JP6575695B2

JP6575695B2 - 細胞濾過フィルタ

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Publication number: JP6575695B2
Application number: JP2018557681A
Authority: JP
Inventors: 萬壽　優; 萬壽　　優; 順子渡邉; 近藤　孝志; 孝志近藤
Original assignee: Murata Manufacturing Co Ltd
Current assignee: Murata Manufacturing Co Ltd
Priority date: 2016-12-20
Filing date: 2017-12-11
Publication date: 2019-09-18
Anticipated expiration: 2037-12-11
Also published as: US20190185804A1; CN109563460B; JPWO2018116883A1; CN109563460A; WO2018116883A1; US10704019B2

Description

本発明は、細胞を濾過する細胞濾過フィルタに関する。

細胞（細胞凝集塊（スフェロイド）を含む）を用いた薬効調査等において、所望のサイズの細胞が求められている。

例えば、特許文献１には、フィルタを用いて細胞を濾過して分級することが開示されている。

特開２０１５−６２４００号公報

近年、フィルタを用いた細胞の濾過において、所望のサイズの細胞をより精度よく得ることが望まれている。後述するように、本願の発明者らは、フィルタを用いた細胞の濾過において、フィルタの貫通孔に対して細胞とともに液体が通過する際に、一度、フィルタにて捕捉された細胞が、液体の流れにより貫通孔へ移動するとともに変形されて、貫通孔よりも大きなサイズの細胞が通過する、という新たな課題を見出した。

本発明は、所望のサイズの細胞を得るための細胞濾過の精度を向上できる細胞濾過フィルタを提供することを目的とする。特に、本発明は、フィルタを用いた細胞の濾過において、フィルタの貫通孔に対して細胞とともに液体が通過する際に、一度、フィルタにて捕捉された細胞が、液体の流れにより貫通孔へ移動するとともに変形されて、貫通孔よりも大きなサイズの細胞が通過する、ことを抑制する細胞濾過フィルタを提供することを目的とする。

本発明の一態様の細胞濾過フィルタは、細胞を濾過する細胞濾過フィルタであって、前記細胞が捕捉される第１主面と、前記第１主面に対向する第２主面とを有するとともに、複数の第１貫通孔を画定する複数の孔縁部と、前記孔縁部の周囲に配置されてそれぞれの前記孔縁部を支持する支持領域と、を有する金属製の膜部を備え、前記膜部の前記支持領域において、前記第１貫通孔よりも小さな開口を有する複数の第２貫通孔が前記それぞれの孔縁部を囲むように配置され、前記膜部の第１主面において、前記支持領域に対して前記それぞれの孔縁部は隆起している、ものである。

本発明によれば、所望のサイズの細胞を得るための細胞濾過の精度を向上できる細胞濾過フィルタを提供することができる。

本発明の一の実施の形態にかかる細胞濾過フィルタの部分拡大平面図図１の細胞濾過フィルタにおけるＡ−Ａ線断面図実施の形態の細胞濾過フィルタの製造方法を示す図実施の形態の細胞濾過フィルタにおいて細胞の濾過処理の状態を示す図本発明の比較例にかかる細胞濾過フィルタの部分拡大平面図図５の細胞濾過フィルタの断面図

（本発明に至った経緯および本発明の基礎となった知見）
細胞凝集塊は、例えば、がんの薬効を調査する場合に、がん細胞のモデルとして用いられている。がん細胞は、進行度合いによって細胞の大きさが異なる。また、がん細胞の大きさが異なれば、効果のある薬も異なる。例えば、初期がんや小さながん組織に対して効果のある薬は、進行がんや大きながん組織に対しての効果が小さい場合がある。このため、細胞凝集塊を用いた薬効調査において、異なる寸法の細胞凝集塊を用いて薬効調査を行うと、薬効データにばらつきが生じる。したがって、薬効データのばらつきを抑えるため、均一な寸法の細胞凝集塊を得ることが求められている。

