JPS6383020A - 中枢性神経退行性疾患の進行防止および治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は神経成長因子（Ｎｅｒｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆ
ａｃｔｏｒ。

以下ＮＧＦと略す）の中枢組織内での産生と分泌とを誘
発し、もって支配神経の機能を賦活し、かつ支配神経の
修復あるいはまた未変性神経による再支配を促進して、
アルツハイマー型老年性痴呆症（Ｓｅｎｉｌｅ　Ｄｅｍ
ｅｎｔｉａ　ｏｆ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ　Ｔｙｐｅ、以
下５ＤＡＴと略す）をはじめとする中枢性神経退行性疾
患の進行を防止しかつ治療する剤に関するものである。

〔発明の背景〕

ＮＧＦはＲ，Ｌｅｖｉ−ＭｏｎｔａｌｃｉｎｉやＳ、Ｃ
ｏｈｅｎらによって発見されて以来、数多くの研究の対
象となり、すでに末梢神経細胞、とくに胎生期の知覚お
よび交感神経細胞の分化と成長、さらに成熟期の交感神
経細胞の生存と機能保持に必須不可欠の因子であること
が明らかにされている（Ｈ，ＴｈｏｅｎｅｎとＹ。

＾、Ｂａｒｄｅ：　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　Ｒｅｖ、　６０
，１２８４４３３５．１９８０およびＢ、Ａ、Ｙａｎｋ
ｅｒとＥ、Ｍ、５ｈｏｏｔｅｒ：　Ａｎｎ、　Ｒｅｖ、
　Ｂｉｏ−ｃｈｅｍ、　５１，８４５−８６８．１９８
２）。

しかしながらＮＧＦは超微量生理活性物質であり、Ｍｉ
織円内分布動態とはごく最近まで不明で、生体内での作
用を直接証明することはできなかった。

近年ＮＧＦの活性サブユニット　（以下β−ＮＧＦと略
す）に対する高感度酵素抗体測定法（ＥｎｚｙｍｅＬｉ
ｎｋｅｄ　Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ　Ａｓ５ａｙ、
以下ＥＬＩＳＡ　）の開発、改良が進み、検出怒度およ
び特異性が飛躍的に高まった（Ｓ、Ｆｕｒｕｋａｗａ　
ｅｔ　ａｌ：　Ｊ、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、　４０゜７３
４−７４４．１９８３およびＳ、ＫｏｒｓｈｉｎｇとＨ
，Ｔｈｏｅｎｅｎ：Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ
、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　８０．３５１３−３５１６．１
９８３）。

またＮＧＦの遺伝子がクローニングされ、構造解析され
て、β−ＮＧＦの相補的ＤＮＡ　（ｃＤＮＡと略す）を
プローブとして、そのメツセンジャーＲＮＡ　（ｍＲＮ
Ａと略す）を定量する方法も確立された（Ｄ、Ｌ、５ｈ
ｅｌ　ｔｏｎとり、Ｆ、Ｒｅ１ｃｈａｒｄｔ：　Ｐｒｏ
ｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　８
１゜７９５１−７９５５．１９８４およびＲ，Ｈｅｕｍ
ａｎｎ　ら：ＥＭＢＯＪ。

３、３１８３−３１８９．１９８４）。

この結果末梢では交感神経の支配組織にＮＧＦとりわけ
そのｍＲＮＡの含量が高（、その量とノルエピネフリン
含量すなわち交感神経細胞の度合との間に正の相関があ
ることが確認された。

さらに驚くべきことに、ラットの中枢、とりわけ海馬、
新皮質、嗅球および前脳基底部の中隔野、ブロー力対角
帯、大細胞性基底核にもＮＧＦが検出され、しかもその
ｍＲＮＡ含量は海馬、新皮質に高く、基底部の中隔野で
は、ＮＧＦの検出されない脳の他の領域並に低いことが
判明した（Ｓ、Ｋｏｒｓｈｉｎｇら：ＥとＢＯＪ、　　
４．１３８９−１３９３．１９８５）。

本成績は、その後他の研究グループによっても次々に追
試された（Ｄ、Ｌ、５ｈｅｌｔｏｎとり、Ｆ、Ｒｅ１ｃ
ｈａｒｄｔ：Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓ
ｃｉ、　ＵＳＡ　８３．２７１４−２７１８゜１９８６
およびＳ、Ｒ，Ｗｈｉ　ｔｔｅｍｏｒｅら：Ｐｒｏｃ、
　Ｎａｔ、１．　Ａｃａｄ。

Ｓｃｉ、ＵＳＡ　８３．８１７−８２１．１９８６）。

この結果はＮＧＦが中枢におけるコリン作動性神経束に
対して、いわゆる「神経栄養因子」として作用している
ことを示す生理化学的実験事実を実証したものである。

すなわちＮＧＦは末梢のみならず中枢とりわけ海馬、新
皮質、嗅球などにおいても遺伝子発現つまり産生され、
分泌されて、この領域へ投射するコリン作動性神経束の
神経終末よりとりこまれ、逆軸索輸送によって大脳基底
部の起始核にある神経細胞本体に到ること。ここにおい
て、ＮＧＦは該神経の生存と、機能維持たとえばコリン
アセチル転移酵素（Ｃｈｏｌｉｎｅ　ａｃｅｔｙｌ−ｔ
ｒａｎｓｆｅｒａｓｅ、　ＣＡＴと略す）の遺伝子発現
等に不可欠な因子として作用していることが明らかとな
った（Ｍ、Ｅ、　Ｓｃｈｗａｂら：　Ｂｒａｉｎ　Ｒｅ
ｓ、　１６８．４７３−４８３゜１９７９およびＭ、　
５ｅｉｌｅｒとＭ、Ｅ、　Ｓｃｈｗａｂ：　Ｂｒａｉｎ
Ｒｅｓ、３００　、３３−３９．１９８４およびＨ，Ｇ
ｎａｈｎ　ら：Ｄｅｖ、　Ｂｒａｉｎ、　Ｒｅｓ、　９
．４５−５２．１９８３）。

また脳にもＮＧＦレセプターが存在し、ＮＧＦとレセプ
ターの複合体が大脳皮質から基底部へ、海馬からブロー
力対角帯および中隔野へ輸送されることも証明され（Ｍ
、ＴＢｎｉｕｃｈｉら：　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａ
ｃａｄ。

Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　８３．１９５０−１９５４．１９
８６）、ＮＧＦは中枢の生理機能に密接かつ決定的に関
与することがさらに確認された。

