JPWO2018042944A1 - 濾過フィルター、濾過装置およびそれを用いた濾過方法 - Google Patents
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Abstract
所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる濾過フィルター、濾過装置およびそれを用いた濾過方法を提供する。本発明の濾過フィルター（１０）は、複数の第１貫通孔（１３）が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔（１３）のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔（１３）より小さい複数の第２貫通孔（１４）によって分割されている。このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
Description
本発明は、濾過フィルター、濾過装置およびそれを用いた濾過方法に関する。
細胞の培養において、培養液に浸した細胞の培養状態を確認するために、培養液に含まれる細胞をサンプリングするサンプリング装置が開発されている（例えば、特許文献１参照。）。
特許文献１のサンプリング装置では、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができないという課題を有する。
本発明は、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる濾過フィルター、濾過装置およびそれを用いた濾過方法を提供することを目的とする。
本発明の一態様の濾過フィルターは、
複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、
前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている。
複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、
前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている。
本発明の一態様の濾過装置は、
細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された濾過フィルターと、
を備え、
前記濾過フィルターには、複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている。
細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された濾過フィルターと、
を備え、
前記濾過フィルターには、複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている。
本発明の一態様の濾過方法は、
複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている濾過フィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させるステップ、
を含む。
複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている濾過フィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させるステップ、
を含む。
本発明によれば、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
（本発明に至った経緯）
近年、薬効調査などに用いる細胞凝集塊等を培養する場合、薬効データのばらつきを低減するために、所望のサイズの細胞凝集塊を培養することが求められている。このため、所望のサイズの細胞凝集塊の培養状態を把握するために、所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングすることが求められている。しかしながら、特許文献１の装置では、培養液導出配管を介して培養液を培養槽から外部へ導出することによってサンプリングを行っているため、サンプリングした細胞凝集塊には異なるサイズの細胞凝集塊が含まれる。
近年、薬効調査などに用いる細胞凝集塊等を培養する場合、薬効データのばらつきを低減するために、所望のサイズの細胞凝集塊を培養することが求められている。このため、所望のサイズの細胞凝集塊の培養状態を把握するために、所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングすることが求められている。しかしながら、特許文献１の装置では、培養液導出配管を介して培養液を培養槽から外部へ導出することによってサンプリングを行っているため、サンプリングした細胞凝集塊には異なるサイズの細胞凝集塊が含まれる。
ここで、培養液から所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングするには、少なくとも２回以上のフィルタリングが必要となる。具体的には、（ｉ）培養液から所望のサイズより大きい細胞凝集塊を除去するためのフィルタリングと、（ｉｉ）所望のサイズより小さい細胞凝集塊を除去するためのフィルタリングと、が行われる。このように、培養液から所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングするためには、複数の工程を行う必要があり、手間がかかる。
本発明者らは、培養液から所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングするため、培養液から所望のサイズより大きい細胞凝集塊を除去するフィルタリングを行う際に、所望のサイズの細胞凝集塊の一部を抽出することを検討した。その結果、本発明者らは、複数の第１貫通孔の少なくとも１つを分割し、第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔が形成された濾過フィルターを見出し、本発明に至った。
本発明の一態様の濾過フィルターにおいては、
複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、
前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている。
複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、
前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている。
このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
前記濾過フィルターにおいて、前記濾過フィルターの第１主面の表面積に対して前記第２貫通孔の占める面積の割合は、前記第１貫通孔の占める面積の割合よりも小さくてもよい。
