CN108025238B - 过滤滤除器、过滤装置以及使用过滤滤除器的过滤方法 - Google Patents

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Abstract

提供一种能够容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块的过滤滤除器、过滤装置以及使用过滤滤除器的过滤方法。本发明的过滤滤除器(10)周期性地形成有多个第1贯通孔(13)，所述多个第1贯通孔(13)中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔(13)小的多个第2贯通孔(14)。通过这种结构，能够容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。

Description

过滤滤除器、过滤装置以及使用过滤滤除器的过滤方法
技术领域
本发明涉及过滤滤除器(Filter)、过滤装置以及使用其的过滤方法。
背景技术
在细胞的培养中，为了确认浸泡在培养液中的细胞的培养状态，开发了一种对包含在培养液中的细胞进行取样的取样装置(例如，参照专利文献1。)。
在先技术文献
专利文献
专利文献1：JP特开2009-180594号公报
发明内容
发明要解决的课题
在专利文献1的取样装置中，具有无法容易地对希望的尺寸的细胞凝集块进行取样的课题。
本发明的目的在于，提供一种能够容易地对希望的尺寸的细胞凝集块进行取样的过滤滤除器、过滤装置以及使用其的过滤方法。
用于解决课题的手段
本发明的一个方式的过滤滤除器周期性地形成有多个第1贯通孔，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的多个第2贯通孔。
本发明的一个方式的过滤装置具备：容器部，具有导入包含细胞凝集块的液体的流入口和排出所述液体的排出口；和过滤滤除器，配置在所述容器部的所述流入口与所述排出口之间，在所述过滤滤除器中周期性地形成有多个第1贯通孔，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的多个第2贯通孔。
本发明的一个方式的过滤方法包括：准备过滤滤除器的步骤，所述过滤滤除器周期性地形成有多个第1贯通孔，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的多个第2贯通孔；和使包含细胞凝集块的液体通过所述过滤滤除器的步骤。
发明效果
根据本发明，能够容易地对希望的尺寸的细胞凝集块进行取样。
附图说明
图1是本发明涉及的实施方式1的过滤滤除器的概略图。
图2是图1的过滤滤除器的Z1部分的放大立体图。
图3是从厚度方向观察图2的过滤滤除器的一部分而得到的概略图。
图4是本发明涉及的实施方式1的过滤装置的概略图。
图5是本发明涉及的实施方式1的变形例的过滤滤除器。
图6是本发明涉及的实施方式1的另一变形例的过滤滤除器。
图7是本发明涉及的实施方式1的另一变形例的过滤滤除器。
图8是本发明涉及的实施方式1的变形例的过滤装置。
具体实施方式
(完成本发明的经过)
近年来，在培养用于药效调查等的细胞凝集块等的情况下，为了降低药效数据的偏差，要求培养希望的尺寸的细胞凝集块。因此，为了掌握希望的尺寸的细胞凝集块的培养状态，要求对希望的尺寸的细胞凝集块进行取样。但是，在专利文献1的装置中，由于通过经由培养液导出配管将培养液从培养槽导出到外部来进行取样，因此在取样出的细胞凝集块中包含不同尺寸的细胞凝集块。
在此，为了从培养液取样希望的尺寸的细胞凝集块，需要至少两次以上的滤除。具体来说，进行：(i)用于从培养液去除比希望的尺寸大的细胞凝集块的滤除；和(ii)用于去除比希望的尺寸小的细胞凝集块的滤除。像这样，为了从培养液取样希望的尺寸的细胞凝集块，需要进行多个工序，很费工夫。
本发明者们为了容易地从培养液取样希望的尺寸的细胞凝集块，研究了在进行从培养液去除比希望的尺寸大的细胞凝集块的滤除时，提取希望的尺寸的细胞凝集块的一部分。其结果，本发明者们发现了对多个第1贯通孔的至少一个进行分割从而形成了比第1贯通孔小的多个第2贯通孔的过滤滤除器，以至于完成了本发明。
在本发明的一个方式的过滤滤除器中，周期性地形成有多个第1贯通孔，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的多个第2贯通孔。
通过这种结构，能够容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤滤除器中，相对于所述过滤滤除器的第1主面的表面积而所述第2贯通孔所占的面积的比例也可以比所述第1贯通孔所占的面积的比例小。
