JPS6350755A - カルシウム分析用一体型多層分析要素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は水性液体試料中のカルシウム分析用−体型多層
分析要素に関し、さらに詳しくは生物体液、例えば血液
（全血、血漿、血清）、髄液、リンパ液、唾液、尿等の
水性液体試料中の全カルシウム定量分析用の乾式操作可
能で臨床診断に特に有用な一体型多層分析要素に関する
ものである。

〔従来の技術〕

カルシウムの分析法のひとつに指示薬を用いた比色定量
法があり、臨床分析などで広く利用されている。指示薬
には一般にｐＨ１０以上に呈色最ＪｐＨを有する０−ク
レゾールフタレインコンプレクソン（ｏ−ＣＰＣ）など
が使用されている。

ところが、カルシウムは水？８液中でアルブミン等の蛋
白質に結合する性質を有している。この性質はｐＨに依
存し、ｐＨ７以下例えばｐＨ４〜５では弱く逆にｐＨ８
以上例えばｐＨ１０〜１１では強い。用手法（溶液法）
においては試料が高倍率に希釈されていることからカル
シウムのアルブミン等の蛋白への結合はさほど問題には
ならない。

一方、試料の無希釈を原則とする乾式分析においてはア
ルブミンへの結合に基づく誤差が大きな間部となる。

この誤差を防止する手段として、特開昭５４−２９７０
０号公報にはクロロホスホナシ■、アルセナゾｍ等の指
示薬を用いてｐＨ５〜６で呈色反応させる方法が開示さ
れている。また、特開昭６１−３５３４６号公報にはカ
ルシウム電極を用いてｐＨ４〜５．５で全カルシウムを
測定することによりアルブミン等に結合したカルシウム
による誤差を排除するカルシウム定量方法が開示されて
いる。

ｏ−ＣＰＣを用いたカルシウム定量方法においてポリビ
ニルピロリドン（ＰＶＰ）あるいはポリエチレングリコ
ール（ＰＥＧ）を用いることについてもいくつか報告が
ある。例えば特開昭５５−４２６号公報にはｏ−ＣＰＣ
にアミノポリカルボン酸を加えてｐＨ８〜１３で血中カ
ルシウムを定量する方法が開示され、そのほかにＰＶＰ
（Ｋ２Ｏ又はに９０）を用いることについても言及され
ている。呈色反応は溶液法または炉祇に試薬をしみ込ま
せた試験片を利用して行なっている。また、Ａｍ、Ｊ、
Ｃｌ１ｎ、Ｐａｔｈ、、　４５．　２９０　（１９６６
）にはｏ−ＰＣＰに８−ヒドロキシキノリンとジェタノ
ールアミンを用いて溶液法で血中カルシウムイオン度を
定量する方法においてＰＶＰを加えることによってアル
ブミンの影響を抑制できることが記載されている。さら
に、Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＋　　２６
゜１５６２−１５６５（１９８０）には、ｏ−ＣＰＣを
用いて血中カルシウム濃度を連続フロー分析する際にカ
ルシウムの水性標準液にＰＶＰ又はＰＥＧを加えること
が記載されている。

〔発明が解決しようとする問題点〕

クロロホスホナシ■等を用いた一体型多層分析要素は吸
光度のブランク値が高く、測定精度に問題があった。電
極法は電極を用いることによる種種の問題があり、簡便
さを大きな利点とする一体型多層分析要素としては好ま
しいものではなかった。特開昭５５−４２６号公報記載
の方法においてはＰＶＰの効果について何ら触れられて
いないが、この方法では少な（とも溶血によるヘモグロ
ビン及びビリルビンの影響を排除できない。また、連続
フロー分析法においては、カルシウムの水性標準液と血
清とで透析のされ方が違うため、標準液にＰＶＰ又はＰ
ＥＧを加えてカルシウムに対するアフィニティーを調節
しており、アルブミン等の蛋白の影響の軽減については
触れられていない。

本発明は、カルシウム分析用一体型多層分析要素におい
てこれらの問題点を解決して間車な手段でアルブミン等
の蛋白の影響を軽減することを目的としている。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明はこのような目的を達成するべくなされたもので
あり、光透過性水不透過性支持体の上に、カルシウムイ
オンと結合して光学的に検出可能な変化をしうる指示薬
を少なくとも１種含有する試薬層および多孔性展開層を
この順に有するカルシウム分析用一体型多層分析要素に
おいて、前記展開層にポリビニルピロリドン又はポリエ
チレングリコールを含有せしめたことによってこの目的
を達成したものである。

