JPWO2005055735A1 - 改良大豆7sたん白及びその製造法 - Google Patents
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Abstract
Description
食生活の多様化に伴い動物性食品の摂取が増加し、動物性食品/植物性食品の摂取バランスが崩れ、一般食品から7Sグロブリンを血中の中性脂肪抑制の有効量である5g以上(非特許文献4)を摂取することは必ずしも容易ではない。
しかしながら大豆7Sグロブリンに富むたん白(以下「大豆7Sたん白」という)は水和性や粘性が著しく高く、その粉末を水などの液体に混ぜると所謂「ママコ」を形成する問題が生じる。また一度形成したママコを分散させることは非常に困難であり、強力な攪拌を伴わなければママコを崩すことができず、簡便な摂取が不可能となる。また大豆7Sたん白のこうした物性は、加水生地に使用する場合の作業性の悪さや、チュアブルタイプのタブレットのようなものへ使用する場合の食べ難さなどにも繋がる。
SAMOTO, Biosci Biotechnol Bioche, Vol.62, No5, 935-940, 1998 OKITA, J.Nutr.Sci.Vitaminol., 27, 379-388, 1981 AOYAMA, Biosci.Biotechnol.Biochem., Vol.65, No.5, 1071-1075, 2001 KAMBARA, Therapeutic, Research, vol.23, no.1, 85-89, 2002
すなわち、本発明は、
(1)大豆7Sたん白の粒子表面をエタノール水で処理することを特徴とする改良大豆7Sたん白の製造法、
(2)エタノール水のエタノール濃度が30重量%以上95重量%以下である(1)記載の改良大豆7Sたん白の製造法、
(3)エタノール水が大豆7Sたん白100重量部に対し15重量部以上である(1)記載の改良大豆7Sたん白の製造法、
(4)改良大豆7Sたん白の5重量%の水分散液がpH6.8以下である(1)記載の改良大豆7Sたん白の製造法
(5)(1)記載の方法により製造された改良大豆7Sたん白、である。
また、7Sグロブリンに富むたん白を得るということでは、育種による11Sグロブリン欠損大豆、すなわち7Sグロブリンに富んだ種子(Breeding Science ,46, 11,1996)から蛋白を分離することが検討され、そうした方法であってもよい。7Sグロブリンはα、α’、βの3種類のサブユニットからなっている。本発明における7Sグロブリンは、サブユニットの一部が欠失している様なものであってもよい。7Sグロブリンの量をいうときはそれらα、α’、βサブユニットのうち、存在するものの総量を指す。
本発明では上記のいずれの方法で得た大豆7Sたん白を用いても良いが、脱脂大豆から7Sグロブリンを高純度に分離する手法に準じ調製したものが好ましい(SAITO, Biosci Biotechnol Bioche Vol.65,No4 .884-887 2001)。
整粒については必須ではないが、粒径が揃った大豆7Sたん白処理物を得たい場合や粒径を小さくしたい場合に行う。整粒は、例えば整粒機や篩等を用いて行えばよい。また整粒を行うことで粘度が下がる傾向があり、粒径が小さいほどその傾向が強い。但し、粒径は大きい方が水への分散性は優れたものに仕上がるため、整粒の最適な度合いは、分散性と粘度の兼ね合いで決まる。一般に、濃度の低い大豆7Sたん白の粉末飲料等に用いる場合には、いずれにせよ粘度があまり高くならないので、分散性の良い比較的粗めの整粒が適し、例えばメッシュを通す場合は10〜80メッシュ程度のものが良い。一方、大豆7Sたん白濃度の高い用途の場合には、粘度を下げるため細かめの整粒が適し、おおよそ80メッシュ以上のメッシュに通せばよい。
*SDS-ポリアクリルアミド電気泳動;Laemmli(Nature,227,680,1970)の方法に基づきゲル濃度10-20%のグラディエントゲルで分析した。たん白アプライ量は5μg。
*フィチン酸;Alii Mohamed の方法(Cereal Chemistry, 63,475-478 1986)に準拠して測定した。
