JPS63500940A - ２６，２６，２６，２７，２７−ペンタフルオロ−１α−ヒドロキシ−２７−メトキシビタミンＤ↓３ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 見１９ま之二］１ヨー仁トＬ辷ζ久旦之ｐ３技術分野 本発明はビタミンＤ様活性により特徴づけられる化合物に関する。

より詳しくは、本発明はビタミンＤ３の誘導体、その化合物の調製方法及びその 方法において生成する新規な中間体に関する。

ビタミンＤ３はカルシウム及びリンのホメオスタシス（恒常性）を調整する薬剤 としてよく知られている。正常な動物及び人間の体内で、この化合物は腸のカル シウム輸送及び骨のカルシウムの流通（ｍｏｂｉ　ｌ１ｚａｔｉｏｎ）を刺激し 、くる病を予防するのに有効であることが知られている。

また、ビタミンＤ３は有効性となるためには、生体内てヒドロキシル化体に転換 されねばならないことも現在よく知られている。

このビタミンは最初肝臓でヒドロキシル化されて２５−ヒドロキシ−ビタミンＤ ３の形となり、腎臓でさらにヒドロキシル化されてｌα、２５−ジヒドロキシ− ビタミンＤ３又は２４．２５−ジヒドロキシビタミンＤ３になる。このビタミン のｌα−ヒドロキシル化体はそのビタミンの生理学的活性形ないしはホルモン形 てあり、カルシウム及びリンの腸内吸収を増大させ、骨のミネラルをを流通させ 、腎臓内にカルシウムを保持するなどビタミンＤ様活性と称される作用を果すも のであると一般に考えられている。

背景技術 ビタミンＤの生物学的に活性な代謝体か発見されて以来、これら代謝体の構造的 類似化合物はカルシウム代謝不調から生じる疾病に対する有用な治療剤となり得 るものであるから、それら化合物の調製に多くの関心か払われてきた。例えば、 米国特許第３，７４１゜９９６号に記載の１α−ヒドロキシコレカルシフェロー ル、同第３．９０７，８４３号に記載の２２−デヒドロ−２５−ヒドロキシコレ カルシフェロール、同第３，９０６，０１４号に記載の３−デオキシ−１α−ヒ ドロキシコレカルシフェロール、同第４，０６９．３２１号に記載の種々のフッ 化側鎖ビタミンＤ、Ｊ導体、フッ化側釦ビタミンＤ３誘導体及びフッ化側鎖ジヒ １くロタチステロール類似化合物の調製があげられる。

ビタミンのホルモン形として認められている１、２５−ジヒドロキシコレカルシ フェロール（１，２５−（ＯＨ）２Ｄ３）のある種のフルオロ誘導体は、それら が１．２５−　（ＯＨ）２Ｄ３よりも大きくはないが少なくとも大きな活性を持 つことで特徴づけられるから特に関心がもたれている。これらは２４．２４−ジ フルオロ−１，２５−（ＯＨ）２Ｄ３　（米国特許第４，２０１，８８１号）及 び２６，２６，２６，２７，２７．２７−ヘキサフルオロ−１α−ジヒドロキシ コレカルシフェノール（米国特許第４，３５８，４０６号）である。

２５−ヒドロキシコレカルシフェロールよりも大きいビタミンＤ様活性を示す２ ５−ヒドロキシコレカルシフェロールの２６゜２６、Ｚ６，２７，２７．２７− ヘキサフルオロ誘導体（米国特許第４，２４８，７９１号参照）もまた関心がも たれている。

λ乳恩皿ｊ ビタミンＤ３の新らしい誘導体が調製された。

その誘導体は２６．２６，２６，２７．２７−ペンタフルオロ−１α−ヒドロキ シ−２７−メドキシビタミンＤ３であると同定された。その化合物はレセプタサ イトに結合することではｌα−ヒドロキシコレカルシフェロール（米国特許第３ ，７４１，９９６号）よりも実質的に活性であるけども、生体内での骨の吸収（ 血清カルシウム濃度により測定）にはほとんど活性を示さないというビタミンＤ ３誘導体としては予想外の性質によって特徴づけられる。