他方記銘力低下や失見当識を特徴的な早期症状とする５
ＤＡＴの直接の病因が中枢性コリン作動神経系の退行性
失調であることを示す知見はすでに数多くある。すなわ
ち５ＤＡＴ患者脳ではＣＡＴ活性が著しく低下している
が、早期においては、これが大脳皮質および海馬の神経
細胞の変性脱落によるというよりはむしろ、本領域への
外因性のアセチルコリン供給路であるコリン作動性神経
束の失調、変性によるものであることが一連の生化学的
検討から明らかにされている（Ｅ、　Ｋ、　Ｐｅｒｒｙ
ら：　Ｌａｎｃｅｔ。

！、　１８９．１９７７、その他）。

その後患者脳の病理学的所見（Ｐ、Ｊ、Ｗｈ　ｉ　ｔｅ
ｈｏｕｓｅら：　Ａｎｎ、　Ｎｅｕｒｏｌ、１０．１２
２−１２６．１９８Ｌその他）および前脳基底部破壊に
よる記憶、学習障害ラットの行動薬理学的解析（Ｃ，Ｆ
ｌｉｃｋｅｒら：　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｅｈａｖｅ、１８．９７３−９８
Ｌ　１９８３．その他）からも証明されるに到った。ま
た臨床的にもＳ　Ｄ　Ａ　Ｔ　、幌者の脳内コリン作動
系の賦活療法としてアセチルコリンエステラーゼ阻害剤
および前駆物質などの投与の試みもなされ、若干の症状
改善例も報告されている。これとは別に、５ＤＡＴ患者
におけるＮＧＦ遺伝子の発現を検討し、ＮＧＦ産生、分
泌の失調と５ＤＡＴの発症との相関を直接解析しようと
する動きも活発になりつつある（　Ｍ、　Ｇｏｅｄｅｒ
ｔら：　Ｍｏｌ。

Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ、　　１．８５−９２．１９８６）
。

〔発明の目的〕

発明者らは、以上述べた二つの大きな研究展開を背景と
して、中枢性神経退行性疾患とりわけ５ＤＡＴの特徴的
早期症状である記銘力の低下や失見当識として表れる学
習、記憶障害の直接原因が、大脳基底部から大脳皮質及
び海馬へ投射するコリン作動神経束の進行性変性と、そ
れによる支配域の機能不全であるとしても、さらにその
本質的原因は、該支配域において産生、分泌され神経支
配を保証する「神経栄養因子」たるＮＧＦの産生、分泌
不全であるとの立場に立つものである。

従って５ＤＡＴの進行防止あるいは治療の目的では、ア
セチルコリンの利用率の向上療法には一過性の効果以上
は期待できず、むしろ大脳皮質および海鳥域でのＮＧＦ
の産生、分泌を確保して、支配神経との間で成立してい
る機能上の悪循環を断つことこそ効果的であると考える
。ただしこの場合、遺伝子のクローニングによってヒト
型のβ−ＮＧＦの大量調製の道が拓かれたとはいうもの
の、分子量１０゜０００を越えるタンパク質の直接適用
には薬剤掌上の様々な制約は避けられないと予想される
。

発明者らは、ＮＧＦの遺伝子発現機能を賦活化し、産生
、分泌量を高める作用のある低分子化合物を検索し、こ
れを比較的軽症時に末梢投与して、中枢の大脳皮質や海
馬の残されたＮＧＦ産生能を高め、支配神経の変性の進
行を防止するとともに、神経修復ないし生存神経による
再支配等、脳機能の可望性に依拠する治療方法の確立を
目標として、本発明のスクリーニング法を設定した。す
なわち１ｎＶｉ　ｔｒｏでの二段階のＮＧＦ産生、分泌
促進試験、急性毒性試験、ｉｎ　ｖｉｖｏでのＮＧＦ産
生、分泌促進試験によって化合物を順次選別し、最終的
に行動薬理学試験によって効果を確認して本発明を完成
するに到った。以下試験方法と実施例とを示す。

なお、本明細書においては一般式（Ａ）における置換基
Ｒについて、Ｒが２個の水素原子又は２個のアシル基で
ある化合物群を化合物（Ｉ）、Ｒが−ＣＯ−である化合
物群を化合物（ＩＩ）　、Ｒが−ｃｏ−ｃｏ−である化
合物群を化合物（Ｉ［Ｉ）　、ＲがＣ（Ｃ）ｌｘ）ｚ−
である化合物群を化合物（ＩＶ）と呼び、これらの化合
物は一般の試薬カタログに記載されているものはそれを
購入して精製して用いたが、入手困難が見込まれるもの
は次のようにして調製してもちいた。

すなわち、無水塩化アルミニウムを触媒としたカテコー
ルと相当するカルボン酸クロリドとのフリーデル・クラ
フッ反応縮合吻、又はＢＦ３を触媒としたカテコールと
相当するカルボン酸とのフリーデル・フラッフ反応筒金
物を通常の方法で還元し精製して化合物（Ｉ）（Ｒ＝Ｈ
で、Ｒ，、Ｉ？２の一方が水素原子、他方がアルキル基
）を得た。

これで得た化合１ｉ　（１）　（Ｒ，Ｒ，・Ｈ，Ｒ２・
アセチル基）の水酸基をアセチル化し、これをカテコー
ルにかわる出発物質として上記の反応を繰り返し脱アセ
チルしてＲ１にもアルキル基を有する一連の化合物（１
）をえた。

水酸基のエステル型置換体は化合物（Ｉ）（１？＝Ｈ）
に塩基の存在下で酸無水物と反応させて化合Ｔｈ（Ｉ）
（Ｒ＝ニアシル）を、同じくホスゲン又は炭酸エステル
と反応させて化合物（ＩＩ）を、同じ（オキザリルクロ
リドと反応させて化合物（［［）を容易にかつ高い収率
で得た。

水酸基のエーテル型置換体は化合物（１）（Ｒ＝Ｈ）に
酸の存在下でアセトンと反応させて１ヒ合物（Ｎ）を高
い収率で得た。

〔試験１〕マウス線維芽細胞を用いるｉｎ　ｖｉｔｒ。

ＮＧＦ産生、分泌促進試験 マウス線維芽細胞樹立株、Ｌ−Ｍ細胞（ＡＴＣＣ。

ＣＣＬ　１．２　）は血゛清非依存的に増殖し、培養培
地中にＮＧＦを産生、分泌すること、比較的高濃度のカ
テコールアミン類が、アドレナリン作動性レセプターを
介さずにこれを促進することが明らかになっている（Ｙ
、　Ｆｕｒｕｋａｉｖａら：　Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈ
ｅｍ、　２６Ｌ６０３９−６０４７．１９８６）。本培
養細胞を用いた検索法は多数の化合物の検索に好適であ
り、古川らの方法に準じて第一段スクリーニング系とし
て試験法を設定した。

