CN112888426A - Aav三质粒系统 - Google Patents

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Abstract

公开一种三质粒系统，其用于产生重组腺相关病毒。在一个方面中，本发明涉及一种用于重组腺相关病毒载体rAAV产生的质粒系统，其包括：(i)含转基因质粒，其包括由5'和3'AAV反向末端重复序列ITR侧接的至少一种异源核酸序列和在所述ITR外部的填充序列；(ii)质粒，其包括AAV复制(Rep)和衣壳(Cap)基因序列；和(iii)腺病毒(Ad)辅助质粒。

Description

AAV三质粒系统
交叉参考
本申请要求2018年10月25日提交的美国临时专利申请第62/750,603号的优先权，所述美国临时专利申请以全文引用的方式并入本文中。
序列表
本申请含有序列表，其已呈ASCII格式以电子方式提交且特此以全文引用的方式并入。将2019年10月22日创建的所述ASCII拷贝命名为250478_001858_SL.txt且大小为274,165字节。
背景技术
腺相关病毒(Adeno-associated virus；AAV)为感染人类和例如灵长类动物、牛类动物、猫类动物和犬类动物的各种其它动物物种的DNA小病毒。其属于细小病毒科家族(family Parvoviridae)且位于依赖病毒属(genus Dependovirus)中，这是因为AAV的产毒性感染仅在辅助病毒(例如，腺病毒或疱疹病毒)的存在下发生。此较小无包膜病毒含有编码复制(Rep)和衣壳(Cap)蛋白质的集合的4.6千碱基单链DNA基因组。举例来说，Rep蛋白质(Rep78、Rep68、Rep52和Rep40)参与AAV基因组的复制、挽救和集成，且Cap蛋白质(VP1、VP2和VP3)提供结构功能且形成病毒体衣壳。在5'和3'端处侧接Rep和Cap开读框为145bp反向末端重复序列(inverted terminal repeat；ITR)。ITR在顺式中充当核酸复制的起源且充当病毒的包装信号。
一旦感染已发生，AAV生命周期存在两个阶段：1)裂解阶段和2)溶原阶段。借助于辅助病毒，裂解阶段开始。在这个阶段期间，AAV开始产毒性感染，从而引起基因组复制、病毒基因表达和病毒体产生。在腺病毒辅助的情况下，提供关于AAV表达的辅助功能的腺病毒蛋白质包含E1a、E1b、E2a、E4和VA RNA。腺病毒通过为AAV产毒性感染提供适当环境来帮助调节细胞基因表达。参见2008年10月达雅(Daya)和伯恩斯(Berns)临床微生物学评述(Clinical Microbiology Reviews),第583-593页。
AAV为可被工程改造以用于基因疗法的万用病毒。用于基因疗法的重组腺相关病毒载体(rAAV)(在其DNA基因组中缺少病毒基因)主要为被工程改造以穿越细胞膜以便将其DNA货物运输和递送到细胞的胞核中的基于蛋白质的纳米粒子。rAAV DNA基因组可形成持续作为经转导细胞的胞核中的游离基因组的环状串联体。因为rAAV DNA不集成到宿主基因组中，其有助于长期基因表达和耐久性，其为rAAV理想用于基因疗法的原因中的一种。
已通过用治疗性转基因表达盒置换全部病毒基因，同时保留载体包装和DNA复制所需的唯一顺式元件ITR来将重组形式的AAV(rAAV)研发为载体。参见例如美国专利第4,797,368号；第5,153,414号；第5,139,941号；第5,252,479号；和第5,354,678号；以及国际公开第WO1991/018088号；第WO1993/024641号和第WO1994/13788号。rAAV产生的早期方法依赖于二质粒系统，所述二质粒系统包括：1)AAV辅助质粒(通常涵盖AAV Rep和Cap编码区，同时缺少AAV ITR，因此其不能自身复制或包装)；和2)含ITR的质粒(通常涵盖由AAV ITR限定的所选所关注转基因，所述转基因提供病毒复制和包装功能)。辅助质粒和携带所选基因的含ITR的质粒两者均可引入到适合细胞中以用于通过瞬时转染来产生。经转染细胞可接着感染有例如腺病毒或单纯疱疹病毒的辅助病毒，所述辅助病毒转活化存在于辅助质粒上的AAV启动子，所述AAV启动子导引AAV Rep和Cap区的转录和翻译。关于Ad辅助病毒，E1a、E1b、E2a、E4和VA RNA基因可提供rAAV产生所必需的辅助功能。将辅助病毒在产生rAAV时感染到生产细胞中以产生rAAV为有效的；然而，后果为其也可能产生可诱发宿主的免疫反应的辅助病毒粒子。在某些平台中，可将AAV制造所必需的病毒辅助基因稳定地转染到制造细胞系(例如，HEK293细胞)中，由此降低来自微量残余辅助病毒的宿主免疫系统的抗辅助病毒免疫反应的可能性。
最近，已研发出三质粒转染方法。这种方法使用AAV血清型特异性Rep和Cap质粒以及含转基因质粒，但通过在第三质粒上提供必需的辅助病毒基因来消除辅助病毒感染的使用(即去除或减少病毒编码序列)，因此降低宿主免疫系统的潜在抗辅助病毒免疫反应。在第三质粒上提供病毒辅助基因极大地减少经转染细胞中的辅助病毒产生，从而仅提供rAAV。粘附性HEK293细胞的多质粒瞬时转染为用于rAAV产生的常用方法。
在多质粒系统中，维持适当质粒大小为至关重要的。因此，添加核酸序列(也称为“填充序列”)以确保质粒具有最优选大小可为至关重要的。举例来说，为阻止含ITR的质粒的质粒骨架不包装到载体衣壳中，可能需要添加填充序列以使得骨架足够大以有效地包装到衣壳中。然而，填充序列为“静默”的且不会在质粒经包装的较小概率中活化免疫系统为至关重要的。
因此，需要用于产生rAAV的改进的基于三质粒的系统。质粒系统应提供改进的转染和降低的免疫原性，同时仍保留转基因的最优选表达。本发明的实施例针对这种质粒系统。
发明内容
如现有技术章节中所说明，在所属领域中存在对改进用于基于rAAV的基因治疗的rAAV质粒系统的较大需求。本发明满足此需求和其它需求。本发明的实施例大体上涉及一种用于产生rAAV的质粒系统，且确切来说，涉及一种基于三质粒的系统。
在一个方面中，本发明涉及一种用于重组腺相关病毒载体(rAAV)产生的质粒系统，其包括：(i)含转基因质粒，其包括由5'和3'AAV反向末端重复序列(ITR)侧接的至少一种异源核酸序列和在所述ITR外部的填充序列；(ii)质粒，其包括AAV复制(Rep)和衣壳(Cap)基因序列；和(iii)腺病毒(Ad)辅助质粒。
在某些实施例中，所述填充序列增加含转基因质粒骨架的大小。在某些实施例中，所述填充序列增加所述含转基因质粒骨架的大小以使得阻止所述含转基因质粒骨架包装到rAAV衣壳中。在某些实施例中，将质粒骨架并入所述rAAV中低于检测极限。在某些实施例中，在添加所述填充序列之后，所述含转基因质粒的骨架大于野生型AAV基因组。
在某些实施例中，所述填充序列不含增强子、启动子、剪接调节子、非编码RNA、反义序列、编码序列，或其任何组合。在某些实施例中，所述填充序列不含增强子、启动子、剪接调节子、非编码RNA、反义序列和编码序列。在某些实施例中，所述填充序列包括发现于人类基因组中的惰性内含子DNA序列。
在某些实施例中，所述填充序列包括长度在1000与5000个核苷酸之间的核酸序列，或长度在1000与2000个核苷酸之间的核酸序列。
在某些实施例中，所述填充序列包括GAPDH内含子2、其片段或突变体。在某些实施例中，所述填充序列包括失活庆大霉素(gentamycin)基因。
在某些实施例中，所述填充序列包括与SEQ ID NO:9具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，所述填充序列包括SEQ ID NO:9或其片段。在某些实施例中，所述片段长度在800-1000个核苷酸之间。
在某些实施例中，所述填充序列由与SEQ ID NO:9具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸组成。在某些实施例中，所述填充序列由SEQ ID NO:9或其片段组成。在某些实施例中，所述片段长度在800-1000个核苷酸之间。
在某些实施例中，所述含转基因质粒包括具有与图3A呈相同次序的结构的质粒，其中eGFP和SEAP转基因可被所述至少一种异源核酸序列置换。
在某些实施例中，所述含转基因质粒包括具有与图3B呈相同次序的结构的质粒，其中所述eGFP转基因可被所述至少一种异源核酸序列置换。
在某些实施例中，所述含转基因质粒在5'到3'的方向上包括以下核酸序列：5'ITR(例如，SEQ ID NO:2或43)、启动子(例如，SEQ ID NO:4)、至少一种异源核酸序列、polyA序列(例如，SEQ ID NO:8)、3'ITR(例如，SEQ ID NO:3)和所述填充序列(例如，SEQ ID NO:9)，其中各核酸序列可被以下取代或编码以下：对应功能片段或其衍生物，或与其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％一致性的序列。
在某些实施例中，所述含转基因质粒进一步包括在表达盒外部但在所述5'ITR与所述3'ITR之间的DNA滴度标签。
在某些实施例中，所述含转基因质粒进一步包括以下处的DNA滴度标签：i)所述3'ITR的上游和polyA序列的下游；或ii)所述3'ITR的上游和所述至少一种异源核酸序列的下游；iii)或所述5'ITR的下游和所述至少一种异源核酸序列的上游；或iv)所述5'ITR的下游和所述至少一种异源核酸序列的启动子的上游；或v)所述5'ITR的下游和所述3'ITR的上游。
在某些实施例中，所述含转基因质粒进一步包括以下处的DNA滴度标签：i)3'ITR(例如，SEQ ID NO:3)的上游和polyA序列(例如，SEQ ID NO:8)的下游；或ii)3'ITR(例如，SEQ ID NO:3)的上游和所述至少一种异源核酸序列的下游；iii)或5'ITR(例如，SEQ IDNO:2或43)的下游和所述至少一种异源核酸序列的上游；或iv)5'ITR(例如，SEQ ID NO:2或43)的下游和启动子(例如，SEQ ID NO:4)的上游；或v)5'ITR(例如，SEQ ID NO:2或43)的下游和3'ITR(例如，SEQ ID NO:3)的上游。
在某些实施例中，所述含转基因质粒在5'到3'的方向上包括以下核酸序列：5'ITR(例如，SEQ ID NO:2或43)、启动子(例如，SEQ ID NO:4)、至少一种异源核酸序列、polyA序列(例如，SEQ ID NO:8)、3'ITR(例如，SEQ ID NO:3)和所述填充序列(例如，SEQ ID NO:9)，其中各核酸序列可被以下取代或编码以下：对应功能片段或其衍生物，或与其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％一致性的序列。
在某些实施例中，所述含转基因质粒进一步包括在所述表达盒外部但在所述5'ITR与所述3'ITR之间的DNA滴度标签。
在某些实施例中，所述含转基因质粒进一步包括以下处的DNA滴度标签：i)所述3'ITR的上游和polyA序列的下游；或ii)所述3'ITR的上游和所述至少一种异源核酸序列的下游；iii)或所述5'ITR的下游和所述至少一种异源核酸序列的上游；或iv)所述5'ITR的下游和所述至少一种异源核酸序列的启动子的上游；或v)所述5'ITR的下游和所述3'ITR的上游。
在某些实施例中，所述含转基因质粒进一步包括以下处的DNA滴度标签：i)3'ITR(例如，SEQ ID NO:3)的上游和polyA序列(例如，SEQ ID NO:8)的下游；或ii)3'ITR(例如，SEQ ID NO:3)的上游和所述至少一种异源核酸序列的下游；iii)或5'ITR(例如，SEQ IDNO:2或43)的下游和所述至少一种异源核酸序列的上游；或iv)5'ITR(例如，SEQ ID NO:2或43)的下游和启动子(例如，SEQ ID NO:4)的上游；或v)5'ITR(例如，SEQ ID NO:2或43)的下游和3'ITR(例如，SEQ ID NO:3)的上游。
在某些实施例中，所述AAV Rep基因序列来自AAV血清型2、5、8、9，或其杂合体。在某些实施例中，所述AAV Cap基因序列来自AAV血清型2、5、8、9，或其杂合体。在某些实施例中，包括所述Rep和所述Cap基因序列的所述质粒进一步包括启动子。在某些实施例中，所述启动子为AAV启动子。在某些实施例中，所述启动子为AAV P5启动子。
在某些实施例中，所述Ad辅助质粒包括选自以下的腺病毒基因中的一或多个：E1a、E1b、E2a、E4orf6或VA RNA。
在某些实施例中，所述Ad辅助质粒在5'到3'的方向上包括以下核酸序列：SEQ IDNO:18、17、16和20，其中各核酸序列可被以下取代：对应功能片段或其衍生物，或与其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％一致性的序列。
在某些实施例中，所述Ad辅助质粒在5'到3'的方向上包括以下核酸序列：SEQ IDNO:21、16、39、40、22、23和20，其中各核酸序列可被以下取代或编码以下：对应功能片段或其衍生物，或与其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％一致性的序列。
在某些实施例中，所述Ad辅助质粒包括与图5的任一构建体呈相同次序的结构。
在某些实施例中，所述Ad辅助质粒包括与SEQ ID NO:14具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。
在某些实施例中，所述Ad辅助质粒包括与SEQ ID NO:15具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。
在某些实施例中，所述异源核酸序列为编码肽、多肽或蛋白质的所关注异源基因。在某些实施例中，所述肽、所述多肽或所述蛋白质为酶、抗体、MHC分子、T细胞受体、B细胞受体、适配体、高亲和性多聚体、受体结合配位体、靶向肽、治疗剂或基因编辑分子。在某些实施例中，所述异源核酸序列为核酸序列，例如反义链、siRNA、shRNA、miRNA、EGS、gRNA、sgRNA、核糖核酸酶或适配体。
在另一方面中，本发明涉及一种宿主细胞，其包括本文中所描述的质粒系统中的任一种。
在另一方面中，本发明涉及一种rAAV，其通过本文中所描述的质粒系统中的任一种产生。
在另一方面中，本发明涉及一种允许通用载体滴定的DNA滴度标签，所述DNA滴度标签包括在含转基因质粒内的异源核酸序列的核酸序列上游或下游的长度为约60个核苷酸到约100个核苷酸的核酸标签序列，其中所述核酸标签序列可用于至少两种不同的含转基因质粒中以允许在至少两种不同类型的AAV载体之间进行通用载体基因组滴定。在某些实施例中，所述核酸标签序列长度为约100个核苷酸。
在某些实施例中，所述核酸标签序列在所述含转基因质粒的3'ITR序列上游，而非在所述含转基因质粒的表达盒内。
在某些实施例中，所述核酸标签序列在所述含转基因质粒的5'ITR序列下游，而非在所述含转基因质粒的表达盒内。
在某些实施例中，所述DNA滴度标签包括SEQ ID NO:61-70的核酸序列中的任一个。
在另一方面中，本发明涉及一种用于产生rAAV的方法，其包括用本文中所描述的质粒系统中的任一种转导细胞，以及分离rAAV。在另一方面中，本发明涉及一种rAAV，其通过所述方法产生。
在另一方面中，本发明涉及一种组合物，其包括本发明的质粒系统。
在另一方面中，本发明涉及一种药物组合物，其包括通过本发明的质粒系统产生的rAAV。
在另一方面中，本发明涉及一种用于将核酸序列递送或转移到个体的细胞中的方法，其包括向个体投予通过本发明的质粒系统产生的所述rAAV，由此将所述核酸序列递送到所述细胞中。在某些实施例中，所述个体的细胞在培养物中或存在于个体中。
在另一方面中，本发明涉及一种用于治疗或预防个体中的疾病或病症的方法，其包括向有需要的个体投予通过本发明的质粒系统产生的rAAV。
在另一方面中，本发明涉及一种宿主细胞，其包括使所述宿主细胞与通过本发明的质粒系统产生的rAAV接触。
在结合随附描述、权利要求书和图式来阅读以下说明书时，本发明的这些和其它目标、特征和优点将变得更显而易见。
附图说明
图1描绘根据本发明的一些实施例的用于产生rAAV的示范性三质粒系统。
图2描绘根据本发明的一些实施例的并入eGFP和SEAP作为转基因的用于rAAV产生的示范性含转基因质粒。
图3A到3B：展示用于单链(ss)(图3A)和自互补(sc)rAAV(图3B)产生的含转基因质粒的示范性基因构建体。
图4A到4B：图4A描绘根据本发明的一些实施例的并入不同AAV Rep和Cap基因的示范性AAV Rep-Cap质粒。图4B描绘并入来自AAV血清型2的启动子的示范性AAV Rep-Cap质粒。
图5描绘短(上部图)和长(下部图)实施例中的示范性Ad辅助质粒。
图6为展示来自根据本发明的质粒的不同AAV血清型的Cap蛋白质的表达水平的蛋白质印迹(Western blot)。
图7为展示来自根据本发明的质粒的不同AAV血清型的Cap蛋白质的表达水平的蛋白质印迹。将单克隆B1无性系用于印迹分析。
图8为展示来自根据本发明的质粒的不同AAV血清型的Cap蛋白质的AAV P5驱动表达水平的蛋白质印迹。-：不具有P5启动子的质粒构建体；+：具有P5启动子的质粒构建体。将单克隆B1无性系用于印迹分析。
图9展示使用根据本发明的短Ad辅助质粒的病毒基因组拷贝数的qPCR分析的结果。1：阴性对照1(pHelper+pAAV-RC2(Agilent))；2：阴性对照2(pHelper+pTRUF11)；3：阳性对照(pHelper+pAAV-RC2+pTRUF11)；4：短Ad辅助测试(短辅助(SEQ ID NO:14)+pAAV-RC2+pTRUF11)。
图10展示使用根据本发明的长Ad辅助质粒的病毒基因组拷贝数的qPCR分析的结果。1：阴性对照1(pTRUF11+pAAV-RC2(Rep2Cap2(Agilent))；2：阳性对照2(pHelper+pAAV-RC2+pTRUF11)；3：短Ad辅助测试(短辅助(SEQ ID NO:14)+pUC19-Rep2Cap8+pITRss(SEQ IDNO:1))；4：长Ad辅助测试(长辅助(SEQ ID NO:15)+pUC19-Rep2Cap8+pITRss(SEQ ID NO:1))。
图11展示使用用于rAAV产生的对应含转基因质粒产生的含有单链(上部图)或自互补(下部图)DNA基因组的rAAV的每毫升细胞裂解物的病毒基因组拷贝数。对于上部图：1：阴性对照(pHelper+AAV-RC2)；2：阳性对照(pHelper+pAAV-RC2+pTRUF11)；3：ssITR(pHelper+pAAV-RC2+ssITR)(SEQ ID NO:1)。对于下部图：1：阴性对照(pHelper+AAV-RC2)；2：阳性对照(pHelper+pAAV-RC2+pTRUF11)；3：scITR(pHelper+pAAV-RC2+scITR(SEQ IDNO:42)。
图12展示根据本发明的三质粒系统的多个衣壳血清型的每毫升细胞裂解物的病毒基因组拷贝数，以及阳性和阴性对照。1：阴性对照(pHelper+pTRUF11)；2：阳性对照(pHelper+pTRUF11+pAAV-RC2)；3：pHelper+pTRUF11+pUC19-P5-Rep2Cap2(SEQ ID NO:31)；4：pHelper+pTRUF11+pUC19-Rep2/5Cap5(SEQ ID NO:24)；5：pHelper+pTRUF11+pUC19-P5-Rep2Cap8(SEQ ID NO:35)；6：pHelper+pTRUF11+pUC19-P5-Rep2Cap9(SEQ ID NO:37)；7：短辅助(SEQ ID NO:14)+ssITR(SEQ ID NO:1)+pUC19-P5-Rep2Cap2(SEQ ID NO:31)；8：短辅助(SEQ ID NO:14)+ssITR(SEQ ID NO:1)+pUC19-Rep2/5Cap5(SEQ ID NO:24)；9：短辅助(SEQ ID NO:14)+ssITR(SEQ ID NO:1)+pUC19-P5-Rep2Cap8(SEQ ID NO:35)；10：短辅助(SEQ ID NO:14)+ssITR(SEQ ID NO:1)+pUC19-P5-Rep2Cap9(SEQ ID NO:37)；11：短辅助(SEQ ID NO:14)+ssITR(SEQ ID NO:1)+pAAV-RC2。
图13A到13B展示使用用于qPCR分析的SV40 polyA和长度为100核苷酸的DNA滴度标签两者的单链ITR(ssITR)转基因质粒(图13A)和自互补ITR(scITR)质粒的每毫升裂解物的病毒基因组拷贝数。
图14A到14B：图14A描绘根据本发明的一些实施例的并入不同AAV Rep和Cap基因的示范性AAV Rep-Cap质粒。图14B描绘根据本发明的一些实施例的并入不同AAV Rep和cap基因且并入P5启动子的示范性AAV Rep-Cap质粒。
图15：展示用于单链(ss)(图15A)和自互补(sc)rAAV(图15B)产生的含转基因质粒的示范性基因构建体。两个经修饰质粒含有具有较高可显影性的经改进质粒骨架。
图16：展示使用用于qPCR分析的长度为100核苷酸的DNA滴度标签的经修饰单链ITR(ssITR)转基因质粒(图16A)和经修饰自互补ITR(scITR)质粒的每毫升裂解物的病毒基因组拷贝数。
具体实施方式
如现有技术章节中所说明，在所属领域中存在对用以产生基于rAAV的基因治疗的rAAV产生的鉴别技术的较大需求。本发明满足此需求和其它需求。本发明的实施例大体上涉及rAAV产生，且更确切来说，涉及一种用以产生rAAV的基于三质粒的系统。
为促进对本发明的各种实施例的原理和特征的理解，下文解释各种说明性实施例。尽管详细解释本发明的示范性实施例，但应理解，涵盖其它实施例。因此，不希望本发明在其范围内限于以下描述或实例中阐述的构建的细节和组分的布置。本发明能够具有其它实施例，且能够以各种方式实践或实施。另外，在描述示范性实施例时，为了清楚起见，将采用特定术语。
希望各术语涵盖如由所属领域的熟练技术人员所理解的其最广泛含义，且包含以类似方式操作以实现类似目的的所有技术等效物。应理解，所公开技术的实施例可在无这些特定细节的情况下实践。在其它情况下，未详细展示熟知方法、结构和技术，以便不混淆对此说明书的理解。提及“一个实施例”、“一实施例”、“实例实施例”、“一些实施例”、“某些实施例”、“各种实施例等”指示如此描述的所公开技术的实施例可包括特定特征、结构或特性，而非各实施例必需包含特定特征、结构或特性。另外，重复使用短语“在一个实施例中”未必指同一实施例，但其可为同一实施例。
还必须指出，如在本说明书和所附权利要求书中所使用，除非上下文以其它方式清楚地指定，否则单数形式“一(a/an)”和“所述”包含复数种参考物。举例来说，提及一种组分也打算包含多种组分的组合物。提及含有“一种”成分的组合物打算包含除了指定成分的外的其它成分。换句话说，术语“一(a/an)”和“所述”不表示数量的限制，而表示存在所提项中的“至少一个”。
如本文中所使用，术语“和/或”可意指“和”，其可意指“或”，其可意指“非排他性或”，其可意指“一个”，其可意指“一些而非全部”，其可意指“两者皆不”，和/或其可意指“两者皆”。术语“或”打算意指包含性“或”。
范围可在本文中表述为“约”或“大约”或“大体上”一个特定值和/或到“约”或“大约”或“大体上”另一特定值。当表述这种范围时，其它示范性实施例包含一个特定值和/或到另一特定值。此外，术语“约”意指如由所属领域的一般技术人员所测定在特定值的可接受误差范围内，其将部分地视如何测量或测定所述值(即测量系统的限制)而定。举例来说，根据所属领域中的实践，“约”可意指在可接受标准差内。替代地，“约”可意指给定值的至多±20％，优选地至多±10％，更优选地至多±5％，且再更优选地至多±1％的范围。替代地，尤其相对于生物系统或方法，所述术语可意指在量值的一定数量级内，优选地在2倍内。在特定值描述于本申请案和权利要求书中的情况下，除非另外陈述，否则术语“约”为隐含的且在此上下文中意指在特定值的可接受误差范围内。
“包括”、“含有”或“包含”意指至少已指定的化合物、元素、粒子或方法步骤存在于组合物或制品或方法中，但不排除其它化合物、材料、粒子、方法步骤的存在，即使其它这些化合物、材料、粒子、方法步骤具有与所指定的相同的功能。
贯穿本说明书，各种组分可经鉴别具有特定值或参数，然而，这些项经提供作为示范性实施例。实际上，示范性实施例并不限制本发明的各种方面和概念，这是因为可实施许多相当的参数、大小、范围和/或值。术语“第一”、“第二”和其类似物、“主要”、“次要”和其类似物并不表示任何次序、数量或重要性，而用于区分一种要素与另一种要素。
应注意，如“特定地”、“优选地”、“典型地”、“通常”和“经常”的术语在本文中并不用于限制所主张公开内容的范围，或暗示某些特征对所主张公开内容的结构或功能为关键、基本或甚至至关重要的。实际上，这些术语仅打算强调可或可不用于本发明的一特定实施例中的替代性或额外特征。还应注意，如“大体上”和“约”的术语在本文中用于表示可归因于任何定量比较、值、测量或其它表示的不定性的固有程度。
本文所公开的尺寸和价不应理解为严格地限于所叙述的精确数值。实际上，除非另外说明，否则各此尺寸均打算意指所叙述值与围绕彼值的功能等效范围两者。举例来说，公开为“50mm”的尺寸打算意指“约50mm”。
还应理解，对一或多个方法步骤的提及不排除额外方法步骤或清楚确认的那些步骤之间的中间方法步骤的存在。类似地，还应理解，对组合物中的一或多种组分的提及不排除相较于经清楚鉴别的那些组分的额外组分的存在。
如本文中所使用，术语“个体(subject)”、“患者”、“个体(individual)”和“动物”在本文中互换使用，且是指哺乳动物，包含(但不限于)人类和兽医学动物(例如，猫、犬、奶牛、马、绵羊、猪等)以及实验动物模型。在一优选实施例中，个体为人类。
如本文中所使用，术语“基因疗法”包含向患者提供编码治疗性基因(例如，因子VIII/IX/X)的核酸以缓解、减轻或预防与疾病或病况相关的一或多种症状(例如，临床因素)的复发的任何治疗性方法。所述术语涵盖投予包括编码治疗性基因的核酸的任何化合物、药物、程序或方案以用于维持或改进患有疾病或病况的个体的健康状况，所述治疗性基因包含任何修饰形式的基因(例如，因子VIII/IX/X变异体)。所属领域的熟练技术人员将了解，可例如基于根据本发明获得的结果来改变基因疗法的过程或基因治疗剂的剂量。
如本文中所使用，应用于剂量或量的术语“治疗有效”是指在投予到个体以用于治疗(例如，预防或改善)病况、病症或病况时足以影响此治疗的化合物或药物组合物的数量。举例来说，适用于治疗血友病的药物的治疗有效量可为能够预防或减轻与血友病相关的一或多种症状的量。“治疗有效量”将视所投予的化合物或细菌或类似物以及疾病和其严重程度和待治疗的哺乳动物的年龄、体重、生理条件和反应性而变化。精确剂量将视治疗目的而定，且将可由所属领域的熟练技术人员使用已知技术来确定(参见例如利伯曼(Lieberman),药物剂型(Pharmaceutical Dosage Forms)(第1-3卷,1992)；劳埃德(Lloyd),药物混配的技术、科学及技艺(The Art,Science and Technology ofPharmaceutical Compounding)(1999)；皮卡(Pickar),剂量计算(Dosage Calculations)(1999)；和雷明顿：药学的科学与实践(Remington:The Science and Practice ofPharmacy),第20版,2003,根纳罗(Gennaro)编,利平科特，威廉姆斯和威尔金斯(Lippincott,Williams&Wilkins))。
如本文中所使用，术语“载体”是指用于将核酸(例如，编码基因疗法构建体)转移到宿主细胞中的任何媒介。在一些实施例中，载体包含复制子，其用于复制媒介以及目标核酸。在一些实施例中，载体为用于引入目标核酸(例如，编码治疗性基因或治疗性基因变异体的经密码子更改的多核苷酸)的病毒粒子。适用于基因疗法的许多经修饰真核病毒在所属领域中已知。举例来说，腺相关病毒(AAV)尤其良好适用于人类基因疗法中，这是因为人类为病毒的天然宿主，尚不知天然病毒促成任何疾病，且病毒引发轻度免疫反应。“重组AAV”(rAAV)和“AAV”贯穿本申请互换地使用。
术语“质粒”是指能够在给定细菌细胞中自主复制的染色体外环状DNA。示范性质粒包含(但不限于)衍生自以下的那些：pBR322、pUC、pUC19、pUC57、pJ241或pJ247、pBluescript、pREP4、pCEP4、pCI和p Poly(那热(Lathe)等人,基因(Gene)57(1987)，193-201)。质粒也可通过标准分子生物学技术(桑布鲁克(Sambrook)等人,实验室手册(Laboratory Manual),冷泉港实验室出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press),冷泉港(Cold Spring Harbor)(1989),纽约(N.Y.))进行工程改造。所述质粒也可包括选择基因以便选择或鉴别经转染细胞(例如，通过细胞营养缺陷型的互补或通过抗生素抗性)、稳定元件(例如，cer序列)或集成元件(例如，LTR病毒序列和转座子)。
如本文中所使用，术语“质粒骨架”是指典型地含有复制起点(例如，SEQ ID NO:20和26)和抗生素选择基因的DNA序列，所述复制起点和抗生素选择基因为仅通过适当质粒转化的宿主的特异性生长所必需。在某些实施例中，这些元件并不打算包装于rAAV衣壳中。
如本文中所使用，术语“基因”是指编码多肽链的DNA分子的片段(例如，编码区)。在一些实施例中，基因通过紧接在编码区之前、在编码区之后和/或插入编码区的区域定位，所述区域涉及产生多肽链(例如，调节元件，例如启动子、增强子、多腺苷酸化序列、5'-非翻译区、3'-非翻译区或内含子)。
如本文中所使用，术语“调节元件”是指在细胞中提供编码序列的表达的核酸序列，例如启动子、增强子、终止子、多腺苷酸化序列、内含子等。
如本文中所使用，术语“启动子元件”是指帮助控制编码序列的表达的核酸序列。通常，启动子元件位于基因的翻译起始位点的5'。然而，在某些实施例中，启动子元件可位于内含子序列内或编码序列的3'。在一些实施例中，适用于基因疗法的启动子衍生自目标蛋白质的天然基因。在一些实施例中，适用于基因疗法的启动子对目标生物体的特定细胞或组织中的表达具有特异性(例如，肝特异性启动子)(吴(Wu)Z等人,分子治疗(MolecularTherapy)16(2):280-9.崔(Choi)VW等人,分子治疗方法与临床发展(Molecular TherapyMethods&Clinical Development)2015.2:15022)，所述文献均出于所有预期目的以全文并入本文中。在又其它实施例中，多个充分表征的启动子元件中的一个用于本文中所描述的基因疗法中。充分表征的启动子元件的非限制性实例包括CMV早期启动子(例如，hCMVie(SEQ ID NO:4))、3-肌动蛋白启动子和甲基CpG结合蛋白质2(MeCP2)启动子。在一些实施例中，启动子为组成型启动子，其大体上驱动目标蛋白质的恒定表达。在其它实施例中，启动子为诱导型启动子，其响应于特定刺激(例如，暴露于特定治疗剂或药剂)而驱动目标蛋白质的表达。对于针对AAV介导的基因疗法设计启动子的综述，参见格雷(Gray)等人(人类基因治疗(Human Gene Therapy)22:1143-53(2011))，其内容出于所有目的明确地以全文引用的方式并入。
如本文中所使用，术语“转基因”广泛地指引入到动物的基因组中的任何核酸，包含(但不限于)具有可能通常不存在于基因组中的序列的基因或核酸、存在但通常不在给定基因组中转录和翻译(“表达”)的基因，或期望引入到基因组中的任何其它基因或核酸。这可包含可能通常存在于非转基因基因组中，但期望对其表达进行更改，或期望以非突变形式或经更改形式或变异体形式引入的基因。转基因可特异地靶向所定义基因位点，可随机集成于染色体内，或其可染色体外复制DNA。转基因可包含一或多个转录调节序列和可为所选核酸的最优选表达所必需的任何其它核酸，例如内含子。转基因长度可少至几个核苷酸，但长度优选为至少约50、100、150、200、250、300、350、400或500个核苷酸或甚至更长，且可为例如整个病毒基因组。转基因可为编码或非编码序列或其组合。转基因通常包括能够在适当条件下驱动一或多个转基因的表达的调节元件。
如本文中所使用，在涉及例如编码序列和/或控制序列的核酸序列时，术语“异源”表示通常不接合在一起和/或通常不与特定细胞缔合的序列。因此，“异源”核酸序列意指核酸序列来自除AAV以外的生物体或以合成方式衍生。在某些实施例中，异源核酸序列(例如，所关注异源基因)可编码多肽，例如(但不限于)凝血因子、酶、抗体或其它所关注多肽。在某些实施例中，异源核酸序列可编码具有结构或治疗性功能的RNA，例如(但不限于)反义链、siRNA、shRNA、miRNA、EGS、gRNA、sgRNA、核糖核酸酶或适配体。类似地，出于本发明的目的，通过通常不存在于细胞中的构建体转化的细胞将被视为异源的。
“可操作地连接”是指以实体方式连接以使得序列中的一个的功能受另一个影响的两个或更多个核酸序列元件的缔合。举例来说，如果两个序列经定位以使得调节DNA序列影响编码DNA序列的表达(即，编码序列或功能RNA在启动子的转录控制下)，那么据称调节DNA序列“可操作地连接到”编码RNA或多肽的DNA序列或“与”所述DNA序列“缔合”。编码序列可以正义或反义定向可操作地连接到调节序列。
如本文中所使用，术语“核酸”是指去氧核糖核苷酸或核糖核苷酸和其呈单链或双链形式的聚合物和其互补序列。术语涵盖含有合成的、天然存在的和非天然存在的已知核苷酸类似物或经修饰骨架残基或键的核酸，其具有与参考核酸类似的结合特性且其以与参考核苷酸类似的方式代谢。这些类似物的实例包含(但不限于)硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、膦酸甲酯、对掌性膦酸甲酯、2-O-甲基核糖核苷酸和肽核酸(PNA)。
术语“氨基酸”是指天然存在和非天然的氨基酸，包含以类似于天然存在的氨基酸的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸包含由基因密码编码的那些氨基酸，以及随后经修饰的那些氨基酸，例如羟基脯氨酸、y-羧基谷氨酸和O-磷丝氨酸。天然存在的氨基酸可包含例如D-氨基酸和L-氨基酸。本文中所使用的氨基酸还可包含非天然氨基酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构(即，与氢、羧基、氨基和R基团结合的任何碳)的化合物，例如高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亚砜或甲硫氨酸甲基锍。这些类似物具有经修饰R基团(例如，正亮氨酸)或经修饰肽骨架，但保持与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸模拟物是指结构不同于氨基酸的一般化学结构，但以类似于天然存在的氨基酸的方式起作用的化学化合物。氨基酸在本文中可由其通常已知的三字母符号或由IUPAC-IUB生物化学命名委员会(BiochemicalNomenclature Commission)所推荐的单字母符号来提及。同样，核苷酸可由其通常已接受的单字母代码来提及。
如本文中所使用，术语“衍生物”是指相较于对应全长野生型核酸、肽或蛋白质，包括一或多个突变和/或化学修饰的核酸、肽或蛋白质或其变异体或类似物。涉及核酸的化学修饰的非限制性实例包含例如对碱基部分、糖部分、磷酸酯部分、磷酸酯-糖骨架或其组合的修饰。
编码可能适用于本文中所描述的质粒系统的突变体基因构建体的核酸序列可与野生型(即，未突变)序列一致，或可为不同编码序列，由于基因密码的冗余或简并，所述序列编码与野生型编码序列相同的多肽。所属领域的一般技术人员将认识到，核酸中的各密码子(除通常为甲硫氨酸的唯一密码子的AUG和通常为色氨酸的唯一密码子的TGG以外)可经修饰以产生功能上一致的分子。因此，编码相同多肽的核酸的各变型就表达产物来说在各所描述序列中为隐含的，但就实际基因疗法构建体来说并非如此。
关于氨基酸序列，所属领域的一般技术人员将认识到，更改、添加或删除编码序列中的单个氨基酸或较小百分比的氨基酸的核酸或肽序列的个别取代、删除或添加为“经保守修饰的变异体”，其中所述更改引起氨基酸经化学上类似的氨基酸取代。提供功能上类似的氨基酸的保守取代表在所属领域中为熟知的。这些经保守修饰的变异体另外为且不排除本发明的多晶型变异体、种间同源物和对偶基因。提供功能上类似的氨基酸的保守氨基酸取代在所属领域中为熟知的。视特定氨基酸(例如，催化、结构或空间重要氨基酸)的功能性而定，可将氨基酸的不同分组视为对彼此的保守取代。
在两个或更多个核酸或肽序列的情形下，术语“一致”或“一致性”百分比(％)是指相同或具有指定百分比的相同氨基酸残基或核苷酸(即，当针对最大对应性在比较窗口或指定区域上进行比较时，在指定区域上的约60％一致性，优选65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高一致性)的两个或更多个序列或子序列，如使用具有下文描述的默认参数的BLAST或BLAST 2.0序列比较算法或通过人工比对和目视检查所测量。
如所属领域中所已知，若干不同程序可用于鉴别蛋白质(或如下文所论述的核酸)是否与已知序列具有序列一致性或相似性。使用所属领域中已知的标准技术，优选使用默认设定或通过检查来测定序列一致性和/或相似性，所述标准技术包含(但不限于)：史密斯(Smith)和沃特曼(Waterman),应用数学进展(Adv.Appl.Math.),2:482(1981)的局部序列一致性算法；尼德曼(Needleman)和温施(Wunsch),分子生物学杂志(J.Mol.Biol.),48:443(1970)的序列一致性比对算法；皮尔森(Pearson)和利普曼(Lipman),美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.),85:2444(1988)的相似性方法的检索；这些算法的计算机化实施方案(威斯康星州麦迪逊市科学大道575号(575Science Drive,Madison,Wis)遗传学计算机小组(Genetics Computer Group)的威斯康星州遗传学软件包(WisconsinGenetics Software Package)中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA)；由德弗罗(Devereux)等人,核酸研究(Nucl.Acid Res.),12:387-395(1984)所描述的Best Fit序列程序。优选地，通过FastDB基于以下参数计算一致性百分比：错配罚分1；空隙罚分1；空隙大小罚分0.33；和接合罚分30，“序列比较和分析的当前方法(Current Methods in Sequence Comparisonand Analysis)”、高分子测序与合成，选择方法与应用(MacromoleculeSequencing andSynthesis,Selected Methods and Applications),第127-149页(1988),艾伦R.利斯公司(Alan R.Liss,Inc)，以上所有者以引用的方式并入。
根据本发明，可在所属领域内采用常规分子生物学、微生物学和重组DNA技术。这些技术在文献中充分解释。参见例如桑布鲁克,弗里奇(Fritsch)和曼尼阿提斯(Maniatis),分子克隆：实验室手册(Molecular Cloning:A Laboratory Manual),第二版(1989)冷泉港实验室出版社,冷泉港,纽约(本文中“桑布鲁克等人,1989”)；DNA克隆：一种实用的方法(DNA Cloning:A Practical Approach),第I卷和第II卷(D.N.格洛弗(Glover)编.1985)；寡核苷酸合成(Oligonucleotide Synthesis)(M.J.盖特(Gait)编.1984)；核酸杂交(Nucleic Acid Hybridization)(B.D.海姆斯(Hames)和S.J.希金斯(Higgins)编.(1985))；转录和翻译(Transcription and Translation)(B.D.海姆斯和S.J.希金斯编(1984))；动物细胞培养(Animal Cell Culture)(R.I.弗雷谢尼(Freshney)编.(1986))；固定化细胞和酶(Immobilized Cells and Enzymes)(IRL出版社(IRL Press),(1986))；B.珀巴尔(Perbal),分子克隆实用指南(A Practical Guide To Molecular Cloning)(1984)；F.M.奥苏贝尔(Ausubel)等人(编),分子生物学协议(Protocols in Molecular Biology),约翰·威利父子公司(John Wiley&Sons,Inc.)(1994)；等。
本发明的质粒系统
在一个方面中，本发明提供一种三质粒系统，其用于工程改造且产生重组腺相关病毒载体(rAAV)。在某些实施例中，三个质粒骨架均相同。在某些实施例中，三个质粒骨架中的至少一个不同。在某些实施例中，所有三个质粒骨架不同。在某些实施例中，所有三个质粒骨架不同以防止可能引起完整AAV基因组的重构的重组出现。在某些实施例中，三个质粒包括基于例如(而不限于)pUC19、pBR322、pUC57、pJ241或pJ247的质粒骨架。在某些实施例中，三个质粒包括基于pUC19、pJ241和pJ247的质粒骨架。
在某些实施例中，一个质粒充当用于rAAV产生构建体的含转基因质粒，第二质粒充当AAV Rep-Cap构建体，且第三质粒充当腺病毒(Ad)辅助构建体。各类型的示范性质粒展示于图1中。
用于rAAV产生的含转基因质粒
用于rAAV产生的含转基因质粒经工程改造以携载所关注的至少一种异源核酸序列(例如，反义RNA分子、shRNA、miRNA、核糖核酸酶或编码所关注多肽的基因)，其中AAV基因组的内部部分经表达盒内的所关注异源核酸序列置换。如本文中所使用，“表达盒”意指能够导引特定异源核酸序列在适当宿主细胞(例如，哺乳动物)中的表达的核酸序列，其可包含可操作地连接到所关注核酸序列的启动子，所述所关注核酸序列可操作地连接到终止信号。包含所关注异源核酸序列的表达盒可为嵌合的。表达盒也可为天然存在但已以适用于异源表达的重组形式获得的表达盒。
在某些实施例中，含转基因质粒不包括抗生素抗性基因。在某些实施例中，含转基因质粒不包括胺苄青霉素(ampicillin)抗性基因(例如，SEQ ID NO:71和73)。虽然抗生素抗性基因常用作用于质粒产生的选择标记物，但包含抗生素抗性基因(例如，胺苄青霉素抗性基因)可能引起安全性问题。举例来说，可存在水平基因到患者的细菌的转移，此将在所述基因不存在于质粒中的情况下得以防止。避免使用涉及具有重要临床用途的抗生素的抗生素选择标记物以便避免使抗生素抗性特质散布到环境微生物(例如，胺苄青霉素)的不必要风险是尤其重要的。也应避免使用造成患者的重大超敏反应的抗生素的抗生素抗性基因，这是因为在药物组合物中可能存在残余抗生素(例如，青霉素和其它β-内酰胺抗生素)。
根据本发明的示范性含转基因质粒展示于图2、3A、3B、15A和15B以及SEQ ID NO:1、42、71和73或与SEQ ID NO:1、42、71和73具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的质粒中。图2、3A、3B、15A和15B提供本发明的含转基因质粒的元件的次序的一实例。
根据SEQ ID NO:71和73的含转基因质粒为有利的，这是因为其去除胺苄青霉素抗性基因的所有痕迹，且还包含充当额外填充序列的失活庆大霉素抗性基因(例如，去除来自开读框的起始密码子)。
使用已知技术来构建含转基因质粒以至少提供在转录的方向上的操作性连接组分、包含转录起始区、所关注DNA和转录终止区的控制元件。控制元件经选择以在哺乳动物细胞中起作用。含有操作性连接组分的所得构建体侧接(5'和3')有功能AAV反向末端重复序列(ITR)序列。质粒中还可包含例如多腺苷酸化位点的终止信号。
ITR已经展示为用于包装所需的唯一顺式元件，从而允许完全清除病毒基因以形成rAAV。尽管由于ITR内的D序列的存在，滚环DNA复制机制主要扩增(即，复制)由ITR侧接的转基因表达盒DNA序列，但由于侧接D序列域的缺失，即使在较低频率下，质粒DNA骨架(例如，复制起点、抗生素抗性基因表达盒等)也可包装到载体衣壳中。在包装大小相似于或小于野生型病毒基因组(约4.7千碱基)的基因组时，AAV为高效的。可通过将骨架的大小增加到不利于使骨架包装到衣壳中的程度来阻止质粒骨架的包装。骨架的扩大可通过额外“填充”序列(即，填充组分)来实现，从而使得质粒骨架大小大于野生型AAV基因组。在不希望受理论束缚的情况下，表明经扩大质粒骨架的存在可能降低rAAV将质粒骨架包装到载体衣壳中的概率。在一些实施例中，通过使用填充序列来形成经扩大质粒骨架。
在某些实施例中，就生物活性来说，填充序列为静默的，因为其不含增强子、启动子、剪接调节子、非编码RNA、反义序列和/或编码序列中的至少一个。在某些实施例中，增强子、启动子、剪接调节子、非编码RNA、反义序列和编码序列中的每一个均缺失。
在某些实施例中，填充序列包括发现于人类基因组中的惰性内含子DNA序列。通过利用来自人类基因组的DNA序列，在将质粒包装到衣壳中的情况下，填充序列将诱发免疫反应的概率较低。填充序列不包含开读框也为至关重要的。
填充序列应足够大以使质粒骨架的大小大于rAAV的最优选包装大小，使得不将质粒骨架包装到载体衣壳中。填充序列可由至少10个、至少20个、至少30个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个、至少90个、至少100个、至少200个、至少300个、至少400个、至少500个、至少600个、至少700个、至少800个、至少900个、至少1000个、至少2000个、至少3000个、至少4000个、至少5000个、至少6000个、至少7000个、至少8000个、至少9000个或至少10000个核苷酸组成。在某些实施例中，填充序列包括长度在1000与5000个核苷酸之间的核酸。在某些实施例中，填充序列包括长度在1000与2000个核苷酸之间的核酸。在某些实施例中，填充序列包括长度在800与1500个核苷酸之间的核酸。在某些实施例中，填充序列包括长度在800与1000个核苷酸之间的核酸。
在一优选实施例中，填充序列包括人类GAPDH内含子2(NG007073.2)。在不希望受理论束缚的情况下，使用人类GAPDH内含子2具有较低免疫原性，这是因为所述人类GAPDH内含子2已存在于人类基因组中且因此在其经偶然包装时不应诱发免疫反应。GAPDH内含子2理想的作为填充序列，这是因为其为单一的天然存在的序列。不需要包含任何额外核苷酸或将超过一个序列连接在一起，此将导致DNA序列的非天然支持。
在某些实施例中，填充序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQ IDNO:9或其片段具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，填充序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ IDNO:9或其片段。
在某些实施例中，填充序列包括失活庆大霉素基因。在某些实施例中，庆大霉素基因经修饰以使其不表达。举例来说，可去除起始密码子。
在某些实施例中，填充序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQ IDNO:72或其片段具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，填充序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ IDNO:72或其非功能性片段。
含转基因质粒可使用来自各种AAV血清型中的任一个的ITR来构建。这些ITR碱基配对以允许合成互补DNA链。ITR保持在这些质粒中的功能性以允许复制且包装含有所关注异源核酸序列的rAAV。AAV质粒的末端重复序列内的突变在产生功能AAV载体方面良好耐受。参见例如萨穆尔斯基(Samulski)等人,1983；穆自卡(Muzyczka)等人,1984；和美国专利第9,163,259号，所述美国专利出于所有目的全文并入本文中。即使具有两个ITR中的一个的质粒缺失，AAV序列可经挽救、复制且产生感染性病毒体，只要构建体中的现有ITR含有完整AAV ITR序列即可。
AAV ITR区的核酸序列为已知的。ITR无需具有野生型核酸序列，但可例如通过核苷酸的插入、缺失或取代而更改。另外，AAV ITR可衍生自若干AAV血清型中的任一种，包含(而不限于)AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11，或其嵌合体。此外，侧接AAV载体中的所选核酸序列的5'和3'ITR无需一致或衍生自相同AAV血清型或分离物，只要其如预期那般起作用，即允许切除且挽救来自宿主细胞基因组的所关注序列。尽管SEQ ID NO:2和43用作此文件中所描述的rAAV的5'ITR序列的一实例，但预期携载末端分解位点的任何5'ITR序列将产生具有相同功能性的载体。同样，尽管SEQ ID NO:3用作此文件中所描述的rAAV的3'ITR序列的一实例，但预期携载末端分解位点的任何3'ITR序列将产生具有相同功能性的载体。
在某些实施例中，5'ITR序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQID NO:2或SEQ ID NO 43或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，5'ITR包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:2或SEQ ID NO 43或其功能片段或衍生物。
在某些实施例中，3'ITR序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQID NO:3或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，3'ITR包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:3或其功能片段或衍生物。
在某些实施例中，包括如上文所描述的填充序列的含转基因质粒可操作地连接到表达盒。
在某些实施例中，表达盒包括启动子。在某些实施例中，至少一种异源核酸序列(例如，所关注异源基因)可操作地连接到Pol II启动子(构成性、细胞特异性或诱导性)，使得异源核酸序列能够在适当或所要条件下在患者的目标细胞中表达。构成性、细胞特异性和诱导性启动子的众多实例为所属领域中已知的，且技术人员可易于针对特定预期用途来选择启动子，例如针对肌肉细胞特异性表达来选择肌肉特异性骨骼α-肌动蛋白启动子或肌肉特异性肌酸激酶启动子/增强子，针对较强的连续或接近连续表达水平(例如，hCMVie(SEQ ID NO:4))来选择构成性CMV启动子，或针对诱导表达来选择诱导性蜕皮激素启动子。诱导表达允许所属领域的熟练技术人员控制所合成的蛋白质的量。以此方式，有可能改变治疗性产物的浓度。熟知诱导性启动子的其它实例为：类固醇启动子(例如，雌性激素和雄性激素启动子)和金属硫蛋白启动子。在某些实施例中，启动子为pol III启动子。在某些实施例中，启动子为U6启动子。在某些实施例中，启动子为H1启动子。在某些实施例中，基因表达盒不具有启动子。
在某些实施例中，含转基因质粒为多顺反子，即携载超过一个基因。与将针对所表达的各基因形成唯一mRNA转录本的启动子不同，多顺反子质粒同时表达来自相同mRNA的两个或更多个单独蛋白质。在这些情况下，多个基因通过允许对各基因进行单独翻译的元件(例如，内部核糖体进入位点(IRES)或2A肽)分离。
尽管SEQ ID NO:6用作此文件中所描述的rAAV的IRES序列的一实例，但预期携载末端分解位点的任何5'ITR序列将产生具有相同功能性的载体。
IRES通过充当另一核糖体募集位点来允许从mRNA的内部区域开始翻译。在某些实施例中，IRES序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQ ID NO:6或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，IRES包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:6或其功能片段或衍生物。
在某些实施例中，含转基因质粒编码2A肽。形成2A肽(参见下表1中的非限制性实例)以克服IRES元件的一些缺点。特定而言，2A肽“自裂解”，这是因为这些肽被认为通过使核糖体跳过在2A元件的C端处的肽键的合成来起作用，从而在2A序列的末端与下一肽下游之间产生分离。“裂解”在发现于C端上的甘氨酸残基与脯氨酸残基之间发生，意指上游顺反子将具有添加到末端的少量额外残基，而下游顺反子将以脯氨酸开始。2A裂解在真核细胞中较普遍，且一些科学家报道接近100％裂解。特异性2A肽的选择将最终视例如细胞类型或实验条件的若干因素而定，所属领域的一般技术人员将理解选择哪一个。
表1四种常见2A肽的实例。
肽 氨基酸序列*
T2A： (GSG)E G R G S L L T C G D V E E N P G P(SEQ ID NO:74)
P2A： (GSG)A T N F S L L K Q A G D V E E N P G P(SEQ ID NO:75)
E2A： (GSG)Q C T N Y A L L K L A G D V E S N P G P(SEQ ID NO:76)
F2A： (GSG)V K Q T L N F D L L K L A G D V E S N P G P(SEQ ID NO:77)
*可将(GSG)残基添加到肽的5'末端以改进裂解效率。
在一实施例中，质粒包括来自AAV的5'和3'ITR，其中ITR包围至少一个基因。在某些实施例中，填充序列定位于3'ITR的下游。在某些实施例中，填充序列在5'ITR的上游。ITR可来自AAV血清型AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10和/或AAV11，或其嵌合体。在某些实施例中，ITR来自AAV血清型AAV2和/或AAV5。在某些实施例中，ITR可为SEQ ID NO:2、3或43或其功能片段或衍生物。在一些实施例中，基因为报道基因，例如(且不限于)eGFP(例如，SEQ ID NO:5)和/或SEAP(例如，SEQ ID NO:7)。在一些实施例中，填充序列为GAPDH内含子2或其片段或变异体。在一些实施例中，填充序列为SEQ ID NO:9或其片段。供用于质粒中以产生ssAAV(图3A)和scAAV(图3B)rAAV的示范性基因构建体展示于图3中。
Rep-Cap质粒
第二质粒包括AAV复制(Rep)和衣壳(Cap)基因序列。AAV Rep-Cap质粒包含主要AAV基因开读框(open reading frame；ORF)Rep基因和Cap基因两者。已展示Rep蛋白质具有许多功能，尤其包含：DNA复制的AAV起点的识别、结合和切断；DNA解旋酶活性；和对AAV(或其它异源)启动子的转录的调节。Cap蛋白质提供必要包装功能且组装到病毒衣壳壳体中。AAV辅助功能在本文中用于补充从AAV载体缺失的反式AAV功能。Rep和Cap基因经翻译以产生多种不同蛋白质(AAV生命周期所需的Rep78、Rep68、Rep52、Rep40；VP1、VP2、VP3-衣壳蛋白质)。Rep和/或Cap基因可衍生自AAV血清型AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10和/或AAV11，或其嵌合体。在某些实施例中，AAV Rep和/或Cap基因编码经基因工程改造的AAV和/或经化学修饰的AAV。参见例如突变为较小免疫原性的AAV病毒体，例如U.S.7,259,151中所叙述的那些，其出于所有预期目的以引用的方式并入本文中。可基于AAV血清型的向性来选择AAV血清型的选择。下表2提供最广泛使用的AAV血清型的向性的实例(而非限制)。AAV的向性也可经由假型化(即，将衣壳与来自不同病毒血清型的ITR的基因组混合)修饰。这些血清型使用斜线表示，使得AAV2/5指示含有携载包装于来自血清型5的衣壳中的血清型2的ITR的基因组的病毒。使用这些假型化病毒可改进转导效率，以及改变向性。举例来说，不通过AAV2有效转导的神经元，可使用在大脑中更广泛分布且经展示具有经改进转导效率的AAV2/5。也可使用衍生自多种不同血清型的杂交衣壳，所述杂交衣壳也更改病毒向性。举例来说，相较于任何野生型血清型，含有衍生自八种血清型的杂交衣壳的AAV-DJ显示更高的活体外转导效率；在活体内，其在广泛范围的细胞类型内显示极高感染力。突变体AAV-DJ8显示AAV-DJ的特性，但具有增强的大脑摄取。已描述若干AAV辅助质粒，例如编码Rep和Cap基因表达产物两者的常用质粒pAAV/Ad和pIM29+45。参见例如萨穆尔斯基等人(1989)病毒学杂志(J.Virol.)63:3822-3828；和麦卡蒂(McCarty)等人(1991)病毒学杂志65:2936-2945和美国专利第5,139,941号；第6,001,650号；第6,376,237号；第7,259,151号，其中的每一个出于所有目的各自以全文引用的方式并入本文中。
表2AAV血清型的组织向性
Figure BDA0003028213640000211
Figure BDA0003028213640000221
根据本发明的一示范性Rep-Cap质粒展示于以下中：图4A、4B、14A和14B；和SEQ IDNO:24、31、33、35、37、41、59和60，或与SEQ ID NO:24、31、33、35、37、41、59或60具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的质粒。图4A、4B、14A和14B提供本发明的AAV Rep-Cap质粒的质粒中的元件的次序的实例。
在某些实施例中，Rep基因可衍生自AAV血清型AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10和/或AAV11，或其嵌合体。在某些实施例中，AAV Rep基因为经基因工程改造的AAV和/或经化学修饰的AAV。在某些实施例中，Rep基因包含来自AAV血清型2(Rep2)和/或Rep5的基因，其包含嵌合体(例如，AAV Rep2/5)。
在某些实施例中，Cap基因可衍生自AAV血清型AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10和/或AAV11，或其嵌合体。在某些实施例中，AAV Cap基因为经基因工程改造的AAV和/或经化学修饰的AAV。在前述实施例中的任一个中，Cap基因可来自与Rep基因相同的AAV血清型或与Rep基因不同的AAV血清型。在前述实施例中的任一个中，质粒进一步包括来自AAV血清型2、5、8和/或9(分别为Cap2、Cap5、Cap8和Cap9)中的任一个的Cap基因，包含包括来自那些血清型的Cap蛋白质的混合物的嵌合蛋白质。
在某些实施例中，Rep-Cap质粒包含(但不限于)来自AAV血清型2且作为从超过1种血清型合并的嵌合Rep蛋白质(例如，Rep2/5)的Rep基因序列，和来自包含AAV2、AAV5、AAV8和/或AAV9的任何AAV衣壳血清型的衣壳基因序列。
在某些实施例中，Rep基因序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQID NO:11、12、28或30或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，Rep基因序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:11、12、28或30或其功能片段或衍生物。
在某些实施例中，Cap基因序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQID NO:13、29、32或36或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，Cap基因序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:13、29、32或36或其功能片段或衍生物。
在某些实施例中，启动子序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQID NO:34或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，启动子序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:34或其功能片段或衍生物。
在一实施例中，Rep-Cap质粒进一步包括用以控制本文中所描述的AAV Rep和Cap蛋白质的表达的AAV启动子。所述启动子可为通过已知考虑因素选择的任何所要启动子，所述已知考虑因素例如功能性连接到启动子的核酸的表达水平和将使用载体的细胞类型。即，启动子可为组织/细胞特异性的。启动子可为原核、真核、真菌、核、线粒体、病毒或植物启动子。启动子对通过载体转导的细胞类型可为外源或内源的。启动子可包含例如细菌启动子；已知的较强启动子，例如SV40或诱导性金属硫蛋白启动子；或AAV启动子，例如AAV P5启动子。另外，可利用用于靶向基因表达的嵌合调节启动子。所属领域中所已知的这些调节系统的实例包含基于四环素的调节系统，其利用tet反式活化蛋白质(tTA)，一种含有融合于大肠杆菌的tet抑制剂的VPl 6活化域的嵌合蛋白质；基于EPTG的调节系统；基于CID的调节系统；和基于蜕皮激素的调节系统。其它启动子包含衍生自肌动蛋白基因、免疫球蛋白基因、巨细胞病毒(CMV)(例如，hCMVie(SEQ ID NO:4))、腺病毒、牛乳头瘤病毒的启动子；腺病毒启动子，例如腺病毒主要晚期启动子、诱导性热休克启动子、呼吸道融合病毒、劳氏肉瘤病毒(Rous sarcomas virus；RSV)等。所述启动子可为AAV血清型中的任一种的启动子，且可为pl9启动子或p40启动子。在某些实施例中，启动子可为AAV2 P5启动子或AAV5 P5启动子或AAV P5启动子。此外，保持启动子活性的P5启动子的小片段可易于通过标准程序来测定，包含例如在P5启动子中构建一系列缺失，将缺失连接到报道基因，以及确定报道基因是否被表达，即被转录和/或被翻译。潜在启动子的实例可发现于WO2005017101中，其出于所有预期目的以引用的方式并入本文中。在某些实施例中，AAV启动子来自AAV血清型2。包括AAV2启动子P5的示范性P5-Rep-Cap质粒展示于图4B和14B中和SEQ ID NO:34中。
用于Rep-Cap质粒的适合质粒骨架包含但不限于：pHLP19、pUC18、pUC19和pAAV-RC2，还参见美国专利第6,001,650号和第6,156,303号中所描述的质粒骨架，所述两个美国专利的全部内容出于所有目的以引用的方式并入本文中。在某些实施例中，Rep-Cap质粒骨架为pUC19。
Ad辅助质粒
在一实施例中，Ad辅助质粒包括腺病毒基因，所述腺病毒基因包含(但不限于)Ad2和/或Ad5。在一实施例中，Ad辅助质粒包括Ad5基因。因为Ad5对rAAV为高效辅助病毒，故使用Ad5基因序列。众所周知，腺病毒基因的完全互补不为辅助功能所需的。实际上，更期望不具有完全互补。举例来说，不能够进行DNA复制和后期基因合成的腺病毒突变体已经展示为容许AAV复制。伊托(Ito)等人,(1970)普通病毒学杂志(J.Gen.Virol.)9:243；石桥(Ishibashi)等人,(1971)病毒学(Virology)45:317。因此，Ad辅助质粒被设计成具有最小大小，以仅携载rAAV产生所需的Ad基因且充当减小质粒大小的构建体。已显示，在E1区中有缺陷或具有缺失E4区的腺病毒不能支持AAV复制。因此，E1A和/或E4区有可能直接或间接地为AAV复制所需的。劳克林(Laughlin)等人,(1982)病毒学杂志41:868；贾尼克(Janik)等人,(1981)美国国家科学院院刊78:1925；卡特(Carter)等人,(1983)病毒学126:505。其它经表征Ad突变体包含：E1B(劳克林等人(1982),见上文；贾尼克等人(1981),见上文；奥斯特罗夫(Ostrove)等人,(1980)病毒学104:502)；E2A(半田(Handa)等人,(1975)普通病毒学杂志29:239；施特劳斯(Strauss)等人,(1976)病毒学杂志17:140；迈尔斯(Myers)等人,(1980)病毒学杂志35:665；杰伊(Jay)等人,(1981)美国国家科学院院刊78：2927；迈尔斯等人,(1981)生物化学杂志(J.Biol.Chem.)256:567)；E2B(卡特,腺相关病毒辅助功能(Adeno-Associated Virus Helper Functions),在I CRC细小病毒手册(I CRC Handbookof Parvoviruses)(P.蒂森(Tijssen)编,1990)中)；E3(卡特等人(1983),见上文)；和E4(卡特等人(1983),见上文；卡特(1995))。虽然对由在E1B编码区中具有突变的腺病毒提供的辅助功能的研究已产生冲突结果，但萨穆尔斯基等人,(1988)病毒学杂志62:206-210最近报道E1B55k为AAV病毒体产生所需的，而E1B19k则不为所需的。另外，国际公开WO 97/17458和松下(Matshushita)等人,(1998)基因治疗(Gene Therapy)5:938-945描述编码各种Ad基因的辅助蛋白质。尤佳的辅助功能质粒包括腺病毒VA RNA编码区、腺病毒E4 ORF6编码区、腺病毒E2A 72kD编码区、腺病毒E1A编码区和缺乏完整E1B55k编码区的腺病毒E1B区。这些质粒的实例描述于国际公开第WO 01/83797号中。在此段落中所叙述的各参考物出于所有目的以全文引用的方式并入本文中。
根据本发明的示范性Ad辅助质粒展示于图5和SEQ ID NO:14和15，或与SEQ IDNO:14和15具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的质粒中。图5提供本发明的Ad辅助质粒的质粒中的元件的次序的实例。
在某些实施例中，Ad辅助质粒可包含(而不限于)E2a、E4(orf6)、VA1 RNA基因和小病毒VP衣壳基因单元的腺病毒基因序列。在某些实施例中，Ad辅助质粒可包含VA、E4和E2A基因。因为对有多少质粒可有效转染到细胞以用于rAAV产生存在限制，故具有携载这些Ad基因的减小大小的质粒可有助于增加用于转染的所有三个质粒的摩尔含量，因此增加产生更高产量rAAV的概率。
在一实施例中，Ad辅助质粒包括E2A；E4 ORF 1、2、3、4和6/7；以及VA(“短Ad辅助质粒”)。示范性短Ad辅助质粒展示于图5的上部图中。此处所描述的短质粒用以在转染的步骤期间减小“质粒负载”，使得所有三个质粒的总质粒拷贝数可增加以得到更高数目的质粒模板以用于rAAV产生的基因表达和复制。减小的质粒负载出人意料地适用于较大批次。此可能不为小型研究规模生产中的关键参数，但可在按比例扩大时更为关键。此示范性短Ad辅助质粒为大约12kb。在另一实施例中，Ad辅助质粒包括E2A；E4 ORF 1、2、3、4和6/7；以及VA，以及编码蛋白酶和纤维的基因和启动子pVIII(“长Ad辅助质粒”)。一示范性长Ad辅助质粒展示于图5的下部图中。此示范性长Ad辅助质粒为大约18kb。
短构建体与长构建体之间的差异展示于图5中。三个必需基因元件的定向不同。长型式携载来自腺病毒基因组的额外元件，所述腺病毒基因组可具有影响rAAV产生的功能。短型式含有已知能够支持rAAV产生的最小基因序列。
在某些实施例中，VA序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQ IDNO:16或48到50或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，VA序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:16或48到50，或其功能片段或衍生物。
在某些实施例中，E4序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQ IDNO:17、40、47或55-58或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，E4序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:17、40、47或55到58，或其功能片段或衍生物。
在某些实施例中，E2A序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：与SEQ IDNO:18、39、46或51或其功能片段或衍生物具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。在某些实施例中，E2A序列包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：SEQ ID NO:18、39、46或51，或其功能片段或衍生物。
用于Ad辅助质粒的适合质粒包含(但不限于)pJ241，还参见美国专利第6,001,650号和第6,156,303号中所描述的质粒，所述两个美国专利的全部内容以引用的方式并入本文中。在某些实施例中，Ad辅助质粒骨架为pUC57。
额外基因
在另一实施例中，所有三个质粒含有选择标记物。选择标记物的一实例包含(但不限于)阳性选择标记物，例如包含(但不限于)以下的抗性基因：G418(具有neor)、嘌呤霉素(puromycin)(具有puror)、潮霉素B(hygromycin B)(具有hygr)、杀稻瘟菌素S(blasticidin S)(与bsrr)、霉酚酸和6-硫基(鸟嘌呤)(具有gpt)和更昔洛韦(gancyclovir)或1(2'-去氧-2'-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-碘尿嘧啶(FIAU)(具有HSV-tk)、庆大霉素和/或卡那霉素(kanamycin)(具有kanr)。在另一实施例中，所有三个质粒上的药物选择标记物为卡那霉素。在某些实施例中，卡那霉素基因包括以下或由以下组成：SEQ ID NO:19或25，或其功能片段或衍生物。在某些实施例中，庆大霉素基因包括以下或由以下组成：SEQ ID NO:44或72，或其功能片段或衍生物。
在一实施例中，三个质粒中的一或多个携载一或多个报道基因。若干报道基因为所属领域中已知的且一些为可商购的(参见阿拉姆(Alam)和库克(Cook)，见上文)。报道基因可插入尤其适于生物体和分子生物学操纵的质粒内。所关注启动子可插入到克隆位点中以使得报道基因的表达在启动子的控制下(参见罗森塔尔(Rosenthal),N.,酶学方法(Methods Enzymol.)152:704-720(1987)；和肖(Shiau),A.和史密斯,J.M.,基因67:295-299(1988))。使用已知方法来将这些质粒引入到细胞类型或整个生物体中(见桑布鲁克等人,分子生物学，实验室手册(Molecular Biology,A Laboratory Manual),冷泉港实验室出版社(1989)；和诺兰Nolan,分子克隆(In:Molecular Cloning),冷泉港实验室出版社,(1989))。报道基因的实例包含(但不限于)β-半乳糖(LacZ)、萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶、长腹水蚤荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶(CAT)、分泌性胚胎碱性磷酸酶(SEAP)、强化型蓝荧光蛋白(CFP)、绿色荧光蛋白(GFP)、增强型GFP(eGFP)、黄色荧光蛋白(YFP)、增强型YFP(eYFP)、蓝色荧光蛋(BFP)、增强型BFP(eBFP)、来自香菇珊瑚(Discosoma coral)(DsRed)的红色荧光蛋白，及/或MmGFP(泽米卡-高兹(Zemicka-Goetz)等人(1997)发展(Development)124：1133-1137)或所属领域的一般技术人员所熟悉的其它报道基因。在另一实施例中，三个质粒中的一或多个携载包括eGFP和SEAP二者的报道构建体，其中内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site；IRES)定位于eGFP与SEAP之间。在此实施例中，定位于胞核中的eGFP可用于确定rAAV的载体转导向性，而在细胞外部分泌的SEAP可容许在活体外环境的培养基中或在活体内环境的个体血流中定量测量转导效率。基于lacZ基因被克隆基因破坏，LacZ可使得能够对所要无性系进行基于颜色的选择。
在一实施例中，各质粒包括唯一DNA滴度标签。在某些实施例中，DNA滴度标签仅出现于含转基因质粒中。在某些实施例中，DNA滴度标签出现于所有质粒系统中。可包含此唯一DNA滴度标签以使得能够例如经由基于qPCR(或ddPCR)的载体基因组滴定分析进行通用载体基因组滴定，以定量所存在载体的量。在某些实施例中，DNA滴度标签可在表达盒外部但在2个ITR之间，以确保其经包装。举例来说，DNA滴度标签可在3'ITR序列的上游。作为另一实例，DNA滴度标签可在5'ITR序列的下游。在某些实施例中，DNA滴度标签经构建以使得其不在个体的基因组内以内源性方式出现。举例来说，可将所述序列对照个体的DNA进行比较(例如，经由Blast检索或其它比对检索工具)。也可分析用于运行qPCR分析的引物以确保其不鉴别发现于用于包装病毒体的宿主细胞中的任何序列。