これらの異常な性質からその化合物は新しい骨の形成（ミネラル化）の促進が望 まれる場合に用いるのに非常に適しているであろうこと及び従来のビタミンＤ様 活性、すなわち、骨の吸収及び骨のミネラル化活性を示すビタミンＤ又はその誘 導体と連繋又は組合わせて投薬するのに非常に適しているであろうことが想定さ れる。そのような連繋又は組合わせ投薬が特に有効となるであろう病状は、例え ば、閉経後骨粗しよう症、老化骨粗しよう症及び骨欠乏症などのような骨質量の 減損の傾向がみられたりあるいはそれが顕著な病状の場合である。同様に、動物 の骨質量の減損をもたらす病状又は七面鳥、鶏及びひな類又はその他の飼育動物 の脚脆弱症などのように不適切な骨のミネラル化か明らかな病状には本発明の化 合物を単独又はビタミンＤ又は他のビタミンＤ様活性と連繋又は組合わせて投薬 するのが適している。

また、この化合物はある種のビタミンＤ様特性を明らかに示すから、例えば、大 間ては上皮小体機能減退症、腎臓骨異栄養症、骨軟化症など、乳牛てはミルク熱 病、家禽類ては卵の殻の薄化に明らかなミネラル（特にカルシウム及びリン）不 均衡の治療用に用途が見出されよう。

ＬＬ′１′）ＬＬＩ′１′） −を−施するための最良の形態 本発明の化合物は以下の図式及び説明によって容易に合成することができる。図 式及び説明において、同じ化合物は同じ番号で示される。

ｌα、３β−ジアセトキシコル−５−エン−２４−オール（Ｙ。

コバヤシ、Ｔ、タグチ、Ｓ、ミツハシ、■、エグチ、Ｅ、オシマ及びＮ、イケカ ワ、ケミカル・ファーマシューティカル・プレチン、且、４２９７　（１９８２ ））のオキサリルジエステルをジメチルスルホキシドて酸化して２４−アルデヒ ド（１）を得た。２，２゜４．４−テトラトリス（トリフルオロメチル）−１， ３−ジチェタンとの縮合により良好な収率てヘキサフルオロ−２４−エン（２） を得た。２４−二重結合を水素化ホウ素ナトリウムで還元してヘキサフルオロコ レステロール誘導体（３）を得た。Ｃ−７二重結合を常法によりＮ−ブロモスク シンイミドを用いて導入した。ジアセテートをＫＯＨ−ＭｅＯＨを用いて加水分 解した時Ｃ−２７位のフッ素原子をメトキシ基で置換してジエン（４）を得た。

この置換は質量分析データにより確認した。次に、ジエン（４）をＵｖ熱照射付 し、ペンタフルオロ−１０−ヒドロキシ−２７−メドキシビタミンＤ（５）を回 収した。

合　成 以下の本発明の化合物の合成の詳細な説明に示す物理化学的データは下記のよう にしてめた。

融点は熱ステージ顕微鏡を用い測定した。Ｕ、Ｖ、スペクトルは島津ＵＶ−２０ ０ダブルビーム分光光度計を用いエタノール溶液中でめた。ＩＲスペクトルはＪ ＥＯＬ　ＩＲＡ−１回折格子赤外線分光光度計を用いて測定した。１Ｈ−ＮＭＲ スペクトルはパリアンＥＭ−３９０分光計により、特記しない限りＣＤＣ５Ｌ３ 溶液中で内部基準としてテトラメチルシランを用いて測定した。１９Ｆ−ＮＭＲ スペクトルはパリアンＥＭ−３６ＯＬ分光計により、ＣＤ０文３溶液中で内部基 準としてペンゾトリフルオリドを用いて記録した（プラスの値は高磁界を意味す る）。質量スペクトルは日立ダブルフォーカス質量分析計ＲＭＵ−７Ｌによりめ た。カラムクロマトグラフィーはシリカゲル（メルク社、７０−２３メツシユ） を用いた。分取薄層クロマトグラフィーはシリカゲル（メルク社、シリカゲル６ ０Ｆ２５４）をプレコートしたプレート上で行った。通常の仕上げ処理とは水に よる希釈、有機溶媒による抽出、中性になるまでの洗浄、硫酸マグネシウム上で の乾燥、ろ過、及び減圧下ての溶媒の除去などを意味する。次の略語を使用した ：ＴＨＦ、テトラヒドロフラン；エーテル、ジエチルエーテル；　ＨＭＰＡ、ヘ キサメチルリン酸アミド；ＴｓＯＨ，Ｐ−）ルエンスルホン酸、ＴＨＰ、テトラ ヒドロピラニル：Ｓ、−重！！：ｄ、二重線：ｔ、三重線：９、四重線；ｍ、多 重線；ｂｓ、広幅−重線。温度はすべて°Ｃである。