また、細胞凝集塊は再生医療用の組織として用いられている。この場合、所望の大きさの組織が必要となるが、細胞凝集塊の作製の工夫によって所望の大きさの組織を作製することは難しく、様々な大きさの細胞凝集塊を作製しておいてから所望の大きさの組織を選択した方が効率がよい。したがって、より精度良く所望の組織を選択することが求められている。

また、細胞凝集塊に限られず、薬効調査等の特定の使用目的のために、フィルタ濾過により所望のサイズの細胞に分級する際に、分級の精度を向上させることが求められている。

本願の発明者らは、フィルタによる細胞の濾過を鋭意研究したところ、所望サイズの細胞を得ることを阻害する要因を、新たな課題（新たな知見）として見出した。この新たな課題について以下に説明する。

様々な大きさの細胞凝集塊を作製した後、フィルタの濾過により所望サイズを越えるサイズの細胞凝集塊をフィルタで捕捉し、所望サイズ以下の細胞凝集塊を、フィルタを通過させて回収する場合を考える。このような場合には、細胞凝集塊の通過・捕捉を考慮した同じ大きさの複数の貫通孔（メッシュ孔）が設けられたフィルタを利用した濾過が行われる。ここで、本願の発明者らが考える本発明の比較例にかかるフィルタを用いた細胞濾過について、図５および図６の模式図を用いて説明する。図５は、本発明の比較例にかかる細胞濾過フィルタ５１（以降、フィルタ５１とする。）の部分拡大平面図であり、図６（Ａ）から（Ｃ）は、細胞濾過の状態を示すフィルタ５１の模式断面図である。

図５に示すように、比較例にかかるフィルタ５１には、同じ大きさの円形状の複数の貫通孔５２が形成されている。図６（Ａ）に示すように、細胞凝集塊を含む液体をフィルタ５１の上流側に供給する。フィルタ５１の貫通孔５２よりも小さなサイズの細胞凝集塊５３Ａは、液体とともにフィルタ５１の貫通孔５２を通過して、フィルタ５１の下流側へ移動する。一方、フィルタ５１の貫通孔５２よりも大きなサイズの細胞凝集塊５３Ｂは、貫通孔５２を通過することができず、フィルタ５１の上流側の面にて捕捉される。

しかしながら、図６（Ｂ）に示すように、濾過時には、フィルタ５１の貫通孔５２を通過する液体の流れＦが生じ、液体は貫通孔５２を通過してフィルタ５１の下流側へと移動する。そのため、一度、フィルタ５１にて捕捉された細胞凝集塊５３Ｂが、液体の流れＦにより貫通孔５２に向かって引っ張られて変形する。その結果、図６（Ｃ）に示すように、フィルタ５１の貫通孔５２よりも大きなサイズの細胞凝集塊５３Ｂが、変形されて貫通孔５２を通過してしまう「漏れ」が発生する場合がある。すなわち、フィルタ５１では、細胞凝集塊と液体とが貫通孔５２に同時に流れ込むことになるため、この液体の流れにより細胞凝集塊が引っ張られて変形し、貫通孔５２よりも大きなサイズの細胞凝集塊が貫通孔５２を通過してしまう場合がある。

フィルタ濾過により所望サイズの細胞（細胞凝集塊を含む）を得るためには、フィルタの貫通孔のサイズの最適化が重要である。しかしながら、細胞を含む液体の流し方や液体中の細胞等の濃度によっても貫通孔の適正なサイズは異なるため、貫通孔のサイズの最適化は容易ではない。

このように、本願の発明者らは、フィルタを用いた細胞の濾過において、フィルタの貫通孔に対して細胞とともに液体が通過する際に、一度、フィルタにて捕捉された細胞が、液体の流れにより貫通孔へ移動するとともに変形されて、貫通孔よりも大きなサイズの細胞が通過する、という新たな課題を見出し、この課題を解決すべく本発明に至った。

