JPS63261164A - アルブミン分析用乾式分析要素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は水性液体中のアルブミン分析用乾式分析要素に
関し，さらに詳しくは生物体液，例えば面液，髄液，唾
液，リンパ液，尿等の水性液体中のアルブミン定量分析
用の乾式操作可能な一体型多層分析要素に関するもので
ある。

［従来の技術］ 生物体液，例えば血液，髄液，唾液，リンパ液，尿等の
水性液体中のアルブミンの測定または定量は緩衝された
プロムクレゾールグリーン（以下，ＢＣＧという）溶液
またはＵＳＰ　３　５３３　７４９およびｕｓｐ３　４
８５　５８７　（ＵＳＰは米国特許を表す）等に記載の
試験片を用いて実施されている。ＢＣＧは蛋白質と結合
して色変化するスルボンフタレイン色素に属する酸塩基
指示薬色素の１種である。ＢＣＧは水性液体中に存在す
る蛋白質，例えはアルブミンの量に対応して色変化する
。緩衝されたＢＣＧは。

緩衝されていない場合には感応するρ１１変化に対応す
る色変化が確実に回避できる。

ＢＣＧ等の酸塩基指示薬はアルブミンに特異的ではない
。ヒトの体液中に存在するグロブリン。

Ｉ・ランスフェリンおよび他の蛋白質は酸塩基指示薬色
素との結合を競合し，アルブミン分析を妨害する。この
競合妨害は低濃度レベルのアルブミンに関して特に顕著
である。ヒトの血清中の全蛋白質濃度は約６．０〜約８
　、　０　ｇ　／　ｄ　Ｌの範囲で，このうち約２．９
ｇ／ｄＬがグロブリンであり、残りが主にアルブミンで
ある。このアルブミン濃度においては競合妨害が現われ
る。

特開昭５７−５０６６０（ＵＳＰ　４３３３７３３）に
はポリエチレンテレフタレート透明支持体の上にＢＣＧ
と緩衝剤とを非蛋白性バインダポリマーに分散した試薬
層（試薬ゾーン）と多孔性展開層（反応層；反応ゾーン
）をこの順に接着積層した構成の競合妨害を低減した乾
式一体型多層分析要素が提案されている。この要素は展
開層にヒト血清を点着すると。

展開層から試薬層に水分が供給されて両層が液体接触状
態になり、試薬層からＢＣＧが展開層に拡散移行し、ア
ルブミンと優先的に結合し、ＢＣＧ−アルブミン結合特
有の色に変化するので、変色後の色濃度を測定して比色
測定の原理によりアルブミン含有量を求める乾式操作の
ものである。しかしながらこの要素を用いても測定時間
が長引くとグロブリンの妨害が無視てきない程度に現わ
れることが判明した。

特開昭６１−２４３３６４にはポリエチレンテレフタレ
ート透明支持体の上にｐＨ緩衝剤を含む非蛋白性親水性
ポリマーバインダー７！（ｐＨ緩衝剤含有吸水層）とＢ
ＣＧ等の指示薬を含浸保持する多孔性展開層（試薬展開
Ｎ）をこの順に接着積層した構造のグＬコブリンの競合
妨害をより低減したアルブミン定量用乾式一体型多層分
析要素が提案されている。この多層分析要素においても
なおアルブミンの競合妨害が現われることが見出された
。

特開昭６２−２４１５０にはポリエチレンテレフタレー
ト透明支持体の、Ｌにｐ＋＋緩衝剤を含む非蛋白性親水
性ポリマーバインダーＮ（ｐ）Ｉ緩衝剤含有吸水Ｎ）と
ＢＣＧ等の指示薬を反応性ポリマー等で固定化して含有
保持する繊維質多孔性展開ＰＪ（試薬展開層）をこの順
に接着積層した構造のグロブリンの競合妨害をより低減
したアルブミン定量用乾式一体型多層分析要素が提案さ
れている。この多層分析要素では、指示薬が反応性ポリ
マー等で固定化されているので変色反応速度が遅いため
に、感度が低いという問題点があることが見出された。

［発明の目的］ 本発明の目的はグ■コブリンその他の蛋白質の妨害によ
る誤差を低減すたアルブミン分析用乾式分析要素を提供
することであるう 本発明の他の目的は簡単な層構成で製造が容易てグロブ
リンその他の蛋白質の妨害による誤差を低減したアルブ
ミン分析用乾式分析要素を提供することである。