このような構成により、所望のサイズより大きい細胞凝集塊を効率良く濾過しつつ、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
前記濾過フィルターにおいては、前記第１貫通孔が形成される領域において、前記第２貫通孔が形成される領域を分散させて設けてもよい。
このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を更に容易にサンプリングすることができる。
前記濾過フィルターにおいては、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としてもよい。
このような構成により、濾過フィルターの機械強度を向上させることができる。
前記濾過フィルターにおいて、前記第１貫通孔は、第１細胞凝集塊を捕捉し、
前記第２貫通孔は、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉してもよい。
前記第２貫通孔は、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉してもよい。
このような構成により、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を第１貫通孔で捕捉しつつ、所望のサイズの第２細胞凝集塊の一部を第２貫通孔で容易に捕捉することができる。
本発明の一態様の濾過装置は、
細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された濾過フィルターと、
を備え、
前記濾過フィルターは、複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている。
細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された濾過フィルターと、
を備え、
前記濾過フィルターは、複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている。
このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
前記濾過装置において、前記濾過フィルターの第１主面の表面積に対して前記第２貫通孔の占める面積の割合は、前記第１貫通孔の占める面積の割合よりも小さくてもよい。
このような構成により、所望のサイズより大きい細胞凝集塊を効率良く濾過しつつ、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
前記濾過装置において、前記濾過フィルターは、前記第１貫通孔が形成される領域において、前記第２貫通孔が形成される領域を分散させて設けてもよい。
このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を更に容易にサンプリングすることができる。
前記濾過装置において、前記濾過フィルターは、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としてもよい。
このような構成により、濾過フィルターの機械強度を向上させることができる。
前記濾過装置において、前記濾過フィルターの前記第１貫通孔は、第１細胞凝集塊を捕捉し、
前記第２貫通孔は、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉してもよい。
前記第２貫通孔は、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉してもよい。
このような構成により、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を第１貫通孔で捕捉しつつ、所望のサイズの第２細胞凝集塊を第２貫通孔で容易に捕捉することができる。
前記濾過装置において、前記濾過フィルターを複数備え、
複数の濾過フィルターは、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された第１濾過フィルターと、
前記第１濾過フィルターより前記容器部の排出口側に配置された第２濾過フィルターと、
を含み、
前記第２濾過フィルターでは、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１濾過フィルターの第２貫通孔より小さい複数の第３貫通孔によって分割されていてもよい。
複数の濾過フィルターは、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された第１濾過フィルターと、
前記第１濾過フィルターより前記容器部の排出口側に配置された第２濾過フィルターと、
を含み、
前記第２濾過フィルターでは、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１濾過フィルターの第２貫通孔より小さい複数の第３貫通孔によって分割されていてもよい。
このような構成により、異なるサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
本発明の一態様の濾過方法は、
複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている濾過フィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させるステップ、
を含む。
複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている濾過フィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させるステップ、
を含む。
このような構成により、所望のサイズより大きい細胞凝集塊を効率良く濾過しつつ、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
前記濾過方法において、前記濾過フィルターの第１主面の表面積に対して前記第２貫通孔の占める面積の割合は、前記第１貫通孔の占める面積の割合よりも小さくてもよい。
このような構成により、所望のサイズより大きい細胞凝集塊を効率良く濾過しつつ、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
前記濾過方法において、前記濾過フィルターは、前記第１貫通孔が形成される領域において、前記第２貫通孔が形成される領域を分散させて設けてもよい。
このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を更に容易にサンプリングすることができる。
前記濾過方法において、前記濾過フィルターは、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としてもよい。
このような構成により、濾過フィルターの機械強度を向上させることができる。