本発明の一の態様の細胞濾過フィルタは、細胞を濾過する細胞濾過フィルタであって、前記細胞が捕捉される第１主面と、前記第１主面に対向する第２主面とを有するとともに、複数の第１貫通孔を画定する複数の孔縁部と、前記孔縁部の周囲に配置されてそれぞれの前記孔縁部を支持する支持領域と、を有する金属製の膜部を備え、前記膜部の前記支持領域において、前記第１貫通孔よりも小さな開口を有する複数の第２貫通孔が前記それぞれの孔縁部を囲むように配置され、前記膜部の第１主面において、前記支持領域に対して前記それぞれの孔縁部は隆起している、ものである。

このような構成により、細胞濾過フィルタにおいて、所望のサイズの細胞を得るための細胞濾過の精度を向上できる。

細胞濾過フィルタにおいて、前記膜部の前記第２主面はフラットであってもよい。これにより、第１貫通孔を通過した細胞が第２主面に付着することを抑制できる。

細胞濾過フィルタにおいて、前記第２貫通孔は多角形状の孔であってもよい。これにより、開口率が確保しやすくなる。なお、「多角形状」には、頂点同士を結ぶ線が直線の場合に限られず、頂点同士を結ぶ線が曲線の場合も含まれる。頂点同士を結ぶ線を曲線とすることで、支持領域に第２貫通孔を設けやすくなり、開口率を高めることができる。

細胞濾過フィルタにおいて、前記第２貫通孔は、前記支持領域において格子状に配置されていてもよい。これにより、多数の第２貫通孔を効率的に配置することができ、開口率が確保しやすくなる。

細胞濾過フィルタにおいて、前記第１貫通孔は、円形状の孔であってもよい。これにより、第１貫通孔を通過する細胞の大きさを制御しやすくなる。

細胞濾過フィルタにおいて、前記第２貫通孔の長径は、前記第１貫通孔の長径より小さく、隣接する前記第２貫通孔同士の間隔は、隣接する前記第１貫通孔同士の間隔より小さく設定されていてもよい。これにより、細胞濾過フィルタにおける開口率を高めることができる。

このように細胞濾過フィルタにおける開口率を高めることにより、液体の通過面積を増加させることができる。よって、液体の流速を高め、圧力損失を低減させる効果を得ることができる。

以下に、本発明にかかる一の実施の形態を図面に基づいて詳細に説明する。また、各図において、説明を容易なものとするため、各要素を誇張して示している。

（実施の形態）
本発明の一の実施の形態にかかる細胞濾過フィルタ１０の部分拡大平面図を図１に示す。また、図１の細胞濾過フィルタ１０におけるＡ−Ａ線断面図を図２に示す。

図１および図２に示すように、細胞濾過フィルタ１０は、互いに対向する第１主面ＰＳ１と第２主面ＰＳ２とを有するとともに、両主面を貫通する複数の第１貫通孔１２を有する膜部１１を備える。細胞濾過フィルタ１０は、例えば、膜部１１に複数の第１貫通孔１２が一定の間隔で設けられた板状構造体である。細胞濾過フィルタ１０は、例えば、異なるサイズの複数の細胞を含む液体を通過させることによって、所望のサイズの細胞を得る（濾過・分級する）金属製の多孔膜である。

本明細書において、「細胞」には「細胞凝集塊」も含まれ、「細胞凝集塊」とは、複数の細胞が接着することによって形成される細胞の集合塊を意味する。細胞凝集塊は、例えば、がん化細胞、幹細胞、ｉＰＳ細胞などを使用した細胞凝集塊である。

