > 100 nM
[00376] Os resultados mostram que variantes geneticamente modificadas de Fc do anticorpo A possuem afinidade de ligação ao C1q significativamente reduzida.
[00377] Um ELISA de ligação dose resposta foi conduzido para determinar as afinidades de ligação relativa à gp120 dos anticorpos descritos neste pedido. Para a realização deste ensaio, uma placa Maxisorp de 384 poços foi revestida com 25 µl de solução de gp120 a 5 µg/mL e incubada por uma noite a 4°C. A placa foi lavada 4 vezes com PBS 0,05% Tween 20 e bloqueada com 75 µL de PBS 5% BSA por 1 hora à temperatura ambiente com agitação a 600 rpm. Depois do bloqueio, os poços foram aspirados e 25 µL de uma diluição seriada 1 para 3 de anticorpo primário foram adicionados e incubados à temperatura ambiente por 1 hora com agitação a 600 rpm. A placa foi então lavada 4 vezes com PBS 0,05% Tween 20 e 25 µl de anticorpo secundário HRP de cabra anti-IgG humana (H + L) diluído 1/10.000 em PBS 1% BSA foram adicionados e incubados à temperatura ambiente, com agitação a 600 rpm por 30 minutos. Em seguida, a placa foi lavada 4 vezes com PBS 0,05% Tween 20 e 25 µl de substrato TMB fresco foram adicionados. A placa foi desenvolvida por 90 segundos com agitação a 600 rpm antes de ser resfriada bruscamente com 25 µl de HCl 1M. A absorvência foi ligada a A450 em uma leitora de placas Spectramax m5.
[00378] Os valores médios da EC50 foram calculados a partir de três ensaios ELISA independentes e estão apresentados na Tabela 43. Tabela 43: Valores de EC50 de ligação à gp120 determinados por
ELISA proteína gp120 A A-1 1.52.64-1 Bal 0,05 ± 0,02 nM 0,06 ± 0,01 nM 0,07 ± 0,02 nM CAAN 1,84 ± 0,22 nM 2,17 ± 0,56 nM 3,79 ± 1,26 nM REJO 2,21 ± 0,44 nM 2,37 ± 0,68 nM 4,02 ± 0,45 nM
[00379] Os resultados sugerem que todos os anticorpos testados se ligam à proteína gp120 do HIV com afinidades similares. Exemplo 13: Efeitos das Mutações no Fc na Meia-Vida Sérica
[00380] Neste exemplo, mutações no Fc da IgG1 que aumentam a destruição de células efetoras e/ou que aumentam a ligação ao FcRn foram avaliadas quanto aos seus efeitos na meia-vida sérica. Os dados são consistentes com a conclusão de que mutações no Fc da IgG1 que aumentam a atividade de destruição de células efetoras (por exemplo, ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330 de acordo com a numeração EU (DEAL)) podem diminuir a meia-vida sérica in vivo. Tal meia-vida diminuída pode ser parcial ou totalmente recuperada também pela incorporação de mutações no Fc da IgG1 que aumentam a ligação ao FcRn (por exemplo, leucina na posição 428, e serina na posição 434 de acordo com a numeração EU (LS)).
[00381] PGT121-WT, PGT121-DEAL, PGT121.60, PGT121-LS (descritos, por exemplo, no documento WO 2017/106346), e A-1 do presente pedido foram administrados a macacos cinomolgos (Covance, TX) a 10 mg/kg ou 0,5 mg/kg (A-1) via uma única injeção intravenosa (IV) para caracterizar seus perfis farmacocinéticos (PK) básicos. As amostras de soro coletadas dos macacos foram analisadas por um método bioanalítico de seletividade e sensibilidade suficientes para determinar os perfis de concentração sérica-tempo e calcular os parâmetros PK séricos médios por análise não compartimental (NCA) da PK. O método bioanalítico utilizou o antígeno gp120 do clado B (Immune-tech, CA) como reagente de captura e anticorpo de cabra anti-IgG humana conjugado à biotina (Southern Biotech, AL) como reagente secundário, com estreptavidina marcada com SULFO-TAG (MesoScale Discovery, MD) para detecção eletroquímica.
[00382] Os perfis de concentração sérica medida versus tempo do PGT121-WT, PGT121-DEAL, PGT121.60, PGT121-LS, e A-1, representados na Figura 6, foram usados para calcular os parâmetros PK médios (± SD) apresentados na Tabela 44. Tabela 44: Parâmetros farmacocinéticos de PGT121-WT, PGT121- DEAL, PGT121.60, PGT121-LS, e A-1 depois da administração IV em macacos cinomolgos naïve (n=3). Dose AUC0-∞ Cl Vd t1/2 Artigo de Teste (mg/kg IV) (dia*ug/mL) (mL/dia/kg) (mL/kg) (dia) PGT121-WT 10 1510 ± 470 7,0 ± 1,9 105 ± 17,6 10,6 ± 1,3 PGT121-DEAL 10 1020 ± 167 9,9 ± 1,5 109 ± 20 7,7 ± 1,3 PGT121.60 10 1490 ± 377 7,0 ± 1,9 96 ± 19 9,7 ± 0,8 PGT121-LS 10 3540 ± 463 2,9 ± 0,4 82 ± 11 19,9 ± 2,1 A-1 0,5 70 ± 7,0 7,2 ± 0,7 91 ± 14 8,7 ± 0,8
[00383] A análise PK mostrou que a inclusão de mutações no Fc (DEAL) para PGT121-WT teve impacto negativo na PK aumentando a depuração (Cl) para 9,9 ± 1,5 mL/dia/kg para PGT121-DEAL comparada a 7,0 ± 1,9 mL/dia/kg para PGT121-WT e reduziu a meia- vida (t1/2) para 7,7 ± 1,3 dias versus 10,6 ± 1,3 dias para PGT121-WT. A inclusão de mutações na ligação ao FcRn (LS) em anticorpos com um Fc que contém as mutações DEAL (PGT121.60 e A-1), resultou em valores de Cl de 7,0 ± 1,9 e 7,2 ± 0,7 mL/dia/kg e valores de t1/2 de 9,7 ± 0,8 e 8,7 ± 0,8 dias, respectivamente, que são equiparáveis à
PK do PGT121-WT. Ao passo que a inclusão de LS apenas ao PGT121-WT reduziu o Cl para 2,9 ± 0,4 mL/dia/kg e aumentou a t1/2 para 19,9 ± 2,1 dias para PGT121-LS. A análise PK sustentou que a introdução de mutações DEAL potencializadoras do Fc reduz a PK do anticorpo (provavelmente devido à ligação aumentada do FcgR), que pode ser recuperada pela inclusão das mutações na ligação ao LS FcRn. Exemplo 14. Avaliações dos Perfis de Fab Glicano da Cadeia Leve
[00384] Foram usadas duas técnicas para isolar e analisar os perfis do Fab glicano da cadeia leve na ausência de Fc glicanos potencialmente interferentes da cadeia pesada. O principal objetivo desses experimentos era entender a percentagem relativa de glicanos da caeia leve terminando com um ou mais grupos ácido siálico (doravante denominada sialilação percentual). A primeira abordagem ("método 1") foi espectrometria de massa em fase reversa da cadeia leve intacta reduzida. Nesta técnica, os desvios de massa observados no espectro de massa desconvoluído foram atribuídos à estrutura do glicano conhecida a partir de vias biossintéticas do N-glicano para corresponder ao desvio de massa. A quantificação relativa das formas sialiladas é obtida somando-se as alturas máximas desconvoluídas para as espécies sialiladas e dividindo-se este valor pelo total de todas as alturas máximas sialiladas e não sialiladas. Um segundo método ("método 2") para quantificar a sialilação nos fab glicanos da cadeia leve dependia da liberação enzimática seletiva dos Fc glicanos (em condições puramente aquosas) antes do isolamento da proteína remanescente e da liberação dos Fab glicanos remanescentes da cadeia leve. As alíquotas separadas correspondentes aos Fc e Fab glicanos foram então marcadas de forma fluorescente (Waters RapiFluor) e analisadas, identificadas, e quantificadas por cromatografia HILIC. Os valores percentuais de sialilação do Fab para diversos anticorpos descritos neste pedido e analisados por uma dessas técnicas estão mostrados abaixo nas Tabelas 45A e 45B.
Tabela 45A.
Avaliação do Fab glicano da cadeia leve do anticorpo A-1 Lote 14 10 7 Sistema de Expressão CHO-S Tuna293TM ExpiCHOTM Glicano ID1 % Área % Área % Área Máxima Máxima Máxima Picos Desconhecidos2 6,47 3,50 4,16 G0-GlcNAc 0,00 4,20 4,49 G0 0,91 55,97 52,43 G0F 0,00 1,25 1,52 G1F-GlcNAc 0,00 11,77 0,00 Man5 0,88 4,02 0,00 G1(a) 0,44 6,50 9,54 G1(b) 0,46 0,43 6,92 G1-GlcNAc 0,00 0,00 11,17 G1F(a) 0,27 0,00 0,00 G1F(b) 0,00 0,00 0,31 G1S 0,00 1,88 0,87 G2 0,00 7,42 8,59 G2F 6,14 0,00 0,00 G2S(a) 0,28 1,79 0,00 G2S(b) 38,65 1,30 0,00 G2FS 0,67 0,00 0,00 G2S2 39,13 0,00 0,00 G2FS2 0,69 0,00 0,00 G2S + 2 GlcNAc 2,60 0,00 0,00 G2S2+2GlcNAc(a) 0,82 0,00 0,00 G2S2+2GlcNAc(b) 1,60 0,00 0,00 Soma de Glicanos Sialilados3 84,44 4,97 0,87 1 Identificação e percentagens máximas derivadas do método de liberação seletiva de fab glicano (VL), marcação, e cromatografia líquida de interação hidrofílica (HILIC). Todas as identificaçõs baseiam-se nas massas monoisotópicas observadas e vias biossintéticas conhecidas, no entanto, variantes isoméricas para algumas entradas são possíveis. 2 Sistema, e totais de picos do reagente, desconhecidos. 3 Soma de glicanos sialilados; soma de N-glicanos identifiados terminando em um ou mais resíduos ácido siálico (ácido N- acetilneuramínico) (sublinhados). Tabela 45B. Avaliação do Fab glicano da cadeia leve comparando os anticorpos A-1 e 1.52.64-1 Nome Lote # Linhagem de Percentagem de Método Células Sialilação 5 Expi293™ 67/52 1/2 7 ExpiCHO™ 1/1 1/2 A-1 10 Tuna293™ 5 2 14 CHO-S 84 2 22 CHO-origem 73 1 18-PP21 CHO-origem 49 1
1.52.64-1 14525-02 CHO-origem 83 1 1 LC/MS da cadeia leve reduzida 2 Liberação seletiva do Fab glicano, marcação, e cromatografia HILIC Exemplo 15: Efeitos das mutações no Fv e perifis de glicosilação do Fv na farmacocinética dos anticorpos
[00385] O Anticorpo A e diversos anticorpos geneticamente modificados descritos neste pedido foram administrados a macacos cinomolgos para caracterizar seus perfis farmacocinéticos (PK). Em certos casos, variantes do Anticorpo A-1 foram transitória ou estavelmente produzidos em diferentes de linhagens de células de expressão para avaliação do impacto da sialilação do Fab glicano ligado em N72 na PK. A percentagem de sialilação do Fab glicano foi determinada por LCMS como descrito no Exemplo 14. Amostras de soro coletadas de macacos foram analisadas por um método bioanalítico de seletividade e sensibilidade suficientes para determinar os perfis de concentração sérica-tempo e os parâmetros PK séricos médios por análise pH não compartimental (NCA). O método bioanalítico utilizou o antígeno gp120 do clado B (Immune-tech, CA) como reagente de captura e anticorpo de cabra anti-IgG humana conjugado à biotina (Southern Biotech, AL) como reagente secundário, com estreptavidina marcada com SULFO-TAG (MesoScale Discovery, MD) para detecção eletroquímica.
