JPS6363697A

JPS6363697A - シアロシルコレステロ−ルの製造方法

Info

Publication number: JPS6363697A
Application number: JP61208380A
Authority: JP
Inventors: Haruo Ogura; 小倉　治夫; Kimio Furuhata; 古畑　公夫; Shingo Sato; 慎吾佐藤; Masayoshi Ito; 伊藤　正善; Yoshiyasu Shidori; 志鳥　善保
Original assignee: Mect Corp
Current assignee: Mect Corp
Priority date: 1986-09-04
Filing date: 1986-09-04
Publication date: 1988-03-22
Anticipated expiration: 2010-12-13
Also published as: JPH07116216B2; ES2007358A6; KR880003968A; KR890004136B1; CN1028998C; CN87106177A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔技術分野〕本発明はシアロシルコレステロールの’ＡＪ方法に関す
る。

〔発明の背景〕

シアル酸は、動物界あるいはいくつかの細菌の細胞表面
にシアロ複合体（糖蛋白、糖脂質、オリゴ糖、および多
糖）として存在することが知られている。

この化合物は近年、神経機能、癌、炎症、免疫、ウィル
ス感染、分化、ホルモンレセプターなど、医学ならびに
薬学的に重要視され、細胞表面に局在する特異な活性分
子として注目されている。しかしながらシアロ複合体に
おいてシアル酸の演する役割については、いまだ推測の
域を出るものではない。

この化合物は更に、多くの天然物有機化学者によって研
究され、既に各、１誘導体に導かれてし）る。

しかしながら、顕著な生理活性を有する誘導体はまだ知
られていなかった。

さろに近年、造血臓器の悪性腫瘍をはじめ、各種癌疾患
、膠原病などの治療の多角化によって、確かに延命効果
がもたらされている。しかしその反面、使用する薬剤、
例えば副腎皮質ホルモン剤や、免疫抑制剤の使用の頻度
の増−加することがさけられず、その結果いわゆる免疫
力の低下・減少と共に、多くの副作用がおこりつつある
。本発明者等は、生体固有成分であるシアル酸に注目し
、そ、の化学的修飾によって副作用が少なく、かつ免疫
監視機構の調整作用をもつ、免疫調整剤の研究を鋭意性
ない、その結果免疫調整作用を持つシアロシルコレステ
ロールの製造方法に到達したのである。

また、本発明化合動には細胞の神経突起生長作用並びに
分化誘導能があることが示唆されている。

〔発明の目的〕

本発明の目的は、シアロシルコレステロールの製造方法
を提供することである。

〔発明の構成〕本発明は上記の目的を達成するため、以下のように構成
したものである。

即ち、本発明は、下式：で示される化合物と、コレステロールとを反応せしめ、一般式：（式中、Ｒ１及びＲ２はいずれか一方カーＣＯＯ［：）
ｉｓ基であり、他方がを得、つぎに加水分解することによって、下式：Ｕ目（式中Ｒ３及びＲ４は、いずれか一方が−ＣＤＯＮａ基
であり、他方が式：で示される本発明の目的化合物としてのシアロシルコレ
ステロールを製造することにある。

以下、本発明について更に詳述する。

まず、本発明の製造工程の概略を次のス土−ムによって
示す。

本発明に於いて使用する式（１）の化合物は公知化合向
であり、容易に商業的に入手し得る。

上記製造方法に於いて、式（１）の化合物をケーニッヒ
スークノル（Ｋｏｅｎｉｇｓ−Ｋｎｏｒｒ）反応用触媒
の存在下にコレステロールを常圧で約２０〜２５℃の、
１度で約１〜７日反応させる。その際、コレステロール
は化合物（１）１モルに対して約１〜５倍モルを用いる
。

この場合、上記触媒としては、臭化第二水銀、ンアン化
第二水銀、過塩素駿銀、トリフルオロメタンスルホン酸
銀、トリフルオロ酢酸銀等が使用できる。

上記触媒は化合物（１）１当看に対して約１．０当量〜
１．２当量の範囲で使用する。

また、溶媒としてはアセトニトリノベニトロメタン、ア
セトン、ベンゼン、テトラヒドロフラン、ジクロルメタ
ン等が挙げられる。就中、ベンゼン、ジクロルメタン、
テトラヒドロフランが好ましい溶媒である。その他、乾
燥剤としてドライライト又はモレキュラーレーブス４人
を用いる。

