JPWO2005061713A1 - ゼニゴケ由来の不飽和脂肪酸合成系酵素遺伝子及びその利用 - Google Patents
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Abstract
Description
アラキドン酸及びエイコサペンタエン酸(EPA)は、それぞれリノール酸及びα−リノレン酸を起点として、Δ6不飽和化、Δ6鎖長延長及びΔ5不飽和化という3つの連続した反応により、生合成されると考えられる。これらの反応は、それぞれΔ6不飽和化酵素、Δ6鎖長延長酵素及びΔ5不飽和化酵素により触媒され、それぞれ、n−6経路(アラキドン酸合成経路)及びn−3経路(EPA合成経路)と呼ばれている。
〔本発明に係るΔ6不飽和化酵素遺伝子〕
本発明に係るΔ6不飽和化酵素遺伝子は、Δ6脂肪酸不飽和化活性を有するたんぱく質をコードするゼニゴケ目生物由来の遺伝子であり、以下の条件に適合する遺伝子であればよい。
本発明に係るΔ6鎖長延長酵素遺伝子は、Δ6脂肪酸鎖長延長酵素活性を有するたんぱく質をコードするゼニゴケ目生物由来の遺伝子であり、以下の条件に適合する遺伝子であればよい。
本発明に係るΔ5不飽和化酵素遺伝子は、Δ5脂肪酸不飽和化活性を有するたんぱく質をコードするゼニゴケ目生物由来の遺伝子であり、以下の条件に適合する遺伝子であればよい。
〔本発明に係るΔ6不飽和化酵素たんぱく質〕
本発明に係るΔ6不飽和化酵素たんぱく質は、ゼニゴケ目生物由来のたんぱく質であってΔ6脂肪酸不飽和化活性を有するたんぱく質であればよい。より具体的には、以下に示すたんぱく質であればよい。
本発明に係るΔ6鎖長延長酵素たんぱく質は、ゼニゴケ目生物由来のたんぱく質であってΔ6脂肪酸鎖長延長活性を有するたんぱく質であればよい。より具体的には、以下に示すたんぱく質であればよい。
本発明に係るΔ5不飽和化酵素たんぱく質は、ゼニゴケ目生物由来のたんぱく質であってΔ5脂肪酸不飽和化活性を有するたんぱく質であればよい。より具体的には、以下に示すたんぱく質であればよい。
本発明に係るたんぱく質及び遺伝子の取得方法(生産方法)は特に限定されるものではないが、代表的な方法として次に示す各方法を挙げることができる。
本発明のたんぱく質を取得する方法(生産方法)は、上述したように特に限定されるものではないが、まず、本発明のたんぱく質を発現する細胞、組織などから単純精製する方法を挙げることができる。精製方法も特に限定されるものではなく、公知の方法で細胞や組織から細胞抽出液を調製し、この細胞抽出液を公知の方法、例えばカラム等を用いて精製すればよい。
本発明の遺伝子を取得する方法(生産方法)も特に限定されるものではないが、例えば、ディファレンシャルスクリーニング(サブトラクションクローニング)を利用する方法を挙げることができる。この方法では、公知の技術に従って、試験管内での直接的ハイブリダイゼーションを繰り返し、目的のcDNA(本発明の遺伝子)を濃縮すればよい。
(5−1)組換え発現ベクター
本発明に係る組換え発現ベクターは、前記(2)に記載した本発明に係る遺伝子を含むものであれば、特に限定されるものではない。例えば、cDNAが挿入された組換え発現ベクターが挙げられる。組換え発現ベクターの作製には、プラスミド、ファージ、又はコスミドなどを用いることができるが特に限定されるものではない。また、作製方法も公知の方法を用いて行えばよい。
本発明に係る形質転換体は、前記(2)に記載した本発明に係る遺伝子導入された形質転換体であれば、特に限定されるものではない。ここで「形質転換体」とは、細胞・組織・器官のみならず、生物個体を含む意味である。
本発明には、本発明に係る遺伝子で形質転換され、脂肪酸組成が改変された植物体又は植物体の組織を用いて脂肪酸を生産する方法が含まれる。
本発明には、上述の脂肪酸生産方法により得られた物質、すなわち、γ−リノレン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、アラキドン酸、ステアリドン酸、エイコサテトラエン酸、エイコサペンタエン酸を少なくとも1つ含む素材も含まれる。この「素材」とは、上述の食料としての種子、果実、切穂、塊茎、又は、塊根の他に、工業原料用途に利用できる素材全般を意味する。
本発明には、本発明に係る遺伝子を用いて脂肪酸組成を改変する方法が含まれる。例えば、上述のように本発明に係る遺伝子を導入した形質転換体を作製することによりホスト細胞の脂肪酸組成を改変することが可能となる。脂肪酸組成を改変する対象は特に限定されるものではなく、植物以外にも動物、細菌、酵母等、あらゆる生物を対象とすることが可能である。