通过这种结构，能够高效地过滤比希望的尺寸大的细胞凝集块，并且容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤滤除器中，在形成所述第1贯通孔的区域中，也可以分散地设置形成所述第2贯通孔的区域。
通过这种结构，能够更加容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤滤除器中，也可以以金属以及金属氧化物的至少一方为主成分。
通过这种结构，能够提高过滤滤除器的机械强度。
在所述过滤滤除器中，也可以是所述第1贯通孔捕捉第1细胞凝集块，所述第2贯通孔捕捉比所述第1细胞凝集块小的第2细胞凝集块。
通过这种结构，能够由第1贯通孔来捕捉比希望的尺寸大的第1细胞凝集块，并且由第2贯通孔来容易地捕捉希望的尺寸的第2细胞凝集块的一部分。
本发明的一个方式的过滤装置具备：容器部，具有导入包含细胞凝集块的液体的流入口和排出所述液体的排出口；和过滤滤除器，配置在所述容器部的所述流入口与所述排出口之间，所述过滤滤除器周期性地形成有多个第1贯通孔，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的多个第2贯通孔。
通过这种结构，能够容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤装置中，相对于所述过滤滤除器的第1主面的表面积而所述第2贯通孔所占的面积的比例也可以比所述第1贯通孔所占的面积的比例小。
通过这种结构，能够高效地过滤比希望的尺寸大的细胞凝集块，并且容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤装置中，所述过滤滤除器也可以在形成所述第1贯通孔的区域中，分散地设置形成所述第2贯通孔的区域。
通过这种结构，能够更加容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤装置中，所述过滤滤除器也可以以金属以及金属氧化物的至少一方为主成分。
通过这种结构，能够提高过滤滤除器的机械强度。
在所述过滤装置中，也可以是所述过滤滤除器的所述第1贯通孔捕捉第1细胞凝集块，所述第2贯通孔捕捉比所述第1细胞凝集块小的第2细胞凝集块。
通过这种结构，能够由第1贯通孔捕捉比希望的尺寸大的第1细胞凝集块，并且由第2贯通孔容易地捕捉希望的尺寸的第2细胞凝集块。
在所述过滤装置中，也可以具备多个所述过滤滤除器，多个过滤滤除器包含：第1过滤滤除器，配置在所述容器部的所述流入口与所述排出口之间；和第2过滤滤除器，配置在比所述第1过滤滤除器更靠所述容器部的排出口侧，在所述第2过滤滤除器中，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1过滤滤除器的第2贯通孔小的多个第3贯通孔。
通过这种结构，能够容易地取样不同尺寸的细胞凝集块。
本发明的一个方式的过滤方法包括：准备过滤滤除器的步骤，所述过滤滤除器周期性地形成有多个第1贯通孔，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的多个第2贯通孔；和使包含细胞凝集块的液体通过所述过滤滤除器的步骤。
通过这种结构，能够高效地过滤比希望的尺寸大的细胞凝集块，并且容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤方法中，相对于所述过滤滤除器的第1主面的表面积而所述第2贯通孔所占的面积的比例也可以比所述第1贯通孔所占的面积的比例小。
通过这种结构，能够高效地过滤比希望的尺寸大的细胞凝集块，并且容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤方法中，所述过滤滤除器也可以在形成所述第1贯通孔的区域中，分散地设置形成所述第2贯通孔的区域。
通过这种结构，能够更加容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在所述过滤方法中，所述过滤滤除器也可以以金属以及金属氧化物的至少一方为主成分。
通过这种结构，能够提高过滤滤除器的机械强度。
在所述过滤方法中，使包含所述细胞凝集块的液体通过所述过滤滤除器的步骤也可以包括：由所述第1贯通孔捕捉第1细胞凝集块，并由所述第2贯通孔捕捉比所述第1细胞凝集块小的第2细胞凝集块。
通过这种结构，能够由第1贯通孔捕捉比希望的尺寸大的第1细胞凝集块，并且由第2贯通孔容易地捕捉希望的尺寸的第2细胞凝集块。
