JPWO2014203362A1 - ジンセノサイド組成物 - Google Patents

Abstract

経口用の組成物や身体関連の非経口用の組成物の用途に有用な薬用人参由来のジンセノサイド組成物を提供することを目的とする。いずれもジンセノサイドであるＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの３成分を必須成分として含有するものであって、三角図表の３頂点をＡ，Ｂ，Ｃとし、Ａ→Ｂ辺にはＣＹの０→１の目盛りを付し、Ｂ→Ｃ辺にはＣＫの０→１の目盛りを付し、Ｃ→Ａ辺にはＰＰＴの０→１の目盛りを付し、かつこれらの目盛りは三角図表の外側に張り出した延長線の内向き方向に読むものとするとき、前記の３成分ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの合計重量に対する各成分の重量割合が、特定の３点（すなわちＰ１，Ｐ２，Ｐ３の3点）で囲まれた領域内にあるジンセノサイド組成物である。

Description

本発明は、経口用の組成物（食品、栄養補助食品、健康食品、機能性食品、医薬品など）、身体関連の非経口用の組成物（化粧料、育毛剤、入浴剤など）の用途に有用な薬用人参由来のジンセノサイド組成物に関するものである。

［用語の説明と略称］
本発明の組成物を構成する３つの成分のそれぞれは、いずれも正式な化学名があるが、煩雑である上に紛らわしいので、本発明を説明するにあたっては慣用的な略称である「ＣＹ」、「ＣＫ」、「ＰＰＴ」の用語を使うことにする。

（ＣＹについて）
「ＣＹ」は、「コンパウンドＹ（化合物Ｙ）」と通称されるジオール系のジンセノサイドであって、その化学名は、
「２０−Ｏ−［α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２０（Ｓ）プロトパナキサジオール」
である。

（ＣＫについて）
「ＣＫ」は、「コンパウンドＫ（化合物Ｋ）」と通称されるジオール系のジンセノサイドであって、その化学名は、
「２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−２０（Ｓ）−プロトパナキサジオール」
であり、
「２０（Ｓ）−プロトパナキサジオール−２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド」
とも称される。
「ＣＫ」は、「ジンセノサイドＭ１」または単に「Ｍ１」と称されることもある。

（ＰＰＴについて）
「プロトパナキサトリオール」は、本明細書においては「ＰＰＴ」と称することにする。「ＰＰＴ」は、「Ｍ４」とも通称される。
「ＰＰＴ」は、「真正サポニゲン」または「真正アグリコン」とも称される。
「ＰＰＴ」は、トリオール系のジンセノサイドである「Ｆ１」と通称される「２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−２０（Ｓ）プロトパナキサトリオール」またはＲｈ１と通称される「６−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−２０（Ｓ）プロトパナキサトリオール」からグルコシド基が外れたものに相当する。

（英文表記と片仮名表記について）
なお、英文表記の「ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ」の部分は、「ジンセノサイド」や「ジンセノシド」や「ギンセノシド」などと片仮名表記される。
英文表記の「ｐａｎａｘａ」の部分は、「パナキサ」や「パナクサ」と片仮名表記される。（ただし、特表２０１０−５２０８９４においては、英文表記が「ｐａｎｘａ」とされており、「パンキサ」と片仮名表記されている。）
本発明の出願に先立つ従来技術の検索（特許電子図書館のデータベースを利用）にあたっては、それらの同義語にも配慮して検索を行っている。

［各種のジンセノサイドについて］
−１−
薬用人参の有用成分であるサポニンは、ジンセノサイドと称される。現在においては、４０種類以上のジンセノサイドが知られている。
ジンセノサイドは、ジオール系とトリオール系とオレアノイック系とに大別されるが、その中でも重要なものがジオール系とトリオール系である。前者のジオール系は中枢神経の沈静化に作用し、後者のトリオール系は中枢神経の興奮化に作用すると言われている。

−２−
生の薬用人参（たとえば高麗人参）にはジオール系のメイジャージンセノサイドであるジンセノサイドＲｂ１やトリオール系のメイジャージンセノサイドであるジンセノサイドＲｅが多く含まれているが、それらのメイジャージンセノサイドを摂取しても人の体内に吸収されにくい。
これらのメイジャージンセノサイドについては、腸内細菌が分泌するβ−グルコシダーゼによりメイジャージンセノサイドの糖鎖が分解されてマイナーサポニン（マイナージンセノサイド）になることにより、体内への吸収が容易になってくる。
ジオール系マイナージンセノサイドには多種のものがあるが、本発明者らが着目しているジンセノサイドＣＹやＣＫもその範疇（ジオール系）に含まれる。
トリオール系マイナージンセノサイドにも多種のものがあるが、本発明者らが着目しているジンセノサイドであるプロトパナキサトリオール（ＰＰＴ）もその範疇（トリオール系）に含まれる。