本発明に係る遺伝子検出器具は、本発明に係る遺伝子の少なくとも一部の塩基配列又はその相補配列をプローブとして用いたものである。遺伝子検出器具は、種々の条件下において、本発明の遺伝子の発現パタ−ンの検出・測定などに利用することができる。
本発明に係る抗体は、本発明に係るたんぱく質、又はその部分たんぱく質・部分ペプチドを抗原として、公知の方法によりポリクロ−ナル抗体又はモノクロ−ナル抗体として得られる抗体である。公知の方法としては、例えば、文献(Harlowらの「Antibodies:A laboratory manual(Cold Spring Harbor Laboratory,New York(1988))、岩崎らの「単クローン抗体ハイブリドーマとELISA,講談社(1991)」)に記載の方法が挙げられる。このようにして得られる抗体は、本発明のたんぱく質の検出・測定などに利用できる。
本発明に係るスクリーニング方法は、本発明に係るたんぱく質を用いて、当該たんぱく質を調節する遺伝子、又は当該たんぱく質を調節する物質をスクリーニングする方法である。本発明のスクリーニング方法としては、物質間の結合の有無や解離の有無を調べる従来公知の種々の方法を適用することができ、特に限定されるものではない。例えば、本発明に係るたんぱく質の活性(Δ6不飽和化活性、Δ6鎖長延長活性及び/又はΔ5不飽和化活性)を促進するような物質のスクリーニングを挙げることができる。
これまでにクローニングされたΔ6不飽和化酵素のアミノ酸配列の比較により、アミノ酸配列Trp−Trp−Lys−(Glu/Asp)−Lys−His−Asn(配列番号37)及びTrp−Phe−Thr−Gly−Gly−Leu−Asn(配列番号38)が保存されていることがわかった。そこで、ゼニゴケ由来のΔ6不飽和化酵素遺伝子を単離するために、上記のアミノ酸配列をコードする下記の縮退プライマーを用いた。
dD6DES−F 5’−TGGTGGAA(A/G)GA(A/G/T/C)AA(A/G)CA(T/C)AA−3’(配列番号7)
dD6DES−R 5’−(A/G)TTIA(A/G)ICCICCIGT(A/G)AACCA−3’ (配列番号8)
(Iはイノシン、()内は複数の塩基)
MpDES6−02R:5’−AAGTTGCCTTCGATGTTTCTGG−3’(配列番号9)
MpDES6−01F:5’−GCTCGCCTGGAGCAAGGAAAATC−3’(配列番号10)
これまでにクローニングされたΔ6鎖長延長酵素のアミノ酸配列の比較により、アミノ酸配列Val−Glu−Phe−Met−Asp−Thr−Val(配列番号39)及びLys−Tyr−Leu−Phe−Trp−Gly−Arg(配列番号40)が保存されていることがわかった。そこで、ゼニゴケ由来のΔ6鎖長延長酵素遺伝子を単離するために、上記のアミノ酸配列をコードする下記の縮退プライマーを用いた。
dD6ELO−F 5’−GTIGA(A/G)TT(T/C)ATGGA(T/C)ACIGT−3’ (配列番号11)
dD6ELO−R 5’−C(G/T)ICCCCA(A/G)AAIA(A/G)(A/G)TA(T/C)TT−3’(配列番号12)
MpELO1−02R:5’−GCGAGCTTTCTCGTTCTTTCCC−3’(配列番号13)
MpELO1−01F:5’−TATGATTTTGAAGCGCAACACG−3’(配列番号14)
他生物種のΔ5不飽和化酵素は、そのN末端にシトクロムb5ドメインを有する。このことから、ゼニゴケ由来のΔ5不飽和化酵素遺伝子は、Δ6不飽和化酵素遺伝子と同じく、シトクロムb5ドメイン融合型不飽和化酵素遺伝子ファミリーに属することが予想された。しかしながら、ケイ藻や真菌においては、Δ5不飽和化酵素及びΔ6不飽和化酵素間のアミノ酸配列レベルでの相同性は非常に低い。そこで、糸状菌(M.alpina)のΔ5不飽和化酵素及びΔ6不飽和化酵素間のアミノ酸配列を比較した結果、縮退プライマー設計に最低限必要な4から5残基程度の連続した保存配列が局所的に存在することを見出した。驚くべきことに、これらの保存配列は、異種のΔ5不飽和化酵素のアミノ酸配列間より、同種内のΔ5不飽和化酵素とΔ6不飽和化酵素との間で、より保存されていることを見出した。このことから、シトクロムb5ドメイン融合型不飽和化酵素遺伝子には、種特異的な保存配列が存在する場合があると考えられた。そこで、上述のMpDES6と、Genetics 159,p981,2001に記載されている機能未知のMpDESとで、塩基配列を鋭意比較検討した結果、2箇所のアミノ酸配列(I(E/N)(G/D)KVYDV(配列番号41)、及び、DPDI(Q/D)(Y/T)(M/V)P(配列番号42))のアミノ酸配列が保存されていることを見出した。それぞれのアミノ酸配列に対応する縮退プライマーの配列を次に示す。