[00386] A disposição in vivo do Anticorpo A e diversas variantes geneticamente modificadas transitoriamente expressas em diferentes linhagens de células foi caracterizada depois de uma única administração intravenosa (IV) em três (n=3) macacos cinomolgos machos naïves por grupo (Covance, TX). Os perfis de concentração sérica medida média ± desvio padrão (SD)-tempo estão apresentados na Figura 7. A análise farmacocinética do Anticorpo A expresso transitoriamente em Expi293™ (ThermoFisher Scientific, MA) administrado a 0,5 mg/kg IV apresentou valores de depuração (Cl) de 17,9 ± 1,0 e meia-vida correspondente (t1/2) de 8,9 ± 1,7 dias que foram equiparáveis ao Anticorpo A-1 Lote 3, expresso em Expi293™ em condições similares, com uma Cl de 18,7 ± 2,3 mL/dia/kg e t1/2 de 7,6 ± 0,3 dias (Tabela 46).
[00387] Anticorpos com Fab glicanos do domínio variável contendo baixo teor de ácido siálico ou alto teor e manose podem ser a PK alterada (Liu L. 2015. J. Pharm. Sci. 104:1866-1884). As composições do glicano podem ser alteradas como resultado das condições de expressão da proteína, por coneguinte, a disposição in vivo do A-1 foi avaliada usando lotes adicionais expressos transitoriamente caracterizados por seu teor % de sialiação de Fab glicano, a saber, CHO-S (Lote 14), de CHO-origem (Lote 22) (Sigma-Aldrich, MO), e Tuna293™ (Lote 10) (LakePharma, CA), e ExpiCHO™ (Lote 7) (ThermoFisher Scientific, MA). Os anticorpos foram caracterizados depois de uma única dose IV de 0,5 mg/kg (Lote 14, 22, e 10) ou 5,0 mg/kg (Lote 7) em macacos cinomolgos naïves (Covance, TX). Os perfis de concentração sérica medida média ± desvio padrão (SD)- tempo de cada lote do Anticorpo A-1 estão apresentados na Figura 7. O Lote 7 teve a dose normalizada para comparação direta. A análise farmacocinética dos lotes testados do Anticorpo A-1 mostrou PK variável baseada no teor % de sialilação do Fab (Tabela 46). O Anticorpo A-1 Lote 14 com 84% de sialilação do Fab glicano teve o valor de depuração (Cl) mais baixo de 7,2 ± 0,7 mL/dia/kg, enquanto que a Cl foi progressivamente mais rápida com o Lote 22 do Anticorpo A-1 (73%) com uma Cl de 10,7 ± 1,7, com o Anticorpo A-1 Lote 3 com uma Cl de 18,7 ± 2,3 mL/dia/kg, com o Anticorpo A-1 Lote 10 (5%) com uma Cl de 68,7 ± 19,8 mL/dia/kg, e com o Anticorpo A-1 Lote 7 (<1%) com uma Cl de 120 ± 46,7 mL/dia/kg. Os dados sustentam que as condições de expressão da proteína podem ter impacto na composição do Fab glicano e na PK resultante. Tabela 46: Farmacocinética do anticorpo A e diversas variantes geneticamente modificadas depois de administração IV a macacos cinomolgos machos naïves (n=3). % de Artigo Sistema de IV Dose Cl Sialilação de de Teste Expressão Lote (mg/kg) (mL/dia/kg) Fab A Expi293TM 5 0,5 17,9 ± 1,0 ND A-1 Expi293TM 3 0,5 18,7 ± 2,3 ND A-1 CHO-S 14 0,5 7,2 ± 0,7 84 A-1 CHO-origem 22 0,5 10,7 ± 1,7 73 A-1 Tuna293TM 10 0,5 68,7 ± 20 5 A-1 ExpiCHOTM 7 5 120 ± 47 <1
1.1.54-1 ExpiCHOTM 3 5 12 ± 1 ND
1.37.51-1 ExpiCHOTM 3 5 15 ± 12 ND ND = não determinado
[00388] Para avaliar o impacto das modificações na proteína destinadas a remover o glicano ligado em N72 do domínio variável e a poliespecificidade, a PK in vivo de 1.1.54-1 e 1.37.51-1 (dois anticorpos sem o glicano ligado em N72 removido) foi avaliada. Ambos os anticorpos foram transitoriamente expressos no sistema de expressão de células de mamífero ExpiCHO™ em condições similares, o que resultou em PK reduzida do A-1 (Lote 7, acima). Os anticorpos foram caracterizados depois uma única dose de bolo IV de 5 mg/kg a três macacos cinomolgos machos naïves (Covance, TX). A análise PK (Tabela 46) demonstrou que 1.1.54-1 e 1.37.51-1 eram equiparáveis em termos de Cl (12 ± 1 e 15 ± 12 mL/dia/kg, respectivamente), e ainda significativamente melhor que o Lote 7 de A- 1 (Cl de 120 ± 47 mL/dia/kg), sustentanto que modificações na proteína que removem o glicano ligado em N72 do domínio variável podem melhorar a PK das variantes de anticorpos descritas neste pedido. A remoção do glicano não atingiu a mesma depuração que os lotes altamente sialilados, sustentando que o glicano ligado em N72 pode estar presente para reduzir interações inespecíficas da proteína.
[00389] A PK de 1.52.64-1 (Lote 4) derivada de expressão transitória em CHO-S, ou 1.52.64-1 de uma poça estável de células de CHO-origem (Lote 18-PP21) ou de uma linhagem de células de CHO-origem selecionadas por clonagem (Lote 14525-32) foi estudada depois de uma única administração IV a macacos cinomolgos machos e fêmeas naïves (n=3). Os perfis de concentração sérica média ± SD-tempo para os dias 0-14 estão apresentados na Figura 8. Os resultados da NCA estão apresentados na Tabela 47. 1.52.64-1 (Lote 4) continha aproximada- mente 75% de sialilação de Fab. O Lote 4 de 1.52.64-1 administrado como um bolo IV lento a 0,5 mg/kg resultou em uma depuração nos macacos cinomolgos de 7,8 ± 0,6 mL/dia/kg; equivalente ao A-1 Lote 14 (7,2 ± 0,7 mL/dia/kg) expresso em CHO-S em condições similares.
Tabela 47: Parâmetros farmacocinéticos de três lotes de 1.52.64-1 depois de administrações IV em macacos cinomolgos machos e fêmeas naïves (n=3). Sistema de IV Dose Cl % de Sialilação Expressão Lote (mg/kg) (mL/dia/kg) de Fab transfecção transitória em Lote 4 0,5 7,8 ± 0,6 75 CHO-S poça estável de Lote 18-PP21 30 20,8 ± 9,5 49 CHO-origem clone estável de Lote 14525-32 30 7,9 ± 1,3 84 CHO-origem
[00390] 1.52.64-1 Lote 18-PP21 produziu material com aproximadamente 49% de sialilação do Fab ao que o Lote 14525-32 produziu material com aproximadamente 84% de sialilação do Fab a partir do sistema de expressão estável de CHO-origem. 1.52.64-1 Lote 18-PP21 e Lote 14525-32 foram administrados via uma infusão IV por 30 minutos a 30 mg/kg. A análise PK revelou que o Lote 18-PP21 teve exposição reduzida em relação ao Lote 14525-32 devido à depuração aumentada de 20,8 ± 9,5 mL/dia/kg comparada a 7,9 ± 1,3 mL/dia/kg, respectivamente. A depuração aumentada é consistente com a % de sialilação reduzida do Fab glicano (49% vs. 84%). A totalidade das avaliações PK pré-clínicas demonstram que variantes do anticorpo A contendo uma estrutura de Fab glicano requerem condições controladas de produção de proteína para produzir anticorpos com alto grau de sialilação de Fab glicano (por exemplo ≥ 75%) que vão atingir a farmacocinética desejável do anticorpo. Exemplo 16: Seleção de Linhagens de Células com Alta Sialilação
[00391] Tendo em vista os dados e as análises precedentes, isolamos linhagens de células para produzir um anticorpo altamente sialilado. Para tanto, o desenvolvimento da linhagem de células (CLD) foi voltado para a identificação de linhagens de células que expressam anticorpos anti-gp120 altamente sialilados, como os descritos neste pedido. Em resumo, a linhagem de células de desenvolvimento baseado em CHO foi transfectada com um vetor codificando a cadeia pesada e a cadeia leve hospedeiras das variantes de anticorpo descritas neste pedido. Múltiplas poças estáveis foram avaliadas quanto ao desempenho em biorreator e quanto à qualidade do produto (incluindo % de sialilação). As poças estáveis expressando o anticorpo tendo um alto nível de sialilação (por exemplo, pelo menos cerca de 75 % sialiladas) foram elecionadas para gerar clones. Com a finalidade de direcionar ainda mais o isolamento da linhagem de células clonais para maior sialilação, as linhagens de células clonais geradas a partir da poça parental estável com a % de sialilação mais alta (aproximadamente 95% sialiladas) foram super-representados em todo o fluxo de trabalho de geração de clones. Múltiplas linhagens de células clonais foram avaliadas quanto ao desempenho em biorreator e quanto à qualidade do produto (incluindo % de sialilação) e uma linhagem de células clonais expressando anticorpo altamente sialilado (>85 %) foi selecionada como a principal linhagem de células para a produção de um banco de células mestre (MCB).
OUTRAS MODALIDADES
[00392] Embora a presente invenção tenha sido descrita em conjunto com a descrição detalhada da mesma, a descrição acima destina-se a ilustrar e não a limitar o escopo da invenção, que é definido pelo escopo das reivindicações em anexo. Outros aspectos, vantagens, e modificações estão dentro do escopo das reivindicações em anexo.

Claims (25)

REIVINDICAÇÕES
1. Anticorpo ou um fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga à glicoproteína gp120 do envelope do vírus da imunodeficiência humana-1 (HIV-1), caracterizado pelo fato de que compreende (i) uma região variável de cadeia pesada (VH) compreendendo regiões determinantes de complementaridade 1-3 da VH (CDRs 1-3) e (ii) uma região variável de cadeia leve (VL) compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL apresentam as sequências representadas em: (i) SEQ ID NOs.: 159, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (ii) SEQ ID NOs.: 137, 160, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (iii) SEQ ID NOs.: 137, 161, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (iv) SEQ ID NOs.: 137, 162, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (v) SEQ ID NOs.: 137, 163, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; (vi) SEQ ID NOs.: 137, 138, 164, 140, 141, e 142, respectivamente; (vii) SEQ ID NOs.: 159, 138, 164, 140, 141, e 142, respectivamente; (viii) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 165, e 142, respectivamente; (ix) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 166, e 142, respectivamente; (x) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 167, e 142, respectivamente; (xi) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 168, e 142,
respectivamente; (xii) SEQ ID NOs.: 137, 138, 154, 140, 141, e 142, respectivamente; ou (xiii) SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente; e opcionalmente inclui na região de estrutura 3 (FR3) da VH na posição correspondente a 74a, 74b, 74c, e 74d (numeração de Kabat) a sequência de aminoácidos apresentada na SEQ ID NO:453 ou na SEQ ID NO: 627.
2. Anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que (a) a VH compreende um ou mais dos seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): valina na posição 5, ácido glutâmico na posição 10, lisina na posição 12, lisina na posição 23, asparagina na posição 28, arginina na posição 30, tirosina na posição 32, treonina na posição 68, metionina na posição 69, histidina na posição 72, fenilalanina na posição 76, alanina na posição 78, serina na posição 82a, arginina na posição 82b, treonina na posição 89, tirosina na posição 99, glutamina na posição 105, ou metionina na posição 108; (b) compreende FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASWDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 628) ou RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629); (c) a VL compreende um ou mais dos seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): arginina na posição 18, lisina na posição 39, prolina na posição 40, treonina na posição 56, serina na posição 65,
treonina na posição 72, serina na posição 76, serina na posição 77, treonina na posição 99, glicina na posição 99, asparagina na posição 103, ou isoleucina na posição 106; (d) a VL compreende um ou mais dos seguintes aminoácidos nas posições indicadas (numeração da posição de acordo com Kabat): arginina na posição 18, alanina na posição 19, serina na posição 65, treonina ou histidina na posição 72, lisina na posição 74, serina na posição 76, serina na posição 77, fenilalanina na posição 98, ou glicina na posição 99; (e) a VL compreende uma sequência de aminoácidos apresentada em qualquer uma das SEQ ID NOs.: 332 a 342; (f) compreende uma região Fc da IgG1 humana, opcionalmente em que a região Fc da IgG1 humana é IgG1m17 (SEQ ID NO: 348); (g) compreende uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): (i) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330; (ii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iv) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (v) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; ou (vi) leucina na posição 243, prolina na posição 292,
leucina na posição 300, isoleucina na posição 305, leucina na posição 396, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (h) compreende uma região constante da cadeia leve Kappa humana, opcionalmente em que a região constante da cadeia leve Kappa humana é Km3 (SEQ ID NO:351); (i) apresenta uma potência de destruição de células infectadas pelo HIV maior que o Anticorpo A; (j) apresenta uma meia-vida sérica melhorada, estendida, ampliada ou aumentada em um ser humano do que o Anticorpo A; e/ou (k) apresenta uma meia-vida sérica em um ser humano de pelo menos cerca de 3 dias, por exemplo, pelo menos cerca de 4 dias, pelo menos cerca de 5 dias, pelo menos cerca de 6 dias, pelo menos cerca de 7 dias, pelo menos cerca de 8 dias, pelo menos cerca de 9 dias, pelo menos cerca de 10 dias, pelo menos cerca de 12 dias, pelo menos cerca de 14 dias, pelo menos cerca de 16 dias, pelo menos cerca de 18 dias, pelo menos cerca de 20 dias, pelo menos cerca de 21 dias, pelo menos cerca de 24 dias, pelo menos cerca de 28 dias, pelo menos cerca de 30 dias, ou mais.
3. Anticorpo que se liga à glicoproteína gp120 do envelope do vírus da imunodeficiência humana-1 (HIV-1), caracterizado pelo fato de que compreende (i) uma região variável de cadeia pesada (VH) compreendendo regiões determinantes de complementaridade 1-3 (CDRs 1-3) da VH e (ii) uma região variável de cadeia leve (VL) compreendendo CDRs 1-3 da VL, em que as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL apresentam as sequências representadas em SEQ ID NOs.: 137, 138, 139, 140, 141, e 142, respectivamente, em que o anticorpo compreende uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU):
(a) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330; (b) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (c) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (d) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (e) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; ou (f) leucina na posição 243, prolina na posição 292, leucina na posição 300, isoleucina na posição 305, leucina na posição 396, leucina na posição 428, e serina na posição 434.
4. Anticorpo, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que: (a) compreende uma cadeia leve compreendendo uma alanina na posição 19 (numeração de Kabat); (b) compreende na região de estrutura 3 (FR3) da VH nas posições correspondentes a 74a, 74b, 74c, e 74d (numeração de Kabat) a sequência de aminoácidos apresentada nas SEQ ID NO: 453 ou SEQ ID NO: 627; (c) compreende a FR3 da VH compreendendo a seguinte sequência de aminoácidos: RVSLTRHASWDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 628) ou RVSLTRHASFDFDTFSFYMDLKALRSDDTAVYFCAR (SEQ ID NO: 629); (d) compreende uma sequência de aminoácidos da VL apresentada em qualquer uma das SEQ ID NOs.: 332 a 342; (e) a região Fc da IgG1 humana é IgG1m17 (SEQ ID NO:348); (f) compreende uma região constante da cadeia leve Kappa humana, opcionalmente em que a região constante da cadeia leve Kappa humana é Km3 (SEQ ID NO:351); (g) apresenta uma potência de destruição de células infectadas pelo HIV maior que o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B; (h) apresenta uma meia-vida sérica melhorada, estendida, ampliada ou aumentada em um ser humano do que o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B; e/ou (i) apresenta uma meia-vida sérica em um ser humano de pelo menos cerca de 3 dias, por exemplo, pelo menos cerca de 4 dias, pelo menos cerca de 5 dias, pelo menos cerca de 6 dias, pelo menos cerca de 7 dias, pelo menos cerca de 8 dias, pelo menos cerca de 9 dias, pelo menos cerca de 10 dias, pelo menos cerca de 12 dias, pelo menos cerca de 14 dias, pelo menos cerca de 16 dias, pelo menos cerca de 18 dias, pelo menos cerca de 20 dias, pelo menos cerca de 21 dias, pelo menos cerca de 24 dias, pelo menos cerca de 28 dias, pelo menos cerca de 30 dias, ou mais.
5. Anticorpo ou um fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, caracterizado pelo fato de que compreende uma região variável de cadeia pesada (VH) e uma região variável de cadeia leve (VL), em que as VH e VL compreendem as sequências de aminoácidos apresentadas, respectivamente, abaixo: (1) SEQ ID NOs.: 184 e 223; (2) SEQ ID NOs.: 185 e 223; (3) SEQ ID NOs.: 182 e 225; (4) SEQ ID NOs.: 185 e 225; (5) SEQ ID NOs.: 186 e 223;
(6) SEQ ID NOs.: 187 e 223; (7) SEQ ID NOs.: 188 e 223; (8) SEQ ID NOs.: 189 e 223; (9) SEQ ID NOs.: 190 e 223; (10) SEQ ID NOs.: 191 e 223; (11) SEQ ID NOs.: 192 e 223; (12) SEQ ID NOs.: 193 e 223; (13) SEQ ID NOs.: 194 e 223; (14) SEQ ID NOs.: 195 e 223; (15) SEQ ID NOs.: 196 e 223; (16) SEQ ID NOs.: 197 e 223; (17) SEQ ID NOs.: 198 e 223; (18) SEQ ID NOs.: 199 e 223; (19) SEQ ID NOs.: 200 e 223; (20) SEQ ID NOs.: 201 e 223; (21) SEQ ID NOs.: 202 e 223; (22) SEQ ID NOs.: 203 e 223; (23) SEQ ID NOs.: 204 e 223; (24) SEQ ID NOs.: 205 e 223; (25) SEQ ID NOs.: 206 e 223; (26) SEQ ID NOs.: 207 e 223; (27) SEQ ID NOs.: 208 e 223; (28) SEQ ID NOs.: 209 e 223; (29) SEQ ID NOs.: 182 e 226; (30) SEQ ID NOs.: 182 e 227; (31) SEQ ID NOs.: 182 e 229; (32) SEQ ID NOs.: 182 e 230; (33) SEQ ID NOs.: 182 e 231; (34) SEQ ID NOs.: 182 e 232; (35) SEQ ID NOs.: 182 e 233;
(36) SEQ ID NOs.: 182 e 234; (37) SEQ ID NOs.: 182 e 235; (38) SEQ ID NOs.: 182 e 236; (39) SEQ ID NOs.: 182 e 237; (40) SEQ ID NOs.: 182 e 238; (41) SEQ ID NOs.: 182 e 239; (42) SEQ ID NOs.: 182 e 240; (43) SEQ ID NOs.: 182 e 241; (44) SEQ ID NOs.: 182 e 242; (45) SEQ ID NOs.: 182 e 243; (46) SEQ ID NOs.: 182 e 244; (47) SEQ ID NOs.: 182 e 245; (48) SEQ ID NOs.: 182 e 246; (49) SEQ ID NOs.: 182 e 247; (50) SEQ ID NOs.: 182 e 248; (51) SEQ ID NOs.: 182 e 249; (52) SEQ ID NOs.: 182 e 250; (53) SEQ ID NOs.: 182 e 251; (54) SEQ ID NOs.: 182 e 252; (55) SEQ ID NOs.: 182 e 253; (56) SEQ ID NOs.: 210 e 238; (57) SEQ ID NOs.: 211 e 238; (58) SEQ ID NOs.: 212 e 238; (59) SEQ ID NOs.: 210 e 240; (60) SEQ ID NOs.: 211 e 240; (61) SEQ ID NOs.: 212 e 240; (62) SEQ ID NOs.: 213 e 223; (63) SEQ ID NOs.: 214 e 223; (64) SEQ ID NOs.: 215 e 223; (65) SEQ ID NOs.: 216 e 223;
(66) SEQ ID NOs.: 217 e 223; (67) SEQ ID NOs.: 218 e 223; (68) SEQ ID NOs.: 182 e 254; (69) SEQ ID NOs.: 213 e 254; (70) SEQ ID NOs.: 214 e 254; (71) SEQ ID NOs.: 215 e 254; (72) SEQ ID NOs.: 216 e 254; (73) SEQ ID NOs.: 217 e 254; (74) SEQ ID NOs.: 218 e 254; (75) SEQ ID NOs.: 182 e 255; (76) SEQ ID NOs.: 213 e 255; (77) SEQ ID NOs.: 214 e 255; (78) SEQ ID NOs.: 215 e 255; (79) SEQ ID NOs.: 216 e 255; (80) SEQ ID NOs.: 217 e 255; (81) SEQ ID NOs.: 218 e 255; (82) SEQ ID NOs.: 182 e 256; (83) SEQ ID NOs.: 213 e 256; (84) SEQ ID NOs.: 214 e 256; (85) SEQ ID NOs.: 215 e 256; (86) SEQ ID NOs.: 216 e 256; (87) SEQ ID NOs.: 217 e 256; (88) SEQ ID NOs.: 218 e 256; (89) SEQ ID NOs.: 182 e 257; (90) SEQ ID NOs.: 213 e 257; (91) SEQ ID NOs.: 214 e 257; (92) SEQ ID NOs.: 215 e 257; (93) SEQ ID NOs.: 216 e 257; (94) SEQ ID NOs.: 217 e 257; (95) SEQ ID NOs.: 218 e 257;