前記濾過方法において、前記細胞凝集塊を捕捉するステップは、前記第１貫通孔で第１細胞凝集塊を捕捉し、前記第２貫通孔で前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉することを含んでもよい。
このような構成により、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を第１貫通孔で捕捉しつつ、所望のサイズの第２細胞凝集塊を第２貫通孔で容易に捕捉することができる。
前記濾過方法において、前記濾過フィルターを準備するステップは、第１濾過フィルターと、前記第１濾過フィルターより下流側に配置される第２濾過フィルターと、を準備すること、を含み、
前記第２濾過フィルターでは、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１濾過フィルターの第２貫通孔より小さい複数の第３貫通孔によって分割されており、
前記細胞凝集塊を捕捉するステップは、前記第１濾過フィルターで前記第１細胞凝集塊と前記第２細胞凝集塊とを捕捉し、前記第２濾過フィルターで前記第１細胞凝集塊と前記第２細胞凝集塊より小さい第３細胞凝集塊とを捕捉すること、を含んでもよい。
前記第２濾過フィルターでは、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１濾過フィルターの第２貫通孔より小さい複数の第３貫通孔によって分割されており、
前記細胞凝集塊を捕捉するステップは、前記第１濾過フィルターで前記第１細胞凝集塊と前記第２細胞凝集塊とを捕捉し、前記第２濾過フィルターで前記第１細胞凝集塊と前記第２細胞凝集塊より小さい第３細胞凝集塊とを捕捉すること、を含んでもよい。
このような構成により、異なるサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
以下、本発明に係る実施の形態１について、添付の図面を参照しながら説明する。また、各図においては、説明を容易なものとするため、各要素を誇張して示している。
（実施の形態１）
［濾過フィルター］
図１は、本発明に係る実施の形態１の濾過フィルター１０の概略図である。図２は、図１の濾過フィルター１０のＺ１部分の拡大斜視図である。図１及び図２中のＸ、Ｙ、Ｚ方向は、それぞれ濾過フィルター１０の縦方向、横方向、厚み方向を示している。
［濾過フィルター］
図１は、本発明に係る実施の形態１の濾過フィルター１０の概略図である。図２は、図１の濾過フィルター１０のＺ１部分の拡大斜視図である。図１及び図２中のＸ、Ｙ、Ｚ方向は、それぞれ濾過フィルター１０の縦方向、横方向、厚み方向を示している。
図１に示すように、濾過フィルター１０は、フィルター部１１と、フィルター部１１の外周に設けられた枠部１２と、を備える。図２に示すように、濾過フィルター１０は、互いに対向する第１主面ＰＳ１と第２主面ＰＳ２とを有している。フィルター部１１には、複数の第１貫通孔１３が周期的に形成されている。また、フィルター部１１には、複数の第１貫通孔１３のうち少なくとも１つが、第１貫通孔１３より小さい複数の第２貫通孔１４によって分割されている。
濾過フィルター１０は、異なるサイズの細胞凝集塊を含む培養液（液体）をフィルター部１１に通過させることによって、所望のサイズより大きい細胞凝集塊を濾過する際に、所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングするものである。
本明細書において、「細胞凝集塊」とは、複数の細胞が接着することによって形成される細胞の集合塊を意味する。凝集塊を構成する細胞は、例えば、がん化細胞、幹細胞、人工多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）、ＥＳ細胞、間葉系幹細胞、再生医療用細胞などである。本明細書において、液体としては、例えば、アミノ酸、タンパク質、血清、などを含んだ培養液、リン酸緩衝生理食塩水、又は水である。細胞凝集塊を含む液体には、細胞凝集塊と液体の他に、樹脂製粒子などの非生物由来物質、骨片又は肉片などの組織の一部、死細胞などを含んでいてもよい。
実施の形態１では、濾過フィルター１０は、例えば、円形の金属メッシュである。濾過フィルター１０の寸法は、例えば、直径８ｍｍ、厚さ１５μｍである。また、濾過フィルター１０は、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする。濾過フィルター１０を構成する材料は、例えば、金、銀、銅、白金、ニッケル、パラジウム、これらの合金及びこれらの酸化物であってもよい。なお、濾過フィルター１０は、円形に限定されず、例えば、長方形、正方形等の矩形形状、又は楕円等の形状であってもよい。
＜フィルター部＞
図１及び図２に示すように、フィルター部１１は、複数の第１貫通孔１３と第２貫通孔１４とが形成されたフィルター基体部１５からなる板状構造体である。実施の形態１では、フィルター部１１の形状は、円形である。なお、フィルター部１１の形状は、円形に限定されず、例えば、長方形、正方形等の矩形形状、又は楕円等の形状であってもよい。
図１及び図２に示すように、フィルター部１１は、複数の第１貫通孔１３と第２貫通孔１４とが形成されたフィルター基体部１５からなる板状構造体である。実施の形態１では、フィルター部１１の形状は、円形である。なお、フィルター部１１の形状は、円形に限定されず、例えば、長方形、正方形等の矩形形状、又は楕円等の形状であってもよい。
図３は、フィルター部１１の一部を厚み方向（Ｚ方向）から見た概略図である。図３に示すように、複数の第１貫通孔１３は、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１及び第２主面ＰＳ２上に周期的に配置されている。具体的には、複数の第１貫通孔１３は、フィルター部１１においてマトリクス状に等間隔で設けられている。言い換えると、複数の第１貫通孔１３は、格子状に配列されている。
実施の形態１では、第１貫通孔１３は、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１側、即ちＺ方向から見て、正方形の形状を有する。なお、第１貫通孔１３は、Ｚ方向から見た形状が正方形に限定されず、例えば長方形を始めとする多角形、円形、又は楕円などの形状であってもよい。
実施の形態１では、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１に対して垂直な面に投影した第１貫通孔１３の形状（断面形状）は、長方形である。具体的には、第１貫通孔１３の断面形状は、濾過フィルター１０の半径方向の一辺の長さが濾過フィルター１０の厚み方向の一辺の長さより長い長方形である。なお、第１貫通孔１３の断面形状は、長方形に限定されず、例えば、平行四辺形又は台形等のテーパー形状であってもよいし、対称形状であってもよいし、非対称形状であってもよい。