DNA滴度标签可具有允许高效qPCR分析且也在质粒中占据最少量的基因组空间的大小。在某些实施例中，DNA滴度标签序列长度为约60个核苷酸到约100个核苷酸(例如，SEQID NO:10)，且基于不存在于人类或标准实验室动物中的序列来设计。在某些实施例中，DNA滴度标签序列为约60个核苷酸到约80个核苷酸、约65个核苷酸到约95个核苷酸、约70个核苷酸到约90个核苷酸或约75个核苷酸到约85个核苷酸。在某些实施例中，DNA滴度标签序列为约60个核苷酸到约70个核苷酸、约65个核苷酸到约75个核苷酸、约70个核苷酸到约80个核苷酸、约75个核苷酸到约85个核苷酸、约80个核苷酸到约90个核苷酸、约85个核苷酸到约95个核苷酸或约90个核苷酸到约100个核苷酸。在某些实施例中，DNA滴度标签序列为至少约60个核苷酸、至少约65个核苷酸、至少约70个核苷酸、至少约75个核苷酸、至少约80个核苷酸、至少约85个核苷酸、至少约90个核苷酸、至少约95个核苷酸或至少约100个核苷酸。在某些实施例中，DNA滴度序列的链段长度为100个核苷酸。在某些实施例中，由于总质粒大小和包装限制，100个核苷酸的滴度标签在快速qPCR分析中可为有利的且允许高效包装。
编码DNA滴度标签的核酸序列的非限制性实例包含SEQ ID NO:61-70。
异源核酸序列
可向个体的一或多个细胞或组织投予通过本发明的质粒制得的重组AAV。因此，本发明涵盖递送可适用于调节个体的细胞或组织的异源核酸序列。举例来说，rAAV可上调或下调细胞或组织的活性或产物。
在某些实施例中，异源核酸序列可为编码一或多种肽、多肽或蛋白质的所关注异源基因。在某些实施例中，异源核酸序列可编码与所关注特异性目标结合的肽、多肽或蛋白质，其可适用于治疗或预防个体的疾病。这些异源核酸序列和相关肽、多肽或蛋白质的实例包含(但不限于)基因编码抗体、MHC分子、T细胞受体、B细胞受体、适配体、高亲和性多聚体、受体结合配位体或靶向肽。适用于本发明的抗体可涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段(例如，Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、Fc等)、嵌合抗体、双特异性抗体、异结合抗体、单链(ScFv)、其突变体、包括抗体部分的融合蛋白、人类化抗体，以及包括所需特异性的抗原识别位点的免疫球蛋白分子的任何其它经修饰配置，包含抗体的糖基化变异体、抗体的氨基酸序列变异体和经共价修饰的抗体。抗体可为鼠类、大鼠、人类或任何其它来源(包含嵌合或人类化抗体)。抗体包含任何类别的抗体，例如IgG、IgA或IgM(或其亚类)，且所述抗体不必为任何特定类别。视其重链的恒定域的抗体氨基酸序列而定，可将免疫球蛋白归为不同类别。存在五种主要类别的免疫球蛋白：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，且这些中的若干可进一步分为亚类(同型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定域分别称为α、δ、ε、γ和μ。不同类别的免疫球蛋白的亚基结构和三维配置为熟知的。
在某些实施例中，异源核酸序列(例如，所关注异源基因)可编码可适用于治疗或预防个体中的疾病的肽、多肽或蛋白质。举例来说，异源核酸序列可编码用于治疗疾病Y的蛋白质X。蛋白质X可例如取代突变蛋白质或用以阻断突变蛋白质。这些核酸序列和相关疾病包含(但不限于)：编码葡萄糖-6-磷酸酶的核酸序列，其与1A型肝糖存储缺乏症相关；编码磷酸烯醇丙酮酸-羧激酶的DNA，其与Pepck缺乏症相关；编码半乳糖-1磷酸酯尿嘧啶转移酶的DNA，其与半乳糖血症相关；编码苯丙氨酸羟化酶的DNA，其与苯酮尿症相关；编码支链α-酮酸去氢酶的DNA，其与枫糖浆尿病相关；编码延胡索酰乙酰乙酸酯水解酶的DNA，其与1型酪氨酸血症相关；编码甲基丙二酰基-CoA变位酶的DNA，其与甲基丙二酸酸血症相关；编码中链酰基CoA去氢酶的DNA，其与中链乙酰CoA缺乏症相关；编码鸟氨酸转氨甲酰酶的DNA，其与鸟氨酸转氨甲酰酶缺乏症相关；编码精氨琥珀酸合成酶的DNA，其与瓜氨酸血症相关；编码低密度脂蛋白受体蛋白质的DNA，其与家族性高胆固醇血症相关；编码UDP-葡萄糖醛糖基转移酶的DNA，其与克里格勒-纳贾尔病(Crigler-Najjar disease)相关；编码腺苷脱氨酶的DNA，其与严重合并性免疫缺失疾病相关；编码次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶的DNA，其与痛风和雷-纳二氏综合症(Lesch-Nyan syndrome)相关；编码生物素酶的DNA，其与生物素酶缺乏症相关；编码α-半乳糖-A的DNA，其与法布立病(Fabry disease)相关；编码β-葡糖脑苷脂酶的DNA，其与高雪氏病(Gaucher disease)相关；编码β-葡糖苷酸酶的DNA，其与斯利综合症(Sly syndrome)相关；编码过氧化体膜蛋白质70kDa的DNA，其与泽尔韦格综合症(Zellweger syndrome)相关；编码胆色素原脱氨酶的DNA，其与急性间歇卟啉症相关；编码α-1抗胰蛋白酶的DNA，其用于治疗α-1抗胰蛋白酶缺乏症(肺气肿)；编码C1-酯酶的DNA，其用于治疗遗传性血管性水肿(HAE)；编码苯丙氨酸羟化酶的DNA，其用于治疗苯酮尿症；编码酸性α-葡糖苷酶的DNA，其用于治疗庞培氏病(Pompe disease)；编码ATP7B的DNA，其用于治疗威尔森氏病(Wilson's disease)；编码α-L-艾杜糖苷的DNA，其用于治疗I型粘多糖病(MPSI)；编码艾杜糖醛硫酸酯酶的DNA，其用于治疗II型粘多糖病(MPSII)；编码乙酰肝素硫酸酰胺酶的DNA，其用于治疗IIIA型粘多糖病(MPSIIIA)；编码N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶的DNA，其用于治疗IIIB型粘多糖病(MPSIIIB)；编码乙酰肝素-α-氨基葡糖苷N-乙酰转移酶的DNA，其用于治疗IIIC型粘多糖病(MPSIIIC)；编码N-乙酰基葡糖胺6-硫酸酯酶的DNA，其用于治疗IIID型粘多糖病(MPSIIID)；编码半乳糖-6-硫酸盐硫酸酯酶的DNA，其用于治疗IVA型粘多糖病(MPSIVA)；编码β-半乳糖苷酶的DNA，其用于治疗IVB型粘多糖病(MPSIVB)；编码N-乙酰基半乳胺糖-4-硫酸酯酶的DNA，其用于治疗VI型粘多糖病(MPSVI)；编码β-葡糖苷酸酶的DNA，其用于治疗VII型粘多糖病(MPSVII)；编码玻尿酸酶的DNA，其用于治疗IX型粘多糖病(MPSIX)；编码红血球生成素的DNA，其用于治疗因地中海贫血症或肾衰竭所致的贫血；编码血管内皮生长因子的DNA、编码血管生成素-1的DNA和编码成纤维细胞生长因子的DNA，其用于治疗局部缺血病；编码凝血调节蛋白和组织因子路径抑制剂的DNA，其用于治疗如例如动脉粥样硬化、血栓或栓塞中所见的血管闭塞；编码芳香族氨基酸去羧酶(AADC)的DNA和编码酪氨酸羟化酶(TH)的DNA，其用于治疗帕金森氏病(Parkinson's disease)；编码β肾上腺素激导性受体的DNA、编码磷酰胺的反义链的DNA或编码磷酰胺的突变体形式的DNA、编码肌(内)细胞质网腺苷三磷酸酶-2(SERCA2)的DNA和编码贲门腺苷酸环化酶的DNA，其用于治疗充血性心脏衰竭；编码肿瘤抑制基因(例如p53)的DNA，其用于治疗各种癌症；编码细胞因子(例如各种白介素中的一种)的DNA，其用于治疗炎症和免疫病症和癌症；编码肌缩蛋白或微小肌营养不良蛋白的DNA和编码肌营养相关蛋白(utrophin)或微小肌营养相关蛋白(miniutrophin)的DNA，其用于治疗肌肉萎缩症；编码ABCA4的DNA，其用于治疗斯特格特氏病(Stargardt's disease)；以及编码胰岛素的DNA，其用于治疗糖尿病。
在某些实施例中，异源核酸序列(例如，所关注异源基因)可编码肽、多肽或蛋白质，所述肽、多肽或蛋白质编码凝血蛋白，其可将所述蛋白质递送到患有血液病症(例如，血友病)的个体的细胞。这些核酸和相关肽、多肽或蛋白质的实例包含(但不限于)编码个体的因子IX以用于治疗B型血友病、编码个体的因子VIII以用于治疗A型血友病、编码因子VII以用于治疗因子VII缺乏症、编码因子X以用于治疗因子X缺乏症、编码因子XI以用于治疗因子XI缺乏症、编码因子XIII以用于治疗因子XIII缺乏症和编码蛋白C以用于治疗蛋白质C缺乏症的DNA。
本发明还包含以下的表达：经工程改造的人工DNA结合域肽、转录活化子或转录抑制子和核酸酶，其可与宿主细胞基因组相互作用以影响基因性和/或后天性疾病的上调或下调基因表达水平。
本发明还包含异源核酸序列的表达，所述异源核酸序列包含(但不限于)：反义链、siRNA、shRNA、miRNA、EGS、gRNA、sgRNA、核糖核酸酶或适配体，其可与可改变基因性和/或后天性疾病的蛋白质的基因表达或活性的细胞DNA、RNA和/或蛋白质相互作用。
本发明还包含用于细胞疗法的中间物和/或关键原材料的表达，所述中间物和/或关键原料包含(但不限于)待用于感染细胞以产生经基因工程改造的细胞疗法材料或药品的rAAV。
本发明还包含异源核酸序列，其为用于修饰细胞中的所关注(即，目标)基因组基因位点的基因编辑分子。这些修饰包含(但不限于)基因中的目标基因位点处的基因序列的破坏、缺失、修复、突变、添加、更改或修饰。基因编辑分子的实例包含(但不限于)核酸内切酶(例如锌指核酸酶(zinc finger nuclease；ZFn))、转录活化子样效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease；TALEN)、巨核酸酶、限制性核酸内切酶、重组酶和成簇规律间隔短回文重复序列(Clustered Regularly InterspersedShort Palindromic Repeat；CRISPR)/CRISPR-相关(Cas)蛋白质。
rAAV的递送
可通过向有需要的个体投予通过本发明的质粒制得的有效量的rAAV而将本文中所描述的重组AAV以治疗上适用的浓度用于治疗和/或预防所关注疾病。用通过本发明的质粒制得的rAAV治疗的个体也可投予有具有已知疗效的其它治疗剂或装置以用于治疗或预防疾病。
向个体递送rAAV可通过肌肉内注射或通过投予到个体的血流中来进行。投予到血流中可通过借助于隔离肢体灌注(外科技术中熟知的技术)向静脉、动脉或任何其它血管管道中将突变体病毒体注射到血流来进行，所述方法基本上使得技术人员能够在投予rAAV之前将肢体与全身循环隔离。此外，对于某些病况，可能需要将突变体病毒体递送到个体的CNS。“CNS”意指脊椎动物的大脑和脊髓的所有细胞和组织。因此，所述术语包含(但不限于)神经元细胞、胶细胞、星形胶质细胞、脑脊髓液(CSF)、间隙空间、骨、软骨、脑内室、颅内、大池注射、鞘内、颈内动脉、鼻内和其类似者。可通过使用针头、导管或相关装置，使用所属领域中已知的神经外科技术(例如通过立体定向注射)注射到例如脑室区中以及注射到纹状体(例如，纹状体的尾核或壳核)、脊髓和肌神经结或小脑小叶而将活体外转导的rAAV或细胞直接递送到CNS或大脑。参见例如斯坦因(Stein)等人,病毒学杂志(J Virol)73:3424-3429,1999；戴维森(Davidson)等人,PNAS97:3428-3432,2000；戴维森等人,自然遗传学(Nat.Genet.)3:219-223,1993；和阿里斯基(Alisky)和戴维森,人类基因治疗(Hum.GeneTher.)11:2315-2329,2000，所述文献出于所有目的各自全文并入本文中。对于投予到眼睛，方法可包含视网膜下、玻璃体内、经巩膜或颅内。
表3用于本发明的质粒的示范性序列
Figure BDA0003028213640000311
Figure BDA0003028213640000321
Figure BDA0003028213640000331
实例
还借助于以下实例来描述和论证本发明。然而，说明书中任何位置的这些和其它实例的使用仅为说明性的，且决不限制本发明或任何示范性术语的范围和含义。同样，本发明不限于此处所描述的任何优选实施例。实际上，本发明的许多修改和变化在阅读本说明书时可对所属领域的熟练技术人员显而易见，且可在不背离本发明的精神或范围的情况下进行这些变化。因此，本发明仅受所附权利要求书的项目以及那些权利要求书所授权的等效物的完整范围限制。
实例1：Cap蛋白质的活体外表达
此实例研究相较于来自携载Rep2和Cap2基因(安捷伦(Agilent))的对照基于pAAV-RC2的质粒的相同衣壳蛋白质的表达水平，来自基于pUC19的质粒的AAV293(安捷伦)细胞中衣壳蛋白质的活体外表达(图4A)。
以Rep2Cap2-pAAV-RC(即，如图4A中所示的pAAV-RC2)开始，在pAAV-RC背景中形成具有不同Rep和Cap基因的四个质粒的第一集合。pAAV-RC2用于产生Rep2/5Cap5-pAAV-RC、Rep2Cap8-pAAV-RC和Rep2Cap9-pAAV-RC(图4A)。
在pUC19-Kan背景中形成四个质粒的第二集合，其中相同复制和衣壳蛋白质作为第一集合。因此，Rep2Cap2-pUC19-Kan、Rep2/5Cap5-pUC19-Kan、Rep2Cap8-pUC19-Kan和Rep2Cap9-pUC19-Kan(图4A和14A)。
对于实验，以1:1的比率将8个质粒中的每一个与Ad辅助质粒pHelper(安捷伦)(例如，SEQ ID NO:45)单独转染。
经由蛋白质印迹法使用单克隆B1抗体将来自基于pUC19-Kan的质粒的Cap蛋白质的表达水平与来自基于pAAV-RC2的质粒的相同Cap蛋白质的表达水平进行比较(图6)。阳性对照AAV2参考标准物质(reference standard material；RSM)和AAV8 RSM为含有AAV2和AAV8 Cap蛋白质的参考标准物质，而阴性对照为来自不具有任何Cap携带质粒的HEK293的细胞裂解物。对于基于pUC19的质粒和基于pAAV-RC2的质粒两者，衣壳蛋白质的表达水平为AAV5>AAV8>AAV9>AAV2。
图7为使用减少的样品进行的蛋白质印迹分析，以更清楚地特异性分析Cap蛋白质VP1-VP3的量。
随后，将AAV2 P5启动子添加到Rep2Cap2 pUC19-Kan、Rep2Cap8 pUC19-Kan和Rep2Cap9 pUC19-Kan质粒(例如，图4B和14B)。图8展示在与上文所描述相同的条件下测试的使用P5启动子表达的来自AAV血清型2、8和9的Cap蛋白质相比于不具有P5启动子的那些蛋白质的表达水平。已发现，P5启动子产生较高水平的衣壳蛋白质表达。以1:1的比率投予含转基因质粒和Ad辅助质粒。
实例2：短和长Ad辅助质粒的功能测试
此实例的目的为测试短Ad辅助质粒和长Ad辅助质粒对比市售pHelper的功能。各质粒经单独测试以确保在以组合方式使用其之前，每一个均起作用。
图9展示在HEK293宿主细胞系统中使用短Ad辅助质粒(SEQ ID NO:14)的阳性测试结果。通过将短辅助质粒与携载GFP作为ITR之间的转基因的含pTRUF11转基因质粒和携载AAV Rep2和Cap2基因的Agilent RC2质粒共转染来测试短Ad辅助质粒(SEQ ID NO:14)。阴性对照由以下组成：1)市售Ad辅助质粒(pHelper)和Agilent质粒RC2，和2)pHelper和pTRUF11；阳性对照由以下组成：pHelper、pTRUF11和Agilent RC2质粒。在48小时之后，HEK293细胞经Triton X-100裂解且用全能核酸酶(benzonase nuclease)处理以减少DNA和RNA。将含有AAV粒子的细胞裂解物在经历qPCR之前用DNA酶I处理且连续稀释，以测定每毫升细胞裂解物的病毒基因组拷贝数。图9展示qPCR分析的结果，其中柱1和2表示阴性对照，柱3展示阳性对照，且柱4展示在将短Ad辅助质粒与2个其它质粒一起使用以产生rAAV时获得的病毒基因组拷贝数。
进行类似实验以测试根据本发明的长Ad辅助质粒(SEQ ID NO:15)(图10)。图10展示如通过qPCR所测定的以下各者的每毫升细胞裂解物的病毒基因组拷贝数：阴性对照(柱1)、阳性对照(柱2)、短Ad辅助质粒(SEQ ID NO:14)+Rep-Cap携带质粒+ITR-GFP携带质粒(柱3)和长Ad辅助质粒+Rep-Cap携带质粒+ITR-GFP携带质粒(柱4)。因此，长Ad辅助质粒也引起AAV的产生。
实例3：使用三质粒系统的rAAV病毒体产生
测试根据本发明的单链(ss)和自互补(sc)-ITR携带质粒形成rAAV病毒体的能力。在此实验中，将质粒共转染到HEK293细胞(安捷伦)中。对于各转染，以1:1:1摩尔比使用Ad辅助质粒、Rep-Cap质粒和含转基因质粒，且每10cm板使用10ug的总DNA。阴性对照为可商购的Ad辅助质粒(安捷伦)和可商购的Rep-Cap携带质粒(安捷伦)，而阳性对照使用不同ITR携带质粒(ATCC)。图11的上部图展示ss-ITR携带质粒的每毫升细胞裂解物的病毒基因组拷贝数(如上通过qPCR测量)，而下部图展示sc-ITR携带质粒的每毫升细胞裂解物的病毒基因组拷贝数。在两个图中，柱1展示阴性对照的拷贝数，柱2表示阳性对照，且柱3表示根据本发明的质粒。
随后，将根据本发明的三个质粒共转染到HEK293细胞中(再次，1:1:1比率)以用于qPCR分析。阴性对照(图12的柱1)为可商购的Ad辅助质粒和ITR携带质粒。阳性对照(图12的柱2)包含可商购的Rep-Cap携带质粒。柱3-6对应于来自经相同可商购的Ad辅助质粒和ITR携带质粒与编码来自AAV血清型2、5、8或9(在图的顶部上指出)的Rep和Cap蛋白质的基于pUC19的质粒转染的细胞的AAV基因组拷贝数。图12的柱7-10对应于来自经根据本发明的Ad辅助质粒、基于pUC19的Rep-Cap携带质粒和ITR携带质粒转染的细胞的AAV基因组拷贝数。图12的柱11为对应于来自经根据本发明的Ad辅助质粒和ss-ITR质粒和可商购的Rep-Cap携带质粒转染的细胞的AAV基因组拷贝数的另一阳性对照。
实例4：rAAV的纯化和产生
用包括根据本发明的三个质粒的质粒系统共转染HEK293细胞。使细胞化学裂解，且收集细胞集结粒和培养基。细胞裂解物经澄清提纯且用全能核酸酶处理。使经澄清裂解物在适当亲和柱上运行(例如，对于包括AAV8衣壳的质粒系统，亲和柱为AVB；对于包括AAV9的质粒系统，亲和柱为AAV9-POROS CaptureSelect)。在缓冲液交换之后，从管柱洗脱rAAV。借助于实例且非限制，rAAV接着通过qPCR特征化，以测定病毒基因组拷贝数(参见图9到13、16)。可通过银染色以测定纯度和一致性，通过鲎变形细胞裂解物(Limulus amebocytelysate；LAL)分析以测量内毒素活性和微生物污染，且通过活体外转导分析以测定生物活性来进一步评估rAAV。其它特征化分析包含用以测试病毒基因组的大小和集成性的碱性电泳、用以检查衣壳的ELISA、用以确定rAAV粒子的感染力的感染性中心分析以及用以观测rAAV粒子的电子显微法。也可通过使用适当抗体来进行用于特异性蛋白质的蛋白质印迹法(参见图6到8)。
实例5：使用标签滴定载体基因组
虽然例如polyA序列的序列可用于qPCR定量，但其使用这些序列进行通用滴定并不理想。举例来说，各转基因可使用不同polyA序列(例如，SV40、bGH polyA等)，由此阻止将其用于定量所有转基因平台上的载体。因此，针对其普遍地定量任何转基因盒的能力来测试在转基因盒外部的单独DNA滴度标签(即不作为转基因mRNA转录物的部分转录)。
在3'ITR序列的上游包含100个核苷酸DNA滴度标签。此相同滴度标签可用于任何含转基因质粒中以用于rAAV产生以允许经由qPCR技术进行通用载体基因组滴定，其可用作任何项目的单一参考标准。针对相同批次的AAV使用SV40 polyA或100个核苷酸DNA滴度标签作为目标序列比较qPCR滴定结果。
使用作为单链(SEQ ID NO:1)或自互补(SEQ ID NO:42)含转基因质粒的含转基因质粒来产生两种不同病毒载体：rAAV8-ssITR(SEQ ID NO:1)和rAAV8-scITR(SEQ ID NO:42)。使用两个不同目标序列来获得类似qPCR滴度，从而指示100个核苷酸DNA滴度标签与SV40 polyA同等良好的工作，所述SV40 polyA已广泛用于基于qPCR的载体滴定的领域中(图13A(rAAV8-ssITR)和13B(rAAV8-scITR))。
实例6：使用标签滴定载体基因组
为进一步确认DNA滴度标签的效用，在两个额外病毒载体：rAAV9-ssITR(SEQ IDNO:71)和rAAV9-scITR(SEQ ID NO:73)中的3'ITR序列的上游包含用于实例5中的相同100个核苷酸DNA滴度标签。
虽然上文公开若干可能的实施例，但本发明的实施例不如此受限。这些示范性实施例并不打算穷尽性或不必要地限制本发明的范围，而被选择和描述以便解释本发明的原理以使得所属领域的熟练技术人员可实践本发明。实际上，根据前述描述，除本文中所描述的那些修改以外，本发明的各种修改对所属领域的熟练技术人员来说也将变得显而易见。这些修改打算属于所附权利要求书的范围内。此外，本文中所采用的术语仅出于描述示范性实施例而使用，且因为本发明的各种实施例的范围将仅受所附权利要求书和其等效物限制，故所述术语不打算为限制性的。因此，本发明的范围由以下权利要求书而非前述描述和上文所论述的实施例来指示，且在其等效物的意义和范围内出现的所有变化均打算包涵于其中。
本文中所引用的所有专利、申请、公布、测试方法、文献和其它材料均以全文引用的方式并入本文中，如同在本说明书中实体存在那般。
序列表
<110> 百特奥尔塔公司(BAXALTA INCORPORATED)
百特奥尔塔股份有限公司(BAXALTA GMBH)
<120> AAV三质粒系统
<130> 250478.001858
<140>
<141>
<150> 62/750,603
<151> 2018-10-25
<160> 77
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 10630
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<220>
<221> modified_base
<222> (6316)..(6415)
<223> a、c、t、g，未知或其他
<220>
<221> misc_feature
<222> (6316)..(6415)
<223> 这个区域可涵盖60-100个核苷酸
<400> 1
tagggaaata ggccaggttt tcaccgtaac acgccacatc ttgcgaatat atgtgtagaa 60
actgccggaa atcgtcgtgt gcactcatgg aaaacggtgt aacaagggtg aacactatcc 120
catatcacca gctcaccgtc tttcattgcc atacggaact ccggatgagc attcatcagg 180
cgggcaagaa tgtgaataaa ggccggataa aacttgtgct tatttttctt tacggtcttt 240
aaaaaggccg taatatccag ctgaacggtc tggttatagg tacattgagc aactgactga 300
aatgcctcaa aatgttcttt acgatgccat tgggatatat caacggtggt atatccagtg 360
atttttttct ccattttttt ttcctccttt agaaaaactc atcgagcatc aaatgaaact 420
gcaatttatt catatcagga ttatcaatac catatttttg aaaaagccgt ttctgtaatg 480
aaggagaaaa ctcaccgagg cagttccata ggatggcaag atcctggtat cggtctgcga 540
ttccgactcg tccaacatca atacaaccta ttaatttccc ctcgtcaaaa ataaggttat 600
caagtgagaa atcaccatga gtgacgactg aatccggtga gaatggcaaa agtttatgca 660
tttctttcca gacttgttca acaggccagc cattacgctc gtcatcaaaa tcactcgcat 720
caaccaaacc gttattcatt cgtgattgcg cctgagcgag gcgaaatacg cgatcgctgt 780
taaaaggaca attacaaaca ggaatcgagt gcaaccggcg caggaacact gccagcgcat 840
caacaatatt ttcacctgaa tcaggatatt cttctaatac ctggaacgct gtttttccgg 900
ggatcgcagt ggtgagtaac catgcatcat caggagtacg gataaaatgc ttgatggtcg 960
gaagtggcat aaattccgtc agccagttta gtctgaccat ctcatctgta acatcattgg 1020
caacgctacc tttgccatgt ttcagaaaca actctggcgc atcgggcttc ccatacaagc 1080
gatagattgt cgcacctgat tgcccgacat tatcgcgagc ccatttatac ccatataaat 1140
cagcatccat gttggaattt aatcgcggcc tcgacgtttc ccgttgaata tggctcattt 1200
ttttttcctc ctttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt 1260
tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt 1320
accatctggc cccagcgctg cgatgatacc gcgagaacca cgctcaccgg ctccggattt 1380
atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc 1440
cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa 1500
tagtttgcgc aacgttgttg ccatcgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg 1560
tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt 1620
gtgcacgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg 1680
cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca 1740
accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata 1800
cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct 1860
tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact 1920
cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa 1980
acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc 2040
atattcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga 2100
tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg tcagtgttac aaccaattaa 2160
ccaattctga acattatcgc gagcccattt atacctgaat atggctcata acaccccttg 2220
tttgcctggc ggcagtagcg cggtggtccc acctgacccc atgccgaact cagaagtgaa 2280
acgccgtagc gccgatggta gtgtggggac tccccatgcg agagtaggga actgccaggc 2340
atcaaataaa acgaaaggct cagtcgaaag actgggcctt tcgcccgggc taattgaggg 2400
gtgtcgccct tattcgactc ggggctcgag ctgcgcgctc gctcgctcac tgaggccgcc 2460
cgggcaaagc ccgggcgtcg ggcgaccttt ggtcgcccgg cctcagtgag cgagcgagcg 2520
cgcagagagg gagtggccaa ctccatcact aggggttcct ttaattaaac gcgtttacat 2580
aacttacggt aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga cccccgccca ttgacgtcaa 2640
taatgacgta tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt caatgggtgg 2700
actatttacg gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg ccaagtacgc 2760
cccctattga cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag tacatgacct 2820
tatgggactt tcctacttgg cagtacatct acgtattagt catcgctatt accatggtga 2880
tgcggttttg gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt tgactcacgg ggatttccaa 2940
gtctccaccc cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca ccaaaatcaa cgggactttc 3000
caaaatgtcg taacaactcc gccccattga cgcaaatggg cggtaggcgt gtacggtggg 3060
aggtctatat aggcgcgccg aactgaaaaa ccagaaagtt aactggtaag tttagtcttt 3120
ttgtctttta tttcaggtcc cggatccggt ggtggtgcaa atcaaagaac tgctcctcag 3180
tggatgttgc ctttacttct aggcctgtac ggaagtgtta cttctgctct aaaagctcct 3240
gcagggaatt cgccaccatg gtgagcaagg gcgaggagct gttcaccggg gtggtgccca 3300
tcctggtcga gctggacggc gacgtaaacg gccacaagtt cagcgtgtcc ggcgagggcg 3360
agggcgatgc cacctacggc aagctgaccc tgaagttcat ctgcaccacc ggcaagctgc 3420
ccgtgccctg gcccaccctc gtgaccaccc tgacctacgg cgtgcagtgc ttcagccgct 3480
accccgacca catgaagcag cacgacttct tcaagtccgc catgcccgaa ggctacgtcc 3540
aggagcgcac catcttcttc aaggacgacg gcaactacaa gacccgcgcc gaggtgaagt 3600
tcgagggcga caccctggtg aaccgcatcg agctgaaggg catcgacttc aaggaggacg 3660
gcaacatcct ggggcacaag ctggagtaca actacaacag ccacaacgtc tatatcatgg 3720
ccgacaagca gaagaacggc atcaaggtga acttcaagat ccgccacaac atcgaggacg 3780
gcagcgtgca gctcgccgac cactaccagc agaacacccc catcggcgac ggccccgtgc 3840
tgctgcccga caaccactac ctgagcaccc agtccgccct gagcaaagac cccaacgaga 3900
agcgcgatca catggtcctg ctggagttcg tgaccgccgc cgggatcact ctcggcatgg 3960
acgagctgta caagtaatag actagtgccc ctctccctcc ccccccccta acgttactgg 4020
ccgaagccgc ttggaataag gccggtgtgc gtttgtctat atgttatttt ccaccatatt 4080
gccgtctttt ggcaatgtga gggcccggaa acctggccct gtcttcttga cgagcattcc 4140
taggggtctt tcccctctcg ccaaaggaat gcaaggtctg ttgaatgtcg tgaaggaagc 4200
agttcctctg gaagcttctt gaagacaaac aacgtctgta gcgacccttt gcaggcagcg 4260
gaacccccca cctggcgaca ggtgcctctg cggccaaaag ccacgtgtat aagatacacc 4320
tgcaaaggcg gcacaacccc agtgccacgt tgtgagttgg atagttgtgg aaagagtcaa 4380
atggctcacc tcaagcgtat tcaacaaggg gctgaaggat gcccagaagg taccccattg 4440
tatgggatct gatctggggc ctcggtgcac atgctttaca tgtgtttagt cgaggttaaa 4500
aaacgtctag gccccccgaa ccacggggac gtggttttcc tttgaaaaac acgatgataa 4560
taccggtgcc accatgctgc tgctgctgct gctgctgggc ctgaggctac agctctccct 4620
gggcatcatc ccagttgagg aggagaaccc ggacttctgg aaccgcgagg cagccgaggc 4680
cctgggtgcc gccaagaagc tgcagcctgc acagacagcc gccaagaacc tcatcatctt 4740
cctgggcgat gggatggggg tgtctacggt gacagctgcc aggatcctaa aagggcagaa 4800
gaaggacaaa ctggggcctg agatacccct ggccatggac cgcttcccat atgtggctct 4860
gtccaagaca tacaatgtag acaaacatgt gccagacagt ggagccacag ccacggccta 4920
cctgtgcggg gtcaagggca acttccagac cattggcttg agtgcagccg cccgctttaa 4980
ccagtgcaac acgacacgcg gcaacgaggt catctccgtg atgaatcggg ccaagaaagc 5040
agggaagtca gtgggagtgg taaccaccac acgagtgcag cacgcctcgc cagccggcac 5100
ctacgcccac acggtgaacc gcaactggta ctcggacgcc gacgtgcctg cctcggcccg 5160
ccaggagggg tgccaggaca tcgctacgca gctcatctcc aacatggaca ttgacgtgat 5220
cctaggtgga ggccgaaagt acatgtttcg catgggaacc ccagaccctg agtacccaga 5280
tgactacagc caaggtggga ccaggctgga cgggaagaat ctggtgcagg aatggctggc 5340
gaagcgccag ggtgcccggt atgtgtggaa ccgcactgag ctcatgcagg cttccctgga 5400
cccgtctgtg acccatctca tgggtctctt tgagcctgga gacatgaaat acgagatcca 5460
ccgagactcc acactggacc cctccctgat ggagatgaca gaggctgccc tgcgcctgct 5520
gagcaggaac ccccgcggct tcttcctctt cgtggagggt ggtcgcatcg accatggtca 5580
tcatgaaagc agggcttacc gggcactgac tgagacgatc atgttcgacg acgccattga 5640
gagggcgggc cagctcacca gcgaggagga cacgctgagc ctcgtcactg ccgaccactc 5700
ccacgtcttc tccttcggag gctaccccct gcgagggagc tccatcttcg ggctggcccc 5760
tggcaaggcc cgggacagga aggcctacac ggtcctccta tacggaaacg gtccaggcta 5820
tgtgctcaag gacggcgccc ggccggatgt taccgagagc gagagcggga gccccgagta 5880
tcggcagcag tcagcagtgc ccctggacga agagacccac gcaggcgagg acgtggcggt 5940
gttcgcgcgc ggcccgcagg cgcacctggt tcacggcgtg caggagcaga ccttcatagc 6000
gcacgtcatg gccttcgccg cctgcctgga gccctacacc gcctgcgacc tggcgccccc 6060
cgccggcacc accgacgccg cgcacccggg ttactctaga gtcggggcgg ccggccgctt 6120
cgagcagaca tgagtcgaca gatcttttaa aaaacctccc acacaattgt tgttgttaac 6180
ttgtttattg cagcttataa tggttacaaa taaagcaata gcatcacaaa tttcacaaat 6240
aaagcatttt tttcactgca ttctagttgt ggtttgtcca aactcatcaa tgtatcttat 6300
catgtctgtt taaacnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 6360
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnattta 6420
aataggaacc cctagtgatg gagttggcca ctccctctct gcgcgctcgc tcgctcactg 6480
aggccgggcg accaaaggtc gcccgacgcc cgggctttgc ccgggcggcc tcagtgagcg 6540
agcgagcgcg cagagagtat acatcgatgt gagttcgcgg gtggctgggg ggccctgggc 6600
tgcgaccgcc cccgaaccgc gtctacgagc cttgcgggct ccgggtcttt gcagtcgtat 6660
gggggcaggg tagctgttcc ccgcaaggag agctcaaggt cagcgctcgg acctggcgga 6720
gccccgcacc caggctgtgg cgccctgtgc agctccgccc ttgcggcgcc atctgcccgg 6780
agcctccttc ccctagtccc cagaaacagg aggtccctac tcccgcccga gatcccgacc 6840
cggaccccta ggtgggggac gctttctttc ctttcgcgct ctgcggggtc acgtgtcgca 6900
gaggagcccc tcccccacgg cctccggcac cgcaggcccc gggatgctag tgcgcagcgg 6960
gtgcatccct gtccggatgc tgcgcctgcg gtagagcggc cgccatgttg caaccgggaa 7020
ggaaatgaat gggcagccgt taggaaagcc tgccggtgac taaccctgcg ctcctgcctc 7080
gatgggtgga gtcgcgtgtg gcggggaagt caggtggagc gaggctagct ggcccgattt 7140
ctcctccggg tgatgctttt cctagattat tctctggtaa atcaaagaag tgggtttatg 7200
gaggtcctct tgtgtcccct ccccgcagag gtgtggtggc tgtggcatgg tgccaagccg 7260
ggagaagctg agtcatgggt agttggaaaa ggacatttcc accgcaaaat ggcccctctg 7320
gtggtggccc cttcctgcag cgccggctca cctcacggcc ccgcccttcc cctgccagcc 7380
tagcgttgac ccgaccccaa aggccaggct gtaaatgtca ccgggaggat tgggtgtctg 7440
ggcgcctcgg ggaacctgcc cttctcccca ttccgtcttc cggaaaccag atctcccacc 7500
gcaccctggt ctgaggttaa atatagctgc tgacctttct gtagctgggg gcctgggctg 7560
gggctctctc ccatcccttc tccccacaca catgcactta cctgtgctcc cactcctgat 7620
ttctggaaaa gagctaggaa ggacaggcaa cttggcaaat caaagccctg ggactagggg 7680
gttaaaatac agcttcccct cttcccaccc gccccagtct ctgtcccttt tgtaggaggg 7740
acttagagaa ggggtgggct tgccctgtcc agttaatttc tgacctttac tcctgccctt 7800
tgagtttgat gatgctgagt gtacaagcgt tttctcccta aagggtgcag ctgagctagg 7860
cagcagcaag cattcctggg gtggcatagt ggggtggtga ataccatgta caaagcttgt 7920
gcccagactg tgggtggcag tgccccacat ggccgcttct cctggaaggg cttcgtatga 7980
ctgggggtgt tgggcagccc tggagccttc agttgcagcc atgccttaag ccaggccagc 8040
ctggcaggga agctcaaggg agataaaatt caacctcttg ggccctcctg ggggtaagga 8100
gatgctgcat tcgccctctt aatggggagg tggcctaggg ctgctcacat attctggagg 8160
agcctcccct cctcatgcct tcttgcctct tgtctcttag gcatgcaaaa gagtcgaata 8220
agggcgacac aaaatttatt ctaaatgcat aataaatact gataacatct tatagtttgt 8280
attatatttt gtattatcgt tgacatgtat aattttgata tcaaaaactg attttccctt 8340
tattattttc gagatttatt ttcttaattc tctttaacaa actagaaata ttgtatatac 8400
aaaaaatcat aaataataga tgaatagttt aattataggt gttcatcaat cgaaaaagca 8460
acgtatctta tttaaagtgc gttgcttttt tctcatttat aaggttaaat aattctcata 8520
tatcaagcaa agtgacaggc gcccttaaat attctgacaa atgctctttc cctaaactcc 8580
ccccataaaa aaacccgccg aagcgggttt ttacgttatt tgcggattaa cgattactcg 8640
ttatcagaac cgcccagggg gcccgagctt aagactggcc gtcgttttac aacacagaaa 8700
gagtttgtag aaacgcaaaa aggccatccg tcaggggcct tctgcttagt ttgatgcctg 8760
gcagttccct actctcgcct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc tcggtcgttc 8820
ggctgcggcg agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc acagaatcag 8880
gggataacgc aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa 8940
aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc 9000
gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag gcgtttcccc 9060
ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg 9120
cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg tatctcagtt 9180
cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc 9240
gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc 9300
cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag 9360
agttcttgaa gtggtgggct aactacggct acactagaag aacagtattt ggtatctgcg 9420
ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa 9480
ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag 9540
gatctcaaga agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg aacgacgcgc 9600
gcgtaactca cgttaaggga ttttggtcat gagcttgcgc cgtcccgtca agtcagcgta 9660
atgctctgct taggtggcgg tacttgggtc gatatcaaag tgcatcactt cttcccgtat 9720
gcccaacttt gtatagagag ccactgcggg atcgtcaccg taatctgctt gcacgtagat 9780
cacataagca ccaagcgcgt tggcctcatg cttgaggaga ttgatgagcg cggtggcaat 9840
gccctgcctc cggtgctcgc cggagactgc gagatcatag atatagatct cactacgcgg 9900
ctgctcaaac ttgggcagaa cgtaagccgc gagagcgcca acaaccgctt cttggtcgaa 9960
ggcagcaagc gcgatgaatg tcttactacg gagcaagttc ccgaggtaat cggagtccgg 10020
ctgatgttgg gagtaggtgg ctacgtcacc gaactcacga ccgaaaagat caagagcagc 10080
ccgcatggat ttgacttggt cagggccgag cctacatgtg cgaatgatgc ccatacttga 10140
gccacctaac tttgttttag ggcgactgcc ctgctgcgta acatcgttgc tgctccataa 10200
catcaaacat cgacccacgg cgtaacgcgc ttgctgcttg gatgcccgag gcatagactg 10260
tacaaaaaaa cagtcataac aagccatgaa aaccgccact gcgccgttac caccgctgcg 10320
ttcggtcaag gttctggacc agttgcgtga gcgcattttt ttttcctcct cggcgtttac 10380
gccccgccct gccactcatc gcagtactgt tgtaattcat taagcattct gccgacatgg 10440
aagccatcac agacggcatg atgaacctga atcgccagcg gcatcagcac cttgtcgcct 10500
tgcgtataat atttgcccat agtgaaaacg ggggcgaaga agttgtccat attggccacg 10560
tttaaatcaa aactggtgaa actcacccag ggattggcgc tgacgaaaaa catattctca 10620
ataaaccctt 10630
<210> 2
<211> 130
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 2
ctgcgcgctc gctcgctcac tgaggccgcc cgggcaaagc ccgggcgtcg ggcgaccttt 60
ggtcgcccgg cctcagtgag cgagcgagcg cgcagagagg gagtggccaa ctccatcact 120
aggggttcct 130
<210> 3
<211> 133
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 3
aggaacccct agtgatggag ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg 60
ccgggcgacc aaaggtcgcc cgacgcccgg gctttgcccg ggcggcctca gtgagcgagc 120
gagcgcgcag aga 133
<210> 4
<211> 503
<212> DNA
<213> 人类巨细胞病毒
<400> 4
acgcgtttac ataacttacg gtaaatggcc cgcctggctg accgcccaac gacccccgcc 60
cattgacgtc aataatgacg tatgttccca tagtaacgcc aatagggact ttccattgac 120
gtcaatgggt ggactattta cggtaaactg cccacttggc agtacatcaa gtgtatcata 180
tgccaagtac gccccctatt gacgtcaatg acggtaaatg gcccgcctgg cattatgccc 240
agtacatgac cttatgggac tttcctactt ggcagtacat ctacgtatta gtcatcgcta 300
ttaccatggt gatgcggttt tggcagtaca tcaatgggcg tggatagcgg tttgactcac 360
ggggatttcc aagtctccac cccattgacg tcaatgggag tttgttttgg caccaaaatc 420
aacgggactt tccaaaatgt cgtaacaact ccgccccatt gacgcaaatg ggcggtaggc 480
gtgtacggtg ggaggtctat ata 503
<210> 5
<211> 723
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 5
atggtgagca agggcgagga gctgttcacc ggggtggtgc ccatcctggt cgagctggac 60
ggcgacgtaa acggccacaa gttcagcgtg tccggcgagg gcgagggcga tgccacctac 120
ggcaagctga ccctgaagtt catctgcacc accggcaagc tgcccgtgcc ctggcccacc 180
ctcgtgacca ccctgaccta cggcgtgcag tgcttcagcc gctaccccga ccacatgaag 240
cagcacgact tcttcaagtc cgccatgccc gaaggctacg tccaggagcg caccatcttc 300
ttcaaggacg acggcaacta caagacccgc gccgaggtga agttcgaggg cgacaccctg 360
gtgaaccgca tcgagctgaa gggcatcgac ttcaaggagg acggcaacat cctggggcac 420
aagctggagt acaactacaa cagccacaac gtctatatca tggccgacaa gcagaagaac 480
ggcatcaagg tgaacttcaa gatccgccac aacatcgagg acggcagcgt gcagctcgcc 540
gaccactacc agcagaacac ccccatcggc gacggccccg tgctgctgcc cgacaaccac 600
tacctgagca cccagtccgc cctgagcaaa gaccccaacg agaagcgcga tcacatggtc 660
ctgctggagt tcgtgaccgc cgccgggatc actctcggca tggacgagct gtacaagtaa 720
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<212> DNA
<213> 人工序列
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<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
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gcccctctcc ctcccccccc cctaacgtta ctggccgaag ccgcttggaa taaggccggt 60
gtgcgtttgt ctatatgtta ttttccacca tattgccgtc ttttggcaat gtgagggccc 120
ggaaacctgg ccctgtcttc ttgacgagca ttcctagggg tctttcccct ctcgccaaag 180
gaatgcaagg tctgttgaat gtcgtgaagg aagcagttcc tctggaagct tcttgaagac 240
aaacaacgtc tgtagcgacc ctttgcaggc agcggaaccc cccacctggc gacaggtgcc 300
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acgttgtgag ttggatagtt gtggaaagag tcaaatggct cacctcaagc gtattcaaca 420
aggggctgaa ggatgcccag aaggtacccc attgtatggg atctgatctg gggcctcggt 480
gcacatgctt tacatgtgtt tagtcgaggt taaaaaacgt ctaggccccc cgaaccacgg 540
ggacgtggtt ttcctttgaa aaacacgatg ataat 575
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 7
atgctgctgc tgctgctgct gctgggcctg aggctacagc tctccctggg catcatccca 60
gttgaggagg agaacccgga cttctggaac cgcgaggcag ccgaggccct gggtgccgcc 120
aagaagctgc agcctgcaca gacagccgcc aagaacctca tcatcttcct gggcgatggg 180
atgggggtgt ctacggtgac agctgccagg atcctaaaag ggcagaagaa ggacaaactg 240
gggcctgaga tacccctggc catggaccgc ttcccatatg tggctctgtc caagacatac 300
aatgtagaca aacatgtgcc agacagtgga gccacagcca cggcctacct gtgcggggtc 360
aagggcaact tccagaccat tggcttgagt gcagccgccc gctttaacca gtgcaacacg 420
acacgcggca acgaggtcat ctccgtgatg aatcgggcca agaaagcagg gaagtcagtg 480
ggagtggtaa ccaccacacg agtgcagcac gcctcgccag ccggcaccta cgcccacacg 540
gtgaaccgca actggtactc ggacgccgac gtgcctgcct cggcccgcca ggaggggtgc 600
caggacatcg ctacgcagct catctccaac atggacattg acgtgatcct aggtggaggc 660
cgaaagtaca tgtttcgcat gggaacccca gaccctgagt acccagatga ctacagccaa 720
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catctcatgg gtctctttga gcctggagac atgaaatacg agatccaccg agactccaca 900
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gcttaccggg cactgactga gacgatcatg ttcgacgacg ccattgagag ggcgggccag 1080
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ccgcaggcgc acctggttca cggcgtgcag gagcagacct tcatagcgca cgtcatggcc 1440
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<212> DNA
<213> 人工序列
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<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
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agatctttta aaaaacctcc cacacaattg ttgttgttaa cttgtttatt gcagcttata 60
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<211> 1632
<212> DNA
<213> 智人
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gtgagttcgc gggtggctgg ggggccctgg gctgcgaccg cccccgaacc gcgtctacga 60
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attctctggt aaatcaaaga agtgggttta tggaggtcct cttgtgtccc ctccccgcag 660
aggtgtggtg gctgtggcat ggtgccaagc cgggagaagc tgagtcatgg gtagttggaa 720
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cacctcacgg ccccgccctt cccctgccag cctagcgttg acccgacccc aaaggccagg 840
ctgtaaatgt caccgggagg attgggtgtc tgggcgcctc ggggaacctg cccttctccc 900
cattccgtct tccggaaacc agatctccca ccgcaccctg gtctgaggtt aaatatagct 960
gctgaccttt ctgtagctgg gggcctgggc tggggctctc tcccatccct tctccccaca 1020
cacatgcact tacctgtgct cccactcctg atttctggaa aagagctagg aaggacaggc 1080
aacttggcaa atcaaagccc tgggactagg gggttaaaat acagcttccc ctcttcccac 1140
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ttcaacctct tgggccctcc tgggggtaag gagatgctgc attcgccctc ttaatgggga 1560
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<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
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<223> a、c、t、g，未知或其他
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<222> (1)..(100)
<223> 这个序列可涵盖60-100个核苷酸
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nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 60
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 100
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<212> DNA
<213> 腺相关病毒
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atgccggggt tttacgagat tgtgattaag gtccccagcg accttgacga gcatctgccc 60
ggcatttctg acagctttgt gaactgggtg gccgagaagg aatgggagtt gccgccagat 120
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caatttgaga agggagagag ctacttccac atgcacgtgc tcgtggaaac caccggggtg 300
aaatccatgg ttttgggacg tttcctgagt cagattcgcg aaaaactgat tcagagaatt 360
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gccggaggcg ggaacaaggt ggtggatgag tgctacatcc ccaattactt gctccccaaa 480
acccagcctg agctccagtg ggcgtggact aatatggaac agtatttaag cgcctgtttg 540
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gagcagaaca aagagaatca gaatcccaat tctgatgcgc cggtgatcag atcaaaaact 660
tcagccaggt acatggagct ggtcgggtgg ctcgtggaca aggggattac ctcggagaag 720
cagtggatcc aggaaaatca ggagagctac ctctccttca actccaccgg caactctcgg 780
agccagatca aggccgcgct cgacaacgcg accaaaatta tgagtctgac aaaaagcgcg 840
gtggactacc tcgtggggag ctccgttccc gaggacattt caaaaaacag aatctggcaa 900
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aagatgacca acaaggtggt tgaatccgcc aaggccatcc tggggggctc aaaggtgcgg 1200
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aatacaaaca tgtgtgtggt ggtggatggg aattccacga cctttgaaca ccagcagccg 1320
ctggaggacc gcatgttcaa atttgaactg actaagcggc tcccgccaga ttttggcaag 1380
attactaagc aggaagtcaa ggactttttt gcttgggcaa aggtcaatca ggtgccggtg 1440
actcacgagt ttaaagttcc cagggaattg gcgggaacta aaggggcgga gaaatctcta 1500
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ctctcatttg ttcccgagac gcctcgcagt tcagacgtga ctgttgatcc cgctcctctg 1620
cgaccgctca attggaattc aaggtatgat tgcaaatgtg actatcatgc tcaatttgac 1680
aacatttcta acaaatgtga tgaatgtgaa tatttgaatc ggggcaaaaa tggatgtatc 1740
tgtcacaatg taactcactg tcaaatttgt catgggattc ccccctggga aaaggaaaac 1800
ttgtcagatt ttggggattt tgacgatgcc aataaagaac agtaa 1845
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<211> 1866
<212> DNA
<213> 腺相关病毒
<400> 12
atgccggggt tttacgagat tgtgattaag gtccccagcg accttgacga gcatctgccc 60
ggcatttctg acagctttgt gaactgggtg gccgagaagg aatgggagtt gccgccagat 120
tctgacatgg atctgaatct gattgagcag gcacccctga ccgtggccga gaagctgcag 180
cgcgactttc tgacggaatg gcgccgtgtg agtaaggccc cggaggccct tttctttgtg 240
caatttgaga agggagagag ctacttccac atgcacgtgc tcgtggaaac caccggggtg 300
aaatccatgg ttttgggacg tttcctgagt cagattcgcg aaaaactgat tcagagaatt 360
taccgcggga tcgagccgac tttgccaaac tggttcgcgg tcacaaagac cagaaatggc 420
gccggaggcg ggaacaaggt ggtggatgag tgctacatcc ccaattactt gctccccaaa 480
acccagcctg agctccagtg ggcgtggact aatatggaac agtatttaag cgcctgtttg 540
aatctcacgg agcgtaaacg gttggtggcg cagcatctga cgcacgtgtc gcagacgcag 600
gagcagaaca aagagaatca gaatcccaat tctgatgcgc cggtgatcag atcaaaaact 660
tcagccaggt acatggagct ggtcgggtgg ctcgtggaca aggggattac ctcggagaag 720
cagtggatcc aggaggacca ggcctcatac atctccttca atgcggcctc caactcgcgg 780
tcccaaatca aggctgcctt ggacaatgcg ggaaagatta tgagcctgac taaaaccgcc 840
cccgactacc tggtgggcca gcagcccgtg gaggacattt ccagcaatcg gatttataaa 900
attttggaac taaacgggta cgatccccaa tatgcggctt ccgtctttct gggatgggcc 960
acgaaaaagt tcggcaagag gaacaccatc tggctgtttg ggcctgcaac taccgggaag 1020
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aagatgaccg ccaaggtcgt ggagtcggcc aaagccattc tcggaggaag caaggtgcgc 1200
gtggaccaga aatgcaagtc ctcggcccag atagacccga ctcccgtgat cgtcacctcc 1260
aacaccaaca tgtgcgccgt gattgacggg aactcaacga ccttcgaaca ccagcagccg 1320
ttgcaagacc ggatgttcaa atttgaactc acccgccgtc tggatcatga ctttgggaag 1380
gtcaccaagc aggaagtcaa agactttttc cggtgggcaa aggatcacgt ggttgaggtg 1440
gagcatgaat tctacgtcaa aaagggtgga gccaagaaaa gacccgcccc cagtgacgca 1500
gatataagtg agcccaaacg ggtgcgcgag tcagttgcgc agccatcgac gtcagacgcg 1560
gaagcttcga tcaactacgc agacaggtac caaaacaaat gttctcgtca cgtgggcatg 1620
aatctgatgc tgtttccctg cagacaatgc gagagaatga atcagaattc aaatatctgc 1680
ttcactcacg gacagaaaga ctgtttagag tgctttcccg tgtcagaatc tcaacccgtt 1740
tctgtcgtca aaaaggcgta tcagaaactg tgctacattc atcatatcat gggaaaggtg 1800
ccagacgctt gcactgcctg cgatctggtc aatgtggatt tggatgactg catctttgaa 1860
caataa 1866
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<212> DNA
<213> 腺相关病毒
<400> 13
atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60
gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120
aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180
aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240
cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300
caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360
gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420
ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480
aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540
tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600
cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660
gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720
accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780
tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840
tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900
ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960
caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020
acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080
gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140
acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200
ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260
cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320
gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380
ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440
ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500
tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560
ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620
ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680
accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740
gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800
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tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160
tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211
<210> 14
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 14
aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga 60
cgcgcgcgta actcacgtta agggattttg gtcatgagct tgcgccgtcc cgtcaagtca 120
gcgtaatgct ctgcttttag aaaaactcat cgagcatcaa atgaaactgc aatttattca 180
tatcaggatt atcaatacca tatttttgaa aaagccgttt ctgtaatgaa ggagaaaact 240
caccgaggca gttccatagg atggcaagat cctggtatcg gtctgcgatt ccgactcgtc 300
caacatcaat acaacctatt aatttcccct cgtcaaaaat aaggttatca agtgagaaat 360
caccatgagt gacgactgaa tccggtgaga atggcaaaag tttatgcatt tctttccaga 420
cttgttcaac aggccagcca ttacgctcgt catcaaaatc actcgcatca accaaaccgt 480
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cacctgaatc aggatattct tctaatacct ggaacgctgt ttttccgggg atcgcagtgg 660
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attccgtcag ccagtttagt ctgaccatct catctgtaac atcattggca acgctacctt 780
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cacctgattg cccgacatta tcgcgagccc atttataccc atataaatca gcatccatgt 900
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gtgtttagtg ctccacttaa actcaggcac aaccatccgc ggcagctcgg tgaagttttc 1740
actccacagg ctgcgcacca tcaccaacgc gtttagcagg tcgggcgccg atatcttgaa 1800
gtcgcagttg gggcctccgc cctgcgcgcg cgagttgcga tacacagggt tgcagcactg 1860
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caaaaagggc gcgtgcccag gctttgagtt gcactcgcac cgtagtggca tcaaaaggtg 2040
accgtgcccg gtctgggcgt taggatacag cgcctgcata aaagccttga tctgcttaaa 2100
agccacctga gcctttgcgc cttcagagaa gaacatgccg caagacttgc cggaaaactg 2160
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cacatttcgg ccccaccggt tcttcacgat cttggccttg ctagactgct ccttcagcgc 2280
gcgctgcccg ttttcgctcg tcacatccat ttcaatcacg tgctccttat ttatcataat 2340
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caggaatcgc cccatcatcg tcacaaaggt cttgttgctg gtgaaggtca gctgcaaccc 2520
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cagtagtttg aagttcgcct ttagatcgtt atccacgtgg tacttgtcca tcagcgcgcg 2640
cgcagcctcc atgcccttct cccacgcaga cacgatcggc acactcagcg ggttcatcac 2700
cgtaatttca ctttccgctt cgctgggctc ttcctcttcc tcttgcgtcc gcataccacg 2760
cgccactggg tcgtcttcat tcagccgccg cactgtgcgc ttacctcctt tgccatgctt 2820
gattagcacc ggtgggttgc tgaaacccac catttgtagc gccacatctt ctctttcttc 2880
ctcgctgtcc acgattacct ctggtgatgg cgggcgctcg ggcttgggag aagggcgctt 2940
ctttttcttc ttgggcgcaa tggccaaatc cgccgccgag gtcgatggcc gcgggctggg 3000
tgtgcgcggc accagcgcgt cttgtgatga gtcttcctcg tcctcggact cgatacgccg 3060
cctcatccgc ttttttgggg gcgcccgggg aggcggcggc gacggggacg gggacgacac 3120
gtcctccatg gttgggggac gtcgcgccgc accgcgtccg cgctcggggg tggtttcgcg 3180
ctgctcctct tcccgactgg ccatttcctt ctcctatagg cagaaaaaga tcatggagtc 3240
agtcgagaag aaggacagcc taaccgcccc ctctgagttc gccaccaccg cctccaccga 3300
tgccgccaac gcgcctacca ccttccccgt cgaggcaccc ccgcttgagg aggaggaagt 3360
gattatcgag caggacccag gttttgtaag cgaagacgac gaggaccgct cagtaccaac 3420
agaggataaa aagcaagacc aggacaacgc agaggcaaac gaggaacaag tcgggcgggg 3480
ggacgaaagg catggcgact acctagatgt gggagacgac gtgctgttga agcatctgca 3540
gcgccagtgc gccattatct gcgacgcgtt gcaagagcgc agcgatgtgc ccctcgccat 3600
agcggatgtc agccttgcct acgaacgcca cctattctca ccgcgcgtac cccccaaacg 3660
ccaagaaaac ggcacatgcg agcccaaccc gcgcctcaac ttctaccccg tatttgccgt 3720
gccagaggtg cttgccacct atcacatctt tttccaaaac tgcaagatac ccctatcctg 3780
ccgtgccaac cgcagccgag cggacaagca gctggccttg cggcagggcg ctgtcatacc 3840
tgatatcgcc tcgctcaacg aagtgccaaa aatctttgag ggtcttggac gcgacgagaa 3900
gcgcgcggca aacgctctgc aacaggaaaa cagcgaaaat gaaagtcact ctggagtgtt 3960
ggtggaactc gagggtgaca acgcgcgcct agccgtacta aaacgcagca tcgaggtcac 4020
ccactttgcc tacccggcac ttaacctacc ccccaaggtc atgagcacag tcatgagtga 4080
gctgatcgtg cgccgtgcgc agcccctgga gagggatgca aatttgcaag aacaaacaga 4140
ggagggccta cccgcagttg gcgacgagca gctagcgcgc tggcttcaaa cgcgcgagcc 4200
tgccgacttg gaggagcgac gcaaactaat gatggccgca gtgctcgtta ccgtggagct 4260
tgagtgcatg cagcggttct ttgctgaccc ggagatgcag cgcaagctag aggaaacatt 4320
gcactacacc tttcgacagg gctacgtacg ccaggcctgc aagatctcca acgtggagct 4380
ctgcaacctg gtctcctacc ttggaatttt gcacgaaaac cgccttgggc aaaacgtgct 4440
tcattccacg ctcaagggcg aggcgcgccg cgactacgtc cgcgactgcg tttacttatt 4500
tctatgctac acctggcaga cggccatggg cgtttggcag cagtgcttgg aggagtgcaa 4560
cctcaaggag ctgcagaaac tgctaaagca aaacttgaag gacctatgga cggccttcaa 4620
cgagcgctcc gtggccgcgc acctggcgga catcattttc cccgaacgcc tgcttaaaac 4680
cctgcaacag ggtctgccag acttcaccag tcaaagcatg ttgcagaact ttaggaactt 4740
tatcctagag cgctcaggaa tcttgcccgc cacctgctgt gcacttccta gcgactttgt 4800
gcccattaag taccgcgaat gccctccgcc gctttggggc cactgctacc ttctgcagct 4860
agccaactac cttgcctacc actctgacat aatggaagac gtgagcggtg acggtctact 4920
ggagtgtcac tgtcgctgca acctatgcac cccgcaccgc tccctggttt gcaattcgca 4980
gctgcttaac gaaagtcaaa ttatcggtac ctttgagctg cagggtccct cgcctgacga 5040
aaagtccgcg gctccggggt tgaaactcac tccggggctg tggacgtcgg cttaccttcg 5100
caaatttgta cctgaggact accacgccca cgagattagg ttctacgaag accaatcccg 5160
cccgccaaat gcggagctta ccgcctgcgt cattacccag ggccacattc ttggccaatt 5220
gcaagccatc aacaaagccc gccaagagtt tctgctacga aagggacggg gggtttactt 5280
ggacccccag tccggcgagg agctcaaccc aatccccccg ccgccgcagc cctatcagca 5340
gcagccgcgg gcccttgctt cccaggatgg cacccaaaaa gaagctgcag ctgccgccgc 5400
cacccacgga cgaggaggaa tactgggaca gtcaggcaga ggaggttttg gacgaggagg 5460
aggaggacat gatggaagac tgggagagcc tagacgagga agcttccgag gtcgaagagg 5520
tgtcagacga aacaccgtca ccctcggtcg cattcccctc gccggcgccc cagaaatcgg 5580
caaccggttc cagcatggct acaacctccg ctcctcaggc gccgccggca ctgcccgttc 5640
gccgacccaa ccgtagatgg gacaccactg gaaccagggc cggtaagtcc aagcagccgc 5700
cgccgttagc ccaagagcaa caacagcgcc aaggctaccg ctcatggcgc gggcacaaga 5760
acgccatagt tgcttgcttg caagactgtg ggggcaacat ctccttcgcc cgccgctttc 5820
ttctctacca tcacggcgtg gccttccccc gtaacatcct gcattactac cgtcatctct 5880
acagcccata ctgcaccggc ggcagcggca gcggcagcaa cagcagcggc cacacagaag 5940
caaaggcgac cggatagcaa gactctgaca aagcccaaga aatccacagc ggcggcagca 6000
gcaggaggag gagcgctgcg tctggcgccc aacgaacccg tatcgacccg cgagcttaga 6060
aacaggattt ttcccactct gtatgctata tttcaacaga gcaggggcca agaacaagag 6120
ctgaaaataa aaaacaggtc tctgcgatcc ctcacccgca gctgcctgta tcacaaaagc 6180
gaagatcagc ttcggcgcac gctggaagac gcggaggctc tcttcagtaa atactgcgcg 6240
ctgactctta aggactagtt tcgcgccctt tctcaaattt aagcgcgaaa actacgtcat 6300
ctccagcggc cacacccggc gccagcacct gtcgtcagcg ccattatgag caaggaaatt 6360
cccacgccct acatgtggag ttaccagcca caaatgggac ttgcggctgg agctgcccaa 6420
gactactcaa cccgaataaa ctacatgagc gcgggacccc acatgatatc ccgggtcaac 6480
ggaatccgcg cccaccgaaa ccgaattctc ttggaacagg cggctattac caccacacct 6540
cgtaataacc ttaatccccg tagttggccc gctgccctgg tgtaccagga aagtcccgct 6600
cccaccactg tggtacttcc cagagacgcc caggccgaag ttcagatgac taactcaggg 6660
gcgcagcttg cgggcggctt tcgtcacagg gtgcggtcgc ccgggcgacg taggttttag 6720
ggcggagtaa cttgtatgtg ttgggaattg tagttttctt aaaatgggaa gttacgtaac 6780
gtgggaaaac ggaagtgacg atttgaggaa gttgtgggtt ttttggcttt cgtttctggg 6840
cgtaggttcg cgtgcggttt tctgggtgtt ttttgtggac tttaaccgtt acgtcatttt 6900
ttagtcctat atatactcgc tctgcacttg gccctttttt acactgtgac tgattgagct 6960
ggtgccgtgt cgagtggtgt ttttttaata ggttttcttt tttactggta aggctgactg 7020
ttatggctgc cgctgtggaa gcgctgtatg ttgttctgga gcgggagggt gctattttgc 7080
ctaggcagga gggtttttca ggtgtttatg tgtttttctc tcctattaat tttgttatac 7140
ctcctatggg ggctgtaatg ttgtctctac gcctgcgggt atgtattccc ccgggctatt 7200
tcggtcgctt tttagcactg accgatgtga atcaacctga tgtgtttacc gagtcttaca 7260
ttatgactcc ggacatgacc gaggagctgt cggtggtgct ttttaatcac ggtgaccagt 7320
ttttttacgg tcacgccggc atggccgtag tccgtcttat gcttataagg gttgtttttc 7380
ctgttgtaag acaggcttct aatgtttaaa tgtttttttg ttattttatt ttgtgtttat 7440
gcagaaaccc gcagacatgt ttgagagaaa aatggtgtct ttttctgtgg tggttccgga 7500
gcttacctgc ctttatctgc atgagcatga ctacgatgtg ctttcttttt tgcgcgaggc 7560
tttgcctgat tttttgagca gcaccttgca ttttatatcg ccgcccatgc aacaagctta 7620
catcggggct acgctggtta gcatagctcc gagtatgcgt gtcataatca gtgtgggttc 7680
ttttgtcatg gttcctggcg gggaagtggc cgcgctggtc cgtgcagacc tgcacgatta 7740
tgttcagctg gccctgcgaa gggacctacg ggatcgcggt atttttgtta atgttccgct 7800
tttgaatctt atacaggtct gtgaggaacc tgaatttttg caatcatgat tcgctgcttg 7860
aggctgaagg tggagggcgc tctggagcag atttttacaa tggccggact taatattcgg 7920
gatttgctta gagatatatt gagaaggtgg cgagatgaga attatttggg catggttgaa 7980
ggtgctggaa tgtttataga ggagattcac cctgaagggt ttagccttta cgtccacttg 8040
gacgtgaggg ccgtttgcct tttggaagcc attgtgcaac atcttacaaa tgccattatc 8100
tgttctttgg ctgtagagtt tgaccacgcc accggagggg agcgcgttca cttaatagat 8160
cttcattttg aggttttgga taatcttttg gaataaaaaa aaaaacatgg ttcttccagc 8220
tcttcccgct cctcccgtgt gtgactcgca gaacgaatgt gtaggttggc tgggtgtggc 8280
ttattctgcg gtggtggatg ttatcagggc agcggcgcat gaaggagttt acatagaacc 8340
cgaagccagg gggcgcctgg atgctttgag agagtggata tactacaact actacacaga 8400
gcgatctaag cggcgagacc ggagacgcag atctgtttgt cacgcccgca cctggttttg 8460
cttcaggaaa tatgactacg tccggcgttc catttggcat gacactacga ccaacacgat 8520
ctcggttgtc tcggcgcact ccgtacagta gggatcgtct acctcctttt gagacagaaa 8580
cccgcgctac catactggag gatcatccgc tgctgcccga atgtaacact ttgacaatgc 8640
acaacgtgag ttacgtgcga ggtcttccct gcagtgtggg atttacgctg attcaggaat 8700
gggttgttcc ctgggatatg gttctaacgc gggaggagct tgtaatcctg aggaagtgta 8760
tgcacgtgtg cctgtgttgt gccaacattg atatcatgac gagcatgatg atccatggtt 8820
acgagtcctg ggctctccac tgtcattgtt ccagtcccgg ttccctgcag tgtatagccg 8880
gcgggcaggt tttggccagc tggtttagga tggtggtgga tggcgccatg tttaatcaga 8940
ggtttatatg gtaccgggag gtggtgaatt acaacatgcc aaaagaggta atgtttatgt 9000
ccagcgtgtt tatgaggggt cgccacttaa tctacctgcg cttgtggtat gatggccacg 9060
tgggttctgt ggtccccgcc atgagctttg gatacagcgc cttgcactgt gggattttga 9120
acaatattgt ggtgctgtgc tgcagttact gtgctgattt aagtgagatc agggtgcgct 9180
gctgtgcccg gaggacaagg cgccttatgc tgcgggcggt gcgaatcatc gctgaggaga 9240
ccactgccat gttgtattcc tgcaggacgg agcggcggcg gcagcagttt attcgcgcgc 9300
tgctgcagca ccaccgccct atcctgatgc acgattatga ctctaccccc atgtaggcgt 9360
ggacttctcc ttcgccgccc gttaagcaac cgcaagttgg acagcagcct gtggctcagc 9420
agctggacag cgacatgaac ttaagtgagc tgcccgggga gtttattaat atcactgatg 9480
agcgtttggc tcgacaggaa accgtgtgga atataacacc taagaatatg tctgttaccc 9540
atgatatgat gctttttaag gccagccggg gagaaaggac tgtgtactct gtgtgttggg 9600
agggaggtgg caggttgaat actagggttc tgtgagtttg attaaggtac ggtgatctgt 9660
ataagctatg tggtggtggg gctatactac tgaatgaaaa atgacttgaa attttctgca 9720
attgaaaaat aaacacgttg aaacataaca caaacgattc tttattcttg ggcaatgtat 9780
gaaaaagtgt aagaggatgt ggcaaatatt tcattaatgt agttgtggcc agaccagtcc 9840
catgaaaatg acatagagta tgcacttgga gttgtgtctc ctgtttcctg tgtaccgttt 9900
agtgtaattc aaccgcggat gtcgcccctc ctgacgcggt aggaggaggg gagggtgccc 9960
tgcatgtctg ccgctgctct tgctcttgcc gctgctgagg aggggggcgc atctgccgca 10020
gcaccggatg catctgggaa aagcaaaaaa ggggctcgtc cctgtttccg gaggaatttg 10080
caagcggggt cttgcatgac ggggaggcaa acccccgttc gccgcagtcc ggccggtccg 10140
agactcgaac cgggggtccc gcgactcaac ccttggaaaa taaccctccg gctacaggga 10200
gcgagccact taatgctttc gctttccagc ctaaccgctt acgctgcgcg cggccagtgg 10260
ccaaaaaagc tagcgcagca gccgccgcgc ctggaaggaa gccaaaagga gcactccccc 10320
gttgtctgac gtcgcacacc tgggttcgac acgcgggcgg taaccgcatg gatcacggcg 10380
gacggccgga tacggggctc gaaccccggt cgtccgccat gatacccttg cgaatttatc 10440
caccagacca cggaagagtg cccgcttaca ggctctcctt ttgcacggtc tagagcgtca 10500
acgattgcgc gcgcctgacc ggccagagcg tcccgaccat ggagcacttt ttgccgctgc 10560
gcaacatctg gaaccgcgtc cgcgactttc cgcgcgcctc caccaccgcc gccggcatca 10620
cctggatgtc caggtacatc tacggatatc atttaattaa gtactgtcga cgcgtacaaa 10680
acgtcaaaag ggcgacacaa aatttattct aaatgcataa taaatactga taacatctta 10740
tagtttgtat tatattttgt attatcgttg acatgtataa ttttgatatc aaaaactgat 10800
tttcccttta ttattttcga gatttatttt cttaattctc tttaacaaac tagaaatatt 10860
gtatatacaa aaaatcataa ataatagatg aatagtttaa ttataggtgt tcatcaatcg 10920
aaaaagcaac gtatcttatt taaagtgcgt tgcttttttc tcatttataa ggttaaataa 10980
ttctcatata tcaagcaaag tgacaggcgc ccttaaatat tctgacaaat gctctttccc 11040
taaactcccc ccataaaaaa acccgccgaa gcgggttttt acgttatttg cggattaacg 11100
attactcgtt atcagaaccg cccagggggc ccgagcttaa gactggccgt cgttttacaa 11160
cacagaaaga gtttgtagaa acgcaaaaag gccatccgtc aggggccttc tgcttagttt 11220
gatgcctggc agttccctac tctcgccttc cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc 11280
ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac ggttatccac 11340
agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa 11400
ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt ccataggctc cgcccccctg acgagcatca 11460
caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa gataccaggc 11520
gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc ttaccggata 11580
cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt ggcgctttct catagctcac gctgtaggta 11640
tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca 11700
gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg taagacacga 11760
cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa caggattagc agagcgaggt atgtaggcgg 11820
tgctacagag ttcttgaagt ggtgggctaa ctacggctac actagaagaa cagtatttgg 11880
tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg 11940
caaacaaacc accgctggta gcggtggttt ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag 12000
aaa 12003
<210> 15
<211> 17817
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 15
ttagaaaaac tcatcgagca tcaaatgaaa ctgcaattta ttcatatcag gattatcaat 60
accatatttt tgaaaaagcc gtttctgtaa tgaaggagaa aactcaccga ggcagttcca 120
taggatggca agatcctggt atcggtctgc gattccgact cgtccaacat caatacaacc 180
tattaatttc ccctcgtcaa aaataaggtt atcaagtgag aaatcaccat gagtgacgac 240
tgaatccggt gagaatggca aaagtttatg catttctttc cagacttgtt caacaggcca 300
gccattacgc tcgtcatcaa aatcactcgc atcaaccaaa ccgttattca ttcgtgattg 360
cgcctgagcg aggcgaaata cgcgatcgct gttaaaagga caattacaaa caggaatcga 420
gtgcaaccgg cgcaggaaca ctgccagcgc atcaacaata ttttcacctg aatcaggata 480
ttcttctaat acctggaacg ctgtttttcc ggggatcgca gtggtgagta accatgcatc 540
atcaggagta cggataaaat gcttgatggt cggaagtggc ataaattccg tcagccagtt 600
tagtctgacc atctcatctg taacatcatt ggcaacgcta cctttgccat gtttcagaaa 660
caactctggc gcatcgggct tcccatacaa gcgatagatt gtcgcacctg attgcccgac 720
attatcgcga gcccatttat acccatataa atcagcatcc atgttggaat ttaatcgcgg 780
cctcgacgtt tcccgttgaa tatggctcat attcttcctt tttcaatatt attgaagcat 840
ttatcagggt tattgtctca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga aaaataaaca 900
aataggggtc agtgttacaa ccaattaacc aattctgaac attatcgcga gcccatttat 960
acctgaatat ggctcataac accccttgtt tgcctggcgg cagtagcgcg gtggtcccac 1020
ctgaccccat gccgaactca gaagtgaaac gccgtagcgc cgatggtagt gtggggactc 1080
cccatgcgag agtagggaac tgccaggcat caaataaaac gaaaggctca gtcgaaagac 1140
tgggcctttc gcccgggcta attagggggt gtcgcccttc gctgaagggg tgaccgtata 1200
cgtttaaact taattaatcg acagaagcac catgtccttg ggtccggcct gctgaatgcg 1260
caggcggtcg gccatgcccc aggcttcgtt ttgacatcgg cgcaggtctt tgtagtagtc 1320
ttgcatgagc ctttctaccg gcacttcttc ttctccttcc tcttgtcctg catctcttgc 1380
atctatcgct gcggcggcgg cggagtttgg ccgtaggtgg cgccctcttc ctcccatgcg 1440
tgtgaccccg aagcccctca tcggctgaag cagggctagg tcggcgacaa cgcgctcggc 1500
taatatggcc tgctgcacct gcgtgagggt agactggaag tcatccatgt ccacaaagcg 1560
gtggtatgcg cccgtgttga tggtgtaagt gcagttggcc ataacggacc agttaacggt 1620
ctggtgaccc ggctgcgaga gctcggtgta cctgagacgc gagtaagccc tcgagtcaaa 1680
tacgtagtcg ttgcaagtcc gcaccaggta ctggtatccc accaaaaagt gcggcggcgg 1740
ctggcggtag aggggccagc gtagggtggc cggggctccg ggggcgagat cttccaacat 1800
aaggcgatga tatccgtaga tgtacctgga catccaggtg atgccggcgg cggtggtgga 1860
ggcgcgcgga aagtcgcgga cgcggttcca gatgttgcgc agcggcaaaa agtgctccat 1920
ggtcgggacg ctctggccgg tcaggcgcgc gcaatcgttg acgctctaga ccgtgcaaaa 1980
ggagagcctg taagcgggca ctcttccgtg gtctggtgga taaattcgca agggtatcat 2040
ggcggacgac cggggttcga gccccgtatc cggccgtccg ccgtgatcca tgcggttacc 2100
gcccgcgtgt cgaacccagg tgtgcgacgt cagacaacgg gggagtgctc cttttggctt 2160
ccttccaggc gcggcggctg ctgcgctagc ttttttggcc actggccgcg cgcagcgtaa 2220
gcggttaggc tggaaagcga aagcattaag tggctcgctc cctgtagccg gagggttatt 2280
ttccaagggt tgagtcgcgg gacccccggt tcgagtctcg gaccggccgg actgcggcga 2340
acgggggttt gcctccccgt catgcaagac cccgcttgca aattcctccg gaaacaggga 2400
cgagcccctt ttttgctttt cccagatgca tccggtgctg cggcagatgc gcccccctcc 2460
tcagcagcgg caagagcaag agcagcggca gacatgcagg gcaccctccc ctcctcctac 2520
cgcgtcagga ggggcgacat ccgcggttga cgcggcagca gatggtgatt acgaaccccc 2580
gcggcgccgg gcccggcact acctggactt ggaggagggc gagggcctgg cgcggctagg 2640
agcgccctct cctgagcggt acccaagggt gcagctgaag cgtgatacgc gtgaggcgta 2700
cgtgccgcgg cagaacctgt ttcgcgaccg cgagggagag gagcccgagg agatgcggga 2760
tcgaaagttc cacgcagggc gcgagctgcg gcatggcctg aatcgcgagc ggttgctgcg 2820
cgaggaggac tttgagcccg acgcgcgaac cgggattagt cccgcgcgcg cacacgtggc 2880
ggccgccgac ctggtaaccg catacgagca gacggtgaac caggagatta actttcaaaa 2940
aagctttaac aaccacgtgc gtacgcttgt ggcgcgcgag gaggtggcta taggactgat 3000
gcatctgtgg gactttgtaa gcgcgctgga gcaaaaccca aatagcaagc cgctcatggc 3060
gcagctgttc cttatagtgc agcacagcag ggacaacgag gcattcaggg atgcgctgct 3120
aaacatagta gagcccgagg gccgctggct gctcgatttg ataaacatcc tgcagagcat 3180
agtggtgcag gagcgcagct tgagcctggc tgacaaggtg gccgccatca actattccat 3240
gcttagcctg ggcaagtttt acgcccgcaa gatataccat accccttacg ttcccataga 3300
caaggaggta aagatcgagg ggttctacat gcgcatggcg ctgaaggtgc ttaccttgag 3360
cgacgacctg ggcgtttatc gcaacgagcg catccacaag gccgtgagcg tgagccggcg 3420
gcgcgagctc agcgaccgcg agctgatgca cagcctgcaa agggccctgg ctggcacggg 3480
cagcggcgat agagaggccg agtcctactt tgacgcgggc gctgacctgc gctgggcccc 3540
aagccgacgc gccctggagg cagctggggc cggacctggg ctggcggtgg cacccgcgcg 3600
cgctggcaac gtcggcggcg tggaggaata tgacgaggac gatgagtacg agccagagga 3660
cggcgagtac taagcggtga tgtttctgat cagatgatgc aagacgcaac ggacccggcg 3720
gtgcgggcgg cgctgcagag ccagccgtcc ggccttaact ccacggacga ctggcgccag 3780
gtcatggacc gcatcatgtc gctgactgcg cgcaatcctg acgcgttccg gcagcagccg 3840
caggccaacc ggctctccgc aattctggaa gcggtggtcc cggcgcgcgc aaaccccacg 3900
cacgagaagg tgctggcgat cgtaaacgcg ctggccgaaa acagggccat ccggcccgac 3960
gaggccggcc tggtctacga cgcgctgctt cagcgcgtgg ctcgttacaa cagcggcaac 4020
gtgcagacca acctggaccg gctggtgggg gatgtgcgcg aggccgtggc gcagcgtgag 4080
cgcgcgcagc agcagggcaa cctgggctcc atggttgcac taaacgcctt cctgagtaca 4140
cagcccgcca acgtgccgcg gggacaggag gactacacca actttgtgag cgcactgcgg 4200
ctaatggtga ctgagacacc gcaaagtgag gtgtaccagt ctgggccaga ctattttttc 4260
cagaccagta gacaaggcct gcagaccgta aacctgagcc aggctttcaa aaacttgcag 4320
gggctgtggg gggtgcgggc tcccacaggc gaccgcgcga ccgtgtctag cttgctgacg 4380
cccaactcgc gcctgttgct gctgctaata gcgcccttca cggacagtgg cagcgtgtcc 4440
cgggacacat acctaggtca cttgctgaca ctgtaccgcg aggccatagg tcaggcgcat 4500
gtggacgagc atactttcca ggagattaca agtgtcagcc gcgcgctggg gcaggaggac 4560
acgggcagcc tggaggcaac cctaaactac ctgctgacca accggcggca gaagatcccc 4620
tcgttgcaca gtttcgcacc ctttggcgca tcccattctc cagtaacttt atgtccatgg 4680
gcgcactcac agacctgggc caaaaccttc tctacgccaa ctccgcccac gcgctagaca 4740
tgacttttga ggtggatccc atggacgagc ccacccttct ttatgttttg tttgaagtct 4800
ttgacgtggt ccgtgtgcac cggccgcacc gcggcgtcat cgaaaccgtg tacctgcgca 4860
cgcccttctc ggccggcaac gccacaacat aaagaagcaa gcaacatcaa caacagctgc 4920
cgccatgggc tccagtgagc aggaactgaa agccattgtc aaagatcttg gttgtgggcc 4980
atattttttg ggcacctatg acaagcgctt tccaggcttt gtttctccac acaagctcgc 5040
ctgcgccata gtcaatacgg ccggtcgcga gactgggggc gtacactgga tggcctttgc 5100
ctggaacccg cactcaaaaa catgctacct ctttgagccc tttggctttt ctgaccagcg 5160
actcaagcag gtttaccagt ttgagtacga gtcactcctg cgccgtagcg ccattgcttc 5220
ttcccccgac cgctgtataa cgctggaaaa gtccacccaa agcgtacagg ggcccaactc 5280
ggccgcctgt ggactattct gctgcatgtt tctccacgcc tttgccaact ggccccaaac 5340
tcccatggat cacaacccca ccatgaacct tattaccggg gtacccaact ccatgctcaa 5400
cagtccccag gtacagccca ccctgcgtcg caaccaggaa cagctctaca gcttcctgga 5460
gcgccactcg ccctacttcc gcagccacag tgcgcagatt aggagcgcca cttctttttg 5520
tcacttgaaa aacatgtaaa aataatgtac tagagacact ttcaataaag gcaaatgctt 5580
ttatttgtac actctcgggt gattatttac ccccaccctt gccgtctgcg ccgtttaaaa 5640
atcaaagggg ttctgccgcg catcgctatg cgccactggc agggacacgt tgcgatactg 5700
gtgtttagtg ctccacttaa actcaggcac aaccatccgc ggcagctcgg tgaagttttc 5760
actccacagg ctgcgcacca tcaccaacgc gtttagcagg tcgggcgccg atatcttgaa 5820
gtcgcagttg gggcctccgc cctgcgcgcg cgagttgcga tacacagggt tgcagcactg 5880
gaacactatc agcgccgggt ggtgcacgct ggccagcacg ctcttgtcgg agatcagatc 5940
cgcgtccagg tcctccgcgt tgctcagggc gaacggagtc aactttggta gctgccttcc 6000
caaaaagggc gcgtgcccag gctttgagtt gcactcgcac cgtagtggca tcaaaaggtg 6060
accgtgcccg gtctgggcgt taggatacag cgcctgcata aaagccttga tctgcttaaa 6120
agccacctga gcctttgcgc cttcagagaa gaacatgccg caagacttgc cggaaaactg 6180
attggccgga caggccgcgt cgtgcacgca gcaccttgcg tcggtgttgg agatctgcac 6240
cacatttcgg ccccaccggt tcttcacgat cttggccttg ctagactgct ccttcagcgc 6300
gcgctgcccg ttttcgctcg tcacatccat ttcaatcacg tgctccttat ttatcataat 6360
gcttccgtgt agacacttaa gctcgccttc gatctcagcg cagcggtgca gccacaacgc 6420
gcagcccgtg ggctcgtgat gcttgtaggt cacctctgca aacgactgca ggtacgcctg 6480
caggaatcgc cccatcatcg tcacaaaggt cttgttgctg gtgaaggtca gctgcaaccc 6540
gcggtgctcc tcgttcagcc aggtcttgca tacggccgcc agagcttcca cttggtcagg 6600
cagtagtttg aagttcgcct ttagatcgtt atccacgtgg tacttgtcca tcagcgcgcg 6660
cgcagcctcc atgcccttct cccacgcaga cacgatcggc acactcagcg ggttcatcac 6720
cgtaatttca ctttccgctt cgctgggctc ttcctcttcc tcttgcgtcc gcataccacg 6780
cgccactggg tcgtcttcat tcagccgccg cactgtgcgc ttacctcctt tgccatgctt 6840
gattagcacc ggtgggttgc tgaaacccac catttgtagc gccacatctt ctctttcttc 6900
ctcgctgtcc acgattacct ctggtgatgg cgggcgctcg ggcttgggag aagggcgctt 6960
ctttttcttc ttgggcgcaa tggccaaatc cgccgccgag gtcgatggcc gcgggctggg 7020
tgtgcgcggc accagcgcgt cttgtgatga gtcttcctcg tcctcggact cgatacgccg 7080
cctcatccgc ttttttgggg gcgcccgggg aggcggcggc gacggggacg gggacgacac 7140
gtcctccatg gttgggggac gtcgcgccgc accgcgtccg cgctcggggg tggtttcgcg 7200
ctgctcctct tcccgactgg ccatttcctt ctcctatagg cagaaaaaga tcatggagtc 7260
agtcgagaag aaggacagcc taaccgcccc ctctgagttc gccaccaccg cctccaccga 7320
tgccgccaac gcgcctacca ccttccccgt cgaggcaccc ccgcttgagg aggaggaagt 7380
gattatcgag caggacccag gttttgtaag cgaagacgac gaggaccgct cagtaccaac 7440
agaggataaa aagcaagacc aggacaacgc agaggcaaac gaggaacaag tcgggcgggg 7500
ggacgaaagg catggcgact acctagatgt gggagacgac gtgctgttga agcatctgca 7560
gcgccagtgc gccattatct gcgacgcgtt gcaagagcgc agcgatgtgc ccctcgccat 7620
agcggatgtc agccttgcct acgaacgcca cctattctca ccgcgcgtac cccccaaacg 7680
ccaagaaaac ggcacatgcg agcccaaccc gcgcctcaac ttctaccccg tatttgccgt 7740
gccagaggtg cttgccacct atcacatctt tttccaaaac tgcaagatac ccctatcctg 7800
ccgtgccaac cgcagccgag cggacaagca gctggccttg cggcagggcg ctgtcatacc 7860
tgatatcgcc tcgctcaacg aagtgccaaa aatctttgag ggtcttggac gcgacgagaa 7920
gcgcgcggca aacgctctgc aacaggaaaa cagcgaaaat gaaagtcact ctggagtgtt 7980
ggtggaactc gagggtgaca acgcgcgcct agccgtacta aaacgcagca tcgaggtcac 8040
ccactttgcc tacccggcac ttaacctacc ccccaaggtc atgagcacag tcatgagtga 8100
gctgatcgtg cgccgtgcgc agcccctgga gagggatgca aatttgcaag aacaaacaga 8160
ggagggccta cccgcagttg gcgacgagca gctagcgcgc tggcttcaaa cgcgcgagcc 8220
tgccgacttg gaggagcgac gcaaactaat gatggccgca gtgctcgtta ccgtggagct 8280
tgagtgcatg cagcggttct ttgctgaccc ggagatgcag cgcaagctag aggaaacatt 8340
gcactacacc tttcgacagg gctacgtacg ccaggcctgc aagatctcca acgtggagct 8400
ctgcaacctg gtctcctacc ttggaatttt gcacgaaaac cgccttgggc aaaacgtgct 8460
tcattccacg ctcaagggcg aggcgcgccg cgactacgtc cgcgactgcg tttacttatt 8520
tctatgctac acctggcaga cggccatggg cgtttggcag cagtgcttgg aggagtgcaa 8580
cctcaaggag ctgcagaaac tgctaaagca aaacttgaag gacctatgga cggccttcaa 8640
cgagcgctcc gtggccgcgc acctggcgga catcattttc cccgaacgcc tgcttaaaac 8700
cctgcaacag ggtctgccag acttcaccag tcaaagcatg ttgcagaact ttaggaactt 8760
tatcctagag cgctcaggaa tcttgcccgc cacctgctgt gcacttccta gcgactttgt 8820
gcccattaag taccgcgaat gccctccgcc gctttggggc cactgctacc ttctgcagct 8880
agccaactac cttgcctacc actctgacat aatggaagac gtgagcggtg acggtctact 8940
ggagtgtcac tgtcgctgca acctatgcac cccgcaccgc tccctggttt gcaattcgca 9000
gctgcttaac gaaagtcaaa ttatcggtac ctttgagctg cagggtccct cgcctgacga 9060
aaagtccgcg gctccggggt tgaaactcac tccggggctg tggacgtcgg cttaccttcg 9120
caaatttgta cctgaggact accacgccca cgagattagg ttctacgaag accaatcccg 9180
cccgccaaat gcggagctta ccgcctgcgt cattacccag ggccacattc ttggccaatt 9240
gcaagccatc aacaaagccc gccaagagtt tctgctacga aagggacggg gggtttactt 9300
ggacccccag tccggcgagg agctcaaccc aatccccccg ccgccgcagc cctatcagca 9360
gcagccgcgg gcccttgctt cccaggatgg cacccaaaaa gaagctgcag ctgccgccgc 9420
cacccacgga cgaggaggaa tactgggaca gtcaggcaga ggaggttttg gacgaggagg 9480
aggaggacat gatggaagac tgggagagcc tagacgagga agcttccgag gtcgaagagg 9540
tgtcagacga aacaccgtca ccctcggtcg cattcccctc gccggcgccc cagaaatcgg 9600
caaccggttc cagcatggct acaacctccg ctcctcaggc gccgccggca ctgcccgttc 9660
gccgacccaa ccgtagatgg gacaccactg gaaccagggc cggtaagtcc aagcagccgc 9720
cgccgttagc ccaagagcaa caacagcgcc aaggctaccg ctcatggcgc gggcacaaga 9780
acgccatagt tgcttgcttg caagactgtg ggggcaacat ctccttcgcc cgccgctttc 9840
ttctctacca tcacggcgtg gccttccccc gtaacatcct gcattactac cgtcatctct 9900
acagcccata ctgcaccggc ggcagcggca gcggcagcaa cagcagcggc cacacagaag 9960
caaaggcgac cggatagcaa gactctgaca aagcccaaga aatccacagc ggcggcagca 10020
gcaggaggag gagcgctgcg tctggcgccc aacgaacccg tatcgacccg cgagcttaga 10080
aacaggattt ttcccactct gtatgctata tttcaacaga gcaggggcca agaacaagag 10140
ctgaaaataa aaaacaggtc tctgcgatcc ctcacccgca gctgcctgta tcacaaaagc 10200
gaagatcagc ttcggcgcac gctggaagac gcggaggctc tcttcagtaa atactgcgcg 10260
ctgactctta aggactagtt tcgcgccctt tctcaaattt aagcgcgaaa actacgtcat 10320
ctccagcggc cacacccggc gccagcacct gtcgtcagcg ccattatgag caaggaaatt 10380
cccacgccct acatgtggag ttaccagcca caaatgggac ttgcggctgg agctgcccaa 10440
gactactcaa cccgaataaa ctacatgagc gcgggacccc acatgatatc ccgggtcaac 10500
ggaatccgcg cccaccgaaa ccgaattctc ttggaacagg cggctattac caccacacct 10560
cgtaataacc ttaatccccg tagttggccc gctgccctgg tgtaccagga aagtcccgct 10620
cccaccactg tggtacttcc cagagacgcc caggccgaag ttcagatgac taactcaggg 10680
gcgcagcttg cgggcggctt tcgtcacagg gtgcggtcgc ccgggcaggg tataactcac 10740
ctgacaatca gagggcgagg tattcagctc aacgacgagt cggtgagctc ctcgcttggt 10800
ctccgtccgg acgggacatt tcagatcggc ggcgccggcc gtccttcatt cacgcctcgt 10860
caggcaatcc taactctgca gacctcgtcc tctgagccgc gctctggagg cattggaact 10920
ctgcaattta ttgaggagtt tgtgccatcg gtctacttta accccttctc gggacctccc 10980
ggccactatc cggatcaatt tattcctaac tttgacgcgg taaaggactc ggcggacggc 11040
tacgactgaa tgttaagtgg agaggcagag caactgcgcc tgaaacacct ggtccactgt 11100
cgccgccaca agtgctttgc ccgcgactcc ggtgagtttt gctactttga attgcccgag 11160
gatcatatcg agggcccggc gcacggcgtc cggcttaccg cccagggaga gcttgcccgt 11220
agcctgattc gggagtttac ccagcgcccc ctgctagttg agcgggacag gggaccctgt 11280
gttctcactg tgatttgcaa ctgtcgatct tattcccttt aactaataaa aaaaaataat 11340
aaagcatcac ttacttaaaa tcagttagca aatttctgtc cagtttattc agcagcacct 11400
ccttgccctc ctcccagctc tggtattgca gcttcctcct ggctgcaaac tttctccaca 11460
atctaaatgg aatgtcagtt tcctcctgtt cctgtccatc cgcacccact atcttcatgt 11520
tgttgcagat gaagcgcgca agaccgtctg aagatacctt caaccccgtg tatccatatg 11580
acacggaaac cggtcctcca actgtgcctt ttcttactcc tccctttgta tcccccaatg 11640
ggtttcaaga gagtccccct ggggtactct ctttgcgcct atccgaacct ctagttacct 11700
ccaatggcat gcttgcgctc aaaatgggca acggcctctc tctggacgag gccggcaacc 11760
ttacctccca aaatgtaacc actgtgagcc cacctctcaa aaaaaccaag tcaaacataa 11820
acctggaaat atctgcaccc ctcacagtta cctcagaagc cctaactgtg gctgccgccg 11880
cacctctaat ggtcgcgggc aacacactca ccatgcaatc acaggccccg ctaaccgtgc 11940
acgactccaa acttagcatt gccacccaag gacccctcac agtgtcagaa ggaaagctag 12000
ccctgcaaac atcaggcccc ctcaccacca ccgatagcag tacccttact atcactgcct 12060
caccccctct aactactgcc actggtagct tgggcattga cttgaaagag cccatttata 12120
cacaaaatgg aaaactagga ctaaagtacg gggctccttt gcatgtaaca gacgacctaa 12180
acactttgac cgtagcaact ggtccaggtg tgactattaa taatacttcc ttgcaaacta 12240
aagttactgg agccttgggt tttgattcac aaggcaatat gcaacttaat gtagcaggag 12300
gactaaggat tgattctcaa aacagacgcc ttatacttga tgttagttat ccgtttgatg 12360
ctcaaaacca actaaatcta agactaggac agggccctct ttttataaac tcagcccaca 12420
acttggatat taactacaac aaaggccttt acttgtttac agcttcaaac aattccaaaa 12480
agcttgaggt taacctaagc actgccaagg ggttgatgtt tgacgctaca gccatagcca 12540
ttaatgcagg agatgggctt gaatttggtt cacctaatgc accaaacaca aatcccctca 12600
aaacaaaaat tggccatggc ctagaatttg attcaaacaa ggctatggtt cctaaactag 12660
gaactggcct tagttttgac agcacaggtg ccattacagt aggaaacaaa aataatgata 12720
agctaacttt gtggaccaca ccagctccat ctcctaactg tagactaaat gcagagaaag 12780
atgctaaact cactttggtc ttaacaaaat gtggcagtca aatacttgct acagtttcag 12840
ttttggctgt taaaggcagt ttggctccaa tatctggaac agttcaaagt gctcatctta 12900
ttataagatt tgacgaaaat ggagtgctac taaacaattc cttcctggac ccagaatatt 12960
ggaactttag aaatggagat cttactgaag gcacagccta tacaaacgct gttggattta 13020
tgcctaacct atcagcttat ccaaaatctc acggtaaaac tgccaaaagt aacattgtca 13080
gtcaagttta cttaaacgga gacaaaacta aacctgtaac actaaccatt acactaaacg 13140
gtacacagga aacaggagac acaactccaa gtgcatactc tatgtcattt tcatgggact 13200
ggtctggcca caactacatt aatgaaatat ttgccacatc ctcttacact ttttcataca 13260
ttgcccaaga ataaagaatc gtttgtgtta tgtttcaacg tgtttatttt tcaattgcag 13320
aaaatttcaa gtcatttttc attcagtagt atagccccac caccacatag cttatacaga 13380
tcaccgtacc ttaatcaaac tcacagaacc ctagtattca acctgccacc tccctcccaa 13440
cacacagagt acacagtcct ttctccccgg ctggccttaa aaagcatcat atcatgggta 13500
acagacatat tcttaggtgt tatattccac acggtttcct gtcgagccaa acgctcatca 13560
gtgatattaa taaactcccc gggcagctca cttaagttca tgtcgctgtc cagctgctga 13620
gccacaggct gctgtccaac ttgcggttgc ttaacgggcg gcgaaggaga agtccacgcc 13680
tacatggggg tagagtcata atcgtgcatc aggatagggc ggtggtgctg cagcagcgcg 13740
cgaataaact gctgccgccg ccgctccgtc ctgcaggaat acaacatggc agtggtctcc 13800
tcagcgatga ttcgcaccgc ccgcagcata aggcgccttg tcctccgggc acagcagcgc 13860
accctgatct cacttaaatc agcacagtaa ctgcagcaca gcaccacaat attgttcaaa 13920
atcccacagt gcaaggcgct gtatccaaag ctcatggcgg ggaccacaga acccacgtgg 13980
ccatcatacc acaagcgcag gtagattaag tggcgacccc tcataaacac gctggacata 14040
aacattacct cttttggcat gttgtaattc accacctccc ggtaccatat aaacctctga 14100
ttaaacatgg cgccatccac caccatccta aaccagctgg ccaaaacctg cccgccggct 14160
atacactgca gggaaccggg actggaacaa tgacagtgga gagcccagga ctcgtaacca 14220
tggatcatca tgctcgtcat gatatcaatg ttggcacaac acaggcacac gtgcatacac 14280
ttcctcagga ttacaagctc ctcccgcgtt agaaccatat cccagggaac aacccattcc 14340
tgaatcagcg taaatcccac actgcaggga agacctcgca cgtaactcac gttgtgcatt 14400
gtcaaagtgt tacattcggg cagcagcgga tgatcctcca gtatggtagc gcgggtttct 14460
gtctcaaaag gaggtagacg atccctactg tacggagtgc gccgagacaa ccgagatcgt 14520
gttggtcgta gtgtcatgcc aaatggaacg ccggacgtag tcatatttcc tgaagcaaaa 14580
ccaggtgcgg gcgtgacaaa cagatctgcg tctccggtct cgccgcttag atcgctctgt 14640
gtagtagttg tagtatatcc actctctcaa agcatccagg cgccccctgg cttcgggttc 14700
tatgtaaact ccttcatgcg ccgctgccct gataacatcc accaccgcag aataagccac 14760
acccagccaa cctacacatt cgttctgcga gtcacacacg ggaggagcgg gaagagctgg 14820