本発明の他の目的はアルブミンの選択的測定を連続して
実施できるアルブミン分析用乾式分析要素を提供するこ
とである。

本発明の他の目的は特開昭６１−２４３３６４等に記載
の多層分析要素等を改良したグロブリンその他の蛋白質
の妨害による誤差をより低減したアルブミン分析用乾式
分析要素を提供することである。

［発明の構成］ 本発明は、光透過性水不透過性支持体の上に。

少なくとも一層のｐＨ緩衝剤を含む親水性ポリマーバイ
ンダー層、およびアルブミンと結合して色変化する指示
薬を含む多孔性展開層がこの順に一体にｆｌＦ’されて
いるアルブミン分析用乾式分析要素において、前記指示
薬が疎水性ポリマー又は疎水性ポリマーと親水性ポリマ
ーとの混合物の中に分散されて前記展開層中に含有保持
されているアルブミン分析用乾式分析要素である。

［発明の構成の詳細な説明］ アルブミンと結合して色変化する指示薬を疎水性ポリマ
ーバインダー中に分散して、又ＣＪ疎水性ポリマーバイ
ンダーと親水性ポリマーバインダーとの混合物中に分散
して層中に含有保持する多孔性展開層（以下、試薬展開
層という）に用いられる多孔性展開層としては特開昭５
５−１６４３５６　、特開昭５７−６６３５９等に記載
の織物展開層（例、ブロード、ボブリン等の平織等）、
特開昭６０−２２２７６９等に記載の編物展開Ｈ（例、
トリコツ）・編、ダブルトリコット編、ミラニーズ編等
）、特開昭５７−１４８２５０に記載の有機ポリマーｗ
＆紺バルブ含有抄造紙からなる展開層、特公昭５３−２
１６７７、ＵＳＰ　３９９２　＋５８等に記載のメンブ
ランフィルタ（プラッシュポリマーＮ）、ポリマーミク
ロビーズ、ガラスミクロビーズ、珪藻土が親水性ポリマ
ーバインダーに保持されてなる連続微空隙含有多孔性層
等の非繊維等方的多孔性展開層、特開昭５５−９０８５
９に記載のポリマーミクロビーズが水で膨潤しないポリ
マー接着剤て点接触状に接着されてなる連続微空隙含有
多孔性層（三次元格子状粒状構造物Ｎ）からなる非繊維
等方的多孔性展開層等を用いることができる。これらの
多孔性展開層のうちで指示薬を含有保持させやすい点で
織物展開層１編物展開層に代表される繊維貿展開層が好
ましい。

アルブミンと結合して色変化する指示薬としてコルトボ
フ（１，Ｍ、Ｋｏｌｔｈｏｆｆ）著「酸−塩基指示薬（
Ａｃｉｄ−Ｂａｓｅ　Ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ）Ｊ　（Ｍ
ａｃＭｉｌｌａｎ社、　１９３７年発行）３５０−３５
３頁等に記載の蛋白誤差（ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｒ−「０
「）を示す酸塩基指示薬色素を用いることが好ましい。

蛋白誤差を示す酸塩基指示薬色素の例としてプロムクレ
ゾールグリーン、プロムクレゾールパープル、ブロムチ
モールブルー、ブロムフェノールブルー、クロルフェノ
ールレッド、フェノールレッド、クレゾールレッド、チ
モールブルー；クレゾールフタレイン等のスルホンフタ
レイン指示薬色素；インジゴカルミン等のインジゴイド
色素：メチルレッド、メチルオレンジ等のアゾ色素系指
示薬がある。これらの指示薬のうちで、スルホンフタ１
メイン指示薬色素が好ましく、プロムクレゾールグリー
ン（Ｂ　ＣＧ）とプロムクレゾールパープル（Ｂ　ＣＰ
）が最も好ましい。