実施の形態１では、複数の第１貫通孔１３は、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１側（Ｚ方向）から見て正方形の各辺と平行な２つの配列方向、即ち図３中のＸ方向とＹ方向に等しい間隔で設けられている。このように、複数の第１貫通孔１３を正方格子配列で設けることによって、開口率を高めることが可能であり、濾過フィルター１０に対する細胞凝集塊を含む培養液の通路抵抗を低減することができる。このような構成により、処理時間を短くし、細胞凝集塊へのストレスを低減することができる。また、複数の第１貫通孔１３の配列の対称性が向上するため、フィルターの観察が容易になる。
なお、複数の第１貫通孔１３の配列は、正方格子配列に限定されず、例えば、準周期配列、又は周期配列であってもよい。周期配列の例としては、方形配列であれば、２つの配列方向の間隔が等しくない長方形配列でもよく、三角格子配列又は正三角格子配列などであってもよい。なお、第１貫通孔１３は、フィルター部１１に複数設けられていればよく、配列は限定されない。
第１貫通孔１３の間隔は、培養液から分離する細胞凝集塊の種類（大きさ、形態、性質、弾性）又は量に応じて適宜設計されるものである。ここで、第１貫通孔１３の間隔とは、図３に示すように、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１側から見て、任意の第１貫通孔１３の中心と隣接する別の第１貫通孔１３の中心との距離ｂを意味する。実施の形態１では、第１貫通孔１３の中心とは、正方形である第１貫通孔１３の２つの対角線が交差する点である。周期配列の構造体の場合、第１貫通孔１３の間隔ｂは、例えば、第１貫通孔１３の一辺ｄの１倍より大きく１０倍以下であり、好ましくは貫通孔１３の一辺ｄの３倍以下である。あるいは、例えば、フィルター部１１における第１貫通孔１３の開口率は、１０％以上であり、好ましくは開口率は、２５％以上である。このような構成により、フィルター部１１に対する細胞凝集塊を含む培養液の抵抗を低減することができる。そのため、処理時間を短くすることができ、細胞凝集塊へのストレスを低減することができる。なお、第１貫通孔１３の開口率は、（第１貫通孔１３が占める面積）／（第１貫通孔１３及び第２貫通孔１４が空いていないと仮定したときの第１主面ＰＳ１の投影面積）で計算される。
第１貫通孔１３は、所望のサイズより大きい細胞凝集塊（第１細胞凝集塊）を捕捉できる寸法に設計されている。即ち、第１貫通孔１３は、所望のサイズ以下の細胞凝集塊を通過させるが、所望のサイズより大きい細胞凝集塊を捕捉するように設計されている。また。複数の第１貫通孔１３の寸法は、略同一に設計されている。ここで、「略同一に設計されている」とは、寸法誤差が１０％以下の範囲内で設計されていることを意味する。
第１貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口と第２主面ＰＳ２側の開口とが連続した壁面を通じて連通している。具体的には、第１貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口が第２主面ＰＳ２側の開口に投影可能に設けられている。即ち、フィルター部１１を第１主面ＰＳ１側から見た場合に、第１貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口が第２主面ＰＳ２側の開口と重なるように設けられている。実施の形態１において、第１貫通孔１３は、その内壁が第１主面ＰＳ１及び第２主面ＰＳ２に対して垂直となるように設けられている。
第２貫通孔１４は、複数の第１貫通孔１３のうち少なくとも１つを分割することによって形成されている。第２貫通孔１４は、第１貫通孔１３よりも小さい貫通孔である。実施の形態１では、複数の第１貫通孔１３のうち１つを分割することによって、４つの第２貫通孔１４が形成されている。また、第２貫通孔１４は、フィルター部１１のうち枠部１２側に近い位置に形成されている。
第２貫通孔１４は、所望のサイズの細胞凝集塊（第２細胞凝集塊）を捕捉できる寸法に設計されている。即ち、第２貫通孔１４は、第１細胞凝集塊よりも小さい第２細胞凝集塊を捕捉するように設計されている。このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊の一部を第２貫通孔１４で捕捉することができる。
実施の形態１では、第２貫通孔１４は、第１貫通孔１３と寸法が異なる点を除いて、同様の構成である。即ち、複数の第２貫通孔１４は、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１側、即ちＺ方向から見て、正方形の形状を有し、格子状に配列されている。なお、複数の第２貫通孔１４は、第１貫通孔１３の構成と異なっていてもよい。複数の第２貫通孔１４の配列は、正方格子配列に限定されず、例えば、準周期配列、又は周期配列であってもよい。第２貫通孔１４の形状は、Ｚ方向から見た形状が正方形に限定されず、例えば長方形を始めとする多角形、円形、又は楕円などの形状であってもよい。
濾過フィルター１０の第１主面ＰＳ１の表面積に対する第２貫通孔１４の占める面積の割合は、第１貫通孔１３の占める面積の割合より小さく設計されている。言い換えると、第２貫通孔１４の開口率は、第１貫通孔１３の開口率よりも小さく設計されている。なお、第２貫通孔１４の開口率は、（第２貫通孔１４が占める面積）／（第１貫通孔１３及び第２貫通孔１４が空いていないと仮定したときの第１主面ＰＳ１の投影面積）で計算される。例えば、第２貫通孔１４の開口率は、１０％より小さく、好ましくは１％以上５％以下である。
フィルター部１１の厚みは、第１貫通孔１３の大きさ（一辺ｄ）の０．０１倍より大きく１０倍以下が好ましい。より好ましくは、フィルター部１１の厚みは、第１貫通孔１３の大きさ（一辺ｄ）の０．０２倍より大きく５倍以下である。このような構成により、濾過フィルター１０の機械強度を確保した上で、細胞凝集塊を含む培養液の通路抵抗を低減することができ、処理時間が短くすることができる。その結果、細胞凝集塊へのストレスを低減することができる。
フィルター部１１において、細胞凝集塊を含む培養液が接触する第１主面ＰＳ１は、平滑に形成されていてもよい。具体的には、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１は、凹凸がなく均一な平面で形成されていてもよい。言い換えると、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１上の複数の第１貫通孔１３の開口及び複数の第２貫通孔１４の開口が同一平面上に形成されている。また、フィルター部１１のうち第１貫通孔１３及び第２貫通孔１４が形成されていない部分、即ちフィルター基体部１５は、繋がっており、一体に形成されている。このような構成により、第１貫通孔１３で捕捉した第１細胞凝集塊、及び第２貫通孔１４で捕捉した第２細胞凝集塊を容易に回収することができる。また、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１が平滑に構成されていることで、顕微鏡での観察が容易になる。例えば、細胞凝集塊を捕捉した濾過フィルター１０をそのまま顕微鏡に持って行き、第１主面ＰＳ１上に捕捉されている細胞凝集塊を観察することができる。このとき、第１主面ＰＳ１上には凹凸がなく均一平面で形成されているため、高倍率にしてもピント合わせなどの作業を容易に行うことができる。