本発明の多層分析要素の光透過性水不透過性支持体とし
ては従来公知の多層分析要素に用いられている光透過性
（透明な）水不透過性支持体を用いることができる。そ
の具体例として、ポリエチレンテレフタレート、ビスフ
ェノールＡのポリカルボネート、ポリスチレン、セルロ
ースエステル（例、セルロースジアセテート、セルロー
ストリアセテート、セルロースアセテートプロピオネー
ト等）等のポリマーからなる厚さ約５０μｍから約１１
■、好ましくは約８０μｍから約３００μｍの範囲の透
明な、すなわち波長約２００ｎｍから約９００ｎｍの範
囲内の少なくとも一部の波長範囲の電磁輻射線を透過さ
せる平滑な表面を有するフィルム状（シート状）または
平板状の支持体を用いることができる。支持体中には必
要に応じて二酸化チタン微粒子、硫酸バリウム微粒子、
カーボンブラック等を分散含有させて光学的性能を調節
することができる。支持体の表面には必要に応じて公知
の下塗層または接着層を設けて支持体の上に設けられる
吸水層または試薬層等と支持体との接着を強固にするこ
とができる。

試薬層はカルシウムイオンと反応して検出可能な色（好
ましくは可視光領域の色）変化を生じさせる少なくとも
１種の指示薬を含む試薬組成物がポリマーバインダーと
しての親水性ポリマー中に実質的に一様に分散されてい
る吸水性で水浸透性の層である。

試薬層に用いられる親水性ポリマーは水吸収時の膨潤率
が３０℃で約１５０％から約２０００％、好ましくは約
２５０％から約１５００％の範囲のものである。親水性
ポリマーの具体例として特開昭５９−１７１８６４、特
開昭６０−１１５８５９等に記載の酸処理ゼラチン、脱
イオンゼラチン等のゼラチン、フタル化ゼラチン、ヒド
ロキシアクリレートグラフトゼラチン等のゼラチン誘導
体、特開昭５９−１７１８６４、特開昭６０−１１５８
５９等に記載のアガロース、プルラン、プルラン誘導体
、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリビ
ニルピロリドン、特願昭６０−１７１１３４に記載のメ
タリルアルコール二元又は三元コポリマー等がある。こ
れらの親水性ポリマーは単独で、あるいは２種以上を組
合せて用いることができる。試薬層には一般的にはゼラ
チンまたはゼラチン誘４体、ポリアクリルアミド、ポリ
ビニルアルコール等を用いるのが好ましく、これらのう
ちではゼラチン（脱イオンゼラチン）が最も好ましい。

試薬層の乾燥時の厚さは約５μｍから約５０ＩＩＩＩ＋
、好ましくは約７μｍから約３０μｍの範囲、被覆量で
は約５　ｇ　／　ｍから約５０ｇ／ｄ、好ましくは約７
　ｇ　／　ｍから約３０　ｇ　／　ｍの範囲である。

試薬層に含有される試薬組成物中の指示薬の具体例とし
て、０−クレゾールフタレインコンプレクソン（３，３
’−ビス〔〔ジ（カルボキシメチル）アミノメタン）−
０−クレゾールフタレイン（２４１１−８９−４）、〔
〕内の数字はＣｈｅｍｉｃａｉＡｂｓｔｒａｃｔｓ　Ｒ
ｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｕｍｂｅｒを表す）、エリオフロー
ムブラックＴ（１−（１−ヒドロキシ−２−ナフチルア
ゾ）−６−ニトロ−２−ヒドロキシナフタレン−４−ス
ルホン酸モノナトリウム塩〔１７８７−６１−７）　、
メチルチモールブルーコンブレクソン（３，３’−ビス
〔〔ジ（カルボキシメチル）アミノ〕メチル〕チモール
スルホンフタレインテトラナトリウム塩［１９４５−７
７−３：ｌ　、チモールフタレインコンブレクソン（３
，３’−ビス〔〔ジ（カルボキシメチル）アミン〕メチ
ル〕チモールフタレイン（１９１３−９３−５）　、ア
ルセナゾＩＩ［（２，７−ビス〔（２−アルソノフェニ
ル）アゾ）−１，８−ジヒドロキシナフタレン−３，６
−ジスルホン酸（１６６８−００−４）　）、クロロホ
スホナシＩ［Ｉ（２，７−ビス〔（４−クロロ−２−ホ
スホノフェニル）アゾ）　−１，８−ジヒドロキシナフ
タレン−３，６−ジスルホン酸（１９１４−９９−４）
　）等「ドータイト試薬総合カタログ第１２版」　（熊
本市側同に化学研究所、１９８０年発行）等に記載の指
示薬がある。これらの指示薬のうちでは〇−クレゾール
フタレインが最も正確な全カルシうムの定量分析が可能
な点で好ましい。また、必要に応じて試薬組成物を２層
以上の別個の層に分けて（例えば試薬層と吸水層）含有
させることもできる。

