JPS6394978A - 固定化枝切り酵素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は固定化枝切り酵素に関し、詳しくは各種澱粉糖
の製造において使用する、特定の担体に固定化した枝切
り酵素に関する。この固定化枝切り酵素は、各種固定化
アミラーゼと併用することによって澱粉液化液からグル
コース、マルトース、マルトオリゴ糖等の澱粉糖を高収
率で得ることができる。

〔従来の技術、発明が解決しようとする問題点〕

澱粉液化液からグルコース、マルトース、マルトオリゴ
糖等の澱粉糖を高収率で得るために、ネイティブのグル
コアミラーゼやβ−アミラーゼとネイティブの枝切り酵
素を併用する方法が知られており、工業的にも実施され
ている。

近年、これら酵素を固定化してプロセスを連続化する試
みがなされている。グルコアミラーゼやβ−アミラーゼ
の固定化については可成りの成果を挙げているが、枝切
り酵素の固定化技術に関しては事例が少なく、かつ良好
な結果も得られていない。

枝切り酵素の固定化技術に関しては、上田ら［Ｂｉｏｔ
ｅｃｈ、　ａｎｄ　Ｂｉｏｅｎｇ、、１０．６６５−６
７６　　（１９７８）　；　１ｂｉｄ、具、　２１３７
−２１５４　　（１９８０）　　コ、高崎ら［微生物工
業技術研究所研究報告書、第５０巻、６３　（１９７８
）　；　　１ｂｉｄ、第５２巻、　ｌ　　（１９７９）
および特開昭５９−３５９５４号公報］等がある。しか
し、前者においては得られる枝切り酵素の発現活性が低
く、また連続運転下での安定性も悪く、工業的規模での
実施に対しては十分なものと云えない。後者においては
、微細な粒子を用いて比較的高い初期の発現活性を得て
いるものもあるが、その場合でも活性維持は１５〜２０
日程度であり、前記各種固定化アミラーゼと併用するに
は不十分である。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、枝切り酵素を固定化するための担体につ
いて検討を重ねた結果、特定の担体な使用すると、従来
よりも高い酵素活性の固定化率を示し、しかも酵素活性
を長期間に亘って安定的に維持できることを見出し、か
かる知見に基いて本発明に到達した。

すなわち本発明は、微弱酸性多孔質吸着樹脂。

弱酸性カチオン交換樹脂、フェノール系吸着樹脂および
多孔質キトサンより選ばれた担体に、澱粉中のα−１，
６−ゲルコンド結合を加水分解する枝切り酵素を固定化
させた固定化枝切り酵素に関する。

澱粉中のα−１，６−ゲルコンド結合を加水分解する枝
切り酵素としては、バチルス・アンドプルリティカス、
クレブシェラ・二ニーモニアナト°の微生物起源のプル
ラナーゼやシュードモナス・アミロデラモサ、シトファ
ーガ属微生物等が生産するイソアミラーゼを用いること
ができるが、グルコース生成アミラーゼではほとんどが
ｐＨ４，０〜６．０１マルトオリゴ糖生成アミラーゼで
はほとんどがｐＨ５，０〜８．５の範囲に至適ｐＨを有
するので、枝切り酵素も同様の安定かつ至適ｐＨ範囲を
有するものを用いることが望ましい。

これら枝切り酵素を効果的しこ固定化しうる担体につい
て、本発明者らが検討した結果、特に微弱酸性的多孔質
吸着樹脂１弱酸性カチオン樹脂、フェノール系吸着樹脂
、多孔質キトサンなどが好適な担体であることを見出し
た。より具体的には、デュオライト系樹脂（ダイヤモン
ド・ジャムロック社製）の商品名ｉｓ　−７６１４、ｒ
Ｓ　−７６２Ｊ　。

ｒＥＳ　−７７ＬＪ　、　　ｒＣ−４６４」、　　ｒＡ
−７Ｊ　、　　ｒＳ−５８７Ｊ　、　　「Ａ−５６２Ｊ
や粒状多孔質キトサン（富士紡績社製、商品名「キトパ
ール」）を挙げることができる。

