JPWO2021054001A5 - - Google Patents

Description

本発明は、濾過回収装置に関する。

濾過対象物を含む液体を濾過する装置として、例えば、特許文献１に記載のセルストレーナーが知られている。特許文献１に記載のセルストレーナーは、上方が開口し液体を濾過する濾過部（フィルタ）と、濾過部を開口部内に保持する保持部と、チューブに保持した際、チューブの内部と外部とを連通する連通部を有する。特許文献１に記載のセルストレーナーでは、濾過部が保持部の側面および底面に配置されている。

特開２０１３－１４１４５６号公報

しかしながら、特許文献１のセルストレーナーでは、濾過対象物の回収率を向上させる点で未だ改善の余地がある。

本発明は、濾過対象物の回収率を向上することができる濾過回収装置を提供する。

本発明の一態様に係る濾過回収装置は、
液体を導入する導入口、前記液体を排出する排出口、および前記導入口と前記排出口とを連通する流路を有し、外周に溝部が形成されたホルダと、
前記ホルダの前記流路に配置され、複数の貫通孔を有する濾過フィルタと、
前記溝部に挿入される挿入部を有する１つまたは複数の把持部と、
を備え、
前記溝部と前記挿入部との間に隙間が形成されている。

本発明によれば、濾過対象物の回収率を向上することができる濾過回収装置を提供することができる。

本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置の一例の概略斜視図である。 本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置の一例の概略分解斜視図である。 本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置の一例の概略平面図である。 図３の濾過回収装置のＡ－Ａ断面図である。 図４Ａの濾過回収装置の一部を拡大した部分拡大図である。 例示的なフィルタ部の一部の拡大斜視図である。 図５のフィルタ部の一部を厚み方向から見た概略図である。 本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置を遠沈管に取り付けた状態を示す概略図である。 本発明の実施の形態１に係る変形例の濾過回収装置の概略斜視図である。 図８Ａの濾過回収装置の概略平面図である。 図８Ａの濾過回収装置の分解斜視図である。 本発明の実施の形態１に係る別の変形例の濾過回収装置の概略平面図である。 本発明の実施の形態２に係る濾過回収装置の一例の概略構成図である。 図１０の濾過回収装置の別の概略構成図である。 図１１の濾過回収装置の平面図である。 図１１の濾過回収装置のＢ－Ｂ断面図である。 図１３Ａの濾過回収装置の一部を拡大した拡大断面図である。 比較例１の濾過回収装置の概略構成図である。 作製した細胞懸濁液を観察した顕微鏡写真である。 実施例１の濾過回収装置から排出された液体の顕微鏡写真である。 比較例１の濾過回収装置から排出された液体の顕微鏡写真である。 実施例１の濾過回収装置により捕捉された細胞の顕微鏡写真である。 比較例１の濾過回収装置により捕捉された細胞の顕微鏡写真である。 実施例１および比較例１の顕微鏡による観察結果を示す表である。

（本発明に至った経緯）
濾過対象物を含む液体を特許文献１に記載のセルストレーナーに通して、濾過対象物をサイズごとに分画することがある。この場合、濾過対象物は、セルストレーナーの貫通孔を通過する小さいものと、濾過フィルタの貫通孔より大きいものとに分画される。濾過対象物の分画の際に、液体をセルストレーナーに導入した後、セルストレーナーの貫通孔を通過するはずの小さな濾過対象物が、セルストレーナーに付着したままになってしまうことがある。

その結果、濾過対象物の回収率が低下してしまうという問題がある。また、セルストレーナーを通液用容器に接続して使用する場合、容器内の圧力が高くなり、セルストレーナーを液体が通過しにくくなるため液体の処理時間が長くなり、処理効率が低下するという問題がある。

また、貫通孔の大きさの異なるセルストレーナーを重ねることで、同時に複数の大きさの濾過対象物を分画することがある。特許文献１に記載のセルストレーナーは、フィルタ部と把持部とが一体形成されており、通液用容器に接続して使用する場合に、把持部が干渉して複数のセルストレーナーを重ねて使用することが難しい。また、セルストレーナーが接続された通液用容器を同時に複数平面上で使用する場合、把持部が干渉するため、通液用容器間には一定の配置間隔が必要となり、限られた作業平面において複数のセルストレーナーを同時に使用することが困難である。さらに、フィルタ部と把持部とが一体形成されていると、フィルタ部を顕微鏡で観察する際に誤って把持部に触れてしまうことがあり、観察域が変化してしまうおそれがある。

そこで、本発明者らは、フィルタ部と把持部とを別部品として構成することを検討し、以下の発明に至った。

本発明の一態様に係る濾過回収装置は、
液体を導入する導入口、前記液体を排出する排出口、および前記導入口と前記排出口とを連通する流路を有し、外周に溝部が形成されたホルダと、
前記ホルダの前記流路に配置され、複数の貫通孔を有する濾過フィルタと、
前記溝部に挿入される挿入部を有する１つまたは複数の把持部と、
を備え、
前記溝部と前記挿入部との間に隙間が形成されている。

このような構成により、濾過対象物の回収率を向上することができる。

濾過回収装置において、
前記ホルダは、
前記溝部を有する筒状の第１ホルダと、
前記第１ホルダに嵌め込まれる筒状の第２ホルダと、
を有し、
前記濾過フィルタは、前記第１ホルダと前記第２ホルダとによって挟持されていてもよい。

このような構成により、濾過フィルタをホルダから取り外すことが可能になる。

濾過回収装置において、
前記挿入部には、１つまたは複数の切欠き部が形成されていてもよい。

このような構成により、通液用容器の内部と外部との間での通気が可能になり、フィルタの通液性を向上することができる。

濾過回収装置において、
前記複数の切欠き部は、等間隔に設けられていてもよい。

このような構成により、挿入部が溝部に等間隔に挿入されるため、ホルダに対する把持部の安定性が向上する。

濾過回収装置において
前記ホルダは円筒形状であり、
前記複数の把持部は、平板状に形成され、厚み方向に重ねて配置されていてもよい。

このような構成により、一方の把持部を回転させて複数の切欠き部で形成される穴の大きさを変化させることができ、流量調節が可能になる。

濾過回収装置において、
前記把持部は、主面を有する平板状に形成され、前記主面に１つまたは複数の凸部が形成されていてもよい。

このような構成により、通液用容器との間に通気口が形成され、通液性を向上することができる。

以下、本発明に係る実施の形態１について、添付の図面を参照しながら説明する。また、各図においては、説明を容易なものとするため、各要素を誇張して示している。

（実施の形態１）
本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置は、濾過および回収を行うことができる装置である。具体的には、濾過回収装置は、濾過対象物を含む液体を濾過フィルタによって濾過し、濾過フィルタを通過した濾過対象物または濾過フィルタで捕捉された濾過対象物を回収する。