−３−
さて、生の薬用人参（たとえば高麗人参）、それを乾燥した白参、生の高麗人参を蒸気で蒸して乾燥させた紅参などには、上述のジンセノサイドＣＫ、ジンセノサイドＣＹ、プロトパナキサトリオール（ＰＰＴ）は、いずれも含まれていない。
これらのＣＫ、ＣＹ、ＰＰＴは、上述のように、人の腸内微生物により糖質が分解されてはじめて生成するものである。
しかしながら、人の腸内環境は様々であって、ジンセノサイドの糖鎖を分解できない人も、たとえば４人に１人というように、決して少なくはないと言われている。

−４−
ジンセノサイドＣＫについては、現在までに、多くの研究者によって、抗癌活性、皮膚への効果、血流の改善、抗炎症作用、糖尿病の改善、抗ストレス作用、抗うつ作用、肝臓保護効果などが報告されている。
ジンセノサイドＣＹは、上記のＣＫの原料となるほか、それ自体も薬理活性のあるジンセノサイドでもある。
トリオール系ジンセノサイドについては、その抗炎症作用や抗アレルギー作用などが報告されている。ただし、多くはＦ１やＲｈ１（部位は異なるが、いずれもグルコシド基付きのＰＰＴである）についての報告であり、ＰＰＴについては文献が少ない。

［特許文献１〜８について］
（特許文献１）
特開平９−１７６０１７（特許文献１）にはＭｃまたはＣＫまたはＰＰＴまたはＣＹを有効成分として含有する制癌剤が示されている。
ただし、この文献には、それらのうちの任意の２者またはそれ以上を併用することについては何の記載も示唆もない。また、制癌剤以外の使い方についても何の記載も示唆もない。
念のため注記すると、この特許文献１における「Ｍｃ」の化学名は「２０−Ｏ−［α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２０（Ｓ）プロトパナキサジオール」であって、「ＣＹ」の化学名である「２０−Ｏ−［α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２０（Ｓ）プロトパナキサジオール」とは別物質である。（Ｍｃの「フラノシル」は５員環、ＣＹのピラノシルは６員環。）

（特許文献２）
特開２００３−２１２７７６（特許第４５４９６２５号）（特許文献２）の請求項２には、化合物Ｋ（つまりＣＫ）、Ｆ１および化合物Ｙ（つまりＣＹ）の混合物からなる微細乳化粒子が示されている。ただし、ＰＰＴについては記載がない。

（特許文献３）
特表２００４−５１９２２４（特許第４９５３５４７号）（特許文献３）には、基質がプロトパナキサジオール系ジンセノサイドおよびプロトパナキサトリオール系ジンセノサイドであり、反応生成物がＣＫやアグリコンなどであるジンセノサイドグルコシダーゼが示されている。

（特許文献４）
特開２００４−４９１５４（特許第３６７８３６２号）（特許文献４）には、人参を特定の菌株により発酵して得られる発酵人参であって、当該発酵人参中に「Ｍ１（つまりＣＫ）」並びに「Ｍ４（つまりＰＰＴ）」を含有する発酵人参の製造法が示されている。ただし、ＣＹについては記載がない。

（特許文献５）
特開平１０−９９０９４（特許文献５）には、プレボテラ属Ｓ−１菌株を、薬用人参サポニンを添加した培地に培養し、化合物Ｋ（つまりＣＫ）および化合物Ｙ（つまりＣＹ）を生成蓄積させるプロトパナキサジオールサポニン代謝産物の製造法が示されている。

（特許文献６）
特表２００８−１５５９９８（特許文献６）には、朝鮮人参エキスを有効成分として含有する抗不安抗うつ剤が示されており、Ｍ１（ＣＫのこと）とＭ４（ＰＰＴのこと）との含有量比（Ｍ１／Ｍ４）が１以上であることについても記載がある（請求項６）。この賦活剤の用途は、医薬組成物、食品組成物または飼料組成物である（請求項７）。

（特許文献７）
特表２００８−１５５９９９（特許文献７）には、朝鮮人参エキスを有効成分として含有するＧＡＢＡ作動性ニューロン賦活剤が示されており、Ｍ１（ＣＫのこと）とＭ４（ＰＰＴのこと）との含有量比（Ｍ１／Ｍ４）が１以上であることについても記載がある（請求項６）。この賦活剤の用途は、医薬組成物、食品組成物または飼料組成物である（請求項７）。