在所述过滤方法中，也可以准备所述过滤滤除器的步骤包括准备第1过滤滤除器和配置在比所述第1过滤滤除器更靠下游侧的第2过滤滤除器，在所述第2过滤滤除器中所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1过滤滤除器的第2贯通孔小的多个第3贯通孔，使包含所述细胞凝集块的液体通过所述过滤滤除器的步骤包括由所述第1过滤滤除器捕捉所述第1细胞凝集块和所述第2细胞凝集块并由所述第2过滤滤除器捕捉所述第1细胞凝集块和比所述第2细胞凝集块小的第3细胞凝集块。
通过这种结构，能够容易地取样不同尺寸的细胞凝集块。
以下，边参照附加的附图边对本发明涉及的实施方式1进行说明。此外，在各图中，为了容易说明，将各要素夸大示出。
(实施方式1)
[过滤滤除器]
图1是本发明涉及的实施方式1的过滤滤除器10的概略图。图2是图1的过滤滤除器10的Z1部分的放大立体图。图1以及图2中的X、Y、Z方向分别表示过滤滤除器10的纵向、横向、厚度方向。
如图1所示，过滤滤除器10具备滤除器部11和设置在滤除器部11的外周的框部12。如图2所示，过滤滤除器10具有相互对置的第1主面PS1和第2主面PS2。在滤除器部11周期性地形成有多个第1贯通孔13。此外，在滤除器部11中，多个第1贯通孔13中的至少一个被分割为比第1贯通孔13小的多个第2贯通孔14。
过滤滤除器10在使包含不同尺寸的细胞凝集块的培养液(液体)通过滤除器部11从而过滤比希望的尺寸大的细胞凝集块时，对希望的尺寸的细胞凝集块进行取样。
在本说明书中，“细胞凝集块”意味着通过多个细胞粘接而形成的细胞的集合块。构成凝集块的细胞例如是癌变细胞、干细胞、人工多能性干细胞(iPS细胞)、ES细胞、间叶系干细胞、再生医疗用细胞等。在本说明书中，作为液体，例如是包含氨基酸、蛋白质、血清等的培养液、磷酸缓冲生理盐水、或水。在包含细胞凝集块的液体中，除了包含细胞凝集块和液体之外，也可以包含树脂制粒子等非生物来源物质、骨片或肉片等组织的一部分、死细胞等。
在实施方式1中，过滤滤除器10例如是圆形的金属网。过滤滤除器10的尺寸例如为直径8mm、厚度15μm。此外，过滤滤除器10以金属以及金属氧化物的至少一方为主成分。构成过滤滤除器10的材料例如也可以是金、银、铜、铂、镍、钯、它们的合金以及它们的氧化物。另外，过滤滤除器10不限定于圆形，例如也可以是长方形、正方形等矩形形状、或椭圆等形状。
<滤除器部>
如图1以及图2所示，滤除器部11是由形成有多个第1贯通孔13和第2贯通孔14的滤除器基体部15构成的板状构造体。在实施方式1中，滤除器部11的形状为圆形。另外，滤除器部11的形状不限定于圆形，例如也可以是长方形、正方形等矩形形状、或椭圆等形状。
图3是从厚度方向(Z方向)观察滤除器部11的一部分而得到的概略图。如图3所示，多个第1贯通孔13周期性地配置在滤除器部11的第1主面PS1以及第2主面PS2上。具体来说，多个第1贯通孔13在滤除器部11中等间隔地设置为矩阵状。换言之，多个第1贯通孔13排列为格子状。
在实施方式1中，第1贯通孔13从滤除器部11的第1主面PS1侧观察、即从Z方向观察，具有正方形的形状。另外，第1贯通孔13从Z方向观察到的形状不限定于正方形，例如也可以是以长方形为代表的多边形、圆形、或椭圆等形状。
在实施方式1中，在相对于滤除器部11的第1主面PS1垂直的面上投影的第1贯通孔13的形状(剖面形状)为长方形。具体来说，第1贯通孔13的剖面形状是过滤滤除器10的半径方向的一边的长度比过滤滤除器10的厚度方向的一边的长度长的长方形。另外，第1贯通孔13的剖面形状不限定于长方形，例如也可以是平行四边形或梯形等锥形形状，既可以是对称形状，也可以是非对称形状。
在实施方式1中，多个第1贯通孔13从滤除器部11的第1主面PS1侧(Z方向)观察在与正方形的各边平行的两个排列方向、即图3中的X方向和Y方向上以相等的间隔而设置。像这样，通过以正方格子排列来设置多个第1贯通孔13，从而能够提高开口率，能够降低包含细胞凝集块的培养液相对于过滤滤除器10的通路阻力。通过这种结构，能够缩短处理时间，降低对细胞凝集块的应力。此外，由于多个第1贯通孔13的排列的对称性提高，因此滤除器的观察变得容易。
另外，多个第1贯通孔13的排列不限定于正方格子排列，例如也可以是准周期排列或周期排列。作为周期排列的例子，只要是方形排列即可，可以是两个排列方向的间隔不相等的长方形排列，还可以是三角格子排列或正三角格子排列等。另外，第1贯通孔13只要在滤除器部11设置有多个即可，排列不被限定。