aagaaccatg tttttttttt tattccaaaa gattatccaa aacctcaaaa tgaagatcta 14880
ttaagtgaac gcgctcccct ccggtggcgt ggtcaaactc tacagccaaa gaacagataa 14940
tggcatttgt aagatgttgc acaatggctt ccaaaaggca aacggccctc acgtccaagt 15000
ggacgtaaag gctaaaccct tcagggtgaa tctcctctat aaacattcca gcaccttcaa 15060
ccatgcccaa ataattctca tctcgccacc ttctcaatat atctctaagc aaatcccgaa 15120
tattaagtcc ggccattgta aaaatctgct ccagagcgcc ctccaccttc agcctcaagc 15180
agcgaatcat gattgcaaaa attcaggttc ctcacagacc tgtataagat tcaaaagcgg 15240
aacattaaca aaaataccgc gatcccgtag gtcccttcgc agggccagct gaacataatc 15300
gtgcaggtct gcacggacca gcgcggccac ttccccgcca ggaaccatga caaaagaacc 15360
cacactgatt atgacacgca tactcggagc tatgctaacc agcgtagccc cgatgtaagc 15420
ttgttgcatg ggcggcgata taaaatgcaa ggtgctgctc aaaaaatcag gcaaagcctc 15480
gcgcaaaaaa gaaagcacat cgtagtcatg ctcatgcaga taaaggcagg taagctccgg 15540
aaccaccaca gaaaaagaca ccatttttct ctcaaacatg tctgcgggtt tctgcataaa 15600
cacaaaataa aataacaaaa aaacatttaa acattagaag cctgtcttac aacaggaaaa 15660
acaaccctta taagcataag acggactacg gccatgccgg cgtgaccgta aaaaaactgg 15720
tcaccgtgat taaaaagcac caccgacagc tcctcggtca tgtccggagt cataatgtaa 15780
gactcggtaa acacatcagg ttgattcaca tcggtcagtg ctaaaaagcg accgaaatag 15840
cccgggggaa tacatacccg caggcgtaga gacaacatta cagcccccat aggaggtata 15900
acaaaattaa taggagagaa aaacacataa acacctgaaa aaccctcctg cctaggcaaa 15960
atagcaccct cccgctccag aacaacatac agcgcttcca cagcggcagc cataacagtc 16020
agccttacca gtaaaaaaga aaacctatta aaaaaacacc actcgacacg gcaccagctc 16080
aatcagtcac agtgtaaaaa agggccaagt gcagagcgag tatatatagg actaaaaaat 16140
gacgtaacgg ttaaagtcca caaaaaacac ccagaaaacc gcacgcgaac ctacgcccag 16200
aaacgaaagc caaaaaaccc acaacttcct caaatcgtca cttccgtttt cccacgttac 16260
gtaacttccc attttaagaa aactacaatt cccaacacat acaagttact ccgccctaaa 16320
acctacgtca acgttattta aatgtcgacg cgtacaaaac gtcaaaaggg cgacacaaaa 16380
tttattctaa atgcataata aatactgata acatcttata gtttgtatta tattttgtat 16440
tatcgttgac atgtataatt ttgatatcaa aaactgattt tccctttatt attttcgaga 16500
tttattttct taattctctt taacaaacta gaaatattgt atatacaaaa aatcataaat 16560
aatagatgaa tagtttaatt ataggtgttc atcaatcgaa aaagcaacgt atcttattta 16620
aagtgcgttg cttttttctc atttataagg ttaaataatt ctcatatatc aagcaaagtg 16680
acaggcgccc ttaaatattc tgacaaatgc tctttcccta aactcccccc ataaaaaaac 16740
ccgccgaagc gggtttttac gttatttgcg gattaacgat tactcgttat cagaaccgcc 16800
cagggggccc gagcttaaga ctggccgtcg ttttacaaca cagaaagagt ttgtagaaac 16860
gcaaaaaggc catccgtcag gggccttctg cttagtttga tgcctggcag ttccctactc 16920
tcgccttccg cttcctcgct cactgactcg ctgcgctcgg tcgttcggct gcggcgagcg 16980
gtatcagctc actcaaaggc ggtaatacgg ttatccacag aatcagggga taacgcagga 17040
aagaacatgt gagcaaaagg ccagcaaaag gccaggaacc gtaaaaaggc cgcgttgctg 17100
gcgtttttcc ataggctccg cccccctgac gagcatcaca aaaatcgacg ctcaagtcag 17160
aggtggcgaa acccgacagg actataaaga taccaggcgt ttccccctgg aagctccctc 17220
gtgcgctctc ctgttccgac cctgccgctt accggatacc tgtccgcctt tctcccttcg 17280
ggaagcgtgg cgctttctca tagctcacgc tgtaggtatc tcagttcggt gtaggtcgtt 17340
cgctccaagc tgggctgtgt gcacgaaccc cccgttcagc ccgaccgctg cgccttatcc 17400
ggtaactatc gtcttgagtc caacccggta agacacgact tatcgccact ggcagcagcc 17460
actggtaaca ggattagcag agcgaggtat gtaggcggtg ctacagagtt cttgaagtgg 17520
tgggctaact acggctacac tagaagaaca gtatttggta tctgcgctct gctgaagcca 17580
gttaccttcg gaaaaagagt tggtagctct tgatccggca aacaaaccac cgctggtagc 17640
ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcagatt acgcgcagaa aaaaaggatc tcaagaagat 17700
cctttgatct tttctacggg gtctgacgct cagtggaacg acgcgcgcgt aactcacgtt 17760
aagggatttt ggtcatgagc ttgcgccgtc ccgtcaagtc agcgtaatgc tctgctt 17817
<210> 16
<211> 743
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 16
tgatatccgt agatgtacct ggacatccag gtgatgccgg cggcggtggt ggaggcgcgc 60
ggaaagtcgc ggacgcggtt ccagatgttg cgcagcggca aaaagtgctc catggtcggg 120
acgctctggc cggtcaggcg cgcgcaatcg ttgacgctct agaccgtgca aaaggagagc 180
ctgtaagcgg gcactcttcc gtggtctggt ggataaattc gcaagggtat catggcggac 240
gaccggggtt cgagccccgt atccggccgt ccgccgtgat ccatgcggtt accgcccgcg 300
tgtcgaaccc aggtgtgcga cgtcagacaa cgggggagtg ctccttttgg cttccttcca 360
ggcgcggcgg ctgctgcgct agcttttttg gccactggcc gcgcgcagcg taagcggtta 420
ggctggaaag cgaaagcatt aagtggctcg ctccctgtag ccggagggtt attttccaag 480
ggttgagtcg cgggaccccc ggttcgagtc tcggaccggc cggactgcgg cgaacggggg 540
tttgcctccc cgtcatgcaa gaccccgctt gcaaattcct ccggaaacag ggacgagccc 600
cttttttgct tttcccagat gcatccggtg ctgcggcaga tgcgcccccc tcctcagcag 660
cggcaagagc aagagcagcg gcagacatgc agggcaccct cccctcctcc taccgcgtca 720
ggaggggcga catccgcggt tga 743
<210> 17
<211> 3201
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 17
cgacgtaggt tttagggcgg agtaacttgt atgtgttggg aattgtagtt ttcttaaaat 60
gggaagttac gtaacgtggg aaaacggaag tgacgatttg aggaagttgt gggttttttg 120
gctttcgttt ctgggcgtag gttcgcgtgc ggttttctgg gtgttttttg tggactttaa 180
ccgttacgtc attttttagt cctatatata ctcgctctgc acttggccct tttttacact 240
gtgactgatt gagctggtgc cgtgtcgagt ggtgtttttt taataggttt tcttttttac 300
tggtaaggct gactgttatg gctgccgctg tggaagcgct gtatgttgtt ctggagcggg 360
agggtgctat tttgcctagg caggagggtt tttcaggtgt ttatgtgttt ttctctccta 420
ttaattttgt tatacctcct atgggggctg taatgttgtc tctacgcctg cgggtatgta 480
ttcccccggg ctatttcggt cgctttttag cactgaccga tgtgaatcaa cctgatgtgt 540
ttaccgagtc ttacattatg actccggaca tgaccgagga gctgtcggtg gtgcttttta 600
atcacggtga ccagtttttt tacggtcacg ccggcatggc cgtagtccgt cttatgctta 660
taagggttgt ttttcctgtt gtaagacagg cttctaatgt ttaaatgttt ttttgttatt 720
ttattttgtg tttatgcaga aacccgcaga catgtttgag agaaaaatgg tgtctttttc 780
tgtggtggtt ccggagctta cctgccttta tctgcatgag catgactacg atgtgctttc 840
ttttttgcgc gaggctttgc ctgatttttt gagcagcacc ttgcatttta tatcgccgcc 900
catgcaacaa gcttacatcg gggctacgct ggttagcata gctccgagta tgcgtgtcat 960
aatcagtgtg ggttcttttg tcatggttcc tggcggggaa gtggccgcgc tggtccgtgc 1020
agacctgcac gattatgttc agctggccct gcgaagggac ctacgggatc gcggtatttt 1080
tgttaatgtt ccgcttttga atcttataca ggtctgtgag gaacctgaat ttttgcaatc 1140
atgattcgct gcttgaggct gaaggtggag ggcgctctgg agcagatttt tacaatggcc 1200
ggacttaata ttcgggattt gcttagagat atattgagaa ggtggcgaga tgagaattat 1260
ttgggcatgg ttgaaggtgc tggaatgttt atagaggaga ttcaccctga agggtttagc 1320
ctttacgtcc acttggacgt gagggccgtt tgccttttgg aagccattgt gcaacatctt 1380
acaaatgcca ttatctgttc tttggctgta gagtttgacc acgccaccgg aggggagcgc 1440
gttcacttaa tagatcttca ttttgaggtt ttggataatc ttttggaata aaaaaaaaaa 1500
catggttctt ccagctcttc ccgctcctcc cgtgtgtgac tcgcagaacg aatgtgtagg 1560
ttggctgggt gtggcttatt ctgcggtggt ggatgttatc agggcagcgg cgcatgaagg 1620
agtttacata gaacccgaag ccagggggcg cctggatgct ttgagagagt ggatatacta 1680
caactactac acagagcgat ctaagcggcg agaccggaga cgcagatctg tttgtcacgc 1740
ccgcacctgg ttttgcttca ggaaatatga ctacgtccgg cgttccattt ggcatgacac 1800
tacgaccaac acgatctcgg ttgtctcggc gcactccgta cagtagggat cgtctacctc 1860
cttttgagac agaaacccgc gctaccatac tggaggatca tccgctgctg cccgaatgta 1920
acactttgac aatgcacaac gtgagttacg tgcgaggtct tccctgcagt gtgggattta 1980
cgctgattca ggaatgggtt gttccctggg atatggttct aacgcgggag gagcttgtaa 2040
tcctgaggaa gtgtatgcac gtgtgcctgt gttgtgccaa cattgatatc atgacgagca 2100
tgatgatcca tggttacgag tcctgggctc tccactgtca ttgttccagt cccggttccc 2160
tgcagtgtat agccggcggg caggttttgg ccagctggtt taggatggtg gtggatggcg 2220
ccatgtttaa tcagaggttt atatggtacc gggaggtggt gaattacaac atgccaaaag 2280
aggtaatgtt tatgtccagc gtgtttatga ggggtcgcca cttaatctac ctgcgcttgt 2340
ggtatgatgg ccacgtgggt tctgtggtcc ccgccatgag ctttggatac agcgccttgc 2400
actgtgggat tttgaacaat attgtggtgc tgtgctgcag ttactgtgct gatttaagtg 2460
agatcagggt gcgctgctgt gcccggagga caaggcgcct tatgctgcgg gcggtgcgaa 2520
tcatcgctga ggagaccact gccatgttgt attcctgcag gacggagcgg cggcggcagc 2580
agtttattcg cgcgctgctg cagcaccacc gccctatcct gatgcacgat tatgactcta 2640
cccccatgta ggcgtggact tctccttcgc cgcccgttaa gcaaccgcaa gttggacagc 2700
agcctgtggc tcagcagctg gacagcgaca tgaacttaag tgagctgccc ggggagttta 2760
ttaatatcac tgatgagcgt ttggctcgac aggaaaccgt gtggaatata acacctaaga 2820
atatgtctgt tacccatgat atgatgcttt ttaaggccag ccggggagaa aggactgtgt 2880
actctgtgtg ttgggaggga ggtggcaggt tgaatactag ggttctgtga gtttgattaa 2940
ggtacggtga tctgtataag ctatgtggtg gtggggctat actactgaat gaaaaatgac 3000
ttgaaatttt ctgcaattga aaaataaaca cgttgaaaca taacacaaac gattctttat 3060
tcttgggcaa tgtatgaaaa agtgtaagag gatgtggcaa atatttcatt aatgtagttg 3120
tggccagacc agtcccatga aaatgacata gagtatgcac ttggagttgt gtctcctgtt 3180
tcctgtgtac cgtttagtgt a 3201
<210> 18
<211> 5336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 18
caccctgtga cgaaagccgc ccgcaagctg cgcccctgag ttagtcatct gaacttcggc 60
ctgggcgtct ctgggaagta ccacagtggt gggagcggga ctttcctggt acaccagggc 120
agcgggccaa ctacggggat taaggttatt acgaggtgtg gtggtaatag ccgcctgttc 180
caagagaatt cggtttcggt gggcgcggat tccgttgacc cgggatatca tgtggggtcc 240
cgcgctcatg tagtttattc gggttgagta gtcttgggca gctccagccg caagtcccat 300
ttgtggctgg taactccaca tgtagggcgt gggaatttcc ttgctcataa tggcgctgac 360
gacaggtgct ggcgccgggt gtggccgctg gagatgacgt agttttcgcg cttaaatttg 420
agaaagggcg cgaaactagt ccttaagagt cagcgcgcag tatttactga agagagcctc 480
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gagggatcgc agagacctgt tttttatttt cagctcttgt tcttggcccc tgctctgttg 600
aaatatagca tacagagtgg gaaaaatcct gtttctaagc tcgcgggtcg atacgggttc 660
gttgggcgcc agacgcagcg ctcctcctcc tgctgctgcc gccgctgtgg atttcttggg 720
ctttgtcaga gtcttgctat ccggtcgcct ttgcttctgt gtggccgctg ctgttgctgc 780
cgctgccgct gccgccggtg cagtatgggc tgtagagatg acggtagtaa tgcaggatgt 840
tacgggggaa ggccacgccg tgatggtaga gaagaaagcg gcgggcgaag gagatgttgc 900
ccccacagtc ttgcaagcaa gcaactatgg cgttcttgtg cccgcgccat gagcggtagc 960
cttggcgctg ttgttgctct tgggctaacg gcggcggctg cttggactta ccggccctgg 1020
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gagcggaggt tgtagccatg ctggaaccgg ttgccgattt ctggggcgcc ggcgagggga 1140
atgcgaccga gggtgacggt gtttcgtctg acacctcttc gacctcggaa gcttcctcgt 1200
ctaggctctc ccagtcttcc atcatgtcct cctcctcctc gtccaaaacc tcctctgcct 1260
gactgtccca gtattcctcc tcgtccgtgg gtggcggcgg cagctgcagc ttctttttgg 1320
gtgccatcct gggaagcaag ggcccgcggc tgctgctgat agggctgcgg cggcgggggg 1380
attgggttga gctcctcgcc ggactggggg tccaagtaaa ccccccgtcc ctttcgtagc 1440
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ggagtgagtt tcaaccccgg agccgcggac ttttcgtcag gcgagggacc ctgcagctca 1680
aaggtaccga taatttgact ttcgttaagc agctgcgaat tgcaaaccag ggagcggtgc 1740
ggggtgcata ggttgcagcg acagtgacac tccagtagac cgtcaccgct cacgtcttcc 1800
attatgtcag agtggtaggc aaggtagttg gctagctgca gaaggtagca gtggccccaa 1860
agcggcggag ggcattcgcg gtacttaatg ggcacaaagt cgctaggaag tgcacagcag 1920
gtggcgggca agattcctga gcgctctagg ataaagttcc taaagttctg caacatgctt 1980
tgactggtga agtctggcag accctgttgc agggttttaa gcaggcgttc ggggaaaatg 2040
atgtccgcca ggtgcgcggc cacggagcgc tcgttgaagg ccgtccatag gtccttcaag 2100
ttttgcttta gcagtttctg cagctccttg aggttgcact cctccaagca ctgctgccaa 2160
acgcccatgg ccgtctgcca ggtgtagcat agaaataagt aaacgcagtc gcggacgtag 2220
tcgcggcgcg cctcgccctt gagcgtggaa tgaagcacgt tttgcccaag gcggttttcg 2280
tgcaaaattc caaggtagga gaccaggttg cagagctcca cgttggagat cttgcaggcc 2340
tggcgtacgt agccctgtcg aaaggtgtag tgcaatgttt cctctagctt gcgctgcatc 2400
tccgggtcag caaagaaccg ctgcatgcac tcaagctcca cggtaacgag cactgcggcc 2460
atcattagtt tgcgtcgctc ctccaagtcg gcaggctcgc gcgtttgaag ccagcgcgct 2520
agctgctcgt cgccaactgc gggtaggccc tcctctgttt gttcttgcaa atttgcatcc 2580
ctctccaggg gctgcgcacg gcgcacgatc agctcactca tgactgtgct catgaccttg 2640
gggggtaggt taagtgccgg gtaggcaaag tgggtgacct cgatgctgcg ttttagtacg 2700
gctaggcgcg cgttgtcacc ctcgagttcc accaacactc cagagtgact ttcattttcg 2760
ctgttttcct gttgcagagc gtttgccgcg cgcttctcgt cgcgtccaag accctcaaag 2820
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agctgcttgt ccgctcggct gcggttggca cggcaggata ggggtatctt gcagttttgg 2940
aaaaagatgt gataggtggc aagcacctct ggcacggcaa atacggggta gaagttgagg 3000
cgcgggttgg gctcgcatgt gccgttttct tggcgtttgg ggggtacgcg cggtgagaat 3060
aggtggcgtt cgtaggcaag gctgacatcc gctatggcga ggggcacatc gctgcgctct 3120
tgcaacgcgt cgcagataat ggcgcactgg cgctgcagat gcttcaacag cacgtcgtct 3180
cccacatcta ggtagtcgcc atgcctttcg tccccccgcc cgacttgttc ctcgtttgcc 3240
tctgcgttgt cctggtcttg ctttttatcc tctgttggta ctgagcggtc ctcgtcgtct 3300
tcgcttacaa aacctgggtc ctgctcgata atcacttcct cctcctcaag cgggggtgcc 3360
tcgacgggga aggtggtagg cgcgttggcg gcatcggtgg aggcggtggt ggcgaactca 3420
gagggggcgg ttaggctgtc cttcttctcg actgactcca tgatcttttt ctgcctatag 3480
gagaaggaaa tggccagtcg ggaagaggag cagcgcgaaa ccacccccga gcgcggacgc 3540
ggtgcggcgc gacgtccccc aaccatggag gacgtgtcgt ccccgtcccc gtcgccgccg 3600
cctccccggg cgcccccaaa aaagcggatg aggcggcgta tcgagtccga ggacgaggaa 3660
gactcatcac aagacgcgct ggtgccgcgc acacccagcc cgcggccatc gacctcggcg 3720
gcggatttgg ccattgcgcc caagaagaaa aagaagcgcc cttctcccaa gcccgagcgc 3780
ccgccatcac cagaggtaat cgtggacagc gaggaagaaa gagaagatgt ggcgctacaa 3840
atggtgggtt tcagcaaccc accggtgcta atcaagcatg gcaaaggagg taagcgcaca 3900
gtgcggcggc tgaatgaaga cgacccagtg gcgcgtggta tgcggacgca agaggaagag 3960
gaagagccca gcgaagcgga aagtgaaatt acggtgatga acccgctgag tgtgccgatc 4020
gtgtctgcgt gggagaaggg catggaggct gcgcgcgcgc tgatggacaa gtaccacgtg 4080
gataacgatc taaaggcgaa cttcaaacta ctgcctgacc aagtggaagc tctggcggcc 4140
gtatgcaaga cctggctgaa cgaggagcac cgcgggttgc agctgacctt caccagcaac 4200
aagacctttg tgacgatgat ggggcgattc ctgcaggcgt acctgcagtc gtttgcagag 4260
gtgacctaca agcatcacga gcccacgggc tgcgcgttgt ggctgcaccg ctgcgctgag 4320
atcgaaggcg agcttaagtg tctacacgga agcattatga taaataagga gcacgtgatt 4380
gaaatggatg tgacgagcga aaacgggcag cgcgcgctga aggagcagtc tagcaaggcc 4440
aagatcgtga agaaccggtg gggccgaaat gtggtgcaga tctccaacac cgacgcaagg 4500
tgctgcgtgc acgacgcggc ctgtccggcc aatcagtttt ccggcaagtc ttgcggcatg 4560
ttcttctctg aaggcgcaaa ggctcaggtg gcttttaagc agatcaaggc ttttatgcag 4620
gcgctgtatc ctaacgccca gaccgggcac ggtcaccttt tgatgccact acggtgcgag 4680
tgcaactcaa agcctgggca cgcgcccttt ttgggaaggc agctaccaaa gttgactccg 4740
ttcgccctga gcaacgcgga ggacctggac gcggatctga tctccgacaa gagcgtgctg 4800
gccagcgtgc accacccggc gctgatagtg ttccagtgct gcaaccctgt gtatcgcaac 4860
tcgcgcgcgc agggcggagg ccccaactgc gacttcaaga tatcggcgcc cgacctgcta 4920
aacgcgttgg tgatggtgcg cagcctgtgg agtgaaaact tcaccgagct gccgcggatg 4980
gttgtgcctg agtttaagtg gagcactaaa caccagtatc gcaacgtgtc cctgccagtg 5040
gcgcatagcg atgcgcggca gaaccccttt gatttttaaa cggcgcagac ggcaagggtg 5100
ggggtaaata atcacccgag agtgtacaaa taaaagcatt tgcctttatt gaaagtgtct 5160
ctagtacatt atttttacat gtttttcaag tgacaaaaag aagtggcgct cctaatctgc 5220
gcactgtggc tgcggaagta gggcgagtgg cgctccagga agctgtagag ctgttcctgg 5280
ttgcgacgca gggtgggctg tacctgggga ctgttgagca tggagttggg taccgc 5336
<210> 19
<211> 810
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 19
ttagaaaaac tcatcgagca tcaaatgaaa ctgcaattta ttcatatcag gattatcaat 60
accatatttt tgaaaaagcc gtttctgtaa tgaaggagaa aactcaccga ggcagttcca 120
taggatggca agatcctggt atcggtctgc gattccgact cgtccaacat caatacaacc 180
tattaatttc ccctcgtcaa aaataaggtt atcaagtgag aaatcaccat gagtgacgac 240
tgaatccggt gagaatggca aaagtttatg catttctttc cagacttgtt caacaggcca 300
gccattacgc tcgtcatcaa aatcactcgc atcaaccaaa ccgttattca ttcgtgattg 360
cgcctgagcg aggcgaaata cgcgatcgct gttaaaagga caattacaaa caggaatcga 420
gtgcaaccgg cgcaggaaca ctgccagcgc atcaacaata ttttcacctg aatcaggata 480
ttcttctaat acctggaacg ctgtttttcc ggggatcgca gtggtgagta accatgcatc 540
atcaggagta cggataaaat gcttgatggt cggaagtggc ataaattccg tcagccagtt 600
tagtctgacc atctcatctg taacatcatt ggcaacgcta cctttgccat gtttcagaaa 660
caactctggc gcatcgggct tcccatacaa gcgatagatt gtcgcacctg attgcccgac 720
attatcgcga gcccatttat acccatataa atcagcatcc atgttggaat ttaatcgcgg 780
cctcgacgtt tcccgttgaa tatggctcat 810
<210> 20
<211> 674
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 20
atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt 60
ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg 120
cgaaacccga caggactata aagataccag gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc 180
tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc 240
gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc 300
aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac 360
tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc cactggcagc agccactggt 420
aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag agttcttgaa gtggtgggct 480
aactacggct acactagaag aacagtattt ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc 540
ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt 600
ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg 660
atcttttcta cggg 674
<210> 21
<211> 118
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 21
tttcaatatt attgaagcat ttatcagggt tattgtctca tgagcggata catatttgaa 60
tgtatttaga aaaataaaca aataggggtc agtgttacaa ccaattaacc aattctga 118
<210> 22
<211> 301
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 22
tattctaaat gcataataaa tactgataac atcttatagt ttgtattata ttttgtatta 60
tcgttgacat gtataatttt gatatcaaaa actgattttc cctttattat tttcgagatt 120
tattttctta attctcttta acaaactaga aatattgtat atacaaaaaa tcataaataa 180
tagatgaata gtttaattat aggtgttcat caatcgaaaa agcaacgtat cttatttaaa 240
gtgcgttgct tttttctcat ttataaggtt aaataattct catatatcaa gcaaagtgac 300
a 301
<210> 23
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 23
ggcgccctta aatattctga caaatgctct ttccctaaac tccccccata aaaaaacccg 60
ccgaagcggg tttttacgtt atttgcggat taacgattac tcgttatcag aaccgcccag 120
<210> 24
<211> 6838
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 24
ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg 60
tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa 120
gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct 180
ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga 240
ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc 300
gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa 360
tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt 420
aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa 480
aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt 540
ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg 600
tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc 660
agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc 720
gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta 780
tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct 840
acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaaggacagt atttggtatc 900
tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa 960
caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa 1020
aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa 1080
aactcacgtt aagggatttt ggtcatgtga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt 1140
ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac 1200
agttagaaaa actcatcgag catcaaatga aactgcaatt tattcatatc aggattatca 1260
ataccatatt tttgaaaaag ccgtttctgt aatgaaggag aaaactcacc gaggcagttc 1320
cataggatgg caagatcctg gtatcggtct gcgattccga ctcgtccaac atcaatacaa 1380
cctattaatt tcccctcgtc aaaaataagg ttatcaagtg agaaatcacc atgagtgacg 1440
actgaatccg gtgagaatgg caaaagttta tgcatttctt tccagacttg ttcaacaggc 1500
cagccattac gctcgtcatc aaaatcactc gcatcaacca aaccgttatt cattcgtgat 1560
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tattcttcta atacctggaa tgctgttttc ccagggatcg cagtggtgag taaccatgca 1740
tcatcaggag tacggataaa atgcttgatg gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag 1800
tttagtctga ccatctcatc tgtaacatca ttggcaacgc tacctttgcc atgtttcaga 1860
aacaactctg gcgcatcggg cttcccatac aatcgataga ttgtcgcacc tgattgcccg 1920
acattatcgc gagcccattt atacccatat aaatcagcat ccatgttgga atttaatcgc 1980
ggcctagagc aagacgtttc ccgttgaata tggctcatac tcttcctttt tcaatattat 2040
tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg tatttagaaa 2100
aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cgtctaagaa 2160
accattatta acatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc ctttcgtctc 2220
gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca 2280
gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt 2340
ggcgggtgtc ggggctggct taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac 2400
catatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa aataccgcat caggcgccat 2460
tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg tgcgggcctc ttcgctatta 2520
cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa gttgggtaac gccagggttt 2580
tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgaattcg agctcggtac ccgtaacaaa 2640
agcttatcga gcggccgcaa gaggcagtat tttactgaca cgaatacacg gtttattgag 2700
ggtatgcgac atgaatgggt taaaggggtc gggtaaggta tcgggttccg ataggtctgg 2760
tggttctgta ttccccggtg ctgtccgggg caaagtccac aaactggggg tcgttgtagt 2820
tgtttgtgta ctggatctct gggttccacc tcttggagtt ttccttcttg agctcccact 2880
ccatctccac ggtgacctgc ccggtgctgt actgggtgat gaagctgctg acgggcacgt 2940
ccgagaagct ggtgatattt ccgggcacag gcgtgttctt gatgagcatc atgggcggtg 3000
ggtgtttgag tccgaatccg cccatggccg gagaggggtg aaagtgcgcc cccgtctctg 3060
ggatcttggc ccagatgggt ccttggaggt acacgtccct ctccatccac acgctgccgg 3120
gcacgatttc ctggaggttg tacgtgccgg tcgcgggggc agtggtggag ctctggttgt 3180
tggtggccat ctgcccgccg acgttgtacg ccacgcggtt caccggctgc gtctcgctct 3240
cgctggtgat gagcatgttg ccctcgaggt acgtggcggt ggtgcccggg ttcgccggct 3300
ggctgttgaa gatcatagtg ttctccaggg cataggtgtt gctgccctgg aggttgttgg 3360
tcatgccgtt cggctgcggg ggcacctggt aactcgcgcc ctcgagctcc atcctattgg 3420
tcgtggcgaa ggcgctgaca ctggcgcggt tgaccccgga gcccaggttc cagccctggg 3480
ttcggcccat gggccccggg aaccagtttt tgtaggtgtt ggcgtatctc ccggccaggt 3540
tcttgttgaa ctggactccg ccagtgttat ttgtgctcac gaagcggtac aagtactggt 3600
ccaccagcgg gttggccagc ttgaacaggt tctgactggg agcgaagctg gagtggaagg 3660
gcacctcctc aaagttgtag gtaaactcaa agttgttgcc cgttctcagc atcttgctgg 3720
gaaagtactc taggcagaag aagctgctcc tctcggtggg attttctgtg ttgtcgcggt 3780
tcagcgtcgc gtaaccgtac tgcggcagcg taaagacctg cggagggaag gccggcaggc 3840
atccctcggt cccgttgccg acgacgtagg gcagctggta gtcgtcgtcc gtaaacactt 3900
ggacggtgga ggtgaggttg ttggcgatgg tggtggtgga gtcctgcacc gtgacctctt 3960
tgacttgaat gttgaagatt ttgactctga gggaccgggg tctgaagccc cagtagttgt 4020
tgatgagtct ttgccagtct cgggggctcc agtggctgtg gaagcggtta aagtcaaagt 4080
acccccaggg ggtgctgtat ccaaagtagg cgttggcgtt gcttccgtcg acggagccgc 4140
ttttgatctc tcggtactgg tggttgttgt agctgggcag cacccaggtt cgggtggact 4200
tggtgacgac tctgtccccc atccacgtgg aatcgcaatg ccaatctccc gaggcattgc 4260
ccactccatc ggcaccttgg ttattgtcgc ccaatgggcc gccacctccc gcagacattg 4320
tatcagctcc caaacttgag gctggttggg ctgggatttg cagctgctgg gatccgctgg 4380
gtccagcttc ggcgtctgac gaggtggaag gcttggagtc ctcttcggtc cgagccttct 4440
ttctttttgg aaagtggtcg tctatccgct ttccggtagg ggccgtctta gcaccctctt 4500
caaccaggcc aaaaggttcg agaacccttt tcttggcctg aaagactgcc tttccgaggt 4560
ttcccccgaa ggatgtgtcg tcggcgagct tctcctgaaa ctcggcgtcc gcgtggttgt 4620
acttgaggta ggggttgtct cccgcctcaa gctgctcgtt gtacgagatg tcgtgctctc 4680
gcgcgacctc gtctgccctg ttgacaggct ctcctcgatc gagaccgttt ccgggtccga 4740
gatagttata accaggcagc acaagaccac gggcttgatc ttgatgctgc tgattgggtt 4800
ttggtttcgg tgggcccgct tcaaggccca aaaactcgcg aagaccttca ccaacttctt 4860
ccaaccaatc tggagggtga tcaacaaaag acatgactac tcgctttatt tactgttctt 4920
tattggcatc gtcaaaatcc ccaaaatctg acaagttttc cttttcccag gggggaatcc 4980
catgacaaat ttgacagtga gttacattgt gacagataca tccatttttg ccccgattca 5040
aatattcaca ttcatcacat ttgttagaaa tgttgtcaaa ttgagcatga tagtcacatt 5100
tgcaatcata ccttgaattc caattgagcg gtcgcagagg agcgggatca acagtcacgt 5160
ctgaactgcg aggcgtctcg ggaacaaatg agagcctggc ccgcttctcc agacttttat 5220
agctagtatt ggtgacgtca cccagtgggc gttttagaga tttctccgcc cctttagttc 5280
ccgccaattc cctgggaact ttaaactcgt gagtcaccgg cacctgattg acctttgccc 5340
aagcaaaaaa gtccttgact tcctgcttag taatcttgcc aaaatctggc gggagccgct 5400
tagtcagttc aaatttgaac atgcggtcct ccagcggctg ctggtgttca aaggtcgtgg 5460
aattcccatc caccaccaca cacatgtttg tattggaagt tacaatgaca ggggtagaat 5520
caatttgaac agaggattta catttctgat cgacccgcac ctttgagccc cccaggatgg 5580
ccttggcgga ttcaaccacc ttgttggtca tctttccctc ctcccaccaa atgagcattt 5640
tgtccacaca gtcattaaag ggaaagtttt cattggtcca gttcacgcag ccgtaaaagg 5700
gcacagtgtg ggcgatggcc tccgcgatgt tggtcttgcc ggtcgtggcg ggtccgtaga 5760
gccagacggt gttcctcttg ttgaaggagc gctgacacca gccgtagagg atggatcccg 5820
cgtaggccgg gtcgtagcca ttcatctcaa aaatttgcca gattctgttt tttgaaatgt 5880
cctcgggaac ggagctcccc acgaggtagt ccaccgcgct ttttgtcaga ctcataattt 5940
tggtcgcgtt gtcgagcgcg gccttgatct ggctccgaga gttgccggtg gagttgaagg 6000
agaggtagct ctcctgattt tcctggatcc actgcttctc cgaggtaatc cccttgtcca 6060
cgagccaccc gaccagctcc atgtacctgg ctgaagtttt tgatctgatc accggcgcat 6120
cagaattggg attctgattc tctttgttct gctcctgcgt ctgcgacacg tgcgtcagat 6180
gctgcgccac caaccgttta cgctccgtga gattcaaaca ggcgcttaaa tactgttcca 6240
tattagtcca cgcccactgg agctcaggct gggttttggg gagcaagtaa ttggggatgt 6300
agcactcatc caccaccttg ttcccgcctc cggcgccatt tctggtcttt gtgaccgcga 6360
accagtttgg caaagtcggc tcgatcccgc ggtaaattct ctgaatcagt ttttcgcgaa 6420
tctgactcag gaaacgtccc aaaaccatgg atttcacccc ggtggtttcc acgagcacgt 6480
gcatgtggaa gtagctctct cccttctcaa attgcacaaa gaaaagggcc tccggggcct 6540
tactcacacg gcgccattcc gtcagaaagt cgcgctgcag cttctcggcc acggtcaggg 6600
gtgcctgctc aatcagattc agatccatgt cagaatctgg cggcaactcc cattccttct 6660
cggccaccca gttcacaaag ctgtcagaaa tgccgggcag atgctcgtca aggtcgctgg 6720
ggaccttaat cacaatctcg taaaaccccg gcatggcggc tgcgcagatc agaagttcct 6780
atactttcta gagaatagga acttcggaat aggaacttct gatcttccgg gggatcca 6838
<210> 25
<211> 816
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 25
ttagaaaaac tcatcgagca tcaaatgaaa ctgcaattta ttcatatcag gattatcaat 60
accatatttt tgaaaaagcc gtttctgtaa tgaaggagaa aactcaccga ggcagttcca 120
taggatggca agatcctggt atcggtctgc gattccgact cgtccaacat caatacaacc 180
tattaatttc ccctcgtcaa aaataaggtt atcaagtgag aaatcaccat gagtgacgac 240
tgaatccggt gagaatggca aaagtttatg catttctttc cagacttgtt caacaggcca 300
gccattacgc tcgtcatcaa aatcactcgc atcaaccaaa ccgttattca ttcgtgattg 360
cgcctgagcg agacgaaata cgcgatcgct gttaaaagga caattacaaa caggaatcga 420
atgcaaccgg cgcaggaaca ctgccagcgc atcaacaata ttttcacctg aatcaggata 480
ttcttctaat acctggaatg ctgttttccc agggatcgca gtggtgagta accatgcatc 540
atcaggagta cggataaaat gcttgatggt cggaagaggc ataaattccg tcagccagtt 600
tagtctgacc atctcatctg taacatcatt ggcaacgcta cctttgccat gtttcagaaa 660
caactctggc gcatcgggct tcccatacaa tcgatagatt gtcgcacctg attgcccgac 720
attatcgcga gcccatttat acccatataa atcagcatcc atgttggaat ttaatcgcgg 780
cctagagcaa gacgtttccc gttgaatatg gctcat 816
<210> 26
<211> 673
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 26
tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt 60
tccataggct ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc 120
gaaacccgac aggactataa agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct 180
ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg 240
tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca 300
agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact 360
atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta 420
acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta 480
actacggcta cactagaagg acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct 540
tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt 600
tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga 660
tcttttctac ggg 673
<210> 27
<211> 143
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 27
aattgttatc cgctcacaat tccacacaac atacgagccg gaagcataaa gtgtaaagcc 60
tggggtgcct aatgagtgag ctaactcaca ttaattgcgt tgcgctcact gcccgctttc 120
cagtcgggaa acctgtcgtg cca 143
<210> 28
<211> 5121
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 28
ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc 60
gctggtagcg gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct 120
caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt 180
taagggattt tggtcatgtg attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa 240
aaatgaagtt ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttagaaa 300
aactcatcga gcatcaaatg aaactgcaat ttattcatat caggattatc aataccatat 360
ttttgaaaaa gccgtttctg taatgaagga gaaaactcac cgaggcagtt ccataggatg 420
gcaagatcct ggtatcggtc tgcgattccg actcgtccaa catcaataca acctattaat 480
ttcccctcgt caaaaataag gttatcaagt gagaaatcac catgagtgac gactgaatcc 540
ggtgagaatg gcaaaagttt atgcatttct ttccagactt gttcaacagg ccagccatta 600
cgctcgtcat caaaatcact cgcatcaacc aaaccgttat tcattcgtga ttgcgcctga 660
gcgagacgaa atacgcgatc gctgttaaaa ggacaattac aaacaggaat cgaatgcaac 720
cggcgcagga acactgccag cgcatcaaca atattttcac ctgaatcagg atattcttct 780
aatacctgga atgctgtttt cccagggatc gcagtggtga gtaaccatgc atcatcagga 840
gtacggataa aatgcttgat ggtcggaaga ggcataaatt ccgtcagcca gtttagtctg 900
accatctcat ctgtaacatc attggcaacg ctacctttgc catgtttcag aaacaactct 960
ggcgcatcgg gcttcccata caatcgatag attgtcgcac ctgattgccc gacattatcg 1020
cgagcccatt tatacccata taaatcagca tccatgttgg aatttaatcg cggcctagag 1080
caagacgttt cccgttgaat atggctcata ctcttccttt ttcaatatta ttgaagcatt 1140
tatcagggtt attgtctcat gagcggatac atatttgaat gtatttagaa aaataaacaa 1200
ataggggttc cgcgcacatt tccccgaaaa gtgccacctg acgtctaaga aaccattatt 1260
aacatgacat taacctataa aaataggcgt atcacgaggc cctttcgtct cgcgcgtttc 1320
ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg agacggtcac agcttgtctg 1380
taagcggatg ccgggagcag acaagcccgt cagggcgcgt cagcgggtgt tggcgggtgt 1440
cggggctggc ttaactatgc ggcatcagag cagattgtac tgagagtgca ccatatgcgg 1500
tgtgaaatac cgcacagatg cgtaaggaga aaataccgca tcaggcgcca ttcgccattc 1560
aggctgcgca actgttggga agggcgatcg gtgcgggcct cttcgctatt acgccagctg 1620
gcgaaagggg gatgtgctgc aaggcgatta agttgggtaa cgccagggtt ttcccagtca 1680
cgacgttgta aaacgacggc cagtgaattc gagctcggta cccgtaacaa aagcttatcg 1740
agcggccgca agaggcagta ttttactgac acgaatacac ggtttattga gggtatgcga 1800
catgaatggg ttaaaggggt cgggtaaggt atcgggttcc gataggtctg gtggttctgt 1860
attccccggt gctgtccggg gcaaagtcca caaactgggg gtcgttgtag ttgtttgtgt 1920
actggatctc tgggttccac ctcttggagt tttccttctt gagctcccac tccatctcca 1980
cggtgacctg cccggtgctg tactgggtga tgaagctgct gacgggcacg tccgagaagc 2040
tggtgatatt tccgggcaca ggcgtgttct tgatgagcat catgggcggt gggtgtttga 2100
gtccgaatcc gcccatggcc ggagaggggt gaaagtgcgc ccccgtctct gggatcttgg 2160
cccagatggg tccttggagg tacacgtccc tctccatcca cacgctgccg ggcacgattt 2220
cctggaggtt gtacgtgccg gtcgcggggg cagtggtgga gctctggttg ttggtggcca 2280
tctgcccgcc gacgttgtac gccacgcggt tcaccggctg cgtctcgctc tcgctggtga 2340
tgagcatgtt gccctcgagg tacgtggcgg tggtgcccgg gttcgccggc tggctgttga 2400
agatcatagt gttctccagg gcataggtgt tgctgccctg gaggttgttg gtcatgccgt 2460
tcggctgcgg gggcacctgg taactcgcgc cctcgagctc catcctattg gtcgtggcga 2520
aggcgctgac actggcgcgg ttgaccccgg agcccaggtt ccagccctgg gttcggccca 2580
tgggccccgg gaaccagttt ttgtaggtgt tggcgtatct cccggccagg ttcttgttga 2640
actggactcc gccagtgtta tttgtgctca cgaagcggta caagtactgg tccaccagcg 2700
ggttggccag cttgaacagg ttctgactgg gagcgaagct ggagtggaag ggcacctcct 2760
caaagttgta ggtaaactca aagttgttgc ccgttctcag catcttgctg ggaaagtact 2820
ctaggcagaa gaagctgctc ctctcggtgg gattttctgt gttgtcgcgg ttcagcgtcg 2880
cgtaaccgta ctgcggcagc gtaaagacct gcggagggaa ggccggcagg catccctcgg 2940
tcccgttgcc gacgacgtag ggcagctggt agtcgtcgtc cgtaaacact tggacggtgg 3000
aggtgaggtt gttggcgatg gtggtggtgg agtcctgcac cgtgacctct ttgacttgaa 3060
tgttgaagat tttgactctg agggaccggg gtctgaagcc ccagtagttg ttgatgagtc 3120
tttgccagtc tcgggggctc cagtggctgt ggaagcggtt aaagtcaaag tacccccagg 3180
gggtgctgta tccaaagtag gcgttggcgt tgcttccgtc gacggagccg cttttgatct 3240
ctcggtactg gtggttgttg tagctgggca gcacccaggt tcgggtggac ttggtgacga 3300
ctctgtcccc catccacgtg gaatcgcaat gccaatctcc cgaggcattg cccactccat 3360
cggcaccttg gttattgtcg cccaatgggc cgccacctcc cgcagacatt gtatcagctc 3420
ccaaacttga ggctggttgg gctgggattt gcagctgctg ggatccgctg ggtccagctt 3480
cggcgtctga cgaggtggaa ggcttggagt cctcttcggt ccgagccttc tttctttttg 3540
gaaagtggtc gtctatccgc tttccggtag gggccgtctt agcaccctct tcaaccaggc 3600
caaaaggttc gagaaccctt ttcttggcct gaaagactgc ctttccgagg tttcccccga 3660
aggatgtgtc gtcggcgagc ttctcctgaa actcggcgtc cgcgtggttg tacttgaggt 3720
aggggttgtc tcccgcctca agctgctcgt tgtacgagat gtcgtgctct cgcgcgacct 3780
cgtctgccct gttgacaggc tctcctcgat cgagaccgtt tccgggtccg agatagttat 3840
aaccaggcag cacaagacca cgggcttgat cttgatgctg ctgattgggt tttggtttcg 3900
gtgggcccgc ttcaaggccc aaaaactcgc gaagaccttc accaacttct tccaaccaat 3960
ctggagggtg atcaacaaaa gacatgacta ctcgctttat ttactgttct ttattggcat 4020
cgtcaaaatc cccaaaatct gacaagtttt ccttttccca ggggggaatc ccatgacaaa 4080
tttgacagtg agttacattg tgacagatac atccattttt gccccgattc aaatattcac 4140
attcatcaca tttgttagaa atgttgtcaa attgagcatg atagtcacat ttgcaatcat 4200
accttgaatt ccaattgagc ggtcgcagag gagcgggatc aacagtcacg tctgaactgc 4260