*純度(SPE基準):上記のSDS-ポリアクリルアミド電気泳動で得られた泳動パターンをデンシトメーターで面積として測定し、β‐コングリシニン画分の全面積に対する面積比率を純度(SPE基準)とした。ここにβ‐コングリシニン含量はα、α’、βサブユニットの総量を指す。
純度測定方法は、これ以外に下記に示すように、混在する脂質会合たん白(前述)の量も考慮した補正純度で求める場合もあるが、本願におけるβ‐コングリシニンたん白の純度は、SPE基準によるものを指す。
*分散性:100mlの水に7Sたん白の大豆7Sたん白処理物を3g加え、スプーンでゆっくりと攪拌し、完全に分散するまでに要した時間を測定した。30秒以内では「非常に良好」、60秒以内では「良好」、それ以上では「不良」とした。
〔大豆7Sたん白の調製〕
脱脂大豆に1:10の重量比で40℃の抽出水を加え、塩酸にてpHを5.3に調整した。この溶液にフィターゼ(フィターゼノボ:ノボインダストリー社製)を蛋白質当り8unit添加後、40℃で30分反応させ酵素処理した抽出スラリーを得た。この酵素処理した抽出スラリーを25℃まで冷却し、pH6.1に調整し、遠心分離(3000G)した。得られた可溶性画分を塩酸でpH4.9に調整して遠心分離して沈殿カードを得た。この沈殿カードを10倍量の水で水洗後、4倍重量加水し、苛性ソーダでpH7.0に中和して140℃15秒殺菌し、噴霧乾燥して低フィチン酸で高い純度の大豆7Sたん白を得た(以下T−aと云う)。このようにして得られた低フィチン7Sたん白(フィチン酸含量 固形分中0.05重量%)をSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動に供し、その後染色された蛋白質のバンドの染色度の測定から、純度として95%であることが示された。
脱脂大豆に1:10の重量比で抽出水を加え、室温、pH7.0において1時間抽出後、遠心分離し、脱脂豆乳を得た。この脱脂豆乳を塩酸にてpH4.8に調整した後、50℃になるように加温を行った。pH調整した脱脂豆乳が50℃に達した後、直ちに30℃付近まで冷却し、苛性ソーダにてpH5.8に調整してバッチ式遠心分離機(3000G)で遠心分離した。得られた可溶性画分を塩酸にてpH4.9に調整した後、遠心分離(3000G×5分)してホエーを除き、沈殿カードを得た。この沈殿カードに4倍重量加水し、苛性ソーダで中和して140℃15秒間殺菌し、噴霧乾燥して高純度の大豆7Sたん白(フィチン酸含量 固形分中1.90重量%)を得た(以下T−bと云う)。このようにして得られた大豆7Sたん白をSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動に供し、その後染色された蛋白質のバンドの染色度の測定から、純度として95%であることが示された。
ケンウッドミキサーにホイッパーをつけT−a100部を攪拌しながら、80重量%のエタノール水溶液50部を徐々に加え、全体がぬれるまで粒子を湿潤させた。この湿潤させた粉体をトレーに薄く広げ、ファン付のインキュベーターにて50℃の条件下で6時間乾燥させた。乾燥後、16メッシュの篩に通し整粒し大豆7Sたん白処理物を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと30秒攪拌したところ、水なじみよく非常に分散性良好であった。
処理法は実施例1と同様で、T−a100部に対し80重量%のエタノール水溶液を20部添加した大豆7Sたん白処理物を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと60秒攪拌したところ、ともに水になじみ分散するものであった。
処理法は実施例1と同様で、T−a100部に対し90重量%のエタノール水溶液を50部添加した大豆7Sたん白処理物を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと60秒攪拌したところ、ともに水になじみ分散するものであった。
卓上用のフードプロセッサーでT−a100部を攪拌しながら、70重量%のエタノール水溶液50部を徐々に加え、全体がぬれるまで粒子を湿潤させた。この湿潤させた粉体をトレーに薄く広げ、ファン付きのインキュベーターにて60℃の条件下で4時間乾燥させた。乾燥後、目の開きが16メッシュの篩に通し整粒し加工大豆7Sたん白を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと30秒攪拌したところ、水なじみよく非常に分散性良好であった。