すなわち、０．５ｚペプトン添加１９９培地（Ｇｉｂｃ
ｏ社製）にてＬ−Ｍ細胞を前培養し、２４孔培養プレー
ト（Ｆａｌｃｏｎ社製、培養孔あたりの培養面積２．１
ｃｍ”）に約３ｘ１０“個／培養孔の細胞をまき、３日
間３７℃にて培養して完全コンフルエント　（約１０６
細胞／培養孔）とする。培地を０．５χ牛血清アルブミ
ン（第五両分、Ａｒｍｏｕｒ社製）添加１９９培地（０
，５ｍｌ／培養孔）に交換する。被検化合物は本培地中
に所定の濃度で含有させ、２４時間後の培養培地中のＮ
ＧＦ？ｆｉ度を高感度ＥＬＩＳＡ法（Ｓ、Ｆｕｒｕｋａ
ｗａら：Ｊ。

Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、４０．７３４−７４４．１９８３
）によって測定する。

結果は被検化合物を含まない培地にて培養した対象の培
養培地中の濃度に対する倍率として求めた。

本ＥＬＩＳＡ法の検出限界ば０．２５ｐｇ／ｍｌであり
、対照のＮＧＦ？ｉ度は、通常５０　２００ｐｇ１０．
５ｎ３１／培養孔である。値は同一細胞標品を用いた４
回の試行の平均値上標準誤差として示しである。

実施例Ｉ ＮＧＦ産生分泌を促進する基本骨格を検討した結果を表
１に示す。これにより、オルト位に水酸基を有する１、
２−ジヒドロキシベンゼン環いわゆるカテコール環が活
性発現のための基本構造であることが判明した。

表１ 化合物　　　　　　　　濃度（ｍＭ）　　　　ＮＧＦ増
加率カテコール　　　　　　　０．０５　　　　　　１
．９７　　±　０．０８０．１５　　　　　　２．６５
　　±　０．２ルゾルシノール　　　　　０．０５　　
　　　　０．９９　　±　０．０７０．１５　　　　　
　１．２５　　±　０．１０ヒドロキノン　　　　　　
０．０５　　　　　　１．２１　　±　０．０８０．１
５　　　　　　０．５２　　±　０．０２２．３−ジヒ
ドロキシ　　　０．０５　　　　　　１．１４　　±　
０．１３ピリジン　　　　　　　０．１５　　　　　　
１．６３　　±　０．０６２．３−ジヒドロキシ　　　
　０．０５　　　　　　０．８３　　±　０．０９ナフ
タレン　　　　　　　０．１５　　　　　　０．７０　
　±　０．１４実施例２ １．２．ジヒドロキシベンゼン環の４位の側鎖（Ｒ２）
の影響を検討した結果を表２に示す。Ａ群にカテコール
アミン類、Ｂ群にはそれ以外のカテコール誘導体の効果
を示した。これにより、１．２−ジヒドロキシベンゼン
環の効果は、４位の側鎖によって増強されるが、その度
合は側鎖の構造によって大きく異なることが判明した。

すなわち、側鎖にアミノ基は不可欠ではなく（Ｂ群には
Ａ群に匹敵する活性を示すものがある）、水酸基やカル
ボキシル基も必須ではない。また不飽和よりは飽和構造
が好ましく、炭素数は２よりは３のほうが活性が高いこ
とが示唆された。また驚くべきことに、Ｂ群のホモカテ
コール（４−メチルカテコール）が、炭素数１ながら低
濃度域で炭素数３の化合物にせまる高活性を示すことが
判明した。本化合物は貰濃度添加では思ったほどの促進
活性がみとめられなかったが、この濃度域では細胞の変
形や一部細胞の器壁からの剥離が観察されたことから、
細胞毒性により効果が滅弱されたと考えられる。

