JPS63246320A - 非水溶性の有効成分のためのリン脂質輪送ビヒクル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 免１へた１ 本発明は、リン脂質カプセルに収容された医薬に係わる
。本発明は一方において、リン脂質カプセルに収容され
たヘキサメチルメラミンに係わる。

本発明はまた他方において、上記のような医薬組成物の
、例えば腫瘍細胞のような生体に医薬を輸送することへ
の使用に係わる。

１匪へ１１ 抗腫瘍活性を有するものとして著しい数の物質が公知で
あるが、多くの場合、そのような物質を腫瘍細胞に安全
かつ有効に輸送するための組成物及び方法の開発が必要
となる問題点が存在する。

多くの抗癌剤の通常の毒性は、それらの抗癌剤を遊離形
態で生体に投与することを妨げる。多くの抗癌剤は水性
環境において、注射その他の有効な投与法が可能になる
ほど十分に溶解可能あるいは安定でない。更に、腫瘍細
胞を標的とするのに、あるいは細菌のような有害成分の
除去を目的とする濾過を可能にするのに輸送薬剤の大き
さの制御がしばしば有用である。また、非毒性であるう
えに生物学的に適合性である組成物を創出することも重
要である。

上記のような問題点の克服に、幾つかの例では、リン脂
質カプセルを有する輸送ビヒクルが用いられている。例
えば、幾つかの非水溶性薬物を、比較的非毒性でかつ生
物学的に適合性である水溶性の輸送ビヒクルを得るべく
、リポソームのリン脂質二重層内の親油性領域内に組み
込み得ることが公知である。しかし、総ての非水溶性物
質を上記のような組成物にできるわけではない。

水に溶解しにくいため用途が限られている抗癌剤の一例
にヘキサメチルメラミン（ＨＸＭ）がある。

ＨＸＭを経口投与すると吸収が一定せず、血漿中の薬物
濃度が様々となる。＾閣ｅｓ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｃａｎ
ｃｅｒＴｒｅａ±ｗｅｎｔ　Ｒｅｐｏｒｔｓ、　Ｖｏｌ
、　６６、　Ｎｏ、　７．　ｐｐ、１５７９−１５８１
　（Ｊｕｌｙ　１９８２）を参照されたい、ＨＸＭのゲ
ンチシン酸塩及び塩酸塩は、ヒトへの静脈内投与におい
て甚だしい局所刺激を惹起した。ＨＸＭを静脈内投与に
おいて許容可能な調製物に処方する最近の試みは、脂質
エマルジョンに薬物を含有させることに焦点を合わせて
おり、２ｘｇ／ｘ１以上のＨＸＭ濃度が達成されている
。腹腔的処方も、ｑリーｃｅｒ　ＴｒｅａＬｍｅｎｔ　
Ｒｅ　ｏｒｔｓ、　Ｖｏｌｕ＠ｅ　６９．　Ｎｏ、　６
．　ｐｐ。

６５７−６６２　（Ｊｕｎｅ　１９８５）においてＷｉ
ｃｋｅｓ等により検討されている、油エマルジヨンビヒ
クルＩｎｔｒａｌｉ−ｐｉｄ　（Ｃｕｔｔｅｒ　Ｌａｂ
ｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｂｅｒｋｅｌｅｙ、　Ｃａ１ｉ
ｆｏｒ−ｎｉａ）を用いて生成されるような脂質エマル
ジョンに焦点を合わせている。このような処方は、ＨＸ
Ｍの濃度を腫瘍細胞に影響を及ぼすのに適したレベルま
で好ましく高めるが、リン脂質カプセルを有する適当な
大きさの小胞を用いて腫瘍細胞を特異的に標的とする問
題を処理してはいない。上記処方はまた、薬効成分やそ
の他の成分が熱安定性でない場合そのような成分を有す
る調製物に無菌が過を実施し得ないために生じる滅菌の
問題も解決していない。

従って本発明は、非水溶性の医薬を処方して生体に輸送
するための新規な組成物の提供を目的とする。本発明は
その一態様において、ヘキサメチルメラミンを含む抗癌
剤の処方及び輸送のための組成物を提供する。