＜枠部＞
枠部１２は、フィルター部１１の外周に設けられており、フィルター部１１に比べて単位面積当たりの第１貫通孔１３の数が少ない部分である。枠部１２における第１貫通孔１３の数は、フィルター部１１における第１貫通孔１３の数の１％以下である。枠部１２の厚みは、フィルター部１１の厚みよりも厚くてもよい。このような構成により、濾過フィルター１０の機械強度を高めることができる。
枠部１２は、フィルター部１１の外周に設けられており、フィルター部１１に比べて単位面積当たりの第１貫通孔１３の数が少ない部分である。枠部１２における第１貫通孔１３の数は、フィルター部１１における第１貫通孔１３の数の１％以下である。枠部１２の厚みは、フィルター部１１の厚みよりも厚くてもよい。このような構成により、濾過フィルター１０の機械強度を高めることができる。
濾過フィルター１０を装置に接続して使用する場合、枠部１２は、濾過フィルター１０と装置とを接続する接続部（後述する図４の符号「１９」）として機能してもよい。また、枠部１２には、濾過フィルター１０の情報（第１貫通孔１３及び第２貫通孔１４の寸法など）を表示してもよい。
図１に示すように、枠部１２は、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１側から見て、リング状に形成されている。濾過フィルター１０を第１主面ＰＳ１側から見て、枠部１２の中心は、フィルター部１１の中心と一致する。即ち、枠部１２は、フィルター部１１と同心円上に形成されている。
［濾過装置］
濾過装置５０について図４を用いて説明する。
濾過装置５０について図４を用いて説明する。
図４は、本発明に係る実施の形態１の濾過装置５０の概略図である。図４に示すように、濾過装置５０は、容器部１６と、容器部１６の内部に配置される濾過フィルター１０と、を備える。実施の形態１では、濾過フィルター１０は、接続部１９を介して容器部１６と接続されている。
＜容器部＞
容器部１６は、細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口１７と、液体を排出する排出口１８とを有する筒体である。実施の形態１では、容器部１６は、円筒状の筒体である。なお、容器部１６は、内部に液体が流れる流路を備えていればよく、円筒状に限定されない。容器部１６は、例えば、流入口１７側から見て、楕円、正方形、長方形などの形状であってもよい。
容器部１６は、細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口１７と、液体を排出する排出口１８とを有する筒体である。実施の形態１では、容器部１６は、円筒状の筒体である。なお、容器部１６は、内部に液体が流れる流路を備えていればよく、円筒状に限定されない。容器部１６は、例えば、流入口１７側から見て、楕円、正方形、長方形などの形状であってもよい。
容器部１６は、例えば、ガンマ滅菌可能な材料で構成することができる。容器部１６は、例えば、ポリエチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリウレタン、ポリスチレン、シリコンゴム、ＡＢＳ樹脂、ポリアミド、ポリアミドイミド、ポリスルフォン、天然ゴム、ラテックス、ウレタンゴム、シリコンゴム、エチレン酢酸ビニル、ポリエステル類、エポキシ類、フェノール類、シリカ、アルミナ、金、白金、ニッケル、ステンレス、チタン、などを含む材料で形成されていてもよい。このような材料で容器部１６を構成することにより、細胞凝集塊へのストレスを低減することができる。
実施の形態１では、容器部１６は、２つの部材、即ち、第１部材１６ａと第２部材１６ｂとで構成されている。例えば、第１部材１６ａと第２部材１６ｂとは、それぞれ端部に形成されたネジ部で螺合することによって接続される。第１部材１６ａ及び第２部材１６ｂの内壁には、濾過フィルター１０の枠部１２を保持するための第１突起部１６ａａ及び第２突起部１６ｂａが、それぞれ形成されている。第１部材１６ａと第２部材１６ｂとが接続されると、濾過フィルター１０の枠部１２は、接続部１９を介して、第１突起部１６ａａと第２突起部１６ｂａとの間で保持される。このような構成により、濾過フィルター１０は、容器部１６の流入口１７と排出口１８との間に配置される。これにより、容器部１６の流入口１７から細胞凝集塊を含む液体を導入すると、液体は容器部１６内部に配置された濾過フィルター１０を通過した後、排出口１８から排出される。
実施の形態１では、濾過装置５０は、濾過フィルター１０の第１主面ＰＳ１に対して鉛直下方向にかかる重力、即ち、液体の自重によって、細胞凝集塊を含む液体を濾過フィルター１０に通過させている。なお、濾過装置５０は、濾過フィルター１０に細胞凝集塊を含む液体を通過させるために、濾過フィルター１０の第１主面ＰＳ１に液体を接触させた状態で、容器部１６の流入口１７から排出口１８への方向６０に向かって液体に圧力を加える押圧部を備えてもよい。あるいは、濾過装置５０は、濾過フィルター１０の第１主面ＰＳ１に液体を接触させた状態で、第２主面ＰＳ２側から方向６０に液体を吸引する吸引部を備えてもよい。濾過装置５０は、押圧部又は吸引部を備えることによって、濾過時間を短縮することができる。なお、圧力を加える場合又は吸引する場合は、細胞凝集塊が変形しない程度の力とすることが好ましい。
濾過装置５０では、細胞凝集塊を含む液体を濾過フィルター１０で濾過した後、第１部材１６ａを第２部材１６ｂから取り外すことができる。そして、細胞凝集塊を捕捉した濾過フィルター１０を第２部材１６ｂに取り付けたまま、顕微鏡にセットすることができる。このため、濾過フィルター１０で捕捉された細胞凝集塊を容易に観察することができる。その結果、濾過装置５０では、第２貫通孔１４で捕捉した所望のサイズの細胞凝集塊の培養状態を容易に確認することができる。
［濾過方法］
濾過フィルター１０を用いた濾過方法について説明する。
濾過フィルター１０を用いた濾過方法について説明する。
まず、濾過フィルター１０を準備する。この工程では、例えば、濾過フィルター１０が、容器部１６に取り付けられる。具体的には、濾過フィルター１０の枠部１２に接続部１９を取り付けた後、濾過フィルター１０を第２部材１６ｂの第２突起部１６ｂａ上に配置する。次に、第１部材１６ａの第１突起部１６ａａが接続部１９に接触するように、第１部材１６ａを第２部材１６ｂに接続する。実施の形態１では、第１部材１６ａは、第２部材１６ｂとネジ部で螺合されることによって接続される。これにより、第１突起部１６ａａと第２突起部１６ｂａとによって、濾過フィルター１０の枠部１２に取り付けられた接続部１９が挟持される。
次に、細胞凝集塊を含む液体を濾過フィルター１０に通過させる。具体的には、容器部１６の流入口１７から排出口１８に向かって容器部１６の内部に液体を流すことによって、フィルター部１１に液体を通過させる。これにより、濾過フィルター１０は、細胞凝集塊を捕捉する。
