JPS6335589A

JPS6335589A - Ｘ型ネオスフインゴ糖脂質関連化合物およびその合成法

Info

Publication number: JPS6335589A
Application number: JP18038886A
Authority: JP
Inventors: Tomoya Ogawa; 智也小川; Susumu Sato; 進佐藤; Yasuo Nukada; 額田　恭郎; Yukinari Ito; 幸成伊藤; Yoshiaki Nakahara; 義昭中原
Original assignee: RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Current assignee: RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Priority date: 1986-07-31
Filing date: 1986-07-31
Publication date: 1988-02-16

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、Ｘ型ネオスフィンゴ糖脂質関連化合物および
その合成法に関する。

ここでネオスフィンゴ糖脂質とは、本来糖タンパクに見
出される糖鎖構造又はその部分構造をセラミドと結合さ
せた準天然型（新しい型）のスフィンゴ糖脂質と定義す
る。

〔発明の背景〕

糖脂質は細胞膜を形成する脂質二重層の構成成分の一群
であり、細胞膜の中では脂質部分を膜二重層に埋め込み
、糖鎖部分を細胞の外側に向けている。これらの糖脂質
とは別に糖タンパクも、細胞膜成分として糖鎖をやはり
外側に向けて存在し、同様の膜機能（例えばレセプター
、抗原物質の認識など）を担っている。本発明のネオス
フィンゴ糖脂質も天然型スフィンゴ糖脂質と同様に細胞
膜に取り込ませることは可能であり、それにより膜機能
の改善も可能と考えられる。又、従来、糖脂質に関して
はモノクローナル抗体作製などを通してその糖鎖の生物
学的意義の解明も進んできているが、糖タンパク糖鎖に
関しては抗体作成が困難な状態にある。

そこで、糖タンパク由来糖鎖を有する糖脂質を合成化学
的に調製することができれば、糖タンパク糖鎮の機能を
解明し、さらに細胞膜表層糖鎖の構造変化を詳細に理解
し、この構造変化に関連するがんなどの疾患の診断、検
査、治療などに応用することが可能になる。

〔発明の目的〕

したがって本発明の目的は、ルイスＸ型ハプテンを有す
る、Ｘ型ネオスフィンゴ糖脂質関連化合物右よびその合
成法を提供することである。

〔発明の構成〕

本発明は、次式で示されるＸ型ネオスフィンゴ糖脂質関
連化合物を提供するものである。

式中Ｒ１は水素原子またはアセチル基、Ｒ２は水素原子
、アセチル基またはベンジル基、Ｒ３は水素原子、Ｒ４
はアセチル基、またはＲ３とＲ４が共同してフタロイル
基を示し、Ｒ５はベンジル基、アセチル基、−Ｃ（ＮＨ
）ＣＣβ３または１ＨＣＯＣ＋ｓＬまたはベンゾイル基を示す）を示す。

上記化合物は式〔２）：で表される化合物（２）と、式〔３）で表される化合物
（３）二を反応させ、式（４）：で表される化合物（４）を得、これをヒドラジン処理し
たのちアセチル化して式（５）：で表される化合物（５）を得、これを水素接触還元によ
り脱ベンジル化したのちアセチル化して式（６）二で表
される化合物（６）を得、これをヒドラジン／酢酸で処
理したのち、トリクロロアセトニトリルと反応させ、式
（カニＵで表される化合物（７）を得、これに式（８）：で表さ
れる化合物を反応させて式（９）：で表される化合物を
得、これをアルカリ処理して保護基を脱離することによ
り合成される。

上記式中、Ａｃはアセチル基、Ｂｎはベンジル基、ｐｈ
ｔｈはフタリル基、Ｂｚはベンゾイル基を示す。

化合物（２）と（３）の反応は、クロロホルム、ジクロ
ロエタン、ジクロロメタン、トルエン、ＴＨＦ等の溶媒
中、トリメチルシリルトリフレート　　　　゛（ＴＭＳ
ＯＴｆ）　、モレキュラーシーブ（ＭＳ）　４Ａ、　８
Ｆ３・８ｔ２０等の触媒存在下、−２０℃〜６０℃、１
分〜１日で十分に進行する。