本明細書において、「濾過対象物」とは、液体に含まれる対象物のうち、濾過されるべき対象物を意味している。例えば、濾過対象物は、液体に含まれる生物由来物質であってもよい。「生物由来物質」とは、細胞（真核細胞）、細菌（真正細菌）、ウィルス等の生物に由来する物質を意味する。細胞（真核細胞）としては、例えば、人工多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）、ＥＳ細胞、幹細胞、間葉系幹細胞、単核球細胞、単細胞、細胞塊、浮遊性細胞、接着性細胞、神経細胞、白血球、再生医療用細胞、自己細胞、がん細胞、血中循環がん細胞（ＣＴＣ）、ＨＬ－６０、ＨＥＬＡ、菌類を含む。細菌（真正細菌）としては、例えば、大腸菌、結核菌を含む。

実施の形態１では、１つの例として、液体は細胞懸濁液であり、濾過対象物は細胞として説明する。

［全体構成］
図１は、本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置１Ａの一例の概略斜視図である。図２は、本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置１Ａの一例の概略分解斜視図である。図３は、本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置１Ａの一例の概略平面図である。図４Ａは、図３の濾過回収装置１ＡのＡ－Ａ断面図である。図４Ｂは、図４Ａの濾過回収装置１Ａの一部を拡大した部分拡大図である。図１～図３中のＸ、Ｙ、Ｚ方向は、それぞれ濾過回収装置１Ａの縦方向、横方向、厚み方向を示している。

図１～図４Ｂに示すように、濾過回収装置１Ａは、濾過フィルタ１０と、濾過フィルタ１０を保持するホルダ２０と、ホルダ２０に取り付けられた把持部２３とを備える。

＜濾過フィルタ＞
濾過フィルタ１０は、金属製フィルタである。具体的には、濾過フィルタ１０は、金属および金属酸化物のうち少なくともいずれかを主成分とする。濾過フィルタ１０は、複数の貫通孔を有するフィルタ部１１と、フィルタ部１１の外周を囲むように配置された枠部１２と、を備える。実施の形態１では、フィルタ部１１と枠部１２とは一体で形成されている。

図５は、例示的なフィルタ部１１の一部の拡大斜視図である。図６は、図５のフィルタ部１１の一部を厚み方向から見た概略図である。

図５および図６に示すように、フィルタ部１１は、液体に含まれる濾過対象物が補足される第１主面ＰＳ１と、第１主面ＰＳ１に対向する第２主面ＰＳ２とを有する板状構造体である。フィルタ部１１には、第１主面ＰＳ１と第２主面ＰＳ２とを貫通する複数の貫通孔１３が形成されている。具体的には、フィルタ部１１を構成するフィルタ基体部１４に、複数の貫通孔１３が形成されている。

図２に示すように、フィルタ部１１の形状は、濾過フィルタ１０の厚み方向（Ｚ方向）から見て、例えば、円形、長方形、楕円形である。実施の形態１では、フィルタ部１１の形状は、略円形である。なお、本明細書において、「略円形」とは、短径の長さに対する長径の長さの比が１．０以上１．２以下であることをいう。

図５および図６に戻って、複数の貫通孔１３は、フィルタ部１１の第１主面ＰＳ１および第２主面ＰＳ２上に周期的に配置されている。具体的には、複数の貫通孔１３は、フィルタ部１１においてマトリクス状に等間隔で設けられている。

実施の形態１では、貫通孔１３は、フィルタ部１１の第１主面ＰＳ１側、すなわちＺ方向から見て、正方形の形状を有する。なお、貫通孔１３は、Ｚ方向から見た形状が正方形に限定されず、例えば、長方形、円形、または楕円などの形状であってもよい。

実施の形態１では、フィルタ部１１の第１主面ＰＳ１に対して垂直な面に投影した貫通孔１３の形状（断面形状）は、長方形である。具体的には、貫通孔１３の断面形状は、濾過フィルタ１０の半径方向の一辺の長さが、濾過フィルタ１０の厚み方向の一辺の長さより長い長方形である。

実施の形態１では、複数の貫通孔１３は、フィルタ部１１の第１主面ＰＳ１側（Ｚ方向）から見て正方形の各辺と平行な２つの配列方向、すなわち図５中のＸ方向とＹ方向に等しい間隔で設けられている。このように、複数の貫通孔１３を正方格子配列で設けることによって、開口率を高めることが可能であり、濾過フィルタ１０に対する液体の通過抵抗を低減することができる。このような構成により、濾過の時間を短くし、濾過対象物へのストレスを低減することができる。

なお、複数の貫通孔１３の配列は、正方格子配列に限定されず、例えば、準周期配列、または周期配列であってもよい。周期配列の例としては、方形配列であれば、２つの配列方向の間隔が等しくない長方形配列でもよく、三角格子配列または正三角格子配列などであってもよい。なお、貫通孔１３は、フィルタ部１１に複数設けられていればよく、配列は限定されない。

複数の貫通孔１３の間隔は、濾過対象物である細胞の種類（大きさ、形態、性質、弾性）または量に応じて適宜設計されるものである。ここで、貫通孔１３の間隔とは、図６に示すように、貫通孔１３をフィルタ部１１の第１主面ＰＳ１側から見て、任意の貫通孔１３の中心と隣接する貫通孔１３の中心との距離ｂを意味する。周期配列の構造体の場合、貫通孔１３の間隔ｂは、貫通孔１３の形状が正方形であるとき、例えば、貫通孔１３の一辺ｄの１倍よりも大きく１０倍以下であり、好ましくは、貫通孔１３の一辺ｄの３倍以下である。あるいは、例えば、フィルタ部１１の開口率は、１０％以上であり、好ましくは、開口率は、２５％以上である。このような構成により、フィルタ部１１に対する液体の通過抵抗を低減することができる。そのため、処理時間を短くすることができ、細胞へのストレスを低減することができる。なお、開口率とは、（貫通孔１３が占める面積）／（貫通孔１３が空いていないと仮定したときの第１主面ＰＳ１の投影面積）で計算される。