表２ 対照　　　　　　　　　　　　　　　　　　　□　　　
１．００　　±　０．０５１−エピネフリン　　Ｃ）１
（０１（）ＣＨｔｌＪ）ＩＣＨ）　　　　　０．０５　
　　　６．２９　　±　０．６５０．１５　　１３．９
９　±２．０４ ドパミン　　　　　　　　ＣＨ２ＣＨ１ＮＨ２Ｏ，０５
６，８４±　０．１１０．１５　　１１．０２　±０．
８３ １−ＤＯＰＡ　　　　Ｃ１（ＺＣＨ（ＣＯＯＩ（）Ｎ）
Ｉｆ　　　　Ｏ，０５５，０３±０．１７０．１５　　
　５．０４　　±　１．０８イソプロテノール　　Ｃｔ
ｌ（ＯＨ）ＣＬＮＨＣＨ（ＣＬ）エ　０．０５　　　　
２．６Ｂ　　±　０．２６０．１５　　　９．７４　　
±　１，２５ノルエピネフリン　　ＣＨＣＯ’ｔＤＣＨ
ｚＮＨｚ　　　　　　Ｏ，０５４，８２±　０，３７０
．１５　　１０．３４　　±０，５３ＤＯＰＳ　　　　
　　ＣＨ（Ｏ）ｌ）Ｃ）Ｉ（ＣＯＯＨ）ＮＨ２Ｏ，０５
６，１３±　１．６６０．１５　　　７．６３　±０．
８１ カフェイン酸　　　　ＣＨ＝Ｃ）ＩｃＯＯＩＩ　　　　
　　　Ｏ，０５２，２１±　０．０９０．１５　　　５
．１６　±０．４５ ＤＯＰＡＣＣＨｔＣＯＯ）Ｔ　　　　　　　Ｏ，０５１
，７５±０．１１０．１５　　　１．９８　　±０．１
９ＤＯＭＡ　　　　　ＣＨ（ＯＲ）ＣＯＯＩＩ　　　　
　０．０５　　　１．６７　　±０．１００．１５　　
　１．６９　±０．０９ （表２つづき） ・ト４會乙袈すイリ’Ｊ　　　　　　　　　＜ｍｘイ）
３．４−ジヒドロキシ　　Ｃ０ＯＨＯ，０５０，９１？
　　±　０．０６安息香酸　　　　　　　　　　　　　
　　　０．１５　　　　１．３７　　±　０．１２ＤＯ
ＰＥＧ　　　　　　ＣＨ（ＯＨ）Ｃ１，ＯＨＯ，０５１
，０２±　０．０５０．１５　　　　８．９８　　±　
０．６１ＤＨＢＡ　　　　　　　ＣＨｔＮＨｔ　　　　
　　　　　Ｏ，０５１，５４±　０，１２０．１５　　
　　２．４６　　±　０．１８３．４−ジヒドロキシ　
　ＣＩＯＯ，０５０，９９±　０．０５ベンズアルデヒ
ド　　　　　　　　　　　　　　０．１５　　　　１．
３３　　±　０．３２ホモカテコール　　　ｃｏ３０．
０５　　　　８．２６　　士　０．７３０．１５　　　
　３．１４　　±　０．２６カテコール　　　　　ＨＯ
，０５１，６３±　０．０３０．１５　　　　２．１４
　　ｉ　　０．０９実施例３ Ｌ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生、分泌活性に対する促進効果は
当初カテコールアミン類特有の作用として見出されたも
のの、１，２−ジヒドロキシベンゼン環（カテコール環
）を有する化合物に共通な性質であり、より単純なアル
キル側鎖だけでも充分な増強効果が認められる可能性が
示唆された。そこで、１．２−ジヒドロキシベンゼンの
３位あるいはまた４位の（特許請求の範囲に示した化合
物（１）でＲ＝ｌ（のＲ１あるいはまたｌｈのアルキル
置換体の効表３ 化合物（１） Ｒ＝）ｉ　　　　　　　　　　　　　　濃度　　　　　
ＮＣＦ増加率Ｒ＋　　　　　　　Ｒｚ　　　　　　　　
（ｍＭ）対照　　　　　　−１，００±０．０６ＨＨＯ
，０３１，０３±　０．０４ ０．１０　　　　１．８１　　±　０．０９Ｈメチル　
　　　　　０．０３　　　　８．９１　　±　０．４３
０．１０　　　　２．３６　　±　１．９０Ｈエチル　
　　　　　０．０３　　　１０．０３　　±　０．９７
０．１０　　　１２．１３　　±　１．０９メチル　　
　　エチル　　　　　　０．０３　　　　６．３１　　
±　０．３９０．１０　　　　３．１９　　±　０．７
３ｎ−プロピｔｂ　　ＨＱ、０３　　　　９．８１　　
±　０．９２０．１０　　　１６．３０　　±　２，０
４（表３つづき） 化合物（１） Ｒ＝Ｈ濃度　　　　　ＮＧＦ増加率 Ｒ１Ｒｚ　　　　　　　　（ｍＭ） （表３つづき） 化合物（ｒ） Ｒ−Ｈ７１度　　　　　　ＮＧＦ）１加率Ｒ＋　　　　
　　　Ｒｚ　　　　　　　　（ｍＭ）メチ／Ｌ／　　　
　　ｎ−ブチル０．０３　　　６．８７　　±　０．６
００．１（１７，７３±　０．５３ メチル　　　　５ｅｃ−ブチル　　　　０．０３　　　
６．７４　　±　０．２５０．１０　　　７．００　　
±　０．７６メチ／Ｌｌ　　　　　ｔｅｒｔ−ブチル０
．０３　　　２．８２　　±　０．１４０．１０　　　
３．６５　　±　０．３９ｎ−ペンチ＃ＨＯ，０３５，
２６±　０．４３０．１（１９，９５±　０．９８ ）１　　　　　　　ｎ−ペンチル　　　０．０３　　　
６．３７　　±　０．２５０．１０　１０．２４土０．
７１ 果を詳細に検討し、表３の結果を得た。

これにより、Ｒ，、Ｒ２の置換基の位置の差は決定的で
はなく、炭素数２から５個の非分技型アルキル基をいず
れかにもち、ＲＩ＋　ＲＺの組み合わせがより「かさ高
くない」化合物、可及的には一方が水素原子であるよう
な組み合わせの化合物が、有効なカテコールアミン類並
ないしそれ以上の効果を、より低濃度で示すことが判明
した。また炭素数が小さい側鎖を有する化合物で観察さ
れる高濃度域における効果城門が、炭素数が大きいもの
では測定濃度域では観察されなくなることも明らかとな
った。高活性を示した化合物はカテコールアミン類とは
異なり、アドレナリン作動性の神経伝達物質活性を有す
ることは知られておらず、本発明用途での臨床通用上も
有利と判断され、以後高次の試験によってさらに検索す
ることとした。

実施例４ 実施例３において高活性が見出された化合物、すなわち
３あるいはまた４位に直鎖アルキル基を有するカテコー
ル類の高濃度域での急性期の細胞表４− 化合物　　　　　　　　　　　濃度　　　　　　　　　
　ＮＧＦ増加率“（ｍＭ）　　　　　　□ ２４時間培養　　　４８時間培養 対　　　照　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．
００　　±　０．０７　　　１．２１　　±　０，０６
＊２４時間培養時の対照に対する倍率 毒性は、カテコール環の遊離の水酸基に由来すると考え
られることから、これをエステル型ないしエーテル型置
換した場合のＮＧＦ産生・分泌活性におよぼす効果を検
討し表４の結果を得た。

これにより、エーテル置換体として、水酸基の一方また
は両方をメトキシ基とした化合物は全く活性を示さなか
った。一方、Ｂ群のエステル置換体では遊離の水酸基に
比べて短時間培養では効果は半減するものの、高濃度域
での活性低下は抑制され、しかも長時間培養で同一レベ
ルに近くまで回復することが判明した。またエーテル置
換体でも化合物（ＩＶ）では部分的に効果が保存される
ことが判明した。効果を示した化合物はいずれも培養中
に徐々に氷解されて遊離型となって作用していると考え
られる。生体投与時の急性期の毒性を極力抑えるための
有力な方法と考え、この種のエステル型、一部エーテル
型置換体についてもあわせて高次の試験によって検索す
ることとした。

〔試験２〕マウス脳アストロダリア細胞を用いるｉｎ　
ｖｉｔｒｏ　ＮＧＦ産生、分泌促進試験マウス末梢′！
Ｆ！７ｉｍ由来の樹立株細胞でＮＧＦ産生、分泌活性を
促進した化合物を、中枢組織での主要なＮＧＦ産生、分
泌細胞と考えられるアストログリア細胞を用いた系でさ
らに検索し、本発明の巨的に適した化合物の選別を行っ
た。

アストログリア細胞はマウス前脳から誘導し、培養系に
移した（Ｓ、　Ｆｕｒｕｋａｗａ　　ら：　Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ、　Ｂｉ。

ｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍｕｎ、　１３６．５７
−６３．１９８６）。

すなわち、生後８日目のマウス脳を細切し、カルシウム
、マグネシウム不含リン酸緩衝生理食塩水（以下ＰＢＳ
）で洗浄後、０．２５％トリプシン含有ＰＢＳ　中で３
７℃、３０分間処理し、パスツール・ピペットで組織を
はくして懸濁液とする。２００ｘｇで５分間遠心して細
胞および細胞凝集体を回収する。

これを１０％牛脂児血清、５Ｘ１０−’ユニット論のペ
ニシリン、５μｇ／ｍｌ　　のストレプトマイシンを含
有するダルベツコ変法イーグル培地（以下ＤＭＥｌ’ｌ
培地、Ｇｉｂｃｏ社製）に移し、３日毎に同培地を変換
しながら、１０−１４日日間化培養する。コンフルエン
トに達したら、トリプシン処理して別の培養器に分配し
て植え継ぐ。さらに２回以上植え継いで形態的に均一な
細胞集団とする。本実験に用いるのは、抗ヒトグリア線
維タンパク質（ＧＦＡＰ）ウサギ抗血清を用いたＰＡＰ
染色法（パーオキシダーゼ−抗パーオキシダーゼ染色法
）で、９７％以上が染色される細胞集団であり、これを
以下アストログリア細胞と呼ぶ。

アストロダリア細胞を２４孔培養プレート（Ｆａｌｃｏ
ｎ社製、培養孔あたりの培養面積２．１ｃｍ”）に約３
Ｘ１０’個／培養孔まき、１０％牛脂児血清含有ＤＭＥ
Ｍ培地にて３日間培養し完全コンフルエント（約１０７
細胞／培養孔）とする。培地を０．５χ牛血清アルブミ
ン（第五画分）含有ＤＭＥＭ培地に交換（０゜５ｍ１／
培養孔）して３日間培養する。もう−度培地交換してさ
らに３日間培養し細胞を培養停止期（ｑｕｉｓｃｅｎｔ
　ｓｔａｇｅ）に誘導する。被検化合物を所定の濃度で
含む０．５ｍｌの同培地に交換し、２４時間後の培養培
地中のＮ　Ｇ　Ｆ　濃度を前述の高怒度ＥＩｊＳＡ法に
よって測定する。結果は被験化合物を含まない培地で培
養した対照の培養培地中の濃度にたいする倍率として求
めた。本ＥＬＩＳＡの検出限界は０゜２５ｐｇ／ｍｔで
あり、対照のＮ　Ｇ　Ｆ　？ｍ度は通常１−１１−１Ｏ
ｐ、５ｍｌ　／培養孔であった。値は同一細胞標品を用
いた４回の試行の平均値上標準誤差として示しである。

実施例１ アルキル基を側鎖に持つカテコール化合物のＮＧＦ産生
、分泌促進活性を牛胎児血清やエピネフリンと比較して
検討した結果を表５に示す。

マウスアストログリア細胞はＬ−Ｍ細胞同様ＮＧＦを産
生分泌するが、培養静止ＦＪＩ（ｑｕｉｓｃｅｎｔ　ｓ
ｔａｇｅ）と増殖期（ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｔａｇｅ）　
とでは全く活性が異なり、停止期では数１１）ｇ／１０
６細胞／日の低レベルであるのに対し、１０％牛脂児血
清を加えて増殖期へ誘導すると２００−３００　ｐｇ／
１０６細胞７日の高レベルへと移行すること（Ｓ、　Ｆ
ｕｒｕｋａｗａら：　　Ｂｉｏｃｈｅｍ。

Ｂｉｏｐｈｙｓ、　　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍｕｎ、　１３
６．５７−６３．１９８６）が追試された。　エピネフ
リンやヒドロカフェイン酸も牛胎児血清には及ばぬもの
の促進活性を示した。

構造活性相関はＬ−Ｍ細胞の場合にきわめて類似し表５ Ｒ１Ｒ１ υ、ｌ’３　　　　　”Ｊｔ、Ｕｌ　　＝’ｄ、ｔ４１
（衾５つづき） 化合物　　　　　　　　　　濃度（ｍＭ）　　　　ＮＧ
Ｆ増加率ており、Ｒ１，Ｒ２の置換基の位置の差は決定
的ではなく、炭素数２から５個の非分枝型アルキル基を
何れかにもち、Ｒ６Ｒｚの組み合わせがより「かさ高く
ない」化合物、可及的には一方が水素原子であるような
組み合わせの化合物が牛胎児血清をはるかに上回る高活
性を示すことが判明した。

実施例２ カテコール環の水酸基の置換体の効果を表６に示した。

この場合もエステル型置換体では急性期の細胞毒性によ
る活性低下が抑制され、長時間培養で水酸基が遊離の化
合物と同一レベルに近い活性を示すことが判明した。

脳における主要なＮＧＦ産生、分泌細胞は、アストログ
リア細胞であると考えられ、脳全体でのＮＧＦの遺伝子
発現頻度から計算すると、アストログリア細胞は生理的
には増殖停止期にあると考えられる（Ｄ、　Ｌ、５ｈｅ
ｌｔｏｎ　とり、　Ｆ、Ｒｅ１ｃｈａｒｄｔ：　Ｐｒｏ
ｃ。

Ｎａ口、　八ｃａｄ、　　Ｓｃｉ、　　ＵＳＡ　　　旦
３．　２７１４−２７１８．　１９８６）。

非分枝型低級アルキル基の側鎖を３ないし４位にもつカ
テコール化合物はこの停止期のアストログ表　６ ＮＧＦ増加率“ 化合物　　　　　　　　　濃　度　　□（ｍＭ）　　　
　２４時間培＃４８時間培養１０χ牛脂児血ｉｆ　　　
　　　　　−４３，２１±　６．２０　　４８．９２　
　±　３．３５化合物（１）　　　　　　　　　０．１
０　　７７．３４　　±　９．２１　　１０６．２３　
　±　７．６１Ｒ，Ｒ，＝）１．　Ｒｔヨメチル　　　
　　０．２５　　　６．５９　　±　１．３４　　　２
．４７　　±　１．２２化合物（１）、　Ｒ−アセチル
　　０．１０　　４９．８２　　±　６．４４　　７７
．３５　　±　６．５２Ｒ１＝Ｈ，Ｒｉ〜ミルメチル　
　　　０．２５　　４１．２５　　±　７．３２　　８
２．３７　　±　７．２４化合物（ＩＩ）、　Ｒ＋・Ｈ
０，１０５２，３５±　５．２９　　７３．３７　　±
　４．２５Ｒ２，メチル　　　　　　　　　０．２５　
　５５．９２　　±　４．２５　　７８．３２　　±　
６．５０化合物（Ｉ［［）、　Ｉｌ、＝ＨＯ，１０４７
，２４±　３．９８　　６９．６２　　±　３．２５Ｒ
ｚ”メチル　　　　　　　　　０．２５　　５０．６２
　　±　４．７４　　７０．２２　　±　５．３７化合
物（ＩＶ）、Ｒ，＝Ｉ（０，１０２８，６２±　２．２
３　　４１．６３　　±　２．２１Ｒｚ’メチル　　　
　　　　　　０．２５　　３３．７１　　±　２．０９
　　５５．２５　　±　４．４２１２４時間培養時の対
照に対する倍率 リア細胞に対し著しいＮＧＦ産生、分泌活性を惹起させ
た。したがって水酸基のエステル型置換体を含めて、こ
れらの化合物が生体投与によって、脳におけるＮＧＦ産
生糸を著明に賦活化するものと期待される。