１α、３β−ジアセトキシコル−５−エン−２４−オール（１）オキサリルクロ リド（０，３２ｄ、３．６９ミリモル）のジクロロメタン（１２ｍり溶液中へ一 ７８°アルゴン雰囲気下でジメチルスルホキシド（０，５２１１，７，３８ミリ モル）を加え、混合液を７８″でｌＯ分間攪はんした。次に、１α、３β−ジア セトキシコル−５−エン−２４−９・ ４２９７　（１９８２））　（８５０ｍｇ、　１．８５ミリモル）のジクロロメ タン（７誼）溶液を加え、溶液をざらに攪はんした。１５分後にトリエチルアミ ン（２，０５ｍ２、１４．フロミリモル）を加え、混合液を５分間攪はんし、そ の後室温まで加温した。通常の仕上げ処理（エーテル）で得た粗生成物をシリカ ゲル（７４ｇ）でのクロマトグラフィーにかけた。ヘキサン−酢酸エチル（４： １）を用いる溶離により無定形固体のアルデヒド（１）　（７ＳＯ＋ｓｇ、８９ ｚ）を得た。Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）δ：０．６５（３１１，ｓ。

１８−１（３）、　１．（）４（コＮ、　ｓ、　１９−１′１３）、　１．９４ （３）１．　Ｓ、アセチル）、　１．９７　（３Ｈ。

Ｓ、アセチル）、　４．８２（ＩＨ，ｒｓ、　３ａ−Ｈ）、　４．９５（ＩＨ， ｖａ、　１β−Ｈ）、　５．４１（１８，ｍ、　６−１１）、　９．５８（ＩＨ ，ｔ、　Ｊ＝１．６Ｈｚ、　２４−Ｈ）。

上述の操作においてアセテート基以外のブロック基が出発物質において用いるこ とがてきると理解すべきである。例えば、炭素原子数１〜４のアシル基が当業者 にとって明らかな他のブロック基と同様に容易に利用できる。

ｌα−アセトキシ、２６，２６，２６，２７，２７．２７−ヘキサフルオロコレ ステロール３β−アセテート（３）１α、３β−ジアセトキシコル−５−エン− ２２−アル（１）（１３４ｍｇ、０．２９ミリモル）とトリフェニルホスフィン （１，０２４ｇ、３．９ミリモル）のエーテル（５０ｄ）溶液中へ一７８℃（ド ライアイス−アセトン）で２．２，４．４−テトラトリス（トリフルオロメチル ）−１，３−ジチェタン（７６０ｍｇ、２．１ミリモル）を添加し、反応混合液 を１６時間攬はんした。減圧下で溶媒を除去した後、残留物をシリカゲルによる クロマトグラフィー処理（ｎ−ヘキサン−酢酸エチル５：１）Ｌ／ヘキサフルオ リド（２）とトリフェニルホスフィンスルフィドの混合物（３９４＋ｓｇ、モル 比１：１．７７）を得た。

’Ｈ−ｎｍｒ　（ＣＤＣ！ｌ）　δ：０．６８（３Ｈ，ｓ、　１８−Ｏ３）、　 ０．９５（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６Ｈｚ。

