JPWO2020086881A5

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Publication number: JPWO2020086881A5
Application number: JP2021516750A
Authority: JP
Publication date: 2022-10-19

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本明細書で引用される全ての特許、出願、刊行物、試験方法、文献、および他の資料は、本明細書に物理的に存在するかのように、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
最後に、本発明の好ましい実施態様を項分け記載する。
［実施態様１］
組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）の産生のためのプラスミドシステムであって、
（ｉ）５’および３’ＡＡＶ末端逆位反復配列（ＩＴＲ）に隣接する少なくとも１つの異種核酸と、それらＩＴＲの外側のスタッファー配列とを含む導入遺伝子含有プラスミド；
（ｉｉ）ＡＡＶの複製（Ｒｅｐ）遺伝子配列とキャプシド（Ｃａｐ）遺伝子配列とを含むプラスミド；および
（ｉｉｉ）アデノウイルス（Ａｄ）ヘルパープラスミド；
を含む、プラスミドシステム。
［実施態様２］
前記スタッファー配列が、導入遺伝子含有プラスミドがｒＡＡＶキャプシドにパッケージングされないように、導入遺伝子含有プラスミドのバックボーンのサイズを増加させる、実施態様１に記載のプラスミドシステム。
［実施態様３］
前記導入遺伝子含有プラスミドのバックボーンが野生型ＡＡＶゲノムよりも大きい、実施態様１または２に記載のプラスミドシステム。
［実施態様４］
前記スタッファー配列が、エンハンサー、プロモーター、スプライシング制御因子、ノンコーディングＲＮＡ、アンチセンス配列、コード配列、またはそれらの任意の組み合わせを欠いている、実施態様１～３のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様５］
前記スタッファー配列が、エンハンサー、プロモーター、スプライシング制御因子、ノンコーディングＲＮＡ、アンチセンス配列、およびコード配列を欠いている、実施態様４に記載のプラスミドシステム。
［実施態様６］
前記スタッファー配列が、ヒトゲノムに見られる不活性なイントロンＤＮＡ配列を含む、実施態様１～５のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様７］
前記スタッファー配列が、１０００～５０００ヌクレオチド長の間の核酸配列または１０００～２０００ヌクレオチド長の間の核酸配列を含む、実施態様１～６のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様８］
前記スタッファー配列が、ＧＡＰＤＨイントロン２、そのフラグメント、またはその変異体を含む、実施態様１～７のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様９］
前記スタッファー配列が、配列番号９と少なくとも約４０％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％の同一性を有する核酸を含む、実施態様１～８のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１０］
前記スタッファー配列が、配列番号９と少なくとも約４０％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％の同一性を有する核酸からなる、実施態様１～９のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１１］
前記スタッファー配列が、配列番号９またはそのフラグメントを含む、実施態様１～８のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１２］
前記スタッファー配列が、配列番号９またはそのフラグメントからなる、実施態様１～８のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１３］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、図３Ａと同じ順序の構造を有するプラスミドを含み、ｅＧＦＰおよびＳＥＡＰ導入遺伝子は少なくとも１つの異種核酸で置き換えることができる、実施態様１～１２のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１４］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、図３Ｂと同じ順序の構造を有するプラスミドを含み、ｅＧＦＰ導入遺伝子を少なくとも１つの異種核酸で置き換えることができる、実施態様１～１２のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１５］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、５’から３’の方向で、配列番号２、４、少なくとも１つの異種核酸、配列番号８、３、およびスタッファー配列の核酸配列を含み、各核酸配列は、その対応する機能的フラグメントもしくは誘導体、またはその配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有する配列で置換することができまたはそれをコードする、実施態様１～１２のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１６］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、発現カセットの外側であるが５’ＩＴＲと３’ＩＴＲとの間に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