第1贯通孔13的间隔根据从培养液分离的细胞凝集块的种类(大小、形态、性质、弹性)或量而适当设计。在此，第1贯通孔13的间隔意味着，如图3所示，从滤除器部11的第1主面PS1侧观察，任意的第1贯通孔13的中心与相邻的另一个第1贯通孔13的中心之间的距离b。在实施方式1中，第1贯通孔13的中心是指作为正方形的第1贯通孔13的两条对角线交叉的点。在周期排列的构造体的情况下，第1贯通孔13的间隔b例如大于第1贯通孔13的一边d的1倍且为10倍以下，优选为贯通孔13的一边d的3倍以下。或者，例如，滤除器部11中的第1贯通孔13的开口率为10％以上，优选开口率为25％以上。通过这种结构，能够降低包含细胞凝集块的培养液相对于滤除器部11的阻力。因此，能够缩短处理时间，能够降低对细胞凝集块的应力。另外，第1贯通孔13的开口率通过(第1贯通孔13所占的面积)/(假定第1贯通孔13以及第2贯通孔14未开口时的第1主面PS1的投影面积)来计算。
第1贯通孔13被设计为能够捕捉比希望的尺寸大的细胞凝集块(第1细胞凝集块)的尺寸。即，第1贯通孔13被设计成使希望的尺寸以下的细胞凝集块通过而捕捉比希望的尺寸大的细胞凝集块。此外，多个第1贯通孔13的尺寸被设计为大致相同。在此，“被设计为大致相同”意味着在尺寸误差为10％以下的范围内进行设计。
第1贯通孔13穿过第1主面PS1侧的开口和第2主面PS2侧的开口连续的壁面而连通。具体来说，第1贯通孔13设置为第1主面PS1侧的开口能够投影到第2主面PS2侧的开口。即，在从第1主面PS1侧观察滤除器部11的情况下，第1贯通孔13设置为第1主面PS1侧的开口与第2主面PS2侧的开口重叠。在实施方式1中，第1贯通孔13设置为其内壁相对于第1主面PS1以及第2主面PS2成为垂直。
第2贯通孔14通过将多个第1贯通孔13中的至少一个进行分割而形成。第2贯通孔14是比第1贯通孔13小的贯通孔。在实施方式1中，通过将多个第1贯通孔13中的一个进行分割，从而形成了4个第2贯通孔14。此外，第2贯通孔14形成在滤除器部11中的靠近框部12侧的位置。
第2贯通孔14被设计为能够捕捉希望的尺寸的细胞凝集块(第2细胞凝集块)的尺寸。即，第2贯通孔14被设计成捕捉比第1细胞凝集块小的第2细胞凝集块。通过这种结构，能够利用第2贯通孔14来捕捉希望的尺寸的细胞凝集块的一部分。
在实施方式1中，第2贯通孔14与第1贯通孔13除了尺寸不同这一点之外，是同样的结构。即，多个第2贯通孔14从滤除器部11的第1主面PS1侧观察、即从Z方向观察，具有正方形的形状，且排列为格子状。另外，多个第2贯通孔14也可以与第1贯通孔13的结构不同。多个第2贯通孔14的排列不限定于正方格子排列，例如也可以是准周期排列或周期排列。关于第2贯通孔14的形状，从Z方向观察到的形状不限定于正方形，例如也可以是以长方形为代表的多边形、圆形、或椭圆等形状。
第2贯通孔14所占的面积相对于过滤滤除器10的第1主面PS1的表面积的比例被设计成小于第1贯通孔13所占的面积的比例。换言之，第2贯通孔14的开口率被设计成小于第1贯通孔13的开口率。另外，第2贯通孔14的开口率通过(第2贯通孔14所占的面积)/(假定第1贯通孔13以及第2贯通孔14未开口时的第1主面PS1的投影面积)来计算。例如，第2贯通孔14的开口率小于10％，优选为1％以上且5％以下。
滤除器部11的厚度优选大于第1贯通孔13的大小(一边d)的0.01倍且为10倍以下。更优选的是，滤除器部11的厚度大于第1贯通孔13的大小(一边d)的0.02倍且为5倍以下。通过这种结构，能够在确保了过滤滤除器10的机械强度的基础上，降低包含细胞凝集块的培养液的通路阻力，能够缩短处理时间。其结果，能够降低对细胞凝集块的应力。
在滤除器部11中，包含细胞凝集块的培养液所接触的第1主面PS1也可以形成为平滑。具体来说，滤除器部11的第1主面PS1也可以以无凹凸且均匀的平面形成。换言之，滤除器部11的第1主面PS1上的多个第1贯通孔13的开口以及多个第2贯通孔14的开口形成在同一平面上。此外，滤除器部11中的未形成第1贯通孔13以及第2贯通孔14的部分、即滤除器基体部15相连，形成为一体。通过这种结构，能够容易地回收由第1贯通孔13捕捉到的第1细胞凝集块以及由第2贯通孔14捕捉到的第2细胞凝集块。此外，通过将滤除器部11的第1主面PS1构成为平滑，从而容易用显微镜进行观察。例如，能够将捕捉了细胞凝集块的过滤滤除器10直接拿到显微镜来观察在第1主面PS1上捕捉到的细胞凝集块。此时，由于在第1主面PS1上以无凹凸且均匀的平面形成，因此即使设为高倍率也能够容易地进行对焦等操作。
<框部>
框部12设置在滤除器部11的外周，是与滤除器部11相比每单位面积的第1贯通孔13的数量少的部分。框部12中的第1贯通孔13的数量为滤除器部11中的第1贯通孔13的数量的1％以下。框部12的厚度也可以比滤除器部11的厚度厚。通过这种结构，能够提高过滤滤除器10的机械强度。
在将过滤滤除器10连接于装置来使用的情况下，框部12也可以作为将过滤滤除器10和装置进行连接的连接部(后述的图4的标号“19”)而发挥功能。此外，也可以在框部12显示过滤滤除器10的信息(第1贯通孔13以及第2贯通孔14的尺寸等)。