図１および図２では細胞濾過フィルタ１０の全体を示していないが、本実施の形態では、細胞濾過フィルタ１０は、例えば、円形状の外形を有する金属メッシュである。細胞濾過フィルタ１０の寸法は、例えば、直径７．８ｍｍ、厚さ２０μｍである。細胞濾過フィルタ１０を構成する材料は金属材料であって、例えば、金、銀、銅、白金、ニッケル、ステンレス、チタン、パラジウムおよびこれらの合金であってもよい。特に、細胞濾過フィルタ１０の材料は、細胞との生体親和性の観点から、金、ニッケル、ステンレス、チタンがよい。なお、細胞濾過フィルタ１０は、円形状の外形に限定されず、例えば、長方形、正方形等の矩形形状、または楕円等の外形であってもよい。

図１に示すように、細胞濾過フィルタ１０の膜部１１は、複数の第１貫通孔１２を画定する複数の孔縁部１３と、孔縁部１３の周囲に配置されてそれぞれの孔縁部１３を支持する支持領域１４とを備える。第１貫通孔１２は円形状の孔であり、孔縁部１３は円形状の孔を囲むように配置された環状の部分である。それぞれの第１貫通孔１２は、同じ形状および大きさを有しており、膜部１１において均一に分散して配置されている。なお、第１貫通孔１２は円形状の孔に限定されず、例えば、長方形、正方形等の矩形形状、または楕円等の形状であってもよい。また、孔縁部１３は、第１貫通孔１２の周囲を囲む孔の縁部分であり、第１貫通孔１２の形状に対応した形状となる。

支持領域１４は、膜部１１において、それぞれの孔縁部１３に接続され、かつ、それぞれの孔縁部１３間に広がる一体的な領域である。図１に示すように、膜部１１の支持領域１４において、第１貫通孔１２よりも小さな開口を有する複数の第２貫通孔１５が、それぞれの孔縁部１３を囲むように配置されている。第２貫通孔１５は頂点の数が異なる複数種類の多角形状の孔（例えば、四角形状の孔と三角形状の孔）が混在している。なお、第２貫通孔１５は、正方形状、長方形状、三角形状などの多角形状の孔に限定されず、例えば、円形、または楕円などの形状の孔であってもよい。本実施の形態では、膜部１１において格子状に配列された複数の四角形状の孔を投影し、それぞれの第１貫通孔１２および孔縁部１３に対応する領域を除くことにより、支持領域１４において、四角形状の孔と、四角形状の孔の一部により形成された多角形状の孔（例えば、三角形状の孔）とを、第２貫通孔１５として配置している。なお、第２貫通孔１５の配列は格子状のみに限定されず、例えば、不規則的に配置される場合であってもよい。図１のように第１貫通孔１２の形状が円形である場合、第１貫通孔１２の周囲に配置される第２貫通孔１５として複数の形状の孔を混在させた方が孔の配置数を多くでき、支持領域１４における開口率を増加させることが可能となる。

膜部１１において、第１貫通孔１２の長径Ｄ１は、膜部１１において捕捉したい細胞の大きさよりも小さく設定され、第２貫通孔１５の長径Ｄ２は、第１貫通孔１２の長径Ｄ１と比して、小さく設定される。また、隣接する第２貫通孔１５同士の間隔Ｄ４は、隣接する第１貫通孔１２同士の間隔Ｄ３と比して、小さく設定される。本明細書では、細胞を液中に配置し、顕微鏡で観察した際、２次元の観察像において、細胞の外周の任意の２つの点を結んだ線のうち、最長なものを細胞の長さとし、捕捉対象のサイズを有する細胞３個以上についての平均値を細胞の大きさとしている。また、本明細書では、貫通孔の外周における任意の２つの点を結んだ線のうち最長の長さに相当するものを長径としている。また、本明細書では、隣接する貫通孔の外周同士を結ぶ線分のうち最短の長さのものを間隔としている。なお、本実施の形態では、例えば、捕捉対象の細胞の大きさが５００μｍであり、第１貫通孔１２の長径Ｄ１が１００μｍであり、第２貫通孔１５の長径Ｄ２が２０μｍである。また、隣接する第１貫通孔１２同士の間隔Ｄ３が３０μｍであり、隣接する第２貫通孔１５同士の間隔Ｄ４が５μｍである。