試薬展開層に含有させる酸塩基指示薬色素の量は１ｍ２
当り約０．２ｇから約３．０ｇ、好ましくは約０．５ｇ
から約１．５ｇの範囲である。

前記の指示薬を分散して保持するポリマーは。

被膜形成能を有するバインダーとしての機能を有してい
て、指示薬と実質的に反応せず、実質的に固定せずに指
示薬を分散保持てきるものが好ましい。用いられるポリ
マーとしては、高分子学会編「高分子材料便覧」（コロ
ナ社、１９７３年発行）、「化学大辞典」（共立出版、
　１９６０〜１９６３年発行）＋　Ｊ、Ｂｒａｎｄｒｕ
ｐ、　Ｅ、）１．Ｉｎ＋ｍｅｒｇｕｔ編ｒＰｏｌｙｍｅ
ｒ　１ＩａｎｄｂｏｏｋＪ（ＩＮＴＥＲ−５ＣＩＥＮＣ
Ｅ　ＰＵＢＬＩＳＨＥＲ５，１９６６年発行）等に記載
の公知の疎水性又は水不溶性ポリマー、親水性又は水溶
性ポリマーから適宜に選択して用いることができる。本
明細書では、指示薬を分散して保持するポリマーについ
て、疎水性とは、疎水性又は水不溶性を、親水性とは、
親水性又は水溶性をそれぞれ意味する。

疎水性ポリマーとしては、疎水性セルロース誘導体系ポ
リマー、疎水性ビニル系ポリマー又はコポリマー、疎水
性アクリル酸誘導体系ポリマー又はコポリマー等を用い
ることができる。

疎水性セルロース誘導体系ポリマーとしては。

疎水性セルロースエーテル、セルロースエステルがある
。セルロースエーテルの例として、メチルセルロース、
エチルセルロース等がある。セルロースエステルの例と
して、アセチルセルロース等がある。

疎水性ビニル系ポリマー又はコポリマーとしては、ポリ
酢酸ビニル、ポリビニルメチルエーテル。

マレイン酸プロピル半エステルコポリマー、マレイン酸
ブチル半エステルコポリマー等がある。

疎水性アクリル酸誘導体系ポリマー又はコポリマーとし
ては、アクリル酸エステル系ポリマー又はコポリマー、
メタアクリル酸エステル系ポリマー又はコポリマー等が
ある。アクリル酸エステル系ポリマーとして、ポリアク
リル酸メチル、ポリアクリル酸エチル、ポリアクリル酸
ブチル；メタアクリル酸エステル系ポリマーとして、メ
タアクリル酸ラウリルエステルコポリマー等がある。

疎水性ポリマーと親水性ポリマーの混合物に用いられる
疎水性ポリマーとしては、前記の疎水性ポリマーがある
。一方、親水性ポリマーとしては。

疎水性ポリマーと相溶性を有していて実質的に均一に混
ざり合うようなポリマー、又は逆に相溶性に乏しくて相
分離を起こすようなポリマーいずれをも用いることがで
きる。親水性ポリマーとしては、メタノール、エタノー
ル２．β−メトキシエタノール、ジオキサン、エチレン
グリコール等の有機溶媒可溶のポリマーが好ましい。

親水性ポリマーとして親水性セルロース誘導体系ポリマ
ー、親水性ビニル系ポリマー又はコポリマー、親水性ア
クリル酸エステル系ポリマー又はコポリマー等を用いる
ことができる。疎水性ポリマーと親水性ポリマーとの混
合物を用いることてアルブミンと結合して色変化する指
示薬のポリマーからの放出の速度を所望の広い範囲に制
御できる利点がある。

親水性セルロース誘導体系ポリマーとして中村亦夫監修
「水溶性高分子」（化学工業社、１９７３年）、Ｒ１１
、Ｄａｖｉｄｓｏｎ、Ｍ、Ｓｉｔｔｉｇ編ｒＷａｔ、ｅ
ｒ−５ｏｌｕｂｌｅ　Ｒｅ５ｉｎｓ　２ｎｄ　Ｅｄ、Ｊ
（ＲＥＩＮｔｌＯＬＤ　ＢＯＯＫ　Ｃ０ＲＰ、、１９６
８年）、特開昭６０−２２２７７０等に記載の親水性又
は水溶性セルロース誘導体がある。親水性又は水溶性セ
ルロース誘導体のうちで、炭素原子数１から３の低級ア
ルキル基。

又は炭素原子数１から４のヒドロキシ基置換低級アルギ
ル基によりヒドロキシル基の一部又は実質的に全部がエ
ーテル化された水溶性セルロースエーテル類が好ましい
。水溶性セルロースエーテルは。

一般に分子量約８千から約１００万、好ましくは約１万
から約３０万の範囲のものを用いることができる。

セルロースエーテルの例として、メチルセルロース、エ
チルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロ
キシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチルメチ
ルセルロース、カルボギシメチルセルロース、カルボキ
シエチルセルロースがあり、これらのうちでメチルセル
ロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボ
キシメチルセルロースが好ましい。