如图1所示，框部12从滤除器部11的第1主面PS1侧观察形成为环状。从第1主面PS1侧观察过滤滤除器10，框部12的中心与滤除器部11的中心一致。即，框部12与滤除器部11形成在同心圆上。
[过滤装置]
关于过滤装置50使用图4来进行说明。
图4是本发明涉及的实施方式1的过滤装置50的概略图。如图4所示，过滤装置50具备容器部16和配置在容器部16的内部的过滤滤除器10。在实施方式1中，过滤滤除器10经由连接部19而与容器部16连接。
<容器部>
容器部16是具有导入包含细胞凝集块的液体的流入口17和排出液体的排出口18的筒体。在实施方式1中，容器部16是圆筒状的筒体。另外，容器部16只要在内部具备液体流动的流路即可，并不限定于圆筒状。容器部16例如从流入口17侧观察也可以是椭圆、正方形、长方形等形状。
容器部16例如能由能够伽马灭菌的材料构成。容器部16例如也可以由包含聚乙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚氨酯、聚苯乙烯、硅橡胶、ABS树脂、聚酰胺、聚酰胺酰亚胺、聚砜、天然橡胶、胶乳、聚氨酯橡胶、硅橡胶、乙烯乙酸乙烯酯、聚酯类、环氧类、酚类、二氧化硅、氧化铝、金、铂、镍、不锈钢、钛等的材料形成。通过由这种材料构成容器部16，从而能够降低对细胞凝集块的应力。
在实施方式1中，容器部16由两个构件、即第1构件16a和第2构件16b构成。例如，第1构件16a和第2构件16b通过利用分别形成于端部的螺丝部进行螺合而连接。在第1构件16a以及第2构件16b的内壁，分别形成有用于对过滤滤除器10的框部12进行保持的第1突起部16aa以及第2突起部16ba。若第1构件16a和第2构件16b被连接，则过滤滤除器10的框部12经由连接部19被保持在第1突起部16aa与第2突起部16ba之间。通过这种结构，过滤滤除器10被配置在容器部16的流入口17和排出口18之间。由此，若从容器部16的流入口17导入包含细胞凝集块的液体，则液体在通过了配置于容器部16内部的过滤滤除器10之后，从排出口18被排出。
在实施方式1中，过滤装置50通过在相对于过滤滤除器10的第1主面PS1铅垂向下的方向施加的重力、即通过液体的自重，使包含细胞凝集块的液体通过过滤滤除器10。另外，过滤装置50为了使包含细胞凝集块的液体通过过滤滤除器10，也可以具备在使液体与过滤滤除器10的第1主面PS1接触的状态下，朝着从容器部16的流入口17向排出口18的方向60对液体施加压力的按压部。或者，过滤装置50也可以具备在使液体与过滤滤除器10的第1主面PS1接触的状态下，从第2主面PS2侧沿方向60吸引液体的吸引部。过滤装置50通过具备按压部或吸引部，能够缩短过滤时间。另外，在施加压力的情况或进行吸引的情况下，优选设为细胞凝集块不发生变形的程度的力。
在过滤装置50中，在由过滤滤除器10过滤了包含细胞凝集块的液体之后，能够从第2构件16b卸下第1构件16a。然后，能够保持将捕捉了细胞凝集块的过滤滤除器10安装于第2构件16b的状态不变地放置于显微镜。因此，能够容易地观察由过滤滤除器10捕捉到的细胞凝集块。其结果，在过滤装置50中，能够容易地确认由第2贯通孔14捕捉到的希望的尺寸的细胞凝集块的培养状态。
[过滤方法]
对使用了过滤滤除器10的过滤方法进行说明。
首先，准备过滤滤除器10。在该工序中，例如，过滤滤除器10被安装到容器部16。具体来说，在将连接部19安装到过滤滤除器10的框部12之后，将过滤滤除器10配置在第2构件16b的第2突起部16ba上。接着，将第1构件16a连接到第2构件16b，使得第1构件16a的第1突起部16aa与连接部19接触。在实施方式1中，第1构件16a与第2构件16b通过用螺丝部进行螺合而连接。由此，通过第1突起部16aa和第2突起部16ba，夹持安装于过滤滤除器10的框部12的连接部19。
接着，使包含细胞凝集块的液体通过过滤滤除器10。具体来说，通过在容器部16的内部使液体从容器部16的流入口17向排出口18流动，从而使液体通过滤除器部11。由此，过滤滤除器10对细胞凝集块进行捕捉。
作为使包含细胞凝集块的液体通过滤除器10的方法，例如有如下方法，即，从相对于滤除器部11的第1主面PS1大致铅垂的上方利用重力使液体通过。除此之外，还有在使液体接触过滤滤除器10的第1主面PS1的状态下朝着从容器部16的流入口17向排出口18的方向60对液体施加压力的方法，或者在使液体接触滤除器部11的第1主面PS1的状态下从第2主面PS2沿方向60吸引液体的方法等。另外，在使包含细胞凝集块的液体通过滤除器部11的工序中，优选尽量不对细胞凝集块给予应力。例如，在施加压力的情况下，优选设为细胞凝集块不发生变形的程度的压力。更优选的是，不施加压力，而通过液体的自重，使液体通过滤除器部11。或者，优选通过提高滤除器部11的开口率来缩短处理时间，减少对细胞凝集块施加应力的时间。