、実施態様１～１５のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１７］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、ｉ）３’ＩＴＲの上流でかつポリＡ配列の下流、またはｉｉ）３’ＩＴＲの上流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の下流；またはｉｉｉ）５’ＩＴＲの下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の上流；またはｉｖ）５’ＩＴＲの下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列のプロモーターの上流；またはｖ）５’ＩＴＲの下流でかつ３’ＩＴＲの上流に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、実施態様１～１５のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１８］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、ｉ）配列番号３の上流でかつ配列番号８の下流；またはｉｉ）配列番号３の上流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の下流；またはｉｉｉ）配列番号２の下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の上流；またはｉｖ）配列番号２の下流でかつ配列番号４の上流；またはｖ）配列番号２の下流でかつ配列番号３の上流に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、実施態様１～１５のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様１９］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、５’から３’の方向で、配列番号４３、４、少なくとも１つの異種核酸配列、配列番号８、３、およびスタッファー配列の核酸配列を含み、各核酸配列は、その対応する機能的フラグメントもしくは誘導体、またはその配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有する配列で置換することができまたはそれをコードする、実施態様１～１２のいずれかに記載のプラスミドシステム
［実施態様２０］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、発現カセットの外側であるが５’ＩＴＲと３’ＩＴＲとの間に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、実施態様１９に記載のプラスミドシステム。
［実施態様２１］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、ｉ）３’ＩＴＲの上流でかつポリＡ配列の下流、またはｉｉ）３’ＩＴＲの上流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の下流；またはｉｉｉ）５’ＩＴＲの下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の上流；またはｉｖ）５’ＩＴＲの下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列のプロモーターの上流；またはｖ）５’ＩＴＲの下流でかつ３’ＩＴＲの上流に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、実施態様１９または２０に記載のプラスミドシステム。
［実施態様２２］
前記導入遺伝子含有プラスミドが、ｉ）配列番号３の上流でかつ配列番号８の下流；またはｉｉ）配列番号３の上流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の下流；またはｉｉｉ）配列番号４３の下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の上流；またはｉｖ）配列番号４３の下流でかつ配列番号４の上流；またはｖ）配列番号４３の下流でかつ配列番号３の上流に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、実施態様１９または２０に記載のプラスミドシステム。
［実施態様２３］
前記ＡＡＶＲｅｐ遺伝子配列が、ＡＡＶ血清型２、５、８、９、またはそれらのハイブリッドに由来する、実施態様１～２２のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様２４］
前記ＡＡＶＣａｐ遺伝子配列が、ＡＡＶ血清型２、５、８、９、またはそれらのハイブリッドに由来する、実施態様１～２３のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様２５］
Ｒｅｐ遺伝子配列およびＣａｐ遺伝子配列を含むプラスミドがプロモーターをさらに含む、実施態様１～２４のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様２６］
前記プロモーターがＡＡＶプロモーターである、実施態様２５に記載のプラスミドシステム。
［実施態様２７］
前記プロモーターがＡＡＶＰ５プロモーターである、実施態様２６に記載のプラスミドシステム。
［実施態様２８］
前記Ａｄヘルパープラスミドが、Ｅ１ａ、Ｅ１ｂ、Ｅ２ａ、Ｅ４ｏｒｆ６、またはＶＡＲＮＡから選択される１つまたは複数のアデノウイルス遺伝子を含む、実施態様１～２７のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様２９］