かくして得られた反応生成物は、カラムクロマトグラフ
ィーの如き常法により単離、精製される。

更に、上記生成物は加水分解してメトキシカルボニル基
をナトリウムカルボキシル基に、アセチル基を水素に変
換する加水分解は、常法により、例えば約１〜３Ｎのア
ルカリ溶液で約１５〜２５℃の温度で約５〜１５時間処
理することにより本発明の目的化合物を製造することが
できる。

〔実施例〕

以下、本発明を実施例により説明する。これらの実施例
は、単に本発明を説明するためのものであり、従って勿
論本発明を限定するためのものではない。

実施例１予め十分に乾燥させたコレステロール０．７７ｇ（２ｍ
　ｍｏｌ）をドライ塩化メチレン等の溶媒１０ｄに溶か
し、引き続き予め高温・減圧下乾燥させておいたモレキ
ュラシーブス４人　０．５ｇを加え、アルゴン気流中室
温にて３０分〜１時間攪拌した。

次に、化合物（１）　１．０２　ｇ　（２ｍ　ｍｏｌ）
を加え、続いてトリフルオロメタンスルホン酸銀２〜２
．４ｍｍｏｌを加え、斜光下室温にて一晩攪拌反応させ
た。

反応液をセライト７ｐ過した後飽和食塩水にて銀塩を除
き、無水硫酸す）　ＩＪウム等で乾燥後溶媒を減圧留去
し、白色固型物を得た。

このものをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル）に
より分離精製し、化合物Ｃ２）０．５６　ｇ（３３％）
および化合物（３）０．５５　ｇ　（３２％）を得た。

化合物（２）の物理恒数７ＪａＳＳ　（ＥＩ）　　ｍ／ｚ　　８６０（Ｍ＋１）
、　８００（Ｍ−５９）元素分析（％）　Ｃ＜７Ｈｔ３
０＋ｓＮ計算値　ｔｌ、＝６５．６３．　）Ｉ＝８．５
５．　Ｎ＝１．６３実測籟　Ｃ＝６５．４１．　Ｈ＝８
．６１．　Ｎ＝１．６０〔α１ｆｌ−２３，８°　（Ｃ
＝１　、クロロホルム）ｍ、ｐ、１１３〜１１５℃ ’ＨＮＭＲＣＤＣｅ３　　　δ（Ｔ！、ｌＳ）　４００
ＭＨｚ０．６６９　３）１．　　ｓ、　　Ｃ）！３１８
０、９８５　３）１．　　ｓ、　　ＣＬ−１９１、８８
３３Ｈ，ｓ、　　ＮＡｃ２．０２６．２，０３１．２．１２６．’２．１４５．
３Ｈｘ４．ｓｘ４，０Ａｃｘ４２．５９６　１）１．　
ｄｄ、　Ｊ＝５．２．１２．８Ｈｚ、　２’Ｈｅｑ３．
６５０　　１Ｈ，ｍ、　　Ｈ−３３、７９０３Ｈ，ｓ、　　ＣＯＯＭｅ４．０２〜４．０９　２Ｈ，ｍ、　　Ｈ−４’、　　Ｈ
−５’４．１６６　１）１．　ｄｄ、　Ｊ＝５．８．　
１２．５Ｈｚ、　Ｈａ−８’４．３４７　　ＬＨ，ｄｄ
、　Ｊ＝２．５．　１２．８Ｈｚ、　Ｈｂ−８’４．８
５４　１）！、　ｄｄｄ、　Ｊ＝５．２．９．８．１２
．０Ｈｚ、　Ｈ−３’５．２０５　１）１．　　ｄ、　
　Ｊ＝１０．１Ｈｚ、　　ＮＨ５，３３〜５．３７　２
Ｈ，ｍ、　）Ｉ−６’、？’化合物（３）の物理恒数Ｍａｓｓ　（ＥＩ）　　ｍ／ｚ　　８６０（Ｍ＋１）、
　８００（？、＋−５９＞元素分析（％）　Ｃ＜７Ｈ＊
ｓＯ＋ｓＮ計算渣　Ｃ＝６５．６３．８＝８．５５．　
Ｎ＝１．６３実測値　Ｃ＝６５．８９．　）Ｉ＝８．５
８．　Ｎ＝１．６６〔α〕ｏ　　４０．２°　（Ｃ＝１
　、クロロホルム）ｍ、ｐ、　　１３８〜１４０℃ ’ＨＮ！ＪＲＣＤＧ３　　　δ（ＴＭＳ）　４００ＭＨ
ｚＯ，６７０３Ｈ，ｓ、　　ＣＨ３−１８０，９９９３
Ｈ，ｓ、　　Ｃ）１３１９１．８７１　　３）１．　　
ｓ、　　ＮＡｃ２．０２１．２．０２１，２．０？７．
２．１３０．３Ｈｘ４．　ｓｘ３．０Ａｃｘ４２．５２
５　１Ｈ，ｄｄ、　Ｊ＝４．９．’１３．１Ｈｚ、　）
ｌｅｑ−２’３．５７２　　１Ｈ，ｍ、　　Ｈ−３３、７９８３Ｈ，ｓ、　　ＣＤ０ＣＨ３４，０４〜４．
１３　２Ｈ，ｍ、　　Ｈ−４’、、５’４．１４６　　
１Ｈ，ｄｄ、　　Ｊ：＝７．６．　１２．５Ｈｚ、　　
）ｌａ−８’４．８８０　　１）１．　　ｄｄ、　　Ｊ
＝１．８．　１２．５）１ｚ、　　）ｌｂ−８’５．０
７　　１Ｈ，ｔｔ、Ｊ＝２．０．８．２Ｈｚ、Ｈ−７’
５．２２〜５．２７　１Ｈ，ｍ、　　Ｈ−３′５．３４
〜５．３８　２Ｈ，ｍ、　　ＮＨ，Ｈ−５′実施例２ソン酸の合成実施例１でｉ尋られた化合物（２）をメタノール２−に
溶解し、これにＩＮの苛性ソーダ溶液３ｍｌを加え、室
温で１夜攪拌した。反応液に水２−を加え、ダウエック
ス（Ｄｅｗｅｘ）５Ｑで中和後、微量の沈殿を濾去し、
濾液を減圧乾固した。白色粉末の化合物（４）３１．４
ｍｇ　（７９，７％）を得た。