２１−Ｈ：＋）、１．０８（３Ｈ，ｓ、　１９−Ｏ３）、　２．０２（３Ｈ，ｓ 、アセチル）、　２．０５（３Ｈ。

Ｓ、アセチル）、　４．９５（ＩＨ，ｔａ、　３−Ｈ）、　５．８２（ＩＨ，ｍ 、　１−Ｈ，）、　５．５８（１１゜ｔｘ、　６−Ｈ）、　６．８０（ＩＨ，腸 、　２４−Ｈ）。

この混合物（３５０腸ｇ）をＴＨＦ（１５ｍｉｌりとｔ−ブタノール（７，５ｄ ）中の水素化ホウ素ナトリウムを用い室温で２２時間処理した。通常の仕上げ処 理〔エーテル−酢酸エチル（１：１）て抽出〕後、抽出物をシリカゲル（４０ｇ ）カラムを用い、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１０：１）溶離による精製で粗へ キサフルオロコールステロール（３）を得て、これをシリカゲル（２０ｇ）のカ ラムてさらに精製した。ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（２０：ｌ）の溶離により純 粋なヘキサフルオロコレステロール話導体（３）　（６９ｍｇ、５１ｚ）を無定 形物として得た。（６）＝　１８−ｎｍｒ（Ｃ［ｌＣＩ　）６．５８（３Ｈ，ｓ 、　１Ｂ−Ｏ３）、　０．９２（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６Ｈ２，２ｌ−Ｏ３）、　１ ．１０　（３Ｈ，ｓ、　１９−Ｏ３）、　２．０３　（３Ｈ，ｓ、アセチル）、 　２．０７　（３Ｈ，ｓ、アセチル）、　５．００　（ＩＨ，ｔａ、　３−Ｈ） 、　５．１０　（ＩＨ。

ｓ、　１−）り、　５．５８　（凰ｙｓ、　６−Ｈ）−Ｆ−ｎ＋＊ｒ　（ＣＤＣ ＪＬ３）　−３，３（３Ｆ、　ｄ、　Ｊ＝１０．３Ｈｚ）、　−４，１（３Ｆ、 　ｄ、　Ｊ＝１０．９Ｈｚ）、　ＭＳ　ｔａｌｅ　４５４　（Ｍ＋　−２ＡｃＯ Ｈ−１１Ｆ）。

４４０、３３５．２５３．高分解能ＭＳ計算値、ＣＨ２７’３５’５として４５ ４．２６５６゜測定値４５４．２５３９゜ ２６．２６，２６，２７．２７−ペンタフルオロ−１α、３β−ジヒドロキシ− ２７−メドキシコレスター５，７−ジエン（４）２６．２６，２６，２７，２７ ．２７−へキサフルオロ−１α。

３β−ジアセトキシコレスト−５−エン（３）　（２６ｔａｇ、０．０４４ミリ モル）とＮ−ブロモスクシンイミド（１１ｍｇ、０．０６２ミリモル）の四塩化 炭素（２舘）中の混合物をアルゴン雰囲気下で２５分間還流処理した。０″に冷 却後得られた沈殿物をろ別した。ろ液を４０°Ｃで濃縮し残留物を得た。これの キシレン（２ｍｌ）溶液をコリジン（０，５ｄ）とキシレン（１，５ｍ）の還流 溶液中へ滴加し、還流を２０分間続けた。通常の仕上げ（酢酸エチルで抽出）で 粗ジエンを得た。これをＴ　ＨＦ　（Ｓｍ）中て５％ＫＯＨ−メタノールて６０ 分間処理した。通常の仕上げ処理（酢酸エチル抽出）で粗生成物を得て、これを 分取ＴＬＣ（ベンゼン−酢酸エチルｌ：ｌで３回展開）にかけた。Ｒｆｏ、４１ の層をかき取り酢酸エチルで溶離した。溶媒を除去して５　、７−シーに−ン（ ４５ｍｇ、２０％）ヲ得り。ＵＶＥｔＯ’：　２９３．２８２．２７２ｍａ× ｎｍ、　ＭＳ　０１／Ｚ　：　５２０ＣＭ”）、　５００．４８２．４６５．２ ８７．２５９．２５１．２３３．質量分析値からＣ−２７のフッ素はＫＯＨ−メ タノールによる加水分解中にメトキシ基に置換されていた。