得られた化合物（４）を、メタノール、エタノール等の
溶媒中、ヒドラジン存在下、−１０℃〜１２０℃で５分
〜２日処理することによりフタリル基を脱離し、次いで
ピリジン、クロロホルム、ジクロロエタン、ジクロロメ
タン、ＴＨＦ、ジオキサン等の溶媒中ピリジン、４−Ｄ
ＭＡＰ　（４−ジメチルアミノピリジン）等の存在下、
無水酢酸でアセチル化して化合物（５）を得る。アセチ
ル化の条件は一１０℃〜８０℃、３０分〜２日が適当で
ある。

化合物（５）をメタノール、エタノール、酢酸等の溶媒
あるいはこれらの混合溶媒中、１０％〜５％Ｐｄ−Ｃ，
５％Ｐｄ−ＢａＳＯ４，５％ｐｔ−ｃ等の触媒存在下、
０℃〜１００℃で１時間〜３日間水素接触還元して、ベ
ンジル基を脱離したのち、上記アセチル化条件でアセチ
ル化することにより化合物（６）を得る。

化合物〔６〕を、ＤＭＦＳＤＭＳＯｌＴＨＦ、ジオキサ
ン等の溶媒中、ヒドラジン／酢酸を加え、−１０℃〜１
００℃で５分〜１日処理して、１−〇Ａｃ基を脱離し、
次いでクロロホルム、ジクロロエタン、トルエン、ＴＨ
Ｆ等の溶媒中、トリクロロアセトニトリルを加え、ＤＢ
Ｕ　（ジアザビシクロウンデカン）等の触媒を加え、−
２０℃〜６０℃で５分〜１日処理することにより化合物
（７）を得る。

化合物（力をクロロホルム、ジクロロエタン、ジクロロ
メタン、トルエン、ＴＨＦ等に溶解し、セラミド化合物
（８）を加え、ＢＦ、・ｅｔ２ｏ、ＭＳ４Ａ、　Ｔｉ、
４ＳＯＴｆ等の触媒存在下に、−２０℃〜６０℃で１分
〜１日処理することにより化合物（９）を得る。

化合物（９）をメタノール、エタノール等に溶解し、Ｎ
ａＯＭｅ等のアルカリを加え、−１０℃〜１００℃で５
分〜１日処理することにより最終の目的化合物（１）を
得る。

本発明の出発原料である化合物（２）は特願昭６０１６
７１３１号明細書記載の方法（スキーム１参照）により
、化合物（３）はく小川ら、カーボハイドレート・リサ
ーチ１０４　　（１９ｇ２）２７１〜２８３頁）に記載
の方法により、また化合物（８）は特開昭６０−１９０
７４５号公報記載の方法により、それぞれ合成すること
ができる。

本発明方法の一具体例を次のスキーム２に示す。

スキ（２）（既　報）ｂｎ −ム２Ｈｎ〔有用性〕本発明により得られる化合物（４）、（５）、（６）、
（７）、（８〕、（９）および（１）はいずれも新規化
合物である。これらの化合物は、糖タンパク糖鎖の生物
学的機能を解明する上で重要な試薬となりうるほか、細
胞膜表層糖鎖の構造変化を詳細に理解し、この構造変化
に関連する各種癌疾患〔ハコモリら、Ｊ、　Ｂｉｏｌ。

Ｃｈｅｍ、、　２５９　（１９８４）　４６８１−４６
８５　）の診断、治療などに応用することができる。

以下、実施例を示し、本発明をさらに詳細に説明する。

実施例１化合物（４）の合成アルゴンガス気流下、事前に十分乾燥したＭ、　Ｓ。

４Ａ２ｇの入った二頚褐色フラスコに、化合物（２）３
４６ｍｇ　（０，２６８ｍＭ）及び（３）　１４５　ｍ
ｇ（０，２６８ｍＭ）をジクロロエタン１Ｏｒｌ！に溶
解し加えた。これにトリメチルシリルトリフレー１−　
（ＴＭＳＯＴｆ）　５３ｔｔｌｌ　（０，２６８ｍＭ）
を水冷下加え３０分間攪拌した。反応混合物をろ通抜、
ろ液を飽和型ソウ水、飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸マ
グネシウムで乾燥し溶媒を留去した。残渣の油状物をカ
ラムクロマトグラフィー（トルエン／酢酸エチル＝５／
１で展開）にて精製し、油状の化合物（４ン１８５ｍｇ
（収率４２％）を得た。