(96) SEQ ID NOs.: 182 e 258; (97) SEQ ID NOs.: 213 e 258; (98) SEQ ID NOs.: 214 e 258; (99) SEQ ID NOs.: 215 e 258; (100) SEQ ID NOs.: 216 e 258; (101) SEQ ID NOs.: 217 e 258; (102) SEQ ID NOs.: 218 e 258; (103) SEQ ID NOs.: 182 e 259; (104) SEQ ID NOs.: 213 e 259; (105) SEQ ID NOs.: 214 e 259; (106) SEQ ID NOs.: 215 e 259; (107) SEQ ID NOs.: 216 e 259; (108) SEQ ID NOs.: 217 e 259; (109) SEQ ID NOs.: 218 e 259; (110) SEQ ID NOs.: 182 e 260; (111) SEQ ID NOs.: 182 e 261; (112) SEQ ID NOs.: 182 e 262; (113) SEQ ID NOs.: 182 e 263; (114) SEQ ID NOs.: 182 e 264; (115) SEQ ID NOs.: 182 e 265; (116) SEQ ID NOs.: 182 e 266; (117) SEQ ID NOs.: 182 e 267; (118) SEQ ID NOs.: 182 e 268; (119) SEQ ID NOs.: 182 e 269; (120) SEQ ID NOs.: 182 e 270; (121) SEQ ID NOs.: 182 e 271; (122) SEQ ID NOs.: 182 e 272; (123) SEQ ID NOs.: 219 e 273; (124) SEQ ID NOs.: 191 e 274; (125) SEQ ID NOs.: 182 e 275;
(126) SEQ ID NOs.: 220 e 277; (127) SEQ ID NOs.: 182 e 278; (128) SEQ ID NOs.: 182 e 279; (129) SEQ ID NOs.: 182 e 280; (130) SEQ ID NOs.: 182 e 281; (131) SEQ ID NOs.: 182 e 282; (132) SEQ ID NOs.: 221 e 228; (133) SEQ ID NOs.: 221 e 283; (134) SEQ ID NOs.: 182 e 284; (135) SEQ ID NOs.: 221 e 285; (136) SEQ ID NOs.: 182 e 286; (137) SEQ ID NOs.: 221 e 287; (138) SEQ ID NOs.: 221 e 288; (139) SEQ ID NOs.: 221 e 289; (140) SEQ ID NOs.: 182 e 290; (141) SEQ ID NOs.: 221 e 291; (142) SEQ ID NOs.: 182 e 292; (143) SEQ ID NOs.: 221 e 293; (144) SEQ ID NOs.: 221 e 294; (145) SEQ ID NOs.: 221 e 295; (146) SEQ ID NOs.: 182 e 296; (147) SEQ ID NOs.: 221 e 297; (148) SEQ ID NOs.: 182 e 298; (149) SEQ ID NOs.: 221 e 299; (150) SEQ ID NOs.: 221 e 300; (151) SEQ ID NOs.: 221 e 301; (152) SEQ ID NOs.: 182 e 302; (153) SEQ ID NOs.: 221 e 303; (154) SEQ ID NOs.: 182 e 304; (155) SEQ ID NOs.: 221 e 305;
(156) SEQ ID NOs.: 182 e 306; (157) SEQ ID NOs.: 182 e 307; (158) SEQ ID NOs.: 182 e 308; (159) SEQ ID NOs.: 182 e 309; (160) SEQ ID NOs.: 220 e 310; (161) SEQ ID NOs.: 220 e 311; (162) SEQ ID NOs.: 182 e 228; (163) SEQ ID NOs.: 465 e 276; (164) SEQ ID NOs.: 466 e 276; (165) SEQ ID NOs.: 182 e 479; (166) SEQ ID NOs.: 465 e 479; (167) SEQ ID NOs.: 466 e 479; (168) SEQ ID NOs.: 182 e 480; (169) SEQ ID NOs.: 465 e 480; (170) SEQ ID NOs.: 466 e 480; (171) SEQ ID NOs.: 182 e 481; (172) SEQ ID NOs.: 182 e 482; (173) SEQ ID NOs.: 465 e 482; (174) SEQ ID NOs.: 466 e 482; (175) SEQ ID NOs.: 182 e 483; (176) SEQ ID NOs.: 182 e 484; (177) SEQ ID NOs.: 465 e 484; (178) SEQ ID NOs.: 466 e 484; (179) SEQ ID NOs.: 182 e 485; (180) SEQ ID NOs.: 182 e 486; (181) SEQ ID NOs.: 465 e 486; (182) SEQ ID NOs.: 466 e 486; (183) SEQ ID NOs.: 182 e 487; (184) SEQ ID NOs.: 182 e 488; (185) SEQ ID NOs.: 465 e 488;
(186) SEQ ID NOs.: 466 e 488; (187) SEQ ID NOs.: 182 e 489; (188) SEQ ID NOs.: 465 e 489; (189) SEQ ID NOs.: 466 e 489; (190) SEQ ID NOs.: 182 e 491; (191) SEQ ID NOs.: 465 e 491; (192) SEQ ID NOs.: 466 e 491; (193) SEQ ID NOs.: 182 e 492; (194) SEQ ID NOs.: 465 e 492; (195) SEQ ID NOs.: 466 e 492; (196) SEQ ID NOs.: 182 e 493; (197) SEQ ID NOs.: 182 e 494; (198) SEQ ID NOs.: 465 e 494; (199) SEQ ID NOs.: 466 e 494; (200) SEQ ID NOs.: 182 e 277; (201) SEQ ID NOs.: 465 e 277; (202) SEQ ID NOs.: 466 e 277; (203) SEQ ID NOs.: 182 e 495; (204) SEQ ID NOs.: 465 e 495; (205) SEQ ID NOs.: 466 e 495; (206) SEQ ID NOs.: 182 e 496; (207) SEQ ID NOs.: 465 e 496; (208) SEQ ID NOs.: 466 e 496; (209) SEQ ID NOs.: 182 e 497; (210) SEQ ID NOs.: 465 e 497; (211) SEQ ID NOs.: 466 e 497; (212) SEQ ID NOs.: 182 e 498; (213) SEQ ID NOs.: 182 e 499; (214) SEQ ID NOs.: 465 e 499; (215) SEQ ID NOs.: 466 e 499;
(216) SEQ ID NOs.: 182 e 500; (217) SEQ ID NOs.: 182 e 501; (218) SEQ ID NOs.: 465 e 501; (219) SEQ ID NOs.: 466 e 501; (220) SEQ ID NOs.: 182 e 502; (221) SEQ ID NOs.: 182 e 503; (222) SEQ ID NOs.: 182 e 504; (223) SEQ ID NOs.: 182 e 505; (224) SEQ ID NOs.: 182 e 506; (225) SEQ ID NOs.: 182 e 507; (226) SEQ ID NOs.: 182 e 508; (227) SEQ ID NOs.: 182 e 509; (228) SEQ ID NOs.: 182 e 510; (229) SEQ ID NOs.: 182 e 511; (230) SEQ ID NOs.: 182 e 512; (231) SEQ ID NOs.: 182 e 513; (232) SEQ ID NOs.: 182 e 514; (233) SEQ ID NOs.: 182 e 515; (234) SEQ ID NOs.: 467 e 223; (235) SEQ ID NOs.: 468 e 223; (236) SEQ ID NOs.: 469 e 223; (237) SEQ ID NOs.: 470 e 223; (238) SEQ ID NOs.: 471 e 223; (239) SEQ ID NOs.: 472 e 223; (240) SEQ ID NOs.: 473 e 223; (241) SEQ ID NOs.: 474 e 223; (242) SEQ ID NOs.: 475 e 223; (243) SEQ ID NOs.: 476 e 223; (244) SEQ ID NOs.: 182 e 516; (245) SEQ ID NOs.: 182 e 276;
(246) SEQ ID NOs.: 182 e 569; (247) SEQ ID NOs.: 477 e 223; (248) SEQ ID NOs.: 477 e 278; (249) SEQ ID NOs.: 477 e 292; ou (250) SEQ ID NOs.: 478 e 276, opcionalmente em que as VH e VL compreenderem a sequência de aminoácidos apresentada em: (a) SEQ ID NOs.: 182 e 275, respectivamente; (b) SEQ ID NOs.: 182 e 278, respectivamente; (c) SEQ ID NOs.: 182 e 223, respectivamente; (d) SEQ ID NOs.: 182 e 292, respectivamente; (e) SEQ ID NOs.: 465 e 276, respectivamente; (f) SEQ ID NOs.: 466 e 276, respectivamente; (g) SEQ ID NOs.: 182 e 491, respectivamente; (h) SEQ ID NOs.: 465 e 491, respectivamente; (i) SEQ ID NOs.: 466 e 491, respectivamente; (j) SEQ ID NOs.: 182 e 493, respectivamente; (k) SEQ ID NOs.: 220 e 276, respectivamente; (l) SEQ ID NOs.: 182 e 516, respectivamente; (m) SEQ ID NOs.: 477 e 278, respectivamente; ou (n) SEQ ID NOs.: 478 e 276, respectivamente.
6. Anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que compreende uma VH que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 181-221 e 465-478 e uma VL que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 222- 311, 479-516 e 569.
7. Anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de acordo com a reivindicação 5 ou 6, caracterizado pelo fato de que: (a) compreende uma região Fc da IgG1 humana, opcionalmente em que a região Fc da IgG1 humana é IgG1m17 (SEQ ID NO:348); (b) compreende uma região Fc da IgG1 humana compreendendo (posição numerada de acordo com a numeração EU): (i) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330; (ii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iii) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (iv) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (v) ácido aspártico na posição 239, ácido glutâmico na posição 332, alanina na posição 236, leucina na posição 330, leucina na posição 428, e serina na posição 434; ou (vi) leucina na posição 243, prolina na posição 292, leucina na posição 300, isoleucina na posição 305, leucina na posição 396, leucina na posição 428, e serina na posição 434; (c) compreende uma região constante da cadeia leve
Kappa humana, opcionalmente em que a região constante da cadeia leve Kappa humana é Km3 (SEQ ID NO:351); (d) apresenta uma potência de destruição de células infectadas pelo HIV maior que o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B; (e) apresenta uma meia-vida sérica melhorada, estendida, ampliada ou aumentada em um ser humano do que o Anticorpo A e/ou o Anticorpo B; e/ou (f) apresenta uma meia-vida sérica em um ser humano de pelo menos cerca de 3 dias, por exemplo, pelo menos cerca de 4 dias, pelo menos cerca de 5 dias, pelo menos cerca de 6 dias, pelo menos cerca de 7 dias, pelo menos cerca de 8 dias, pelo menos cerca de 9 dias, pelo menos cerca de 10 dias, pelo menos cerca de 12 dias, pelo menos cerca de 14 dias, pelo menos cerca de 16 dias, pelo menos cerca de 18 dias, pelo menos cerca de 20 dias, pelo menos cerca de 21 dias, pelo menos cerca de 24 dias, pelo menos cerca de 28 dias, pelo menos cerca de 30 dias, ou mais.
8. Fragmento de ligação ao antígeno, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que compreende um fragmento scFv, sc(Fv)2, Fab, F(ab)2, Fab', F(ab')2, Facb ou Fv.
9. Anticorpo, caracterizado pelo fato de que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia pesada e a cadeia leve compreenderem as sequências de aminoácidos apresentadas, respectivamente, abaixo: (1) SEQ ID NOs.: 2 e 49; (2) SEQ ID NOs.: 5 e 49; (3) SEQ ID NOs.: 6 e 49; (4) SEQ ID NOs.: 2 e 50; (5) SEQ ID NOs.: 6 e 50; (6) SEQ ID NOs.: 7 e 49;
(7) SEQ ID NOs.: 8 e 49; (8) SEQ ID NOs.: 9 e 49; (9) SEQ ID NOs.: 10 e 49; (10) SEQ ID NOs.: 11 e 49; (11) SEQ ID NOs.: 12 e 49; (12) SEQ ID NOs.: 13 e 49; (13) SEQ ID NOs.: 14 e 49; (14) SEQ ID NOs.: 15 e 49; (15) SEQ ID NOs.: 16 e 49; (16) SEQ ID NOs.: 17 e 49; (17) SEQ ID NOs.: 18 e 49; (18) SEQ ID NOs.: 19 e 49; (19) SEQ ID NOs.: 20 e 49; (20) SEQ ID NOs.: 21 e 49; (21) SEQ ID NOs.: 22 e 49; (22) SEQ ID NOs.: 23 e 49; (23) SEQ ID NOs.: 24 e 49; (24) SEQ ID NOs.: 25 e 49; (25) SEQ ID NOs.: 26 e 49; (26) SEQ ID NOs.: 27 e 49; (27) SEQ ID NOs.: 28 e 49; (28) SEQ ID NOs.: 29 e 49; (29) SEQ ID NOs.: 30 e 49; (30) SEQ ID NOs.: 2 e 51; (31) SEQ ID NOs.: 2 e 52; (32) SEQ ID NOs.: 2 e 53; (33) SEQ ID NOs.: 2 e 54; (34) SEQ ID NOs.: 2 e 55; (35) SEQ ID NOs.: 2 e 56; (36) SEQ ID NOs.: 2 e 57;