５．７−ジエン（４）　（４，５ｍｇ、８．８６ＪＬモル）のベンゼン（９０ｍ ｌＪ）とエタノール（４０ｍｌｌりの溶液をアルゴン雰囲気下で、氷冷したビコ ールフィルターを通した中圧水銀灯で５分間照射処理した。その後、反応混合物 をアルゴン雰囲気下で１時間還流処理した。減圧下の溶媒除去により粗生成物を 得て、それを分取ＴＬＣ（ベンゼン−酢酸エチル１：ｌ、３回展開）処理に付し た。Ｒｆｏ、５０の層をかき取り、酢酸エチルて溶離した。溶媒の除去によりビ タミンＤ３ＥｔＯＨ：２６Ｓｎｍ、　エＥ４０）１゜類似体（５）　（０，６７ ｍｇ、　１５％）を得た。ＵＶＭａｘ　ｍａｎ２２８ｎｍ　；　ＭＳ　ｍ／ｚ　 ：　５０　（Ｍ”　−ＨＦ）、　４８２．４６６、３５８．２８７．２６９．２ ５１゜２３３、２１３．１５２．１３４．　Ｒｆ　０　、４３の層をかきとり酢 酸エチルで溶離した。溶媒の除去により５．７−ジエン（１，３Ｂ、２９ｚ）を 回収した。

２６．２６，２６，２７．２７−ペンタフルオロ−１α−ヒドロキシ−２７−メ ドキシビタミンＤ３　（５）は所望によりこの技術分野では周知のヘキサン、エ ーテル及びアルコール（無水又は水溶液）及びそれらの混合物などの適当な溶媒 からの結晶化により容易に結晶形として得るこくができる。

本発明の２６．２６，２６，２７．２７−ペンタフルオロ−１α−ヒドロキシ− ２７−メ１−キシビタミンＤ３化合物は滅菌非経口溶液として注射又は静脈注射 により、又は経口薬の形で消化塁管に。

又は生薬として容易に投薬することができる。１日あたりＯ８ｌＩＬｇから１０ ｐｇの投薬量が上述のビタミンＤ様活性の特徴である生理学的カルシウム平衡反 応を得るのに有効であり、維持のための投薬量は約０．２５７ｐｇが適している 。

化合物の投薬形態にはこれをこの技術分野で周知の無毒性で医薬的に許容される 担体と組合せて調製することができる。担体は、例えば、コーンスターチ、ラク トース、スクロース、ピーナツ油、オリーブ油、ごま油及び水のように固体てあ っても液体てあってもよい。もし固体の担体が用いられるならば、本発明の化合 物の投薬形態は錠剤、カプセル、粉末、トローチ又はロレンジにすることができ る。もし液体の担体が用いられるならば、軟ゼラチンカプセル、又はシロップ又 は懸濁液、乳濁液又は溶液が投薬形態となろう。また、投薬形態には保存剤、安 定剤、湿潤剤又は乳化剤、溶解促進剤などの佐薬な含有することもできる。また 、その他の治療学的に有効な物質を含有することもできる。

投薬量範囲を示したけれども、ある患者に投与すべき薬量そのものは治療すべき 病気の状態、その場合にめられる最終結果ならびにこの種薬剤の治療用途におい て当業者に知られたその他の諸因子に基いて決められるものであると理解すべき である。