親水性ビニル系ポリマー又はコポリマーとしては、前記
文献、特開昭５９　１７１８６４．特開昭６０−１１５
８５９等に記載の広範囲の親水性又は水溶性ビニル系ポ
リマーを用いることができる。ポリマーの例として、ポ
リビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニル
ピロリドン、マレイン酸メチル半エステルコポリマー、
マレイン酸エチル半エステルコポリマーマレイン酸−ビ
ニルメチルエーテルコポリマー等があり、これらはいず
れも好ましい。

親水性アクリル酸誘導体系ポリマー又はコポリマーとし
ては、ポリアクリル酸、β−ヒドロキシプロピルアクリ
レート、ポリアクリルアミド等があり、これらはいずれ
も好ましい。

これらのポリマーの被覆量は約０．５ｇ／ｍ２から約１
５ｇ／ｍ２．好ましくは約０．７ｇ／ｍ２から約］Ｏｇ
／ｍ２の範囲である。

多孔性展開層に指示薬を分散保持するポリマーを含有さ
せる方法として、指示薬とポリマーを含む水−有機溶媒
混合溶媒溶液又は有機溶媒溶液（有機溶媒の例：メタノ
ール、エタノール、イソプロピルアルコール等の脂肪族
アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等のジアル
キルケトン；ジメチルエーテル等のジアルキルエーテル
；テトラヒドロフラン、ジオキサン等の脂肪族環状エー
テル；アセトニトリル；ベキ９１ン；β−メトキシエタ
ノール；エチレングリコール等）を展開層の上から公知
の方法により実質的に均一に塗布又は噴霧し乾燥する方
法、指示薬とポリマーを含む溶液に展開層用の素材を浸
漬し乾燥又は半乾燥状態で親水性ポリマーバインダーＩ
？！（吸水層又は［Ｉ）（緩衝剤含有吸水層）に１ｆｉ
層し一体化する方法等がある。指示薬とポリマーを溶解
する溶剤は吸水層又はｐｌ＋緩衝剤含有吸水屡の親水性
ポリマーＪｉを膨潤さぜないもので両者を溶解又は分散
しろるものから適宜に選択して用いることができる。

指示薬、ポリマーとともに界面活性剤を含有させて指示
薬とポリマーを展開層中に一様に含有保持させ、水性液
体試料点着時の指示薬の放出速度のコントロールするこ
とができる。界面活性剤としては、アニオン界面活性剤
、カチオン界面活性剤、ノニオン界面活性剤９両性界面
活性剤いずれも使用できるが、ノニオン界面活性剤が好
ましい。

ノニオン界面活性剤としては、後述するｐ＋＋緩衝剤含
有吸水層に含有させることができる界面活性剤と同様の
ものがある。添加量はポリマー量の約５％〜約３００％
、好ましくは約ＩＯ％〜約１２０％の範囲である。

ｐＨ緩衝剤を含む親水性ポリマーバインダー層はｐ＋−
＋緩衝剤と水に接触して膨潤し水を吸収できる親水性ポ
リマーバインダーを主成分とする吸水性のｊｉ！（ｐＨ
緩衝剤含有吸水層またはｐ１１調節吸水層ということが
ある）である。ｐ＋＋調節吸水層は分析操作時に試薬展
開層に点着された水性液体試料中の水がこの層に到達し
両層が液体接触状態になった時に低分子量のｐ）Ｉ緩衝
剤を試薬展開層に拡散により供給して試薬展開層の液体
試料の存在領域を予め定められた一定のｐｉ値またはそ
の近傍の値に維持する機能を有する。

ｐ１１調節吸水層に含有さ！ＪるｐＨ緩衝剤は分析操作
時に液体接触領域の試薬展開；Ｚのρ１１値を約２．０
）））ら約４６０．好ましくは約３．２から約３６４の
範囲に＆ｉｌ持できる低分子量のｐＨ緩衝剤組成物また
は低分子量の酸である。用いられるｐＨ緩衝剤の例とし
て。