〔化合物（４）の性質〕元素分析値　Ｃ３ｓＨ３゜、Ｎ０２Ｓ　＝１６６８．８
６７として理論値　Ｃ：、６９．０９　　Ｈ：６．ｌＯ
Ｎ：０．８４実測値　Ｃ：６ｇ、９５　　Ｈ：６．０６
　　Ｎ：０．８２旋光度　［α］　。”−１３，４°（
Ｃ＝１．１３　、ＣＨＣｆ　３）Ｒｆ　＝０．５７　（
）ルエン／酢酸エチル＝３／１）’　Ｈ−ＮＭＲ（４０
０ＭＨｚ　５ＣＯＣＩ！　ｚ＞δニア、７−７、０（ｍ
、　４４Ｈ。

アロマチック）　、５．２２（ｄ、　ＩＨ，Ｈ−４［：
、　Ｊ＝３．６　Ｈｚ）　、５．２１（ｄ、　ＩＨＳＨ
−１ｂＳＪ＝８．５Ｈｚ＞。

２．００．１．９９．１．９４．１．８２（４ＸＳ　、
　４Ｘ３Ｈ。

４　ｘ−ＯＡｃ）１．２０（ｄ、　３ＨＳＰＬＩＣＣＨ３、Ｊ＝６．４Ｈ
ｚ）”　Ｃ−ＮＭＲ（ＣＯＣｌ　３）δ：９９．５８４（Ｃ−１ｃ）　　　５６，３４８（Ｃ−２
ｂ）９７．４６９（Ｃ−１ｂ）　　　１６．７４１（Ｃ
−６ｄ）９６、８１７　（Ｃ−１６）９６．５５０　（Ｃ−１ａ）実施例２化合物（５）の合成化合物（４）１６２ｍｇ　（０，０９７ｍＭ）を２％ヒ
ドラジン−エタノール１０ｍ１に溶解し、終夜還流攪拌
した。溶媒を留去し、残渣を無水酢酸／ピリジン／４−
ジメチルアミノピリジン（４−ＤＭＡＰ　）（１ｍｎ／
１ｍβ／触媒量）に溶解し、５時間、室温にて攪拌した
。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、飽和型ソウ水、希塩
酸、飽和食塩水で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥
し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー
（酢酸エチル／トルエン＝１／１で展開）にて精製し、
油状の化合物（５）　１４８　ｍｇ　（収率９７％）を
得た。

〔化合物（５）の性質〕元素分析値Ｃ９ｏｔ＋１０１ＮＯ２４’Ｈ２０＝１ｓ’
Ｊｓ、　ａ１６として理論値　Ｃ：６７．６１　　Ｈ：
６．４９　　Ｎ：０．８８実測値　Ｃ：６７．０７　　
Ｈ：６．２２　１Ｊ：０．９８旋光度　〔α〕。”−５
，９°（Ｃ＝０．８８　、ＣＨＣｆ　３）Ｒｆ　＝０．
６３　（酢酸エチル／トルエン＝１／１）’Ｈ−ＮＭＲ
（４００ＭＨｚ　、　ＣＤＣβ３）δニア、４５−７．
２（ｍ、　４０Ｈ、７０７ｆツク）、５．６５（ｄ、　
ＩＨ，ＮＨ）　、５．２１（ｄ、１■、Ｈ−１ｂ。

Ｊ・８．５４　Ｈｚ）、５．０３（ｄ、　ｉｌｌ、　）
Ｉ−１ｄ、　Ｊ＝３．９Ｈｚ）、２．０３．１．９７、
■、９４．１．８３．１．６２（５ＸＳ　、　５ｘ３Ｈ
，５ＸＡｃ）　、１．１９（ｄ、　３Ｈ。