フィルタ部１１の厚みは、貫通孔１３の大きさ（一辺ｄ）の０．１倍よりも大きく１００倍以下が好ましい。より好ましくは、フィルタ部１１の厚みは、貫通孔１３の大きさ（一辺ｄ）の０．５倍よりも大きく１０倍以下である。このような構成により、液体に対する濾過フィルタ１０の抵抗を低減することができ、濾過の時間を短くすることができる。その結果、濾過対象物へのストレスを低減することができる。

フィルタ部１１において、濾過対象物を含む液体が接触する第１主面ＰＳ１は、表面粗さが小さいことが好ましい。ここで、表面粗さとは、第１主面ＰＳ１の任意の５箇所において触針式段差計で測定された最大値と最小値との差の平均値を意味する。実施の形態１では、表面粗さは、濾過対象物の大きさより小さいことが好ましく、濾過対象物の大きさの半分より小さいことがより好ましい。言い換えると、フィルタ部１１の第１主面ＰＳ１上の複数の貫通孔１３の開口が同一平面（ＸＹ平面）上に形成されている。また、フィルタ部１１のうち、貫通孔１３が形成されていない部分であるフィルタ基体部１４は、繋がっており、一体に形成されている。このような構成により、フィルタ部１１の表面（第１主面ＰＳ１）への濾過対象物の付着が低減され、液体の抵抗を低減することができる。

貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口と第２主面ＰＳ２側の開口とが連続した壁面を通じて連通している。具体的には、貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口が第２主面ＰＳ２側の開口に投影可能に設けられている。すなわち、フィルタ部１１を第１主面ＰＳ１側から見た場合に、貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口が第２主面ＰＳ２側の開口と重なるように設けられている。実施の形態１において、貫通孔１３は、その内壁が第１主面ＰＳ１および第２主面ＰＳ２に対して垂直となるように設けられている。

フィルタ基体部１４を構成する材料は、金属および／または金属酸化物を主成分としている。フィルタ基体部１４は、例えば、金、銀、銅、白金、ニッケル、パラジウム、チタン、これらの合金およびこれらの酸化物であってもよい。特に、チタンや、ニッケル－パラジウム合金を使用することにより、金属の溶出が少なく、濾過対象物への影響を低減することができる。

枠部１２は、濾過フィルタ１０とホルダ２０とを接続する接続部として機能する。

また、枠部１２には、フィルタの情報（例えば、貫通孔１３の寸法など）を表示してもよい。これにより、改めて測長などを行うことなく貫通孔１３の寸法を把握したり、表裏を判別したりしやすくなる。

実施の形態１では、濾過フィルタ１０の直径は１７ｍｍであり、膜厚は１．６μｍである。フィルタ部１１の直径は１３ｍｍであり、枠部１２の幅は２ｍｍである。濾過フィルタ１０は、これらの寸法に限定されることなく、他の寸法で作製されていてもよい。

実施の形態１では、枠部１２を構成する材料は、フィルタ部１１（フィルタ基体部１４）を構成する材料と同じである。なお、枠部１２の材料とフィルタ部１１の材料とは、一体で形成されていなくてもよく、別の部材で構成されていてもよい。

＜ホルダ＞
図４Ａに示すように、ホルダ２０は、液体を導入する導入口２０ａと、液体を排出する排出口２０ｂと、導入口２０ａと排出口２０ｂとを連通する流路２０ｃとを有し、外周に溝部２１ａが形成されている。ホルダ２０は、導入口２０ａと排出口２０ｂとの間の流路２０ｃに濾過フィルタ１０を保持する。実施の形態１では、ホルダ２０は、流路２０ｃにおいて、排出口２０ｂよりも上方に濾過フィルタ１０を保持する。

ホルダ２０は、筒状に形成されている。具体的には、ホルダ２０において、導入口２０ａと排出口２０ｂとが対向して設けられている。ホルダ２０の内部において、導入口２０ａと排出口２０ｂとを連通するように流路２０ｃが設けられている。

実施の形態１では、ホルダ２０は、筒状の第１ホルダ２１と、第１ホルダ２１の内側に配置される筒状の第２ホルダ２２と、を有する。

図２および図４Ａに示すように、第１ホルダ２１は外周に溝部２１ａが形成され、溝部２１ａに後述する把持部２３の挿入部２３ａが挿入されることにより、第１ホルダ２１に把持部２３が取り付けられている。図４Ｂに示すように、把持部２３の挿入部２３ａが溝部２１ａに挿入された状態で、挿入部２３ａと溝部２１ａとの間には隙間が形成されている。具体的には、把持部２３の厚みＷ１よりも溝部２１ａの幅Ｗ２が大きく、挿入部２３ａの端面２３ａａと溝部２１ａの底部２１ａａとの間の距離Ｄ１が０より大きい。換言すると、把持部２３の挿入部２３ａと溝部２１ａとの間には、溝部２１ａの幅方向および深さ方向において、隙間が形成されている。溝部２１ａの幅方向は、図１～図３におけるＺ方向、溝部２１ａの深さ方向は、図１～図３におけるＸＹ方向である。なお、隙間は、溝部２１ａの幅方向または深さ方向の少なくともどちらか一方に形成されていればよい。

溝部２１ａの幅Ｗ２は、把持部２３の厚みＷ１の１．１倍以上２倍未満に設定される。把持部２３が第１ホルダ２１から意図せず外れることを防止するため、溝部２１ａの幅Ｗ２は、把持部２３の厚みＷ１の１．１倍以上１．５倍未満に設定されることが好ましい。また、把持部２３の挿入部２３ａの端面２３ａａと溝部２１ａの底部２１ａａとの間の距離Ｄ１は、溝部２１ａの深さＤ２の０．１倍以上０．８倍以下に設定される。より好ましくは、距離Ｄ１は、深さＤ２の０．３倍以上０．６倍以下に設定されるとよい。