なお、上記多孔質キトサンとしては自然界に広く存在し
、甲殻類、−節足動物などに多く含まれる天然高分子キ
チンを脱アセチル化して得られるキトサンがあり、特に
粒状化、多孔質化したものや良好な吸着性能をもたせた
ものが好ましく、前記の「キトパール」は好適なもので
ある。これは天然高分子キチンを脱アセチル化した後、
ジカルボン酸、ジアルデヒド、ジイソシアネート等で架
橋して耐酸性を付与したものに、さらにスペーサーとし
て脂肪族または芳香族系などの官能基を導入した多孔性
ビーズであり、ｐＨ安定性、耐薬品性、熱安定性にすぐ
れている。この「キトパール」は粒径０．１〜３．０ｍ
ｍ、孔径３．Ｏｐｍ以下、比表面積１５〜２３０＆　／
ｇであるが、本発明ではこの値に制限されるものではな
い。

なお、枝切り酵素の固定化方法は特に制限されず、たと
えば緩衝液中で該酵素と担体を接触させる方法を採用す
ることができる。その１例を示すと、［キトパールＪ　
Ｌｏｏｍｇを０．０１〜０．２０モル濃度の各種緩衝液
（ｐＨ４，０〜８．０）で十分に平衡化した後、枝切り
酵素５〜５００単位を緩衝液２ｍｌに溶解して添加し、
十分に混合する。次いで、室温にて０．５〜２４時間放
置するか、または０．５〜５．０時間往復振とう処理（
１２０ストロ一ク／分）した後、ガラスフィルターで濾
過し、続いて種々の緩衝液５０ｍｅで洗浄する。

このようにして得られる固定化酵素は見かけ上の固定化
率が９０％以上であり、固定化酵素の発現活性は担体湿
重Ｍｋ　１　ｇあたり４０〜２０００単位である。なお
、見かけ上の固定化率は次式によって算出した値である
。

酵素の固定化方法としては、上記方法のはか担体をカラ
ムに充填したのち酵素溶液を下降法または上昇法により
通液する方法も適用できる。

ここで、ネイティブの枝切り酵素および固定化技切り酵
素の活性は、基質としてプルランまたはアミロペクチン
（もち米澱粉原料）を用いてそれらの至適反応条件で反
応を行なうことによって求めることができる。また、酵
素活性はそれぞれの反応条件で１分間に１μｍｏｌのα
−１，６−グルコシド結合を切断する酵素量を１単位（
１国際車位ＩＵ）として表わすことにする。

本発明で得られた固定化枝切り酵素はネイティブまたは
固定化したグルコアミラーゼ、β−アミラーゼまたはマ
ルトオリゴ糖生成アミラーゼ等のアミラーゼとともに用
（・て、それぞれの生成する澱粉糖の収率を高める目的
で通常使用される。

すなわち、グルコアミラーゼと併用する場合においては
、グルコース純度が９０％以上の時１〜３％収率を高め
ることが可能であり、固定化グルコアミラーゼと固定化
枝切り酵素の場合でも９５％を越えるグルコース純度を
達成することも可能である。

β−アミラーゼと併用する場合においては、マルトース
純度が５０％以上の時で、５〜１５％収率を高めること
が可能である。

また、マルトオリゴ糖生成アミラーゼと併用する場合に
おいては、マルトオリゴ糖の純度が３０％以上の時、３
〜８％程度収率を高めることが可能である。

なお、これら澱粉糖を製造する場合の原料澱粉としては
種々のものが使用できるが、通常馬鈴薯膜Ｌ　甘苦澱粉
、コーンスターチ、ワキシーコーンスターチ、キャラサ
バ澱粉等を用いる。また、反応器に通液する澱粉液化液
のグルコース当量（ＤＥ）は通常、１〜３５、好ましく
は５〜２０の範囲にあるものを用いるのが良い。ここで
、澱粉液化液のＤＥがワキシーコーンスターチの場合１
以下、それ以外の澱粉ではＤＥが５以下のものは老化が
激しいので、その取扱いに工夫が必要である。一方、Ｉ
ＣＥが３５以上になると、グルコアミラーゼによるグル
コース生成に対しては適合成が促進すれてイソマルトー
ス、パノースなどの生成が増大し、グルコースの収量が
低下する。また、各種マルトオリゴ塘の生成に対してグ
ルコース。