本発明はまた、医薬を生体に、特に腫瘍細胞に輸送する
ための上記のような組成物を製造、滅菌及び使用する方
法の提供も目的とする。

ル哩二乱１ 本発明は、薬効成分をヒトあるいは動物に投与するのに
適した小胞（ｖｅｓｉｃｌｅｓ）を含有する組Ｉｔ物を
提供する。本発明による組成物は、外側のリン脂質被膜
と内容相（ｅｎｃｌｏｓｅｄ　ｐｈａｓｅ）とから成る
小胞を含有し、前記内容相は、実質的に非水溶性である
薬効成分と脂質トリグリセリド成分とを含む。

小胞は、薬剤に許容可能なキャリア中に分散している。

分散している小胞はほぼ球形であるリン脂質の外側単分
子層を有し、その際リン脂質分子の疎水性尾部は内側の
薬効成分−脂質トリグリセリド相の方を向いていると考
えられる。

好ましい有効成分は抗癌剤ヘキサメチルメラミンである
。ヘキサメチルメラミンと共に用いるうえで好ましいト
リグリセリドは、トリミリストイルグリセロール（トリ
ミリスチン）及びトリラウロイルグリセロール（トリラ
ウリン）である、リン指貫外側被膜は、アルキル鎖中に
１２〜２０個の炭素原子を有する１種以上のリン脂質物
質を含む。有効成分かヘキサメチルメラミンである場合
、上記リン脂質物質はジステアロイルホスファチジルコ
リン及びジステアロイルホスファチジルグリセロールが
好ましい、コレステロールを組成物に付加することも可
能である。組成物の調製は、適当な塩類あるいは単糖類
をベースとするキャリア溶液中で標準的な手続きを用い
て実施し得る。最終組成物の凝集を最小化するべく、水
性キャリアにグリセロールを付加することも可能である
。

々・ましい目　　１の二重 先に述べたように、本発明は、非水溶性の有効成分、特
にヘキサメチルメラミンのような不溶性抗癌剤をリン脂
質小胞内に封じ込めて好ましく輸送することを実現する
。本発明の組成物は、リポソームのような他の輸送ビヒ
クルでは不十分であるような場合に用いられ得る。

ヘキサメチルメラミン（ＨＸＭ）、即ち２．４．６−ト
リス（ジメチルアミノ）−ｓ−トリアジンは、ｔＲ造的
にアルキル化剤トリエチレンメラミンに非常に類似する
抗癌化合物である。ヘキサメチルメラミンの構造は次の
とおりである。

上述のように、ＨＸ　Ｍは、水に溶解しにくい性質によ
って抗癌治療での有用性を損なわれてきた。

本発明に係わる実験の結果、本発明による輸送゛ビヒク
ルが、リン脂質小胞内のＨＸＭのリポソーム組成物の場
合より良好な溶解を実現し得ることが判明した。

本発明の組成物は、横断面が第１図に示したようなもの
である構造を有すると考えられる。輸送ビヒクルはほぼ
球形であり得る。輸送ビヒクルの内側相は、脂質トリア
ジルグリセロール（トリグリセリド）中に溶解した有効
成分を含む。それ故に内側相は実質的に親油性であり、
カプセルのリン脂質単分子層との安定な関係を成立させ
る。カプセル層の外面が親水性であることによって、水
溶性及びｉｎ　ｖｉｖｏ溶解性が得られ、また（生物学
的適合性、有効成分の毒性の隔離、並びに腫瘍細胞の標
的化を含めた）リポソーム構造に関連する他の利点も達
成され得る。