在实施方式1中，滤除器部11的第1贯通孔13被设计成能够捕捉比希望的尺寸大的第1细胞凝集块的尺寸。此外，多个第2贯通孔14对多个第1贯通孔13中的一个进行分割，被设计成比第1贯通孔13小的尺寸。具体来说，第2贯通孔14被设计成能够捕捉比第1细胞凝集块小的尺寸的第2细胞凝集块、即能够捕捉希望的尺寸的细胞凝集块的尺寸。
因此，通过使包含细胞凝集块的液体通过滤除器部11，从而能够由第1贯通孔13来捕捉比希望的尺寸大的第1细胞凝集块，并且由第2贯通孔14来提取希望的尺寸的第2细胞凝集块的一部分。即，根据过滤方法，能够在1次滤除中去除第1细胞凝集块，并且取样希望的尺寸的第2细胞凝集块。
[效果]
根据实施方式1涉及的过滤滤除器10，能够发挥以下的效果。
过滤滤除器10周期性地形成有多个第1贯通孔13，并对多个第1贯通孔13中的至少一个进行分割，形成了比第1贯通孔小的多个第2贯通孔14。通过这种结构，在由第1贯通孔13来滤除比希望的尺寸大的第1细胞凝集块时，能够由第2贯通孔14来提取希望的尺寸的第2细胞凝集块的一部分。
像这样，根据过滤滤除器10，即使不进行多次滤除，也能够容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。
在过滤滤除器10中，相对于第1主面PS1的表面积而第2贯通孔14所占的面积的比例被设计成比第1贯通孔13所占的面积的比例小。通过这种结构，能够由第1贯通孔13高效地过滤比希望的尺寸大的细胞凝集块，并且由第2贯通孔14容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。此外，由于希望的尺寸以下的细胞凝集块能够通过第1贯通孔13，因此能够抑制堵塞，降低在过滤时施加给滤除器部11的压力。
过滤滤除器10以金属以及金属氧化物的至少一方作为主成分。通过这种结构，与隔膜等的树脂滤除器相比，能够提高过滤滤除器10的机械强度。根据过滤滤除器10，例如在包含细胞凝集块的液体通过滤除器部11时，第1贯通孔13以及第2贯通孔14不易变形，因此能够抑制希望的尺寸的细胞凝集块通过滤除器部11。
在过滤装置50以及过滤方法中，也能够发挥与上述的过滤滤除器10的效果同样的效果。特别是，通过使用过滤装置50，能够提高过滤滤除器10的操作性。例如，能够保持将过滤滤除器10安装于容器部16的第2构件16b的状态不变地，用显微镜容易地观察在过滤滤除器10的第1主面PS1上捕捉到的细胞凝集块。
另外，在实施方式1中，对过滤滤除器10以金属以及金属氧化物的至少一方为主成分的结构进行了说明，但不限定于此。过滤滤除器10只要为多孔膜即可，例如也可以是尼龙、聚丙烯、聚乙烯、聚酯、聚醚醚酮、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚偏二氯乙烯等。
在实施方式1中，对第1贯通孔13捕捉第1细胞凝集块，第2贯通孔14捕捉第2细胞凝集块的例子进行了说明，但并不限定于这些。第1贯通孔13以及第2贯通孔14也可以捕捉细胞凝集块以外的物体。例如，第1贯通孔13也可以捕捉离析细胞。此外，第2贯通孔14也可以使用于确定除了细胞凝集块以外通过了第1贯通孔13的物体。即，第2贯通孔14也可以使用于通过捕捉存在于通过了第1贯通孔13的液体中的物体，从而获得包含在液体中的物体的存在信息。第2贯通孔14例如也可以使用于获得离析细胞、死细胞、树脂珠等的存在信息。
在实施方式1中，对第2贯通孔14在滤除器部11中形成于框部12侧的例子(参照图1)进行了说明，但不限定于此。第2贯通孔14只要包含细胞凝集块的液体通过即可，可以形成在滤除器部11的任意位置。例如，既可以形成在滤除器部11的中央，也可以形成在滤除器部11的端部。
在实施方式1中，对多个第2贯通孔14是通过对多个第1贯通孔13中的一个进行分割而形成的4个贯通孔的例子进行了说明，但不限定于此。第2贯通孔14只要形成至少一个以上比第1贯通孔13小的尺寸的贯通孔即可。此外，多个第2贯通孔14只要通过对多个第1贯通孔13中的至少一个进行分割而形成即可。
图5是本发明涉及的实施方式1的变形例的过滤滤除器10A。如图5所示，在过滤滤除器10A中，也可以通过对多个第1贯通孔13中的两个进行分割，来形成比第1贯通孔13小的多个第2贯通孔14。像这样，通过增加相对于过滤滤除器10A的第1主面PS1的表面积而第2贯通孔14所占的面积的比例，从而能够增加希望的尺寸的细胞凝集块的取样数。另外，在图5中，对相邻的两个第1贯通孔13进行分割而形成了第2贯通孔14，但本发明的过滤滤除器不限定于此。例如，也可以对位于相互分离的位置的多个第1贯通孔13进行分割，从而在多个区域形成第2贯通孔14。