このように、挿入部２３ａと溝部２１ａとの間に隙間が形成されることにより、把持部２３に対して、第１ホルダ２１を隙間の範囲で動かすことができる。このため、把持部２３を固定した状態で、第１ホルダ２１および第２ホルダ２２に保持されている濾過フィルタ１０に対して、振動を与えることができる。また、挿入部２３ａと溝部２１ａとの間の隙間により、把持部２３を容易にホルダ２０から取り外すことができる。

また、第１ホルダ２１の内部には、濾過フィルタ１０を保持する台座部２１ｂが設けられている。台座部２１ｂは、第１ホルダ２１の内壁から第１ホルダ２１の内側に向かって突出しており、第１ホルダ２１内においてリング状に形成されている。なお、台座部２１ｂは必須の構成ではなく、例えば、第１ホルダ２１または第２ホルダ２２に濾過フィルタ１０を嵌め込む溝等が形成されていてもよい。

実施の形態１では、第１ホルダ２１は、径の異なる２つの円筒が組み合わさった形状であるが、第１ホルダ２１の形状はこれに限定されない。

第２ホルダ２２は、第１ホルダ２１に嵌め込まれ、濾過フィルタ１０を第１ホルダ２１の台座部２１ｂと第２ホルダ２２の端部２２ａとで挟持している。実施の形態１では、第２ホルダ２２の外周に突起部２２ｂが形成されているが、突起部２２ｂは必須の構成ではない。

第１ホルダ２１および第２ホルダ２２を含むホルダ２０は、例えば、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリエーテルイミド、ポリアセタール、ポリエーテルエーテルケトンなどの樹脂材料で形成することができる。第１ホルダ２１および第２ホルダ２２は、異なる色で形成されていてもよい。この場合、色により、第１ホルダ２１と第２ホルダ２２とを識別しやすくなる。このため、ホルダ２０の向きを容易に判別することができる。

＜把持部＞
把持部２３は、平板状に形成され、第１ホルダ２１の溝部２１ａに挿入される挿入部２３ａと把持部本体２３ｃとを有する。把持部２３は、挿入部２３ａが第１ホルダ２１の溝部２１ａに挿入されて、第１ホルダ２１に取り付けられる。すなわち、把持部２３はホルダ２０とは別の部品として形成されており、把持部２３はホルダ２０に対して着脱可能である。

把持部２３は、例えば、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリエーテルイミド、ポリアセタール、ポリエーテルエーテルケトンなどの樹脂材料で形成することができる。把持部２３は、第１ホルダ２１および第２ホルダ２２と同じ材料で形成されていてもよいし、異なる材料で形成されていてもよい。また、把持部２３は、第１ホルダ２１および／または第２ホルダ２２と異なる色で形成されていてもよい。

把持部本体２３ｃには、ホルダ２０が挿入される貫通孔２３ｄが設けられている。挿入部２３ａは、貫通孔２３ｄの内壁である。または、貫通孔２３ｄの内壁と接続される把持部本体２３ｃの上面および下面の一部も挿入部２３ａに含まれていてもよい。挿入部２３ａには４つの切欠き部２３ｂが形成されて、切欠き部２３ｂにより、挿入部２３ａが複数に分断されている。また、切欠き部２３ｂは、把持部本体２３ｃの外周と繋がっていてもよい。繋がっていることにより、把持部２３を平板上の平面方向に移動させて、第１ホルダ２１の溝部２１ａに挿入部２３ａを挿入することができる。

貫通孔２３ｄは、上述した第１ホルダ２１の溝部２１ａと把持部２３の挿入部２３ａとの関係を満たすように、その内径Ｒ１が、第１ホルダ２１をＺ方向から見たときの溝部２１ａの底部２１ａａ（図４Ｂ参照）の直径よりも大きく、第１ホルダ２１の外周の直径よりも小さくなるように設けられる。実施の形態１では、第１ホルダ２１は径の異なる２つの円筒が組み合わさった形状であるが、この場合の外周は、溝部２１ａが形成されている外周のことである。このように貫通孔２３ｄを設けることで、把持部２３が第１ホルダ２１に接続されたときに、挿入部２３ａと溝部２１ａとの間に隙間を形成することができる。

挿入部２３ａには、４つの切欠き部２３ｂが形成されている。このため、挿入部２３ａは４つに分断されている。また、切欠き部２３ｂはホルダ２０を中心にして等間隔に設けられている。「ホルダ２０を中心にして等間隔に設けられている」とは、図３に示すように、ホルダ２０の中心を軸として、それぞれの切欠き部２３ｂが回転対称をなすように配置されていることを示す。実施の形態１では、それぞれの切欠き部２３ｂは、ホルダ２０を中心にしてそれぞれ９０度の間隔で配置されている。なお、切欠き部２３ｂの配置間隔はこれに限定されず、等間隔であればよい。この場合、それぞれの挿入部２３ａは第１ホルダ２１を中心軸とする回転対称をなすように配置される。このような構成によると、把持部２３を第１ホルダ２１に取り付けた際の安定性を向上することができる。なお、切欠き部２３ｂは必須の構成ではなく、設けられていなくてもよい。また、切欠き部２３ｂが等間隔に設けられていなくても構わない。

図２に示すように、第１ホルダ２１を、Ｚ方向から把持部２３の貫通孔２３ｄに挿入することにより、第１ホルダ２１と把持部２３とを接続することができる。上述した挿入部２３ａと溝部２１ａとの大きさの関係により、貫通孔２３ｄの内径Ｒ１は、第１ホルダ２１の外径よりも小さい。しかし、第１ホルダ２１を貫通孔２３ｄにＺ方向に押し込むことにより、挿入部２３ａがその応力により撓むため、挿入部２３ａを溝部２１ａに挿入することができ、第１ホルダ２１と把持部２３とを接続することができる。このような構成により、第１ホルダ２１に把持部２３が接続された状態において、溝部２１ａと挿入部２３ａとの間に隙間が生じる。このため、把持部２３を固定したときに、ホルダ２０を振動させることができ、逆に、ホルダ２０を固定したときに、把持部２３を回転させることができる。

図７は、本発明の実施の形態１に係る濾過回収装置１Ａを遠沈管４０に取り付けた状態を示す概略図である。図７に示すように、把持部２３を有することにより、濾過回収装置１Ａが把持部２３により遠沈管４０に保持される。具体的には、遠沈管４０の開口に濾過回収装置１Ａを取り付ける場合、把持部２３が遠沈管４０の開口を画定する開口端部に載置される。このようにして、把持部２３が遠沈管４０の開口端部によって保持される。