本発明の多層分析要素にはカルシウムイオンと指示薬が
結合して光学的に検出可能な変化をする環境ｐＨ値（以
下単に環境ｐＨ値ということがある。）を約８．０から
約１２．０、好ましくは約９．０から約１１．５の範囲
の所望の値に緩衝できる公知の緩衝剤から適宜選択して
含有させる。

用いうる緩衝剤としては、日本化学金線「化学便覧、基
礎編」（東京、丸首■、１９６６年発行）１３１２−１
３２０頁、Ｒ，Ｍ、Ｃ，Ｄａｗｓｏｎ　ｅｔ　ａｉｍ　
ｒＤａｔａ　ｆｏｒＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｅ５ｅ
ａｒｃｈＪ第５ｅａｒｃｈＪｒｄ　ａｔ　ｔｈｅＣｌａ
ｒｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、　１９６９年発行）４７６
−５０８頁、ｒＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙＪ　５．　４
６７頁以降（１９６６年）、ｒＡｎａｌｙｔｉｃａｌ　
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　Ｊ　　１０４　、　３００
−３１０頁（１９８０年）等に記載のｐＨ緩衝剤系があ
る。

ｐＨｓ、ｏから１２．０の範囲のｐ　Ｈ８！衝剤の具体
例としてトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔ
ｒｉｓ）を含む緩衝剤；燐酸塩を含む緩衝剤；硼酸塩を
含む緩衝剤：炭酸塩を含む緩衝剤；グリシンヲ含む緩衝
剤；　　Ｎ、Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシ
ン（Ｂｉｃｉｎｅ）　；　３　　　（シクロへキシルア
ミノ）−１−プロパンスルホン酸（ＣＡＰＳ）　Ｎａ塩
またはに塩、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ
′−２−ヒドロキシプロパン−３−スルホン酸（）ＩＥ
ＰＰＳ）　Ｎａ塩またはに塩等；Ｎ−２−ヒドロキシエ
チルピペラジン−Ｎ’−３−スルホン酸（ＥＰＰＳ）　
Ｎａ塩またはに塩等、Ｎ−（）リス（ヒドロキシメチル
）メチル〕−３−アミノプ口バンスルホン酸（ＴＡＰＳ
）Ｎａ塩またはに塩等；Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペ
ラジン−Ｎ′−２−エタンスルホンｔａ　（ＨＥＰＥＳ
）　Ｎａ塩またはに塩等：およびこれらのいずれかと必
要により組合せられる酸、アルカリまたは塩がある。好
ましい緩衝剤の具体例として、Ｔｒｉｓ−硼酸ナトリウ
ム；　Ｂｉｃｉｎｅ　；　ＨＥＰＰＳ；ＨＥｒ’ＰＳ；
ナトリウム塩；　ＥＰＰＳ　；　ＥＰＰＳナトリウム塩
、ＣＡＰＳ、ＣＡＰＳナトリウム塩；　ＴＡＰＳ　；　
ＴＡＰＳナトリウム塩等がある。

試薬層又は後述する吸水層、中間層の親水性バインダー
ポリマーとしてゼラチン又はゼラチン’ＢＭ　”１体を
用いる場合には、ビニルスルホン構造含有架橋剤でこれ
らの層の適当な架橋硬化ができ、塗布によりこれらの層
が安定に設けられ、高精度の定量分析が実施可能という
観点から硼酸又はｖＩＡ酸ナトリウム含有ｐＨ緩４Ｊｉ
剤またはＣＡＰＳ、　ＣＡＰＳナトリウムが好ましい。