前記Ａｄヘルパープラスミドが、５’から３’の方向で、配列番号１８、１７、１６、および２０の核酸配列を含み、各核酸配列は、その対応する機能的フラグメントもしくは誘導体、またはその配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有する配列で置換することができる、実施態様２８に記載のプラスミドシステム。
［実施態様３０］
前記Ａｄヘルパープラスミドが、５’から３’の方向で、配列番号２１、１６、３９、４０、２２、２３、および２０の核酸配列を含み、各核酸配列は、その対応する機能的フラグメントもしくは誘導体、またはその配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有する配列で置換することができまたはそれをコードする、実施態様２８に記載のプラスミドシステム。
［実施態様３１］
前記Ａｄヘルパープラスミドが、図５のいずれかの構築物と同じ順序の構造を含む、実施態様１～２８のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様３２］
前記Ａｄヘルパープラスミドが、配列番号１４と少なくとも約４０％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％の同一性を有する核酸を含む、実施態様１～２８のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様３３］
前記Ａｄヘルパープラスミドが、配列番号１５と少なくとも約４０％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％の同一性を有する核酸を含む、実施態様１～２８のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様３４］
前記異種核酸配列が、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質をコードする目的の異種遺伝子である、実施態様１～３３のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様３５］
前記ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質が、酵素、抗体、ＭＨＣ分子、Ｔ細胞受容体、Ｂ細胞受容体、アプタマー、アビマー、受容体結合リガンド、ターゲティングペプチド、治療薬、または遺伝子編集分子である、実施態様３４に記載のプラスミドシステム。
［実施態様３６］
前記異種核酸が、アンチセンス、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ＥＧＳ、ｇＲＮＡ、ｓｇＲＮＡ、リボザイム、またはアプタマーなどの核酸配列である、実施態様１～３５のいずれかに記載のプラスミドシステム。
［実施態様３７］
実施態様１～３６のいずれかに記載のプラスミドシステムを含む宿主細胞。
［実施態様３８］
実施態様３７に記載の宿主細胞によって産生された組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）。
［実施態様３９］
普遍的なベクター力価測定を可能にするＤＮＡ力価タグであって、導入遺伝子含有プラスミド内の異種核酸配列の核酸配列の上流または下流のいずれかにある約６０ヌクレオチド～約１００ヌクレオチド長の核酸タグ配列を含み、前記核酸タグ配列が、少なくとも２つの異なる導入遺伝子含有プラスミドで使用されて少なくとも２つの異なるタイプのＡＡＶベクター間での普遍的なベクターゲノム力価測定を可能にすることができる、ＤＮＡ力価タグ。
［実施態様４０］
前記核酸タグ配列が約１００ヌクレオチド長である、実施態様３９に記載のＤＮＡ力価タグ。
［実施態様４１］
前記核酸タグ配列が、導入遺伝子含有プラスミドの３’ＩＴＲ配列の上流にあるが、導入遺伝子含有プラスミドの発現カセット内にはない、実施態様３９または実施態様４０に記載のＤＮＡ力価タグ。
［実施態様４２］
前記核酸タグ配列が、導入遺伝子含有プラスミドの５’ＩＴＲ配列の下流にあるが、導入遺伝子含有プラスミドの発現カセット内にはない、実施態様３９または実施態様４０に記載のＤＮＡ力価タグ。
［実施態様４３］
前記ＤＮＡ力価タグが、配列番号６１～７０の核酸配列のいずれか１つを含む、実施態様３９～４２のいずれかに記載のＤＮＡ力価タグ。
［実施態様４４］
実施態様１～３６のいずれかに記載のプラスミドシステムで細胞に形質導入し、さらにｒＡＡＶを単離することを含む、組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）を製造する方法。
［実施態様４５］
実施態様４４に記載の方法によって製造された組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）。
［実施態様４６］
実施態様１～３６のいずれかに記載のプラスミドシステムを含む組成物。
［実施態様４７］
実施態様３８または実施態様４５に記載のｒＡＡＶを含む医薬組成物。
［実施態様４８］
核酸配列を対象の細胞に送達または移送する方法であって、実施態様３８または実施態様４５に記載のｒＡＡＶを対象に投与し、それによって核酸配列を細胞に送達することを含む、方法。
［実施態様４９］
前記対象の細胞が培養中であるか、または対象に存在する、実施態様４８に記載の方法。
［実施態様５０］
対象における疾患または障害を処置または予防する方法であって、それを必要とする対象に実施態様３８または実施態様４５に記載のｒＡＡＶを投与することを含む、方法。
［実施態様５１］
宿主細胞に実施態様３８または実施態様４５に記載のｒＡＡＶを接触させることを含む、宿主細胞に形質導入する方法。

Claims

組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）の産生のためのプラスミドシステムであって、
（ｉ）５’および３’ＡＡＶ末端逆位反復配列（ＩＴＲ）に隣接する少なくとも１つの異種核酸と、それらＩＴＲの外側のスタッファー配列とを含む導入遺伝子含有プラスミド；
（ｉｉ）ＡＡＶの複製（Ｒｅｐ）遺伝子配列とキャプシド（Ｃａｐ）遺伝子配列とを含むプラスミド；および
（ｉｉｉ）アデノウイルス（Ａｄ）ヘルパープラスミド；