細胞凝集塊を含む液体をフィルター１０に通過させる方法としては、例えば、フィルター部１１の第１主面ＰＳ１に対して略鉛直上方から重力を利用して液体を通過させる方法がある。この他に、濾過フィルター１０の第１主面ＰＳ１に液体を接触させた状態で、容器部１６の流入口１７から排出口１８への方向６０に向かって液体に圧力を加える方法、又はフィルター部１１の第１主面ＰＳ１に液体を接触させた状態で、第２主面ＰＳ２から方向６０に液体を吸引する方法などがある。なお、細胞凝集塊を含む液体をフィルター部１１に通過させる工程においては、細胞凝集塊にストレスをなるべく与えないことが好ましい。例えば、圧力を加える場合、細胞凝集塊が変形しない程度の圧力とすることが好ましい。より好ましくは、圧力を加えずに、液体の自重により、液体をフィルター部１１に通過させることである。あるいは、フィルター部１１の開口率を高めることによって処理時間を短縮し、細胞凝集塊にストレスがかかっている時間を少なくすることが好ましい。
実施の形態１では、フィルター部１１の第１貫通孔１３は、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を捕捉できる寸法で設計されている。また、複数の第２貫通孔１４は、複数の第１貫通孔１３のうち１つを分割し、第１貫通孔１３より小さい寸法で設計されている。具体的には、第２貫通孔１４は、第１細胞凝集塊より小さいサイズの第２細胞凝集塊、即ち、所望のサイズの細胞凝集塊を捕捉できる寸法で設計されている。
したがって、細胞凝集塊を含む液体を、フィルター部１１に通過させることによって、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を第１貫通孔１３で捕捉しつつ、所望のサイズの第２細胞凝集塊の一部を第２貫通孔１４で抽出することができる。即ち、濾過方法によれば、１回のフィルタリングで、第１細胞凝集塊を除去しつつ、所望のサイズの第２細胞凝集塊をサンプリングすることができる。
［効果］
実施の形態１に係る濾過フィルター１０によれば、以下の効果を奏することができる。
実施の形態１に係る濾過フィルター１０によれば、以下の効果を奏することができる。
濾過フィルター１０は、複数の第１貫通孔１３が周期的に形成されており、複数の第１貫通孔１３のうち少なくとも１つを分割し、第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔１４を形成している。このような構成により、第１貫通孔１３で所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊をフィルタリングする際に、第２貫通孔１４で所望のサイズの第２細胞凝集塊の一部を抽出することができる。
このように、濾過フィルター１０によれば、複数回のフィルタリングを行わなくても、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
濾過フィルター１０において、第１主面ＰＳ１の表面積に対して第２貫通孔１４の占める面積の割合は、第１貫通孔１３の占める面積の割合よりも小さく設計されている。このような構成により、所望のサイズより大きい細胞凝集塊を第１貫通孔１３で効率良く濾過しつつ、所望のサイズの細胞凝集塊を第２貫通孔１４で容易にサンプリングすることができる。また、第１貫通孔１３は、所望のサイズ以下の細胞凝集塊が通過できるため、目詰まりを抑制し、濾過時にフィルター部１１にかかる圧力を低減することができる。
濾過フィルター１０は、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としている。このような構成により、メンブレンなどの樹脂フィルターに比べて、濾過フィルター１０の機械強度を向上させることができる。濾過フィルター１０によれば、例えば、細胞凝集塊を含む液体がフィルター部１１を通過する際において、第１貫通孔１３及び第２貫通孔１４が変形しにくいため、所望のサイズの細胞凝集塊がフィルター部１１を通過してしまうのを抑制することができる。
濾過装置５０及び濾過方法においても、上述した濾過フィルター１０の効果と同様の効果を奏することができる。特に、濾過装置５０を用いることで、濾過フィルター１０の取り扱い性を向上させることができる。例えば、濾過フィルター１０を容器部１６の第２部材１６ｂに取り付けたままで、濾過フィルター１０の第１主面ＰＳ１上に捕捉された細胞凝集塊を顕微鏡で容易に観察することができる。
なお、実施の形態１では、濾過フィルター１０は、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としている構成について説明したが、これに限定されない。濾過フィルター１０は、多孔膜であればよく、例えば、ナイロン、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリエステル、ポリエーテルエーテルケトン、ポリエチレンテレフタレート、ポリ塩化ビニリデン等であってもよい。
実施の形態１では、第１貫通孔１３は第１細胞凝集塊を捕捉し、第２貫通孔１４は第２細胞凝集塊を捕捉する例について説明したが、これらに限定されない。第１貫通孔１３及び第２貫通孔１４は、細胞凝集塊以外のものを捕捉してもよい。例えば、第１貫通孔１３は、単離細胞を捕捉してもよい。また、第２貫通孔１４は、細胞凝集塊以外に第１貫通孔１３を通過したものを特定するために使用されてもよい。即ち、第２貫通孔１４は、第１貫通孔１３を通過した液体中に存在する物体を捕捉することによって、液体中に含まれる物体の存在情報を得るために使用されてもよい。第２貫通孔１４は、例えば、単離細胞、死細胞、樹脂ビーズなどの存在情報を得るために使用されてもよい。
実施の形態１では、第２貫通孔１４は、フィルター部１１において枠部１２側に形成されている例（図１参照）について説明したが、これに限定されない。第２貫通孔１４は、細胞凝集塊を含む液体が通過するのであれば、フィルター部１１のいずれの位置に形成されていてもよい。例えば、フィルター部１１の中央に形成されてもよいし、フィルター部１１の端に形成されてもよい。
実施の形態１では、複数の第２貫通孔１４は、複数の第１貫通孔１３のうち１つを分割することによって形成される４つの貫通孔の例について説明したが、これに限定されない。第２貫通孔１４は、第１貫通孔１３より小さいサイズの貫通孔が少なくとも１つ以上形成されていればよい。また、複数の第２貫通孔１４は、複数の第１貫通孔１３のうち少なくとも１つを分割することによって形成されていればよい。
図５は、本発明に係る実施の形態１の変形例の濾過フィルター１０Ａである。図５に示すように、濾過フィルター１０Ａでは、複数の第１貫通孔１３のうち２つを分割することによって、第１貫通孔１３より小さい複数の第２貫通孔１４を形成してもよい。このように、濾過フィルター１０Ａの第１主面ＰＳ１の表面積に対して、第２貫通孔１４の占める面積の割合を増やすことによって、所望のサイズの細胞凝集塊のサンプリング数を増やすことができる。なお、図５では、隣接する２つの第１貫通孔１３を分割して、第２貫通孔１４を形成しているが、本発明の濾過フィルターは、これに限定されない。例えば、互いに離れた位置にある複数の第１貫通孔１３を分割して、複数の領域に第２貫通孔１４を形成してもよい。