（特許文献８）
特開２０１０−１３２６２５（特許文献８）には、Ｍ１（ＣＫのこと）とＭ４（ＰＰＴのこと）との含有量比（Ｍ１／Ｍ４）が１以上である抗糖尿病剤が示されている（請求項７）。

特開平９−１７６０１７ 特開２００３−２１２７７６（特許第４５４９６２５号） 特表２００４−５１９２２４（特許第４９５３５４７号） 特開２００４−４９１５４（特許第３６７８３６２号） 特開平１０−９９０９４ 特表２００８−１５５９９８ 特表２００８−１５５９９９ 特開２０１０−１３２６２５

（特許文献１〜８に記載の事項）
上記の特許文献１〜８に記載のジンセノサイド成分を、本発明の必須のジンセノサイド３成分と対比してみると、次の表１のようになる（○は記載あり、×は記載なし）。
表１のように、これらの特許文献１〜８には、本発明の必須の３成分（ＣＹとＣＫとＰＰＴとの３成分）の全てを含有する組成物については記載がない。

（特許文献１）
−１−
特許文献１の請求項、段落０００３〜０００５、段落０００９の製剤例１、段落００１０の製剤例２、実施例１にかかる表１、実施例２にかかる表２と表３、実施例３にかかる表４の直後の箇所、段落００１４の発明の効果の箇所には、「ジンセノシドＭｃ」または「化合物Ｋ」または「化合物Ｙ」または「ＰＰＴ」の個々を有効成分として含有する制癌剤が示されている。

−２−
しかしながら、特許文献１の表１、表２、表３、表４のように、細胞障害活性試験、増殖阻害試験、遊走阻害試験、基底膜浸潤抑制試験は全て上記４つのジンセノサイド成分のうち「個々のジンセノサイド成分」について行っており、これら４つの成分のうちの２成分以上を併用した試験は行っていない。
また、特許文献１の発明は制癌剤に関するものであって、制癌剤以外の目的ないし用途については記載がない。

（特許文献２）
特許文献２には、「ＣＹ（化合物Ｙ）」と「ＣＫ（化合物Ｋ）」との併用、さらにはこれらの２成分と２０（Ｓ）部位がＯ−Ｇｌｕ基である「ｇ−ＰＰＴ」との併用については記載がある。しかしながら、「ＣＹ（化合物Ｙ）」と「ＣＫ（化合物Ｋ）」と「ＰＰＴ」との３成分を含むものを使用することについては何の記載もない。

（特許文献３）
特許文献３の表１〜６、表８〜９、表１２には、酵素による加水分解によりＣＫ、Ｆ２，アグリコンなどを含む反応生成物が得られることにつき記載があるが、本発明のように「ＣＹ，ＣＫおよびＰＰＴ」の３成分を含むものを得ることについては何の記載もない。ちなみに、Ｆ２は「ＣＫ」の前駆物質である。

（特許文献４〜８）
特許文献４〜８には、「ＣＹおよびＣＫ」を含むジンセノサイド組成物、あるいは「ＣＫおよびＰＰＴ」を含むジンセノサイド組成物が示されているが、本発明のように「ＣＹ，ＣＫおよびＰＰＴ」の３成分を含むものを得ることについては何の記載もない。
そして、「ＣＹ＋ＣＫ」の併用や「ＣＫ＋ＰＰＴ」の併用によっては、あるいは「ＣＹ＋ＰＰＴ」の併用によっては、（すなわち、本発明の三角図表の外側の辺上に位置する組成の２成分組成物によっては、）本発明の場合ほどのすぐれた作用効果は到底期待しえない。

本発明のジンセノサイド組成物は、
いずれもジンセノサイドであるコンパウンドＹを「ＣＹ」、コンパウンドＫを「ＣＫ」、プロトパナキサトリオールを「ＰＰＴ」と略記するとき、ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの３成分を必須成分として含有するものであること、および、
三角図表の３頂点をＡ，Ｂ，Ｃとし、Ａ→Ｂ辺にはＣＹの０→１の目盛りを付し、Ｂ→Ｃ辺にはＣＫの０→１の目盛りを付し、Ｃ→Ａ辺にはＰＰＴの０→１の目盛りを付し、かつこれらの目盛りは三角図表の外側に張り出した延長線の内向き方向に読むものとするとき、前記の３成分ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの合計重量に対する各成分の重量割合が、
Ｐ１（０．７５，０．２，０．０５）,
Ｐ２（０．１，０．８５，０．０５）,
Ｐ３（０．１，０．２，０．７）
の3点で囲まれた範囲内にあること、
を特徴とするものである。

上記のジンセノサイド組成物の主たる用途は、経口用の組成物または身体関連の非経口用の組成物である。

上記のジンセノサイド組成物におけるＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴからなる３成分は、シクロデキストリンに包接された状態にあることが好ましい。