gaggcgtctc gggaacaaat gagagcctgg cccgcttctc cagactttta tagctagtat 4320
tggtgacgtc acccagtggg cgttttagag atttctccgc ccctttagtt cccgccaatt 4380
ccctgggaac tttaaactcg tgagtcaccg gcacctgatt gacctttgcc caagcaaaaa 4440
agtccttgac ttcctgctta gtaatcttgc caaaatctgg cgggagccgc ttagtcagtt 4500
caaatttgaa catgcggtcc tccagcggct gctggtgttc aaaggtcgtg gaattcccat 4560
ccaccaccac acacatgttt gtattggaag ttacaatgac aggggtagaa tcaatttgaa 4620
cagaggattt acatttctga tcgacccgca cctttgagcc ccccaggatg gccttggcgg 4680
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agtcattaaa gggaaagttt tcattggtcc agttcacgca gccgtaaaag ggcacagtgt 4800
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ggtcgtagcc attcatctca aaaatttgcc agattctgtt ttttgaaatg tcctcgggaa 4980
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tctcctgatt ttcctggatc c 5121
<210> 29
<211> 2175
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 29
ttaaaggggt cgggtaaggt atcgggttcc gataggtctg gtggttctgt attccccggt 60
gctgtccggg gcaaagtcca caaactgggg gtcgttgtag ttgtttgtgt actggatctc 120
tgggttccac ctcttggagt tttccttctt gagctcccac tccatctcca cggtgacctg 180
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gtacgtgccg gtcgcggggg cagtggtgga gctctggttg ttggtggcca tctgcccgcc 480
gacgttgtac gccacgcggt tcaccggctg cgtctcgctc tcgctggtga tgagcatgtt 540
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actggcgcgg ttgaccccgg agcccaggtt ccagccctgg gttcggccca tgggccccgg 780
gaaccagttt ttgtaggtgt tggcgtatct cccggccagg ttcttgttga actggactcc 840
gccagtgtta tttgtgctca cgaagcggta caagtactgg tccaccagcg ggttggccag 900
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gaagctgctc ctctcggtgg gattttctgt gttgtcgcgg ttcagcgtcg cgtaaccgta 1080
ctgcggcagc gtaaagacct gcggagggaa ggccggcagg catccctcgg tcccgttgcc 1140
gacgacgtag ggcagctggt agtcgtcgtc cgtaaacact tggacggtgg aggtgaggtt 1200
gttggcgatg gtggtggtgg agtcctgcac cgtgacctct ttgacttgaa tgttgaagat 1260
tttgactctg agggaccggg gtctgaagcc ccagtagttg ttgatgagtc tttgccagtc 1320
tcgggggctc cagtggctgt ggaagcggtt aaagtcaaag tacccccagg gggtgctgta 1380
tccaaagtag gcgttggcgt tgcttccgtc gacggagccg cttttgatct ctcggtactg 1440
gtggttgttg tagctgggca gcacccaggt tcgggtggac ttggtgacga ctctgtcccc 1500
catccacgtg gaatcgcaat gccaatctcc cgaggcattg cccactccat cggcaccttg 1560
gttattgtcg cccaatgggc cgccacctcc cgcagacatt gtatcagctc ccaaacttga 1620
ggctggttgg gctgggattt gcagctgctg ggatccgctg ggtccagctt cggcgtctga 1680
cgaggtggaa ggcttggagt cctcttcggt ccgagccttc tttctttttg gaaagtggtc 1740
gtctatccgc tttccggtag gggccgtctt agcaccctct tcaaccaggc caaaaggttc 1800
gagaaccctt ttcttggcct gaaagactgc ctttccgagg tttcccccga aggatgtgtc 1860
gtcggcgagc ttctcctgaa actcggcgtc cgcgtggttg tacttgaggt aggggttgtc 1920
tcccgcctca agctgctcgt tgtacgagat gtcgtgctct cgcgcgacct cgtctgccct 1980
gttgacaggc tctcctcgat cgagaccgtt tccgggtccg agatagttat aaccaggcag 2040
cacaagacca cgggcttgat cttgatgctg ctgattgggt tttggtttcg gtgggcccgc 2100
ttcaaggccc aaaaactcgc gaagaccttc accaacttct tccaaccaat ctggagggtg 2160
atcaacaaaa gacat 2175
<210> 30
<211> 3
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成寡核苷酸
<400> 30
cat 3
<210> 31
<211> 6980
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 31
ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg 60
tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa 120
gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct 180
ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga 240
ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc 300
gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa 360
tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt 420
aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa 480
aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt 540
ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg 600
tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc 660
agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc 720
gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta 780
tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct 840
acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaaggacagt atttggtatc 900
tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa 960
caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa 1020
aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa 1080
aactcacgtt aagggatttt ggtcatgtga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt 1140
ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac 1200
agttagaaaa actcatcgag catcaaatga aactgcaatt tattcatatc aggattatca 1260
ataccatatt tttgaaaaag ccgtttctgt aatgaaggag aaaactcacc gaggcagttc 1320
cataggatgg caagatcctg gtatcggtct gcgattccga ctcgtccaac atcaatacaa 1380
cctattaatt tcccctcgtc aaaaataagg ttatcaagtg agaaatcacc atgagtgacg 1440
actgaatccg gtgagaatgg caaaagttta tgcatttctt tccagacttg ttcaacaggc 1500
cagccattac gctcgtcatc aaaatcactc gcatcaacca aaccgttatt cattcgtgat 1560
tgcgcctgag cgagacgaaa tacgcgatcg ctgttaaaag gacaattaca aacaggaatc 1620
gaatgcaacc ggcgcaggaa cactgccagc gcatcaacaa tattttcacc tgaatcagga 1680
tattcttcta atacctggaa tgctgttttc ccagggatcg cagtggtgag taaccatgca 1740
tcatcaggag tacggataaa atgcttgatg gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag 1800
tttagtctga ccatctcatc tgtaacatca ttggcaacgc tacctttgcc atgtttcaga 1860
aacaactctg gcgcatcggg cttcccatac aatcgataga ttgtcgcacc tgattgcccg 1920
acattatcgc gagcccattt atacccatat aaatcagcat ccatgttgga atttaatcgc 1980
ggcctagagc aagacgtttc ccgttgaata tggctcatac tcttcctttt tcaatattat 2040
tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg tatttagaaa 2100
aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cgtctaagaa 2160
accattatta acatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc ctttcgtctc 2220
gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca 2280
gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt 2340
ggcgggtgtc ggggctggct taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac 2400
catatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa aataccgcat caggcgccat 2460
tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg tgcgggcctc ttcgctatta 2520
cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa gttgggtaac gccagggttt 2580
tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgaattcg agctcggtac ccgtagccat 2640
ggaaactaga taagaaagaa atacgcagag accaaagttc aactgaaacg aattaaacgg 2700
tttattgatt aacaagcaat tacagattac gagtcaggta tctggtgcca atggggcgag 2760
gctctgaata cacgccatta gtgtccacag taaagtccac attaacagac ttgttgtagt 2820
tggaagtgta ctgaatttcg ggattccagc gtttgctgtt ttccttctgc agctcccact 2880
cgatctccac gctgacctgt cccgtggagt actgtgtgat gaaggaagca aactttgccg 2940
cactgaaggt ggtcgaagga ttcgcaggta ccggggtgtt cttgatgaga atctgtggag 3000
gagggtgttt aagtccgaat ccacccatga ggggagaggg gtgaaaatgt ccgtccgtgt 3060
gtggaatctt tgcccagatg ggcccctgaa ggtacacatc tctgtcctgc cagaccatgc 3120
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ggttggtaga tacagaacca tactgctccg tagccacggg attggttgtc ctgatttcct 3240
cttcgtctgt aatcatgacc ttttcaatgt ccacatttgt tttctctgag ccttgcttcc 3300
caaagatgag aaccccgctc tgaggaaaaa acttttcttc atcgtccttg tggcttgcca 3360
tggccgggcc cggattcacc agagagtctc tgccattgag gtggtacttg gtagctccag 3420
tccacgagta ttcactgttg ttgttatccg cagatgtctt tgatactcgc tgctggcggt 3480
aacagggtcc aggaagccag ttcctagact ggtcccgaat gtcactcgct ccggcctgag 3540
aaaactgaag ccttgactgc gtggtggttc cacttggagt gtttgttctg ctcaagtaat 3600
acaggtactg gtcgatgaga ggattcatga gacggtccag actctggctg tgagcgtagc 3660
tgctgtggaa aggaacgtcc tcaaaagtgt agctgaaggt aaagttgttt ccggtacgca 3720
gcatctgaga aggaaagtac tccaggcagt aaaatgaaga gcgtcctact gcctgactcc 3780
cgttgttcag ggtgaggtat ccatactgtg gcaccatgaa gacgtctgct gggaacggcg 3840
ggaggcatcc ttgatgcgcc gagccgagga cgtacgggag ctggtactcc gagtcagtaa 3900
acacctgaac cgtgctggta aggttattgg caatcgtcgt cgtaccgtca ttctgcgtga 3960
cctctttgac ttgaatgtta aagagcttga agttgagtct cttgggtcgg aatccccagt 4020
tgttgttgat gagtctttgc cagtcacgtg gtgaaaagtg gcagtggaat ctgttgaagt 4080
caaaataccc ccaaggggtg ctgtagccaa agtagtgatt gtcgttcgag gctcctgatt 4140
ggctggaaat ttgtttgtag aggtggttgt tgtaggtggg cagggcccag gttcgggtgc 4200
tggtggtgat gactctgtcg cccatccatg tggaatcgca atgccaattt cccgaggaat 4260
tacccactcc gtcggcgccc tcgttattgt ctgccattgg tgcgccactg cctgtagcca 4320
tcgtattagt tcccagacca gagggggctg ctggtggctg tccgagaggc tgggggtcag 4380
gtactgagtc tgcgtctcca gtctgaccaa aattcaatct ttttcttgca ggctgctggc 4440
ccgcctttcc ggttcccgag gaggagtctg gctccacagg agagtgctct accggcctct 4500
tttttcccgg agccgtctta acaggttcct caaccaggcc cagaggttca agaaccctct 4560
ttttcgcctg gaagactgct cgtccgaggt tgcccccaaa agacgtatct tctttaaggc 4620
gctcctgaaa ctccgcgtcg gcgtggttgt acttgaggta cgggttgtct ccgctgtcga 4680
gctgccggtc gtaggctttg tcgtgctcga gggccgcggc gtctgcctcg ttgaccggct 4740
ctcccttgtc gagtccgttg aagggtccga ggtacttgta cccaggaagc acaagacccc 4800
tgctgtcgtc cttatgccgc tctgcgggct ttggtggtgg tgggccaggt ttgagcttcc 4860
accactgtct tattccttca gagagagtgt cctcgagcca atctggaaga taaccatcgg 4920
cagccatacc tgatttaaat catttattgt tcaaagatgc agtcatccaa atccacattg 4980
accagatcgc aggcagtgca agcgtctggc acctttccca tgatatgatg aatgtagcac 5040
agtttctgat acgccttttt gacgacagaa acgggttgag attctgacac gggaaagcac 5100
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cattgtctgc agggaaacag catcagattc atgcccacgt gacgagaaca tttgttttgg 5220
tacctgtctg cgtagttgat cgaagcttcc gcgtctgacg tcgatggctg cgcaactgac 5280
tcgcgcaccc gtttgggctc acttatatct gcgtcactgg gggcgggtct tttcttggct 5340
ccaccctttt tgacgtagaa ttcatgctcc acctcaacca cgtgatcctt tgcccaccgg 5400
aaaaagtctt tgacttcctg cttggtgacc ttcccaaagt catgatccag acggcgggtg 5460
agttcaaatt tgaacatccg gtcttgcaac ggctgctggt gttcgaaggt cgttgagttc 5520
ccgtcaatca cggcgcacat gttggtgttg gaggtgacga tcacgggagt cgggtctatc 5580
tgggccgagg acttgcattt ctggtccacg cgcaccttgc ttcctccgag aatggctttg 5640
gccgactcca cgaccttggc ggtcatcttc ccctcctccc accagatcac catcttgtcg 5700
acacagtcgt tgaagggaaa gttctcattg gtccagttta cgcacccgta gaagggcaca 5760
gtgtgggcta tggcctccgc gatgttggtc ttcccggtag ttgcaggccc aaacagccag 5820
atggtgttcc tcttgccgaa ctttttcgtg gcccatccca gaaagacgga agccgcatat 5880
tggggatcgt acccgtttag ttccaaaatt ttataaatcc gattgctgga aatgtcctcc 5940
acgggctgct ggcccaccag gtagtcgggg gcggttttag tcaggctcat aatctttccc 6000
gcattgtcca aggcagcctt gatttgggac cgcgagttgg aggccgcatt gaaggagatg 6060
tatgaggcct ggtcctcctg gatccactgc ttctccgagg taatcccctt gtccacgagc 6120
cacccgacca gctccatgta cctggctgaa gtttttgatc tgatcaccgg cgcatcagaa 6180
ttgggattct gattctcttt gttctgctcc tgcgtctgcg acacgtgcgt cagatgctgc 6240
gccaccaacc gtttacgctc cgtgagattc aaacaggcgc ttaaatactg ttccatatta 6300
gtccacgccc actggagctc aggctgggtt ttggggagca agtaattggg gatgtagcac 6360
tcatccacca ccttgttccc gcctccggcg ccatttctgg tctttgtgac cgcgaaccag 6420
tttggcaaag tcggctcgat cccgcggtaa attctctgaa tcagtttttc gcgaatctga 6480
ctcaggaaac gtcccaaaac catggatttc accccggtgg tttccacgag cacgtgcatg 6540
tggaagtagc tctctccctt ctcaaattgc acaaagaaaa gggcctccgg ggccttactc 6600
acacggcgcc attccgtcag aaagtcgcgc tgcagcttct cggccacggt caggggtgcc 6660
tgctcaatca gattcagatc catgtcagaa tctggcggca actcccattc cttctcggcc 6720
acccagttca caaagctgtc agaaatgccg ggcagatgct cgtcaaggtc gctggggacc 6780
ttaatcacaa tctcgtaaaa ccccggcatg gcggctgcgc gttcaaacct cccgcttcaa 6840
aatggagacc ctgcgtgctc actcgggctt aaatacccag cgtgaccaca tggtgtcgca 6900
aaatgtcgca aaacactcac gtgacctcta atacaggacc tccctaaccc tatgacgtaa 6960
ttcacgtcac gactccacca 6980
<210> 32
<211> 2208
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 32
ttacagatta cgagtcaggt atctggtgcc aatggggcga ggctctgaat acacgccatt 60
agtgtccaca gtaaagtcca cattaacaga cttgttgtag ttggaagtgt actgaatttc 120
gggattccag cgtttgctgt tttccttctg cagctcccac tcgatctcca cgctgacctg 180
tcccgtggag tactgtgtga tgaaggaagc aaactttgcc gcactgaagg tggtcgaagg 240
attcgcaggt accggggtgt tcttgatgag aatctgtgga ggagggtgtt taagtccgaa 300
tccacccatg aggggagagg ggtgaaaatg tccgtccgtg tgtggaatct ttgcccagat 360
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gttgacatct gcggtagctg cttgtctgtt gcctctctgg aggttggtag atacagaacc 480
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cttttcaatg tccacatttg ttttctctga gccttgcttc ccaaagatga gaaccccgct 600
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gttgttatcc gcagatgtct ttgatactcg ctgctggcgg taacagggtc caggaagcca 780
gttcctagac tggtcccgaa tgtcactcgc tccggcctga gaaaactgaa gccttgactg 840
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ccagtcacgt ggtgaaaagt ggcagtggaa tctgttgaag tcaaaatacc cccaaggggt 1380
gctgtagcca aagtagtgat tgtcgttcga ggctcctgat tggctggaaa tttgtttgta 1440
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ggaggagtct ggctccacag gagagtgctc taccggcctc ttttttcccg gagccgtctt 1800
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gtcgtgctcg agggccgcgg cgtctgcctc gttgaccggc tctcccttgt cgagtccgtt 2040
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agagagagtg tcctcgagcc aatctggaag ataaccatcg gcagccat 2208
<210> 33
<211> 6893
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 33
ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg 60
tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa 120
gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct 180
ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga 240
ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc 300
gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa 360
tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt 420
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tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc 660
agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc 720
gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta 780
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caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa 1020
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ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac 1200
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tattcttcta atacctggaa tgctgttttc ccagggatcg cagtggtgag taaccatgca 1740
tcatcaggag tacggataaa atgcttgatg gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag 1800
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ggcctagagc aagacgtttc ccgttgaata tggctcatac tcttcctttt tcaatattat 2040
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accattatta acatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc ctttcgtctc 2220
gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca 2280
gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt 2340
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tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgaattcg agctcggtac ccgtagccat 2640
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gctctgaata cacgccatta gtgtccacag taaagtccac attaacagac ttgttgtagt 2820
tggaagtgta ctgaatttcg ggattccagc gtttgctgtt ttccttctgc agctcccact 2880
cgatctccac gctgacctgt cccgtggagt actgtgtgat gaaggaagca aactttgccg 2940
cactgaaggt ggtcgaagga ttcgcaggta ccggggtgtt cttgatgaga atctgtggag 3000
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ggttggtaga tacagaacca tactgctccg tagccacggg attggttgtc ctgatttcct 3240
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gcatctgaga aggaaagtac tccaggcagt aaaatgaaga gcgtcctact gcctgactcc 3780
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tgttgttgat gagtctttgc cagtcacgtg gtgaaaagtg gcagtggaat ctgttgaagt 4080
caaaataccc ccaaggggtg ctgtagccaa agtagtgatt gtcgttcgag gctcctgatt 4140
ggctggaaat ttgtttgtag aggtggttgt tgtaggtggg cagggcccag gttcgggtgc 4200
tggtggtgat gactctgtcg cccatccatg tggaatcgca atgccaattt cccgaggaat 4260
tacccactcc gtcggcgccc tcgttattgt ctgccattgg tgcgccactg cctgtagcca 4320
tcgtattagt tcccagacca gagggggctg ctggtggctg tccgagaggc tgggggtcag 4380
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ttttcgcctg gaagactgct cgtccgaggt tgcccccaaa agacgtatct tctttaaggc 4620
gctcctgaaa ctccgcgtcg gcgtggttgt acttgaggta cgggttgtct ccgctgtcga 4680
gctgccggtc gtaggctttg tcgtgctcga gggccgcggc gtctgcctcg ttgaccggct 4740
ctcccttgtc gagtccgttg aagggtccga ggtacttgta cccaggaagc acaagacccc 4800
tgctgtcgtc cttatgccgc tctgcgggct ttggtggtgg tgggccaggt ttgagcttcc 4860
accactgtct tattccttca gagagagtgt cctcgagcca atctggaaga taaccatcgg 4920
cagccatacc tgatttaaat catttattgt tcaaagatgc agtcatccaa atccacattg 4980
accagatcgc aggcagtgca agcgtctggc acctttccca tgatatgatg aatgtagcac 5040
agtttctgat acgccttttt gacgacagaa acgggttgag attctgacac gggaaagcac 5100
tctaaacagt ctttctgtcc gtgagtgaag cagatatttg aattctgatt cattctctcg 5160
cattgtctgc agggaaacag catcagattc atgcccacgt gacgagaaca tttgttttgg 5220
tacctgtctg cgtagttgat cgaagcttcc gcgtctgacg tcgatggctg cgcaactgac 5280
tcgcgcaccc gtttgggctc acttatatct gcgtcactgg gggcgggtct tttcttggct 5340
ccaccctttt tgacgtagaa ttcatgctcc acctcaacca cgtgatcctt tgcccaccgg 5400
aaaaagtctt tgacttcctg cttggtgacc ttcccaaagt catgatccag acggcgggtg 5460
agttcaaatt tgaacatccg gtcttgcaac ggctgctggt gttcgaaggt cgttgagttc 5520
ccgtcaatca cggcgcacat gttggtgttg gaggtgacga tcacgggagt cgggtctatc 5580
tgggccgagg acttgcattt ctggtccacg cgcaccttgc ttcctccgag aatggctttg 5640
gccgactcca cgaccttggc ggtcatcttc ccctcctccc accagatcac catcttgtcg 5700
acacagtcgt tgaagggaaa gttctcattg gtccagttta cgcacccgta gaagggcaca 5760
gtgtgggcta tggcctccgc gatgttggtc ttcccggtag ttgcaggccc aaacagccag 5820
atggtgttcc tcttgccgaa ctttttcgtg gcccatccca gaaagacgga agccgcatat 5880
tggggatcgt acccgtttag ttccaaaatt ttataaatcc gattgctgga aatgtcctcc 5940
acgggctgct ggcccaccag gtagtcgggg gcggttttag tcaggctcat aatctttccc 6000
gcattgtcca aggcagcctt gatttgggac cgcgagttgg aggccgcatt gaaggagatg 6060
tatgaggcct ggtcctcctg gatccactgc ttctccgagg taatcccctt gtccacgagc 6120
cacccgacca gctccatgta cctggctgaa gtttttgatc tgatcaccgg cgcatcagaa 6180
ttgggattct gattctcttt gttctgctcc tgcgtctgcg acacgtgcgt cagatgctgc 6240
gccaccaacc gtttacgctc cgtgagattc aaacaggcgc ttaaatactg ttccatatta 6300
gtccacgccc actggagctc aggctgggtt ttggggagca agtaattggg gatgtagcac 6360
tcatccacca ccttgttccc gcctccggcg ccatttctgg tctttgtgac cgcgaaccag 6420
tttggcaaag tcggctcgat cccgcggtaa attctctgaa tcagtttttc gcgaatctga 6480
ctcaggaaac gtcccaaaac catggatttc accccggtgg tttccacgag cacgtgcatg 6540
tggaagtagc tctctccctt ctcaaattgc acaaagaaaa gggcctccgg ggccttactc 6600
acacggcgcc attccgtcag aaagtcgcgc tgcagcttct cggccacggt caggggtgcc 6660
tgctcaatca gattcagatc catgtcagaa tctggcggca actcccattc cttctcggcc 6720
acccagttca caaagctgtc agaaatgccg ggcagatgct cgtcaaggtc gctggggacc 6780
ttaatcacaa tctcgtaaaa ccccggcatg gcggctgcgc agatcagaag ttcctatact 6840
ttctagagaa taggaacttc ggaataggaa cttctgatct tccgggggat cca 6893
<210> 34
<211> 179
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 34
ccccggcatg gcggctgcgc gttcaaacct cccgcttcaa aatggagacc ctgcgtgctc 60
actcgggctt aaatacccag cgtgaccaca tggtgtcgca aaatgtcgca aaacactcac 120
gtgacctcta atacaggacc tccctaaccc tatgacgtaa ttcacgtcac gactccacc 179
<210> 35
<211> 6989
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 35
ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg 60
tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa 120
gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct 180
ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga 240
ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc 300
gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa 360
tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt 420
aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa 480
aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt 540
ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg 600
tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc 660
agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc 720
gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta 780
tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct 840
acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaaggacagt atttggtatc 900
tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa 960
caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa 1020
aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa 1080
aactcacgtt aagggatttt ggtcatgtga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt 1140
ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac 1200
agttagaaaa actcatcgag catcaaatga aactgcaatt tattcatatc aggattatca 1260
ataccatatt tttgaaaaag ccgtttctgt aatgaaggag aaaactcacc gaggcagttc 1320
cataggatgg caagatcctg gtatcggtct gcgattccga ctcgtccaac atcaatacaa 1380
cctattaatt tcccctcgtc aaaaataagg ttatcaagtg agaaatcacc atgagtgacg 1440
actgaatccg gtgagaatgg caaaagttta tgcatttctt tccagacttg ttcaacaggc 1500
cagccattac gctcgtcatc aaaatcactc gcatcaacca aaccgttatt cattcgtgat 1560
tgcgcctgag cgagacgaaa tacgcgatcg ctgttaaaag gacaattaca aacaggaatc 1620
gaatgcaacc ggcgcaggaa cactgccagc gcatcaacaa tattttcacc tgaatcagga 1680
tattcttcta atacctggaa tgctgttttc ccagggatcg cagtggtgag taaccatgca 1740
tcatcaggag tacggataaa atgcttgatg gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag 1800
tttagtctga ccatctcatc tgtaacatca ttggcaacgc tacctttgcc atgtttcaga 1860
aacaactctg gcgcatcggg cttcccatac aatcgataga ttgtcgcacc tgattgcccg 1920
acattatcgc gagcccattt atacccatat aaatcagcat ccatgttgga atttaatcgc 1980
ggcctagagc aagacgtttc ccgttgaata tggctcatac tcttcctttt tcaatattat 2040
tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg tatttagaaa 2100
aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cgtctaagaa 2160
accattatta acatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc ctttcgtctc 2220
gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca 2280
gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt 2340
ggcgggtgtc ggggctggct taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac 2400
catatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa aataccgcat caggcgccat 2460
tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg tgcgggcctc ttcgctatta 2520
cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa gttgggtaac gccagggttt 2580
tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgaattcg agctcggtac ccgtagccat 2640
ggaaactaga taagaaagaa atacgcagag accaaagttc aactgaaacg aattaaacgg 2700
tttattgatt aacaagcaat tacagattac gggtgaggta acgggtgcca atggggcggg 2760
gttcagagta cacgccttct gtattaacag caaagtccac acttgtagat ttgtagtagt 2820
tggaggtgta ctggatctcg gggttccagc gcttgctgtt ttccttctgc agctcccatt 2880
caatttccac gctgacctgt ccggtgctgt attgcgtgat gaaagagttc agctttgact 2940
ggttgaaggt ggtcggagga tccgcaggta caggcgtgtt cttgatcagg atctgaggcg 3000
gaggatgttt caggccaaag ccgcccatca gcggagacgg gtggaagttg ccgtccgtgt 3060
gaggaatctt ggcccagatg ggaccctgca ggtacacgtc ccggttctgc cagaccatac 3120
cgggtaaggc cccctggctg ttgacagttc caatttgagg agccgtgttt tgctgctgca 3180
agttatctgc cacgataccg tattcctctg tagccacagg gttagtggtt ttgatttctt 3240
cctcgctggt gagcatgaca tcgctgtaat ccgcattgtc tctggcagca ttttgtttgc 3300
caaaaatcag gatcccgtta ctgggaaaaa aacgctcctc gtcgtctttg tgtgttgcca 3360
tagcgatgcc aggattagcc aatgaatttc ttccattcag atggtatttg gtcccagcag 3420
tccaggcaaa gttgctattg ttgttttgcc cggttgtcgt tgagacgcgt tgttggcggt 3480
aacagggtcc tggcagccag ttctttgcct gattggccat tgtattaggc ccaccttggc 3540
tgaagcccag agtctgcgta tttgccgtgc ctcctgttgt ttgagtccga gacaagtagt 3600
acaggtactg gtcaatcaga ggattcatca gccggtccaa gctctggctg tgggcgtagc 3660
tgctgtggaa aggcacgtcc tcgaaggtgt aagtaaactg gaagttgttg ccggttctca 3720
gcatctgcga aggaaagtat tccaggcagt agaaggagga gcgtcccacg gcctgactac 3780
cgttgttgag tgttaggtag ccgtactggg gaatcatgaa cacgtccgcc gggaacggag 3840
gcaggcagcc ctggtgggca gagccgagaa cgtacggcag ctggtactcc gagtccgtaa 3900
acacctggat ggtgctggtg aggttattgg cgatggtctt ggtgccttca ttctgcgtga 3960
cctccttgac ctggatgttg aagagcttga agctgagtct cttgggccgg aatccccagt 4020
tgttgttgat gagtcgctgc cagtcacgtg gtgaaaagtg gcagtggaat ctgttaaagt 4080
caaaataccc ccagggggtg ctgtagccga agtaggtgtt gtcgttggtg gctcctcccg 4140
atgtcccgtt ggagatttgc ttgtagaggt ggttgttgta ggtgggcagg gcccaggttc 4200
gggtgctggt ggtgatgact ctgtcgccca gccatgtgga atcgcaatgc caatttcccg 4260
aggaactacc cactccgtcg gcgccttcgt tattgtctgc cattggtgcg ccaccgcctg 4320
cagccattgt attaggtccc acaccagagg gcgctgctgg aggttctccg agaggttgag 4380
ggtctggaac tgactctgag tcgccagtct gaccaaaatt gagtcttttt ctggcgggct 4440
gttggccttt cttgccgatg cccgtagagg agtctggaga acgctggggt gatggctcta 4500
ccggtctctt ctttccagga gccgtcttag cgccttcctc aaccagaccg agaggttcga 4560
gaacccgctt cttggcctgg aagactgctc gcccgaggtt gcccccaaaa gacgtatctt 4620
cttgcagacg ctcctgaaac tcggcgtcgg cgtggttata ccgcaggtac ggattgtcac 4680
ccgcctgcag ctgctggtcg taggccttgt cgtgctcgag ggccgctgcg tccgccgcgt 4740
tgacgggctc ccccttgtcg agtccgttga agggtccgag gtacttgtag ccaggaagca 4800
ccagaccccg gccgtcgtcc tgcttttgct ggttggcttt gggcttcggg gctccaggtt 4860
tcagcgccca ccactcgcga atgccctcag agaggttgtc ctcgagccaa tctggaagat 4920
aaccatcggc agccatacct gatttaaatc atttattgtt caaagatgca gtcatccaaa 4980
tccacattga ccagatcgca ggcagtgcaa gcgtctggca cctttcccat gatatgatga 5040
atgtagcaca gtttctgata cgcctttttg acgacagaaa cgggttgaga ttctgacacg 5100
ggaaagcact ctaaacagtc tttctgtccg tgagtgaagc agatatttga attctgattc 5160
attctctcgc attgtctgca gggaaacagc atcagattca tgcccacgtg acgagaacat 5220
ttgttttggt acctgtctgc gtagttgatc gaagcttccg cgtctgacgt cgatggctgc 5280
gcaactgact cgcgcacccg tttgggctca cttatatctg cgtcactggg ggcgggtctt 5340
ttcttggctc cacccttttt gacgtagaat tcatgctcca cctcaaccac gtgatccttt 5400
gcccaccgga aaaagtcttt gacttcctgc ttggtgacct tcccaaagtc atgatccaga 5460
cggcgggtga gttcaaattt gaacatccgg tcttgcaacg gctgctggtg ttcgaaggtc 5520
gttgagttcc cgtcaatcac ggcgcacatg ttggtgttgg aggtgacgat cacgggagtc 5580
gggtctatct gggccgagga cttgcatttc tggtccacgc gcaccttgct tcctccgaga 5640
atggctttgg ccgactccac gaccttggcg gtcatcttcc cctcctccca ccagatcacc 5700
atcttgtcga cacagtcgtt gaagggaaag ttctcattgg tccagtttac gcacccgtag 5760
aagggcacag tgtgggctat ggcctccgcg atgttggtct tcccggtagt tgcaggccca 5820
aacagccaga tggtgttcct cttgccgaac tttttcgtgg cccatcccag aaagacggaa 5880
gccgcatatt ggggatcgta cccgtttagt tccaaaattt tataaatccg attgctggaa 5940
atgtcctcca cgggctgctg gcccaccagg tagtcggggg cggttttagt caggctcata 6000
atctttcccg cattgtccaa ggcagccttg atttgggacc gcgagttgga ggccgcattg 6060
aaggagatgt atgaggcctg gtcctcctgg atccactgct tctccgaggt aatccccttg 6120
tccacgagcc acccgaccag ctccatgtac ctggctgaag tttttgatct gatcaccggc 6180
gcatcagaat tgggattctg attctctttg ttctgctcct gcgtctgcga cacgtgcgtc 6240
agatgctgcg ccaccaaccg tttacgctcc gtgagattca aacaggcgct taaatactgt 6300
tccatattag tccacgccca ctggagctca ggctgggttt tggggagcaa gtaattgggg 6360
atgtagcact catccaccac cttgttcccg cctccggcgc catttctggt ctttgtgacc 6420
gcgaaccagt ttggcaaagt cggctcgatc ccgcggtaaa ttctctgaat cagtttttcg 6480
cgaatctgac tcaggaaacg tcccaaaacc atggatttca ccccggtggt ttccacgagc 6540
acgtgcatgt ggaagtagct ctctcccttc tcaaattgca caaagaaaag ggcctccggg 6600
gccttactca cacggcgcca ttccgtcaga aagtcgcgct gcagcttctc ggccacggtc 6660
aggggtgcct gctcaatcag attcagatcc atgtcagaat ctggcggcaa ctcccattcc 6720
ttctcggcca cccagttcac aaagctgtca gaaatgccgg gcagatgctc gtcaaggtcg 6780
ctggggacct taatcacaat ctcgtaaaac cccggcatgg cggctgcgcg ttcaaacctc 6840
ccgcttcaaa atggagaccc tgcgtgctca ctcgggctta aatacccagc gtgaccacat 6900
ggtgtcgcaa aatgtcgcaa aacactcacg tgacctctaa tacaggacct ccctaaccct 6960
atgacgtaat tcacgtcacg actccacca 6989
<210> 36
<211> 2217
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 36
ttacagatta cgggtgaggt aacgggtgcc aatggggcgg ggttcagagt acacgccttc 60
tgtattaaca gcaaagtcca cacttgtaga tttgtagtag ttggaggtgt actggatctc 120
ggggttccag cgcttgctgt tttccttctg cagctcccat tcaatttcca cgctgacctg 180
tccggtgctg tattgcgtga tgaaagagtt cagctttgac tggttgaagg tggtcggagg 240
atccgcaggt acaggcgtgt tcttgatcag gatctgaggc ggaggatgtt tcaggccaaa 300
gccgcccatc agcggagacg ggtggaagtt gccgtccgtg tgaggaatct tggcccagat 360
gggaccctgc aggtacacgt cccggttctg ccagaccata ccgggtaagg ccccctggct 420
gttgacagtt ccaatttgag gagccgtgtt ttgctgctgc aagttatctg ccacgatacc 480
gtattcctct gtagccacag ggttagtggt tttgatttct tcctcgctgg tgagcatgac 540
atcgctgtaa tccgcattgt ctctggcagc attttgtttg ccaaaaatca ggatcccgtt 600
actgggaaaa aaacgctcct cgtcgtcttt gtgtgttgcc atagcgatgc caggattagc 660
caatgaattt cttccattca gatggtattt ggtcccagca gtccaggcaa agttgctatt 720
gttgttttgc ccggttgtcg ttgagacgcg ttgttggcgg taacagggtc ctggcagcca 780
gttctttgcc tgattggcca ttgtattagg cccaccttgg ctgaagccca gagtctgcgt 840
atttgccgtg cctcctgttg tttgagtccg agacaagtag tacaggtact ggtcaatcag 900
aggattcatc agccggtcca agctctggct gtgggcgtag ctgctgtgga aaggcacgtc 960
ctcgaaggtg taagtaaact ggaagttgtt gccggttctc agcatctgcg aaggaaagta 1020
ttccaggcag tagaaggagg agcgtcccac ggcctgacta ccgttgttga gtgttaggta 1080
gccgtactgg ggaatcatga acacgtccgc cgggaacgga ggcaggcagc cctggtgggc 1140
agagccgaga acgtacggca gctggtactc cgagtccgta aacacctgga tggtgctggt 1200
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gaagagcttg aagctgagtc tcttgggccg gaatccccag ttgttgttga tgagtcgctg 1320
ccagtcacgt ggtgaaaagt ggcagtggaa tctgttaaag tcaaaatacc cccagggggt 1380
gctgtagccg aagtaggtgt tgtcgttggt ggctcctccc gatgtcccgt tggagatttg 1440
cttgtagagg tggttgttgt aggtgggcag ggcccaggtt cgggtgctgg tggtgatgac 1500
tctgtcgccc agccatgtgg aatcgcaatg ccaatttccc gaggaactac ccactccgtc 1560
ggcgccttcg ttattgtctg ccattggtgc gccaccgcct gcagccattg tattaggtcc 1620
cacaccagag ggcgctgctg gaggttctcc gagaggttga gggtctggaa ctgactctga 1680
gtcgccagtc tgaccaaaat tgagtctttt tctggcgggc tgttggcctt tcttgccgat 1740
gcccgtagag gagtctggag aacgctgggg tgatggctct accggtctct tctttccagg 1800
agccgtctta gcgccttcct caaccagacc gagaggttcg agaacccgct tcttggcctg 1860
gaagactgct cgcccgaggt tgcccccaaa agacgtatct tcttgcagac gctcctgaaa 1920
ctcggcgtcg gcgtggttat accgcaggta cggattgtca cccgcctgca gctgctggtc 1980
gtaggccttg tcgtgctcga gggccgctgc gtccgccgcg ttgacgggct cccccttgtc 2040
gagtccgttg aagggtccga ggtacttgta gccaggaagc accagacccc ggccgtcgtc 2100
ctgcttttgc tggttggctt tgggcttcgg ggctccaggt ttcagcgccc accactcgcg 2160
aatgccctca gagaggttgt cctcgagcca atctggaaga taaccatcgg cagccat 2217
<210> 37
<211> 6983
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 37
ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg 60
tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa 120
gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct 180
ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga 240
ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc 300
gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa 360
tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt 420
aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa 480
aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt 540
ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg 600
tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc 660
agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc 720
gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta 780
tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct 840
acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaaggacagt atttggtatc 900
tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa 960
caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa 1020
aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa 1080
aactcacgtt aagggatttt ggtcatgtga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt 1140
ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac 1200
agttagaaaa actcatcgag catcaaatga aactgcaatt tattcatatc aggattatca 1260
ataccatatt tttgaaaaag ccgtttctgt aatgaaggag aaaactcacc gaggcagttc 1320
cataggatgg caagatcctg gtatcggtct gcgattccga ctcgtccaac atcaatacaa 1380
cctattaatt tcccctcgtc aaaaataagg ttatcaagtg agaaatcacc atgagtgacg 1440
actgaatccg gtgagaatgg caaaagttta tgcatttctt tccagacttg ttcaacaggc 1500
cagccattac gctcgtcatc aaaatcactc gcatcaacca aaccgttatt cattcgtgat 1560
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tcatcaggag tacggataaa atgcttgatg gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag 1800
tttagtctga ccatctcatc tgtaacatca ttggcaacgc tacctttgcc atgtttcaga 1860
aacaactctg gcgcatcggg cttcccatac aatcgataga ttgtcgcacc tgattgcccg 1920
acattatcgc gagcccattt atacccatat aaatcagcat ccatgttgga atttaatcgc 1980
ggcctagagc aagacgtttc ccgttgaata tggctcatac tcttcctttt tcaatattat 2040
tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg tatttagaaa 2100
aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cgtctaagaa 2160
accattatta acatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc ctttcgtctc 2220
gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca 2280
gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt 2340
ggcgggtgtc ggggctggct taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac 2400
catatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa aataccgcat caggcgccat 2460
tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg tgcgggcctc ttcgctatta 2520
cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa gttgggtaac gccagggttt 2580
tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgaattcg agctcggtac ccgtagccat 2640
ggaaactaga taagaaagaa atacgcagag accaaagttc aactgaaacg aattaaacgg 2700
tttattgatt aacaagcaat tacagattac gagtcaggta tctggtgcca atggggcggg 2760
gttcactata tacaccttca gtattaacag caaattcaac attattagac ttgtaatagt 2820
tggaagtgta ctggatctcc gggttccagc gcttgctgtt ttccttctgc agctcccact 2880
cgatctccac gctgacttgg ccagtagaat actgggtgat gaaagagttc agcttgtcct 2940
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cttcgttggt tatcatgact ttgtccgcat ccacgttgtc tcttccagtt ccttgtttgc 3300
caaaaattaa agatccagac aaaggaaaga aacggtcctc tccttctttg tggctggcca 3360
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agctgggtcc aggtatgtag tttcttccct ggacagccat gttgctgggt ccggccacac 3540
tgaattttag cgtttgttga ttctgtccag aaccgttaat agtctttgag agatagtaca 3600
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tttgcgacgg gaaatattcc aggcagtaaa aggacgaacg acccacggcc tggcttccat 3780
cattaagcgt cagatacccg tactgaggaa tcatgaaaac gtccgctggg aacggcggga 3840
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tgttgatgag tcgctgccag tcacgtggtg agaagtggca gtggaatctg ttgaagtcaa 4080
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tgctgttgga gatttgcttg tagaggtgat tgttgtaggt gggcagggcc caggttcggg 4200
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ccattgtaag agatcccaca cctgaggggg ctgcgggagg ttctccgatt ggttgagggt 4380
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gccgctcctg gaactcggcg tcggcgtggt tgtacttgag gtacgggttg tctccggcct 4680
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cccaccactc gcgaattcct tcactaaggt tgtcctcgag ccaatctgga agataaccat 4920
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gctccaccct ttttgacgta gaattcatgc tccacctcaa ccacgtgatc ctttgcccac 5400
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ttggccgact ccacgacctt ggcggtcatc ttcccctcct cccaccagat caccatcttg 5700
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tccacgggct gctggcccac caggtagtcg ggggcggttt tagtcaggct cataatcttt 6000
cccgcattgt ccaaggcagc cttgatttgg gaccgcgagt tggaggccgc attgaaggag 6060
atgtatgagg cctggtcctc ctggatccac tgcttctccg aggtaatccc cttgtccacg 6120
agccacccga ccagctccat gtacctggct gaagtttttg atctgatcac cggcgcatca 6180
gaattgggat tctgattctc tttgttctgc tcctgcgtct gcgacacgtg cgtcagatgc 6240
tgcgccacca accgtttacg ctccgtgaga ttcaaacagg cgcttaaata ctgttccata 6300
ttagtccacg cccactggag ctcaggctgg gttttgggga gcaagtaatt ggggatgtag 6360
cactcatcca ccaccttgtt cccgcctccg gcgccatttc tggtctttgt gaccgcgaac 6420
cagtttggca aagtcggctc gatcccgcgg taaattctct gaatcagttt ttcgcgaatc 6480
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atgtggaagt agctctctcc cttctcaaat tgcacaaaga aaagggcctc cggggcctta 6600
ctcacacggc gccattccgt cagaaagtcg cgctgcagct tctcggccac ggtcaggggt 6660
gcctgctcaa tcagattcag atccatgtca gaatctggcg gcaactccca ttccttctcg 6720
gccacccagt tcacaaagct gtcagaaatg ccgggcagat gctcgtcaag gtcgctgggg 6780
accttaatca caatctcgta aaaccccggc atggcggctg cgcgttcaaa cctcccgctt 6840
caaaatggag accctgcgtg ctcactcggg cttaaatacc cagcgtgacc acatggtgtc 6900
gcaaaatgtc gcaaaacact cacgtgacct ctaatacagg acctccctaa ccctatgacg 6960
taattcacgt cacgactcca cca 6983
<210> 38
<211> 31
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成寡核苷酸
<400> 38
caacatacga gccggaagca taaagtgtaa a 31
<210> 39
<211> 5334
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 39
ggtacccaac tccatgctca acagtcccca ggtacagccc accctgcgtc gcaaccagga 60
acagctctac agcttcctgg agcgccactc gccctacttc cgcagccaca gtgcgcagat 120
taggagcgcc acttcttttt gtcacttgaa aaacatgtaa aaataatgta ctagagacac 180
tttcaataaa ggcaaatgct tttatttgta cactctcggg tgattattta cccccaccct 240
tgccgtctgc gccgtttaaa aatcaaaggg gttctgccgc gcatcgctat gcgccactgg 300
cagggacacg ttgcgatact ggtgtttagt gctccactta aactcaggca caaccatccg 360
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gctcttgtcg gagatcagat ccgcgtccag gtcctccgcg ttgctcaggg cgaacggagt 600
caactttggt agctgccttc ccaaaaaggg cgcgtgccca ggctttgagt tgcactcgca 660
ccgtagtggc atcaaaaggt gaccgtgccc ggtctgggcg ttaggataca gcgcctgcat 720
aaaagccttg atctgcttaa aagccacctg agcctttgcg ccttcagaga agaacatgcc 780
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gtcggtgttg gagatctgca ccacatttcg gccccaccgg ttcttcacga tcttggcctt 900
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gtgctcctta tttatcataa tgcttccgtg tagacactta agctcgcctt cgatctcagc 1020
gcagcggtgc agccacaacg cgcagcccgt gggctcgtga tgcttgtagg tcacctctgc 1080
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ggtgaaggtc agctgcaacc cgcggtgctc ctcgttcagc caggtcttgc atacggccgc 1200
cagagcttcc acttggtcag gcagtagttt gaagttcgcc tttagatcgt tatccacgtg 1260
gtacttgtcc atcagcgcgc gcgcagcctc catgcccttc tcccacgcag acacgatcgg 1320
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ctcttgcgtc cgcataccac gcgccactgg gtcgtcttca ttcagccgcc gcactgtgcg 1440
cttacctcct ttgccatgct tgattagcac cggtgggttg ctgaaaccca ccatttgtag 1500
cgccacatct tctctttctt cctcgctgtc cacgattacc tctggtgatg gcgggcgctc 1560
gggcttggga gaagggcgct tctttttctt cttgggcgca atggccaaat ccgccgccga 1620
ggtcgatggc cgcgggctgg gtgtgcgcgg caccagcgcg tcttgtgatg agtcttcctc 1680
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cgacggggac ggggacgaca cgtcctccat ggttggggga cgtcgcgccg caccgcgtcc 1800
gcgctcgggg gtggtttcgc gctgctcctc ttcccgactg gccatttcct tctcctatag 1860
gcagaaaaag atcatggagt cagtcgagaa gaaggacagc ctaaccgccc cctctgagtt 1920
cgccaccacc gcctccaccg atgccgccaa cgcgcctacc accttccccg tcgaggcacc 1980
cccgcttgag gaggaggaag tgattatcga gcaggaccca ggttttgtaa gcgaagacga 2040
cgaggaccgc tcagtaccaa cagaggataa aaagcaagac caggacaacg cagaggcaaa 2100
cgaggaacaa gtcgggcggg gggacgaaag gcatggcgac tacctagatg tgggagacga 2160
cgtgctgttg aagcatctgc agcgccagtg cgccattatc tgcgacgcgt tgcaagagcg 2220
cagcgatgtg cccctcgcca tagcggatgt cagccttgcc tacgaacgcc acctattctc 2280
accgcgcgta ccccccaaac gccaagaaaa cggcacatgc gagcccaacc cgcgcctcaa 2340
cttctacccc gtatttgccg tgccagaggt gcttgccacc tatcacatct ttttccaaaa 2400
ctgcaagata cccctatcct gccgtgccaa ccgcagccga gcggacaagc agctggcctt 2460
gcggcagggc gctgtcatac ctgatatcgc ctcgctcaac gaagtgccaa aaatctttga 2520
gggtcttgga cgcgacgaga agcgcgcggc aaacgctctg caacaggaaa acagcgaaaa 2580
tgaaagtcac tctggagtgt tggtggaact cgagggtgac aacgcgcgcc tagccgtact 2640
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aaatttgcaa gaacaaacag aggagggcct acccgcagtt ggcgacgagc agctagcgcg 2820
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agtgctcgtt accgtggagc ttgagtgcat gcagcggttc tttgctgacc cggagatgca 2940
gcgcaagcta gaggaaacat tgcactacac ctttcgacag ggctacgtac gccaggcctg 3000
caagatctcc aacgtggagc tctgcaacct ggtctcctac cttggaattt tgcacgaaaa 3060
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ccgcgactgc gtttacttat ttctatgcta cacctggcag acggccatgg gcgtttggca 3180
gcagtgcttg gaggagtgca acctcaagga gctgcagaaa ctgctaaagc aaaacttgaa 3240
ggacctatgg acggccttca acgagcgctc cgtggccgcg cacctggcgg acatcatttt 3300
ccccgaacgc ctgcttaaaa ccctgcaaca gggtctgcca gacttcacca gtcaaagcat 3360
gttgcagaac tttaggaact ttatcctaga gcgctcagga atcttgcccg ccacctgctg 3420
tgcacttcct agcgactttg tgcccattaa gtaccgcgaa tgccctccgc cgctttgggg 3480
ccactgctac cttctgcagc tagccaacta ccttgcctac cactctgaca taatggaaga 3540
cgtgagcggt gacggtctac tggagtgtca ctgtcgctgc aacctatgca ccccgcaccg 3600
ctccctggtt tgcaattcgc agctgcttaa cgaaagtcaa attatcggta cctttgagct 3660
gcagggtccc tcgcctgacg aaaagtccgc ggctccgggg ttgaaactca ctccggggct 3720
gtggacgtcg gcttaccttc gcaaatttgt acctgaggac taccacgccc acgagattag 3780
gttctacgaa gaccaatccc gcccgccaaa tgcggagctt accgcctgcg tcattaccca 3840
gggccacatt cttggccaat tgcaagccat caacaaagcc cgccaagagt ttctgctacg 3900
aaagggacgg ggggtttact tggaccccca gtccggcgag gagctcaacc caatcccccc 3960
gccgccgcag ccctatcagc agcagccgcg ggcccttgct tcccaggatg gcacccaaaa 4020
agaagctgca gctgccgccg ccacccacgg acgaggagga atactgggac agtcaggcag 4080
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aagcttccga ggtcgaagag gtgtcagacg aaacaccgtc accctcggtc gcattcccct 4200
cgccggcgcc ccagaaatcg gcaaccggtt ccagcatggc tacaacctcc gctcctcagg 4260
cgccgccggc actgcccgtt cgccgaccca accgtagatg ggacaccact ggaaccaggg 4320
ccggtaagtc caagcagccg ccgccgttag cccaagagca acaacagcgc caaggctacc 4380
gctcatggcg cgggcacaag aacgccatag ttgcttgctt gcaagactgt gggggcaaca 4440
tctccttcgc ccgccgcttt cttctctacc atcacggcgt ggccttcccc cgtaacatcc 4500
tgcattacta ccgtcatctc tacagcccat actgcaccgg cggcagcggc agcggcagca 4560
acagcagcgg ccacacagaa gcaaaggcga ccggatagca agactctgac aaagcccaag 4620
aaatccacag cggcggcagc agcaggagga ggagcgctgc gtctggcgcc caacgaaccc 4680
gtatcgaccc gcgagcttag aaacaggatt tttcccactc tgtatgctat atttcaacag 4740
agcaggggcc aagaacaaga gctgaaaata aaaaacaggt ctctgcgatc cctcacccgc 4800
agctgcctgt atcacaaaag cgaagatcag cttcggcgca cgctggaaga cgcggaggct 4860
ctcttcagta aatactgcgc gctgactctt aaggactagt ttcgcgccct ttctcaaatt 4920
taagcgcgaa aactacgtca tctccagcgg ccacacccgg cgccagcacc tgtcgtcagc 4980
gccattatga gcaaggaaat tcccacgccc tacatgtgga gttaccagcc acaaatggga 5040
cttgcggctg gagctgccca agactactca acccgaataa actacatgag cgcgggaccc 5100
cacatgatat cccgggtcaa cggaatccgc gcccaccgaa accgaattct cttggaacag 5160
gcggctatta ccaccacacc tcgtaataac cttaatcccc gtagttggcc cgctgccctg 5220
gtgtaccagg aaagtcccgc tcccaccact gtggtacttc ccagagacgc ccaggccgaa 5280
gttcagatga ctaactcagg ggcgcagctt gcgggcggct ttcgtcacag ggtg 5334
<210> 40
<211> 3201
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 40
tacactaaac ggtacacagg aaacaggaga cacaactcca agtgcatact ctatgtcatt 60
ttcatgggac tggtctggcc acaactacat taatgaaata tttgccacat cctcttacac 120
tttttcatac attgcccaag aataaagaat cgtttgtgtt atgtttcaac gtgtttattt 180
ttcaattgca gaaaatttca agtcattttt cattcagtag tatagcccca ccaccacata 240
gcttatacag atcaccgtac cttaatcaaa ctcacagaac cctagtattc aacctgccac 300
ctccctccca acacacagag tacacagtcc tttctccccg gctggcctta aaaagcatca 360
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ccagctgctg agccacaggc tgctgtccaa cttgcggttg cttaacgggc ggcgaaggag 540
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cacagcagcg caccctgatc tcacttaaat cagcacagta actgcagcac agcaccacaa 780
tattgttcaa aatcccacag tgcaaggcgc tgtatccaaa gctcatggcg gggaccacag 840
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gcccgccggc tatacactgc agggaaccgg gactggaaca atgacagtgg agagcccagg 1080
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cgtgcataca cttcctcagg attacaagct cctcccgcgt tagaaccata tcccagggaa 1200
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cagcctcaag cagcgaatca tgattgcaaa aattcaggtt cctcacagac ctgtataaga 2100
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ccgatgtaag cttgttgcat gggcggcgat ataaaatgca aggtgctgct caaaaaatca 2340
ggcaaagcct cgcgcaaaaa agaaagcaca tcgtagtcat gctcatgcag ataaaggcag 2400
gtaagctccg gaaccaccac agaaaaagac accatttttc tctcaaacat gtctgcgggt 2460
ttctgcataa acacaaaata aaataacaaa aaaacattta aacattagaa gcctgtctta 2520
caacaggaaa aacaaccctt ataagcataa gacggactac ggccatgccg gcgtgaccgt 2580
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tcataatgta agactcggta aacacatcag gttgattcac atcggtcagt gctaaaaagc 2700
gaccgaaata gcccggggga atacataccc gcaggcgtag agacaacatt acagccccca 2760
taggaggtat aacaaaatta ataggagaga aaaacacata aacacctgaa aaaccctcct 2820
gcctaggcaa aatagcaccc tcccgctcca gaacaacata cagcgcttcc acagcggcag 2880
ccataacagt cagccttacc agtaaaaaag aaaacctatt aaaaaaacac cactcgacac 2940
ggcaccagct caatcagtca cagtgtaaaa aagggccaag tgcagagcga gtatatatag 3000
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cctacgccca gaaacgaaag ccaaaaaacc cacaacttcc tcaaatcgtc acttccgttt 3120
tcccacgtta cgtaacttcc cattttaaga aaactacaat tcccaacaca tacaagttac 3180
tccgccctaa aacctacgtc a 3201
<210> 41
<211> 6896
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 41
ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg 60
tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa 120
gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct 180
ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga 240
ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc 300
gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa 360
tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt 420
aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa 480
aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt 540
ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg 600
tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc 660
agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc 720
gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta 780
tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct 840
acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaaggacagt atttggtatc 900
tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa 960
caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa 1020
aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa 1080
aactcacgtt aagggatttt ggtcatgtga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt 1140
ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac 1200
agttagaaaa actcatcgag catcaaatga aactgcaatt tattcatatc aggattatca 1260
ataccatatt tttgaaaaag ccgtttctgt aatgaaggag aaaactcacc gaggcagttc 1320
cataggatgg caagatcctg gtatcggtct gcgattccga ctcgtccaac atcaatacaa 1380
cctattaatt tcccctcgtc aaaaataagg ttatcaagtg agaaatcacc atgagtgacg 1440
actgaatccg gtgagaatgg caaaagttta tgcatttctt tccagacttg ttcaacaggc 1500
cagccattac gctcgtcatc aaaatcactc gcatcaacca aaccgttatt cattcgtgat 1560
tgcgcctgag cgagacgaaa tacgcgatcg ctgttaaaag gacaattaca aacaggaatc 1620
gaatgcaacc ggcgcaggaa cactgccagc gcatcaacaa tattttcacc tgaatcagga 1680
tattcttcta atacctggaa tgctgttttc ccagggatcg cagtggtgag taaccatgca 1740
tcatcaggag tacggataaa atgcttgatg gtcggaagag gcataaattc cgtcagccag 1800
tttagtctga ccatctcatc tgtaacatca ttggcaacgc tacctttgcc atgtttcaga 1860
aacaactctg gcgcatcggg cttcccatac aatcgataga ttgtcgcacc tgattgcccg 1920
acattatcgc gagcccattt atacccatat aaatcagcat ccatgttgga atttaatcgc 1980
ggcctagagc aagacgtttc ccgttgaata tggctcatac tcttcctttt tcaatattat 2040
tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg tatttagaaa 2100
aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cgtctaagaa 2160
accattatta acatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc ctttcgtctc 2220
gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca 2280
gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt 2340
ggcgggtgtc ggggctggct taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac 2400
catatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa aataccgcat caggcgccat 2460
tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg tgcgggcctc ttcgctatta 2520
cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa gttgggtaac gccagggttt 2580
tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgaattcg agctcggtac ccgtagccat 2640
ggaaactaga taagaaagaa atacgcagag accaaagttc aactgaaacg aattaaacgg 2700
tttattgatt aacaagcaat tacagattac gagtcaggta tctggtgcca atggggcggg 2760
gttcactata tacaccttca gtattaacag caaattcaac attattagac ttgtaatagt 2820
tggaagtgta ctggatctcc gggttccagc gcttgctgtt ttccttctgc agctcccact 2880
cgatctccac gctgacttgg ccagtagaat actgggtgat gaaagagttc agcttgtcct 2940
tgttgaaggc cgttggagga tccgcaggta caggtgtgtt tttgatgagg atctgaggag 3000
gcgggtgctt cattccaaac cctcccatca gcggagaagg gtgaaagttg ccgtccgtgt 3060
gaggaatttt ggcccaaatg ggtccttgca ggtacacatc tctgtcctgc caaaccatac 3120
ccggaagtat tccttggttt tgaacccagc cggtctgcgc ctgtgcttgg gcactctggt 3180
ggtttgtggc cacttgtcca taggactccg ttgctaccgg gttagtagtt ttaatttctt 3240
cttcgttggt tatcatgact ttgtccgcat ccacgttgtc tcttccagtt ccttgtttgc 3300
caaaaattaa agatccagac aaaggaaaga aacggtcctc tccttctttg tggctggcca 3360
tagcaggtcc aggattcatc aagctattac gtccattgag agcccaagaa gaagctccag 3420
gccaagcaaa ttcgctgttg ttgttttgag tcacagtggt tgagacacgt tgttgtcggt 3480
agctgggtcc aggtatgtag tttcttccct ggacagccat gttgctgggt ccggccacac 3540
tgaattttag cgtttgttga ttctgtccag aaccgttaat agtctttgag agatagtaca 3600
agtattggtc gatgagtgga ttcattagtc ggtccaggct ttggctgtga gcgtagctgc 3660
tatggaaagg tacgttctca aactcgtagc tgaactggaa gttgttaccc gttcttagca 3720
tttgcgacgg gaaatattcc aggcagtaaa aggacgaacg acccacggcc tggcttccat 3780
cattaagcgt cagatacccg tactgaggaa tcatgaaaac gtccgctggg aacggcggga 3840
ggcagccctc gtgagccgac ccgagcacgt acgggagctg atagtctgag tccgtgaaga 3900
cctggaccgt gctggtaagg ttattggcga tggtcttgac tccattgttg tccgtaacct 3960
ctttgacctg aatgttgaag agcttgaagt tgagtcgctt aggccggaat ccccagttgt 4020
tgttgatgag tcgctgccag tcacgtggtg agaagtggca gtggaatctg ttgaagtcaa 4080
aataccccca gggggtgctg tagccgaagt aggcgttgtc atttgaagat cctccagatg 4140
tgctgttgga gatttgcttg tagaggtgat tgttgtaggt gggcagggcc caggttcggg 4200
tgctggtggt gatgactctg tcccccagcc attgggaatc gcaatgccaa tttcccgagg 4260
aactacccac tccatcggca ccttcgttat tgtctgccac tggtgcgcca ccacctgaag 4320
ccattgtaag agatcccaca cctgaggggg ctgcgggagg ttctccgatt ggttgagggt 4380
ctgggactga ctctgtgtcg ccagtctgac cgaaattgag tctcttttta gcgggctgtg 4440
cacccgattt gccaataccc gcggaggagt ccggttcctg aggagactgc tctacaggcc 4500
tcttctttcc aggagccgtc ttagccgctt cctcaaccag accaagaggt tcaagaagcc 4560
tctttttggc ctggaagact gctcgcccga ggttgccccc aaaagacgta tcttctttga 4620
gccgctcctg gaactcggcg tcggcgtggt tgtacttgag gtacgggttg tctccggcct 4680
tgagctgctg gtcgtaggcc ttgtcgtgct cgagggccgc cgcgtctgct gcgttgaccg 4740
gctccccctt gtcgagtccg ttgccgggtc caaggtattt gtaacccgga agcacaagac 4800
ctcgagcgtt gtcttgatgt tgttgatttg ccttgggttg aggggctcca ggtttcaaag 4860
cccaccactc gcgaattcct tcactaaggt tgtcctcgag ccaatctgga agataaccat 4920
cggcagccat acctgattta aatcatttat tgttcaaaga tgcagtcatc caaatccaca 4980
ttgaccagat cgcaggcagt gcaagcgtct ggcacctttc ccatgatatg atgaatgtag 5040
cacagtttct gatacgcctt tttgacgaca gaaacgggtt gagattctga cacgggaaag 5100
cactctaaac agtctttctg tccgtgagtg aagcagatat ttgaattctg attcattctc 5160
tcgcattgtc tgcagggaaa cagcatcaga ttcatgccca cgtgacgaga acatttgttt 5220
tggtacctgt ctgcgtagtt gatcgaagct tccgcgtctg acgtcgatgg ctgcgcaact 5280
gactcgcgca cccgtttggg ctcacttata tctgcgtcac tgggggcggg tcttttcttg 5340
gctccaccct ttttgacgta gaattcatgc tccacctcaa ccacgtgatc ctttgcccac 5400
cggaaaaagt ctttgacttc ctgcttggtg accttcccaa agtcatgatc cagacggcgg 5460
gtgagttcaa atttgaacat ccggtcttgc aacggctgct ggtgttcgaa ggtcgttgag 5520
ttcccgtcaa tcacggcgca catgttggtg ttggaggtga cgatcacggg agtcgggtct 5580
atctgggccg aggacttgca tttctggtcc acgcgcacct tgcttcctcc gagaatggct 5640
ttggccgact ccacgacctt ggcggtcatc ttcccctcct cccaccagat caccatcttg 5700
tcgacacagt cgttgaaggg aaagttctca ttggtccagt ttacgcaccc gtagaagggc 5760
acagtgtggg ctatggcctc cgcgatgttg gtcttcccgg tagttgcagg cccaaacagc 5820
cagatggtgt tcctcttgcc gaactttttc gtggcccatc ccagaaagac ggaagccgca 5880
tattggggat cgtacccgtt tagttccaaa attttataaa tccgattgct ggaaatgtcc 5940
tccacgggct gctggcccac caggtagtcg ggggcggttt tagtcaggct cataatcttt 6000
cccgcattgt ccaaggcagc cttgatttgg gaccgcgagt tggaggccgc attgaaggag 6060
atgtatgagg cctggtcctc ctggatccac tgcttctccg aggtaatccc cttgtccacg 6120
agccacccga ccagctccat gtacctggct gaagtttttg atctgatcac cggcgcatca 6180
gaattgggat tctgattctc tttgttctgc tcctgcgtct gcgacacgtg cgtcagatgc 6240
tgcgccacca accgtttacg ctccgtgaga ttcaaacagg cgcttaaata ctgttccata 6300
ttagtccacg cccactggag ctcaggctgg gttttgggga gcaagtaatt ggggatgtag 6360
cactcatcca ccaccttgtt cccgcctccg gcgccatttc tggtctttgt gaccgcgaac 6420
cagtttggca aagtcggctc gatcccgcgg taaattctct gaatcagttt ttcgcgaatc 6480
tgactcagga aacgtcccaa aaccatggat ttcaccccgg tggtttccac gagcacgtgc 6540
atgtggaagt agctctctcc cttctcaaat tgcacaaaga aaagggcctc cggggcctta 6600
ctcacacggc gccattccgt cagaaagtcg cgctgcagct tctcggccac ggtcaggggt 6660
gcctgctcaa tcagattcag atccatgtca gaatctggcg gcaactccca ttccttctcg 6720
gccacccagt tcacaaagct gtcagaaatg ccgggcagat gctcgtcaag gtcgctgggg 6780
accttaatca caatctcgta aaaccccggc atggcggctg cgcagatcag aagttcctat 6840
actttctaga gaataggaac ttcggaatag gaacttctga tcttccgggg gatcca 6896
<210> 42
<211> 8469
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<220>
<221> modified_base
<222> (4155)..(4254)
<223> a、c、t、g，未知或其他
<220>
<221> misc_feature
<222> (4155)..(4254)
<223> 这个区域可涵盖60-100个核苷酸
<400> 42
tagggaaata ggccaggttt tcaccgtaac acgccacatc ttgcgaatat atgtgtagaa 60
actgccggaa atcgtcgtgt gcactcatgg aaaacggtgt aacaagggtg aacactatcc 120
catatcacca gctcaccgtc tttcattgcc atacggaact ccggatgagc attcatcagg 180
cgggcaagaa tgtgaataaa ggccggataa aacttgtgct tatttttctt tacggtcttt 240
aaaaaggccg taatatccag ctgaacggtc tggttatagg tacattgagc aactgactga 300
aatgcctcaa aatgttcttt acgatgccat tgggatatat caacggtggt atatccagtg 360
atttttttct ccattttttt ttcctccttt agaaaaactc atcgagcatc aaatgaaact 420
gcaatttatt catatcagga ttatcaatac catatttttg aaaaagccgt ttctgtaatg 480
aaggagaaaa ctcaccgagg cagttccata ggatggcaag atcctggtat cggtctgcga 540
ttccgactcg tccaacatca atacaaccta ttaatttccc ctcgtcaaaa ataaggttat 600
caagtgagaa atcaccatga gtgacgactg aatccggtga gaatggcaaa agtttatgca 660
tttctttcca gacttgttca acaggccagc cattacgctc gtcatcaaaa tcactcgcat 720
caaccaaacc gttattcatt cgtgattgcg cctgagcgag gcgaaatacg cgatcgctgt 780
taaaaggaca attacaaaca ggaatcgagt gcaaccggcg caggaacact gccagcgcat 840
caacaatatt ttcacctgaa tcaggatatt cttctaatac ctggaacgct gtttttccgg 900
ggatcgcagt ggtgagtaac catgcatcat caggagtacg gataaaatgc ttgatggtcg 960
gaagtggcat aaattccgtc agccagttta gtctgaccat ctcatctgta acatcattgg 1020
caacgctacc tttgccatgt ttcagaaaca actctggcgc atcgggcttc ccatacaagc 1080
gatagattgt cgcacctgat tgcccgacat tatcgcgagc ccatttatac ccatataaat 1140
cagcatccat gttggaattt aatcgcggcc tcgacgtttc ccgttgaata tggctcattt 1200
ttttttcctc ctttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt 1260
tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt 1320
accatctggc cccagcgctg cgatgatacc gcgagaacca cgctcaccgg ctccggattt 1380
atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc 1440
cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa 1500
tagtttgcgc aacgttgttg ccatcgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg 1560
tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt 1620
gtgcacgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg 1680
cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca 1740
accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata 1800
cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct 1860
tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact 1920
cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa 1980
acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc 2040
atattcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga 2100
tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg tcagtgttac aaccaattaa 2160
ccaattctga acattatcgc gagcccattt atacctgaat atggctcata acaccccttg 2220
tttgcctggc ggcagtagcg cggtggtccc acctgacccc atgccgaact cagaagtgaa 2280
acgccgtagc gccgatggta gtgtggggac tccccatgcg agagtaggga actgccaggc 2340
atcaaataaa acgaaaggct cagtcgaaag actgggcctt tcgcccgggc taattgaggg 2400
gtgtcgccct tattcgactc ggggctcgag cagcagctgc gcgctcgctc gctcactgag 2460
gccgcccggg caaagcccgg gcgtcgggcg acctttggtc gcccggcctc agtgagcgag 2520
cgagcgcgca gagagggagt ggggttttaa ttaaacgcgt ttacataact tacggtaaat 2580
ggcccgcctg gctgaccgcc caacgacccc cgcccattga cgtcaataat gacgtatgtt 2640
cccatagtaa cgccaatagg gactttccat tgacgtcaat gggtggacta tttacggtaa 2700
actgcccact tggcagtaca tcaagtgtat catatgccaa gtacgccccc tattgacgtc 2760
aatgacggta aatggcccgc ctggcattat gcccagtaca tgaccttatg ggactttcct 2820
acttggcagt acatctacgt attagtcatc gctattacca tggtgatgcg gttttggcag 2880
tacatcaatg ggcgtggata gcggtttgac tcacggggat ttccaagtct ccaccccatt 2940
gacgtcaatg ggagtttgtt ttggcaccaa aatcaacggg actttccaaa atgtcgtaac 3000
aactccgccc cattgacgca aatgggcggt aggcgtgtac ggtgggaggt ctatataggc 3060
gcgccgaact gaaaaaccag aaagttaact ggtaagttta gtctttttgt cttttatttc 3120
aggtcccgga tccggtggtg gtgcaaatca aagaactgct cctcagtgga tgttgccttt 3180
acttctaggc ctgtacggaa gtgttacttc tgctctaaaa gctcctgcag ggaattcgcc 3240
accatggtga gcaagggcga ggagctgttc accggggtgg tgcccatcct ggtcgagctg 3300
gacggcgacg taaacggcca caagttcagc gtgtccggcg agggcgaggg cgatgccacc 3360
tacggcaagc tgaccctgaa gttcatctgc accaccggca agctgcccgt gccctggccc 3420
accctcgtga ccaccctgac ctacggcgtg cagtgcttca gccgctaccc cgaccacatg 3480
aagcagcacg acttcttcaa gtccgccatg cccgaaggct acgtccagga gcgcaccatc 3540
ttcttcaagg acgacggcaa ctacaagacc cgcgccgagg tgaagttcga gggcgacacc 3600
ctggtgaacc gcatcgagct gaagggcatc gacttcaagg aggacggcaa catcctgggg 3660
cacaagctgg agtacaacta caacagccac aacgtctata tcatggccga caagcagaag 3720
aacggcatca aggtgaactt caagatccgc cacaacatcg aggacggcag cgtgcagctc 3780
gccgaccact accagcagaa cacccccatc ggcgacggcc ccgtgctgct gcccgacaac 3840
cactacctga gcacccagtc cgccctgagc aaagacccca acgagaagcg cgatcacatg 3900
gtcctgctgg agttcgtgac cgccgccggg atcactctcg gcatggacga gctgtacaag 3960
taatagacta gtgtcgacag atcttttaaa aaacctccca cacaattgtt gttgttaact 4020
tgtttattgc agcttataat ggttacaaat aaagcaatag catcacaaat ttcacaaata 4080
aagcattttt ttcactgcat tctagttgtg gtttgtccaa actcatcaat gtatcttatc 4140
atgtctgttt aaacnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 4200
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnatttaa 4260
ataggaaccc ctagtgatgg agttggccac tccctctctg cgcgctcgct cgctcactga 4320
ggccgggcga ccaaaggtcg cccgacgccc gggctttgcc cgggcggcct cagtgagcga 4380
gcgagcgcgc agagagtata catcgatgtg agttcgcggg tggctggggg gccctgggct 4440
gcgaccgccc ccgaaccgcg tctacgagcc ttgcgggctc cgggtctttg cagtcgtatg 4500
ggggcagggt agctgttccc cgcaaggaga gctcaaggtc agcgctcgga cctggcggag 4560
ccccgcaccc aggctgtggc gccctgtgca gctccgccct tgcggcgcca tctgcccgga 4620
gcctccttcc cctagtcccc agaaacagga ggtccctact cccgcccgag atcccgaccc 4680
ggacccctag gtgggggacg ctttctttcc tttcgcgctc tgcggggtca cgtgtcgcag 4740
aggagcccct cccccacggc ctccggcacc gcaggccccg ggatgctagt gcgcagcggg 4800
tgcatccctg tccggatgct gcgcctgcgg tagagcggcc gccatgttgc aaccgggaag 4860
gaaatgaatg ggcagccgtt aggaaagcct gccggtgact aaccctgcgc tcctgcctcg 4920
atgggtggag tcgcgtgtgg cggggaagtc aggtggagcg aggctagctg gcccgatttc 4980
tcctccgggt gatgcttttc ctagattatt ctctggtaaa tcaaagaagt gggtttatgg 5040
aggtcctctt gtgtcccctc cccgcagagg tgtggtggct gtggcatggt gccaagccgg 5100
gagaagctga gtcatgggta gttggaaaag gacatttcca ccgcaaaatg gcccctctgg 5160
tggtggcccc ttcctgcagc gccggctcac ctcacggccc cgcccttccc ctgccagcct 5220
agcgttgacc cgaccccaaa ggccaggctg taaatgtcac cgggaggatt gggtgtctgg 5280
gcgcctcggg gaacctgccc ttctccccat tccgtcttcc ggaaaccaga tctcccaccg 5340
caccctggtc tgaggttaaa tatagctgct gacctttctg tagctggggg cctgggctgg 5400
ggctctctcc catcccttct ccccacacac atgcacttac ctgtgctccc actcctgatt 5460
tctggaaaag agctaggaag gacaggcaac ttggcaaatc aaagccctgg gactaggggg 5520
ttaaaataca gcttcccctc ttcccacccg ccccagtctc tgtccctttt gtaggaggga 5580
cttagagaag gggtgggctt gccctgtcca gttaatttct gacctttact cctgcccttt 5640
gagtttgatg atgctgagtg tacaagcgtt ttctccctaa agggtgcagc tgagctaggc 5700
agcagcaagc attcctgggg tggcatagtg gggtggtgaa taccatgtac aaagcttgtg 5760
cccagactgt gggtggcagt gccccacatg gccgcttctc ctggaagggc ttcgtatgac 5820
tgggggtgtt gggcagccct ggagccttca gttgcagcca tgccttaagc caggccagcc 5880
tggcagggaa gctcaaggga gataaaattc aacctcttgg gccctcctgg gggtaaggag 5940
atgctgcatt cgccctctta atggggaggt ggcctagggc tgctcacata ttctggagga 6000
gcctcccctc ctcatgcctt cttgcctctt gtctcttagg catgcaaaag agtcgaataa 6060
gggcgacaca aaatttattc taaatgcata ataaatactg ataacatctt atagtttgta 6120
ttatattttg tattatcgtt gacatgtata attttgatat caaaaactga ttttcccttt 6180
attattttcg agatttattt tcttaattct ctttaacaaa ctagaaatat tgtatataca 6240
aaaaatcata aataatagat gaatagttta attataggtg ttcatcaatc gaaaaagcaa 6300
cgtatcttat ttaaagtgcg ttgctttttt ctcatttata aggttaaata attctcatat 6360
atcaagcaaa gtgacaggcg cccttaaata ttctgacaaa tgctctttcc ctaaactccc 6420
cccataaaaa aacccgccga agcgggtttt tacgttattt gcggattaac gattactcgt 6480
tatcagaacc gcccaggggg cccgagctta agactggccg tcgttttaca acacagaaag 6540
agtttgtaga aacgcaaaaa ggccatccgt caggggcctt ctgcttagtt tgatgcctgg 6600
cagttcccta ctctcgcctt ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct cggtcgttcg 6660
gctgcggcga gcggtatcag ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca cagaatcagg 6720
ggataacgca ggaaagaaca tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa 6780
ggccgcgttg ctggcgtttt tccataggct ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg 6840
acgctcaagt cagaggtggc gaaacccgac aggactataa agataccagg cgtttccccc 6900
tggaagctcc ctcgtgcgct ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc 6960
ctttctccct tcgggaagcg tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc 7020
ggtgtaggtc gttcgctcca agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg 7080
ctgcgcctta tccggtaact atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc 7140
actggcagca gccactggta acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga 7200
gttcttgaag tggtgggcta actacggcta cactagaaga acagtatttg gtatctgcgc 7260
tctgctgaag ccagttacct tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac 7320
caccgctggt agcggtggtt tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg 7380
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tgctctgctt aggtggcggt acttgggtcg atatcaaagt gcatcacttc ttcccgtatg 7560
cccaactttg tatagagagc cactgcggga tcgtcaccgt aatctgcttg cacgtagatc 7620
acataagcac caagcgcgtt ggcctcatgc ttgaggagat tgatgagcgc ggtggcaatg 7680
ccctgcctcc ggtgctcgcc ggagactgcg agatcataga tatagatctc actacgcggc 7740
tgctcaaact tgggcagaac gtaagccgcg agagcgccaa caaccgcttc ttggtcgaag 7800
gcagcaagcg cgatgaatgt cttactacgg agcaagttcc cgaggtaatc ggagtccggc 7860
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ccccgccctg ccactcatcg cagtactgtt gtaattcatt aagcattctg ccgacatgga 8280
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taaaccctt 8469
<210> 43
<211> 116
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 43
cagcagctgc gcgctcgctc gctcactgag gccgcccggg caaagcccgg gcgtcgggcg 60
acctttggtc gcccggcctc agtgagcgag cgagcgcgca gagagggagt ggggtt 116
<210> 44
<211> 534
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 44
ttaggtggcg gtacttgggt cgatatcaaa gtgcatcact tcttcccgta tgcccaactt 60
tgtatagaga gccactgcgg gatcgtcacc gtaatctgct tgcacgtaga tcacataagc 120
accaagcgcg ttggcctcat gcttgaggag attgatgagc gcggtggcaa tgccctgcct 180
ccggtgctcg ccggagactg cgagatcata gatatagatc tcactacgcg gctgctcaaa 240
cttgggcaga acgtaagccg cgagagcgcc aacaaccgct tcttggtcga aggcagcaag 300
cgcgatgaat gtcttactac ggagcaagtt cccgaggtaa tcggagtccg gctgatgttg 360
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ctttgtttta gggcgactgc cctgctgcgt aacatcgttg ctgctccata acat 534
<210> 45
<211> 11635
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 45
ggtacccaac tccatgctta acagtcccca ggtacagccc accctgcgtc gcaaccagga 60
acagctctac agcttcctgg agcgccactc gccctacttc cgcagccaca gtgcgcagat 120
taggagcgcc acttcttttt gtcacttgaa aaacatgtaa aaataatgta ctaggagaca 180
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cttgccgtct gcgccgttta aaaatcaaag gggttctgcc gcgcatcgct atgcgccact 300
ggcagggaca cgttgcgata ctggtgttta gtgctccact taaactcagg cacaaccatc 360
cgcggcagct cggtgaagtt ttcactccac aggctgcgca ccatcaccaa cgcgtttagc 420
aggtcgggcg ccgatatctt gaagtcgcag ttggggcctc cgccctgcgc gcgcgagttg 480
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acgctcttgt cggagatcag atccgcgtcc aggtcctccg cgttgctcag ggcgaacgga 600
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acgtggactc caacgtcaaa gggcgaaaaa ccgtctatca gggcgatggc ccactacgtg 11400
aaccatcacc ctaatcaagt tttttggggt cgaggtgccg taaagcacta aatcggaacc 11460
ctaaagggag cccccgattt agagcttgac ggggaaagcc ggcgaacgtg gcgagaaagg 11520
aagggaagaa agcgaaagga gcgggcgcta gggcgctggc aagtgtagcg gtcacgctgc 11580
gcgtaaccac cacacccgcc gcgcttaatg cgccgctaca gggcgcgatg gatcc 11635
<210> 46
<211> 5336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 46
ggtacccaac tccatgctta acagtcccca ggtacagccc accctgcgtc gcaaccagga 60
acagctctac agcttcctgg agcgccactc gccctacttc cgcagccaca gtgcgcagat 120
taggagcgcc acttcttttt gtcacttgaa aaacatgtaa aaataatgta ctaggagaca 180
ctttcaataa aggcaaatgt ttttatttgt acactctcgg gtgattattt accccccacc 240
cttgccgtct gcgccgttta aaaatcaaag gggttctgcc gcgcatcgct atgcgccact 300
ggcagggaca cgttgcgata ctggtgttta gtgctccact taaactcagg cacaaccatc 360
cgcggcagct cggtgaagtt ttcactccac aggctgcgca ccatcaccaa cgcgtttagc 420
aggtcgggcg ccgatatctt gaagtcgcag ttggggcctc cgccctgcgc gcgcgagttg 480
cgatacacag ggttgcagca ctggaacact atcagcgccg ggtggtgcac gctggccagc 540
acgctcttgt cggagatcag atccgcgtcc aggtcctccg cgttgctcag ggcgaacgga 600
gtcaactttg gtagctgcct tcccaaaaag ggtgcatgcc caggctttga gttgcactcg 660
caccgtagtg gcatcagaag gtgaccgtgc ccggtctggg cgttaggata cagcgcctgc 720
atgaaagcct tgatctgctt aaaagccacc tgagcctttg cgccttcaga gaagaacatg 780
ccgcaagact tgccggaaaa ctgattggcc ggacaggccg cgtcatgcac gcagcacctt 840
gcgtcggtgt tggagatctg caccacattt cggccccacc ggttcttcac gatcttggcc 900