卓上用のフードプロセッサーでT−a100部を攪拌しながら、50重量%のエタノール水溶液40部を徐々に加え、全体がぬれるまで粒子を湿潤させた。この湿潤させた粉体をトレーに薄く広げ、ファン付きのインキュベーターにて60℃の条件下で4時間乾燥させた。乾燥後、コーヒーミルで粉砕し100メッシュの篩を通過する加工大豆7Sたん白を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと30秒攪拌したところ、水なじみよく非常に分散性良好であった。
処理法は実施例1と同様で、T−b100部に対し80重量%のエタノール水溶液を35部添加し大豆7Sたん白処理物を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと30秒攪拌したところ、水なじみよく非常に分散性良好であった。
ケンウッドミキサーにホイッパーをつけT−a100部を攪拌しながら、80重量%のエタノール水を35部徐々に加え、全体がぬれるまで粒子を湿潤させた。この湿潤させた粉体をトレーに薄く広げ、ファン付のインキュベーターにて60℃の条件下で4時間乾燥させた。乾燥後、100メッシュの篩に通し整粒し加工大豆7Sたん白を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと60秒攪拌したところ、水になじみ分散するものであった。
処理法は実施例7と同様で、T−a100部に対して80重量%のエタノール水35部に乳酸を1部混合した液を添加した場合と乳酸を0.88部、0.53部に各々変更した場合の加工大豆7Sたん白を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと30秒攪拌したところ、全て水なじみよく非常に分散性良好であった。
処理法は実施例7と同様で、T−a100部に対して80重量%のエタノール水35部、酢酸1部を混合した液を添加し加工大豆7Sたん白を得た。評価として、100mlの水にこの加工大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと30秒攪拌したところ、全て水なじみよく非常に分散性良好であった。
処理法は実施例1と同様で、添加する80重量%のエタノール水の量を10部で実施し大豆7Sたん白処理物を得た。
評価として、100mlの水にこの大豆7Sたん白処理物を3g加えスプーンでゆっくりと60秒攪拌したところ、ママコが多く生じ分散する性状のものにはならなかった。
処理法は実施例1と同様で、100重量%エタノールを50部添加し大豆7Sたん白処理物を得た。評価として、100mlの水にこの大豆7Sたん白処理物を3g加えスプーンでゆっくりと60秒攪拌したところ、水なじみが悪くママコが生じ分散する性状のものにはならなかった。
処理法は実施例5と同様で、20重量%のエタノール水溶液を35部添加し実施したが、エタノール水添加時に大豆7Sたん白が塊状となり作業性が不良であった。また、分散性の評価として、100mlの水にこの大豆7Sたん白処理物を3g加えスプーンでゆっくりと60秒攪拌したところ、水なじみが悪く分散する性状のものにはならなかった。
T−aをトレーに薄く広げ、ファン付きのインキュベーターにて60℃の条件下4時間放置した。放置後、100メッシュの篩に通した大豆7Sたん白処理物を得た。評価として、100mlの水にこの大豆7Sたん白を3g加えスプーンでゆっくりと60秒攪拌したところ、水なじみ悪くママコが多く生じ分散する性状のものにはならなかった。
Claims (5)
- 大豆7Sたん白の粒子表面をエタノール水で処理することを特徴とする改良大豆7Sたん白の製造法。
- エタノール水のエタノール濃度が30重量%以上95重量%以下である請求項1記載の改良大豆7Sたん白の製造法。
- エタノール水が大豆7Sたん白100重量部に対し15重量部以上である請求項1記載の改良大豆7Sたん白の製造法。
- 改良大豆7Sたん白の5重量%の水分散液がpH6.8以下である請求項1記載の改良大豆7Sたん白の製造法。
- 請求項1記載の方法により製造された改良大豆7Sたん白。
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