特開昭６１−２４３３６４に記載のリンゴ酸、乳酸、コ
ハク酸、マロン酸、杓備酸、酒石酸等の低分子量カルボ
ン酸およびそれらの塩、特開昭６２　２７６（ｉ４に記
載のグルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸等のジカルボ
ン酸、　ＵＳＰ　３４．３８７３７．日本化学会編「化
学便覧基礎編」（東京、先着、　１９６６年発行）１３
１２〜１３２０頁等に記載のその他の低分子量のｐ＋＋
緩衝剤組成物がある。

これらのうちでリンゴ酸が好ましい。＋１１１緩衝剤又
は酸のｐＨ調節吸水層における含有量は１ｍ２当り約３
０ミリ当量から約５００ミリ当量、好ましくは約５０ミ
リ当量から約３００ミリ当量の範囲である。

ｐＨ調節吸水層に用いられるポリマーバインダーは水に
接触時に膨潤して吸水する性質と皮膜形成能とを有する
天然および合成の非蛋白性の親水性ポリマーである。非
蛋白性の親水性ポリマー〇例としてポリアクリルアミド
、アガ【コース、特開昭５７−５０６６０　、特開昭５
８−７７６６４等に記載のアクリルアミド−Ｎ−ビニル
ビｒニアリドンコポリマー等のアクリルアミド系コポリ
マーがある。ｐｌ＋調節吸水層に用いられるポリマーバ
インダーの被覆量は１ｍ２当り約７ｇから約７０ｇ、好
ましくは約１０ｇから約５０　ｇの範囲である。ポリマ
ーバインダーは必要により２種以上を混合して用いるこ
とができる。

ｐ）（調節吸水層にはアナライＩ・であるアルブミンと
結合する指示薬の能力ここ悪影響を及ぼさない諸種の成
分を含有させることかてぎる。その例としてノニオン性
界面活性剤がある。ノニオン性界面活性剤の具体例とし
て、ｐ−オクチルフェノキシポリエトキシエタノール、
ｐ−ノニルフエノキシボリエトキシエタノール、ポリオ
キシエチレンオレイルエーテル、ポリオキシエチレンソ
ルビタンモノラウレート、ｐ−ノニルフエノキシボリグ
リシト−ル、オクチルグルコシド等がある。ノニオン性
界面活性剤をｐｉ−１調節吸水層に含有させることによ
り分析操作時に水性液体試料中の水がｐｌ＋調節吸水層
に実質的に一様己こ吸収ざ４１やすくなり、：４、た試
薬展開層との液体接触が迅速（３：か′つ実質的に−・
様：こなる。

ｐ＋＋調節吸水層は必要に応じて２層以−１１設りるこ
とができる。２Ｎ以上のｐＨ調節吸水層を設ける場合に
は、試薬展開層に近い層に低分子量のｐ１１緩衝剤糾成
物または低分子量の酸を含有させ、試薬展開層から遠い
層に高分子量のｐＨ緩衝剤または高分子量の酸を含有さ
せることが好ましい。用いることができる高分子量の酸
の例として、公知のカルボキシル基含有ポリマー、スル
ボン酸基含有ポリマーがある。

ｐ＋＋調節層と支持体との間に親水性ポリマーバインダ
ーからなる吸水層を設けることもてきる。吸水層に用い
られる親水性ポリマーはｐ＋＋調節吸水層と同様のポリ
マーである。その例として、ポリビニルピロリドン、ポ
リアクリルアミＩ−，アガロース等の非蛋白性ポリマー
がある。吸水層に用いられるポリマーバインダーの被覆
量は１ｍ２当り約７ｇから約７０ｇ、好ましくは約１０
ｇから約５０ｇの範囲である。ポリマーバインダーは必
要により２種以」二を混合して用いることができる。

光透過性水不透過性支持体は１１来の一体型多層分析要
素に用いられる公知のものを用いることが］　６ てきる。その具体例としては、ポリスチレンテしフタレ
ート、ヒスフェノールＡのポリカルボネート、ポリスチ
レン、セルロース］〜ステル（例、ｌ？ル「７−スシア
セテート、セルローストリアセテート。

セルロースアセテートプロピオネート等）等のポリマー
からなる厚さ約５０ｐｍから約１闘、好ましくは約８０
１１ｍから約３００７１ｍの範囲の透明な、すなわち波
長約２００ｎｍから約９００ｎｍの範囲の電磁輻射線を
透過さぜる。平泪平面状の支持体を用いることができる
。支持体の表面には公知の下塗Ｎまたは接着層を設けて
ｐｌ＋調節吸水層、ｐ１１調節層Ｊ、たは吸水層との接
着を強固にすることができる。