上記と同様にして、実施例１で得られた化合物（３）か
ら化合物（５）３０．０ｍｇ　（７６，１％）を得た。

化合物（４）の物理恒数 ’ＨＮＭＲ［”Ｄα３　　δ（ＴＭＳ）　９０ＭＨｚＯ
，７１３Ｈ，ｓ、　ＣＨ３−１８０，８４および０．９１　６）１．　ＣＨ３−２６およ
びり、Ｈ３−２７０、９５３８，ｄ、　Ｊ＝４．５）＋
２．　Ｃ）１３−２１１、００　　’　３Ｈ，ｓ、　Ｃ
Ｈ３−１９２，０１３Ｈ，ｓ、ＮＡｃ２．４３　　１Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝４．５および１２．６Ｈ
ｚ、　３−Ｈｅｑ〔α〕ｏ　　−１２，５８°　（Ｃ＝
０．４１、メタノール中）化合物（５）の物理恒数 ’ＨＮＭＲＣＤ３０Ｄ　　δ（Ｔ＞、４Ｓ）　９０１．
１ＨｚＯ，７１３Ｈ，ｓ、　ＣＨ３１８０，８６および０．９２　６Ｈ，ＣＨ３−２６および［
：Ｈ３−２７０，９５３）１．　ｄ、　Ｊ＝４．５Ｈ２
，ＣＨ３−２１１，００３Ｈ，ｓ、　ＣＨ３−１９２，００３）１．　ｓ、　ＮＡｃ２．３９　　　ＬＨ，ｄｄ、Ｊ＝４．５および１２．６
）１ｚ、　３−Ｈｅｑ〔α）ｏ　　−３１，７７°　（
Ｃ＝０．７８、メタノール中）実施例３メチル５−アセトアミド−４，７，８，９−テトラ−０
−アセチル−２−０−（５−コーステン−３−β−イル
）−３，５−ジデオキシ−α−Ｄ−グリセローＤ−ガラ
クトー２−ノニュロピラノンネート（化合物（２））の
５０ｍｇを、メタノールの１００−に溶かして攪拌しな
がら２Ｎ水酸化ナリウム水溶液の２０ｒｎｉ弱を滴下し
て約０．２Ｎ水酸化ナトリウム／メタノール溶液とし、
室温で一晩攪拌することによりけん化を行った。