良好な輸送ビヒクルを得るには、適当な脂質トリグリセ
リドを用いなければならない。所与の有効成分は規程か
のトリグリセリドに溶解し得るが、あるいは例えば混合
物のｐＨあるいはイオン強度を変更することによってか
、あるいは第二の脂質可溶性薬剤との錯体化によって可
溶化され得る。それにもかかわらず、所与の有効成分を
溶解させ得る脂質トリグリセリドの総てが安定なリン脂
質エマルジョンに適合し得るとは限らない。例えばＩ・
リバルミチン及びトリステアリンのような完全に飽和し
た長鎖トリグリセリドは加熱されればＨＸＭを溶解させ
るが、冷却すると、試験したリン脂質と共に良好にエマ
ルジョン化し得ない硬い蝋質組成物を形成しがちである
。逆に、トリグリセリドトリオレインの不飽和アルキル
長鎖はリン脂質とのエマルジョン化を実現するが、この
トリグリセリドはＨＸＭを溶解させない。トリアセチン
及びトリラウリンのようなより短い鎖を有するトリグリ
セリドは、ＨＸＭを溶解させに＜＜、かつ試験組成物に
おいて安定なエマルジョンを生成しない。

有効成分がＨＸＭである場合、脂質トリグリセリドとし
てトリミリスチンあるいはトリラウリンを用いることが
好ましい。これらのトリグリセリドは有効成分を溶解さ
せ、かつ安定なエマルジョンを生成し得る。混合アルキ
ル鎖を有するものを含めたその他の適当なトリグリセリ
ドも有用であり得、それらのトリグリセリドは、本発明
の開示に付与された比較的形式的な実験によって確認で
きる。適当なトリグリセリドの選択は当然ながら、有効
成分の種類及び所望濃度と、用いるリン脂質あるいはリ
ン脂質混合物の種類と、組成物の処方によって得られる
混合物のその他の成分の性質とに従属する６従って、本
明細書に開示した、即ち好ましい特別のトリグリセリド
は本発明の範囲を限定せず、むしろ有効であると判明し
たトリグリセリドを例示するものである。

本発明の説明において用いるべき有効成分は普通、水性
媒体に不溶性であるが、あるいは有用な濃度の達成に高
度の可溶化を必要とする１種以上の化合物である。例え
ばＨＸＭに関して、塩類溶液中の遊離薬物の水への溶解
度が、低いもので０．０７０ｘｇ／ｘ１（＆４：Ｃｋｅ
Ｓ　ｅｔ　　ａｌ、、　　Ｃａｎｃｅｒ　　Ｔｒｅａｔ
＋ｏｅｎｔ【〃二頃、　Ｖｏｌｕｍｅ　８９．　Ｎｏ、
　６．　ｐｐ、　８５７−６６２（Ｊｕｎｅ　１９８５
））、高いもので０．２０ｚｙ／ｘｉ’（＾ｍｅｓ　ｅ
ｔａｌ、、　Ｃａｎｃｅｒユｒｅａｔｍｅｎｔ　Ｒｅ　
ｏｒｔｓ、　Ｖｏｌｕｍｅ　６６゜Ｎｏ、　７．　ｐｐ
、　１５７９−１５８１　（Ｊｕｌｙ　１９８２））と
報告されている。望ましい濃度は、ＨＸ’Ｍ含量に関し
て測定して１　、ＯＩＩｇ／ｚｌを上回ろう。

本発明において有用な有効成分は、−ｍに水性媒体に溶
解させにくい薬剤であるが、必ずしもそうである必要は
無い、有効成分をトリグリセリド相に適合させ得、かつ
該有効成分をリン脂質単分子層内に封じ込めることが望
ましい場合、本発明は有用な輸送ビヒクルをもたらし得
る。先に述べたように、有効成分をトリグリセリド可溶
性とするのに、混合物のｐＨあるいはイオン強度の調節
、あるいは有効成分の錯体化などの改変を用いることも
できる。安定なリン脂質小胞の形成を可能にするために
も、上記と同様の処理を実施し得る。

小胞の外側リン脂質被膜は、ホスファチジルコリン及び
ホスファチジルエタノールアミンのような中性リン脂質
と、ホスファチジルグリセロール及びホスファチジルセ
リンのようなイオン性リン脂質とを含む１列のリン脂質
によって構成され得る。好ましいリン脂質は、そのアル
キル側鎖中に１２〜２０個の炭素原子を有する。外層の
成分とじてコレステロールを付加することも可能であり
、このことは多くの場合において好ましい。