ｐ　Ｈ１１衝剤は支持体と後述する多孔性展開層の間の
少なくとも一層に含有させればよ（、試薬層、吸水層等
に含有させることもできる。但し、試薬層以外の層に展
開させる場合には試薬層よりも多孔性展開層側の層に含
有させることが望ましい。

試薬層には公知の媒染剤、ポリマー媒染剤等を含有させ
ることができる。試薬層および／または吸水層は実質的
に透明であることが好ましいが、必要に応じて層中に二
酸化チタン微粒子、硫酸バリウム微粒子、カーボンブラ
ック等を少量分散含有させて光学的性能を調節すること
ができる。

多孔性展開層としては特開昭５５−１６４３５６、特開
昭５７−６６３５９等に記載の織物展開層（例、ブロー
ド、ボブリン等の平織等）、特開昭６０−２２２７６９
等に記載の編物展開層（例、（・リコソトＷ、ダブルト
リコツ１４１、ミラニーズ属等）、特開昭５７−１４８
２５０に記載の有機ポリマー繊維パルプ含有抄造祇から
なる展開層、特公昭５３−２１６７７　、米国特許３９
９２１５８等に記載のメンブランフィルタ（プラッシュ
ポリマー層）、ポリマーミクロビーズ、ガラスミクロビ
ーズ、珪藻土が親水性ポリマーバインダーに保持されて
なる連続微空隙含有多孔性層等の非繊維等方的多孔性展
開層、特開昭５５−９０８５９に記載のポリマーミクロ
ピースが水で膨潤しないポリマー接着剤で点接触状に接
着されてなる連続微空隙含有多孔性Ｎ（三次元格子状粒
状構造物層）からなる非繊維等方的多孔性展開層等を用
いることができる。

多孔性展開層に用いられる織物生地、編物生地又は抄造
紙は特開昭５７−６６３５９に記載のグロー放電処理ま
たはコロナ放電処理に代表される物理的活性化処理を布
生地の少なくとも片面に施すか、または特開昭５５−１
６４３５６、特開昭５７−６６３５９等に記載の水洗脱
脂処理、親水性ポリマー含浸等親水化処理、またはこれ
らの処理工程を適宜に組み合せて逐次実施することによ
り布生地を親水化し、下側（支持体に近い側）の層との
接着力を増大させることができる。

本発明はこのような一体型多層分析要素において前記試
薬層より上の少なくとも一層にポリビニルピロリドン（
ＰＶＰ）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含有
せしめるところに特徴がある。ＰＶＰは平均分子量約１
万〜約１００万、好ましくは約２万〜約８０万のものが
よく、ＰＥＧは平均分子量約２００〜約５万、好ましく
は約２０００〜約２万のものが適当である。ＰＶＰある
いはＰＥＧを含有せしめる層はなるべく上の層が好まし
く多孔性展開層が最適である。展開層に隣接する層、例
えば接着層がその次に好ましい。

一方、ＰＶＰ、ＰＥＧは一層に限らず複数の層に含有せ
しめることもできる。含有させる方法は、ＰＶＰ、ＰＥ
Ｇを水あるいはエタノール、メタノール、塩化メチレン
、クロロホルム、酢酸等の有機溶媒に溶解して当該層へ
塗布あるいは噴霧すればよい。ＰＶＰあるいはＰＥＧの
被覆量はいずれも約０．２ｇ／ｎ７〜約１０ｇ／ｒｒｌ
ｔ’あり、約０．５ｇ／Ｍ〜約５ｇ／ボが好ましい。ｐ
ｖｐとＰＥＧは併用することができ、その場合前記被覆
量は両者の和になる。

本発明の多層分析要素にはこれら以外にも層を設けるこ
とができる。支持体と試薬層の間には吸水層を設けるこ
とができる。吸水層は水を吸収して膨潤する親水性ポリ
マーを主成分とする層であって、吸水層の界面に到達ま
たは浸透した水性液体試料の水を吸収できる居であり、
全血試料を用いる場合には水性液体成分である雌具の試
薬層への浸透を促進する作用を有する。吸水層に用いら
れる親水性ポリマーは前述の試薬層に用いるもののなか
から選択すればよい。一般的にはゼラチンまたはゼラチ
ン誘４体、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール
を用いるのが好ましく、これらのうちではゼラチン（脱
イオンゼラチン）が最も好ましい。