を含み、前記導入遺伝子含有プラスミドのバックボーンが野生型ＡＡＶゲノムよりも大きい、プラスミドシステム。
前記スタッファー配列は、導入遺伝子含有プラスミドがｒＡＡＶキャプシドにパッケージングされないように、前記導入遺伝子含有プラスミドのバックボーンのサイズを増加させる、請求項１に記載のプラスミドシステム。
前記スタッファー配列が、エンハンサー、プロモーター、スプライシング制御因子、ノンコーディングＲＮＡ、アンチセンス配列、コード配列、またはそれらの任意の組み合わせを欠いている、請求項１または２に記載のプラスミドシステム。
前記スタッファー配列が、ヒトゲノムに見られる不活性なイントロンＤＮＡ配列を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記スタッファー配列が、１０００～５０００ヌクレオチド長の間の核酸配列または１０００～２０００ヌクレオチド長の間の核酸配列を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記スタッファー配列が、ＧＡＰＤＨイントロン２、そのフラグメント、またはその変異体を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記スタッファー配列が、配列番号９と少なくとも約４０％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％の同一性を有する核酸を含むかまたはからなる、請求項６に記載のプラスミドシステム。
前記スタッファー配列が、配列番号９またはそのフラグメントを含むかまたはからなる、請求項６に記載のプラスミドシステム。
前記導入遺伝子含有プラスミドが、図３Ａまたは図３Ｂと同じ順序の構造を有するプラスミドを含み、ｅＧＦＰおよびＳＥＡＰ導入遺伝子は少なくとも１つの異種核酸で置き換えることができる、請求項１～８のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記導入遺伝子含有プラスミドが、５’から３’の方向で、配列番号２、４、少なくとも１つの異種核酸、配列番号８、３、およびスタッファー配列の核酸配列を含み、各核酸配列は、その対応する機能的フラグメントもしくは誘導体、またはその配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有する配列で置換することができまたはそれをコードする、請求項１～８のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記導入遺伝子含有プラスミドが、発現カセットの外側であるが５’ＩＴＲと３’ＩＴＲとの間に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記導入遺伝子含有プラスミドが、
ａ）ｉ）３’ＩＴＲの上流でかつポリＡ配列の下流、またはｉｉ）３’ＩＴＲの上流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の下流；またはｉｉｉ）５’ＩＴＲの下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の上流；またはｉｖ）５’ＩＴＲの下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列のプロモーターの上流；またはｖ）５’ＩＴＲの下流でかつ３’ＩＴＲの上流に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む；
ｂ）ｉ）配列番号３の上流でかつ配列番号８の下流；またはｉｉ）配列番号３の上流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の下流；またはｉｉｉ）配列番号２の下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の上流；またはｉｖ）配列番号２の下流でかつ配列番号４の上流；またはｖ）配列番号２の下流でかつ配列番号３の上流に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む；
ｃ）ｉ）３’ＩＴＲの上流でかつポリＡ配列の下流、またはｉｉ）３’ＩＴＲの上流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の下流；またはｉｉｉ）５’ＩＴＲの下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の上流；またはｉｖ）５’ＩＴＲの下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列のプロモーターの上流；またはｖ）５’ＩＴＲの下流でかつ３’ＩＴＲの上流に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む；または
ｄ）ｉ）配列番号３の上流でかつ配列番号８の下流；またはｉｉ）配列番号３の上流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の下流；またはｉｉｉ）配列番号４３の下流でかつ少なくとも１つの異種核酸配列の上流；またはｉｖ）配列番号４３の下流でかつ配列番号４の上流；またはｖ）配列番号４３の下流でかつ配列番号３の上流に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記導入遺伝子含有プラスミドが、５’から３’の方向で、配列番号４３、４、少なくとも１つの異種核酸配列、配列番号８、３、およびスタッファー配列の核酸配列を含み、各核酸配列は、その対応する機能的フラグメントもしくは誘導体、またはその配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有する配列で置換することができまたはそれをコードする、請求項１～８のいずれか一項に記載のプラスミドシステム
前記導入遺伝子含有プラスミドが、発現カセットの外側であるが５’ＩＴＲと３’ＩＴＲとの間に、ＤＮＡ力価タグをさらに含む、請求項１３に記載のプラスミドシステム。