−１−
本発明のジンセノサイド組成物は、ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの３成分を必須成分としかつそれらの成分を特定の割合で含有することを特徴とするものである。
ここで、ＣＹはジオール系のマイナージンセノサイド、ＣＫもジオール系のマイナージンセノサイド、ＰＰＴはトリオール系のマイナージンセノサイドである。
なお、ＰＰＴはＦ１またはＲｈ１からグルコシド基が外れたものに相当するが、上記３成分中のＰＰＴに代えてグルコシド基付きのＰＰＴであるＦ１やＲｈ１を用いても、本発明の組成物ほどのすぐれた作用効果は期待しえない。

−２−
上記の３成分からなる組成物を用いてたとえば化粧用クリームを調製して使用したときには、その３成分のうちのいずれか１成分あるいは任意の組み合わせの２成分から調製したクリームに比し、顕著にすぐれた作用効果（一例をあげれば後述の実施例の箇所で述べるような保湿効果）が奏される。

−３−
また、上記の３成分からなる組成物を用いてたとえば錠剤やエキスを調製して摂取したときは、その３成分のうちのいずれか１成分あるいは任意の組み合わせの２成分から調製した錠剤を摂取した場合に比し、顕著にすぐれた作用効果（一例をあげれば後述の実施例の箇所で述べるような冷え症改善効果）が奏される。

−４−
さらに、上記の３成分を含む組成物は、糖分解酵素を用いて１段階目と２段階目の酵素反応を行うことにより、一挙に所望の割合の３成分組成物を取得することができる。
この場合、別の条件で取得した３成分組成物や１〜２成分を含むものを適宜配合して、所期の３成分組成に調整することも容易である。

クリームによる保湿効果を示した三角図表である。 冷え症改善効果を示した三角図表である。

以下、本発明を詳細に説明する。

（本発明の組成物を構成する３成分とそれらの割合）
−１−
本発明のジンセノサイド組成物は、コンパウンドＣＹを「ＣＹ」、コンパウンドＣＫを「ＣＫ」、プロトパナキサトリオールを「ＰＰＴ」と略記するとき、これらの３成分を必須成分として含有することを必須要件とするものである。

−２−
加えて、三角図表の３頂点をＡ，Ｂ，Ｃとし、Ａ→Ｂ辺にはＣＹの０→１の目盛りを付し、Ｂ→Ｃ辺にはＣＫの０→１の目盛りを付し、Ｃ→Ａ辺にはＰＰＴの０→１の目盛りを付し、かつこれらの目盛りは三角図表の外側に張り出した延長線の内向き方向に読むものとするとき、前記の３成分ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの合計重量に対する各成分の重量割合が、
Ｐ１（０．７５，０．２，０．０５）,
Ｐ２（０．１，０．８５，０．０５）,
Ｐ３（０．１，０．２，０．７）
の3点で囲まれた領域内にあることを必須要件とするものである。
（上記の３成分の重量割合は、後述の実施例における図１、図２の三角図表の太線で囲まれた三角形の領域内にあることを意味している。）

−３−
なお、ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの組成が、上記の三角図表のＡ→Ｂ辺、Ｂ→Ｃ辺またはＣ→Ａ辺上にあるとき、すなわち本発明の組成とは２成分のみが共通する場合には、本発明の組成物ほどのすぐれた作用効果は奏されない。
ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの組成が上記の三角図表の３つの頂点にあるとき、すなわち本発明の組成とは１成分のみが共通する場合には、上述の２成分のみが共通する場合よりもさらに劣る効果しか奏されない。
そして、ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの組成が上記の三角図表における３辺で囲まれた領域の内部にあっても、その三角図表の太線で囲まれた三角形の領域の外側にある場合は、その領域内にある場合に比しては作用効果が明らかに劣る。
3成分が上記の領域内にあるときに、ジオール系のマイナージンセノサイドとトリオール系のマイナージンセノサイドとの微妙なバランスが作用して、該組成物の効能が最大限に発揮されるものと考えられる。

−４−
上記の組成物におけるＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの各成分の量は、その組成物の剤形（液剤・乳剤か、錠剤・顆粒剤・散剤か）によっても異なるので一概には決められないが、１ｐｐｍ以上、望ましくは５ｐｐｍ以上、さらには１０ｐｐｍ以上、殊に２０ｐｐｍ以上であることが好ましい。

（ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの３成分を含む組成物の取得）
−１−
ジンセノサイドＣＫ、ＣＹ、ＰＰＴのそれぞれの製造法については、研究論文や特許文献などにおいて、薬用人参エキスの発酵処理や、エキス中のジンセノサイド類のβ−グルコシダーゼによる酵素反応などによる製造法が報告されている。
しかしながら、いずれの製造法にあっても生成量はわずかであって、実用化は難しいものばかりである。
しかも、ＣＫ、ＣＹ、ＰＰＴの３成分が共存しているという報告は（ましてそれらの３成分が上記三角図表の太線で囲まれた三角形の領域内に存在しているという報告は）、皆無であると思われる。

−２−
しかるに、本発明者らは、ジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴを同時にかつ高濃度に製造する方法につき鋭意検討した結果、薬用人参、殊にジンセノサイドを多く含むアメリカ人参や高麗人参（特に高麗紅参）のエキスを原料として、β−グルコシダーゼによる次の２段階反応を試みた。
（１）ジンセノサイドＲｂ１やＲｄにβ−グルコシダーゼを作用させてジンセノサイドＦ２を作る１段階目の酵素反応を行う。
（２）ついで、そのＦ２を含む反応液中の酵素を失活させてから、異なるβ−グルコシダーゼで作用させてジンセノサイドＣＫ（コンパウンドＣＫ）を作る反応の２段階目の反応を行う。

−３−
この２段階目の反応後の反応液中に生じた沈殿物にはＣＫおよびＣＹが高濃度に存在している上、ＰＰＴも高濃度に生成しているので、適当な操作によりＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴを高濃度に含む目的物を得ることができるのである。

−４−
なお、上記のようにＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴを所望の割合で含む組成物を一挙に得る方法に代えて、ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴのうちの3者または2者または１者を含む組成物を適当な割合で混合することにより、３成分を所望の割合で含む組成物を調合したり、３成分間の割合を微調整したりしても差し支えない。

（シクロデキストリンによる包接化）
−１−
本発明におけるＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの３成分を含む組成物は、シクロデキストリン（殊にγ−シクロデキストリン）に包接された状態にあることが好ましい。その理由は次の如くである。

−２−
ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴはいずれも水に難溶で、アルコール類には易溶である。そのため、ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴが高含有量の粉末状の組成物は、水系の液体に添加しても塊りになって存在し、分散しにくいという性質がある。
そのため、ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴが高含量の粉末を摂取しても、腸内で塊りとなって分散しがたいので、そのような分散状態では生体への吸収は困難になる。

−３−
しかるに、ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴを含有する組成物をシクロデキストリンで包接すると、水系でも塊りにならずにミクロに分散し、分子レベルでこれらの成分が生体に吸収されるようになるのである。
ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの３成分の組成物のシクロデキストリンよる包接化は、今まで知られていなかったものと考えられる。

−４−
一般にシクロデキストリンよるジンセノサイドの包接化については知られているが、ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの３成分を含有する組成物自体についての検討が従来はなされていなかったので、その３成分組成物とシクロデキストリンとの関係についての検討については考慮外にあったものと思われる。

（用途）
本発明の組成物の用途の代表例は、経口用の組成物（一般食品、加工食品、健康食品、栄養補助食品、機能性食品などの食品類；健康維持（予防）、健康悪化防止（進行抑制）あるいは治療のための医薬類）および身体関連の非経口用の組成物（化粧料、育毛剤、入浴剤など）である。

次に実施例をあげて本発明をさらに説明する。

［実施例１］
［ジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴからなる組成物の製造］
−１−
薬用人参を乾燥粉末化し、その粉末に１０倍重量の６０〜８０％エタノール溶液を加え、７０〜８０℃で加熱することにより、エキスを抽出した。
−２−
抽出エキスに食品加工用の糖分解酵素（β−グルコシダーゼ）を加え、４０〜６０℃で２〜４日間、１段階目の酵素反応を行った。
−３−
１段階目の反応終了後、酵素反応液を加熱して酵素を失活させた。ついで、遠心操作を行い、上清を回収した。
−４−
回収した上清に食品加工用の糖分解酵素（β−グルコシダーゼ）を加え、４０〜６０℃で２〜４日間、２段階目の酵素反応を行った。
−５−
２段階目の反応終了後、酵素反応液中に生じた沈殿物を遠心操作によって回収し、エタノールに溶解した。さらに、そのエタノール溶液において生じた沈殿物を遠心操作によって除去し、ジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴを高含有量含むエキスを得た。
−６−
このエキスからジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴを高含有量含む粉末にする場合は、さらに濃縮・乾燥操作を行い、溶媒のエタノールを留去した後、乾固した固形物を粉末化すればよい。

［ジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの分析法］
−１−
試料粉末１ｇを正確に量り、日本薬局方「ニンジン」「コウジン」に記載された方法でジンセノサイド成分を抽出した。さらにＣ１８簡易カラムを用いてジンセノサイド成分を粗精製した後、メンブランフィルターによってろ過し、これを試料溶液とした。
次に、Ｃ１８カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により試料溶液を分析、定量した。
−２−
ＨＰＬＣにおいては、アセトニトリル濃度が４０〜５５％の移動相で分離を行った。各ジンセノサイド（ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴ）標準品のピーク面積と試料溶液の各ジンセノサイド（ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴ）のピーク面積の比較により、試料中の各ジンセノサイド（ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴ）含有量を算出した。

［ジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴのγ−ＣＤへの包接化］
−１−
ジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの高含有粉末にγ−ＣＤ（γ−シクロデキストリン）を加えた。このとき、ジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴとγ−ＣＤの重量比が１：１〜１：２となるようにした。さらに、ジンセノサイド高含有粉末の４〜５倍重量の水を加えた。
−２−
混合した試料をホモジナイズした。ホモジナイズ操作は、ホモジナイザーを使用して、１０，０００回転／分で１０分間、冷却を間にはさんで２回行った。
−３−
ホモジナイズ操作後の溶液を回収し、濃縮・乾燥操作を行い、乾固した固形物を粉末化して、γ−ＣＤに包接されたＣＫ、ＣＹおよびＰＰＴの組成物の粉末を得た。

［クリームによる保湿効果の評価試験］
上記で得たジンセノサイド組成物を用い、下記の表１の組成の化粧クリーム２０種類を調製した。
種々の濃度のジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴを含有するジンセノサイド組成物２０種類の調製は、原料を紅参濃縮エキスとし、数種類のβ−グルコシダーゼを用いてそれらの添加量を変化させた場合や、ｐＨ、温度、反応時間なども変化させて、２０種類のジンセノサイド組成物を調製した。

乾燥肌で肌荒れのある３５歳から７０歳までの女性パネラー１００名による保湿効果評価試験を行った。
パネラー１００名を５名づつの２０グループに分け、グループ番号と同じ番号のクリームを使用してもらった。具体的には、１日２〜４回の水仕事後に肌荒れを起こしている部位にクリームを塗布してもらい、１カ月後に肌荒れ改善の程度としっとり感の程度について、以下の５段階で全員に評価してもらった。

（肌荒れ改善）
１点…使用前よりも悪化
２点…使用前とほとんど同じ
３点…使用前に比べやや改善
４点…使用前に比べ改善
５点…使用前に比べかなり改善

（しっとり感）
１点…使用前よりも悪化
２点…使用前とほとんど同じ
３点…使用前に比べややしっとりしている
４点…使用前に比べしっとりしている
５点…使用前に比べかなりしっとりしている

（保湿効果の判定）
なお、各クリームの保湿効果は、グループ平均の「肌荒れ改善」の点数と「しっとり感」の点数とを合計した値につき、次のように判定した。
・合計値が「８．０以上の場合」を効果が大（●）
・合計値が「８．０未満で７．０以上の場合」を効果が中（○）
・合計値が「７．０未満で６．０以上の場合」を効果がやや小（□）
・合計値が「６．０未満で４．０以上の場合」を効果が小（△）
・合計値が「４．０未満の場合」を効果なし（×）

（クリームの組成）
次の処方にてクリームを調製した。
・２５．０重量％のスクワラン
・ ６．０重量％のミツロウ
・ ５．０重量％のグリセリン
・ ５．０重量％のグリセリンモノステアレート
・ ２．０重量％のポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート
・ ５．０重量％のエタノール
・ 表１に示す配合量のジンセノサイド組成物
・ 適量の防腐剤
・ 適量の香料
・ 残余の精製水

（結果）
結果を表２〜表３および図１に示す。
なお、表にまとめたときにわかりやすいように、グループの番号とクリームの番号は、効果が●、○、□、△、×のグループに分けて、付け直しを行ってある。（○評価は、該当する例がなかった。）
表２〜表３の実験番号の欄の「ＭＫ−」は「ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｋｅｅｐｉｎｇ（保湿）の略号であり、その「ＭＫ−」の右側の「１〜２０」の数字は、付け直し後のグループ番号である。
図１においては、実験番号のうちの「ＭＫ−」を省略して、「１〜２０」の数字のみを三角図表内に記入してある。なお、効果が●の実験番号ＭＫ−１からＭＫ−９を含む太線で囲んだ三角形の領域（頂点はＰ１，Ｐ２，Ｐ３）は、特に好ましい領域である。
表２、３中の「上段：３成分の含有量」の単位は「ｐｐｍ」（「ｍｇ／ｋｇ」、つまりクリーム１ｋｇ当りの各成分のｍｇ数）である。