図６は、本発明に係る実施の形態１の別の変形例の濾過フィルター１０Ｂである。図６に示すように、濾過フィルター１０Ｂでは、第１貫通孔１３が形成されている領域Ａ１において、第２貫通孔１４が形成される領域Ａ２を分散させて設けている。なお、本明細書において、第１貫通孔１３が形成されている領域Ａ１とは、濾過フィルター１０Ｂを第１主面ＰＳ１側から見て、フィルター部１１が形成されている領域を意味する。第２貫通孔１４が形成されている領域Ａ２とは、濾過フィルター１０Ｂを第１主面ＰＳ１側から見て、フィルター部１１において第２貫通孔１４が形成されている領域を意味する。
図６に示すように、濾過フィルター１０Ｂでは、第１貫通孔１３が形成されている領域Ａ１において、第２貫通孔１４が形成される領域Ａ２が所定の間隔で複数設けられている。このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊をより容易にサンプリングすることができる。また、細胞凝集塊を含む液体が濾過フィルター１０Ｂのフィルター部１１のいずれの領域を通過しても、所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングすることができる。なお、図６に示す濾過フィルター１０Ｂでは、第１貫通孔１３が形成されている領域Ａ１において、第２貫通孔１４が形成される領域Ａ２を所定の間隔で複数設ける構成について説明したが、これに限定されない。第２貫通孔１４が形成される領域Ａ２は、第１貫通孔１３が形成されている領域Ａ１において、分散して設けられていればよい。例えば、第２貫通孔１４が形成される領域Ａ２は、第１貫通孔１３が形成されている領域Ａ１において、ランダムに設けられていてもよい。また、第２貫通孔１４が形成される領域Ａ２は、第１貫通孔１３が形成されている領域Ａ１の一部において、分散して設けられていてもよい。このように、第２貫通孔１４が形成される領域Ａ２の数及び／又は位置は、適宜変更してもよい。
図７は、本発明に係る実施の形態１の別の変形例の濾過フィルター１０Ｃである。図７に示すように、濾過フィルター１０Ｃでは、更に、第２貫通孔１４ａより小さい複数の第３貫通孔１４ｂを設けてもよい。複数の第３貫通孔１４ｂは、複数の第１貫通孔１３のうち少なくとも１つを分割することによって形成されている。第３貫通孔１４ｂは、第２貫通孔１４ａで捕捉する第２細胞凝集塊よりも小さい第３細胞凝集塊を捕捉する。これにより、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊をフィルタリングする際に、２つの異なる所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。言い換えると、１回のフィルタリングで、異なるサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
なお、図７では、第１貫通孔１３を分割して、第１貫通孔１３より小さい２つのサイズの貫通孔１４ａ、１４ｂを形成する例について説明したが、濾過フィルター１０Ｃは、これに限定されない。濾過フィルター１０Ｃでは、サンプリングしたい細胞凝集塊のサイズの数に応じて、異なるサイズの貫通孔の数を決定してもよい。
また、図７では、１つの第１貫通孔１３から第２貫通孔１４ａ又は第３貫通孔１４ｂのいずれか一方のみが形成されている例について示されているが、これに限定されない。濾過フィルター１０Ｃは、例えば、１つの第１貫通孔１３を分割して、第２貫通孔１４ａと第３貫通孔１４ｂとの両方のサイズの貫通孔を形成してもよい。即ち、濾過フィルター１０Ｃは、１つの第１貫通孔１３を分割して、第１貫通孔１３より小さい異なるサイズの複数の貫通孔を形成してもよい。
実施の形態１では、濾過装置５０の容器部１６は、２つの部材、即ち第１部材１６ａと第２部材１６ｂとで構成される例について説明したが、これに限定されない。また、実施の形態１では、第１部材１６ａと第２部材１６ｂとがネジ部で螺合されることによって接続される例について説明したが、これに限定されない。例えば、容器部１６において、第１部材１６ａと第２部材１６ｂとが一体形成されていてもよい。
実施の形態１では、濾過装置５０において、濾過フィルター１０は、容器部１６の流入口１７と排出口１８との間に配置される例について説明したが、これに限定されない。濾過フィルター１０は、細胞凝集塊を含む液体が通過できる位置に配置されていればよい。例えば、濾過フィルター１０は、容器部１６の流入口１７に配置されていてもよいし、容器部１６の排出口１８に配置されていてもよい。
実施の形態１では、濾過装置５０は、濾過フィルター１０を１つ備える例について説明したが、これに限定されない。濾過装置５０は、複数の濾過フィルター１０を備えてもよい。図８は、本発明に係る実施の形態１の変形例の濾過装置５０Ａである。図８に示すように、濾過装置５０Ａでは、容器部１６の流入口１７と排出口１８との間に第１濾過フィルター１０Ｄを配置し、第１濾過フィルター１０Ｄよりも容器部１６の排出口１８側に第２濾過フィルター１０Ｅを配置してもよい。第１濾過フィルター１０Ｄと第２濾過フィルター１０Ｅとは、同じフィルターであってもよいし、異なるフィルターであってもよい。
第１濾過フィルター１０Ｄと第２濾過フィルター１０Ｅとが同じフィルターである場合、所望のサイズの細胞凝集塊のサンプリング数を増やすことができる。
第１濾過フィルター１０Ｄと第２濾過フィルター１０Ｅとが異なるフィルターである場合、それぞれのフィルターにおいて異なるサイズの細胞凝集塊をサンプリングすることができる。濾過装置５０Ａでは、例えば、第１濾過フィルター１０Ｄには第１貫通孔１３よりも小さい第２貫通孔１４ａを設け、第２濾過フィルター１０Ｅには第２貫通孔１４ａより小さい第３貫通孔１４ｂを設けていてもよい。このような構成により、第１貫通孔１３で所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を除去しつつ、第１濾過フィルター１０Ｄの第２貫通孔１４ａで所望のサイズの第２細胞凝集塊の一部を抽出し、第２濾過フィルター１０Ｅの第３貫通孔１４ｂで第２細胞凝集塊より小さいサイズの第３細胞凝集塊の一部を抽出することができる。
濾過装置５０Ａの容器部１６は、３つの部材、即ち第１部材１６ａと第２部材１６ｂと第３部材１６ｃとで構成されている。具体的には、図８に示すように、第１部材１６ａと第２部材１６ｂとの間に第３部材１６ｃが設けられている。第３部材１６ｃの内部には、濾過フィルター１０Ｄ及び１０Ｅを保持するための第３突起部１６ｃａと第４突起部１６ｃｂとが形成されている。これにより、第１濾過フィルター１０Ｄの枠部１２は、第１部材１６ａの第１突起部１６ａａと第３部材１６ｃの第３突起部１６ｃａとによって挟持される。また、第２濾過フィルター１０Ｅの枠部１２は、第２部材１６ｂの第２突起部１２ｂａと第３部材１６ｃの第４突起部１６ｃｂとによって挟持される。