図２に示すように、膜部１１の第１主面ＰＳ１において、支持領域１４に対して、それぞれの孔縁部１３は隆起している。すなわち、第１主面ＰＳ１において、それぞれの第１貫通孔１２の開口端縁は、支持領域１４におけるそれぞれの第２貫通孔１５の開口端縁より、厚み方向外向きに突出している。また、図２に示すように、第１主面ＰＳ１において、互いに高さが異なる孔縁部１３と支持領域１４とは、傾斜面１６によって接続されている。これに対して、膜部１１の第２主面ＰＳ２は、フラットな面（平坦状な面）として形成されている。なお、図２では、第２主面ＰＳ２を基準とした孔縁部１３の高さをＨ１、支持領域１４の高さＨ２とすると、Ｈ１＞Ｈ２となっていることを示している。また、本明細書において、膜部１１の第２主面ＰＳ２が「フラット」であるとは、第２主面ＰＳ２の算術平均粗さが０．７μｍ以下であることを意味する。算術平均粗さの測定は、株式会社アルバック製の触針式表面形状測定機ＤＥＫＴＡＫ１５０（登録商標）を用い、第２主面ＰＳ２のうちの５個所の測定値の平均値を第２主面ＰＳ２の算術平均粗さとした。

次に、本実施の形態の細胞濾過フィルタ１０の製造方法の一例について説明する。図３（Ａ）〜図３（Ｇ）は、細胞濾過フィルタ１０の製造方法の一例を示す部分断面図であり、細胞濾過フィルタ１０における第１貫通孔１２とその周囲の支持領域１４となる部分を示している。

図３（Ａ）に示すように、シリコンなどの基板３１上にＣｕ薄膜３２を形成する。Ｃｕ薄膜３２は、例えば蒸着またはスパッタリングにより形成することができる。スパッタリングにて形成した方が、蒸着にて形成される場合と比べて、表面膜質を良好なものとすることができる。

次に、図３（Ｂ）に示すように、Ｃｕ薄膜３２上にレジスト膜３３を形成する。具体的には、Ｃｕ薄膜３２上に、例えばスピンコートによりレジストの塗布を行い、乾燥処理を行うことにより、レジスト膜３３を形成する。レジスト膜３３は、例えば２μｍ程度の厚さに形成される。

次に、図３（Ｃ）に示すように、レジスト膜３３に対して、露光および現像処理（第１露光・現像処理）を行い、レジスト膜３３から膜部１１に相当する部分が除去された溝部３３ａを有する第１レジスト像３４を形成する。

次に、図３（Ｄ）に示すように、第１レジスト像３４に対して、再び露光および現像処理（第２露光・現像処理）を行い、第１レジスト像３４から膜部１１の支持領域１４に相当する部分を部分的に除去して、レジストの膜高さを低減させる。これにより、支持領域１４に相当する部分におけるレジストの膜高さが、他の部分よりも低減された第２レジスト像３５を形成する。

例えば、マスクフィルタなどを用いて、第１レジスト像３４に対して露光させる部分と露光させない部分とを設けることにより、部分的にレジスト膜高さを低減させることができる。また、例えば、露光させる部分内において、露光時間の差を設けることにより、レジスト膜高さが傾斜的に変化している部分（例えば、膜部１１における孔縁部１３と支持領域１４とを接続する傾斜面１６（図２参照）が形成される部分に相当）を形成することができる。

次に、図３（Ｅ）に示すように、第２レジスト像３５において、溝部３３ａに金属製膜、すなわち膜部１１を形成する。膜部１１は、例えば、電解めっき法により形成される。第２レジスト像３５では、部分的にレジスト膜高さが異なっているため、それぞれの溝部３３ａの深さも異なっている。そのため、例えば、浅い溝部３３ａに対しては、溝部３３ａの上方に邪魔板を配置する等して、めっきの成長を抑制するようにしてもよい。その結果、図３（Ｅ）に示すように、それぞれの溝部３３ａにおいて、深さに応じた高さを有する膜部１１が形成される。