ttgctagact gctccttcag cgcgcgctgc ccgttttcgc tcgtcacatc catttcaatc 960
acgtgctcct tatttatcat aatgctcccg tgtagacact taagctcgcc ttcgatctca 1020
gcgcagcggt gcagccacaa cgcgcagccc gtgggctcgt ggtgcttgta ggttacctct 1080
gcaaacgact gcaggtacgc ctgcaggaat cgccccatca tcgtcacaaa ggtcttgttg 1140
ctggtgaagg tcagctgcaa cccgcggtgc tcctcgttta gccaggtctt gcatacggcc 1200
gccagagctt ccacttggtc aggcagtagc ttgaagtttg cctttagatc gttatccacg 1260
tggtacttgt ccatcaacgc gcgcgcagcc tccatgccct tctcccacgc agacacgatc 1320
ggcaggctca gcgggtttat caccgtgctt tcactttccg cttcactgga ctcttccttt 1380
tcctcttgcg tccgcatacc ccgcgccact gggtcgtctt cattcagccg ccgcaccgtg 1440
cgcttacctc ccttgccgtg cttgattagc accggtgggt tgctgaaacc caccatttgt 1500
agcgccacat cttctctttc ttcctcgctg tccacgatca cctctgggga tggcgggcgc 1560
tcgggcttgg gagaggggcg cttctttttc tttttggacg caatggccaa atccgccgtc 1620
gaggtcgatg gccgcgggct gggtgtgcgc ggcaccagcg catcttgtga cgagtcttct 1680
tcgtcctcgg actcgagacg ccgcctcagc cgcttttttg ggggcgcgcg gggaggcggc 1740
ggcgacggcg acggggacga cacgtcctcc atggttggtg gacgtcgcgc cgcaccgcgt 1800
ccgcgctcgg gggtggtttc gcgctgctcc tcttcccgac tggccatttc cttctcctat 1860
aggcagaaaa agatcatgga gtcagtcgag aaggaggaca gcctaaccgc cccctttgag 1920
ttcgccacca ccgcctccac cgatgccgcc aacgcgccta ccaccttccc cgtcgaggca 1980
cccccgcttg aggaggagga agtgattatc gagcaggacc caggttttgt aagcgaagac 2040
gacgaggatc gctcagtacc aacagaggat aaaaagcaag accaggacga cgcagaggca 2100
aacgaggaac aagtcgggcg gggggaccaa aggcatggcg actacctaga tgtgggagac 2160
gacgtgctgt tgaagcatct gcagcgccag tgcgccatta tctgcgacgc gttgcaagag 2220
cgcagcgatg tgcccctcgc catagcggat gtcagccttg cctacgaacg ccacctgttc 2280
tcaccgcgcg taccccccaa acgccaagaa aacggcacat gcgagcccaa cccgcgcctc 2340
aacttctacc ccgtatttgc cgtgccagag gtgcttgcca cctatcacat ctttttccaa 2400
aactgcaaga tacccctatc ctgccgtgcc aaccgcagcc gagcggacaa gcagctggcc 2460
ttgcggcagg gcgctgtcat acctgatatc gcctcgctcg acgaagtgcc aaaaatcttt 2520
gagggtcttg gacgcgacga gaaacgcgcg gcaaacgctc tgcaacaaga aaacagcgaa 2580
aatgaaagtc actgtggagt gctggtggaa cttgagggtg acaacgcgcg cctagccgtg 2640
ctgaaacgca gcatcgaggt cacccacttt gcctacccgg cacttaacct accccccaag 2700
gttatgagca cagtcatgag cgagctgatc gtgcgccgtg cacgacccct ggagagggat 2760
gcaaacttgc aagaacaaac cgaggagggc ctacccgcag ttggcgatga gcagctggcg 2820
cgctggcttg agacgcgcga gcctgccgac ttggaggagc gacgcaagct aatgatggcc 2880
gcagtgcttg ttaccgtgga gcttgagtgc atgcagcggt tctttgctga cccggagatg 2940
cagcgcaagc tagaggaaac gttgcactac acctttcgcc agggctacgt gcgccaggcc 3000
tgcaaaattt ccaacgtgga gctctgcaac ctggtctcct accttggaat tttgcacgaa 3060
aaccgcctcg ggcaaaacgt gcttcattcc acgctcaagg gcgaggcgcg ccgcgactac 3120
gtccgcgact gcgtttactt atttctgtgc tacacctggc aaacggccat gggcgtgtgg 3180
cagcaatgcc tggaggagcg caacctaaag gagctgcaga agctgctaaa gcaaaacttg 3240
aaggacctat ggacggcctt caacgagcgc tccgtggccg cgcacctggc ggacattatc 3300
ttccccgaac gcctgcttaa aaccctgcaa cagggtctgc cagacttcac cagtcaaagc 3360
atgttgcaaa actttaggaa ctttatccta gagcgttcag gaattctgcc cgccacctgc 3420
tgtgcgcttc ctagcgactt tgtgcccatt aagtaccgtg aatgccctcc gccgctttgg 3480
ggtcactgct accttctgca gctagccaac taccttgcct accactccga catcatggaa 3540
gacgtgagcg gtgacggcct actggagtgt cactgtcgct gcaacctatg caccccgcac 3600
cgctccctgg tctgcaattc gcaactgctt agcgaaagtc aaattatcgg tacctttgag 3660
ctgcagggtc cctcgcctga cgaaaagtcc gcggctccgg ggttgaaact cactccgggg 3720
ctgtggacgt cggcttacct tcgcaaattt gtacctgagg actaccacgc ccacgagatt 3780
aggttctacg aagaccaatc ccgcccgcca aatgcggagc ttaccgcctg cgtcattacc 3840
cagggccaca tccttggcca attgcaagcc atcaacaaag cccgccaaga gtttctgcta 3900
cgaaagggac ggggggttta cctggacccc cagtccggcg aggagctcaa cccaatcccc 3960
ccgccgccgc agccctatca gcagccgcgg gcccttgctt cccaggatgg cacccaaaaa 4020
gaagctgcag ctgccgccgc cgccacccac ggacgaggag gaatactggg acagtcaggc 4080
agaggaggtt ttggacgagg aggaggagat gatggaagac tgggacagcc tagacgaagc 4140
ttccgaggcc gaagaggtgt cagacgaaac accgtcaccc tcggtcgcat tcccctcgcc 4200
ggcgccccag aaattggcaa ccgttcccag catcgctaca acctccgctc ctcaggcgcc 4260
gccggcactg cctgttcgcc gacccaaccg tagatgggac accactggaa ccagggccgg 4320
taagtctaag cagccgccgc cgttagccca agagcaacaa cagcgccaag gctaccgctc 4380
gtggcgcggg cacaagaacg ccatagttgc ttgcttgcaa gactgtgggg gcaacatctc 4440
cttcgcccgc cgctttcttc tctaccatca cggcgtggcc ttcccccgta acatcctgca 4500
ttactaccgt catctctaca gcccctactg caccggcggc agcggcagcg gcagcaacag 4560
cagcggtcac acagaagcaa aggcgaccgg atagcaagac tctgacaaag cccaagaaat 4620
ccacagcggc ggcagcagca ggaggaggag cgctgcgtct ggcgcccaac gaacccgtat 4680
cgacccgcga gcttagaaat aggatttttc ccactctgta tgctatattt caacaaagca 4740
ggggccaaga acaagagctg aaaataaaaa acaggtctct gcgctccctc acccgcagct 4800
gcctgtatca caaaagcgaa gatcagcttc ggcgcacgct ggaagacgcg gaggctctct 4860
tcagcaaata ctgcgcgctg actcttaagg actagtttcg cgccctttct caaatttaag 4920
cgcgaaaact acgtcatctc cagcggccac acccggcgcc agcacctgtc gtcagcgcca 4980
ttatgagcaa ggaaattccc acgccctaca tgtggagtta ccagccacaa atgggacttg 5040
cggctggagc tgcccaagac tactcaaccc gaataaacta catgagcgcg ggaccccaca 5100
tgatatcccg ggtcaacgga atccgcgccc accgaaaccg aattctcctc gaacaggcgg 5160
ctattaccac cacacctcgt aataacctta atccccgtag ttggcccgct gccctggtgt 5220
accaggaaag tcccgctccc accactgtgg tacttcccag agacgcccag gccgaagttc 5280
agatgactaa ctcaggggcg cagcttgcgg gcggctttcg tcacagggtg cggtcg 5336
<210> 47
<211> 3201
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 47
cccgggcgtt ttagggcgga gtaacttgca tgtattggga attgtagttt ttttaaaatg 60
ggaagtgacg tatcgtggga aaacggaagt gaagatttga ggaagttgtg ggttttttgg 120
ctttcgtttc tgggcgtagg ttcgcgtgcg gttttctggg tgttttttgt ggactttaac 180
cgttacgtca ttttttagtc ctatatatac tcgctctgta cttggccctt tttacactgt 240
gactgattga gctggtgccg tgtcgagtgg tgttttttaa taggtttttt tactggtaag 300
gctgactgtt atggctgccg ctgtggaagc gctgtatgtt gttctggagc gggagggtgc 360
tattttgcct aggcaggagg gtttttcagg tgtttatgtg tttttctctc ctattaattt 420
tgttatacct cctatggggg ctgtaatgtt gtctctacgc ctgcgggtat gtattccccc 480
gggctatttc ggtcgctttt tagcactgac cgatgttaac caacctgatg tgtttaccga 540
gtcttacatt atgactccgg acatgaccga ggaactgtcg gtggtgcttt ttaatcacgg 600
tgaccagttt ttttacggtc acgccggcat ggccgtagtc cgtcttatgc ttataagggt 660
tgtttttcct gttgtaagac aggcttctaa tgtttaaatg tttttttttt tgttatttta 720
ttttgtgttt aatgcaggaa cccgcagaca tgtttgagag aaaaatggtg tctttttctg 780
tggtggttcc ggaacttacc tgcctttatc tgcatgagca tgactacgat gtgcttgctt 840
ttttgcgcga ggctttgcct gattttttga gcagcacctt gcattttata tcgccgccca 900
tgcaacaagc ttacataggg gctacgctgg ttagcatagc tccgagtatg cgtgtcataa 960
tcagtgtggg ttcttttgtc atggttcctg gcggggaagt ggccgcgctg gtccgtgcag 1020
acctgcacga ttatgttcag ctggccctgc gaagggacct acgggatcgc ggtatttttg 1080
ttaatgttcc gcttttgaat cttatacagg tctgtgagga acctgaattt ttgcaatcat 1140
gattcgctgc ttgaggctga aggtggaggg cgctctggag cagattttta caatggccgg 1200
acttaatatt cgggatttgc ttagagacat attgataagg tggcgagatg aaaattattt 1260
gggcatggtt gaaggtgctg gaatgtttat agaggagatt caccctgaag ggtttagcct 1320
ttacgtccac ttggacgtga gggcagtttg ccttttggaa gccattgtgc aacatcttac 1380
aaatgccatt atctgttctt tggctgtaga gtttgaccac gccaccggag gggagcgcgt 1440
tcacttaata gatcttcatt ttgaggtttt ggataatctt ttggaataaa aaaaaaaaaa 1500
catggttctt ccagctcttc ccgctcctcc cgtgtgtgac tcgcagaacg aatgtgtagg 1560
ttggctgggt gtggcttatt ctgcggtggt ggatgttatc agggcagcgg cgcatgaagg 1620
agtttacata gaacccgaag ccagggggcg cctggatgct ttgagagagt ggatatacta 1680
caactactac acagagcgag ctaagcgacg agaccggaga cgcagatctg tttgtcacgc 1740
ccgcacctgg ttttgcttca ggaaatatga ctacgtccgg cgttccattt ggcatgacac 1800
tacgaccaac acgatctcgg ttgtctcggc gcactccgta cagtagggat cgcctacctc 1860
cttttgagac agagacccgc gctaccatac tggaggatca tccgctgctg cccgaatgta 1920
acactttgac aatgcacaac gtgagttacg tgcgaggtct tccctgcagt gtgggattta 1980
cgctgattca ggaatgggtt gttccctggg atatggttct gacgcgggag gagcttgtaa 2040
tcctgaggaa gtgtatgcac gtgtgcctgt gttgtgccaa cattgatatc atgacgagca 2100
tgatgatcca tggttacgag tcctgggctc tccactgtca ttgttccagt cccggttccc 2160
tgcagtgcat agccggcggg caggttttgg ccagctggtt taggatggtg gtggatggcg 2220
ccatgtttaa tcagaggttt atatggtacc gggaggtggt gaattacaac atgccaaaag 2280
aggtaatgtt tatgtccagc gtgtttatga ggggtcgcca cttaatctac ctgcgcttgt 2340
ggtatgatgg ccacgtgggt tctgtggtcc ccgccatgag ctttggatac agcgccttgc 2400
actgtgggat tttgaacaat attgtggtgc tgtgctgcag ttactgtgct gatttaagtg 2460
agatcagggt gcgctgctgt gcccggagga caaggcgtct catgctgcgg gcggtgcgaa 2520
tcatcgctga ggagaccact gccatgttgt attcctgcag gacggagcgg cggcggcagc 2580
agtttattcg cgcgctgctg cagcaccacc gccctatcct gatgcacgat tatgactcta 2640
cccccatgta ggcgtggact tccccttcgc cgcccgttga gcaaccgcaa gttggacagc 2700
agcctgtggc tcagcagctg gacagcgaca tgaacttaag cgagctgccc ggggagttta 2760
ttaatatcac tgatgagcgt ttggctcgac aggaaaccgt gtggaatata acacctaaga 2820
atatgtctgt tacccatgat atgatgcttt ttaaggccag ccggggagaa aggactgtgt 2880
actctgtgtg ttgggaggga ggtggcaggt tgaatactag ggttctgtga gtttgattaa 2940
ggtacggtga tcaatataag ctatgtggtg gtggggctat actactgaat gaaaaatgac 3000
ttgaaatttt ctgcaattga aaaataaaca cgttgaaaca taacatgcaa caggttcacg 3060
attctttatt cctgggcaat gtaggagaag gtgtaagagt tggtagcaaa agtttcagtg 3120
gtgtattttc cactttccca ggaccatgta aaagacatag agtaagtgct tacctcgcta 3180
gtttctgtgg attcactaga a 3201
<210> 48
<211> 743
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 48
tcgatgtagg atgttgcccc tcctgacgcg gtaggagaag gggagggtgc cctgcatgtc 60
tgccgctgct cttgctcttg ccgctgctga ggaggggggc gcatctgccg cagcaccgga 120
tgcatctggg aaaagcaaaa aaggggctcg tccctgtttc cggaggaatt tgcaagcggg 180
gtcttgcatg acggggaggc aaacccccgt tcgccgcagt ccggccggcc cgagactcga 240
accgggggtc ctgcgactca acccttggaa aataaccctc cggctacagg gagcgagcca 300
cttaatgctt tcgctttcca gcctaaccgc ttacgccgcg cgcggccagt ggccaaaaaa 360
gctagcgcag cagccgccgc gcctggaagg aagccaaaag gagcgctccc ccgttgtctg 420
acgtcgcaca cctgggttcg acacgcgggc ggtaaccgca tggatcacgg cggacggccg 480
gatccggggt tcgaaccccg gtcgtccgcc atgataccct tgcgaattta tccaccagac 540
cacggaagag tgcccgctta caggctctcc ttttgcacgg tctagagcgt caacgactgc 600
gcacgcctca ccggccagag cgtcccgacc atggagcact ttttgccgct gcgcaacatc 660
tggaaccgcg tccgcgactt tccgcgcgcc tccaccaccg ccgccggcat cacctggatg 720
tccaggtaca tctacggatt acg 743
<210> 49
<211> 160
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 49
aaggggctcg tccctgtttc cggaggaatt tgcaagcggg gtcttgcatg acggggaggc 60
aaacccccgt tcgccgcagt ccggccggcc cgagactcga accgggggtc ctgcgactca 120
acccttggaa aataaccctc cggctacagg gagcgagcca 160
<210> 50
<211> 162
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 50
aaaggagcgc tcccccgttg tctgacgtcg cacacctggg ttcgacacgc gggcggtaac 60
cgcatggatc acggcggacg gccggatccg gggttcgaac cccggtcgtc cgccatgata 120
cccttgcgaa tttatccacc agaccacgga agagtgcccg ct 162
<210> 51
<211> 1590
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 51
ttaaaaatca aaggggttct gccgcgcatc gctatgcgcc actggcaggg acacgttgcg 60
atactggtgt ttagtgctcc acttaaactc aggcacaacc atccgcggca gctcggtgaa 120
gttttcactc cacaggctgc gcaccatcac caacgcgttt agcaggtcgg gcgccgatat 180
cttgaagtcg cagttggggc ctccgccctg cgcgcgcgag ttgcgataca cagggttgca 240
gcactggaac actatcagcg ccgggtggtg cacgctggcc agcacgctct tgtcggagat 300
cagatccgcg tccaggtcct ccgcgttgct cagggcgaac ggagtcaact ttggtagctg 360
ccttcccaaa aagggtgcat gcccaggctt tgagttgcac tcgcaccgta gtggcatcag 420
aaggtgaccg tgcccggtct gggcgttagg atacagcgcc tgcatgaaag ccttgatctg 480
cttaaaagcc acctgagcct ttgcgccttc agagaagaac atgccgcaag acttgccgga 540
aaactgattg gccggacagg ccgcgtcatg cacgcagcac cttgcgtcgg tgttggagat 600
ctgcaccaca tttcggcccc accggttctt cacgatcttg gccttgctag actgctcctt 660
cagcgcgcgc tgcccgtttt cgctcgtcac atccatttca atcacgtgct ccttatttat 720
cataatgctc ccgtgtagac acttaagctc gccttcgatc tcagcgcagc ggtgcagcca 780
caacgcgcag cccgtgggct cgtggtgctt gtaggttacc tctgcaaacg actgcaggta 840
cgcctgcagg aatcgcccca tcatcgtcac aaaggtcttg ttgctggtga aggtcagctg 900
caacccgcgg tgctcctcgt ttagccaggt cttgcatacg gccgccagag cttccacttg 960
gtcaggcagt agcttgaagt ttgcctttag atcgttatcc acgtggtact tgtccatcaa 1020
cgcgcgcgca gcctccatgc ccttctccca cgcagacacg atcggcaggc tcagcgggtt 1080
tatcaccgtg ctttcacttt ccgcttcact ggactcttcc ttttcctctt gcgtccgcat 1140
accccgcgcc actgggtcgt cttcattcag ccgccgcacc gtgcgcttac ctcccttgcc 1200
gtgcttgatt agcaccggtg ggttgctgaa acccaccatt tgtagcgcca catcttctct 1260
ttcttcctcg ctgtccacga tcacctctgg ggatggcggg cgctcgggct tgggagaggg 1320
gcgcttcttt ttctttttgg acgcaatggc caaatccgcc gtcgaggtcg atggccgcgg 1380
gctgggtgtg cgcggcacca gcgcatcttg tgacgagtct tcttcgtcct cggactcgag 1440
acgccgcctc agccgctttt ttgggggcgc gcggggaggc ggcggcgacg gcgacgggga 1500
cgacacgtcc tccatggttg gtggacgtcg cgccgcaccg cgtccgcgct cgggggtggt 1560
ttcgcgctgc tcctcttccc gactggccat 1590
<210> 52
<211> 2446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 52
ttccttctcc tataggcaga aaaagatcat ggagtcagtc gagaaggagg acagcctaac 60
cgcccccttt gagttcgcca ccaccgcctc caccgatgcc gccaacgcgc ctaccacctt 120
ccccgtcgag gcacccccgc ttgaggagga ggaagtgatt atcgagcagg acccaggttt 180
tgtaagcgaa gacgacgagg atcgctcagt accaacagag gataaaaagc aagaccagga 240
cgacgcagag gcaaacgagg aacaagtcgg gcggggggac caaaggcatg gcgactacct 300
agatgtggga gacgacgtgc tgttgaagca tctgcagcgc cagtgcgcca ttatctgcga 360
cgcgttgcaa gagcgcagcg atgtgcccct cgccatagcg gatgtcagcc ttgcctacga 420
acgccacctg ttctcaccgc gcgtaccccc caaacgccaa gaaaacggca catgcgagcc 480
caacccgcgc ctcaacttct accccgtatt tgccgtgcca gaggtgcttg ccacctatca 540
catctttttc caaaactgca agatacccct atcctgccgt gccaaccgca gccgagcgga 600
caagcagctg gccttgcggc agggcgctgt catacctgat atcgcctcgc tcgacgaagt 660
gccaaaaatc tttgagggtc ttggacgcga cgagaaacgc gcggcaaacg ctctgcaaca 720
agaaaacagc gaaaatgaaa gtcactgtgg agtgctggtg gaacttgagg gtgacaacgc 780
gcgcctagcc gtgctgaaac gcagcatcga ggtcacccac tttgcctacc cggcacttaa 840
cctacccccc aaggttatga gcacagtcat gagcgagctg atcgtgcgcc gtgcacgacc 900
cctggagagg gatgcaaact tgcaagaaca aaccgaggag ggcctacccg cagttggcga 960
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gctaatgatg gccgcagtgc ttgttaccgt ggagcttgag tgcatgcagc ggttctttgc 1080
tgacccggag atgcagcgca agctagagga aacgttgcac tacacctttc gccagggcta 1140
cgtgcgccag gcctgcaaaa tttccaacgt ggagctctgc aacctggtct cctaccttgg 1200
aattttgcac gaaaaccgcc tcgggcaaaa cgtgcttcat tccacgctca agggcgaggc 1260
gcgccgcgac tacgtccgcg actgcgttta cttatttctg tgctacacct ggcaaacggc 1320
catgggcgtg tggcagcaat gcctggagga gcgcaaccta aaggagctgc agaagctgct 1380
aaagcaaaac ttgaaggacc tatggacggc cttcaacgag cgctccgtgg ccgcgcacct 1440
ggcggacatt atcttccccg aacgcctgct taaaaccctg caacagggtc tgccagactt 1500
caccagtcaa agcatgttgc aaaactttag gaactttatc ctagagcgtt caggaattct 1560
gcccgccacc tgctgtgcgc ttcctagcga ctttgtgccc attaagtacc gtgaatgccc 1620
tccgccgctt tggggtcact gctaccttct gcagctagcc aactaccttg cctaccactc 1680
cgacatcatg gaagacgtga gcggtgacgg cctactggag tgtcactgtc gctgcaacct 1740
atgcaccccg caccgctccc tggtctgcaa ttcgcaactg cttagcgaaa gtcaaattat 1800
cggtaccttt gagctgcagg gtccctcgcc tgacgaaaag tccgcggctc cggggttgaa 1860
actcactccg gggctgtgga cgtcggctta ccttcgcaaa tttgtacctg aggactacca 1920
cgcccacgag attaggttct acgaagacca atcccgcccg ccaaatgcgg agcttaccgc 1980
ctgcgtcatt acccagggcc acatccttgg ccaattgcaa gccatcaaca aagcccgcca 2040
agagtttctg ctacgaaagg gacggggggt ttacctggac ccccagtccg gcgaggagct 2100
caacccaatc cccccgccgc cgcagcccta tcagcagccg cgggcccttg cttcccagga 2160
tggcacccaa aaagaagctg cagctgccgc cgccgccacc cacggacgag gaggaatact 2220
gggacagtca ggcagaggag gttttggacg aggaggagga gatgatggaa gactgggaca 2280
gcctagacga agcttccgag gccgaagagg tgtcagacga aacaccgtca ccctcggtcg 2340
cattcccctc gccggcgccc cagaaattgg caaccgttcc cagcatcgct acaacctccg 2400
ctcctcaggc gccgccggca ctgcctgttc gccgacccaa ccgtag 2446
<210> 53
<211> 375
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 53
gcccctactg caccggcggc agcggcagcg gcagcaacag cagcggtcac acagaagcaa 60
aggcgaccgg atagcaagac tctgacaaag cccaagaaat ccacagcggc ggcagcagca 120
ggaggaggag cgctgcgtct ggcgcccaac gaacccgtat cgacccgcga gcttagaaat 180
aggatttttc ccactctgta tgctatattt caacaaagca ggggccaaga acaagagctg 240
aaaataaaaa acaggtctct gcgctccctc acccgcagct gcctgtatca caaaagcgaa 300
gatcagcttc ggcgcacgct ggaagacgcg gaggctctct tcagcaaata ctgcgcgctg 360
actcttaagg actag 375
<210> 54
<211> 354
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 54
atgagcaagg aaattcccac gccctacatg tggagttacc agccacaaat gggacttgcg 60
gctggagctg cccaagacta ctcaacccga ataaactaca tgagcgcggg accccacatg 120
atatcccggg tcaacggaat ccgcgcccac cgaaaccgaa ttctcctcga acaggcggct 180
attaccacca cacctcgtaa taaccttaat ccccgtagtt ggcccgctgc cctggtgtac 240
caggaaagtc ccgctcccac cactgtggta cttcccagag acgcccaggc cgaagttcag 300
atgactaact caggggcgca gcttgcgggc ggctttcgtc acagggtgcg gtcg 354
<210> 55
<211> 1164
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 55
atgactacgt ccggcgttcc atttggcatg acactacgac caacacgatc tcggttgtct 60
cggcgcactc cgtacagtag ggatcgccta cctccttttg agacagagac ccgcgctacc 120
atactggagg atcatccgct gctgcccgaa tgtaacactt tgacaatgca caacgtgagt 180
tacgtgcgag gtcttccctg cagtgtggga tttacgctga ttcaggaatg ggttgttccc 240
tgggatatgg ttctgacgcg ggaggagctt gtaatcctga ggaagtgtat gcacgtgtgc 300
ctgtgttgtg ccaacattga tatcatgacg agcatgatga tccatggtta cgagtcctgg 360
gctctccact gtcattgttc cagtcccggt tccctgcagt gcatagccgg cgggcaggtt 420
ttggccagct ggtttaggat ggtggtggat ggcgccatgt ttaatcagag gtttatatgg 480
taccgggagg tggtgaatta caacatgcca aaagaggtaa tgtttatgtc cagcgtgttt 540
atgaggggtc gccacttaat ctacctgcgc ttgtggtatg atggccacgt gggttctgtg 600
gtccccgcca tgagctttgg atacagcgcc ttgcactgtg ggattttgaa caatattgtg 660
gtgctgtgct gcagttactg tgctgattta agtgagatca gggtgcgctg ctgtgcccgg 720
aggacaaggc gtctcatgct gcgggcggtg cgaatcatcg ctgaggagac cactgccatg 780
ttgtattcct gcaggacgga gcggcggcgg cagcagttta ttcgcgcgct gctgcagcac 840
caccgcccta tcctgatgca cgattatgac tctaccccca tgtaggcgtg gacttcccct 900
tcgccgcccg ttgagcaacc gcaagttgga cagcagcctg tggctcagca gctggacagc 960
gacatgaact taagcgagct gcccggggag tttattaata tcactgatga gcgtttggct 1020
cgacaggaaa ccgtgtggaa tataacacct aagaatatgt ctgttaccca tgatatgatg 1080
ctttttaagg ccagccgggg agaaaggact gtgtactctg tgtgttggga gggaggtggc 1140
aggttgaata ctagggttct gtga 1164
<210> 56
<211> 345
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 56
atggttcttc cagctcttcc cgctcctccc gtgtgtgact cgcagaacga atgtgtaggt 60
tggctgggtg tggcttattc tgcggtggtg gatgttatca gggcagcggc gcatgaagga 120
gtttacatag aacccgaagc cagggggcgc ctggatgctt tgagagagtg gatatactac 180
aactactaca cagagcgagc taagcgacga gaccggagac gcagatctgt ttgtcacgcc 240
cgcacctggt tttgcttcag gaaatatgac tacgtccggc gttccatttg gcatgacact 300
acgaccaaca cgatctcggt tgtctcggcg cactccgtac agtag 345
<210> 57
<211> 319
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 57
atgattcgct gcttgaggct gaaggtggag ggcgctctgg agcagatttt tacaatggcc 60
ggacttaata ttcgggattt gcttagagac atattgataa ggtggcgaga tgaaaattat 120
ttgggcatgg ttgaaggtgc tggaatgttt atagaggaga ttcaccctga agggtttagc 180
ctttacgtcc acttggacgt gagggcagtt tgccttttgg aagccattgt gcaacatctt 240
acaaatgcca ttatctgttc tttggctgta gagtttgacc acgccaccgg aggggagcgc 300
gttcacttaa tagatcttc 319
<210> 58
<211> 411
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 58
atgcaggaac ccgcagacat gtttgagaga aaaatggtgt ctttttctgt ggtggttccg 60
gaacttacct gcctttatct gcatgagcat gactacgatg tgcttgcttt tttgcgcgag 120
gctttgcctg attttttgag cagcaccttg cattttatat cgccgcccat gcaacaagct 180
tacatagggg ctacgctggt tagcatagct ccgagtatgc gtgtcataat cagtgtgggt 240
tcttttgtca tggttcctgg cggggaagtg gccgcgctgg tccgtgcaga cctgcacgat 300
tatgttcagc tggccctgcg aagggaccta cgggatcgcg gtatttttgt taatgttccg 360
cttttgaatc ttatacaggt ctgtgaggaa cctgaatttt tgcaatcatg a 411
<210> 59
<211> 7327
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 59
gcgcgccgat atcgttaacg ccccgcgccg gccgctctag aactagtgga tcccccggaa 60
gatcagaagt tcctattccg aagttcctat tctctagaaa gtataggaac ttctgatctg 120
cgcagccgcc atgccggggt tttacgagat tgtgattaag gtccccagcg accttgacga 180
gcatctgccc ggcatttctg acagctttgt gaactgggtg gccgagaagg aatgggagtt 240
gccgccagat tctgacatgg atctgaatct gattgagcag gcacccctga ccgtggccga 300
gaagctgcag cgcgactttc tgacggaatg gcgccgtgtg agtaaggccc cggaggccct 360
tttctttgtg caatttgaga agggagagag ctacttccac atgcacgtgc tcgtggaaac 420
caccggggtg aaatccatgg ttttgggacg tttcctgagt cagattcgcg aaaaactgat 480
tcagagaatt taccgcggga tcgagccgac tttgccaaac tggttcgcgg tcacaaagac 540
cagaaatggc gccggaggcg ggaacaaggt ggtggatgag tgctacatcc ccaattactt 600
gctccccaaa acccagcctg agctccagtg ggcgtggact aatatggaac agtatttaag 660
cgcctgtttg aatctcacgg agcgtaaacg gttggtggcg cagcatctga cgcacgtgtc 720
gcagacgcag gagcagaaca aagagaatca gaatcccaat tctgatgcgc cggtgatcag 780
atcaaaaact tcagccaggt acatggagct ggtcgggtgg ctcgtggaca aggggattac 840
ctcggagaag cagtggatcc aggaggacca ggcctcatac atctccttca atgcggcctc 900
caactcgcgg tcccaaatca aggctgcctt ggacaatgcg ggaaagatta tgagcctgac 960
taaaaccgcc cccgactacc tggtgggcca gcagcccgtg gaggacattt ccagcaatcg 1020
gatttataaa attttggaac taaacgggta cgatccccaa tatgcggctt ccgtctttct 1080
gggatgggcc acgaaaaagt tcggcaagag gaacaccatc tggctgtttg ggcctgcaac 1140
taccgggaag accaacatcg cggaggccat agcccacact gtgcccttct acgggtgcgt 1200
aaactggacc aatgagaact ttcccttcaa cgactgtgtc gacaagatgg tgatctggtg 1260
ggaggagggg aagatgaccg ccaaggtcgt ggagtcggcc aaagccattc tcggaggaag 1320
caaggtgcgc gtggaccaga aatgcaagtc ctcggcccag atagacccga ctcccgtgat 1380
cgtcacctcc aacaccaaca tgtgcgccgt gattgacggg aactcaacga ccttcgaaca 1440
ccagcagccg ttgcaagacc ggatgttcaa atttgaactc acccgccgtc tggatcatga 1500
ctttgggaag gtcaccaagc aggaagtcaa agactttttc cggtgggcaa aggatcacgt 1560
ggttgaggtg gagcatgaat tctacgtcaa aaagggtgga gccaagaaaa gacccgcccc 1620
cagtgacgca gatataagtg agcccaaacg ggtgcgcgag tcagttgcgc agccatcgac 1680
gtcagacgcg gaagcttcga tcaactacgc agacaggtac caaaacaaat gttctcgtca 1740
cgtgggcatg aatctgatgc tgtttccctg cagacaatgc gagagaatga atcagaattc 1800
aaatatctgc ttcactcacg gacagaaaga ctgtttagag tgctttcccg tgtcagaatc 1860
tcaacccgtt tctgtcgtca aaaaggcgta tcagaaactg tgctacattc atcatatcat 1920
gggaaaggtg ccagacgctt gcactgcctg cgatctggtc aatgtggatt tggatgactg 1980
catctttgaa caataaatga tttaaatcag gtatggctgc cgatggttat cttccagatt 2040
ggctcgagga cactctctct gaaggaataa gacagtggtg gaagctcaaa cctggcccac 2100
caccaccaaa gcccgcagag cggcataagg acgacagcag gggtcttgtg cttcctgggt 2160
acaagtacct cggacccttc aacggactcg acaagggaga gccggtcaac gaggcagacg 2220
ccgcggccct cgagcacgac aaagcctacg accggcagct cgacagcgga gacaacccgt 2280
acctcaagta caaccacgcc gacgcggagt ttcaggagcg ccttaaagaa gatacgtctt 2340
ttgggggcaa cctcggacga gcagtcttcc aggcgaaaaa gagggttctt gaacctctgg 2400
gcctggttga ggaacctgtt aagacggctc cgggaaaaaa gaggccggta gagcactctc 2460
ctgtggagcc agactcctcc tcgggaaccg gaaaggcggg ccagcagcct gcaagaaaaa 2520
gattgaattt tggtcagact ggagacgcag actcagtacc tgacccccag cctctcggac 2580
agccaccagc agccccctct ggtctgggaa ctaatacgat ggctacaggc agtggcgcac 2640
caatggcaga caataacgag ggcgccgacg gagtgggtaa ttcctcggga aattggcatt 2700
gcgattccac atggatgggc gacagagtca tcaccaccag cacccgaacc tgggccctgc 2760
ccacctacaa caaccacctc tacaaacaaa tttccagcca atcaggagcc tcgaacgaca 2820
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tcaatggcag agactctctg gtgaatccgg gcccggccat ggcaagccac aaggacgatg 3600
aagaaaagtt ttttcctcag agcggggttc tcatctttgg gaagcaaggc tcagagaaaa 3660
caaatgtgga cattgaaaag gtcatgatta cagacgaaga ggaaatcagg acaaccaatc 3720
ccgtggctac ggagcagtat ggttctgtat ctaccaacct ccagagaggc aacagacaag 3780
cagctaccgc agatgtcaac acacaaggcg ttcttccagg catggtctgg caggacagag 3840
atgtgtacct tcaggggccc atctgggcaa agattccaca cacggacgga cattttcacc 3900
cctctcccct catgggtgga ttcggactta aacaccctcc tccacagatt ctcatcaaga 3960
acaccccggt acctgcgaat ccttcgacca ccttcagtgc ggcaaagttt gcttccttca 4020
tcacacagta ctccacggga caggtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa 4080
acagcaaacg ctggaatccc gaaattcagt acacttccaa ctacaacaag tctgttaatg 4140
tggactttac tgtggacact aatggcgtgt attcagagcc tcgccccatt ggcaccagat 4200
acctgactcg taatctgtaa ttgcttgtta atcaataaac cgtttaattc gtttcagttg 4260
aactttggtc tctgcgtatt tctttcttat ctagtttcca tggctacgta gataagtagc 4320
atggcgggtt aatcattaac tacagcccgg gcgtttaaac agcgggcgga ggggtggagt 4380
cgtgacgtga attacgtcat agggttaggg aggtcctgta ttagaggtca cgtgagtgtt 4440
ttgcgacatt ttgcgacacc atgtggtctc gctggggggg ggggcccgag tgagcacgca 4500
gggtctccat tttgaagcgg gaggtttgaa cgagcgctgg cgcgctcact ggccgtcgtt 4560
ttacaacgtc gtgactggga aaaccctggc gttacccaac ttaatcgcct tgcagcacat 4620
ccccctttcg ccagctggcg taatagcgaa gaggcccgca ccgatcgccc ttcccaacag 4680
ttgcgcagcc tgaatggcga atggaaattg taagcgttaa tattttgtta aaattcgcgt 4740
taaatttttg ttaaatcagc tcattttttt aaccaatagg ccgaaatcgg caaaatccct 4800
tataaatcaa aagaatagac cgagataggg ttgagtgttg ttccagtttg gaacaagagt 4860
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gcccactacg tgaaccatca ccctaatcaa gttttttggg gtcgaggtgc cgtaaagcac 4980
taaatcggaa ccctaaaggg agcccccgat ttagagcttg acggggaaag ccggcgaacg 5040
tggcgagaaa ggaagggaag aaagcgaaag gagcgggcgc tagggcgctg gcaagtgtag 5100
cggtcacgct gcgcgtaacc accacacccg ccgcgcttaa tgcgccgcta cagggcgcgt 5160
caggtggcac ttttcgggga aatgtgcgcg gaacccctat ttgtttattt ttctaaatac 5220
attcaaatat gtatccgctc atgagacaat aaccctgata aatgcttcaa taatattgaa 5280
aaaggaagag tatgagtatt caacatttcc gtgtcgccct tattcccttt tttgcggcat 5340
tttgccttcc tgtttttgct cacccagaaa cgctggtgaa agtaaaagat gctgaagatc 5400
agttgggtgc acgagtgggt tacatcgaac tggatctcaa cagcggtaag atccttgaga 5460
gttttcgccc cgaagaacgt tttccaatga tgagcacttt taaagttctg ctatgtggcg 5520
cggtattatc ccgtattgac gccgggcaag agcaactcgg tcgccgcata cactattctc 5580
agaatgactt ggttgagtac tcaccagtca cagaaaagca tcttacggat ggcatgacag 5640
taagagaatt atgcagtgct gccataacca tgagtgataa cactgcggcc aacttacttc 5700
tgacaacgat cggaggaccg aaggagctaa ccgctttttt gcacaacatg ggggatcatg 5760
taactcgcct tgatcgttgg gaaccggagc tgaatgaagc cataccaaac gacgagcgtg 5820
acaccacgat gcctgtagca atggcaacaa cgttgcgcaa actattaact ggcgaactac 5880
ttactctagc ttcccggcaa caattaatag actggatgga ggcggataaa gttgcaggac 5940
cacttctgcg ctcggccctt ccggctggct ggtttattgc tgataaatct ggagccggtg 6000
agcgtgggtc tcgcggtatc attgcagcac tggggccaga tggtaagccc tcccgtatcg 6060
tagttatcta cacgacgggg agtcaggcaa ctatggatga acgaaataga cagatcgctg 6120
agataggtgc ctcactgatt aagcattggt aactgtcaga ccaagtttac tcatatatac 6180
tttagattga tttaaaactt catttttaat ttaaaaggat ctaggtgaag atcctttttg 6240
ataatctcat gaccaaaatc ccttaacgtg agttttcgtt ccactgagcg tcagaccccg 6300
tagaaaagat caaaggatct tcttgagatc ctttttttct gcgcgtaatc tgctgcttgc 6360
aaacaaaaaa accaccgcta ccagcggtgg tttgtttgcc ggatcaagag ctaccaactc 6420
tttttccgaa ggtaactggc ttcagcagag cgcagatacc aaatactgtt cttctagtgt 6480
agccgtagtt aggccaccac ttcaagaact ctgtagcacc gcctacatac ctcgctctgc 6540
taatcctgtt accagtggct gctgccagtg gcgataagtc gtgtcttacc gggttggact 6600
caagacgata gttaccggat aaggcgcagc ggtcgggctg aacggggggt tcgtgcacac 6660
agcccagctt ggagcgaacg acctacaccg aactgagata cctacagcgt gagctatgag 6720
aaagcgccac gcttcccgaa gggagaaagg cggacaggta tccggtaagc ggcagggtcg 6780
gaacaggaga gcgcacgagg gagcttccag ggggaaacgc ctggtatctt tatagtcctg 6840
tcgggtttcg ccacctctga cttgagcgtc gatttttgtg atgctcgtca ggggggcgga 6900
gcctatggaa aaacgccagc aacgcggcct ttttacggtt cctggccttt tgctggcctt 6960
ttgctcacat gttctttcct gcgttatccc ctgattctgt ggataaccgt attaccgcct 7020
ttgagtgagc tgataccgct cgccgcagcc gaacgaccga gcgcagcgag tcagtgagcg 7080
aggaagcgga agagcgccca atacgcaaac cgcctctccc cgcgcgttgg ccgattcatt 7140
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atgtgagtta gctcactcat taggcacccc aggctttaca ctttatgctt ccggctcgta 7260
tgttgtgtgg aattgtgagc ggataacaat ttcacacagg aaacagctat gaccatgatt 7320
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<210> 60
<211> 6902
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 60
ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg 60
tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa 120
gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct 180
ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga 240
ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc 300
gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa 360
tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt 420
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tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc 660
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caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa 1020
aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa 1080
aactcacgtt aagggatttt ggtcatgtga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt 1140
ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac 1200
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aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cgtctaagaa 2160
accattatta acatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc ctttcgtctc 2220
gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca 2280
gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt 2340
ggcgggtgtc ggggctggct taactatgcg gcatcagagc agattgtact gagagtgcac 2400
catatgcggt gtgaaatacc gcacagatgc gtaaggagaa aataccgcat caggcgccat 2460
tcgccattca ggctgcgcaa ctgttgggaa gggcgatcgg tgcgggcctc ttcgctatta 2520
cgccagctgg cgaaaggggg atgtgctgca aggcgattaa gttgggtaac gccagggttt 2580
tcccagtcac gacgttgtaa aacgacggcc agtgaattcg agctcggtac ccgtagccat 2640
ggaaactaga taagaaagaa atacgcagag accaaagttc aactgaaacg aattaaacgg 2700
tttattgatt aacaagcaat tacagattac gggtgaggta acgggtgcca atggggcggg 2760
gttcagagta cacgccttct gtattaacag caaagtccac acttgtagat ttgtagtagt 2820
tggaggtgta ctggatctcg gggttccagc gcttgctgtt ttccttctgc agctcccatt 2880
caatttccac gctgacctgt ccggtgctgt attgcgtgat gaaagagttc agctttgact 2940
ggttgaaggt ggtcggagga tccgcaggta caggcgtgtt cttgatcagg atctgaggcg 3000
gaggatgttt caggccaaag ccgcccatca gcggagacgg gtggaagttg ccgtccgtgt 3060
gaggaatctt ggcccagatg ggaccctgca ggtacacgtc ccggttctgc cagaccatac 3120
cgggtaaggc cccctggctg ttgacagttc caatttgagg agccgtgttt tgctgctgca 3180
agttatctgc cacgataccg tattcctctg tagccacagg gttagtggtt ttgatttctt 3240
cctcgctggt gagcatgaca tcgctgtaat ccgcattgtc tctggcagca ttttgtttgc 3300
caaaaatcag gatcccgtta ctgggaaaaa aacgctcctc gtcgtctttg tgtgttgcca 3360
tagcgatgcc aggattagcc aatgaatttc ttccattcag atggtatttg gtcccagcag 3420
tccaggcaaa gttgctattg ttgttttgcc cggttgtcgt tgagacgcgt tgttggcggt 3480
aacagggtcc tggcagccag ttctttgcct gattggccat tgtattaggc ccaccttggc 3540
tgaagcccag agtctgcgta tttgccgtgc ctcctgttgt ttgagtccga gacaagtagt 3600
acaggtactg gtcaatcaga ggattcatca gccggtccaa gctctggctg tgggcgtagc 3660
tgctgtggaa aggcacgtcc tcgaaggtgt aagtaaactg gaagttgttg ccggttctca 3720
gcatctgcga aggaaagtat tccaggcagt agaaggagga gcgtcccacg gcctgactac 3780
cgttgttgag tgttaggtag ccgtactggg gaatcatgaa cacgtccgcc gggaacggag 3840
gcaggcagcc ctggtgggca gagccgagaa cgtacggcag ctggtactcc gagtccgtaa 3900
acacctggat ggtgctggtg aggttattgg cgatggtctt ggtgccttca ttctgcgtga 3960
cctccttgac ctggatgttg aagagcttga agctgagtct cttgggccgg aatccccagt 4020
tgttgttgat gagtcgctgc cagtcacgtg gtgaaaagtg gcagtggaat ctgttaaagt 4080
caaaataccc ccagggggtg ctgtagccga agtaggtgtt gtcgttggtg gctcctcccg 4140
atgtcccgtt ggagatttgc ttgtagaggt ggttgttgta ggtgggcagg gcccaggttc 4200
gggtgctggt ggtgatgact ctgtcgccca gccatgtgga atcgcaatgc caatttcccg 4260
aggaactacc cactccgtcg gcgccttcgt tattgtctgc cattggtgcg ccaccgcctg 4320
cagccattgt attaggtccc acaccagagg gcgctgctgg aggttctccg agaggttgag 4380
ggtctggaac tgactctgag tcgccagtct gaccaaaatt gagtcttttt ctggcgggct 4440
gttggccttt cttgccgatg cccgtagagg agtctggaga acgctggggt gatggctcta 4500
ccggtctctt ctttccagga gccgtcttag cgccttcctc aaccagaccg agaggttcga 4560
gaacccgctt cttggcctgg aagactgctc gcccgaggtt gcccccaaaa gacgtatctt 4620
cttgcagacg ctcctgaaac tcggcgtcgg cgtggttata ccgcaggtac ggattgtcac 4680
ccgcctgcag ctgctggtcg taggccttgt cgtgctcgag ggccgctgcg tccgccgcgt 4740
tgacgggctc ccccttgtcg agtccgttga agggtccgag gtacttgtag ccaggaagca 4800
ccagaccccg gccgtcgtcc tgcttttgct ggttggcttt gggcttcggg gctccaggtt 4860
tcagcgccca ccactcgcga atgccctcag agaggttgtc ctcgagccaa tctggaagat 4920
aaccatcggc agccatacct gatttaaatc atttattgtt caaagatgca gtcatccaaa 4980
tccacattga ccagatcgca ggcagtgcaa gcgtctggca cctttcccat gatatgatga 5040
atgtagcaca gtttctgata cgcctttttg acgacagaaa cgggttgaga ttctgacacg 5100
ggaaagcact ctaaacagtc tttctgtccg tgagtgaagc agatatttga attctgattc 5160
attctctcgc attgtctgca gggaaacagc atcagattca tgcccacgtg acgagaacat 5220
ttgttttggt acctgtctgc gtagttgatc gaagcttccg cgtctgacgt cgatggctgc 5280
gcaactgact cgcgcacccg tttgggctca cttatatctg cgtcactggg ggcgggtctt 5340
ttcttggctc cacccttttt gacgtagaat tcatgctcca cctcaaccac gtgatccttt 5400
gcccaccgga aaaagtcttt gacttcctgc ttggtgacct tcccaaagtc atgatccaga 5460
cggcgggtga gttcaaattt gaacatccgg tcttgcaacg gctgctggtg ttcgaaggtc 5520
gttgagttcc cgtcaatcac ggcgcacatg ttggtgttgg aggtgacgat cacgggagtc 5580
gggtctatct gggccgagga cttgcatttc tggtccacgc gcaccttgct tcctccgaga 5640