〔試験３〕急性毒性試験 試験法２において、ＮＧＦ産生、分泌促進活性を示した
化合物の生体での効果を評価するだめの前段試験として
急性毒性試験を行った。

実施例 非分技型低級飽ｆロアルキル基をもつカテコール化合物
をｄｄＹ雄性マウス（４週令）に腹腔内、静脈内ないし
経口投与し、常法によりＬＤ、。値（ｍｇ／ｋｇ）を求
めた。結果を表７に示す。

これによると、いずれの投与法に関しても、側鎖の炭素
数が増加するのに伴い急性毒性が低下するが、特に静脈
内投与でその傾向が著しい。またＬＤ５６の２５２を超
す量を静脈内及び腹腔内投与すると、特に低炭素数側鎖
化合物では一過性の痙彎をおこす個体が観察された。遊
離水酸基のエステル表７ Ｌ　Ｄ、。（ｍｇ／ｋｇ） 化合物　　　　　　　　□ 静脈内投与　　　腹腔内投与　　　経口投与ｚ メチル　　　　　　　　　　　＞　５０　　　　　　＞
　２００　　　　　＞　５００エチル　　　　　　　　
　　　＞　７５　　　　　　＞　３００　　　　　＞１
００Ｏｎ−プロピル　　　　　　　　　＞１５０　　　
　　　　＞　５００　　　　　＞１５０Ｏｎ−ブチル　
　　　　　　　　＞１５０　　　　　　＞　５００　　
　　　＞１５０ＯＲ，＝Ｈ メチル　　　　　　　　　　　＞　５０　　　　　　＞
　２００　　　　　＞　５０Ｏｎ−プロピル　　　　　
　　　　＞１５０　　　　　　　＞　５００　　　　　
　＞１５００型置換体やエーテル型置換体では相当する
遊離化合物に比してＬＤｓ。値は著明に上昇し、痙彎惹
起等の急性期の毒性症状も大巾に改善された。

以上より本化合物たとえば化合物（１）　（ＲＪ＋＝Ｈ
。

Ｒ２＝ｎ−プロピル、４−ｎ−プロピルカテコール）を
公知の製剤方法により任意の剤型として、注射、内服す
る場合の投与量としては、成人１回投与量として静脈内
投与では７５ｍｇ以下、非命管内投与では１００ｍｇ以
下、経口投与で７５０ｍｇ以下であることが望まれる。

水酸基のエステル型置換体ではそれぞれ１２５ｍｇ以下
、３７５−６２５ｍｇ以下、１２５０−１５００ｍｇ以
下と投与量を増大させることが可能である。

〔試験４〕ラツト腹腔内投与による中枢性ＮＧＦの産生
賦活試験 ＷｉｓｔａｒｔＪｊｉ性ラット（９−１００週令２００
−２５０ｇ）に被検化合物を０．５ｍｌの生理食塩水溶
液として腹腔内投与する。投与量、投与回数の影響は実
施例に示す。最終投与後２日目に動物をを髄強打により
殺し、脳各部分を採取して、水冷下吹の操作を行う。

脳各部分を秤量し、ホモジナイズ用緩衝液（０，１Ｍト
リス塩酸、２％牛血清アルブミン第五画分、２％ゼラチ
ン、１．ＯＭ　ＮａＣ１，０，０２χＮａＮｚ、２ｍＭ
ＥＤＴＡ、２．６ＫＩＥ／ｍｌアプロチニン、ｐＨ７，
６）を１０χ（Ｗ／Ｖ）となるように（中隔野のみ５９
４となるように）加え、Ｄｏｕｎｃｅ型ホモジナイザー
で３０ストロークホモジナイズする。各ホモジネートは
１００゜０００ＸｇｌＯ分間遠心し、上清５０ハをとっ
て、同量の希釈用緩衝液（（１，ＩＭ　　Ｆリス塩酸、
２％牛血清アルブミン第五両分、０．０２Ｚ　ＮａＮ３
．２０ｍＭ　ＣａＣ１ｚ、ｐＨ７，６）を加えて以下β
−ＮＧＦに対する高感度ＥｔｊＳＡ系（Ｓ、　Ｆｕｒｕ
ｋａｉｖａら：　Ｊ、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、４０．７３
４−７４４゜１９８３）によって定量する。定量限界は
０．２５ｐｇ／ｎ＋１である。結果は脳各部位の湿１シ
ｇあたりのβ−ＮＧＦＩ）ｇとして同時に実験した５頭
の平均値±標準誤差の値で示す。

実施例１ 化合物（Ｉ　）（Ｒ１Ｒ＋＝ｌ（、Ｒｚ＝ｎ−プロピル
、以下４−ｎ−プロピルカテコール）につき、５　ｍｇ
／ｋｇを１日おきに４回腹腔内投与し、最終投与２日後
に殺した場合の脳の各部位のＮＧＦ含量を、生理食塩水
のみを投与した対照群のそれと比較した結果を表８に示
す。前脳皮質部、海馬、嗅球においては著明にＮＧＦ産
生は促進されこれらの領域に投射するコリン作動性神経
束の起始核領域においても有意な促進が観察された。

実施例２ ４−ｎ−プロピルカテコールにつき、２．５ｍｇ、　５
ｍｇ。

１０ｍｇ／ｋｇをそれぞれ１日おきに腹腔内に１−４回
投与し、最終投与の２日後に殺して前脳皮質部のＮＧＦ
の含量を、生理食塩水のみを投与した対照群のそれと比
較した結果を表９に、また５　ｍｇ／ｋｇを４回投与し
た場合の前脳皮質および海馬におけるＮＧＦ含量の時間
的推移を検討した結果を表１０に示した。