dD5DES−F 5’−AT(A/T/C)(A/G)AIG(A/G)IAA(A/G)TITA(T/C)GA(T/C)GT−3’(配列番号15)
dD5DES−R 5’−GGIA(T/C)I(G/T)(A/T)IT(G/C)(A/G/T)AT(A/G)TCIGG(A/G)TC−3’(配列番号16)
MpDES5−02R:5’−GTGTGTACGATCCGTGGTTACC−3’(配列番号17)
MpDES5−01F:5’−AAGGCGGGACAGGATTCAACAC−3’(配列番号18)
MpDES6、MpELO1及びMpDES5のcDNAの機能を調べるために、まず個々のORFを、メタノール誘導性プロモーターAOX1の下流に配置したコンストラクトを作製した。これらのコンストラクトをメタノール資化性酵母(Pichia pastoris)に導入し、その脂肪酸組成を解析した。MpDES6、MpELO1、及び、MpDES5のcDNA塩基配列のORF部分を、下記のプライマーを用いて、PCRにより増幅した。
(MpDES6ORF増幅用プライマー)
MpD6−17F:5’−GGAATTCGCGATGGCCTCGTCCACCACCAC−3’(配列番号19)
MpD6−18F:5’−GGAATTCTACTTTCGCAGCGTATGCTACC−3’(配列番号20)
(MpELO1ORF増幅用プライマー)
MpD6ELO1−15F:5’−GGAATTCGCGATGGAGGCGTACGAGATGG−3’(配列番号21)
MpD6ELO1−16F:5’−GGAATTCTTCTGCCTTTTTGCTCTTGATC−3’(配列番号22)
(MpDES5ORF増幅用プライマー)
MpD5−11F:5’−GTTGAATTCGACAGTTATGCCGCCACACGC−3’(配列番号23)
MpD5−12R:5’−GTTGAATTCAGGCCCAAAGCATGCTGTCAC−3’(配列番号24)
MpDES6、MpELO1及びMpDES5を共発現させるために、上記実施例4で作製した、EcoRI消化したMpELO1及びMpDES5のORF増幅断片を、各々別のメタノール資化性酵母発現ベクターpPIC3K(マーカー:HIS4遺伝子、Invitrogen社製社)及びpPIC6A(マーカー:ブラスチシジン耐性遺伝子、Invitrogen社製社)の5’AOX1プロモーター下流のEcoRI部位にセンス方向に連結した。また、MpDES6に関しては、実施例4で作製した発現ベクターを用いた。以下各発現ベクターを、それぞれpPICZA−MpDES6、pPIC3K−MpELO1及びpPIC6A−MpDES5と表記する。
イネにおいて、MpDES6、MpELO1及びMpDES5遺伝子を発現させるために、以下の(i)〜(iv)に示す手順で発現コンストラクトを作製した。また、作製手順を図1に示した。
MK001(F):5’−CGGGATCCTCTCCTGGCGCACCATCGTC−3’(配列番号25)
MK002(R):5’−GGGGTACCAACGCGCTTTCCCACCAACG−3’(配列番号26)
(MpDES6 ORF増幅用プライマー)
MpD6−21F:5’−GCTCTAGAGCGATGGCCTCGTCCACCACC−3’(配列番号27)
MpD6−11R:5’−GCTCTAGACTATACTTTCGCAGCGTATGC−3’(配列番号28)
(MpELO1 ORF増幅用プライマー)
MpD6ELO1−18F:5’−GCTCTAGAGCGATGGAGGCGTACGAGATGG−3’(配列番号29)
MpD6ELO1−13R:5’−GCTCTAGATTATTCTGCCTTTTTGCTC−3’ (配列番号30)
(MpDES5 ORF増幅用プライマー)
MpD5−22F:5’−GCTCTAGAGACAGTTATGCCGCCACACGC−3’(配列番号31)
MpD5−23R:5’−GCTCTAGAAGGCCCAAAGCATGCTGTCAC−3’(配列番号32)
(MpDES5 遺伝子発現カセット増幅用プライマー)