次に、図３（Ｆ）に示すように、溶剤（例えば、アセトン等）への浸漬を行って、第２レジスト像３５を溶解して、Ｃｕ薄膜３２から剥離させる。その後、図３（Ｇ）に示すように、Ｃｕ薄膜３２および基板３１を溶解処理することにより、第１貫通孔１２と第２貫通孔１５とを有するとともに、第１貫通孔１２を画定する孔縁部１３が隆起した状態の細胞濾過フィルタ１０が作製される。なお、図３（Ａ）から（Ｆ）を用いて説明した製造方法は一例であり、その他の製造方法が採用されてもよい。

本実施の形態の細胞濾過フィルタ１０を用いて、細胞の濾過処理を行う場合について、図４に示す細胞濾過フィルタ１０の部分断面図を用いて説明する。

図４に示すように、細胞を含む液体を細胞濾過フィルタ１０の膜部１１の上流側（第１主面ＰＳ１側）に供給する。細胞濾過フィルタ１０の第１貫通孔１２よりも小さなサイズの細胞は、液体とともに第１貫通孔１２を通過して、下流側（第２主面ＰＳ２側）へと移動する。一方、第１貫通孔１２よりも大きなサイズの細胞５３Ｂは、第１貫通孔１２（および第２貫通孔１５）を通過することができず、膜部１１の上流側である第１主面ＰＳ１にて捕捉される。

本実施の形態の細胞濾過フィルタ１０では、第１貫通孔１２の周囲における支持領域１４にて、第１貫通孔１２の長径Ｄ１よりも小さな長径Ｄ２を有する複数の第２貫通孔１５が形成されている。これにより、膜部１１の上流側から供給された液体が、第１貫通孔１２のみに集中するのではなく、その周囲の第２貫通孔１５を通して下流側へと移動する。したがって、膜部１１を通過する液体の流れは、第１貫通孔１２のみに集中することなく、第２貫通孔１５にも分散された状態とすることができる。よって、細胞濾過フィルタ１０にて捕捉された細胞５３Ｂが、液体の流れにより第１貫通孔１２の方へ引っ張られて変形することが抑制される。

また、細胞濾過フィルタ１０において、第１貫通孔１２を画定する孔縁部１３は、その周囲の支持領域１４よりも隆起した状態とされている。そのため、図４に示すように、支持領域１４にて捕捉された細胞５３Ｂが、孔縁部１３を乗り越えて第１貫通孔１２内へと移動することを抑制できる。

これにより、第１貫通孔１２よりも大きなサイズの細胞５３Ｂが、液体の流れにより変形されて第１貫通孔１２を通過してしまう「漏れ」の発生を抑制できる。よって、細胞濾過フィルタ１０において、細胞濾過の精度を向上させることができる。

また、細胞濾過フィルタ１０の第１主面ＰＳ１において、隆起している孔縁部１３と支持領域１４との間に傾斜面１６を設けている。これにより、孔縁部１３と支持領域１４との間の角部分をなだらかな状態とすることができ、細胞凝集塊が衝突して粉砕することにより第１貫通孔１２を通過ししまうという問題が生じにくくなる。

また、細胞濾過フィルタ１０の第２主面ＰＳ２は、フラットな面として形成されている。これにより、第１貫通孔１２を通過した後に細胞が第２周面ＰＳ２に付着しにくくすることができる。

また、細胞濾過フィルタ１０では、濾過対象物である細胞の大きさに基づいて長径Ｄ１の大きさが設定される第１貫通孔１２に加えて、第１貫通孔１２の長径Ｄ１よりも小さな長径Ｄ２を有する第２貫通孔１５が設けられている。そのため、細胞濾過フィルタ１０の開口率の調整を第２貫通孔１５の長径Ｄ２の大きさまたは個数にて調整することができる。よって、細胞濾過フィルタ１０における開口率の設定を容易に行うことができるとともに、第１貫通孔１２の配置間隔や個数についての設計の自由度が増し、求められる様々な仕様の細胞濾過フィルタを提供することができる。