濾過回収装置１Ａを遠沈管４０に取り付けたとき、把持部２３の挿入部２３ａに形成された４つの切欠き部２３ｂが、遠沈管４０の内部と外部との間で空気を通過させる通気口となり、遠沈管４０の内圧が上昇することを防止することができる。すなわち、遠沈管４０の内部と外部とで気圧差が小さくなるため、濾過回収装置１Ａに液体を導入する際に、遠沈管４０の内圧が上昇することによる液体の通過抵抗を低減することができる。このような構成により、濾過の時間を短くし、濾過対象物へのストレスを低減することができる。

また、把持部２３の挿入部２３ａに切欠き部２３ｂが形成されていることにより、濾過回収装置１Ａを遠沈管４０に取り付けた状態で、切欠き部２３ｂから遠沈管４０に排出された液体の状態を目視で確認することができる。

さらに、遠沈管４０に排出された液体に、切欠き部２３ｂからピペット等で、例えば試薬等の追加の液体を投入したり、遠沈管４０に排出された液体の一部を抽出したりすることができる。

把持部２３の遠沈管４０との接触部分に１つまたは複数の凸部が設けられていてもよい。このような構成によると、濾過回収装置１Ａに液体を導入している間に、ホルダ２０に対してより振動を与えやすく、液体の通液性および濾過対象物の回収率を向上することができる。

［濾過回収方法］
濾過回収装置１Ａによる懸濁液の濾過回収方法の一例を説明する。

（１）図７に示すように、濾過回収装置１Ａを遠沈管４０に取り付ける。このとき、把持部２３が遠沈管４０の開口端部で保持される。

（２）濾過回収装置１Ａのホルダ２０の導入口２０ａから、濾過対象物を含む液体をホルダ２０内部の流路２０ｃに導入する。把持部２３の挿入部２３ａと第１ホルダ２１の溝部２１ａとの間には隙間が形成されているため、把持部２３が遠沈管４０の開口端部に固定されたときに、ホルダ２０を振動させることができる。このため、液体を導入している間に、液体が流れる際の衝撃によりホルダ２０が不規則に振動する。この不規則な振動により、濾過フィルタ１０のフィルタ基体部１４に付着した貫通孔１３よりも小さい濾過対象物が遠沈管４０に落下するため、濾過フィルタ１０の目詰まりを防止することができる。その結果、液体の通液性を向上することもできる。

（３）遠沈管４０に排出された液体をピペット等で抽出する。遠沈管４０に排出された液体には、所望の大きさよりも小さい濾過対象物、すなわちフィルタ部１１の貫通孔１３を通過する大きさの濾過対象物が含まれている。

（４）濾過フィルタ１０をホルダ２０から取り外し、例えば緩衝液中に投入して濾過フィルタ１０に付着した濾過対象物を分離する。

このように、濾過フィルタ１０の貫通孔１３を通過する大きさの濾過対象物と、貫通孔１３よりも大きい濾過対象物とを分画することができる。

［効果］
実施の形態１に係る濾過回収装置１Ａによれば、以下の効果を奏することができる。

濾過回収装置１Ａは、ホルダ２０と、濾過フィルタ１０と、把持部２３とを備える。ホルダ２０は、導入口２０ａ、排出口２０ｂ、および導入口２０ａと排出口２０ｂとを連通する流路２０ｃを有し、外周に溝部２１ａが形成されている。濾過フィルタ１０は、ホルダ２０の流路２０ｃに配置され、複数の貫通孔１３を有する。把持部２３は、溝部２１ａに挿入される挿入部２３ａを有する。溝部２１ａと挿入部２３ａとの間に隙間が形成されている。このため、把持部２３を固定した状態で濾過回収装置１Ａに液体を導入すると、ホルダ２０を振動させることができる。

このような構成により、濾過回収装置１Ａに濾過対象物を含む液体を導入したときに、濾過フィルタ１０のフィルタ基体部１４に付着した貫通孔１３よりも小さい濾過対象物が遠沈管４０に落下するため、目詰まりの発生を低減して、通液性を向上することができる。

また、溝部２１ａと挿入部２３ａとの間の隙間により、ホルダ２０を固定したときにホルダ２０を中心に把持部２３を回転させることができる。例えば、ホルダ２０に濾過フィルタ１０を装着したまま顕微鏡による観察を行う場合に、誤って把持部２３に触れてしまっても、把持部２３が回転するため、観察域を変化させることを防止することができる。

また、濾過回収装置１Ａは、濾過フィルタ１０、ホルダ２０、および把持部２３に分解することができる。例えば、複数の濾過回収装置１Ａを同一容器内に梱包して搬送や保管する場合、ある濾過回収装置１Ａに接続された把持部２３が、別の濾過回収装置１Ａの濾過フィルタ１０に接触してしまい、濾過フィルタ１０が破損してしまう場合がある。しかし本発明に基づき、ホルダ２０と把持部２３を分解することによって、梱包の際に把持部２３により濾過フィルタ１０を破損させることを防止することができる。

把持部２３がホルダ２０から取り外し可能であるため、把持部２３同士を干渉させずに複数の濾過回収装置１Ａを重ねて使用することができる。

また、把持部２３がホルダ２０から取り外し可能であるため、把持部２３同士を干渉させずに複数の濾過回収装置１Ａを平面上に多数並べて使用することができる。把持部２３がホルダ２０に固定されたセルストレーナーが接続された遠沈管４０等の複数の通液用容器を、同時に同じ平面上で使用することがある。この場合、把持部２３が干渉するため、通液用容器間には一定の配置間隔が必要となる。このため、限られた作業平面において、複数のセルストレーナーを同時に使用することが困難である。例えば、図３に示すように、Ｚ方向から見たときに、濾過回収装置１Ａが収まる円Ｃ１より外側に、隣接する濾過回収装置１Ａが接続された通液用容器を配置することになる。

しかし、把持部２３をホルダ２０から取り外せば、隣接する濾過回収装置１Ａが接続された通液用容器を、図３に示す円Ｃ２、すなわちホルダ２０の外周まで近接させることがでる。このため、限られた作業平面において、より多くの数の濾過回収装置１Ａを同時に使用することができる。