表９の結果から、１回ないし２回投与では特に低投与量
では効果は出に（いが、３回投与によって急に有意な効
果が認められ、以後一定レベルを保つことが判明した。

また投与後の効果出現は比較的ゆるやかであり、数日間
以上にわたって効果が持続することが表１０の結果から
明らかとなった。

表８ ＮＧＦ含量（ｐｇ／ｍｇ組織湿重量） 脳部位　　□ 生理食塩水投与　　　４−ｎ−プロピルカテコール投与
前脳皮質部　　　　　　０．８７　　±　０．１１　　
　　　　２．１４　　±　０．４９゜海馬　　　　２．
２１±０．３２　　　３．９２±０．６３“嗅球　　　
　０．９２±０．０８　　　１．７０±０．２４亭１中
隔野　　　　　　　　０．７４　　±　０．０６　　　
　　　１．３９　　±　０．１４”線条体　　　　　　
　　０．２２　　±　０．０２　　　　　　０．２４　
　±　０．０４小脳　　　　０．３０±０．０９　　　
０．３３±０．１６生理食塩水投与に関して有意（市Ｐ
　＜　０．０５．　　林ｐ　＜　ｏ、ｏｔ　＞表９ 前脳皮質部のＮＧＦ念ｆ！、　（ｐｇ／閘ｇ湿重量）１
　　　０．９２±０．１３　　０．８９±０．１１　　
１．０３±０．２１　　１．２４±０．３６２　　　０
．９５±０．１０　　１．２３±０．１９　　１．２１
±０．３０　　１．５２±０．２９３　　　０．８３±
０．１１　　１．３７±０．２４”　　　１．６２±０
．３３°　　２．１６±０．４４°３４　　　０．８８
±０．１２　　１．８７±０．３２′″　　２．１９±
０．４０”　　２．２４±０．４５”表１０ ４回投与後の　　　　　　　　ＮＧＦ含量（ρｇ／ｍｇ
湿重量）時間 前脳皮質　　　　　　　　海　鳥 １２　　時間　　　　　　１．４１±０．４２　　　　
　２．３２±０．５６２４　　時間　　　　　　２．１
０±０．４７　　　　　３．０３±０．４４４８　　時
間　　　　　　２．２８±０．３２　　　　　３．７６
±０．４１７　　日　　　　　　　　　　　　２１５　
±　０．４８　　　　　　　　　３．９０　　±　０．
３６実施例３ 各種化合物５　ｍｇ／ｋｇを１日おきに３回投与し、最
終投与から４８時間後、７日後のＮＧＦの前脳皮質部の
含量を測定した結果を表１１に示した。

化合物（Ｉ）のうち遊離の水酸基をもつ一連の化合物（
Ｒ，Ｈ）における側鎖（Ｒ＋ないしＲＺ）の効果を比較
すると、炭素数３前後のアルキル基を側鎖にもつ化合物
が長期にわたって安定したＮＧＦレベルを保持させるこ
とが判った。またさらに遊離水酸基をエステル型に保護
した化合物にも遊離水酸基を有する化合物に匹敵する効
果が認められることが判明した。

以上総合すると、ｉｎ　ｖｉｔｒｏでアストログリア細
胞のＮＧＦ産生、分泌活性を促進した化合物は、末梢投
与によって中枢のＮＧＦ産生能を部位特異的に賦活し得
ることがｉｎ　ｖｉｖｏ実験で証明された。ただし生体
内での効果発現のためにはやや高投与量を頻回投与する
必要があることから、急性毒性試験（試験３）の結果を
考慮すると、より好ましい化合物として、炭素数３前後
の非分技型低級アル表１１ ＮＧＦ含量（ｐｇ／ｍｇ前脳皮質湿重量）化合物 ４８時間後　　　　　　　　　７日後 対　　照　　　　　　　　　　　０．９２　　　±　０
．１２　　　　　０．８７　　±　０．０９エチル　　
　　　　　１．９６　　±　０．４２”　　　　　１．
７３　　±　０．３９１ｎ〜プロピル　　　　１．９７
　　±　０．４１”　　　　　２．２８　　±　０．２
９軸ｎ−ブチル　　　　　１．８８　　±　０．４６”
　　　　　２．２５　　±　０．３３軸対照に関して有
意＜　＊　ｐ　＜　ｏ、ｏｓ、林ｐ　＜　０．０１　）
キル基を３ないし４位に有する化合物のうち、可及的に
は水酸基のエステル型置換体が考えられる。

〔試験５〕ラット受動的回避学習の保持に対する効果試
験 カイニン酸の前脳基底部への注入による受動的回避学習
の保持障害に対する防止効果と、障害状態からの反復学
習による回復の促進効果とを検討する。

Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ雄性ラット（９−１０週
令、２０〇−２５０ｇ）をネンブタール麻酔下（５０ｍ
ｇ／ｋｇ、　Ｉｔ！腔）脳定位固定装置に固定し、０．
２５μｇのカイニン酸溶液ＩＪＬｉ！（＋Ｊン酸緩衝生
理食塩水溶液、ｐＨ７，４）を直接定位注入（ｂｒｅｇ
ｍａ後方０．７ｍｍ、正中線側方２．７ｍｍ。

頭蓋表面後側方７．Ｏｍｍ）シて、淡蒼球復側部の両側
性障害モデルを作製する。対照はリン酸緩衝生理食塩水
のみで偽手術したラットとする。

受動回避学習は明暗画室をギロチンドアで仕切った５ｔ
ｅｐ−ｔｈｒｏｕｇｈ型の受動回避装置で行った。電気
シｇ７りは暗室床部グリッドに交流３ｍＡを３秒間通電
して与える。学習試行に先立って馴化試行を行う。すな
わちラットを明室に入れ１０秒間ドアを開放して、暗室
に入れば直ちにドアを閉じ、１０秒間放置後取り出す、
１０秒以内の潜時で暗室に入らないラットは除外する。

獲得試行は馴化試行と同様に行い、ラットが暗室に入っ
た直後に電気ショックを与え直ちに取り出す。保持試行
はラットを明室に入れ１０秒後のドア開放から、暗室へ
入るまでの潜時を測定する。最大測定時間は３００秒と
し、３００秒以上回避したラットの潜時は３００秒とし
た。