Ｆｕｃ−ＣＬ　、Ｊ＝６．６Ｈｚ） ”　Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣβ３）δ：９６、６３６　（Ｃ−１ｃ）　　　５８．６７８　（Ｃ
−２ｂ）９７、４１７　（Ｃ−１ａ）実施例３化合物（６）の合成水素ガス気流下、化合物（５）１４８ｍｇ　（０，０９
３ｍ　Ｍ　）及び１０％Ｐｄ−Ｃ５０ｍｇのメタノール
／酢酸（４ｍｌ／１ｍｆｆ）溶液を室温にて２日間攪拌
した。反応終了後、触媒をろ去し、溶媒をを留去後、残
’ａをｆｍ水酢ｅ／ピ’）シフ／４−ＤＭＡＰ　（１ｍ
ｎ／１ｍβ／触媒量）に溶解し、室温にて、７時間攪拌
した。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、水、飽和型ソウ
水、希塩酸、飽和食塩水で順次洗浄後、硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグ
ラフィー（アセトン／トルエン＝１／３で展開）にて精
製し、化合物（６）８２ｍｇ　（収率７３％）を得た。

〔化合物（６）の性質〕元素分析値　Ｃ５，Ｈ６９ＮＯ３２＝　１１９６．０９
５として理論値　Ｃ：５０．２１　　Ｈ：５．８１　　
Ｎ：１．１？実測値　Ｃ：５０．０５　　Ｈ：５．７７
　　Ｎ：１．１５Ｒｆ　＝０，５２　（アセトン／トル
エン＝１／ｌ）’ｔ（−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ　５ＣＤ
Ｃｌ　３）δ：２、２−１．９（ｍＳ、　１３　Ｘ３Ｈ
，−Ａｃ）１．２０（ｄ、３Ｈ，Ｆｕｃ−ＣＨ３１，Ｊ
’６．７Ｈｚ）”　Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣβ３）δ：１００．５６０（Ｃ−１ｃ）　　　５６．８３５（Ｃ−
２ｂ）９９．４７６（Ｃ−１ｂ）　　　１５．８７４（
Ｃ−６ｄ）９５、４６６　（Ｃ−１ｄ）９１、１３２（Ｃ−１ａ）実施例４化合物（７）の合成化合物（６）７１ｍｇ　（０，０５９ｍＭ）をＤＭＦ　
１ｍｌに溶解し、これにヒドラジン・酢酸塩６．５　ｍ
ｇ（０，０７ｍＭ）を加え、室温にて１時間攪拌した。

反応溶液を酢酸エチルで抽出し、水洗後、硫酸マグネシ
ウムで乾燥し、溶媒を留去した。残渣をジクロロエタン
２ｍｆｌに溶解し、これにトリクロロアセトニトリル８
６ｍｇ（０，６ｍＭ）を加えた。これにアルゴンガス気
流、氷冷下、Ｄ　Ｂ　Ｕ　９　ｍｇ（０，０６ｍＭ）を
滴下し、１時間攪拌した。反応溶液を濃縮後、カラムク
ロマトグラフィー（アセトン／トルエン＝１７２で展開
）にて精製し、油状の化合物（７）６１　＋ｎｇ　（収
率７４％）を寿た。

〔化合物（７）の性質〕Ｒｆ　＝０．６０　（アセトン／トルエン＝１／１）’
Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ　、　ＣＤＣＩ２３）δ：６
、１４（ｄ、　１）ＩＳＨ−１ａ、　Ｊ＝１．４Ｈｚ）
２、２−１．９　（ｍｓ、１２Ｘ３Ｈ１−八Ｃ）１．２
Ｈｄ、　３Ｈ，Ｆｕｃ−ＣＨ３、Ｊ＝６．７Ｈｚ）実施
例５化合物（９）の合成アルゴンガス気流下、化合物（７）　５５　ｍｇ　（０
，０４２ｍＭ）及び化合物（８）２６ｍｇ　（０，０４
２ｍＭ）のクロロホルム溶液を、事前に十分乾燥したＭ
、Ｓ、４Ａ（Ａ、Ｗ、３００）２００ｍｇの入った褐色
二頭フラスコに注入し、これに氷冷下、ＢＦ３・Ｅｔ２
０５．６　ｍｇのクロロホルム溶液０．５　ｍ　ｊｌ！
を滴下し、３０分間攪拌した。反応混合物をろ通抜、ろ
液を飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、
溶媒を留去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ア
セトン／トルエン＝１／２で展開）にて精製し、化合物
（９）２３ｍｇ（収率３１％）を得た。