(37) SEQ ID NOs.: 2 e 58; (38) SEQ ID NOs.: 2 e 59; (39) SEQ ID NOs.: 2 e 60; (40) SEQ ID NOs.: 2 e 61; (41) SEQ ID NOs.: 2 e 62; (42) SEQ ID NOs.: 2 e 63; (43) SEQ ID NOs.: 2 e 64; (44) SEQ ID NOs.: 2 e 65; (45) SEQ ID NOs.: 2 e 66; (46) SEQ ID NOs.: 2 e 67; (47) SEQ ID NOs.: 2 e 68; (48) SEQ ID NOs.: 2 e 69; (49) SEQ ID NOs.: 2 e 70; (50) SEQ ID NOs.: 2 e 71; (51) SEQ ID NOs.: 2 e 72; (52) SEQ ID NOs.: 2 e 73; (53) SEQ ID NOs.: 2 e 74; (54) SEQ ID NOs.: 2 e 75; (55) SEQ ID NOs.: 2 e 76; (56) SEQ ID NOs.: 2 e 77; (57) SEQ ID NOs.: 2 e 78; (58) SEQ ID NOs.: 31 e 63; (59) SEQ ID NOs.: 32 e 63; (60) SEQ ID NOs.: 33 e 63; (61) SEQ ID NOs.: 31 e 65; (62) SEQ ID NOs.: 32 e 65; (63) SEQ ID NOs.: 33 e 65; (64) SEQ ID NOs.: 34 e 49; (65) SEQ ID NOs.: 35 e 49; (66) SEQ ID NOs.: 36 e 49;
(67) SEQ ID NOs.: 37 e 49; (68) SEQ ID NOs.: 38 e 49; (69) SEQ ID NOs.: 39 e 49; (70) SEQ ID NOs.: 2 e 79; (71) SEQ ID NOs.: 34 e 79; (72) SEQ ID NOs.: 35 e 79; (73) SEQ ID NOs.: 36 e 79; (74) SEQ ID NOs.: 37 e 79; (75) SEQ ID NOs.: 38 e 79; (76) SEQ ID NOs.: 39 e 79; (77) SEQ ID NOs.: 2 e 80; (78) SEQ ID NOs.: 34 e 80; (79) SEQ ID NOs.: 35 e 80; (80) SEQ ID NOs.: 36 e 80; (81) SEQ ID NOs.: 37 e 80; (82) SEQ ID NOs.: 38 e 80; (83) SEQ ID NOs.: 39 e 80; (84) SEQ ID NOs.: 2 e 81; (85) SEQ ID NOs.: 34 e 81; (86) SEQ ID NOs.: 35 e 81; (87) SEQ ID NOs.: 36 e 81; (88) SEQ ID NOs.: 37 e 81; (89) SEQ ID NOs.: 38 e 81; (90) SEQ ID NOs.: 39 e 81; (91) SEQ ID NOs.: 2 e 82; (92) SEQ ID NOs.: 34 e 82; (93) SEQ ID NOs.: 35 e 82; (94) SEQ ID NOs.: 36 e 82; (95) SEQ ID NOs.: 37 e 82; (96) SEQ ID NOs.: 38 e 82;
(97) SEQ ID NOs.: 39 e 82; (98) SEQ ID NOs.: 2 e 83; (99) SEQ ID NOs.: 34 e 83; (100) SEQ ID NOs.: 35 e 83; (101) SEQ ID NOs.: 36 e 83; (102) SEQ ID NOs.: 37 e 83; (103) SEQ ID NOs.: 38 e 83; (104) SEQ ID NOs.: 39 e 83; (105) SEQ ID NOs.: 2 e 84; (106) SEQ ID NOs.: 34 e 84; (107) SEQ ID NOs.: 35 e 84; (108) SEQ ID NOs.: 36 e 84; (109) SEQ ID NOs.: 37 e 84; (110) SEQ ID NOs.: 38 e 84 (111) SEQ ID NOs.: 39 e 84; (112) SEQ ID NOs.: 2 e 85; (113) SEQ ID NOs.: 2 e 86; (114) SEQ ID NOs.: 2 e 87; (115) SEQ ID NOs.: 2 e 88; (116) SEQ ID NOs.: 2 e 89; (117) SEQ ID NOs.: 2 e 90; (118) SEQ ID NOs.: 2 e 91; (119) SEQ ID NOs.: 2 e 92; (120) SEQ ID NOs.: 2 e 93; (121) SEQ ID NOs.: 2 e 94; (122) SEQ ID NOs.: 2 e 95; (123) SEQ ID NOs.: 2 e 96; (124) SEQ ID NOs.: 2 e 97; (125) SEQ ID NOs.: 40 e 98; (126) SEQ ID NOs.: 12 e 99;
(127) SEQ ID NOs.: 2 e 100; (128) SEQ ID NOs.: 41 e 49; (129) SEQ ID NOs.: 42 e 101; (130) SEQ ID NOs.: 42 e 102; (131) SEQ ID NOs.: 2 e 103; (132) SEQ ID NOs.: 2 e 104; (133) SEQ ID NOs.: 2 e 105; (134) SEQ ID NOs.: 2 e 106; (135) SEQ ID NOs.: 2 e 107; (136) SEQ ID NOs.: 43 e 49; (137) SEQ ID NOs.: 44 e 49; (138) SEQ ID NOs.: 45 e 49; (139) SEQ ID NOs.: 46 e 49; (140) SEQ ID NOs.: 47 e 53; (141) SEQ ID NOs.: 47 e 108; (142) SEQ ID NOs.: 2 e 109; (143) SEQ ID NOs.: 47 e 110; (144) SEQ ID NOs.: 2 e 111; (145) SEQ ID NOs.: 47 e 112; (146) SEQ ID NOs.: 47 e 113; (147) SEQ ID NOs.: 47 e 114; (148) SEQ ID NOs.: 2 e 115; (149) SEQ ID NOs.: 47 e 116; (150) SEQ ID NOs.: 2 e 117; (151) SEQ ID NOs.: 47 e 118; (152) SEQ ID NOs.: 47 e 119; (153) SEQ ID NOs.: 47 e 120; (154) SEQ ID NOs.: 2 e 121; (155) SEQ ID NOs.: 47 e 122; (156) SEQ ID NOs.: 2 e 123;
(157) SEQ ID NOs.: 47 e 124; (158) SEQ ID NOs.: 47 e 125; (159) SEQ ID NOs.: 47 e 126; (160) SEQ ID NOs.: 2 e 127; (161) SEQ ID NOs.: 47 e 128; (162) SEQ ID NOs.: 2 e 129; (163) SEQ ID NOs.: 47 e 130; (164) SEQ ID NOs.: 2 e 131; (165) SEQ ID NOs.: 2 e 132; (166) SEQ ID NOs.: 2 e 133; (167) SEQ ID NOs.: 2 e 134; (168) SEQ ID NOs.: 42 e 135; (169) SEQ ID NOs.: 42 e 136; (170) SEQ ID NOs.: 517 e 101; (171) SEQ ID NOs.: 518 e 101; (172) SEQ ID NOs.: 2 e 531; (173) SEQ ID NOs.: 517 e 531; (174) SEQ ID NOs.: 518 e 531; (175) SEQ ID NOs.: 2 e 532; (176) SEQ ID NOs.: 517 e 532; (177) SEQ ID NOs.: 518 e 532; (178) SEQ ID NOs.: 2 e 533; (179) SEQ ID NOs.: 2 e 534; (180) SEQ ID NOs.: 517 e 534; (181) SEQ ID NOs.: 518 e 534; (182) SEQ ID NOs.: 2 e 535; (183) SEQ ID NOs.: 2 e 536; (184) SEQ ID NOs.: 517 e 536; (185) SEQ ID NOs.: 518 e 536; (186) SEQ ID NOs.: 2 e 537;
(187) SEQ ID NOs.: 2 e 538; (188) SEQ ID NOs.: 517 e 538; (189) SEQ ID NOs.: 518 e 538; (190) SEQ ID NOs.: 2 e 539; (191) SEQ ID NOs.: 2 e 540; (192) SEQ ID NOs.: 517 e 540; (193) SEQ ID NOs.: 518 e 540; (194) SEQ ID NOs.: 2 e 541; (195) SEQ ID NOs.: 517 e 541; (196) SEQ ID NOs.: 518 e 541; (197) SEQ ID NOs.: 2 e 542; (198) SEQ ID NOs.: 517 e 542; (199) SEQ ID NOs.: 518 e 542; (200) SEQ ID NOs.: 2 e 543; (201) SEQ ID NOs.: 517 e 543; (202) SEQ ID NOs.: 518 e 543; (203) SEQ ID NOs.: 2 e 544; (204) SEQ ID NOs.: 2 e 545; (205) SEQ ID NOs.: 517 e 545; (206) SEQ ID NOs.: 518 e 545; (207) SEQ ID NOs.: 2 e 102; (208) SEQ ID NOs.: 517 e 102; (209) SEQ ID NOs.: 518 e 102; (210) SEQ ID NOs.: 2 e 546; (211) SEQ ID NOs.: 517 e 546; (212) SEQ ID NOs.: 518 e 546; (213) SEQ ID NOs.: 2 e 547; (214) SEQ ID NOs.: 517 e 547; (215) SEQ ID NOs.: 518 e 547; (216) SEQ ID NOs.: 2 e 548;
(217) SEQ ID NOs.: 517 e 548; (218) SEQ ID NOs.: 518 e 548; (219) SEQ ID NOs.: 2 e 549; (220) SEQ ID NOs.: 2 e 550; (221) SEQ ID NOs.: 517 e 550; (222) SEQ ID NOs.: 518 e 550; (223) SEQ ID NOs.: 2 e 551; (224) SEQ ID NOs.: 2 e 552; (225) SEQ ID NOs.: 517 e 552; (226) SEQ ID NOs.: 518 e 552; (227) SEQ ID NOs.: 2 e 553; (228) SEQ ID NOs.: 2 e 554; (229) SEQ ID NOs.: 2 e 555; (230) SEQ ID NOs.: 2 e 556; (231) SEQ ID NOs.: 2 e 557; (232) SEQ ID NOs.: 2 e 558; (233) SEQ ID NOs.: 2 e 559; (234) SEQ ID NOs.: 2 e 560; (235) SEQ ID NOs.: 2 e 561; (236) SEQ ID NOs.: 2 e 562; (237) SEQ ID NOs.: 2 e 563; (238) SEQ ID NOs.: 2 e 564; (239) SEQ ID NOs.: 2 e 565; (240) SEQ ID NOs.: 2 e 566; (241) SEQ ID NOs.: 519 e 49; (242) SEQ ID NOs.: 520 e 49; (243) SEQ ID NOs.: 521 e 49; (244) SEQ ID NOs.: 522 e 49; (245) SEQ ID NOs.: 523 e 49; (246) SEQ ID NOs.: 524 e 49;
(247) SEQ ID NOs.: 526 e 49; (248) SEQ ID NOs.: 527 e 49; (249) SEQ ID NOs.: 528 e 49; (250) SEQ ID NOs.: 2 e 567; (251) SEQ ID NOs.: 2 e 568; (252) SEQ ID NOs.: 2 e 101; (253) SEQ ID NOs.: 529 e 49; (254) SEQ ID NOs.: 529 e 103; (255) SEQ ID NOs.: 529 e 117; ou (256) SEQ ID NOs.: 530 e 101, opcionalmente em que a cadeia pesada e a cadeia leve apresentam a sequência de aminoácidos representada em: (a) SEQ ID NOs.: 2 e 49, respectivamente; (b) SEQ ID NOs.: 2 e 100, respectivamente; (c) SEQ ID NOs.: 42 e 101, respectivamente; (d) SEQ ID NOs.: 2 e 103, respectivamente; (e) SEQ ID NOs.: 2 e 117, respectivamente; (f) SEQ ID NOs.: 517 e 101, respectivamente; (g) SEQ ID NOs.: 518 e 101, respectivamente; (h) SEQ ID NOs.: 2 e 542, respectivamente; (i) SEQ ID NOs.: 517 e 542, respectivamente; (j) SEQ ID NOs.: 518 e 542, respectivamente; (k) SEQ ID NOs.: 2 e 544, respectivamente; (l) SEQ ID NOs.: 2 e 567, respectivamente; (m) SEQ ID NOs.: 529 e 103, respectivamente; ou (n) SEQ ID NOs.: 530 e 101, respectivamente.
10. Anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que: (a) compreende uma cadeia pesada (HC) que é pelo menos
80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 1-47 e 517-530 e uma cadeia leve (LC) que é pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, idêntica a uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 48- 136 e 531-567; e/ou (b) pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, ou mais, sítios de N-glicosilação ligados em uma VL são sialilados.
11. Anticorpo ou um fragmento de ligação ao antígeno, de acordo com a reivindicação 10(b), caracterizado pelo fato de que: (a) a asparagina na posição aminoacídica 72 da VL de acordo com a numeração de Kabat (N72) é sialilada; (b) os sítios de N-glicosilação ligados sialilados em uma VL compreendem de 1 a 5 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 4 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 3 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 2 resíduos ácido siálico; (c) a VL é sialilada com ácido N-acetilneuramínico (NANA); (d) os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas biantenárias; (e) os resíduos de ácido siálico estão presentes em: (i) estruturas complexas de N-glicano ligado; ou (ii) estruturas híbridas de N-glicano ligado; e/ou (f) os glicanos são terminalmente sialilados.
12. Anticorpo biespecífico, caracterizado pelo fato de que compreende: um primeiro braço de ligação ao antígeno que se liga à gp120, o primeiro braço de ligação a antígenos compreendendo: (i) as CDRs 1-3 da VH e as CDRs 1-3 da VL; ou (ii) a VH e a VL como definidas em qualquer uma das reivindicações 1 a 11; e um segundo braço de ligação ao antígeno que se liga a um segundo antígeno.