吸水層の乾燥時の厚さは約３μｍから約１００μｍ、好
ましくは約５μｍから約３０μｍの範囲、被覆量では約
３　ｇ　／　ｍから約１００ｇ／ｒｒｆ、好ましくは約
５　ｇ　／　ｒｌから約３０　ｇ　／　ｒｄの範囲であ
る。

吸水層には後述するｐＨ緩衝剤、公知の塩基性ポリマー
等を含有させて使用時（分析操作実施時）のｐＨを調節
することができる。さらに吸水層には公知の媒染剤、ポ
リマー媒染剤等を含有させることができる。

本発明の多層分析要素には、また展開層と試薬層の間に
少なくとも蛋白質を透過させない親水性非孔質中間層が
設けることができる。親水性非孔質中間層は吸水層に用
いられるのと同様な親木性ポリマーバインダー又は架橋
された親水性ポリマーバインダーからなり、閏分子量の
蛋白質、殊にアルブミンやグロブリンを通過させない厚
さを有する層である。親水性非孔質中間層（以下、中間
層ということがある）には一般的にはゼラチンまたはゼ
ラチン誘専体、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコ
ール等を用いるのが好ましく、これらのうちではゼラチ
ン（脱イオンゼラチン）が最も好ましい。中間層の乾燥
時の厚さは約３μｍから約２０μｍ、好ましくは約５μ
ｍから約１５μｍの範囲である。中間層には前述のｐＨ
緩衝剤、公知の塩基性ポリマー等を含有させて分析操作
時のｐＨを調節することができる。中間層中には二酸化
チタン微粒子、硫酸バリウム微粒子等を非孔質を損なわ
ない範囲で分散含有させて光遮蔽層の機能もあわせ持た
せることができる。

試薬層又は中間層の上には展開層を強固に接着一体化す
る目的でゼラチンに代表される吸水層に用いられるのと
同様な親水性ポリマーからなる公知の接着層を設けるこ
とができる。接着層の乾燥時の厚さは約０．５μｍから
約５μｍの範囲である。

試薬層、吸水層、中間層、接着層、展開層等には界面活
性剤を含有させることができる。その例としてノニオン
性界面活性剤がある。ノニオン性界面活性剤の具体例と
して、ｐ−オクチルフェノキシポリエトキシエタノール
、ｐ−ノニルフェノキシポリエトキシエタノール、ポリ
オキシエチレンオレイルエーテル、ポリオキシエチレン
ソルビタンモノラウレート、ｐ−ノニルフェノキシポリ
グリシドール、オクチルグルコシド等がある。ノニオン
性界面活性剤を展開層に含有させることにより水性液体
試料の展開作用（メータリング作用）がより良好になる
。ノニオン性界面活性剤を試薬層または吸水層に含有さ
せることにより分析操作時に水性液体試材中の水が試薬
層または吸水層に実質的に一様に吸収されやすくなり、
また展開層との液体接触が迅速にかつ実質的に一様にな
る。

本発明の多層分析要素は、まず前述の諸特許明細書に記
載の公知のいずれかの方法により調製し、その後展開層
の上からＰＶＰおよび／又はＰＥＧを含有する溶液を均
一に塗布あるいは噴霧すればよい。

本発明の多層分析要素は一辺約１５ｍｍから約３０１１
８の正方形またはほぼ同サイズの円形等の小片に裁断し
、特公昭５７−２８３３１　、実開昭５６−１４２４５
４、特開昭５７−６３４５２　、実開昭５８−３２３５
０　、特表昭５８−５０１１４４等に記載のスライド枠
に収めて化学分析スライドとして用いることが、製造、
包装、輸送、保存、測定操作等諸種の観点で好ましい。