图6是本发明涉及的实施方式1的另一变形例的过滤滤除器10B。如
图6所示，在过滤滤除器10B中，在形成有第1贯通孔13的区域A1中，分散地设置有形成第2贯通孔14的区域A2。另外，在本说明书中，形成有第1贯通孔13的区域A1意味着从第1主面PS1侧观察过滤滤除器10B时形成有滤除器部11的区域。形成有第2贯通孔14的区域A2意味着从第1主面PS1侧观察过滤滤除器10B时在滤除器部11中形成有第2贯通孔14的区域。
如图6所示，在过滤滤除器10B中，在形成有第1贯通孔13的区域A1中，以给定的间隔设置有多个形成第2贯通孔14的区域A2。通过这种结构，能够更容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。此外，无论包含细胞凝集块的液体通过过滤滤除器10B的滤除器部11的哪个区域，都能够取样希望的尺寸的细胞凝集块。另外，在图6所示的过滤滤除器10B中，对在形成有第1贯通孔13的区域A1中以给定的间隔设置多个形成第2贯通孔14的区域A2的结构进行了说明，但不限定于此。形成第2贯通孔14的区域A2只要在形成有第1贯通孔13的区域A1中分散设置即可。例如，形成第2贯通孔14的区域A2也可以在形成有第1贯通孔13的区域A1中随机设置。此外，形成第2贯通孔14的区域A2也可以在形成有第1贯通孔13的区域A1的一部分中分散设置。像这样，形成第2贯通孔14的区域A2的数量以及/或者位置也可以适当变更。
图7是本发明涉及的实施方式1的另一变形例的过滤滤除器10C。如图7所示，在过滤滤除器10C中，也可以进一步设置比第2贯通孔14a小的多个第3贯通孔14b。多个第3贯通孔14b通过对多个第1贯通孔13中的至少一个进行分割而形成。第3贯通孔14b捕捉比由第2贯通孔14a捕捉的第2细胞凝集块小的第3细胞凝集块。由此，在滤除比希望的尺寸大的第1细胞凝集块时，能够容易地对两个不同的希望的尺寸的细胞凝集块进行取样。换言之，能够在一次滤除中容易地取样不同尺寸的细胞凝集块。
另外，在图7中，说明了对第1贯通孔13进行分割从而形成比第1贯通孔13小的两个尺寸的贯通孔14a、14b的例子，但过滤滤除器10C不限定于此。在过滤滤除器10C中，也可以根据想要取样的细胞凝集块的尺寸的数量来决定不同尺寸的贯通孔的数量。
此外，在图7中，示出了从一个第1贯通孔13仅形成了第2贯通孔14a或第3贯通孔14b中的任一方的例子，但不限定于此。过滤滤除器10C例如也可以对一个第1贯通孔13进行分割从而形成第2贯通孔14a和第3贯通孔14b双方的尺寸的贯通孔。即，过滤滤除器10C也可以对一个第1贯通孔13进行分割从而形成比第1贯通孔13小的不同尺寸的多个贯通孔。
在实施方式1中，说明了过滤装置50的容器部16由两个构件、即第1构件16a和第2构件16b构成的例子，但不限定于此。此外，在实施方式1中，说明了第1构件16a和第2构件16b通过用螺丝部进行螺合而连接的例子，但不限定于此。例如，在容器部16中，第1构件16a和第2构件16b也可以一体形成。
在实施方式1中，说明了在过滤装置50中过滤滤除器10配置于容器部16的流入口17和排出口18之间的例子，但不限定于此。过滤滤除器10只要配置在包含细胞凝集块的液体能够通过的位置即可。例如，过滤滤除器10既可以配置在容器部16的流入口17，也可以配置在容器部16的排出口18。
在实施方式1中，对过滤装置50具备一个过滤滤除器10的例子进行了说明，但不限定于此。过滤装置50也可以具备多个过滤滤除器10。图8是本发明涉及的实施方式1的变形例的过滤装置50A。如图8所示，在过滤装置50A中，也可以在容器部16的流入口17与排出口18之间配置第1过滤滤除器10D，且在比第1过滤滤除器10D更靠容器部16的排出口18侧配置第2过滤滤除器10E。第1过滤滤除器10D和第2过滤滤除器10E既可以是相同的滤除器，也可以是不同的滤除器。
在第1过滤滤除器10D和第2过滤滤除器10E是相同的滤除器的情况下，能够增加希望的尺寸的细胞凝集块的取样数。
在第1过滤滤除器10D和第2过滤滤除器10E是不同的滤除器的情况下，能够在各个滤除器中对不同尺寸的细胞凝集块进行取样。在过滤装置50A中，例如也可以在第1过滤滤除器10D设置比第1贯通孔13小的第2贯通孔14a，在第2过滤滤除器10E设置比第2贯通孔14a小的第3贯通孔14b。通过这种结构，能够由第1贯通孔13去除比希望的尺寸大的第1细胞凝集块，并且由第1过滤滤除器10D的第2贯通孔14a来提取希望的尺寸的第2细胞凝集块的一部分，由第2过滤滤除器10E的第3贯通孔14b来提取比第2细胞凝集块小的尺寸的第3细胞凝集块的一部分。