濾過方法においても、上述したように複数の濾過フィルター１０に、細胞凝集塊を含む液体を通過させることによって、サンプリング数を増やしたり、異なるサイズの細胞凝集塊をサンプリングしてもよい。
本発明は、添付図面を参照しながら好ましい実施形態に関連して充分に記載されているが、この技術の熟練した人々にとっては種々の変形や修正は明白である。そのような変形や修正は、添付した特許請求の範囲による本発明の範囲から外れない限りにおいて、その中に含まれると理解されるべきである。
本発明の濾過フィルターは、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。このため、培養液から所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングする用途に有用である。
１０、１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃ、１０Ｄ，１０Ｅ 濾過フィルター
１１ フィルター部
１２ 枠部
１３ 第１貫通孔
１４、１４ａ 第２貫通孔
１４ｂ 第３貫通孔
１５ フィルター基体部
１６ 容器部
１６ａ 第１部材
１６ａａ 第１突起部
１６ｂ 第２部材
１６ｂａ 第２突起部
１６ｃ 第３部材
１６ｃａ 第３突起部
１６ｃｂ 第４突起部
１７ 流入口
１８ 排出口
１９ 接続部
５０、５０Ａ 濾過装置
６０ 方向
ＰＳ１ 第１主面
ＰＳ２ 第２主面
１１ フィルター部
１２ 枠部
１３ 第１貫通孔
１４、１４ａ 第２貫通孔
１４ｂ 第３貫通孔
１５ フィルター基体部
１６ 容器部
１６ａ 第１部材
１６ａａ 第１突起部
１６ｂ 第２部材
１６ｂａ 第２突起部
１６ｃ 第３部材
１６ｃａ 第３突起部
１６ｃｂ 第４突起部
１７ 流入口
１８ 排出口
１９ 接続部
５０、５０Ａ 濾過装置
６０ 方向
ＰＳ１ 第１主面
ＰＳ２ 第２主面
Claims (17)
- 複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、
前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている、濾過フィルター。 - 前記濾過フィルターの第１主面の表面積に対して前記第２貫通孔の占める面積の割合は、前記第１貫通孔の占める面積の割合よりも小さい、請求項１に記載の濾過フィルター。
- 前記第１貫通孔が形成される領域において、前記第２貫通孔が形成される領域を分散させて設けた、請求項１又は２に記載の濾過フィルター。
- 金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の濾過フィルター。
- 前記第１貫通孔は、第１細胞凝集塊を捕捉し、
前記第２貫通孔は、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の濾過フィルター。 - 細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された濾過フィルターと、
を備え、
前記濾過フィルターには、複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている、濾過装置。 - 前記濾過フィルターの第１主面の表面積に対して前記第２貫通孔の占める面積の割合は、前記第１貫通孔の占める面積の割合よりも小さい、請求項６に記載の濾過装置。
- 前記濾過フィルターは、前記第１貫通孔が形成される領域において、前記第２貫通孔が形成される領域を分散させて設けた、請求項６又は７に記載の濾過装置。
- 前記濾過フィルターは、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする、請求項６〜８のいずれか一項に記載の濾過装置。
- 前記濾過フィルターの前記第１貫通孔は、第１細胞凝集塊を捕捉し、
前記第２貫通孔は、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉する、請求項６〜９のいずれか一項に記載の濾過装置。 - 前記濾過フィルターを複数備え、
複数の濾過フィルターは、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された第１濾過フィルターと、
前記第１濾過フィルターより前記容器部の排出口側に配置された第２濾過フィルターと、
を含み、
前記第２濾過フィルターでは、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１濾過フィルターの第２貫通孔より小さい複数の第３貫通孔によって分割された、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の濾過装置。 - 複数の第１貫通孔が周期的に形成されており、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１貫通孔より小さい複数の第２貫通孔によって分割されている濾過フィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させるステップ、
を含む、濾過方法。 - 前記濾過フィルターの第１主面の表面積に対して前記第２貫通孔の占める面積の割合は、前記第１貫通孔の占める面積の割合よりも小さい、請求項１２に記載の濾過方法。
- 前記濾過フィルターは、前記第１貫通孔が形成される領域において、前記第２貫通孔が形成される領域を分散させて設けた、請求項１２又は１３に記載の濾過方法。
- 前記濾過フィルターは、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の濾過方法。
- 前記細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させるステップは、前記第１貫通孔で第１細胞凝集塊を捕捉し、前記第２貫通孔で前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉することを含む、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の濾過方法。
- 前記濾過フィルターを準備するステップは、第１濾過フィルターと、前記第１濾過フィルターより下流側に配置される第２濾過フィルターと、を準備すること、を含み、
前記第２濾過フィルターでは、前記複数の第１貫通孔のうち少なくとも１つが、前記第１濾過フィルターの第２貫通孔より小さい複数の第３貫通孔によって分割されており、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させるステップは、前記第１濾過フィルターで前記第１細胞凝集塊と前記第２細胞凝集塊とを捕捉し、前記第２濾過フィルターで前記第１細胞凝集塊と前記第２細胞凝集塊より小さい第３細胞凝集塊とを捕捉すること、を含む、請求項１６に記載の濾過方法。
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