〔化合物（９）の性質〕Ｒｆ　＝０．５６　（アセトン／トルエン＝２／３）旋
光度　〔α〕ｏ”　　８．８°（Ｃ＝１．１６　、ＣＨ
Ｃ１３）’Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ　、　ＣＤＣｊｌ
’３）δ：８．０−７．４（ｍ　、　５Ｈ，７０７チツ
ク）２、２５−１．９５（ｍＳ、　１２　ｘ３Ｈ１−Ａ
ｃ）０．８７（ｔ、２Ｘ３ＨＳ　Ｃｅｒ（セラミ　ド）
−ＣＨ３、Ｊ＝７．０Ｈｚ）実施例６化合物（１）の合成化合物（９）２１ｍｇ　（０，０１１８ｍＭ）のメタノ
ール／ＴＨＦ（１ｍｌ／１ｍ１）溶液に、０．ＩＮＮａ
ＯＭｅ−メタノール溶液２００μｌを加え、終夜攪拌し
た。反応溶液にアンバーリスト１５を加え、中和後、ろ
去し、ろ液を減圧留去した。残渣をゲルろ適法（Ｌ、Ｈ
−２０）（クロロホルム／メタノール／水＝６０／４０
／４．６）にて精製して、化合物（１）　１４　ｍｇ　
（定量的）を得た。

〔化合物（１）の性質〕Ｒｆ＝０．５９（ｎ−ブタ／−ル／エタノール／水＝２
／１／１）旋光度　〔α〕。２２−５゜０°（Ｃ＝０．１６　、メ
タノール）

Claims

【特許請求の範囲】（１）次式で示されるＸ型ネオスフィンゴ糖脂質関連化
合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中Ｒ＾１は水素原子またはアセチル基、Ｒ＾２は水素
原子、アセチル基またはベンジル基、Ｒ＾３は水素原子
、Ｒ＾４はアセチル基、またはＲ＾３とＲ＾４が共同し
てフタリル基を示し、Ｒ＾５はベンジル基、アセチル基
、−Ｃ（ＮＨ）ＣＣｌ＿３または▲数式、化学式、表等
があります▼（Ｒ＾６は水素原子またはベンゾイル基を示す）を示す。（２）式（２）： ▲数式、化学式、表等があります▼（２）で表される化合物（２）と、式（３）で表される化合物
（３）： ▲数式、化学式、表等があります▼（３）を反応させ、式（４）： ▲数式、化学式、表等があります▼（４）で表される化合物（４）を得、これをヒドラジン処理し
たのちアセチル化して式（５）： ▲数式、化学式、表等があります▼（５）で表される化合物（５）を得、これを水素接触還元によ
り脱ベンジル化したのちアセチル化して式（６）： ▲数式、化学式、表等があります▼（６）で表される化合物（６）を得、これをヒドラジン／酢酸
で処理したのち、トリクロロアセトニトリルと反応させ
、式（７）： ▲数式、化学式、表等があります▼（７）で表される化合物（７）を得、これに式（８）：▲数式
、化学式、表等があります▼（８）で表される化合物を反応させて式（９）： ▲数式、化学式、表等があります▼ （９）Ｒ＝Ｂｚ（１）Ｒ＝Ｈで表される化合物を得、これをアルカリ処理して保護基
を脱離することを特徴とする、式（１）で表されるＸ型
ネオスフィンゴ糖脂質関連化合物の合成法。上記式中、Ａｃはアセチル基、Ｂｎはベンジル基、Ｐｈ
ｔｈはフタリル基、Ｂｚはベンゾイル基を示す。