13. Anticorpo biespecífico, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que o segundo antígeno é selecionado dentre o grupo que consiste em CD3, FcγRI (CD64), FcγRII (CD32), FcγRIII (CD16); CD89, CCR5, CD4, gp41, receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com três domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR3DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 1 (KIR2DL1), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 2 (KIR2DL2), receptor de células exterminadoras similar à imunoglobulina com dois domínios de Ig com cauda citoplasmática longa 3 (KIR2DL3), receptor similar à lectina de células exterminadoras C1 (KLRC1), receptor similar à lectina de células exterminadoras C2 (KLRC2), receptor similar à lectina de células exterminadoras C3 (KLRC3), receptor similar à lectina de células exterminadoras C4 (KLRC4), receptor similar à lectina de células exterminadoras D1 (KLRD1), receptor similar à lectina de células exterminadoras K1 (KLRK1), receptor desencadeador da citotoxicidade natural 3 (NCR3 ou NKp30), receptor desencadeador da citotoxicidade natural 2 (NCR2 ou NK-p44), receptor desencadeador da citotoxicidade natural 1 (NCR1 ou NK-p46), CD226 (DNAM-1), molécula de célula T citotóxica e reguladora (CRTAM ou CD355), membro da família de moléculas de ativação linfocítica sinalizadora 1 (SLAMF1), CD48 (SLAMF2), antígeno linfocitário 9 (LY9 ou SLAMF3), CD244 (2B4 ou SLAMF4), CD84 (SLAMF5), membro da família SLAM 6 (SLAMF6 ou NTB-A), membro da família SLAM 7 (SLAMF7 ou CRACC), CD27 (TNFRSF7), semaforina 4D (SEMA4D ou CD100), e CD160 (NK1), e um segundo epítopo da gp120.
14. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, e um veículo farmaceuticamente aceitável, opcionalmente em que a composição farmacêutica compreende ainda: (a) um segundo agente para tratar uma infecção por HIV; (b) um agonista de receptor toll-like (TLR), opcionalmente em que o agonista de TLR é: (i) um agonista de TLR2, um agonista de TLR3, um agonista de TLR7, um agonista de TLR8 ou um agonista de TLR9; ou (ii) um agonista de TLR7, opcionalmente em que o agonista de TLR7 é selecionado dentre o grupo que consiste em vesatolimod, imiquimod, e resiquimod; (c) um anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, opcionalmente em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende: (i) as VH e VL de PGT121.60 ou PGT121.66; (ii) uma VH na SEQ ID NO: 454 e uma VL na SEQ ID NO: 455; ou (iii) uma VH na SEQ ID NO: 454 e uma VL na SEQ
ID NO: 456; e/ou (d) um segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo não compete com o anticorpo ou um fragmento de ligação ao antígeno como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10 para se ligar à gp120, opcionalmente em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV: (i) compete com ou compreende domínios variáveis da VH e da VL de um anticorpo amplamente neutralizante (bNAb) contra HIV; e/ou (ii) se liga a um epítopo ou região de: (I) gp120 selecionada dentre o grupo que consiste em: (A) terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332; (B) segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env; (C) interface gp120/gp41; ou (D) face silenciosa da gp120, opcionalmente em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a: a. um epítopo ou região da gp120 na terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado dentre o grupo que consiste em GS-9722, PGT-121, PGT-122, PGT-
123, PGT-124, PGT-125, PGT-126, PGT-128, PGT-130, PGT-133, PGT-134, PGT-135, PGT-136, PGT-137, PGT-138, PGT-139, 10- 1074, VRC24, 2G12, BG18, 354BG8, 354BG18, 354BG42, 354BG33, 354BG129, 354BG188, 354BG411, 354BG426, DH270.1, DH270.6, PGDM12, VRC41.01, PGDM21, PCDN-33A, BF520.1 e VRC29.03; b. um epítopo ou região da gp120 na segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PG9, PG16, PGC14, PGG14, PGT-142, PGT-143, PGT-144, PGT-145, CH01, CH59, PGDM1400, CAP256, CAP256-VRC26.08, CAP256-VRC26.09, CAP256- VRC26.25, PCT64-24E e VRC38.01; c. um epítopo ou região da gp120 na interface gp120/gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PGT-151, CAP248-2B, 35O22, 8ANC195, ACS202, VRC34 e VRC34.01; ou d. um epítopo ou região da face silenciosa da gp120 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC- PG05 e SF12; ou (II) gp41 na região proximal da membrana (MPER), opcionalmente em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV se liga a um epítopo ou região da gp41 na região proximal da membrana (MPER) e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em 10E8, 10E8v4, 10E8-5R-100cF, 4E10, DH511.11P, 2F5, 7b2, e LN01; ou (III) o peptídeo de fusão de gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC34 e ACS202.
15. Ácido(s) nucleico(s), caracterizado(s) pelo fato de que codifica(m) o anticorpo ou um fragmento de ligação ao antígeno, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, opcionalmente em que: (i) compreende(m) DNA, cDNA ou mRNA; (ii) codifica(m) uma VH selecionada dentre o grupo que consiste em SEQ ID NOs: 181-221 e 465-478 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 572-581; e codificando uma VL selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 222-311, 479-516 e 569 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 582-595, e/ou (iii) codifica(m) uma HC selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 1-47 e 517-530 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 596-605; e codificando uma LC selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 48-136 e 531-567 e tendo pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%,
pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100%, de identidade com uma sequência de ácidos nucleicos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NOs: 606-619.
16. Vetor(es) de expressão, caracterizado(s) pelo fato de que compreende(m) o(s) ácido(s) nucleico(s) como definidos na reivindicação 15 operacionalmente ligados a uma sequência reguladora, opcionalmente em que compreende(m) um vetor plasmídico ou um vetor viral.
17. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o(s) ácido(s) nucleico(s) como definido(s) na reivindicação 15, ou o(s) vetor(es) de expressão como definido(s) na reivindicação 16, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
18. Nanopartícula lipídica (LNP), caracterizada pelo fato de que compreende o(s) ácido(s) nucleico(s) como definido(s) na reivindicação 15, ou o(s) vetor(es) de expressão como definido(s) na reivindicação 16.
19. Receptor de antígeno quimérico (CAR), caracterizado pelo fato de que compreende um fragmento de ligação ao antígeno como definido na reivindicação 8.
20. Célula T CAR, caracterizada pelo fato de que compreende o CAR como definido na reivindicação 19.
21. Célula hospedeira ou população de células, caracterizada pelo fato de que compreende o(s) ácido(s) nucleico(s) como definido(s) na reivindicação 15, ou o(s) vetor(es) de expressão como definido(s) na reivindicação 16, opcionalmente em que: (i) compreende uma célula eucariótica; (ii) compreende uma célula de mamífero, uma célula de inseto, uma célula vegetal ou uma célula de levedura; (iii) a célula de mamífero é:
(I) uma célula de ovário de hamster chinês (CHO); ou (II) uma célula humana, opcionalmente em que a célula é uma célula de rim embrionário humano ou uma célula B humana; e/ou (iv) a célula sialila predominantemente sítios de N- glicosilação ligados nos domínios variáveis (Fv) de anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos expressos, opcionalmente em que: (I) pelo menos 50%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, ou mais, sítios de N- glicosilação ligados nos domínios variáveis (Fv) de anticorpos ou fragmentos de ligação a antígenos expressos são sialilados; (II) pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, ou mais, sítios de N-glicosilação ligados em uma VL são sialilados; (III) a asparagina na posição aminoacídica 72 da VL de acordo com a numeração de Kabat (N72) é sialilada; (IV) os sítios de N-glicosilação ligados sialilados em uma VL compreendem de 1 a 5 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 4 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 3 resíduos ácido siálico, por exemplo, de 1 a 2 resíduos ácido siálico; (V) a VL é sialilada com ácido N-acetilneuramínico (NANA); (VI) os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas biantenárias; (VII) os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas complexas de N-glicano ligado;
(VIII) os resíduos ácido siálico estão presentes em estruturas híbridas de N-glicano ligado; e/ou (IX) as glicanos são terminalmente sialiladas.
22. Método para a produção de um anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, caracterizado pelo fato de que compreende: cultivar a célula hospedeira como definida na reivindicação 21 em uma cultura de células; e isolar o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos da cultura de células, opcionalmente em que o método compreende ainda formular o anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno em uma composição farmacêutica estéril adequada para administração a um indivíduo humano.
23. Anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, ou composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado(a) pelo fato de que é pra uso em um método para: (a) o tratamento ou a prevenção de HIV, ou (b) inibir o HIV em um indivíduo humano com necessidade do mesmo.
24. Anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, de acordo com a reivindicação 23(a), caracterizado pelo fato de que o método compreende ainda administrar ao indivíduo: (a) um segundo agente para tratar uma infecção por HIV, (b) um agonista de receptor toll-like (TLR), opcionalmente em que o agonista de TLR é: (i) um agonista de TLR2, um agonista de TLR3, um agonista de TLR7, um agonista de TLR8 ou um agonista de TLR9; (ii) um agonista de TLR7, opcionalmente em que o agonista de TLR7 é selecionado dentre o grupo que consiste em vesatolimod, imiquimod, e resiquimod; (c) um anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, opcionalmente em que o anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende: (i) uma VH na SEQ ID NO: 454 e uma VL na SEQ ID NO: 455; ou (ii) uma VH na SEQ ID NO: 454 e uma VL na SEQ ID NO: 456; e/ou (d) uma quantidade eficaz de um segundo anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo não compete com o anticorpo ou um fragmento de ligação ao antígeno como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13 para se ligar à gp120, opcionalmente em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV: (i) compete com ou compreende domínios variáveis da VH e da VL de um anticorpo amplamente neutralizante (bNAb) contra HIV; e/ou (ii) se liga a um epítopo ou região de: (I) gp120 selecionada dentre o grupo que consiste em: (A) terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332; (B) segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env; (C) interface gp120/gp41; ou
(D) face silenciosa da gp120, opcionalmente em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV, se liga a: a. um epítopo ou região da gp120 na terceira alça variável (V3) e/ou trecho com alto teor de manose compreendendo uma oligomanose glicano N332 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em GS-9722, PGT-121, PGT-122, PGT-123, PGT- 124, PGT-125, PGT-126, PGT-128, PGT-130, PGT-133, PGT-134, PGT-135, PGT-136, PGT-137, PGT-138, PGT-139, 10-1074, VRC24, 2G12, BG18, 354BG8, 354BG18, 354BG42, 354BG33, 354BG129, 354BG188, 354BG411, 354BG426, DH270.1, DH270.6, PGDM12, VRC41.01, PGDM21, PCDN-33A, BF520.1 e VRC29.03; b. um epítopo ou região da gp120 na segunda alça variável (V2) e/ou ápex do trímero do Env e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PG9, PG16, PGC14, PGG14, PGT-142, PGT-143, PGT-144, PGT-145, CH01, CH59, PGDM1400, CAP256, CAP256-VRC26.08, CAP256-VRC26.09, CAP256- VRC26.25, PCT64-24E e VRC38.01; c. um epítopo ou região da gp120 na interface gp120/gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em PGT-151, CAP248-2B, 35O22, 8ANC195, ACS202, VRC34 e VRC34.01; ou d. um epítopo ou região da face silenciosa da gp120 e compete com ou compreende regiões de VH e VL a partir de anticorpo selecionado dentre o grupo que consiste em VRC-PG05 e SF12; ou (II) gp41 na região proximal da membrana
(MPER), opcionalmente em que o segundo anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV se liga a um epítopo ou região da gp41 na região proximal da membrana (MPER) e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em 10E8, 10E8v4, 10E8-5R-100cF, 4E10, DH511.11P, 2F5, 7b2, e LN01; ou (III) o peptídeo de fusão de gp41 e compete com ou compreende regiões da VH e da VL de um anticorpo selecionado do grupo que consiste em VRC34 e ACS202, opcionalmente em que o anticorpo ou fragmento de ligação a antígenos do mesmo que se liga, inibe, e/ou neutraliza o HIV compreende as VH e VL of PGT121.60 ou PGT121.66.
25. Uso de um anticorpo ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, ou de uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para: (a) tratar ou prevenir o HIV, ou (b) inibir o HIV em um indivíduo humano em necessidade do mesmo.