マルトース等の低分子糖の生成が増大し、かつマルトオ
リゴ糖の収量が低下するので適当でない。

なお、各種澱粉を液化する方法は特に制限はないが、通
常は液化型α−アミラーゼまたは塩酸等の酸で処理する
。

次に、マルトオリゴ糖とはマルトース、マルトトリオー
ス、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルト
テトラオース等を意味する。

固定化アミラーゼと併用する固定化枝切り酵素の比率に
ついては、後者の量が増すほど澱粉糖の濃度（収率）を
高めることができるが、通常発現活性ベースで前者１に
対して後者０．１〜５、好ましくは０．２〜２の範囲と
する。固定化枝切り酵素の比率を上限以上としても、相
応する効果が奏されない上に、反応器の大きさが比例的
に大きくなるので経済的に好ましくない。

なお、ここで使用する各種固定化アミラーゼの発現活性
は、その使用条件によって絶対値が大きく変るので、次
のような測定条件を設定して求めた。すなわち、各種固
定化アミラーゼ１０ｍｇ（ｗｅｔ）を０．５ｍｌの該ア
ミラーゼに好適なｐＨの５０ｍＭ緩衝液（５０ｍｌ三角
フラスコ中）に加え、十分に馴染ませた後、ｌｏｗ／ｖ
％可溶性でん粉（Ｍｅｒｃｋ社製）　　５．０ｍｌを加
えて４０°Ｃで１０分間往復振とう機により　１２０ス
トロ一ク／分、４ｃｍ幅で振とうしながら酵素反応を行
ない、生成還元糖をＳｏｍｏｇｙｉ−Ｎｅｌｓｏｎ法で
測定し、発現する活性を求めた。なお、１単位とは１分
間に１μｍｏｌのグルコシド結合を切断する酵素量を意
味する。

□　本発明の固定化枝切り酵素を前記固定化アミラーゼ
と併用し複合酵素系として用いる場合、反応器の形態と
充填方法は種々の態様が考えられる。たとえば、２種の
固定化酵素を別々の容器に充填する方法、２種の固定化
酵素を混合してから同じ容器に充填する方法、さらには
２種のネイティブ酵素を一定の比率で混合した後、同時
に固定化し、容器に充填する方法等がある。

〔実　施　例〕

次に本発明を実施例により詳しく説明する。

実　　施　　例　　１ 酵素としてクレプシェーラ・ニエーモニア起源のプルラ
ナーゼ（比活性５０ＩＵ／ｍｇ−タンパク、大野製薬味
製）を用い、担体として第１表に示したものを使用して
固定化プルラナーゼを得た。すなわち、担体０．２ｇに
対して４０ＩＵの酵素をｐＨ７，０のＯ，１Ｍ！Ｊン酸
緩衝液で２．０ｍｌとしたものを内径２０ｍｍの試験管
に入れ、室温下１時間、１２０ス）＋−−り、４ｃｍ幅
で往復壁とうしながら酵素な担体に固定化した。次いで
、これを濾過した後、さらに２０ｍＭ！Ｊン酸緩衝液（
ｐＨ７，０）を用いてタンパクが溶出しなくなるまで十
分に洗浄して固定化プルラナーゼを得た。

この固定化プルラナーゼについて、次の方法により実際
に発現する活性を測定した。すなわち、固定化プルラナ
ーゼ１０ｍｇ　（ｗｅｔ）を０．５ｍ／の１０ｍＭリン
酸バッファ　　（ｐＨ７，０）　　（５０ｍ１三角フラ
スコ中）に加え、十分に馴染ませた後、１０　ｗ／ｖ％
プルラン（体厚生化学研究所製、分子量６．５Ｘ　１０
４）５．０ｍｌを加えて４０°Ｃで１０分間往往復壁う
機により［２０ストロ一ク／分、４ｃｍ幅で振とうしな
がら酵素反応を行ない、生成還元糖をＳｏｍｏｇｙｉ−
Ｎｅｌｓｏｎ法でマルトトリオースをスタンダードとし
て測定し、発現する活性を求めた。なお、１単位とは１
分間に１μｍｏｌのグルコシド結合を切断する酵素量を
意味する。得られた固定化プルラナーゼの発現活性の値
を第１表に示す。