引き続き、攪拌しながらダウエックス５０Ｗ（Ｐ）衝脂
を加えていき、溶液のｐＨを酸性（約ｐＨ４）に調整し
た後、樹脂を除き、減圧下、乾燥し、５−アセトアミド
−２−０−アセチル−（５−コーステン−３−β−イル
）−３，５−ジデオキシ−α−Ｄ−グリセローＤ−ガラ
クトー２−７ニユロピラノソニツクアシツドとして白色
粉末として得、次にこれらをそれぞれ０．０２　Ｎ水酸
化す）　ＩＪウム水溶液に溶かし、ダイアノン（Ｄｉａ
ｉｏｎ　）　）ＩＰ２０樹脂カラムに通して吸着させ、
水洗後、７５％メタノール水にて溶出し、メタノールを
留去後、凍結乾燥して、ナトリウム−５−アセトアミド
−２−〇−（５−コーステン−３−β−イル）−３，５
−ジデオキシ−α−Ｄ−グリセローＤ−ガラクトー２−
ノニュロピラノソネイト（化合物（４））を白色銹末と
して得た（３７ｍｇ９１％）。この化合物（４）の物理
恒数は実施例２におけるものと実質的に同一、のっ／＋
−ロ実施例４化合物（２）のＪＯｍｇを、メタノール１００ｍ１に溶
かして、２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液の２０ｍ１を加
えて室温で一晩攪拌することにより、けん化を行ない、
引き続き、ダウエックス５０Ｗ　Ｘ８（１“）に（脂を
加えて攪拌し、溶液のｐＨを７〜８とした後、吸引ろ過
、メタノールで洗浄することにより、壱脂を除き、ろ液
および洗浄液をまとめて減圧下、メタノールを留去、析
出してきた白色不溶物はろ過後ろ液を凍結乾燥すること
により、化合物（４）を白色粉末として得た（３９ｍｇ
　　９６％）。

化合物（４）の物理恒数 ’Ｊａｓｓ　（ＦＤ）　　ｍ／ｚ　　７２２（Ｍ＋Ｎａ
）、　７０（１Ｍ＋１）、３８６，３３６および３１４元焉分析（％）　Ｃ５ｅＨｓ２０ｓＮＮａ　・２Ｈ２０
計算渣；　ｃ：６１．９６．　Ｈ：８．４２．　Ｎ：１
．９０実測埴、　Ｃ：６１．９２．　Ｈ：８．７１．　
Ｎ：２．０４〔αＥｏ　　”２．２°　（Ｃ＝１．０、
メタノール）ＩＲνｍａｘ　　３２５０．２９４０およ
び１６０５ｃｌ′！ｌ’’ＨＮＭＲＣＤ３０Ｄ　　　δ
（ＴλＩｓ）　　４００！、１ＨｚＯ，７０４３Ｈ，ｓ
、　　ＣＨ３−１８０、８７０と０．８８５３ＨＸ２．
　　ｄ、　　Ｊ＝１．７８２．　　Ｃ）＋３−２６．　
　ＣＨ，−２７０、９３６３）１．　　ｄ、　　Ｊ＝６
．５Ｈ２，ＣＨ３−２１０，９９２３Ｈ，ｓ、　　ＣＨ
３１９２，０１０３Ｈ，ｓ、　　ＮＡｃ２．８３９　　ＬＨ，ｄｄ、　Ｊ＝４．２および１２．
０Ｈｚ、　２’−）１ｅｑ５．３３２　　　ｉＨ，ｄ、
　　Ｊ＝５．５Ｈｚ、　　６−Ｈ１３ＣＮＭＲＣＤ、０
０　　　δ（ＴＭＳ）　　１００＼１Ｈｚ１７５．９１
　　　ＮＡｃ１７５．２６　　１’−ＣＤＯＮａ１４２．８７　　　Ｃ−５１２２，５９Ｃ−６１０２、５７Ｃ−１’ ７０．５０　　　Ｃ−３４１，００Ｃ−２実施例５メチル５−アセトアミド−４，？、８．９−テトラー○
−アセチル−２−〇−（５−コーステン−３−β−イル
）−３，５−ジデオキシ−β−Ｄ−グリセローＤ−ガラ
クトー２−ノニュロピラノソネート（化合物（３））を
化合物（２）の代わりに用いる池は実施例３と同様に操
作し、ナ）　ＩＪウムー５−アセトアミド−２−〇−（
５−コーステン−３−β−イル）−３，５−ジデオキシ
−β−Ｄ−グリセローＤ−ガラクトー２−ノニュロピラ
ノソネート（化合物（５））を得た（３６ｍｇ　　８８
％）。この化合物〔５〕の物理恒数は実施例２のものと
実質的に同一であった。