atggctttgg ccgactccac gaccttggcg gtcatcttcc cctcctccca ccagatcacc 5700
atcttgtcga cacagtcgtt gaagggaaag ttctcattgg tccagtttac gcacccgtag 5760
aagggcacag tgtgggctat ggcctccgcg atgttggtct tcccggtagt tgcaggccca 5820
aacagccaga tggtgttcct cttgccgaac tttttcgtgg cccatcccag aaagacggaa 5880
gccgcatatt ggggatcgta cccgtttagt tccaaaattt tataaatccg attgctggaa 5940
atgtcctcca cgggctgctg gcccaccagg tagtcggggg cggttttagt caggctcata 6000
atctttcccg cattgtccaa ggcagccttg atttgggacc gcgagttgga ggccgcattg 6060
aaggagatgt atgaggcctg gtcctcctgg atccactgct tctccgaggt aatccccttg 6120
tccacgagcc acccgaccag ctccatgtac ctggctgaag tttttgatct gatcaccggc 6180
gcatcagaat tgggattctg attctctttg ttctgctcct gcgtctgcga cacgtgcgtc 6240
agatgctgcg ccaccaaccg tttacgctcc gtgagattca aacaggcgct taaatactgt 6300
tccatattag tccacgccca ctggagctca ggctgggttt tggggagcaa gtaattgggg 6360
atgtagcact catccaccac cttgttcccg cctccggcgc catttctggt ctttgtgacc 6420
gcgaaccagt ttggcaaagt cggctcgatc ccgcggtaaa ttctctgaat cagtttttcg 6480
cgaatctgac tcaggaaacg tcccaaaacc atggatttca ccccggtggt ttccacgagc 6540
acgtgcatgt ggaagtagct ctctcccttc tcaaattgca caaagaaaag ggcctccggg 6600
gccttactca cacggcgcca ttccgtcaga aagtcgcgct gcagcttctc ggccacggtc 6660
aggggtgcct gctcaatcag attcagatcc atgtcagaat ctggcggcaa ctcccattcc 6720
ttctcggcca cccagttcac aaagctgtca gaaatgccgg gcagatgctc gtcaaggtcg 6780
ctggggacct taatcacaat ctcgtaaaac cccggcatgg cggctgcgca gatcagaagt 6840
tcctatactt tctagagaat aggaacttcg gaataggaac ttctgatctt ccgggggatc 6900
ca 6902
<210> 61
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 61
ttagaccgtg ccatggctag ttgggtacca ggtcacccgt gctcgacttc cggtcttcat 60
ggagaactgg tgaccggtaa ccgaccgtaa gattgggaat 100
<210> 62
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 62
tgtcaagaat acgatcggaa aggactcgac aattgatggg cctgtagcgc caacgttgta 60
ctttatccaa ggtgagctca ggagtgttat cataaatacg 100
<210> 63
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 63
tctcctgttc atccgacaac cacactccct agttcaggga ggtcactcga gttagagctg 60
aaaccccact agctcacgct cgttatcaac ccgggtaagt 100
<210> 64
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 64
gtggctcctt taaggtctcg cctgttcgat tgttcgtcgc tgccgcggat cagcaaagtt 60
gcttccgtcc taattcggcc taaggatccg ctagtgcgcg 100
<210> 65
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 65
actgcgcttc tgtggctcct gaacaacgca aagcttcggt cgcctagtcc agtggatggg 60
ccaaggacaa ttgcagtgct tatctccact gctgaaaccc 100
<210> 66
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 66
gtgaaagatg aggagtgagt ttacgcactc acgaagccct aattacccga gtatcgtaag 60
ccaatatcgt agcccagttc ctgtacaggg tcgcgtataa 100
<210> 67
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 67
acgatttccg tcgttcatat gagccaccag gcttgtctct tcgcgcaatt tgacacgcaa 60
cacccgctgc cattccgagg tcgttagggc ttttggattt 100
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<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 68
aacctatttg attgtacagc gtgagtacga agcgaatagg ctagtaacac tgccctatgc 60
aaagacgcct tggttgattc tagagctggg attggtacga 100
<210> 69
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 69
tgaggtcatc tccttttcat ccgtgtccta acgcttcgat ccttctgcag gctcctctta 60
tggatgtttt atcaccctgt cgagcgtgca cgatggtgga 100
<210> 70
<211> 100
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 70
gaactccgcg tgcagcgcgg agttgacacg gaaggccagg gagccaattt ccactgtcct 60
gagctagacc ccttgatagc acttgctgtg catggttgct 100
<210> 71
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<220>
<221> modified_base
<222> (5875)..(5974)
<223> a、c、t、g，未知或其他
<220>
<221> misc_feature
<222> (5875)..(5974)
<223> 这个区域可涵盖60-100个核苷酸
<400> 71
tagggaaata ggccaggttt tcaccgtaac acgccacatc ttgcgaatat atgtgtagaa 60
actgccggaa atcgtcgtgt gcactcatgg aaaacggtgt aacaagggtg aacactatcc 120
catatcacca gctcaccgtc tttcattgcc atacggaact ccggatgagc attcatcagg 180
cgggcaagaa tgtgaataaa ggccggataa aacttgtgct tatttttctt tacggtcttt 240
aaaaaggccg taatatccag ctgaacggtc tggttatagg tacattgagc aactgactga 300
aatgcctcaa aatgttcttt acgatgccat tgggatatat caacggtggt atatccagtg 360
atttttttct ccattttttt ttcctccttt agaaaaactc atcgagcatc aaatgaaact 420
gcaatttatt catatcagga ttatcaatac catatttttg aaaaagccgt ttctgtaatg 480
aaggagaaaa ctcaccgagg cagttccata ggatggcaag atcctggtat cggtctgcga 540
ttccgactcg tccaacatca atacaaccta ttaatttccc ctcgtcaaaa ataaggttat 600
caagtgagaa atcaccatga gtgacgactg aatccggtga gaatggcaaa agtttatgca 660
tttctttcca gacttgttca acaggccagc cattacgctc gtcatcaaaa tcactcgcat 720
caaccaaacc gttattcatt cgtgattgcg cctgagcgag gcgaaatacg cgatcgctgt 780
taaaaggaca attacaaaca ggaatcgagt gcaaccggcg caggaacact gccagcgcat 840
caacaatatt ttcacctgaa tcaggatatt cttctaatac ctggaacgct gtttttccgg 900
ggatcgcagt ggtgagtaac catgcatcat caggagtacg gataaaatgc ttgatggtcg 960
gaagtggcat aaattccgtc agccagttta gtctgaccat ctcatctgta acatcattgg 1020
caacgctacc tttgccatgt ttcagaaaca actctggcgc atcgggcttc ccatacaagc 1080
gatagattgt cgcacctgat tgcccgacat tatcgcgagc ccatttatac ccatataaat 1140
cagcatccat gttggaattt aatcgcggcc tcgacgtttc ccgttgaata tggctcattt 1200
ttttttcctc ctttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt 1260
tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt 1320
accatctggc cccagcgctg cgatgatacc gcgagaacca cgctcaccgg ctccggattt 1380
atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc 1440
cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa 1500
tagtttgcgc aacgttgttg ccatcgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg 1560
tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gattcttcct ttttcaatat 1620
tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat acatatttga atgtatttag 1680
aaaaataaac aaataggggt cagtgttaca accaattaac caattctgaa cattatcgcg 1740
agcccattta tacctgaata tggctcataa caccccttgt ttgcctggcg gcagtagcgc 1800
ggtggtccca cctgacccca tgccgaactc agaagtgaaa cgccgtagcg ccgatggtag 1860
tgtggggact ccccatgcga gagtagggaa ctgccaggca tcaaataaaa cgaaaggctc 1920
agtcgaaaga ctgggccttt cgcccgggct aattgagggg tgtcgccctt attcgactcg 1980
gggctcgagc tgcgcgctcg ctcgctcact gaggccgccc gggcaaagcc cgggcgtcgg 2040
gcgacctttg gtcgcccggc ctcagtgagc gagcgagcgc gcagagaggg agtggccaac 2100
tccatcacta ggggttcctt taattaaacg cgtttacata acttacggta aatggcccgc 2160
ctggctgacc gcccaacgac ccccgcccat tgacgtcaat aatgacgtat gttcccatag 2220
taacgccaat agggactttc cattgacgtc aatgggtgga ctatttacgg taaactgccc 2280
acttggcagt acatcaagtg tatcatatgc caagtacgcc ccctattgac gtcaatgacg 2340
gtaaatggcc cgcctggcat tatgcccagt acatgacctt atgggacttt cctacttggc 2400
agtacatcta cgtattagtc atcgctatta ccatggtgat gcggttttgg cagtacatca 2460
atgggcgtgg atagcggttt gactcacggg gatttccaag tctccacccc attgacgtca 2520
atgggagttt gttttggcac caaaatcaac gggactttcc aaaatgtcgt aacaactccg 2580
ccccattgac gcaaatgggc ggtaggcgtg tacggtggga ggtctatata ggcgcgccga 2640
actgaaaaac cagaaagtta actggtaagt ttagtctttt tgtcttttat ttcaggtccc 2700
ggatccggtg gtggtgcaaa tcaaagaact gctcctcagt ggatgttgcc tttacttcta 2760
ggcctgtacg gaagtgttac ttctgctcta aaagctcctg cagggaattc gccaccatgg 2820
tgagcaaggg cgaggagctg ttcaccgggg tggtgcccat cctggtcgag ctggacggcg 2880
acgtaaacgg ccacaagttc agcgtgtccg gcgagggcga gggcgatgcc acctacggca 2940
agctgaccct gaagttcatc tgcaccaccg gcaagctgcc cgtgccctgg cccaccctcg 3000
tgaccaccct gacctacggc gtgcagtgct tcagccgcta ccccgaccac atgaagcagc 3060
acgacttctt caagtccgcc atgcccgaag gctacgtcca ggagcgcacc atcttcttca 3120
aggacgacgg caactacaag acccgcgccg aggtgaagtt cgagggcgac accctggtga 3180
accgcatcga gctgaagggc atcgacttca aggaggacgg caacatcctg gggcacaagc 3240
tggagtacaa ctacaacagc cacaacgtct atatcatggc cgacaagcag aagaacggca 3300
tcaaggtgaa cttcaagatc cgccacaaca tcgaggacgg cagcgtgcag ctcgccgacc 3360
actaccagca gaacaccccc atcggcgacg gccccgtgct gctgcccgac aaccactacc 3420
tgagcaccca gtccgccctg agcaaagacc ccaacgagaa gcgcgatcac atggtcctgc 3480
tggagttcgt gaccgccgcc gggatcactc tcggcatgga cgagctgtac aagtaataga 3540
ctagtgcccc tctccctccc ccccccctaa cgttactggc cgaagccgct tggaataagg 3600
ccggtgtgcg tttgtctata tgttattttc caccatattg ccgtcttttg gcaatgtgag 3660
ggcccggaaa cctggccctg tcttcttgac gagcattcct aggggtcttt cccctctcgc 3720
caaaggaatg caaggtctgt tgaatgtcgt gaaggaagca gttcctctgg aagcttcttg 3780
aagacaaaca acgtctgtag cgaccctttg caggcagcgg aaccccccac ctggcgacag 3840
gtgcctctgc ggccaaaagc cacgtgtata agatacacct gcaaaggcgg cacaacccca 3900
gtgccacgtt gtgagttgga tagttgtgga aagagtcaaa tggctcacct caagcgtatt 3960
caacaagggg ctgaaggatg cccagaaggt accccattgt atgggatctg atctggggcc 4020
tcggtgcaca tgctttacat gtgtttagtc gaggttaaaa aacgtctagg ccccccgaac 4080
cacggggacg tggttttcct ttgaaaaaca cgatgataat accggtgcca ccatgctgct 4140
gctgctgctg ctgctgggcc tgaggctaca gctctccctg ggcatcatcc cagttgagga 4200
ggagaacccg gacttctgga accgcgaggc agccgaggcc ctgggtgccg ccaagaagct 4260
gcagcctgca cagacagccg ccaagaacct catcatcttc ctgggcgatg ggatgggggt 4320
gtctacggtg acagctgcca ggatcctaaa agggcagaag aaggacaaac tggggcctga 4380
gatacccctg gccatggacc gcttcccata tgtggctctg tccaagacat acaatgtaga 4440
caaacatgtg ccagacagtg gagccacagc cacggcctac ctgtgcgggg tcaagggcaa 4500
cttccagacc attggcttga gtgcagccgc ccgctttaac cagtgcaaca cgacacgcgg 4560
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caactggtac tcggacgccg acgtgcctgc ctcggcccgc caggaggggt gccaggacat 4740
cgctacgcag ctcatctcca acatggacat tgacgtgatc ctaggtggag gccgaaagta 4800
catgtttcgc atgggaaccc cagaccctga gtacccagat gactacagcc aaggtgggac 4860
caggctggac gggaagaatc tggtgcagga atggctggcg aagcgccagg gtgcccggta 4920
tgtgtggaac cgcactgagc tcatgcaggc ttccctggac ccgtctgtga cccatctcat 4980
gggtctcttt gagcctggag acatgaaata cgagatccac cgagactcca cactggaccc 5040
ctccctgatg gagatgacag aggctgccct gcgcctgctg agcaggaacc cccgcggctt 5100
cttcctcttc gtggagggtg gtcgcatcga ccatggtcat catgaaagca gggcttaccg 5160
ggcactgact gagacgatca tgttcgacga cgccattgag agggcgggcc agctcaccag 5220
cgaggaggac acgctgagcc tcgtcactgc cgaccactcc cacgtcttct ccttcggagg 5280
ctaccccctg cgagggagct ccatcttcgg gctggcccct ggcaaggccc gggacaggaa 5340
ggcctacacg gtcctcctat acggaaacgg tccaggctat gtgctcaagg acggcgcccg 5400
gccggatgtt accgagagcg agagcgggag ccccgagtat cggcagcagt cagcagtgcc 5460
cctggacgaa gagacccacg caggcgagga cgtggcggtg ttcgcgcgcg gcccgcaggc 5520
gcacctggtt cacggcgtgc aggagcagac cttcatagcg cacgtcatgg ccttcgccgc 5580
ctgcctggag ccctacaccg cctgcgacct ggcgcccccc gccggcacca ccgacgccgc 5640
gcacccgggt tactctagag tcggggcggc cggccgcttc gagcagacat gagtcgacag 5700
atcttttaaa aaacctccca cacaattgtt gttgttaact tgtttattgc agcttataat 5760
ggttacaaat aaagcaatag catcacaaat ttcacaaata aagcattttt ttcactgcat 5820
tctagttgtg gtttgtccaa actcatcaat gtatcttatc atgtctgttt aaacnnnnnn 5880
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 5940
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnatttaa ataggaaccc ctagtgatgg 6000
agttggccac tccctctctg cgcgctcgct cgctcactga ggccgggcga ccaaaggtcg 6060
cccgacgccc gggctttgcc cgggcggcct cagtgagcga gcgagcgcgc agagagtata 6120
catcgatgtg agttcgcggg tggctggggg gccctgggct gcgaccgccc ccgaaccgcg 6180
tctacgagcc ttgcgggctc cgggtctttg cagtcgtatg ggggcagggt agctgttccc 6240
cgcaaggaga gctcaaggtc agcgctcgga cctggcggag ccccgcaccc aggctgtggc 6300
gccctgtgca gctccgccct tgcggcgcca tctgcccgga gcctccttcc cctagtcccc 6360
agaaacagga ggtccctact cccgcccgag atcccgaccc ggacccctag gtgggggacg 6420
ctttctttcc tttcgcgctc tgcggggtca cgtgtcgcag aggagcccct cccccacggc 6480
ctccggcacc gcaggccccg ggatgctagt gcgcagcggg tgcatccctg tccggatgct 6540
gcgcctgcgg tagagcggcc gccatgttgc aaccgggaag gaaatgaatg ggcagccgtt 6600
aggaaagcct gccggtgact aaccctgcgc tcctgcctcg atgggtggag tcgcgtgtgg 6660
cggggaagtc aggtggagcg aggctagctg gcccgatttc tcctccgggt gatgcttttc 6720
ctagattatt ctctggtaaa tcaaagaagt gggtttatgg aggtcctctt gtgtcccctc 6780
cccgcagagg tgtggtggct gtggcatggt gccaagccgg gagaagctga gtcatgggta 6840
gttggaaaag gacatttcca ccgcaaaatg gcccctctgg tggtggcccc ttcctgcagc 6900
gccggctcac ctcacggccc cgcccttccc ctgccagcct agcgttgacc cgaccccaaa 6960
ggccaggctg taaatgtcac cgggaggatt gggtgtctgg gcgcctcggg gaacctgccc 7020
ttctccccat tccgtcttcc ggaaaccaga tctcccaccg caccctggtc tgaggttaaa 7080
tatagctgct gacctttctg tagctggggg cctgggctgg ggctctctcc catcccttct 7140
ccccacacac atgcacttac ctgtgctccc actcctgatt tctggaaaag agctaggaag 7200
gacaggcaac ttggcaaatc aaagccctgg gactaggggg ttaaaataca gcttcccctc 7260
ttcccacccg ccccagtctc tgtccctttt gtaggaggga cttagagaag gggtgggctt 7320
gccctgtcca gttaatttct gacctttact cctgcccttt gagtttgatg atgctgagtg 7380
tacaagcgtt ttctccctaa agggtgcagc tgagctaggc agcagcaagc attcctgggg 7440
tggcatagtg gggtggtgaa taccatgtac aaagcttgtg cccagactgt gggtggcagt 7500
gccccacatg gccgcttctc ctggaagggc ttcgtatgac tgggggtgtt gggcagccct 7560
ggagccttca gttgcagcca tgccttaagc caggccagcc tggcagggaa gctcaaggga 7620
gataaaattc aacctcttgg gccctcctgg gggtaaggag atgctgcatt cgccctctta 7680
atggggaggt ggcctagggc tgctcacata ttctggagga gcctcccctc ctcatgcctt 7740
cttgcctctt gtctcttagg catgcaaaag agtcgaataa gggcgacaca aaatttattc 7800
taaatgcata ataaatactg ataacatctt atagtttgta ttatattttg tattatcgtt 7860
gacatgtata attttgatat caaaaactga ttttcccttt attattttcg agatttattt 7920
tcttaattct ctttaacaaa ctagaaatat tgtatataca aaaaatcata aataatagat 7980
gaatagttta attataggtg ttcatcaatc gaaaaagcaa cgtatcttat ttaaagtgcg 8040
ttgctttttt ctcatttata aggttaaata attctcatat atcaagcaaa gtgacaggcg 8100
cccttaaata ttctgacaaa tgctctttcc ctaaactccc cccataaaaa aacccgccga 8160
agcgggtttt tacgttattt gcggattaac gattactcgt tatcagaacc gcccaggggg 8220
cccgagctta agactggccg tcgttttaca acacagaaag agtttgtaga aacgcaaaaa 8280
ggccatccgt caggggcctt ctgcttagtt tgatgcctgg cagttcccta ctctcgcctt 8340
ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag 8400
ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca 8460
tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt 8520
tccataggct ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc 8580
gaaacccgac aggactataa agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct 8640
ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg 8700
tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca 8760
agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact 8820
atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta 8880
acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtgggcta 8940
actacggcta cactagaaga acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct 9000
tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt 9060
tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga 9120
tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga acgacgcgcg cgtaactcac gttaagggat 9180
tttggtcatg agcttgcgcc gtcccgtcaa gtcagcgtaa tgctacactt cttcccgtat 9240
gcccaacttt gtatagagag ccactgcggg atcgtcaccg taatctgctt gcacgtagat 9300
ttataaagca ccaagcgcgt tggcctttag cttgaggaga ttgatgagcg cggtggcaat 9360
gccctgcctc cggtgctcgc cggagactgc gagatttaag atatagatct cactacgcgg 9420
ctgctcaaac ttgggcagaa cgtaagccgc gagagcgcca acaaccgctt cttggtcgaa 9480
ggcagcaagc gcgatgaatg tcttactacg gagcaagttc ccgaggtaat cggagtccgg 9540
ctgatgttgg gagtaggtgg ctacgtcacc gaactcacga ccgaaaagat caagagcagc 9600
ccgttaggat ttgacttggt cagggccgag cctattagtg cgaatgatgc cttaacttga 9660
gccacctaac tttgttttag ggcgactgcc ctgctgcgta attacgttgc tgctcttaaa 9720
ttacaaacat cgacccacgg cgtaacgcgc ttgctgcttg gatgcccgag gcatagactg 9780
tacaaaaaaa cagtcataac aagccatgaa aaccgccact gcgccgttac caccgctgcg 9840
ttcggtcaag gttctggacc agttgcgtga gcgcattttt ttttcctcct cggcgtttac 9900
gccccgccct gccactcatc gcagtactgt tgtaattcat taagcattct gccgacatgg 9960
aagccatcac agacggcatg atgaacctga atcgccagcg gcatcagcac cttgtcgcct 10020
tgcgtataat atttgcccat agtgaaaacg ggggcgaaga agttgtccat attggccacg 10080
tttaaatcaa aactggtgaa actcacccag ggattggcgc tgacgaaaaa catattctca 10140
ataaaccctt 10150
<210> 72
<211> 498
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<400> 72
cacttcttcc cgtatgccca actttgtata gagagccact gcgggatcgt caccgtaatc 60
tgcttgcacg tagatttata aagcaccaag cgcgttggcc tttagcttga ggagattgat 120
gagcgcggtg gcaatgccct gcctccggtg ctcgccggag actgcgagat ttaagatata 180
gatctcacta cgcggctgct caaacttggg cagaacgtaa gccgcgagag cgccaacaac 240
cgcttcttgg tcgaaggcag caagcgcgat gaatgtctta ctacggagca agttcccgag 300
gtaatcggag tccggctgat gttgggagta ggtggctacg tcaccgaact cacgaccgaa 360
aagatcaaga gcagcccgtt aggatttgac ttggtcaggg ccgagcctat tagtgcgaat 420
gatgccttaa cttgagccac ctaactttgt tttagggcga ctgccctgct gcgtaattac 480
gttgctgctc ttaaatta 498
<210> 73
<211> 7989
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸
<220>
<221> modified_base
<222> (3714)..(3813)
<223> a、c、t、g，未知或其他
<220>
<221> misc_feature
<222> (3714)..(3813)
<223> 这个区域可涵盖60-100个核苷酸
<400> 73
tagggaaata ggccaggttt tcaccgtaac acgccacatc ttgcgaatat atgtgtagaa 60
actgccggaa atcgtcgtgt gcactcatgg aaaacggtgt aacaagggtg aacactatcc 120
catatcacca gctcaccgtc tttcattgcc atacggaact ccggatgagc attcatcagg 180
cgggcaagaa tgtgaataaa ggccggataa aacttgtgct tatttttctt tacggtcttt 240
aaaaaggccg taatatccag ctgaacggtc tggttatagg tacattgagc aactgactga 300
aatgcctcaa aatgttcttt acgatgccat tgggatatat caacggtggt atatccagtg 360
atttttttct ccattttttt ttcctccttt agaaaaactc atcgagcatc aaatgaaact 420
gcaatttatt catatcagga ttatcaatac catatttttg aaaaagccgt ttctgtaatg 480
aaggagaaaa ctcaccgagg cagttccata ggatggcaag atcctggtat cggtctgcga 540
ttccgactcg tccaacatca atacaaccta ttaatttccc ctcgtcaaaa ataaggttat 600
caagtgagaa atcaccatga gtgacgactg aatccggtga gaatggcaaa agtttatgca 660
tttctttcca gacttgttca acaggccagc cattacgctc gtcatcaaaa tcactcgcat 720
caaccaaacc gttattcatt cgtgattgcg cctgagcgag gcgaaatacg cgatcgctgt 780
taaaaggaca attacaaaca ggaatcgagt gcaaccggcg caggaacact gccagcgcat 840
caacaatatt ttcacctgaa tcaggatatt cttctaatac ctggaacgct gtttttccgg 900
ggatcgcagt ggtgagtaac catgcatcat caggagtacg gataaaatgc ttgatggtcg 960
gaagtggcat aaattccgtc agccagttta gtctgaccat ctcatctgta acatcattgg 1020
caacgctacc tttgccatgt ttcagaaaca actctggcgc atcgggcttc ccatacaagc 1080
gatagattgt cgcacctgat tgcccgacat tatcgcgagc ccatttatac ccatataaat 1140
cagcatccat gttggaattt aatcgcggcc tcgacgtttc ccgttgaata tggctcattt 1200
ttttttcctc ctttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt 1260
tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt 1320
accatctggc cccagcgctg cgatgatacc gcgagaacca cgctcaccgg ctccggattt 1380
atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc 1440
cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa 1500
tagtttgcgc aacgttgttg ccatcgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg 1560
tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gattcttcct ttttcaatat 1620
tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat acatatttga atgtatttag 1680
aaaaataaac aaataggggt cagtgttaca accaattaac caattctgaa cattatcgcg 1740
agcccattta tacctgaata tggctcataa caccccttgt ttgcctggcg gcagtagcgc 1800
ggtggtccca cctgacccca tgccgaactc agaagtgaaa cgccgtagcg ccgatggtag 1860
tgtggggact ccccatgcga gagtagggaa ctgccaggca tcaaataaaa cgaaaggctc 1920
agtcgaaaga ctgggccttt cgcccgggct aattgagggg tgtcgccctt attcgactcg 1980
gggctcgagc agcagctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 2040
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 2100
gggttttaat taaacgcgtt tacataactt acggtaaatg gcccgcctgg ctgaccgccc 2160
aacgaccccc gcccattgac gtcaataatg acgtatgttc ccatagtaac gccaataggg 2220
actttccatt gacgtcaatg ggtggactat ttacggtaaa ctgcccactt ggcagtacat 2280
caagtgtatc atatgccaag tacgccccct attgacgtca atgacggtaa atggcccgcc 2340
tggcattatg cccagtacat gaccttatgg gactttccta cttggcagta catctacgta 2400
ttagtcatcg ctattaccat ggtgatgcgg ttttggcagt acatcaatgg gcgtggatag 2460
cggtttgact cacggggatt tccaagtctc caccccattg acgtcaatgg gagtttgttt 2520
tggcaccaaa atcaacggga ctttccaaaa tgtcgtaaca actccgcccc attgacgcaa 2580
atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc tatataggcg cgccgaactg aaaaaccaga 2640
aagttaactg gtaagtttag tctttttgtc ttttatttca ggtcccggat ccggtggtgg 2700
tgcaaatcaa agaactgctc ctcagtggat gttgccttta cttctaggcc tgtacggaag 2760
tgttacttct gctctaaaag ctcctgcagg gaattcgcca ccatggtgag caagggcgag 2820
gagctgttca ccggggtggt gcccatcctg gtcgagctgg acggcgacgt aaacggccac 2880
aagttcagcg tgtccggcga gggcgagggc gatgccacct acggcaagct gaccctgaag 2940
ttcatctgca ccaccggcaa gctgcccgtg ccctggccca ccctcgtgac caccctgacc 3000
tacggcgtgc agtgcttcag ccgctacccc gaccacatga agcagcacga cttcttcaag 3060
tccgccatgc ccgaaggcta cgtccaggag cgcaccatct tcttcaagga cgacggcaac 3120
tacaagaccc gcgccgaggt gaagttcgag ggcgacaccc tggtgaaccg catcgagctg 3180
aagggcatcg acttcaagga ggacggcaac atcctggggc acaagctgga gtacaactac 3240
aacagccaca acgtctatat catggccgac aagcagaaga acggcatcaa ggtgaacttc 3300
aagatccgcc acaacatcga ggacggcagc gtgcagctcg ccgaccacta ccagcagaac 3360
acccccatcg gcgacggccc cgtgctgctg cccgacaacc actacctgag cacccagtcc 3420
gccctgagca aagaccccaa cgagaagcgc gatcacatgg tcctgctgga gttcgtgacc 3480
gccgccggga tcactctcgg catggacgag ctgtacaagt aatagactag tgtcgacaga 3540
tcttttaaaa aacctcccac acaattgttg ttgttaactt gtttattgca gcttataatg 3600
gttacaaata aagcaatagc atcacaaatt tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt 3660
ctagttgtgg tttgtccaaa ctcatcaatg tatcttatca tgtctgttta aacnnnnnnn 3720
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 3780
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnatttaaa taggaacccc tagtgatgga 3840
gttggccact ccctctctgc gcgctcgctc gctcactgag gccgggcgac caaaggtcgc 3900
ccgacgcccg ggctttgccc gggcggcctc agtgagcgag cgagcgcgca gagagtatac 3960
atcgatgtga gttcgcgggt ggctgggggg ccctgggctg cgaccgcccc cgaaccgcgt 4020
ctacgagcct tgcgggctcc gggtctttgc agtcgtatgg gggcagggta gctgttcccc 4080
gcaaggagag ctcaaggtca gcgctcggac ctggcggagc cccgcaccca ggctgtggcg 4140
ccctgtgcag ctccgccctt gcggcgccat ctgcccggag cctccttccc ctagtcccca 4200
gaaacaggag gtccctactc ccgcccgaga tcccgacccg gacccctagg tgggggacgc 4260
tttctttcct ttcgcgctct gcggggtcac gtgtcgcaga ggagcccctc ccccacggcc 4320
tccggcaccg caggccccgg gatgctagtg cgcagcgggt gcatccctgt ccggatgctg 4380
cgcctgcggt agagcggccg ccatgttgca accgggaagg aaatgaatgg gcagccgtta 4440
ggaaagcctg ccggtgacta accctgcgct cctgcctcga tgggtggagt cgcgtgtggc 4500
ggggaagtca ggtggagcga ggctagctgg cccgatttct cctccgggtg atgcttttcc 4560
tagattattc tctggtaaat caaagaagtg ggtttatgga ggtcctcttg tgtcccctcc 4620
ccgcagaggt gtggtggctg tggcatggtg ccaagccggg agaagctgag tcatgggtag 4680
ttggaaaagg acatttccac cgcaaaatgg cccctctggt ggtggcccct tcctgcagcg 4740
ccggctcacc tcacggcccc gcccttcccc tgccagccta gcgttgaccc gaccccaaag 4800
gccaggctgt aaatgtcacc gggaggattg ggtgtctggg cgcctcgggg aacctgccct 4860
tctccccatt ccgtcttccg gaaaccagat ctcccaccgc accctggtct gaggttaaat 4920
atagctgctg acctttctgt agctgggggc ctgggctggg gctctctccc atcccttctc 4980
cccacacaca tgcacttacc tgtgctccca ctcctgattt ctggaaaaga gctaggaagg 5040
acaggcaact tggcaaatca aagccctggg actagggggt taaaatacag cttcccctct 5100
tcccacccgc cccagtctct gtcccttttg taggagggac ttagagaagg ggtgggcttg 5160
ccctgtccag ttaatttctg acctttactc ctgccctttg agtttgatga tgctgagtgt 5220
acaagcgttt tctccctaaa gggtgcagct gagctaggca gcagcaagca ttcctggggt 5280
ggcatagtgg ggtggtgaat accatgtaca aagcttgtgc ccagactgtg ggtggcagtg 5340
ccccacatgg ccgcttctcc tggaagggct tcgtatgact gggggtgttg ggcagccctg 5400
gagccttcag ttgcagccat gccttaagcc aggccagcct ggcagggaag ctcaagggag 5460
ataaaattca acctcttggg ccctcctggg ggtaaggaga tgctgcattc gccctcttaa 5520
tggggaggtg gcctagggct gctcacatat tctggaggag cctcccctcc tcatgccttc 5580
ttgcctcttg tctcttaggc atgcaaaaga gtcgaataag ggcgacacaa aatttattct 5640
aaatgcataa taaatactga taacatctta tagtttgtat tatattttgt attatcgttg 5700
acatgtataa ttttgatatc aaaaactgat tttcccttta ttattttcga gatttatttt 5760
cttaattctc tttaacaaac tagaaatatt gtatatacaa aaaatcataa ataatagatg 5820
aatagtttaa ttataggtgt tcatcaatcg aaaaagcaac gtatcttatt taaagtgcgt 5880
tgcttttttc tcatttataa ggttaaataa ttctcatata tcaagcaaag tgacaggcgc 5940
ccttaaatat tctgacaaat gctctttccc taaactcccc ccataaaaaa acccgccgaa 6000
gcgggttttt acgttatttg cggattaacg attactcgtt atcagaaccg cccagggggc 6060
ccgagcttaa gactggccgt cgttttacaa cacagaaaga gtttgtagaa acgcaaaaag 6120
gccatccgtc aggggccttc tgcttagttt gatgcctggc agttccctac tctcgccttc 6180
cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc 6240
tcactcaaag gcggtaatac ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat 6300
gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt 6360
ccataggctc cgcccccctg acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg 6420
aaacccgaca ggactataaa gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc 6480
tcctgttccg accctgccgc ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt 6540
ggcgctttct catagctcac gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa 6600
gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta 6660
tcgtcttgag tccaacccgg taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa 6720
caggattagc agagcgaggt atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtgggctaa 6780
ctacggctac actagaagaa cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt 6840
cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtggttt 6900
ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag atcctttgat 6960
cttttctacg gggtctgacg ctcagtggaa cgacgcgcgc gtaactcacg ttaagggatt 7020
ttggtcatga gcttgcgccg tcccgtcaag tcagcgtaat gctacacttc ttcccgtatg 7080
cccaactttg tatagagagc cactgcggga tcgtcaccgt aatctgcttg cacgtagatt 7140
tataaagcac caagcgcgtt ggcctttagc ttgaggagat tgatgagcgc ggtggcaatg 7200
ccctgcctcc ggtgctcgcc ggagactgcg agatttaaga tatagatctc actacgcggc 7260
tgctcaaact tgggcagaac gtaagccgcg agagcgccaa caaccgcttc ttggtcgaag 7320
gcagcaagcg cgatgaatgt cttactacgg agcaagttcc cgaggtaatc ggagtccggc 7380
tgatgttggg agtaggtggc tacgtcaccg aactcacgac cgaaaagatc aagagcagcc 7440
cgttaggatt tgacttggtc agggccgagc ctattagtgc gaatgatgcc ttaacttgag 7500
ccacctaact ttgttttagg gcgactgccc tgctgcgtaa ttacgttgct gctcttaaat 7560
tacaaacatc gacccacggc gtaacgcgct tgctgcttgg atgcccgagg catagactgt 7620
acaaaaaaac agtcataaca agccatgaaa accgccactg cgccgttacc accgctgcgt 7680
tcggtcaagg ttctggacca gttgcgtgag cgcatttttt tttcctcctc ggcgtttacg 7740
ccccgccctg ccactcatcg cagtactgtt gtaattcatt aagcattctg ccgacatgga 7800
agccatcaca gacggcatga tgaacctgaa tcgccagcgg catcagcacc ttgtcgcctt 7860
gcgtataata tttgcccata gtgaaaacgg gggcgaagaa gttgtccata ttggccacgt 7920
ttaaatcaaa actggtgaaa ctcacccagg gattggcgct gacgaaaaac atattctcaa 7980
taaaccctt 7989
<210> 74
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成肽
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(3)
<223> 这个区域可存在或可不存在
<400> 74
Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu
1 5 10 15
Glu Asn Pro Gly Pro
20
<210> 75
<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成肽
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(3)
<223> 这个区域可存在或可不存在
<400> 75
Gly Ser Gly Ala Thr Asn Phe Ser Leu Leu Lys Gln Ala Gly Asp Val
1 5 10 15
Glu Glu Asn Pro Gly Pro
20
<210> 76
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成肽
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(3)
<223> 这个区域可存在或可不存在
<400> 76
Gly Ser Gly Gln Cys Thr Asn Tyr Ala Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp
1 5 10 15
Val Glu Ser Asn Pro Gly Pro
20
<210> 77
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成肽
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(3)
<223> 这个区域可存在或可不存在
<400> 77
Gly Ser Gly Val Lys Gln Thr Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala
1 5 10 15
Gly Asp Val Glu Ser Asn Pro Gly Pro
20 25

Claims (51)

1.一种用于重组腺相关病毒载体rAAV产生的质粒系统，其包括：
(i)含转基因质粒，其包括由5'和3'AAV反向末端重复序列ITR侧接的至少一种异源核酸和在所述ITR外部的填充序列；
(ii)质粒，其包括AAV复制(Rep)和衣壳(Cap)基因序列；和
(iii)腺病毒(Ad)辅助质粒。
2.根据权利要求1所述的质粒系统，其中所述填充序列增加含转基因质粒骨架的大小，使得所述含转基因质粒不包装到rAAV衣壳中。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒的所述骨架大于野生型AAV基因组。
4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述填充序列不含增强子、启动子、剪接调节子、非编码RNA、反义序列、编码序列，或其任何组合。
5.根据权利要求4所述的质粒系统，其中所述填充序列不含增强子、启动子、剪接调节子、非编码RNA、反义序列和编码序列。
6.根据权利要求1至5中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述填充序列包括发现于人类基因组中的惰性内含子DNA序列。
7.根据权利要求1至6中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述填充序列包括长度在1000与5000个核苷酸之间的核酸序列，或长度在1000与2000个核苷酸之间的核酸序列。
8.根据权利要求1至7中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述填充序列包括GAPDH内含子2、其片段或突变体。
9.根据权利要求1至8中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述填充序列包括与SEQID NO:9具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。
10.根据权利要求1至9中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述填充序列由与SEQID NO:9具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸组成。
11.根据权利要求1至8中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述填充序列包括SEQID NO:9或其片段。
12.根据权利要求1至8中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述填充序列由SEQ IDNO:9或其片段组成。
13.根据权利要求1至12中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒包括具有与图3A呈相同次序的结构的质粒，其中eGFP和SEAP转基因能够被所述至少一种异源核酸置换。
14.根据权利要求1至12中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒包括具有与图3B呈相同次序的结构的质粒，其中eGFP转基因能够被所述至少一种异源核酸置换。
15.根据权利要求1至12中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒在5'到3'的方向上包括以下核酸序列：SEQ ID NO:2、4、至少一种异源核酸、8、3和所述填充序列，其中各核酸序列能够被以下取代或编码以下：对应功能片段或其衍生物，或与其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％一致性的序列。
16.根据权利要求1至15中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒进一步包括在表达盒外部但在5'ITR与3'ITR之间的DNA滴度标签。
17.根据权利要求1至15中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒进一步包括在以下各处的DNA滴度标签：i)3'ITR的上游和polyA序列的下游；或ii)所述3'ITR的上游和所述至少一种异源核酸序列的下游；iii)或5'ITR的下游和至少一种异源核酸序列的上游；或iv)所述5'ITR的下游和所述至少一种异源核酸序列的启动子的上游；或v)所述5'ITR的下游和所述3'ITR的上游。
18.根据权利要求1至15中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒进一步包括在以下各处的DNA滴度标签：i)SEQ ID NO:3的上游和SEQ ID NO:8的下游；或ii)SEQID NO:3的上游和所述至少一种异源核酸序列的下游；iii)或SEQ ID NO:2的下游和所述至少一种异源核酸序列的上游；或iv)SEQ ID NO:2的下游和SEQ ID NO:4的上游；或v)SEQ IDNO:2的下游和SEQ ID NO:3的上游。
19.根据权利要求1至12中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒在5'到3'的方向上包括以下核酸序列：SEQ ID NO:43、4、至少一种异源核酸序列、8、3和所述填充序列，其中各核酸序列能够被以下取代或编码以下：对应功能片段或其衍生物，或与其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％一致性的序列。
20.根据权利要求19所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒进一步包括在所述表达盒外部但在所述5'ITR与所述3'ITR之间的DNA滴度标签。
21.根据权利要求19或权利要求20所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒进一步包括在以下各处的DNA滴度标签：i)3'ITR的上游和polyA序列的下游；或ii)所述3'ITR的上游和所述至少一种异源核酸序列的下游；iii)或5'ITR的下游和所述至少一种异源核酸序列的上游；或iv)所述5'ITR的下游和所述至少一种异源核酸序列的启动子的上游；或v)所述5'ITR的下游和所述3'ITR的上游。
22.根据权利要求19至20中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述含转基因质粒进一步包括在以下各处的DNA滴度标签：i)SEQ ID NO:3的上游和SEQ ID NO:8的下游；或ii)SEQ ID NO:3的上游和所述至少一种异源核酸序列的下游；iii)或SEQ ID NO:43的下游和所述至少一种异源核酸序列的上游；或iv)SEQ ID NO:43的下游和SEQ ID NO:4的上游；或v)SEQ ID NO:43的下游和SEQ ID NO:3的上游。
23.根据权利要求1至22中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述AAV Rep基因序列来自AAV血清型2、5、8、9，或其杂合体。
24.根据权利要求1至23中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述AAV Cap基因序列来自AAV血清型2、5、8、9，或其杂合体。
25.根据权利要求1至24中任一权利要求所述的质粒系统，其中包括所述Rep及Cap基因序列的所述质粒进一步包括启动子。
26.根据权利要求25所述的质粒系统，其中所述启动子为AAV启动子。
27.根据权利要求26所述的质粒系统，其中所述启动子为AAV P5启动子。
28.根据权利要求1至27中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述Ad辅助质粒包括选自以下的腺病毒基因中的一或多个：E1a、E1b、E2a、E4orf6或VA RNA。
29.根据权利要求28所述的质粒系统，其中所述Ad辅助质粒在5'到3'的方向上包括以下核酸序列：SEQ ID NO:18、17、16和20，其中各核酸序列能够被以下取代：对应功能片段或其衍生物，或与其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％一致性的序列。
30.根据权利要求28所述的质粒系统，其中所述Ad辅助质粒在5'到3'的方向上包括以下核酸序列：SEQ ID NO:21、16、39、40、22、23和20，其中各核酸序列能够被以下取代或编码以下：对应功能片段或其衍生物，或与其具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％一致性的序列。
31.根据权利要求1至28中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述Ad辅助质粒包括与图5的任一构建体呈相同次序的结构。
32.根据权利要求1至28中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述Ad辅助质粒包括与SEQ ID NO:14具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。
33.根据权利要求1至28中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述Ad辅助质粒包括与SEQ ID NO:15具有至少约40％、约50％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％一致性的核酸。
34.根据权利要求1至33中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述异源核酸序列为编码肽、多肽或蛋白质的所关注异源基因。
35.根据权利要求34所述的质粒系统，其中所述肽、所述多肽或所述蛋白质为酶、抗体、MHC分子、T细胞受体、B细胞受体、适配体、高亲和性多聚体、受体结合配位体、靶向肽、治疗剂或基因编辑分子。
36.根据权利要求1至35中任一权利要求所述的质粒系统，其中所述异源核酸为核酸序列，例如反义链、siRNA、shRNA、miRNA、EGS、gRNA、sgRNA、核糖核酸酶或适配体。
37.一种宿主细胞，其包括根据权利要求1至36中任一权利要求所述的质粒系统。
38.一种重组腺相关病毒载体rAAV，其通过根据权利要求37所述的宿主细胞产生。
39.一种允许通用载体滴定的DNA滴度标签，所述DNA滴度标签包括在含转基因质粒内的异源核酸序列的核酸序列上游或下游的长度为约60个核苷酸到约100个核苷酸的核酸标签序列，其中所述核酸标签序列能够用于至少两种不同的含转基因质粒中以允许在至少两种不同类型的AAV载体之间进行通用载体基因组滴定。
40.根据权利要求39所述的DNA滴度标签，其中所述核酸标签序列长度为约100个核苷酸。
41.根据权利要求39或权利要求40所述的DNA滴度标签，其中所述核酸标签序列在所述含转基因质粒的3'ITR序列上游，但不在所述含转基因质粒的表达盒内。
42.根据权利要求39或权利要求40所述的DNA滴度标签，其中所述核酸标签序列在所述含转基因质粒的5'ITR序列下游，但不在所述含转基因质粒的表达盒内。
43.根据权利要求39至42中任一权利要求所述的DNA滴度标签，其中所述DNA滴度标签包括SEQ ID NO:61-70的核酸序列中的任一个。
44.一种用于产生重组腺相关病毒载体rAAV的方法，其包括用根据权利要求1至36中任一权利要求所述的质粒系统转导细胞，以及分离所述rAAV。
45.一种重组腺相关病毒载体rAAV，其通过根据权利要求44所述的方法产生。
46.一种组合物，其包括根据权利要求1至36中任一权利要求所述的质粒系统。
47.一种药物组合物，其包括根据权利要求38或权利要求45所述的rAAV。
48.一种用于将核酸序列递送或转移到个体的细胞中的方法，其包括向个体投予根据权利要求38或权利要求45所述的rAAV，由此将所述核酸序列递送到所述细胞中。
49.根据权利要求48所述的方法，其中所述个体的细胞在培养物中或存在于所述个体中。
50.一种用于治疗或预防个体的疾病或病症的方法，其包括向有需要的个体投予根据权利要求38或权利要求45所述的rAAV。
51.一种转导宿主细胞的方法，其包括使所述宿主细胞与根据权利要求38或权利要求45所述的rAAV接触。
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