実　　施　　例　　２ 酵素としてバチルス・アンドプルリティη又起源のプル
ラナーゼ（比活性４．９　ＩＵ／ｍｇ−タフ　ハク、Ｎ
ｏｖｏ社製）を用い、さらに担体として第２表に示した
ものを使用して、実施例１と同様にして固定化プルラナ
ーゼを得た。なお、固定化に際し酢酸緩衝液（ｐＨ４，
５）を使用したこと以外はすべて実施例１の方法に従っ
て固定化した。得られた固定化プルラナーゼの発現活性
をｐＨ４，５で行なったこと以外は実施例１と同様の方
法で測定した。得られた結果を第２表に示す。

微弱酸性多孔質吸着樹脂 デュオライトＳ　−７６１６６，１ Ｓ　−７６２７４，９ フ工ノール系吸着樹脂 デュオライトＡ−７６１，７ Ａ−−５６２６６，１ Ｓ　　−５６８６３，１ 粒状多孔質キトサン キトバールＢ　ＣＷ　３５０５　　　１３５．４微弱酸
性多孔質吸着樹脂 デュオライトＳ　−７６１４０，３ 〃Ｓ−７６２６５，９ デユオライトＥ　Ｓ　−７７１３１，８弱酸性カチオン
交換樹脂 デュオライトＣ−４６４９０，６ 粒状多孔質キトサン キトバールＢ　ＣＷ　３５０５　　　１４０．２比較例
１ 酵素トしてクレブシエーラ・ニューモニア起源のプルラ
ナーゼ（比活性５０ＩＵ／ｍｇ−タンパク、大野製薬■
製）を用い、担体として第３表に示したセライト、パー
ライトまたは活性アルミナを使用して実施例１に記載の
方法に従って固定化プルラナーゼを得た。得られた発現
活性の値を第３表に示す。

セライト　　　　　　　　　　　　２２．２パーライト
　　　　　　　　　　　３１．５活性アルミナ　　　　
　　　　　１３．７実　　施　　例　　３ 酵素としてマルトテトラオース生成アミラーゼ（シュー
ドモナス・ストッツエリ起源、比活性８０．８ＩＵ／ｍ
ｇ−タンパク）を用い、固定化用担体として微弱酸性吸
着樹脂のデュオライトＳ　−７６１（ダイヤモンド・ジ
ャムロック社製）を使用して固定化酵素を得た。すなわ
ち、担体２０ｇを５０ｍＭＴｒｉｓ　−ＨＣＩバｙ　７
７−　（ｐＨ７，０）で十分に平衡化した後、ｌ　ＯＯ
ｍｅの同一バッファーに溶解した２０．０ＯＯＩＵの酵
素を添加し、室温で１時間往復振とう　（３００ｍｌ’
三角フラスコ中、１２０ストロ一ク／分、４ｃｍ幅）し
ながら酵素な担体に固定化した。

次いで、濾紙で濾過した後、１０　ｍＭ　Ｔｒｉｓ−Ｈ
ＣＩバソファー（ｐＨ７，０）でタンパクが溶出しなく
なるまで十分に洗浄し、発現活性が２５　ＩＵ／ｇ−担
体の固定化マルトテトラオース生成酵素を得た。

また、枝切り酵素であるプルラナーゼ（クレブシェーラ
・ニューモニア起源、比活性５０■Ｕ／ｍｇ・タンパク
）を用いてｐＨ６，０のリン酸バッファーを使用したこ
と以外は上記と同様の方法で同一の担体に固定化し、発
現活性７４．９　ＩＵ／ｇ−担体の固定化酵素を得た。

次に、直径２７ｍｍ、長さ１３０ｍｍのガラスカラム２
本を用いて、一方にマルトテトラオース生成固定化酵素
Ｌｏａｆ、他方にマルトテトラオース生成固定化酵素Ｌ
Ｏｍｌと固定化枝切り酵素８ｍｌを混合（発現活性比で
約４：　　１）してそれぞれ充填した。基質として２６
．２％（Ｗ／Ｗ）の澱粉液化液（ＤＥ＝８、　　ｐＨ７
，２）を用いて温度４５℃、流速２４ｍｔ　／　ｈｒの
条件で連続通液した。その結果を第４表に示す。また、
上記記載の条件で連続通液したときの単−酵素系および
複合酵素系におけるカラム流出液のマルトテトラオース
濃度の経時変化を第５表に示す。