また、挿入部２３ａに、複数の切欠き部２３ｂが形成されている。この場合、濾過回収装置１Ａを、例えば遠沈管４０に取り付けた際に、切欠き部２３ｂは、遠沈管４０の内部と外部との間で空気を通過させる通気口となり、遠沈管４０の内圧が上昇することを防止することができる。したがって、さらに通液性を向上することができる。

また、複数の切欠き部２３ｂは、ホルダ２０に対して等間隔に形成されている。この場合、把持部２３をホルダ２０に取り付けた際の安定性を向上することができる。

また、把持部２３は、主面を有する平板状に形成され、主面に１つまたは複数の凸部が形成されていてもよい。この場合、濾過回収装置１Ａに液体を導入している間に、ホルダ２０に対してより振動を与えやすく、液体の通液性および濾過対象物の回収率を向上することができる。

濾過フィルタ１０は、金属および金属酸化物のうち少なくともいずれかを主成分とする。このような構成により、濾過対象物を容易に回収することができ、回収率を向上させることができる。例えば、樹脂フィルタにおいては、貫通孔の寸法および配置にばらつきがあり、濾過対象物が貫通孔に入り込んでしまう場合がある。金属および金属酸化物のうち、少なくともいずれかを主成分とする濾過フィルタ１０においては、貫通孔の寸法および配置が樹脂フィルタに比べて均等に設計されている。このため、濾過回収装置１Ａでは、金属および金属酸化物のうち少なくともいずれかを主成分とする濾過フィルタ１０を用いることによって、濾過対象物を回収する際、濾過フィルタ１０から濾過対象物を剥離しやすくなり、樹脂フィルタに比べて回収率を向上させることができる。

なお、実施の形態１では、濾過フィルタ１０は金属製フィルタである例を説明したが、これに限定されない。濾過フィルタ１０は、液体に含まれる濾過対象物を濾過することができる膜状もしくはシート状の物質であればよい。

実施の形態１では、濾過回収装置１Ａは、１つの濾過フィルタ１０を備える例について説明したが、これに限定されない。濾過回収装置１Ａは、複数の濾過フィルタを備えてもよい。濾過回収装置１Ａが複数の濾過フィルタを備える場合、複数の濾過フィルタは、液体が流れる方向に直列に配置されてもよい。また、複数の濾過フィルタの貫通孔の寸法は、異なっていてもよい。例えば、複数の濾過フィルタは、液体が流れる上流側から、貫通孔の寸法が大きい順に直列に配置されていてもよい。このような構成により、一度にサイズの異なる濾過対象物を濾過し、回収することができる。

実施の形態１では、濾過対象物を細胞、液体を細胞懸濁液として説明したが、これに限定されない。

実施の形態１では、ホルダ２０は第１ホルダ２１と第２ホルダ２２とで構成される例について説明したが、これに限定されない。ホルダ２０は、第１ホルダ２１と第２ホルダ２２とが一体形成されていてもよいし、２つ以上のパーツで構成されていてもよい。

実施の形態１では、濾過フィルタ１０の枠部１２は、全周にわたって第１ホルダ２１と第２ホルダ２２とによって挟持されている例について説明したが、これに限定されない。例えば、枠部１２は、第１ホルダ２１と第２ホルダ２２とによって部分的に挟持されていてもよい。このような構成により、濾過フィルタ１０の径方向外側に引っ張る力を抑制することができる。その結果、濾過中に濾過フィルタ１０が破損することを抑制することができる。

実施の形態１では、濾過を行う際に、濾過回収装置１Ａを遠沈管４０に取り付ける例について説明したが、これに限定されない。濾過を行う際には、濾過回収装置１Ａは、遠沈管以外の容器または装置などに取り付けられていてもよい。

実施の形態１では、濾過フィルタ１０は、ホルダ２０の内壁に対して略垂直に配置される例について説明したが、これに限定されない。濾過フィルタ１０は、ホルダ２０の内壁に対して斜めに配置されていてもよい。

また、実施の形態１では、４つの切欠き部２３ｂか形成されている例について説明したが、これに限定されない。切欠き部２３ｂは、１つまたは複数であってもよい。

図８Ａは、実施の形態１に係る変形例の濾過回収装置１Ｂの概略斜視図である。図８Ｂは、図８Ａの濾過回収装置１Ｂの概略平面図である。図８Ｃは、図８Ａの濾過回収装置１Ｂの分解斜視図である。

図８Ａ～図８Ｃに示す濾過回収装置１Ｂのように、把持部２４がＺ方向からみて凹状に形成されていてもよい。「把持部２４が凹状に形成されている」とは、切欠き部のうちの１つである切欠き部２４ｄが、把持部本体２４ｃの外周と繋がって形成されていることを示す。なお、外周と繋がって形成される切欠き部２４ｄは、図８Ａ～図８Ｃに示すものに限らず、切欠き部２４ｂが外周と繋がって形成されていてもよい。図８Ｃに示すように、把持部本体２４ｃの外周と繋がっている切欠き部２４ｄに、矢印Ｌの方向にホルダ２０を移動させることにより、ホルダ２０と把持部２４とを接続することができる。このため、把持部２４とホルダ２０との着脱がさらに容易になる。

図９は、本発明の実施の形態１に係る別の変形例の濾過回収装置１Ｃの概略平面図である。図９に示すように、把持部２５の挿入部２５ａに設けられた切欠き部２５ｂの形状および大きさが異なっていてもよい。

切欠き部２５ｂの大きさを、上述の切欠き部２３ｂの大きさよりも小さくすることにより、遠沈管４０の内部と外部との間の通気口の役割を担う部分が小さくなるため、液体が濾過フィルタ１０を通過する速度を遅くすることができる。このように、切欠き部の大きさを調整することにより、液体が濾過フィルタ１０を通過する速度を調整することができる。

また、この場合、挿入部２５ａが、上述の挿入部２３ａよりも幅広に形成されるため、把持部２５がホルダ２０に接続されたときの安定性を向上することができる。

（実施の形態２）
本発明の実施の形態２に係る濾過回収装置について説明する。

実施の形態２では、主に実施の形態１と異なる点について説明する。実施の形態２においては、実施の形態１と同一または同等の構成については同じ符号を付して説明する。また、実施の形態２では、実施の形態１と重複する記載は省略する。