実施例６化合物（２）の代わりに化合物（３）を用いる他は、実
施例４と同様に操作し、化合物（５）を得た（４０ｍｇ
９３％）。

化合物（５）の物理恒数！、Ｉａｓｓ　（ＦＤ）　　ｍ／ｚ　　７２２（！、ｌ
＋Ｎａ）、　７００（、’、Ｉ”、１）および３８６元
素分析（％）　ＣａａＨｓ。０ｉＮＮａ−ｈ２０計算値
；　Ｃ：６３，５２．　Ｈ：８．９１．Ｎ：１．９５実
測値；Ｃ二６３．８１．　Ｈ：９．２５．　Ｎ：２．１
３０α〕；−１Ｏ，６°　（Ｃ＝１．０　、メタノール
）’ＨＮ！、＋ＲＣＤ３０ｆ：］　　δ（Ｔ！、４Ｓ）
　　４００ＭＨｚＯ，７００３Ｈ，ｓ、　　ＣＨ３１８０，８６１と０．８００３８×２．ｏ、　　Ｊ＝ｌ、５
Ｈｚ、　　ｌ−８３−２６，［：Ｈ３２７０、９２８３
Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝６．５Ｈ２，Ｃ）１３−２１０、９９
１　　３Ｈ，ｓ、　　ＣＨ３”１９１．９７２　　３Ｈ
，Ｓ、　　ＮＡｃ２．４８２　　ＬＨ，ｄｄ、　Ｊ＝４．５および１３．
ＯＨ２，２’−）１ｅｑ５．２８２　　　ＬＨ，ｄ、　
　Ｊ＝５．３）１ｚ、　　６−Ｈ”ＣＮＭＲＣＤ３００
　　　δ（Ｔ’、４Ｓ）　　１００！、１Ｈｚ１７６．
９５　　　ＮＡＣ１７４、＋１　　１　　’−ＣＯＯＮａ１４３．０８　
　　Ｃ−５１２２，４６Ｃ−６１０１，３７ＣＩ’ ？２．　＋７　　　Ｃ−３４３．８２　　　ｃ−ｖ’ 実施例７化合物（２）の５０ｍｇを無水メタノールの１００−に
溶かして２８％ナトリウムメチラート溶液の０．０２ｄ
を加えて室温で約１時間攪拌することにより脱アセチル
化を行ない、引き続き、ダウエックス５０Ｗ　ｘ　８　
（Ｈ’）樹脂を加えて攪拌し、溶液を中性にした後、吸
引ろ過、メタノールで洗浄することにより皮脂を除き、
ろ液および洗浄液をまとめてさらに２Ｎ−水酸化ナトリ
ウム水溶液の２０ｍ１を加えて室温で一晩攪拌すること
によりけん化を行ない、引き続きアンバーライトＩ　Ｒ
Ｃ−５０’（）ｌａｉＭ指を加えて攪拌し、溶液のｐ）
Ｉを５〜７とした後、吸引ろ過、メタノールで洗浄する
二とにより樹脂を除き、ろ液および洗浄液をまとめて減
圧下メタノールを留去、析出してきた微口の白色不溶物
をろ通抜、ろ液を凍結乾燥することにより化合物（４）
を白色粉末として得た（３８１ｒ１ｇ９３％）。この化
合物（４）の物理恒数は実施例２で得られたものと実質
的に同一であった。

実施例８化合物（２）の代わりに化合物（３）を用いる他は実施
例７と同様に操作し、化合物（５）を得た（３５Ｔ：ｇ
２．８６％）。この化合物（５）の物理恒数は実施例２
のものと実質的に同一であった。

昭和　　　年　　　月　　　日　　− 特許庁長官　黒　１）明　誰　殿３、補正をする者事件との関係　　　出願人名称　メクト株式会社４、代理人

Claims

【特許請求の範囲】下式： ▲数式、化学式、表等があります▼（１）で示される化合物と、コレステロールとを反応せしめ、一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ａ）（式中、Ｒ＾１及びＲ＾２はいずれか一方が−ＣＯＯＣ
Ｈ＿３基であり、他方が ▲数式、化学式、表等があります▼である）を得、つぎに加水分解することによって、下式：▲数式
、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＾３及びＲ＾４は、いずれか一方が−ＣＯＯＮ
ａ基であり、他方が式： ▲数式、化学式、表等があります▼である）で示されるシアロシルコレステロールを製造する方法。