さらに、細胞濾過フィルタ１０において、隣接する第２貫通孔１５同士の間隔Ｄ４が、隣接する第１貫通孔１２同士の間隔Ｄ３より小さく設定されている。これにより、支持領域１４における開口率を高めることができ、細胞濾過フィルタ１０の開口率を高めることができる。

上述の実施の形態では、第１貫通孔１２を円形状の孔とし、第２貫通孔１５を正方形格子配列の孔を元とする複数種類の多角形状の孔とする場合を例としたが、このような組み合わせに限られない。上述したように、第１貫通孔および第２貫通孔は様々な形状としてもよい。例えば、第１貫通孔を円形状の孔とする場合には、方形状の孔とする場合に比して、通過させる細胞の大きさを制御しやすくなる。また、第２貫通孔を正方形格子配列の孔を元とする複数種類の多角形状の孔とする場合には、複数の円形状の孔を分散配置する場合に比して、大きな開口率を確保しやすくなる。また、液体を通過させることが主目的となる第２貫通孔は、支持領域全体に対して概ね均一に分散して配置されることが好ましいが、第１貫通孔との配置関係により、あるいは膜部の中央側および外周側等において、第２貫通孔の配置密度に高低を設けてもよい。

本発明は、添付図面を参照しながら好ましい実施形態に関連して充分に記載されているが、この技術の熟練した人々にとっては種々の変形や修正は明白である。そのような変形や修正は、添付した特許請求の範囲による本発明の範囲から外れない限りにおいて、その中に含まれると理解されるべきである。

本発明の細胞濾過フィルタは、所望のサイズの細胞を得るための細胞濾過の精度を向上できるため、例えば、薬効調査や再生医療薬の製造等の分野への適用が有用である。

１０細胞濾過フィルタ
１１膜部
１２第１貫通孔
１３孔縁部
１４支持領域
１５第２貫通孔
１６傾斜面
３１基板
３２Ｃｕ薄膜
３３レジスト膜
３３ａ溝部
３４第１レジスト像
３５第２レジスト像
５３Ｂ細胞
ＰＳ１第１主面
ＰＳ２第２主面
Ｄ１第１貫通孔の長径
Ｄ２第２貫通孔の長径
Ｄ３隣接する第１貫通孔同士の間隔
Ｄ４隣接する第２貫通孔同士の間隔

Claims

細胞を濾過する細胞濾過フィルタであって、
前記細胞が捕捉される第１主面と、前記第１主面に対向する第２主面とを有するとともに、複数の第１貫通孔を画定する複数の孔縁部と、前記孔縁部の周囲に配置されてそれぞれの前記孔縁部を支持する支持領域と、を有する金属製の膜部を備え、
前記膜部の前記支持領域において、前記第１貫通孔よりも小さな開口を有する複数の第２貫通孔が前記それぞれの孔縁部を囲むように配置され、
前記膜部の第１主面において、前記支持領域に対して前記それぞれの孔縁部は隆起している、細胞濾過フィルタ。
前記膜部の前記第２主面はフラットである、請求項１に記載の細胞濾過フィルタ。
前記第２貫通孔は多角形状の孔である、請求項１または２に記載の細胞濾過フィルタ。
前記第２貫通孔は、前記支持領域において格子状に配置されている、請求項１から３のいずれか１つに記載の細胞濾過フィルタ。
前記第１貫通孔は、円形状の孔である、請求項１から４のいずれか１つに記載の細胞濾過フィルタ。
前記第２貫通孔の長径は、前記第１貫通孔の長径より小さく、隣接する前記第２貫通孔同士の間隔は、隣接する前記第１貫通孔同士の間隔より小さい、請求項１から５のいずれか１つに記載の細胞濾過フィルタ。