本発明の乾式分析要素は前述の諸特許明細書に記載の公
知の方法により調製することができる。

本発明の多層分析要素は一辺約１５闘から約３０ｍｍの
正方形またはほぼ同サイズの円形等の小片に裁断し、特
公昭５７−２８３３１．実開昭５６−１４２４５４．特
開昭５７−６３４５２．実開昭５８−３２３５０　、特
表昭５８−５０１１４１１等ここ記載のスライド枠に収
めて化学分析スライ）・とじて用いることが、製造、包
装、輸送、保存、測定操作等諸種の観点て好ましい。使
用目的によっては。

長いテープ状でカセット又はマガジンに収めて用いるこ
と、または小片を開口のあるカードに貼付又は収めて用
いることなともてきる。

本発明の多層分析要素は前述の詫特許明細書等に記載の
操作により液体試料中のアナライＩ・であるアルブミン
の定量分析を実施できる。すなわち約５１止から約３０
＋止、好ましくは８１」１から１５ｔ＋ｌの範囲の全血
、血漿、血清、リンパ液、尿等の水性液体試料篩を展開
層に点着し、約２０°Ｃから約４０°Ｃの範囲の実質的
に一定の温度で、好ましくは３７゛Ｃ近傍の実質的に一
定の温度で１分から１０分の範囲て、インクＪ＼−ジョ
ンし、光透過性支持体側からアルフミン−酸塩基指示薬
色素結合の吸収極大波長またはその近傍の波長の光を用
いて試薬展開層の光学濃度を反射測光し、予め作成した
検量線を用いて比色測定法の原理により液体試料中のア
ルブミン含有量を求めることができる。点着する水性液
体試料の量、インクヘーション時間と温度は一定にづる
ことによりアルブミンの定量分析を高精度で実施できる
。測定操作は特開昭６０−１２５５４３　、特開昭６０
−２２０８６２　、特開昭６１−２９４３６７　、特開
昭５８−１６１８６７等に記載の化学分析装置により極
めて容易な操作で高精度の定員分析を実施できる。

実施例１ 厚さ１８０７１．ｍの無色透明ポリエチレンテレフタレ
ー（ｒ’ＥＴ）フィルム（支持体）の上に下記の被覆量
コこなるようにして水溶液から塗布乾燥して吸水層を設
けた。

吸水層の被覆量（１ｍ２当り） アクリルアミド−Ｎ−ビニルピロリドンコポリマー（モ
ノマー重量比１：１；平均分子量ＩＯ万）　　７ｇｐ−
ノニルフェノキシポリグリシトール（平均１０グリシド
一ル単位含有）　　　　　４８ｍｇ吸水層の」−に下記
の被覆量になるようにして水溶液から塗布乾燥してｐ＋
＋調節吸水層を設けた。

ｐＨ調節吸水層の被覆ｆｌ（１ｍ２当り）リンゴ酸　　
　　　　　　　　　　　　　１２ｇアクリルアミ（・−
Ｎ−ビニルピロリドンコポリマー（モノマー重量比ｌ：
１；平均分子量１０万）１５ｇ１〕−ノニルフェノキシ
ポリグリシトール（平均１０グリシド一ル単位含有）　
　　　　２５０ｍｇついてｐｌ＋調節吸水層の表面に水
を３０ｇ／イの割合でほぼ一様に供給して湿潤させたの
ち、グロー放電処理して親水化したｆ’ＥＴ紡績糸（太
さ５０デニール〉からなるニラ）　１２物生地（平均厚
さ２５０７１ＩＩ＋）を圧着ラミネー１＝　シて多孔性
展開層を設けた。

ブロモクレゾールグリーンとエチルセルロース（疎水性
ポリマー）の混合物のアセトン−エタノール（容量比１
：１）混合液溶液から下記の被覆量になるようにして展
開層の−１−から塗布乾燥させてアルブミン定量用一体
型多層分析要素を調製した。