M13R:5’−CAGGAAACAGCTATGACC−3’(配列番号33)
NOS−R4−PST:5’−AAACTGCAGATTCCCGATCTAGTAACATAG−3’(配列番号34)
(MpELO1 遺伝子発現カセット増幅用プライマー)
35S−F3−EI:5’−CCGGAATTCGCATGCCTGCAGGTCCCCAGA−3’(配列番号35)
M13F:5’−TGTAAAACGACGGCCAGT−3’ (配列番号36)
本実施例では、上述のゼニゴケ由来の不飽和脂肪酸合成酵素遺伝子、すなわち、MpDES6遺伝子、MpDES5遺伝子、およびMpELO遺伝子が、植物体中で良好に機能することを確認した。
pE2113(Mitsuhara et al.Plant Cell Physiol.37,45−59 1996)は、エンハンサー配列の繰り返しを有するカリフラワーモザイクウィルス35S(El235S)プロモーター、および、ノパリンシンターゼ(nos)ターミネーターを有する。
pUCAP(van Engelen et al.Transgenic Research 4,288−290,1995)をAscIで消化した後SgfIリンカーと連結し、さらに、PacIで消化した後FseIリンカーと連結することで、pUCSAPFを作製した。また、pBINPLUSにも同様の処理を施し、pBINSAPFを作製した。
XbaMpELOf:5‘−AGTCTCTAGAGCGATGGAGGCGTACG−3’(配列番号43)
SacMpELOr:5‘−CAGTGAGCTCGGTGTCTTATTCTGCC−3’(配列番号44)
XbaMpD5f:5’−AGCTTCTAGAGCCATGCCGCCACACGCCC−3’(配列番号45)
SacMpD5r:5’−CAGTGAGCTCTCAGCCATCCAGTCGT−3’ (配列番号46)
引き続いて、公知の方法(Plant J.5,81,1994)に基づいて、pSPB2368またはpSPB1519を用いてAgrobacterium tumefaciens(菌株:AglO(Lazo et al.1991,Biotechnology9:963−967))を形質転換した。このpSPB2368またはpSPB1519を有する形質転換体アグロバクテリウムを、タバコリーフディスクに感染させた。このようにして得られた組換えタバコの葉から、RNeasyPlantminiKit(キアゲン)を用いてRNAを抽出し、定法に従って、RT−PCRにより、導入した遺伝子が発現している系統を選択した。
(ガスクロマトグラフィー分析条件)
カラム:Supelco SP−2330、Fused Silica Capillary Column、30m x 0.32mm ID、0.2μm
温度:Inj:240℃、Det:250℃、Oven:180℃ 3分、180℃→220℃(2℃/min)
カラム流量:30cm/sec、圧力200kPa、検出器 FID
MpDES6、MpELO1及びMpDES5のcDNAの機能を調べるために、まず個々のORFを、メタノール誘導性プロモーターAOX1の下流に配置したコンストラクトを作製した。これらのコンストラクトをメタノール資化性酵母(Pichia pastoris)に導入し、その脂肪酸組成を解析した。MpDES6、MpELO1、及び、MpDES5のcDNA塩基配列のORF部分を、下記のプライマーを用いて、PCRにより増幅した。
(MpDES6ORF増幅用プライマー)
MpD6‐17F: 5’‐GGAATTCGCGATGGCCTCGTCCACCACCAC‐3’ (配列番号19)
MpD6‐18F: 5’‐GGAATTCTACTTTCGCAGCGTATGCTACC‐3’ (配列番号20)
(MpELO1ORF増幅用プライマー)
MpD6ELO1‐15F: 5’‐GGAATTCGCGATGGAGGCGTACGAGATGG‐3’ (配列番号21)
MpD6ELO1‐16F: 5’‐GGAATTCTTCTGCCTTTTTGCTCTTGATC‐3’ (配列番号22)
(MpDES5ORF増幅用プライマー)
MpD5‐11F: 5’ ‐GTTGAATTCGACAGTTATGCCGCCACACGC‐3’ (配列番号23)
MpD5‐12R: 5’ ‐GTTGAATTCAGGCCCAAAGCATGCTGTCAC‐3’ (配列番号24)
本実施例では、上述のゼニゴケ由来の不飽和脂肪酸合成酵素遺伝子、すなわち、MpDES6遺伝子、MpDES5遺伝子、およびMpELO1遺伝子が、植物体中で良好に機能することを確認した。