ａ）前記ＡＡＶＲｅｐ遺伝子配列が、ＡＡＶ血清型２、５、８、９、またはそれらのハイブリッドに由来する；
ｂ）前記ＡＡＶＣａｐ遺伝子配列が、ＡＡＶ血清型２、５、８、９、またはそれらのハイブリッドに由来する；
ｃ）Ｒｅｐ遺伝子配列およびＣａｐ遺伝子配列を含むプラスミドがプロモーターをさらに含む；
ｄ）前記プロモーターがＡＡＶプロモーターである；
ｅ）前記プロモーターがＡＡＶＰ５プロモーターである；および／または
ｆ）前記Ａｄヘルパープラスミドが、Ｅ１ａ、Ｅ１ｂ、Ｅ２ａ、Ｅ４ｏｒｆ６、またはＶＡＲＮＡから選択される１つまたは複数のアデノウイルス遺伝子を含む、請求項１～１４のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記Ａｄヘルパープラスミドが、５’から３’の方向で、配列番号１８、１７、１６、および２０の核酸配列を含み、各核酸配列は、その対応する機能的フラグメントもしくは誘導体、またはその配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有する配列で置換することができる、請求項１～１５のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記Ａｄヘルパープラスミドが、５’から３’の方向で、配列番号２１、１６、３９、４０、２２、２３、および２０の核酸配列を含み、各核酸配列は、その対応する機能的フラグメントもしくは誘導体、またはその配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の同一性を有する配列で置換することができまたはそれをコードする、請求項１～１５のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記Ａｄヘルパープラスミドが、図５のいずれかの構築物と同じ順序の構造を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記Ａｄヘルパープラスミドが、配列番号１４と少なくとも約４０％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％の同一性を有する核酸を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記Ａｄヘルパープラスミドが、配列番号１５と少なくとも約４０％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％の同一性を有する核酸を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記異種核酸配列が、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質をコードする目的の異種遺伝子である、請求項１～２０のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
前記ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質が、酵素、抗体、ＭＨＣ分子、Ｔ細胞受容体、Ｂ細胞受容体、アプタマー、アビマー、受容体結合リガンド、ターゲティングペプチド、治療薬、または遺伝子編集分子である、請求項２１に記載のプラスミドシステム。
前記異種核酸が、アンチセンス、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ＥＧＳ、ｇＲＮＡ、ｓｇＲＮＡ、リボザイム、またはアプタマーなどの核酸配列である、請求項１～２２のいずれか一項に記載のプラスミドシステム。
請求項１～２３のいずれか一項に記載のプラスミドシステムを含む宿主細胞。
請求項２４に記載の宿主細胞によって産生された組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）。
普遍的なベクター力価測定を可能にするＤＮＡ力価タグであって、導入遺伝子含有プラスミド内の異種核酸配列の核酸配列の上流または下流のいずれかにある約６０ヌクレオチド～約１００ヌクレオチド長の核酸タグ配列を含み、前記核酸タグ配列が、少なくとも２つの異なる導入遺伝子含有プラスミドで使用されて少なくとも２つの異なるタイプのＡＡＶベクター間での普遍的なベクターゲノム力価測定を可能にすることができる、ＤＮＡ力価タグ。
前記核酸タグ配列が約１００ヌクレオチド長である、請求項２６に記載のＤＮＡ力価タグ。
前記核酸タグ配列が、導入遺伝子含有プラスミドの３’ＩＴＲ配列の上流にあるかまたは導入遺伝子含有プラスミドの５’ＩＴＲ配列の下流にあるが、導入遺伝子含有プラスミドの発現カセット内にはない、請求項２６または請求項２７に記載のＤＮＡ力価タグ。
配列番号６１～７０の核酸配列のいずれか１つを含む、請求項２６～２８のいずれか一項に記載のＤＮＡ力価タグ。
請求項１～２３のいずれか一項に記載のプラスミドシステムで細胞に形質導入し、さらにｒＡＡＶを単離することを含む、組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）を製造する方法。
請求項３０に記載の方法によって製造された組換えアデノ随伴ウイルスベクター（ｒＡＡＶ）。
請求項１～２３のいずれか一項に記載のプラスミドシステムを含む組成物。
請求項２５または請求項３１に記載のｒＡＡＶを含む組成物。
ｉｎｖｉｔｒｏで核酸配列を対象の細胞に送達または移送する方法であって、細胞に請求項２５または請求項３１に記載のｒＡＡＶを接触させ、それによって核酸配列を細胞に送達することを含む、方法。
請求項２５または請求項３１に記載のｒＡＡＶを含む、核酸配列を対象の細胞に送達または移送するための組成物。
前記対象の細胞が培養中であるか、または対象に存在する、請求項３４に記載の組成物。
対象における疾患または障害を処置または予防するための組成物であって、請求項１～２３のいずれか一項に記載のプラスミドシステム、あるいは請求項２５または請求項３１に記載のｒＡＡＶを含む、組成物。
宿主細胞に請求項２５または請求項３１に記載のｒＡＡＶを接触させることを含む、ｉｎｖｉｔｒｏで宿主細胞に形質導入する方法。