BR112020025721-4A 2018-07-03 2019-07-02 Anticorpos que visam a gp120 do hiv e métodos de uso BR112020025721A2 (pt)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862693642P 2018-07-03 2018-07-03
US62/693,642 2018-07-03
US201962810191P 2019-02-25 2019-02-25
US62/810,191 2019-02-25
PCT/US2019/040342 WO2020010107A1 (en) 2018-07-03 2019-07-02 Antibodies that target hiv gp120 and methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BR112020025721A2 true BR112020025721A2 (pt) 2021-04-06

Family

ID=67441655

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112020025721-4A BR112020025721A2 (pt) 2018-07-03 2019-07-02 Anticorpos que visam a gp120 do hiv e métodos de uso

Country Status (20)

Country Link
US (3) US11168130B2 (pt)
EP (2) EP4257600A3 (pt)
JP (3) JP7126573B2 (pt)
KR (1) KR102579246B1 (pt)
CN (2) CN112368052A (pt)
AU (2) AU2019297324B9 (pt)
BR (1) BR112020025721A2 (pt)
CA (1) CA3102859A1 (pt)
CL (2) CL2020003422A1 (pt)
CO (1) CO2020016559A2 (pt)
CR (1) CR20200653A (pt)
DO (1) DOP2023000187A (pt)
IL (1) IL279189A (pt)
MX (1) MX2020013723A (pt)
NZ (1) NZ771700A (pt)
PE (1) PE20210685A1 (pt)
PH (1) PH12021500001A1 (pt)
SG (1) SG11202012043RA (pt)
TW (2) TWI799610B (pt)
WO (1) WO2020010107A1 (pt)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PE20210685A1 (es) 2018-07-03 2021-04-08 Gilead Sciences Inc Anticuerpos que se dirigen al gp120 de vih y metodos de uso
TWI762925B (zh) 2019-05-21 2022-05-01 美商基利科學股份有限公司 鑑別對使用gp120 v3聚醣導向之抗體的治療敏感之hiv病患的方法
AU2021237718B2 (en) 2020-03-20 2023-09-21 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of 4'-C-substituted-2-halo-2'-deoxyadenosine nucleosides and methods of making and using the same
CN115997008A (zh) 2020-04-22 2023-04-21 艾欧凡斯生物治疗公司 协调用于患者特异性免疫疗法的细胞的制造的系统和方法
CN111647078B (zh) * 2020-06-22 2022-04-26 中国医学科学院医学生物学研究所 一种抗hiv的单克隆抗体及其制备方法和应用
PE20231105A1 (es) 2020-08-25 2023-07-19 Gilead Sciences Inc Moleculas de union a antigeno multi-especificas contra el vih y metodos de uso
CN116437958A (zh) 2020-11-11 2023-07-14 吉利德科学公司 鉴定对采用gp120 CD4结合位点导向的抗体的疗法敏感的HIV患者的方法
US20240050474A1 (en) * 2021-02-09 2024-02-15 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Engineered cells and uses thereof
JP2024517181A (ja) 2021-04-28 2024-04-19 ウエヌイグレックオ・ファーマ 組合せ治療としてｆｘｒアゴニストを使用するｔｌｒ３アゴニストの効果の強い増強
CN115590965B (zh) * 2021-06-28 2024-06-28 前沿生物药业(南京)股份有限公司 用于治疗和/或预防hiv相关疾病的aptc偶联物及其应用
WO2023060180A1 (en) * 2021-10-06 2023-04-13 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Novel immune cell engagers for immunotherapy
CN114163534B (zh) * 2021-11-08 2023-07-18 复旦大学 一种靶向hiv-1病毒囊膜蛋白的双特异性嵌合抗原受体及其制备方法和应用
CA3235937A1 (en) 2021-12-03 2023-06-08 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compounds for hiv virus infection
KR20240117588A (ko) 2021-12-03 2024-08-01 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Hiv 바이러스 감염 치료용 화합물
EP4440701A1 (en) 2021-12-03 2024-10-09 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compounds for hiv virus infection
JPWO2023145755A1 (pt) * 2022-01-25 2023-08-03
TWI843506B (zh) 2022-04-06 2024-05-21 美商基利科學股份有限公司 橋聯三環胺甲醯基吡啶酮化合物及其用途
WO2023201369A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Iovance Biotherapeutics, Inc. Til expansion processes using specific cytokine combinations and/or akti treatment
TW202402280A (zh) 2022-07-01 2024-01-16 美商基利科學股份有限公司 可用於ｈｉｖ病毒感染之疾病預防性或治療性治療的治療性化合物
US20240226130A1 (en) 2022-10-04 2024-07-11 Gilead Sciences, Inc. 4'-thionucleoside analogues and their pharmaceutical use
WO2024112571A2 (en) 2022-11-21 2024-05-30 Iovance Biotherapeutics, Inc. Two-dimensional processes for the expansion of tumor infiltrating lymphocytes and therapies therefrom

Family Cites Families (132)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2073403A (en) 1935-11-23 1937-03-09 Abraham G Goldberg Display device
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4474893A (en) 1981-07-01 1984-10-02 The University of Texas System Cancer Center Recombinant monoclonal antibodies
US4714681A (en) 1981-07-01 1987-12-22 The Board Of Reagents, The University Of Texas System Cancer Center Quadroma cells and trioma cells and methods for the production of same
US5156840A (en) 1982-03-09 1992-10-20 Cytogen Corporation Amine-containing porphyrin derivatives
US5057313A (en) 1986-02-25 1991-10-15 The Center For Molecular Medicine And Immunology Diagnostic and therapeutic antibody conjugates
US4925648A (en) 1988-07-29 1990-05-15 Immunomedics, Inc. Detection and treatment of infectious and inflammatory lesions
US5601819A (en) 1988-08-11 1997-02-11 The General Hospital Corporation Bispecific antibodies for selective immune regulation and for selective immune cell binding
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
ATE144793T1 (de) 1989-06-29 1996-11-15 Medarex Inc Bispezifische reagenzien für die aids-therapie
ATE125157T1 (de) * 1990-04-03 1995-08-15 Genentech Inc Methoden und zusammensetzungen zur impfung gegen hiv.
ES2129029T5 (es) 1990-10-05 2005-10-16 Celldex Therapeutics, Inc. Inmunoestimulacion dirigida con reactivos biespecificos.
EP0557300B1 (en) 1990-10-29 1997-11-19 Chiron Corporation Bispecific antibodies, method of production, and uses thereof
AU665758B2 (en) 1991-04-26 1996-01-18 Surface Active Limited Novel antibodies, and methods for their use
ES2241710T3 (es) 1991-11-25 2005-11-01 Enzon, Inc. Procedimiento para producir proteinas multivalentes de union a antigeno.
DE69332948T2 (de) 1992-03-05 2003-11-27 Board Of Regents, The University Of Texas System Verwendung von Immunokonjugate zur Diagnose und/oder Therapie der vaskularisierten Tumoren
US6174666B1 (en) 1992-03-27 2001-01-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method of eliminating inhibitory/instability regions from mRNA
US6114143A (en) 1993-03-11 2000-09-05 Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute Anti-HIV monoclonal antibody
US5827690A (en) 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
FR2775435B1 (fr) 1998-02-27 2000-05-26 Bioalliance Pharma Nanoparticules comprenant au moins un polymere et au moins un compose apte a complexer un ou plusieurs principes actifs
WO2000002950A1 (en) 1998-07-13 2000-01-20 Expression Genetics, Inc. Polyester analogue of poly-l-lysine as a soluble, biodegradable gene delivery carrier
US6897044B1 (en) 1999-01-28 2005-05-24 Biogen Idec, Inc. Production of tetravalent antibodies
US7658921B2 (en) 2000-12-12 2010-02-09 Medimmune, Llc Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof
AU2002327164A1 (en) 2001-01-29 2002-12-09 Idec Pharmaceuticals Corporation Engineered tetravalent antibodies and methods of use
US20030020733A1 (en) 2001-07-24 2003-01-30 Yin Memphis Zhihong Computer display having selective area magnification
US8093357B2 (en) 2002-03-01 2012-01-10 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
PT1543106E (pt) 2002-07-15 2007-05-31 Immunex Corp Métodos e meios para controlar a sialilação de proteínas produzidas por células de mamíferos
CA2492807A1 (en) 2002-07-29 2004-03-04 Nanodel Technologies Gmbh Nanoparticles for dna administration to a target organ
US20090010920A1 (en) 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US8388955B2 (en) 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
EP1628685B1 (en) 2003-04-25 2010-12-08 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonate analogs
US7727969B2 (en) 2003-06-06 2010-06-01 Massachusetts Institute Of Technology Controlled release nanoparticle having bound oligonucleotide for targeted delivery
WO2005058963A1 (ja) 2003-12-16 2005-06-30 Kumamoto Technology And Industry Foundation 抗ｈｉｖ抗体
ME03423B (me) 2004-07-27 2020-01-20 Gilead Sciences Inc Fosfonatni analozi jedinjenja hiv inhibitora
AU2005282700A1 (en) 2004-09-02 2006-03-16 Genentech, Inc. Heteromultimeric molecules
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8546543B2 (en) 2004-11-12 2013-10-01 Xencor, Inc. Fc variants that extend antibody half-life
AU2005304624B2 (en) 2004-11-12 2010-10-07 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US7404969B2 (en) 2005-02-14 2008-07-29 Sirna Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticle based compositions and methods for the delivery of biologically active molecules
TWI404537B (zh) 2005-08-19 2013-08-11 Array Biopharma Inc 作為類鐸受體（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）調節劑之８-經取代苯并氮雜呯
TWI382019B (zh) 2005-08-19 2013-01-11 Array Biopharma Inc 作為類鐸受體（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）調節劑之胺基二氮雜呯
DK1931709T3 (en) 2005-10-03 2017-03-13 Xencor Inc FC VARIETIES WITH OPTIMIZED FC RECEPTOR BINDING PROPERTIES
EP3456351A1 (en) * 2006-04-05 2019-03-20 The Rockefeller University Polypeptides with enhanced anti-inflammatory and decreased cytotoxic properties and relating methods
CA2681974C (en) 2007-03-29 2019-12-31 Genmab A/S Bispecific antibodies and methods for production thereof
MX2009013832A (es) 2007-06-29 2010-03-10 Gilead Sciences Inc Derivados de purina y su uso como moduladores del receptor 7 similar a un puente.
US8003621B2 (en) 2007-09-14 2011-08-23 Nitto Denko Corporation Drug carriers
JP5285709B2 (ja) 2007-11-16 2013-09-11 ギリアード サイエンシス インコーポレーテッド ヒト免疫不全ウイルスの複製阻害薬
DK2313111T3 (da) 2008-08-01 2013-12-02 Ventirx Pharmaceuticals Inc Toll-lignende receptoragonistformuleringer og anvendelse deraf
ES2623794T3 (es) 2008-12-09 2017-07-12 Gilead Sciences, Inc. Intermedios para la preparación de moduladores de receptores tipo toll
US8673307B1 (en) 2009-03-09 2014-03-18 The Rockefeller University HIV-1 anti-core neutralizing antibodies that target a conformational epitope within the ALPHA5-helix of GP120
SI3260136T1 (sl) 2009-03-17 2021-05-31 Theraclone Sciences, Inc. Humani imunodeficientni virus (HIV)-nevtralizirajoča protitelesa
US8338441B2 (en) 2009-05-15 2012-12-25 Gilead Sciences, Inc. Inhibitors of human immunodeficiency virus replication
WO2011022509A2 (en) 2009-08-18 2011-02-24 Ventirx Pharmaceuticals, Inc. Substituted benzoazepines as toll-like receptor modulators
ES2620629T3 (es) 2009-08-18 2017-06-29 Ventirx Pharmaceuticals, Inc. Benzoazepinas sustituidas como moduladores del receptor tipo Toll
JP2013505236A (ja) 2009-09-16 2013-02-14 デューク ユニバーシティー Ｈｉｖ−１抗体
WO2011038290A2 (en) 2009-09-25 2011-03-31 The U. S. A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 and their use
WO2011046623A2 (en) 2009-10-16 2011-04-21 Duke University Hiv-1 antibodies
CN102666541B (zh) 2009-10-22 2015-11-25 吉里德科学公司 用于治疗特别是病毒感染的嘌呤或脱氮嘌呤的衍生物
EP2496268A4 (en) 2009-11-06 2013-06-19 Univ Chung Ang Ind GENE DELIVERY SYSTEMS BASED ON NANOPARTICLES
US20130165489A1 (en) 2010-05-03 2013-06-27 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Small Molecule Modulators of HIV-1 Capsid Stability and Methods Thereof
KR101209266B1 (ko) 2010-06-30 2012-12-06 한국과학기술연구원 생분해성 및 온도 감응성 폴리포스파젠계 자성 고분자, 그의 제조 방법 및 용도
TWI458711B (zh) 2010-07-02 2014-11-01 Gilead Sciences Inc 治療性化合物
MX2012015097A (es) 2010-07-02 2013-05-28 Gilead Sciences Inc Derivados de acido naft-2-ilacetico para tratar sida.