指示薬−ポリマー組成物の被覆、１（１＋ｎ２当り）エ
チルセルロース （エトキシ基含有ｆｌ：４７．５〜４９．０％；トルエ
ン−エタノール４　：　Ｉ　ｔ＝合溶媒濃度５％、温度
２５℃での粘度５０ｃｐｓ）　　　６ｇブロモクレゾー
ルグリーン　　　　　　　１．２ｇボリエギシエチレン
オＩノイルエーテル（オキシエチレン単位平均７含有）
　　　　３．２ｇ比較例１ 展開層にブロモクレゾールグリーンのアセトン−エタノ
ール（容量比１：１）混合液溶液から実施例１と同じ被
覆量で展開層に含浸したほか！Ｊ、実施例１と同様にし
て従来技術による比較用アルブミン定量用一体型多層分
析要素を調製した。

各要素の性能評価実験 水性液体試料として４％ヒトアルブミンを含む生理食塩
水、４％ヒトアルブミンと５％ヒトグロブリンを含む生
理食塩水を調製した。これらの試料の１０曲を各要素の
試薬展開層に点着し、３７°Ｃて３分インクペーション
した後、直ちに中心波長６４０ｎｍの可視光で１）ＥＴ
支持体側から試薬展開層の色光学濃度を反射測光して第
１表に示す結果が得られた。

ここで、Ｄは色光学濃度値で。

ＤＡ：アルブミン含有生理食塩水による値Ｔ）Ａ＋Ｇ：
アルブミンとグロブリン含有生理食塩水による値 誤差は式［（ＤＡｌ、Ｇ　　ＤＡ）／　ＤＡＩＸｌｏｏ
（％）による値を示す。

第　　１　　表 比較例１十０．９０４　　０．９８８　　１０．４％第
１表に不ず結果から本発明の多層分析要素が従来技術で
ある比較例の多層分析要素に比へて液体試料中に共存す
るグロブリンによる誤差が極めて少ない（約ｌ／１５て
、実質的に誤差がない）ことが明らかである。

実施例２ 展開層に含浸保持させるポリマーをエチルセルロース（
疎水性ポリマー）とヒドロキシプロピルセルロース（親
水性ポリマー）の混合物に変え、指示薬色素とポリマー
の被覆量を下記のとおり変えたほかは実施例１と同様に
してアルブミン定量用一体型多層分析要素を調製した。

指示薬−ポリマー組成物の被覆ｔ（Ｉｎ２当り）エチル
セルロース（実施例１と同種）　　６．０ｇヒドロギシ
ブロビルメチルセルロース （ヒドロキシプロポキシ基７〜１２％。

メトキシ基２８〜３０％含有；　　　□２％水溶液２０
℃ての粘度５０ｃｐｓ）　　　　１．８ｇブロモクレゾ
ールグリーン　　　　　９００ｍｇボリエキシエチレン
ラウリルエ・−チル（オキシエチレン単位平均９含有）
　　３００ｍｇ比較例２ 特開昭５７　５０６６０実施例１に記載の要素４１に準
じて第２表に示す層構成及び成分被覆量でアルブミン定
量用一体型多層分析要素を調製した。

夏Ｔ至亘 第２表 ：ｉ：ｆｌ工（：ニー。

一一−−−−−−−−−−−４−一−−−一□−−−−
−−−−−−−−−−−１４−ビニルピロリトンコボリ
マー ＊２実施例１と同種のｐ−ノニルフェノキシ−ポリグリ
シドール 各要素の性能評価実験 インクヘーション時間を７分に延長したほかは実施例１
と同様にして性能評価実験を実施したところ、第３表に
示す結果が得られた。

回Ｔ金飢 第３表 を７分に延長しても本発明の多層分析要素は従来技術で
ある比較例２の多層分析要素に比べて液体試料中に共存
するグロブリンによる誤差が約１／４であることが明ら
かである。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）光透過性水不透過性支持体の上に、少なくとも一
   層のｐＨ緩衝剤組成物を含む親水性ポリマーバインダー
   層、およびアルブミンと結合して色変化する指示薬を含
   む多孔性展開層がこの順に一体に積層されているアルブ
   ミン分析用乾式分析要素において、前記指示薬が疎水性
   ポリマー又は疎水性ポリマーと親水性ポリマーとの混合
   物の中に分散されて前記展開層中に含有保持されている
   ことを特徴とするアルブミン分析用乾式分析要素。
2. （２）前記指示薬が蛋白誤差を示す酸塩基指示薬色素で
   ある特許請求の範囲１に記載の分析要素。
3. （３）前記酸塩基指示薬色素がプロムクレゾールグリー
   ンまたはプロムクレゾールパープルである特許請求の範
   囲２に記載の分析要素。