［実施例２］
［錠剤摂取による冷え症改善効果の評価試験］
１５種類の濃度のジンセノサイドＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴを含有するジンセノサイド組成物を作製した。
すなわち、原料を紅参濃縮エキスとし、数種類のβ−グルコシダーゼを用いてその添加量を変化させた場合や、ｐＨ、温度、反応時間なども変化させて、１５種類のジンセノサイド組成物を調製した。
その各組成物を一旦粉末化し、次にγ−ＣＤ（γ−シクロデキストリン）と水とを加えて定法により包接化した１５種類のジンセノサイドＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴ共存粉末を得た。
それらを用いて１５種類の錠剤を作製した。ジンセノサイド含有量は表２に示す。
錠剤の形状は円盤形とし、錠剤の組成は、ジンセノサイド含有粉末が９４％、賦形剤のショ糖脂肪酸エステルが６重量％である。１錠は３００ｍｇである。

冷え症を持つ５０〜７０歳の男性３０名と女性４５名の計７５名を被験者として、冷え症に対する臨床試験を行った。
無作為に男性２名と女性３名を１グループとし、１５グループにグループ分けした。
グループ番号と同じ番号の錠剤を毎日３粒、１ケ月間継続摂取した。摂取前と摂取１ケ月後に、被験者全員が冷え症に対する自覚症状をチェックした。自覚症状表には、冷え症の状態が次のように７段階に分かれている（但し、今の状態を冬季にあてはめる）。

・状態１：手足が冷えて夜小用に起きるので、電気毛布やあんかを入れないとよく眠れない
・状態２：手足が冷えるが、夜具に電気毛布やあんかを入れるほどではない
・状態３：日当たりや、暖房、コタツ、ストーブのあるところを離れにくいほうである
・状態４：暖房はそれほど気にしないが厚着をしている
・状態５：手足が冷えると思って身体を少し動かすと暖かくなってくる
・状態６：手足の冷えなど気にならない
・状態７：身体がポカポカして手足も暖かい

被験者全員が摂取前と摂取１ケ月後の状態について上記に当てはまる状態の数字を記入してもらい、数字が上昇するかどうかで冷え症に対する改善効果を評価した。
・数字が３段階以上上昇した場合、著効とし３点をつける
・数字が２段階上昇した場合、有効とし２点をつける
・数字が１段階上昇した場合、やや有効とし１点をつける
・数字に変化なしまたは下降した場合、無効とし０点とする

各グループ５名の改善効果の点数を合計して、各グループの改善度を求めた。
このときには、合計の点数が
・１３以上を効果が大（●）
・１２〜１０を効果が中（○）
・ ９〜 ８を効果がやや小（□）
・ ７〜 ４を効果が小（△）
・ 3以下を効果ほぼなしまたは効果なし（×）
と判定した。

結果を表４および図２に示す。
表４の実験番号の欄の「ＯＳ−」は「ｏｖｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅｎｅｓｓ ｔｏ ｃｏｌｄ（冷え症）の略号であり、その「ＯＳ−」の右側の「１〜１５」の数字はグループ番号である。
なお、上述のように錠剤１錠は３００ｍｇであるので、たとえばＯＳ−０１の「ＣＹ＋ＣＫ＋ＰＰＴ＝３０ｍｇ／粒」は、錠剤１ｋｇ当りでは１０万ｍｇ（１０万ｐｐｍ）に相当する。

［実施例３］
［γ−シクロデキストリンによる包接化の効果］
高麗紅参のエキスから調製したジンセノサイドＣＹ２９０ｍｇ／ｇ、ＣＫ３５０ｍｇ／ｇ、ＰＰＴ１２０ｍｇ／ｇを含有するジンセノサイド粉末にγ−シクロデキストリンを１．５倍重量加え、さらに４倍重量の水を加えて、１０，０００回転／分にて１０分間、冷却しながらホモジナイズした。
その後、濃縮・乾燥を行い、乾固した固形物を粉末化して、ジンセノサイドＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴが包接された粉末を得た。
次に２００ｍｌの水を入れたビーカーを２個用意し、一方には包接前のジンセノサイド粉末を添加し、もう一方には包接された粉末を添加して両方とも攪拌したところ、前者は塊りとなって分散しなかったが、後者はすぐに分散し、溶解状態となった。

本発明のジンセノサイド組成物は、経口用の組成物（食品、栄養補助食品、健康食品、機能性食品、医薬品など）、身体関連の非経口用の組成物（化粧料、育毛剤、入浴剤など）などの用途に有用である。

本発明は、食品関連の経口用の組成物（食品、栄養補助食品、健康食品、機能性食品など）または身体関連の非経口用の組成物（化粧料、育毛剤、入浴剤など）の用途に有用な薬用人参由来のジンセノサイド組成物に関するものである。