过滤装置50A的容器部16由三个构件、即第1构件16a、第2构件16b和第3构件16c构成。具体来说，如图8所示，在第1构件16a与第2构件16b之间设置有第3构件16c。在第3构件16c的内部，形成有用于对过滤滤除器10D以及10E进行保持的第3突起部16ca和第4突起部16cb。由此，第1过滤滤除器10D的框部12被第1构件16a的第1突起部16aa和第3构件16c的第3突起部16ca夹持。此外，第2过滤滤除器10E的框部12被第2构件16b的第2突起部16ba和第3构件16c的第4突起部16cb夹持。
在过滤方法中，也如上述那样可以使包含细胞凝集块的液体通过多个过滤滤除器10，从而增加取样数，或者对不同尺寸的细胞凝集块进行取样。
本发明边参照添加的附图边与优选的实施方式关联地充分进行了记载，但对于熟练该技术的人们来说，各种变形或修正是显而易见的。这种变形或修正只要不脱离基于所附的权利要求书的本发明的范围，就应理解为包含在本发明的范围中。
工业实用性
本发明的过滤滤除器能够容易地取样希望的尺寸的细胞凝集块。因此，在从培养液取样希望的尺寸的细胞凝集块的用途中有用。
标号说明
10、10A、10B、10C、10D、10E：过滤滤除器；
11：滤除器部；
12：框部；
13：第1贯通孔；
14、14a：第2贯通孔；
14b：第3贯通孔；
15：滤除器基体部；
16：容器部；
16a：第1构件；
16aa：第1突起部；
16b：第2构件；
16ba：第2突起部；
16c：第3构件；
16ca：第3突起部；
16cb：第4突起部；
17：流入口；
18：排出口；
19：连接部；
50、50A：过滤装置；
60：方向；
PS1：第1主面；
PS2：第2主面。

Claims (12)

1.一种过滤滤除器，形成有排列为格子状的多个第1贯通孔，
所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的不同尺寸的包含第2贯通孔及第3贯通孔的多个贯通孔，由所述第1贯通孔捕捉第1细胞凝集块，由所述第2贯通孔捕捉比所述第1细胞凝集块小的第2细胞凝集块，由所述第3贯通孔捕捉比所述第2细胞凝集块小的第3细胞凝集块，
所述第1贯通孔的开口率为10％以上，所述第2贯通孔的开口率小于10％。
2.根据权利要求1所述的过滤滤除器，其中，
所述第1贯通孔的开口率为25％以上，所述第2贯通孔的开口率为1～5％。
3.根据权利要求1或2所述的过滤滤除器，其中，
在形成所述第1贯通孔的区域中，分散地设置了形成所述第2贯通孔的区域。
4.根据权利要求1或2所述的过滤滤除器，其中，
以金属以及金属氧化物的至少一方为主成分。
5.一种过滤装置，具备：
容器部，具有导入包含细胞凝集块的液体的流入口和排出所述液体的排出口；和
过滤滤除器，配置在所述容器部的所述流入口与所述排出口之间，
在所述过滤滤除器中形成有排列为格子状的多个第1贯通孔，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的不同尺寸的包含第2贯通孔及第3贯通孔的多个贯通孔，由所述第1贯通孔捕捉第1细胞凝集块，由所述第2贯通孔捕捉比所述第1细胞凝集块小的第2细胞凝集块，由所述第3贯通孔捕捉比所述第2细胞凝集块小的第3细胞凝集块，
所述第1贯通孔的开口率为10％以上，所述第2贯通孔的开口率小于10％。
6.根据权利要求5所述的过滤装置，其中，
所述第1贯通孔的开口率为25％以上，所述第2贯通孔的开口率为1～5％。
7.根据权利要求5或6所述的过滤装置，其中，
所述过滤滤除器在形成所述第1贯通孔的区域中，分散地设置了形成所述第2贯通孔的区域。
8.根据权利要求5或6所述的过滤装置，其中，
所述过滤滤除器以金属以及金属氧化物的至少一方为主成分。
9.一种过滤方法，包括：
准备过滤滤除器的步骤，所述过滤滤除器形成有排列为格子状的多个第1贯通孔，所述多个第1贯通孔中的至少一个被分割为比所述第1贯通孔小的不同尺寸的包含第2贯通孔及第3贯通孔的多个贯通孔；
使包含细胞凝集块的液体通过所述过滤滤除器的步骤；和
由所述第1贯通孔捕捉第1细胞凝集块，由所述第2贯通孔捕捉比所述第1细胞凝集块小的第2细胞凝集块，由所述第3贯通孔捕捉比所述第2细胞凝集块小的第3细胞凝集块的步骤，
所述第1贯通孔的开口率为10％以上，所述第2贯通孔的开口率小于10％。
10.根据权利要求9所述的过滤方法，其中，
所述第1贯通孔的开口率为25％以上，所述第2贯通孔的开口率为1～5％。
11.根据权利要求9或10所述的过滤方法，其中，
所述过滤滤除器在形成所述第1贯通孔的区域中，分散地设置了形成所述第2贯通孔的区域。
12.根据权利要求9或10所述的过滤方法，其中，
所述过滤滤除器以金属以及金属氧化物的至少一方为主成分。
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