Claims (28)
- 配列番号1に示される塩基配列からなるDNAの全部又は一部、あるいは当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAの全部又は一部とストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつΔ6脂肪酸不飽和化活性を有するたんぱく質をコードするゼニゴケ目生物由来の遺伝子。
- Δ6脂肪酸不飽和化活性を有するゼニゴケ目生物由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号1に示される塩基配列を有する遺伝子。
(b)配列番号1に示される塩基配列からなるDNA、又は当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズする遺伝子。 - Δ6脂肪酸不飽和化活性を有するゼニゴケ目生物由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号1に示される塩基配列のうち、253ないし1698番目の塩基配列を有する遺伝子。
(b)配列番号1に示される塩基配列のうち、253ないし1698番目の塩基配列からなるDNA、又は当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズする遺伝子。 - Δ6脂肪酸不飽和化活性を有するゼニゴケ目生物由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるたんぱく質をコードする遺伝子。
(b)配列番号2に示されるアミノ酸配列の1個又はそれ以上のアミノ酸が置換、欠失、挿入、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなるたんぱく質をコードする遺伝子。 - 配列番号3に示される塩基配列からなるDNAの全部又は一部、あるいは当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAの全部又は一部とストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつΔ6脂肪酸鎖長延長活性を有するたんぱく質をコードするゼニゴケ目生物由来の遺伝子。
- Δ6脂肪酸鎖長延長活性を有するゼニゴケ目生物由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号3に示される塩基配列を有する遺伝子。
(b)配列番号3に示される塩基配列からなるDNA、又は当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズする遺伝子。 - Δ6脂肪酸鎖長延長活性を有するゼニゴケ目生物由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号1に示される塩基配列のうち、194ないし1066番目の塩基配列を有する遺伝子。
(b)配列番号1に示される塩基配列のうち、194ないし1066番目の塩基配列からなるDNA、又は当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズする遺伝子。 - Δ6脂肪酸鎖長延長活性を有するゼニゴケ目由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号4に示されるアミノ酸配列からなるたんぱく質、
(b)配列番号4に示されるアミノ酸配列の1個又はそれ以上のアミノ酸が置換、欠失、挿入、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなるたんぱく質をコードする遺伝子。 - 配列番号5に示される塩基配列からなるDNAの全部又は一部、あるいは当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAの全部又は一部とストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつΔ5脂肪酸不飽和化活性を有するたんぱく質をコードするゼニゴケ目生物由来の遺伝子。
- Δ5脂肪酸不飽和化活性を有するゼニゴケ目生物由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号5に示される塩基配列を有する遺伝子。