本発明のジンセノサイド組成物は、
いずれもジンセノサイドであるコンパウンドＹを「ＣＹ」、コンパウンドＫを「ＣＫ」、プロトパナキサトリオールを「ＰＰＴ」と略記するとき、ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの３成分を必須成分として含有する組成物であること、および、
三角図表の３頂点をＡ，Ｂ，Ｃとし、Ａ→Ｂ辺にはＣＹの０→１の目盛りを付し、Ｂ→Ｃ辺にはＣＫの０→１の目盛りを付し、Ｃ→Ａ辺にはＰＰＴの０→１の目盛りを付し、かつこれらの目盛りは三角図表の外側に張り出した延長線の内向き方向に読むものとするとき、前記の３成分のＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの合計重量に対する各成分の重量割合が、
Ｐ１（０．７５，０．２，０．０５），
Ｐ２（０．１，０．８５，０．０５），
Ｐ３（０．１，０．２，０．７）
の３点で囲まれた領域内にあること、
ここで前記の組成物は、薬用人参のエキスを原料として糖分解酵素を用いて１段階目と２段階目の酵素反応を行うことにより、上記の割合の３成分組成物を取得したものであること、
かつ前記の組成物は、食品関連の経口用の組成物または身体関連の非経口用の組成物であること、
を特徴とするものである。

本発明のジンセノサイド組成物の主たる用途は、食品関連の経口用の組成物または身体関連の非経口用の組成物（化粧料、育毛剤、入浴剤など）である。

−４−
上記の３成分を含む組成物は、糖分解酵素を用いて１段階目と２段階目の酵素反応を行うことにより、一挙に所望の割合の３成分組成物を取得することができる。
この場合、別の条件で取得した３成分組成物や１〜２成分を含むものを適宜配合して、所期の３成分組成に調整することも容易である。

−２−
しかるに、本発明者らはジンセノサイドＣＹ、ＣＫを同時にかつ高濃度に製造する方法につき鋭意検討した結果、薬用人参、殊にジンセノサイドを多く含むアメリカ人参や高麗人参（特に高麗人参）のエキスを原料として、β−グルコシダーゼによる次の２段階反応を試みた。
（１）ジンセノサイドＲｂ１やＲｄにβ−グルコシダーゼを作用させてジンセノサイドＦ２を作る１段階目の酵素反応を行う。
（２）ついで、そのＦ２を含む反応液中の酵素を必要に応じ失活させてから、異なるβ−グルコシダーゼで作用させてジンセノサイドＣＫ（コンパウンドＣＫ）を作る反応の２段階目の反応を行う。

−４−
なお、上記のようにＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴを所望の割合で含む組成物を一挙に得る方法に代えて、ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの３者を含む組成物を適当な割合で混合することにより、３成分を所望の割合で含む組成物を調合したり、３成分間の割合を微調整したりしても差し支えない。

（用途）
本発明の組成物の用途の代表例は、食品関連の経口用の組成物（一般食品、加工食品、健康食品、栄養補助食品、機能性食品など）および身体関連の非経口用の組成物（化粧料、育毛剤、入浴剤など）である。

本発明のジンセノサイド組成物は、食品関連の経口用の組成物（食品、栄養補助食品、健康食品、機能性食品など）、身体関連の非経口用の組成物（化粧料、育毛剤、入浴剤など）の用途に有用である。

Claims (3)

1. いずれもジンセノサイドであるコンパウンドＹを「ＣＹ」、コンパウンドＫを「ＣＫ」、プロトパナキサトリオールを「ＰＰＴ」と略記するとき、ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴの３成分を必須成分として含有するものであること、および、
   三角図表の３頂点をＡ，Ｂ，Ｃとし、Ａ→Ｂ辺にはＣＹの０→１の目盛りを付し、Ｂ→Ｃ辺にはＣＫの０→１の目盛りを付し、Ｃ→Ａ辺にはＰＰＴの０→１の目盛りを付し、かつこれらの目盛りは三角図表の外側に張り出した延長線の内向き方向に読むものとするとき、前記の３成分ＣＹ、ＣＫ、ＰＰＴの合計重量に対する各成分の重量割合が、
   Ｐ１（０．７５，０．２，０．０５）,
   Ｐ２（０．１，０．８５，０．０５）,
   Ｐ３（０．１，０．２，０．７）
   の3点で囲まれた領域内にあること、
   を特徴とするジンセノサイド組成物。
2. 経口用の組成物または身体関連の非経口用の組成物であることを特徴とする請求項１記載のジンセノサイド組成物。
3. ＣＹ、ＣＫおよびＰＰＴからなる３成分がシクロデキストリンに包接された状態にあることを特徴とする請求項１記載のジンセノサイド組成物。