ES2774369T3 (es) 2010-08-31 2020-07-20 Theraclone Science Int Anticuerpo de neutralización del virus de la inmunodeficiencia humana
SG189071A1 (en) 2010-10-01 2013-05-31 Ventirx Pharmaceuticals Inc Therapeutic use of a tlr agonist and combination therapy
EP2621499B1 (en) 2010-10-01 2017-11-22 VentiRx Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of allergic diseases
EP3695850A1 (en) 2010-12-30 2020-08-19 Samyang Biopharmaceuticals Corporation Carrier for negatively charged drugs comprising a cationic lipid and a preparation method thereof
PT2663555T (pt) 2011-01-12 2017-03-23 Array Biopharma Inc Benzoazepinas substituídas como moduladores de recetores tipo-toll
MX346387B (es) 2011-01-12 2017-03-02 Ventirx Pharmaceuticals Inc Benzoazepinas sustituidas como moduladores de receptores tipo toll.
US9422250B2 (en) 2011-04-08 2016-08-23 Janssen Sciences Ireland Uc Pyrimidine derivatives for the treatment of viral infections
MX2013012266A (es) 2011-04-21 2013-11-22 Gilead Sciences Inc Compuestos de benzotiazol y su uso farmaceutico.
WO2012154312A1 (en) 2011-05-09 2012-11-15 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 and their use
US8691750B2 (en) 2011-05-17 2014-04-08 Axolabs Gmbh Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds
SI2710033T1 (sl) 2011-05-17 2021-05-31 The Rockefeller University Virus humane imunske pomanjkljivosti nevtralizirajoča protitelesa in metode njihove uporabe
HUE036220T2 (hu) 2011-05-18 2018-06-28 Janssen Sciences Ireland Uc Kinazolin származékok vírusfertõzések és további betegségek kezelésére
US9540343B2 (en) 2011-07-06 2017-01-10 Gilead Sciences, Inc. Compounds for the treatment of HIV
CN102863512B (zh) 2011-07-07 2016-04-20 上海泓博智源医药技术有限公司 抗病毒化合物
US9493549B2 (en) 2011-07-25 2016-11-15 The Rockefeller University Antibodies directed toward the HIV-1 GP120 CD4 binding site with increased potency and breadth
EP2736532B1 (en) 2011-07-25 2018-05-16 California Institute of Technology Compositions and methods for improving potency and breadth or hiv antibodies
RU2624046C2 (ru) 2011-11-07 2017-06-30 Дзе Юнайтед Стейтс Оф Америка, Эз Репрезентед Бай Дзе Секретэри, Департмент Оф Хелт Энд Хьюман Сервисиз Gp41-нейтрализующие антитела и их применение
KR101383324B1 (ko) 2011-11-10 2014-04-28 주식회사 종근당 신규한 유전자 전달용 조성물
AU2012347453B2 (en) 2011-12-08 2017-11-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to HIV-1 and their use
WO2013090644A2 (en) 2011-12-13 2013-06-20 California Institute Of Technology Anti-hiv antibodies having increased potency and breadth
EP2794613B1 (en) 2011-12-20 2017-03-29 Boehringer Ingelheim International GmbH Condensed triclyclic compounds as inhibitors of hiv replication
KR101699822B1 (ko) 2011-12-21 2017-01-25 노비라 테라퓨틱스, 인코포레이티드 B형 간염의 항바이러스성 제제
BR112014019699B1 (pt) 2012-02-08 2021-12-07 Janssen Sciences Ireland Uc Derivados de piperidino-pirimidina, seu uso no tratamento de infecções virais e composição farmacêutica que os compreende
WO2013142324A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Usa, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 and their use
SG11201401189WA (en) 2012-04-20 2014-09-26 Gilead Sciences Inc Benzothiazol- 6 -yl acetic acid derivatives and their use for treating an hiv infection
WO2013192589A1 (en) * 2012-06-21 2013-12-27 California Institute Of Technology Antibodies targeting hiv escape mutants
ES2707885T3 (es) 2012-08-10 2019-04-05 Janssen Sciences Ireland Unlimited Co Alquilpirimidinderivados para el tratamiento de infecciones víricas y otras enfermedades
WO2014028487A1 (en) 2012-08-13 2014-02-20 Massachusetts Institute Of Technology Amine-containing lipidoids and uses thereof
KR102217111B1 (ko) 2012-10-10 2021-02-18 얀센 사이언시즈 아일랜드 언리미티드 컴퍼니 바이러스 감염 및 다른 질환 치료를 위한 피롤로[3,2-d]피리미딘 유도체
AU2013331049B2 (en) 2012-10-18 2018-11-15 California Institute Of Technology Broadly-neutralizing anti-HIV antibodies
NZ706226A (en) 2012-11-16 2019-09-27 Janssen Sciences Ireland Uc Heterocyclic substituted 2-amino-quinazoline derivatives for the treatment of viral infections
CN104955847A (zh) 2012-12-04 2015-09-30 马里兰州大学(巴尔的摩) HIV-1 Env结合抗体、融合蛋白及其使用方法
MX357940B (es) 2012-12-21 2018-07-31 Gilead Sciences Inc Compuestos de carbamoilpiridona policiclicos y su uso farmaceutico.
US20140221378A1 (en) 2012-12-27 2014-08-07 Japan Tobacco Inc. SUBSTITUTED SPIROPYRIDO[1,2-a]PYRAZINE DERIVATIVE AND PHARMACEUTICAL USE OF SAME AS HIV INTEGRASE INHIBITOR
EP2958900B1 (en) 2013-02-21 2019-04-10 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company 2-aminopyrimidine derivatives for the treatment of viral infections
WO2014165128A2 (en) 2013-03-12 2014-10-09 Novira Therapeutics, Inc. Hepatitis b antiviral agents
US20160244510A1 (en) 2013-09-27 2016-08-25 Duke University Human monoclonal antibodies
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
WO2015117008A2 (en) 2014-01-31 2015-08-06 The Rockefeller University Broadly neutralizing anti-hiv antibodies and epitope therefor
US10676521B2 (en) 2014-07-21 2020-06-09 The Rockefeller University Combination of broadly neutralizing HIV antibodies and viral inducers
SI3321265T1 (sl) 2015-03-04 2020-07-31 Gilead Sciences, Inc. Spojine 4,6-diamino-pirido(3,2-d)pirimidina in njihova uporaba kot modulatorji toličnih receptorjev
WO2016149698A2 (en) 2015-03-19 2016-09-22 Duke University Hiv-1 neutralizing antibodies and uses thereof (v3 antibodies)
WO2016149710A2 (en) 2015-03-19 2016-09-22 Duke University Hiv-1 neutralizing antibodies and uses thereof
SI3271389T1 (sl) 2015-03-20 2020-09-30 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Nevtralizirajoča protitelesa proti GP120 in njihova uporaba
WO2016168758A1 (en) 2015-04-17 2016-10-20 Igm Biosciences, Inc. Multi-valent human immunodeficiency virus antigen binding molecules and uses thereof
AU2016256911B2 (en) 2015-05-07 2022-03-31 Agenus Inc. Anti-OX40 antibodies and methods of use thereof
US10654943B2 (en) * 2015-06-02 2020-05-19 The Rockefeller University Tri-specific antibodies for HIV therapy
WO2016196975A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CA3003878A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 gp41 and their use
WO2017096276A1 (en) 2015-12-02 2017-06-08 Agenus Inc. Anti-gitr antibodies and methods of use thereof
EP3383914A4 (en) 2015-12-02 2019-10-30 Agenus Inc. ANTI-OX40 ANTIBODIES AND METHODS OF USE
US20200123265A1 (en) 2015-12-02 2020-04-23 Agenus Inc. Anti-gitr antibodies and methods of use thereof
WO2017096221A1 (en) 2015-12-02 2017-06-08 The Rockefeller University Bispecific anti-hiv broadly neutralizing antibodies
US11447557B2 (en) 2015-12-02 2022-09-20 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
CA3006963A1 (en) 2015-12-03 2017-06-08 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Anti-ox40 antibodies and methods of use thereof
MA44077A (fr) 2015-12-15 2021-05-05 Gilead Sciences Inc Anticorps neutralisants le virus de l'immunodéficience humaine
CN107022027B (zh) 2016-02-02 2022-03-08 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心 Hiv-1广谱中和抗体及其用途
CN107033241B (zh) 2016-02-03 2022-03-08 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心 Hiv-1广谱中和抗体及其用途
EP3525821A4 (en) 2016-10-17 2020-09-09 University of Maryland MULTI-SPECIFIC ANTIBODIES TARGETING THE HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS AND THEIR METHODS OF USE
MA46770A (fr) 2016-11-09 2019-09-18 Agenus Inc Anticorps anti-ox40, anticorps anti-gitr, et leurs procédés d'utilisation
US11325966B2 (en) 2016-12-27 2022-05-10 The Rockefeller University Broadly neutralizing anti-HIV-1 antibodies and methods of use thereof
WO2018237148A1 (en) 2017-06-21 2018-12-27 Gilead Sciences, Inc. MULTISPECIFIC ANTIBODIES TARGETING HIV GP120 AND CD3
PE20210685A1 (es) 2018-07-03 2021-04-08 Gilead Sciences Inc Anticuerpos que se dirigen al gp120 de vih y metodos de uso

Also Published As

Publication number Publication date
CL2023001949A1 (es) 2023-12-22
CO2020016559A2 (es) 2021-01-18
CA3102859A1 (en) 2020-01-09
JP2021529530A (ja) 2021-11-04
JP7455156B2 (ja) 2024-03-25
CN118063599A (zh) 2024-05-24
TW202005980A (zh) 2020-02-01
CN112368052A (zh) 2021-02-12
NZ771700A (en) 2024-07-05
EP4257600A3 (en) 2024-01-10
TW202321293A (zh) 2023-06-01
JP2022101682A (ja) 2022-07-06
AU2019297324B9 (en) 2022-07-07
TWI799610B (zh) 2023-04-21
JP7126573B2 (ja) 2022-08-26
MX2020013723A (es) 2021-03-02
AU2022224846A1 (en) 2022-09-29
SG11202012043RA (en) 2021-01-28
AU2019297324A1 (en) 2021-01-28
KR20210028223A (ko) 2021-03-11
WO2020010107A1 (en) 2020-01-09
US20220089698A1 (en) 2022-03-24
US11987617B2 (en) 2024-05-21
AU2019297324B2 (en) 2022-06-16
US11168130B2 (en) 2021-11-09
EP4257600A2 (en) 2023-10-11
IL279189A (en) 2021-01-31
CR20200653A (es) 2021-02-11
TWI846233B (zh) 2024-06-21
EP3817819A1 (en) 2021-05-12
DOP2023000187A (es) 2023-10-31
US20200223907A1 (en) 2020-07-16
PH12021500001A1 (en) 2021-09-13
PE20210685A1 (es) 2021-04-08
CL2020003422A1 (es) 2021-06-25
KR102579246B1 (ko) 2023-09-19
US20240034774A1 (en) 2024-02-01
JP2024029240A (ja) 2024-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11987617B2 (en) Antibodies that target HIV GP120 and methods of use
KR102324568B1 (ko) HIV gp120 및 CD3을 표적화하는 다중특이적 항체
JP7518286B2 (ja) Ｈｉｖを標的とする多重特異性抗原結合分子及び使用方法
US20220289829A1 (en) Anti-hiv vaccine antibodies with reduced polyreactivity