(b)配列番号5に示す塩基配列からなるDNA、又は当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズする遺伝子。 - Δ5脂肪酸不飽和化活性を有するゼニゴケ目生物由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号5に示される塩基配列のうち、375ないし1829番目の塩基配列を有する遺伝子。
(b)配列番号5に示される塩基配列のうち、375ないし1829番目の塩基配列からなるDNA、又は当該DNAと相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズする遺伝子。 - Δ5脂肪酸不飽和化活性を有するゼニゴケ目生物由来のたんぱく質をコードする、下記(a)又は(b)に記載の遺伝子。
(a)配列番号6に示されるアミノ酸配列からなるたんぱく質をコードする遺伝子。
(b)配列番号6に示されるアミノ酸配列の1個又はそれ以上のアミノ酸が置換、欠失、挿入、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなるたんぱく質をコードする遺伝子。 - 請求項1〜12の何れか1項に記載の遺伝子によってコードされるたんぱく質。
- 以下の(a)又は(b)記載のたんぱく質。
(a)配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるたんぱく質。
(b)配列番号2に示されるアミノ酸配列において、1個又はそれ以上のアミノ酸が置換、欠失、挿入、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなり、かつ、Δ6脂肪酸不飽和化活性を有するたんぱく質。 - 以下の(a)又は(b)記載のたんぱく質。
(a)配列番号4に示されるアミノ酸配列からなるたんぱく質。
(b)配列番号4に示されるアミノ酸配列において、1個又はそれ以上のアミノ酸が置換、欠失、挿入、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなり、かつ、Δ6脂肪酸鎖長延長活性を有するたんぱく質。 - 以下の(a)又は(b)記載のたんぱく質。
(a)配列番号6に示されるアミノ酸配列からなるたんぱく質。
(b)配列番号6に示されるアミノ酸配列において、1個又はそれ以上のアミノ酸が置換、欠失、挿入、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなり、かつ、Δ5脂肪酸不飽和化活性を有するたんぱく質。 - 請求項13〜16の何れか1項に記載のたんぱく質を認識する抗体。
- 少なくとも請求項1〜12の何れか1項に記載の遺伝子を含む組換え発現ベクター。
- 少なくとも請求項1〜12の何れか1項に記載の遺伝子を導入してなる形質転換体。
- 少なくとも請求項1〜12の何れか1項に記載の遺伝子が発現可能に導入された植物体、もしくは当該植物体と同一の性質を有する当該植物体の子孫となる植物体、又は当該植物体の組織。
- 少なくとも請求項1〜12の何れか1項に記載の遺伝子が発現可能に導入され、脂肪酸組成が改変された植物体、もしくは当該植物体と同一の性質を有する当該植物体の子孫となる植物体、又は当該植物体の組織。
- 請求項20又は21に記載の植物体の繁殖材料。
- 請求項21に記載の植物体又は植物体の組織を用いることを特徴とする脂肪酸生産方法。
- 請求項23に記載の脂肪酸生産方法により得られた、γ−リノレン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、アラキドン酸、ステアリドン酸、エイコサテトラエン酸、およびエイコサペンタエン酸から選択される少なくとも1つ含む素材。
- 少なくとも請求項1〜12の何れか1項に記載の遺伝子を用いて脂肪酸組成を改変する方法。
- 請求項1〜12の何れか1項に記載の遺伝子における少なくとも一部の塩基配列又はその相補配列をプローブとして用いた遺伝子検出器具。
- 請求項13〜16の何れか1項に記載のたんぱく質を用いて、当該たんぱく質を調節する遺伝子、又は当該たんぱく質を調節する物質をスクリーニングする方法。
- 請求項27に記載のスクリーニング方法により得られた遺伝子又は物質。
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