実施例１ 手術１日前に馴化試行を行い、１０秒以上の潜時を示し
たラットはあらかじめ除外しておく。３０頭にカイニン
酸注入手術、他の３０頭にリン酸緩衝生理食塩水のみに
よる注入偽手術を行った。手術群、偽手術群をそれぞれ
さらに１０頭の群に分け、１日、４日、７日後に生理食
塩水、化合物（１）　（Ｒ，Ｒ＋・Ｈ１Ｒｚ＝ｎ−プロ
ピル；４−ｎ−プロピルカテコール）、化合物（Ｕ　）
　（Ｒ＋＝ＦＩ、　Ｒｚ＝ｎ−プロピル）の各５　ｍｇ
／ｋｇを生理食塩水溶液として、それぞれ腹腔内に投与
した０手術１０日後に獲得試行を行い２４時間後に保持
テストを行った結果を表１２に示す。

カイエン酸注入群では、リン酸緩衝生理食塩水注入群に
対して、学習、記憶の著しい保持障害を示したが、ｉｎ
　ｖｉｔｒｏ　　及びｉｎ　ｖｉｖｏ　　で著明なＮＧ
Ｆ産生分泌促進活性を示した代表化合物である４−ｎ−
プロピルカテコールとその水酸基のエステル型置換体、
化合物（ＩＩ　）（Ｒｔ□Ｈ，Ｒｚ＝ｎ−プロピル）は
、カイニン酸注入による学習記・Ｌｑの保持障害に対し
て著明な防止効果を示した。

実施例２ 手術１日前に馴化試行を行い、１０秒以上の潜時を示し
たラットはあらかじめ、除外しておく。３０頭にカイニ
ン酸注入を行い、手術１０日後に獲得試行を行った。２
４時間後、４−ｎ−プロピルカテコールとその水酸基の
エステル型置換体、化合物（ｎ）（Ｒ１”Ｈ，Ｒ２・ｎ
−プロピル）とをそれぞれ１０頭ごとに生理食塩水溶液
として５　ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与した。

残りの１０頭には生理食塩水溶液のみを腹腔内投与して
対照とした。投与２日後に１回目の保持試行表１２ 偽手術対照群 生理食塩水投与　　　　　　　　２８０　　±　５１０
力イニン酸投与群 生理食塩水投与　　　　　　　　　２７　　±　１１０
同−群生理食塩水投与に関して有窓（車Ｐ＜０．０１　
）を行い、３００秒以内に暗室に入ったラットには電気
ショックを与えて学習を強化した。１回目の保持試行の
翌日に同量の被検化合物ないし生理食塩水を投与し、そ
の２日後２回目の保持試行を行った。３００秒以下の潜
時を示したラットには電気ショックを与えて学習を強化
した。同じ間隔で被検化合物ないし生理食塩水投与と保
持試行をさらに、２回くり返し、各保持試行時の成績を
比較した。

表１３にその結果を示す。

カイニン酸投与による前脳基底部障害う７）の学習、記
憶障害は、保持試行時に学習を強化すると徐々に回復す
る。４−ｎ−プロピルカテコール化合物とその水酸基の
エステル型置換体、化合物（ＩＩ　）　（Ｒ＋＝Ｈ，Ｒ
２＝ｎ−プロピル）は、カイニン酸注入による学習記憶
障害動物の反復学習による回復過程を著明に強化した。

〔発明の効果〕

特許請求の範囲に示した化合物は必ずしも新規な化合物
とは限らない。しかしながら本発明において設定したｉ
ｎ　ｖＨｒｏからｉｎ　ｖｉｖｏにいたる一連表１３ １　　　　　　　２４　　±　１２４７　±　１６４６
±　１３２　　　　　９８　±　１９　　　　　　１４
７±　２９　　　　　　１６７±　３ド３１４９　　±
　３０　　　　　　２０１　”　　３３　　　　　　２
３６　±　２８１４２０１　　±　２３　　　　　　２
７２±　１４”″　　　　　２８４　±　１５”の試験
によって、末梢投与によっても、中枢とりわけ大脳皮質
および海馬などの学習記憶機能にかかわる領域の組織の
ＮＧＦ産生、分泌を著明に促進するという全く新規かつ
驚くべき活性を有する化合物であることが明らかとなっ
た。

ＮＧＦの脳における生理作用に関する生理化学、生化学
および分子生物学の最新の知見と、中枢性神経退行性疾
患の生化学および病理学的所見に依拠して、該化合物の
新規医薬品としての利用の可能性を合わせて検討した。

この結果急性毒性試験および行動薬理学的試験において
代表化合物が、薬学的に許容し得る投与量において中枢
性神経退行性疾患の実験モデル動物の学習、記憶の保持
障害を防止し、かつ障害状態からの回復を促すことを実
証し得た。

ヒトにおける中枢性神経退行性疾患の典型例であるアル
ツハイマー型老年性痴呆症に関しては、いまだに厳密な
意味での動物モデルさえも作製し得す、高齢化社会の進
行に伴い増加の一途をたどるこの種の深刻な病態に対し
て、本質的な治療法は確立していない。このような背景
のものとで、本発明にかかる化合物は、従来全く知られ
ていない新規かつ、より本質的な作用機作によって、本
庄の特徴的な早期症状である記銘力低下や失見当識の進
行を防止し、かつこの段階でのすぐれた治療効果をもた
らし得ると期待される。

すなわち当該化合物のいずれかを有効成分として、その
ままもしくはそれ自体公知の薬学的に許容されうる担体
、賦形剤などと混合した医薬組成物として、経口的もし
くは非経口的に投与することが可能である。投与量は投
与対象、投与ルート、症状などによって異なるが、たと
えば４−ｎ−プロピルカテコールの水酸基のエステル置
換体についていえば、成人１日当たり５０−５００ｍｇ
を数日間隔で数回非経口的に投与することにより、中枢
性神経退行性疾患の早期症状を改善することが可能であ
る。

三井東圧化学株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（Ａ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ａ） （式中、Ｒは２個の水素原子、２個のアシル基、−ＣＯ
   −，−ＣＯ−ＣＯ−又は−Ｃ（ＣＨ＿３）＿２−であり
   、Ｒ＿１、Ｒ＿２は水素原子ないし低級アルキル基を示
   す。）である化合物のいずれかを有効成分として含有す
   る中枢性神経退行性疾患の進行防止および治療剤。 ２、一般式（Ａ） ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（Ａ） （式中、Ｒは２個の水素原子、２個のアシル基、−ＣＯ
   −、−ＣＯ・ＣＯ−又は−Ｃ（ＣＨ＿３）＿２−であり
   、Ｒ＿１、Ｒ＿２は水素原子ないし低級アルキル基であ
   り特にはＲ＿１、Ｒ＿２のうち一方が水素原子であり、
   他方がエチル基またはｎ−プロピル基またはｎ−ブチル
   基である。 ）である化合物のいずれかを有効成分として含有する中
   枢性神経退行性疾患の進行防止および治療剤。