実　　施　　例　　４ 担体として粒状多孔質中トサン、「キトパールＢＣＷ３
５ｏｓ」（富士紡績社製）を使用して実施例３に記載の
方法に従ってマルトテトラオース生成酵素およびプルラ
ナーゼを固定化した。得られた固定化マルトテトラオー
ス生成酵素および固定化プルラナーゼの発現活性は、そ
れぞれ３５０　ＩＵ／ｇ−担体およびＬ１２ＩＵ／ｇ−
担体であった。

次に、直径２７ｍｍ、長さ１３０ｍｍのガラスカラムを
用いて、一方に固定化マルトテトラオース生成酵素１０
コと固定化プルラナーゼ５ｍｌを混合（発現活性比で約
４：　　１）１．て、それぞれ充填した。基質として２
６．２％（Ｗ／Ｗ）の澱粉液化液（ＤＥ＝８、　　ｐＨ
７，２）を用いて温度４５°Ｃ１流速３０ｍ１　／　ｈ
ｒの条件で連続通液した。その結果を第４表に示す。ま
た、上記記載の条件で連続通液したときの屯−酵素系お
よび複合酵素系におけるカラム流出液のマルトテトラオ
ース濃度の経時変化を第５表に示す。

０　　　　　　　　４４．８　　　　　　　　５０．３
１０　　　　　　　　４１．５　　　　　　　　４９．
２２０　　　　　　　　４０．０　　　　　　　　４７
．８３０　　　　　　　　３９．１　　　　　　　　４
６．０実−」虻−１Ｂ ０　　　　　　　　４５．２　　　　　　　　５０．９
ｔｏ　　　　　　　　　４５．０　　　　　　　　５０
．０２０　　　　　　　　４４．５　　　　　　　　４
９．０３０　　　　　　　　４３．９　　　　　　　　
４８．２実　　施　　例　　５ 担体として微弱酸性吸着樹脂「デュオライトＳ−７６１
Ｊ　　（ダイヤモンド・ジャムロック社製）ヲ用い、リ
ゾプス・デレマー起源のグルコアミラーゼ（新日本化学
（株）製）を固定化した。すなわち、担体のキトサンを
２０　ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５，５）で十分に平衡化し
た後、ｔｏＯ＋／容の三角フラスコに湿重量で１０ｇの
担当を秤量し、これにグルコアミラーゼを担体１ｇあた
り１０５０単位（液量Ｌｏｗ／）添加した。次いで、室
温で１時間往復振とつ（１２０ストロ一ク／分）して固
定化した。さらに、２０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５，０）
で蛋白質が溶出しなくなるまで十分に洗浄し、固定化グ
ルコアミラーゼ標品を得た。得られた固定化グルコアミ
ラーゼの発現活性は３６８　ＩＵ／ｇ−担体であった。

また、枝切り酵素であるプルラナーゼ（タレブシエーラ
・ニューモニア起源、比活性５０ＩＵ／ｍｇ・タンパク
）ヲ用いてｐＨ６，０のリン酸バッファーを使用したこ
と以外は上記と同様の方法で同一の担体に固定化し、発
現活性７３．２　ＩＵ／ｇ−担体の固定化酵素を得た。

次に、直径１０ｍｍ、長さ１５０ｍｍのガラスカラムを
用いて、一方に固定化グルコアミラーゼ５ｍｅ、他方に
固定化グルコアミラーゼ５ｍ／と固定化プルラナーゼ５
　ｍｌＶを混合（発現活性比で約５：　１）して、それ
ぞれ充填した。基質として３０．３％（Ｗ／Ｗ）のコー
ンスターチ液化液（Ｄ　Ｅ　＝　１１　、ｐＨ５，５）
を用いて温度５０°Ｃ１流速３．５ｍ／　／　ｈｒの条
件で連続通液した。結果を第６表に示す。

実　　施　　例　　６ 担体として粒状多孔質キトサン［キトバールＢＣＷ３５
０５Ｊ　　（富士紡績社製）を使用して、実施例５に記
載の方法に従ってグルコアミラーゼおよびプルラナーゼ
を固定化した。