使用目的によっては、長いテープ状でカセットまたはマ
ガジンに収めて用いること、または小片を開口のあるカ
ードに貼付または収めて用いることなどもできる。

本発明の多層分析要素を用いた液体試料中の被検成分の
分析は前述の諸特許明細書等に記載の操作により実施で
きる。すなわち約５　／、７　ｅがら約３０μｐ、好ま
しくは８μｌがら１５μｌの範囲の全血、血禁、血清等
の水性液体試料ン清を前処理することなく展開層に点着
し、１分から１０分の範囲で、約２０℃から約４０℃の
範囲の実質的に一定の温度で、好ましくは３７℃近傍の
実質的に一定の温度でインクペーションし、光透過性支
持体側から可視光（又は近紫外線）を用いて試薬層又は
吸水層の光学濃度を反射測光し、予め作成した検量線を
用いて比色測定法の原理により液体試料中の被検成分（
全カルシウム）含有量を求めることができる。点着する
水性液体試料の量、インクベーション時間と温度は一定
にすることにより被検成分の定量分析を高精度で実施で
きる。この測定操作は特開昭５６−７７７４６　、特開
昭５８−２１５６６　、特開昭５８−１６１８６７等に
記載の化学分析装置により極めて容易な操作で高精度の
測定をすることができる。

〔作　用〕 従来の一体型多層分析要素においてはアルブミンと結合
している結合型カルシウムを定量するために呈色反応を
酸性で行なわせていた。本発明の一体型多層分析要素に
おいては、点着された試料を呈色反応さセる前にＰＶＰ
又はＰＥＧと接触させることにより、呈色反応を酸性で
行なわせなくともイオン型カルシウムに加えて蛋白結合
型カルシウムも定量できる。

〔実施例〕

実施例１ 厚さ１８０μｍの無色透明ポリエチレンテレフタレー）
　（ＰＥＴ）フィルム（支持体）の上に下記の組成塗布
層を、乾燥して設けた。

拭１皿 脱イオンゼラチン　　　　　　　　２３．９ｇ／ｍ硼酸
　　　　　　　１．１１　ｇ　／　ｒｄ水溶液をＮａＯ
ＨでｐＨ１０，０に調整した。

援■亙 脱イオンゼラチン　　　　　　　　　１．４６　ｇ　／
　ｍ二酸化チタン微粒子　　　　　　　　０．８５　ｇ
　／イついで接着層の表面に水をほぼ一様に供給して湿
潤させ、その上に１００Ｓ相当のＰＥＴ紡績糸からなる
厚さ約２５０μｍのトリコット編物生地をほぼ一様に軽
く圧力をかけてラミネートして展開層を設けた。ついで
展開層の上から下記の被覆世になるようにポリマー水溶
液を塗布し乾燥させてカルシウム定量用一体型多層分析
要素を調製した。

水溶液をＮａＯＨでｐＨ１０，０に調整した。

実施例２ 実施例１においてポリマー水溶液の代わりに下記の水溶
液を用いてカルシウム定量用一体型多層分析要素を調製
した。

ポリスチレンスルホン酸ナトリウム　５．８ｇ／ｍ比較
例１ 実施例１においてポリマー水溶液の代わりに下記の水溶
液を用いてカルシウム定Ｈ用一体型多層分析要素を調製
した。

ポリスチレンスルホン酸ナトリウム　５．７５ｇ／ｒｒ
ｒ水溶液をＮａＯＨでｐＨ１０，０に調整した。

次に、塩化カルシウム、ヒト血清アルブミン及びグロブ
リンを生理食塩水で溶解してカルシウム１０＋ｍｇ／ｄ
！で下表記載の蛋白濃度を有するカルシウム溶液を調製
した。この溶液のカルシウム濃度を上記の一体型多層分
析要素を用いて定量したところ下表に示す結果が得られ
た。

〔発明の効果〕

本発明の一体型多層分析要素により、アルブミン等の蛋
白の影響を排除してカルシウムを高精度で定量できる。

本発明のこの分析要素は従来の分析要素にポリビニルピ
ロリドンまたはポリエチレングリコールを含有せしめる
だけであるから製造が容易で安価であるという利点も有
する。

特許出願人　富士写真フィルム株式会社代理人　弁理士
　　１）中　政　浩 はか１名

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）光透過性水不透過性支持体の上に、カルシウムイ
   オンと結合して光学的に検出可能な変化をしうる指示薬
   を少なくとも１種含有する試薬層および多孔性展開層を
   この順に有するカルシウム分析用一体型多層分析要素に
   おいて、前記展開層にポリビニルピロリドン又はポリエ
   チレングリコールを含有せしめたことを特徴とするカル
   シウム分析用一体型多層分析要素