生物学的活性 ２６．２６，２６，２７．２７−ペンタフルオロ−１α−ヒドロキシ−２７−メ ドキシビタミンＤ３の生物学的活性は下記の特定の検定法により設定した。

骨カルシウムの流通 乳ばなれした雄のラット、（ホルッマン社、ライスコンシン　マジソン）に低カ ルシウムビタミンＤ欠乏飼料（スダら、ジャーナル・オブ・ニュートリジョン（ １９７０）１００．１０４９）を３週間与えた。その期間終了時にラットを３群 に分け、その１群には９５％エタノール０．０５ｄに溶解したｌα−ヒドロキシ ビタミンＤ　３（１ａ　ＯＨＤ　３）　６５０ピコモルを与え、次には１群には １α−ヒドロキシビタミンＤ３の場合と同じビヒクル中のｌα−ヒドロキシ−２ ６，２６，２６，２７，２７−ペンタフルオロ−２７−メドキシビタミンＤ３（ １α０Ｈ−２６，２６，２６，２７，２７−Ｆ５−２７０ＣＨ３−Ｄ３）６５０ ピコモルを与え、最後の群にはビヒクルのみを与えた。投薬は殺害前１６時間に 頚静脈注射て行った。血液を収集し、遠心分離して血清を得た。各本例の血清０ ．１ｍｌを塩化ランタン溶液と混合し、カルシウム濃度を原子吸光分光光度計（ パーキンエルマー型式２１４）を用いて測定した。飼料からのカルシウム取りこ み量は無視できるほど少ないから、血清カルシウム濃度の増加が試験した化合物 の骨の流通活性を反映する。結果は下記の第１表に示す。

第　工　表 １ｃｘＯＨＤ　又は１　ａＯＨ２６，２６，２６，２７，２７Ｆｓ−２７−ＯＣ Ｈ３−Ｄ３に応答する血清カルシウム濃度の増加ビヒクル　３．２±０．１　ａ ）本　４１αＯＨＤ　３４．７±０．５　ｂ）　５１α０Ｈ−２６，２６，２６ ，２７゜ ＊平均値標準偏差 ｂ）及びＣ）はａ）に対し、またｂ）はＣ）に対し有意差であり、　ｐｏ、００ １゜ レセプター結合 シェバートらの方法（ザ・バイオケミカル・ジャーナル（１９７８）１８２．５ ５−６９）によって、ひよこの腸内レセプターからの放射性標識付けした１、２ ５−ジヒドロキシビタミンＤ３の置換なｌα−〇ＨＤ３及び１α０Ｈ−２６，２ ６，２６，２７，２７−Ｆ　−２７−ＯＣＨ３−Ｄ３について測定した。得られ た結果は第１図に示すように、ペンタフルオロ化合物はこれら化合物のカルシウ ム腸内輸送及び骨の流通におけるビタミンＤ様活性の証拠であるレセプターから の放射性標識付けした１、２５　（ＯＨ）２　Ｄ３の置換能力が１α−０ＨＤ３ の約３倍であることを示している。

第１図 ピコモル／管 国悴謔査卸告

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. １．一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ及びＲ１は水素及び炭素原子数１から約４を有するアシル基からなる群 から選ばれる。） を有する化合物。
2. ２．結晶である請求の範囲第１項記載の化合物。
3. ３．少なくとも１種の医薬的に許容されるふ形剤とともに請求の範囲第１項記載 の化合物の少なくとも１種からなる医薬組成物。
4. ４．２６，２６，２６，２７，２７−ベンタフルオロ−１α−ヒドロキシ−２７ −メトキシビタミンＤ３。
5. ５．少なくとも１種の医薬的に許容されるふ形剤とともに請求の範囲第４項記載 のからなる医薬組成物。
6. ６．結晶である請求の範囲第４項記載の化合物。
7. ７．一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ及びＲ１は水素及び炭素原子数１から約４を有するアシル基からなる群 から選ばれ、Ｒ２は水素及び−ＯＣＨ３からなる群から選ばれ、点線はＲ２が− ＯＣＨ３である場合の炭素と炭素の結合を示す。） を有する化合物。
8. ８．１α，３β−ジヒドロキシ−２６，２６，２６，２７，２７−ベンタフルオ ロ−２７−メトキシコレスタ−５，７−ジエン。