実施の形態２では、濾過回収装置が複数の把持部を有する点で、実施の形態１と異なる。

図１０は、本発明の実施の形態２に係る濾過回収装置１Ｄの一例の概略構成図である。図１１は、図１０の濾過回収装置１Ｄの別の概略構成図である。図１２は、図１１の濾過回収装置１Ｄの平面図である。図１３Ａは、図１２の濾過回収装置１ＤのＢ－Ｂ断面図である。図１３Ｂは、図１３Ａの濾過回収装置１Ｄの一部を拡大した拡大断面図である。

図１０～図１２に示すように、濾過回収装置１Ｄは、複数の把持部２６、２７を有する。複数の把持部２６、２７は平板状に形成され、厚み方向（Ｚ方向）に重ねて配置されている。図１０に示すように、実施の形態２では、複数の把持部２６、２７は、同一の形状のものが厚み方向に重ねて配置されている。把持部２６は、挿入部２６ａと切欠き部２６ｂとを有する。把持部２７も同様に、挿入部２７ａと切欠き部２７ｂとを有する。図１１および図１２に示すように、把持部２６と把持部２７とは、ホルダ２０を中心として個別に回転させることができる。このような構成により、２つの切欠き部２６ｂ、２７ｂで形成される穴の大きさを変えることができる。２つの切欠き部２６ｂ、２７ｂで形成される穴は、例えば、濾過回収装置１Ｄを遠沈管等に取り付けた際に、遠沈管の内部と外部との間の通気口として機能する。

図１３Ａに示すように、実施の形態２では、第１ホルダ２１に形成された溝部２１ａに、把持部２６の挿入部２６ａと把持部２７の挿入部２７ａとが挿入されることにより、第１ホルダ２１に把持部２６および把持部２７が取り付けられている。溝部２１ａは、図１３Ｂに示すように、把持部２６および把持部２７が溝部２１ａに挿入されたときに、挿入部２６ａおよび挿入部２７ａと溝部２１ａとの間に隙間が形成されている。具体的には、把持部２６と把持部２７とを重ねたときの厚みＷ３よりも溝部２１ａの幅Ｗ４が大きく、挿入部２６ａの端面２６ａａまたは挿入部２７ａの端面２７ａａと溝部２１ａの底部２１ａａとの間の距離Ｄ３が０より大きい。すなわち、把持部２６の挿入部２６ａおよび把持部２７の挿入部２７ａと溝部２１ａとの間には、溝部２１ａの幅方向および深さ方向において、隙間が形成されている。溝部２１ａの幅方向は、図１０～図１２におけるＺ方向、溝部２１ａの深さ方向は、図１０～図１２におけるＸＹ方向である。なお、隙間は、溝部２１ａの幅方向または深さ方向の少なくともどちらか一方に形成されていればよい。

溝部２１ａの幅Ｗ４は、把持部２６と把持部２７とを重ねたときの厚みＷ３の１．１倍以上２倍未満に設定される。把持部２６および把持部２７が意図せず外れることを防止するため、溝部２１ａの幅Ｗ４は、把持部２６と把持部２７とを重ねたときの厚みＷ３の１．１倍以上１．５倍未満に設定されることが好ましい。また、挿入部２６ａの端面２６ａａおよび挿入部２７ａの端面２７ａａと溝部２１ａの底部２１ａａとの距離Ｄ３は、溝部２１ａの深さＤ４の０．１倍以上０．８倍以下に設定される。より好ましくは、距離Ｄ３は深さＤ４の０．３倍以上０．６倍以下に設定されるとよい。

なお、把持部２６と把持部２７とは、厚みが異なるように形成されていてもよい。

［効果］
実施の形態２に係る濾過回収装置１Ｄによれば、以下の効果を奏することができる。

濾過回収装置１Ｄでは、２つの把持部２６、２７が厚み方向に重ねて配置されている。このような構成により、例えば遠沈管に濾過回収装置１Ｄを取り付けたとき、把持部２６または把持部２７のどちらか一方を回転させることにより、遠沈管の内部と外部との間で空気を通過させる通気口の大きさ変化させることができる。なお、通気口とは、上述した２つの切欠き部２６ｂ、２７ｂにより形成される穴である。例えば、濾過回収装置１Ｄに液体を導入中に通気口の大きさを変えることにより、液体が濾過フィルタ１０を通過する速度を調整することができる。

（実施例）
実施例１として、実施の形態１の濾過回収装置１Ａを用いて、細胞懸濁液に含まれる細胞塊およびシングル細胞の分画を行い、濾過フィルタ１０を通過した細胞懸濁液、および濾過フィルタ１０に捕捉された細胞塊に対して評価を行った。また、比較例１を用いて、実施例１と同様の条件にて評価を行った。

＜実施例１の濾過回収装置＞
実施例１で濾過回収装置１Ａの構成は、実施の形態１で述べているため説明を省略する。

＜比較例１の濾過回収装置＞
図１４は、比較例１の濾過回収装置１０１Ａの概略構成図である。図１４に示すように、比較例１の濾過回収装置１０１Ａは、導入口、排出口および導入口と排出口とを連通する流路１２０ｃを有するホルダ１２０と、流路１２０ｃに配置される濾過フィルタ１１０とを備える。ホルダ１２０は、把持部１２１ａが一体形成された第１ホルダ１２１と第１ホルダ１２１に嵌め込まれる第２ホルダ１２２とを有する。その他の構成は、実施例１の濾過回収装置１Ａと同一である。

実施例１の濾過回収装置１Ａ、および比較例１の濾過回収装置１０１Ａには、同一の濾過フィルタを配置した。この濾過フィルタは、正方形の貫通孔が正方格子配列で設けられており、正方形の一辺の長さｄ（図６参照）は３０μｍ、格子間隔ｂ（図６参照）は４２μｍ、濾過フィルタの厚みは１．６μｍである。また、濾過フィルタの材質はＮｉである。