得られた固定化グルコアミラーゼおよび固定化プルラナ
ーゼの発現活性はそれぞれ４３５ＩＵ／ｇ−担体および
１１２ＩＵ／ｇ−担体であった。

次に、直径１０ｍｍ、長さ１５０ｍｍのガラスカラムを
用いて、一方に固定化グルコアミラーゼ５　ｍｅ　。

他方に固定化グルコアミラーゼ５ｍ１４と固定化プルラ
ナーゼ５ｙ／’を混合（発現活性比で約４：　　１）し
て、それぞれ充填した。基質として３０．３％（Ｗ／Ｗ
）のコーンスターチ液化液（ＤＥ＝１１．　　ｐＨ５，
５）を用いて温度５０°Ｃ１流速３．３ｍｌ　／　ｈｒ
の条件で連続通液した。結果を第６表に示す。また、反
応温度を４５°Ｃとしたこと以外は上記記載の方法に従
って、カラム流出液のグルコース濃度が９５％以上にな
るように通−液速度を変化させ、連続的に通液した。

そのときの通液速度の経時的変化を第７表に示す。なお
、通液速度は次式により求められる空塔速度（ｈｒ号）
で表わした。

１　　　　　　　　　！ 実施例７ 担体として微弱酸性吸着樹脂「デーオライドＳ　−７６
ＬＪ　　（ダイヤモンド・シャムロゾク社製）を用い、
β−アミラーゼ（大豆起源、長瀬産業■製）を常法によ
り固定化した。得られた固定化β−アミラーゼの発現活
性は２Ｌ５ＩＵ／ｇ−担体であった。

次に、直径１０ｍｍ、長さ１５０ｍｍのガラスカラムを
用いて、一方に固定化β−アミラーゼ５　ｒｎｔ　％他
方に固定化β−アミラーゼ５ｍｌと実施例４に記載の方
法に従って得た固定化プルラナーゼ（発現活性７４．９
　ＩＵ／ｇ−担体）　　４．０ｍｌを混合（発現活性比
で約４：　　１）して、それぞれ充填した。基質として
２５％（Ｗ／Ｗ）の澱粉液化液（ＤＥ＝８．　　ｐＨ６
，０）を用いて、温度５０°Ｃ１流速５．２ｍｅ　／　
ｈｒの条件で連続的に通液した。得られた結果を第８表
に示す。

実施例８ 担体として多孔質キトサン［キトパールＢＣＷ３５０５
Ｊ　　（富士紡績社製）を用し・、β−アミラーゼ（大
豆起源、長瀬産業（株）製）を常法により固定化した。

得られた固定化β−アミラーゼ（現活性は２３０　ＩＵ
／ｇ−担体であった。

また、同一の担体にクレブシェーラ・ニューニア起源の
プルラナーゼを実施例３に記載の−に従って固定化した
。この酵素の発現活１１１２　ｒＵ／ｇ−担体であった
。

次に、直径ＬＯｍｍ、長さ１５０ｍｍのガラス力を用い
て、一方に固定化β−アミラシー５ｍｅ方に固定化β−
アミラーゼ５ｍｌと固定化プ。

ナーゼ２．５ｍｌを混合（発現活性比で約４：１て、そ
れぞれ充填した。基質として２５％（Ｗ）の澱粉液化液
（ＤＥ＝８．ｐＨ６，０）をノて、温度５０°Ｃ１流速
４．９ｍｌ／ｈｒの条件で連続ｒ通液した。結果を第８
表に示す。

また、上記記載の条件で連続通液したとき・−酵素系お
よび複合酵素系におけるカラム流のマルトース濃度の経
時変化を第９表に示すゴ　　　　　　　艶 実施例８ ０　　　　　　５３．２　　　　　　６４．５ｔｏ　　
　　　　　５３．０　　　　　　６５．０２０　　　　
　　５２．０　　　　　　６４．２３０　　　　　　５
１．２　　　　　　６３．９〔発明の効果〕 本発明の固定化枝切り酵素は、その再利用が可能である
ばかりでなく、各種アミラーゼと併用することによって
、目的とする澱粉糖の収率な高めることができる。とり
わけ、客種固定化アミラーゼと併用した場合には、完全
な連続運転により各種澱粉糖を高収率で製造することが
できる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 微弱酸性多孔質吸着樹脂、弱酸性カチオン交換樹脂、フ
   ェノール系吸着樹脂および多孔質キトサンより選ばれた
   担体に、澱粉中のα−１，６−グルコシド結合を加水分
   解する枝切り酵素を固定化させた固定化枝切り酵素。