＜細胞懸濁液＞
クラレ社製Ｍｉｃｒｏ－Ｓｐａｃｅ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｐｌａｔｅ（品番ＭＰｃ ５００ ６）の１ウェルあたりにＤＭＥＭ培地（１ ｇ／Ｌ Ｇｌｕｃｏｓｅ ｗｉｔｈ Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ ａｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ｐｙｒｕｖａｔｅ － １０％ ＦＢＳ）を２ｍｌ投入し、マウス胎児線維芽細胞（ＭＥＦ細胞）を１ウェルあたりに１×１０^６個を播種して細胞塊を作製した。培養７日目にプレートから細胞塊を抽出し、ＤＭＥＭ培地で調整して、細胞塊濃度が３０個／ｍｌの細胞懸濁液を２０ｍｌ作製した。この細胞懸濁液を顕微鏡で観察し、細胞塊１０個の平均値、最小値、および最大値を計測したところ、細胞塊を球形近似した場合の直径は１１０±４０μｍであった。図１５は、作製した細胞懸濁液を観察した顕微鏡写真である。図１５に示すように、３個の細胞塊と、細胞塊になりきっていない１６個のシングル細胞とが観察された。なお、顕微鏡の視野面積は、１．７０×１．１７ｍｍ^２である。図１５の顕微鏡写真において、大きな塊が細胞塊であり、白い球形の像がシングル細胞である。なお、シングル細胞には顕微鏡の焦点が合っていないため、シングル細胞の大きさは実際よりも大きく見えている。

＜評価方法＞
実施例１の濾過回収装置１Ａ、および比較例１の濾過回収装置１０１Ａを、それぞれ５０ｍｌの遠沈管に取り付けて、上述の細胞懸濁液をそれぞれの濾過回収装置に対して１０ｍｌ導入し、さらにその後、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を４０ｍｌ導入した。

実施例１の濾過回収装置１Ａに細胞懸濁液およびＰＢＳを導入している間、濾過回収装置１Ａが遠沈管上でカタカタと音をたて不規則に振動する様子を目視で観察した。

一方、比較例１の濾過回収装置１０１Ａに細胞懸濁液およびＰＢＳを導入している間、濾過回収装置１０１Ａが遠沈管に対して静置している様子を目視で観察した。

細胞懸濁液およびＰＢＳの導入から２０秒後に、遠沈管の目盛りを使用して目視測定した遠沈管の液量は、実施例１では４８ｍｌ、比較例１では４４ｍｌであった。

遠沈管に排出された液体をピペットで抽出し、顕微鏡により観察を行った。図１６は、実施例１の濾過回収装置１Ａから排出された液体の顕微鏡写真である。図１７は、比較例１の濾過回収装置１０１Ａから排出された液体の顕微鏡写真である。なお、顕微鏡の視野面積は、１．７０×１．１７ｍｍ^２である。

図１６に示すように、実施例１では１４個のシングル細胞が観察された。また、図１７に示すように、比較例１では、５個のシングル細胞が観察された。

次に、濾過フィルタに捕捉された細胞を観察した。ＰＢＳ１０ｍｌを投入した２０ｍｌビーカーに、実施例１および比較例１それぞれの濾過回収装置から取り外した濾過フィルタを投入し、濾過フィルタに付着した細胞を分離した。ビーカー内の液体を顕微鏡で観察した。

図１８は、実施例１の濾過回収装置１Ａにより捕捉された細胞の顕微鏡写真である。図１９は、比較例１の濾過回収装置１０１Ａにより捕捉された細胞の顕微鏡写真である。なお、顕微鏡の視野面積は、１．７０×１．１７ｍｍ^２である。

実施例１および比較例１のどちらの場合も、細胞塊が観察された。図１８に示すように、実施例１では、２個の細胞塊が観察され、さらに１個のシングル細胞が観察された。なお、図１８において、中央から右上に見られる粒子状物質は細胞以外の微粒子である。

図１９に示すように、比較例１では、１個の細胞塊が観察され、さらに１２個以上のシングル細胞が観察された。

＜考察＞
図２０は、実施例１および比較例１の顕微鏡による観察結果を示す表である。図２０に示すように、実施例１では、遠沈管に排出された液体中にシングル細胞が多く観察され、比較例１では、濾過フィルタに捕捉された細胞中にシングル細胞が多く観察された。

実施例１では、液体の導入中の濾過回収装置１Ａの不規則な振動により通液性が向上したため、シングル細胞が濾過フィルタから効率よく落下および通過し、比較例１と比べて多くの液体が遠沈管に排出された。

また、実施例１では、濾過回収装置１Ａの不規則な振動により、濾過フィルタに付着したシングル細胞が遠沈管内に落下して濾過フィルタを通過できた。この結果、遠沈管に排出された液体において、実施例１では比較例１よりも多くのシングル細胞を観察することができた。

一方、濾過フィルタに捕捉された細胞を観察した結果、比較例１では多くのシングル細胞が観察された。比較例１では、液体の導入中に濾過回収装置１０１Ａが遠沈管に対して静置していたため、図６に示す濾過フィルタのフィルタ基体部１４にシングル細胞が付着したままであったことを示している。

上述の評価により、実施例１の濾過回収装置１Ａのように、液体の導入中に不規則な振動が発生することにより、細胞の分画を効率よく行うことができることがわかった。

本発明は、添付図面を参照しながら好ましい実施形態に関連して十分に記載されているが、この技術の熟練した人々にとっては種々の変形や修正は明白である。そのような変形や修正は、添付した特許請求の範囲による本発明の範囲から外れない限りにおいて、その中に含まれると理解されるべきである。

本発明の濾過回収装置は、流体中の生物由来物質を高回収率で回収する用途に有用であり、再生医療産業や食品産業等への応用が効果的である。

１Ａ、１Ｂ、１Ｃ、１Ｄ 濾過回収装置
１０ 濾過フィルタ
２０ ホルダ
２０ａ 導入口
２０ｂ 排出口
２０ｃ 流路
２１ 第１ホルダ
２１ａ 溝部
２２ 第２ホルダ
２３、２４、２５、２６、２７ 把持部
２３ａ、２４ａ、２５ａ、２６ａ、２７ａ 挿入部
２３ｂ、２４ｂ、２５ｂ、２６ｂ、２７ｂ 切欠き部
１０１Ａ 濾過回収装置
１１０ 濾過フィルタ
１２０ ホルダ
１２０ｃ 流路
１２１ 第１ホルダ
１２１ａ 把持部
１２２ 第２ホルダ