有効成分がＨＸＭであり、かつ内側相のトリグリセリド
にトリラウリンが用いられる場合、特に好ましいリン脂
質はジステアロイルホスファチジルコリンである。アニ
オン性のジステアロイルホスファチジルグリセロールも
、優れた組成物をもたらすべく付加され得る。コレステ
ロールは外側被膜の好ましい成分である。このようなＨ
ＸＭ組成物の諸成分のモル比は、好ましくは次のような
ものである。

ＨＸＭ：　　　　　　　　　　　　　　　　１ジステア
ロイルホスフアチジル コリン；　　　　　　　　　　　　　２〜１コレステロ
ール＝　　　　　　　　　　１ジステアロイルホスフア
チジル グリセロール：　　　　　　　　　　Ｏ〜１トリラウリ
ン：　　　　　　　　　　　４エマルジヨン化した輸送
ビヒクルの生成は、例えば塩化ナトリウムの０．９％水
溶液のような塩類溶液中でか、あるいはデキストロース
の５％水溶液あるいはラクトースの９％水溶液のような
単糖類あるいは二糖類溶液中で実施し得る。更に、小胞
の凝集を招く任意の不利な傾向を減少あるいは排除する
べく混合物にグリセロールを約１００＋ｓＭの濃□度で
添加することがしばしば好ましい、小胞の形成は、標準
的な超音波処理技術を用いて実施し得る０本明細書に述
べるＨＸＭ組成物の場合、上記のようにして小胞を形成
する。

溶解しない物質は、遠心分離によって混合物から除去し
得る。その後、例えば注射に用い得ることを確認する５
マイクロメートルフィルタニードルによるが過、並びに
例えば細菌性汚染物質を除去する０、４５及び／または
０．２２マイクロメートルフィルタによる一過を含み得
る精製を実施し得る。最終的な輸送ビヒクル小胞は、好
ましくは１１００ｎを下回り、特に４０〜７５ｎｍの範
囲内である直径を有する。

本発明の輸送ビヒクルの一形態の調製方法及び諸特徴を
、本明細書の本文並びに特許請求の範囲各項に記載した
本発明の範囲を限定しない以下の実施例によって詳述す
る。実施例２では、本発明組成物の一つを、ＨＸＭと共
に用いることに関して試験したリポソーム型輸送ビヒク
ルと比較した。

Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ
、　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　Ｎ５Ｃ−１３８７５、ｌｏｔ　
ｎｕｍｂｅｒ　８７３９６４６からヘキサメチルメラミ
ンを得た。ＨＸＭに関し、規程かの純粋なトリグリセリ
ドへの可溶性を試験し、ＨＸＭがトリブチリン、トリヘ
キサノイン、トリカブリリン、トリラウリン及びトリパ
ルミヂン（Ｓｉｇ＋ｓａ　Ｃｈｅ輪１−ｃａｌ　Ｃｏ、
、　ＳＬ、　Ｌｏｕｉｓ、　Ｎｏ）に高度に溶解性であ
る（５０ｙｇ／ｚＮを上回る）ことを判定した。測定量
のトリグリセリドを加熱して液状とし、測定量のＨＸＭ
、リン脂質（＾ｖａｎｔｉ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ
、　Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ。

ＡＬ）、コレステロール（Ｓｉｇｍａ）、及び最後に水
溶液相を攪拌下に付加することによって、ＨＸ　Ｍのエ
マルジョンを生成した。得られた溶液を不活性雰囲気下
にプローブ型超音波処理装置（Ｓｏｎｉｃｓ　ａｎｄＭ
ａｔｅｒｉａｌｓ、　Ｍｏｄｅｌ　ＶＣＳ−５００，Ｄ
ａｎｂｕｒｙ、　ＣＴ）を用いて超音波処理した。試料
を７５０ｇで１０分間遠心分離し、沈澱物の量を見積も
った。沈′ａ物の総量が出発物質の約２０％より多かっ
た場合は、別の組成物を求めた。好ましくは、沈澱物フ
ラクションは１０％を下回る。

注射に用い得ることを確認するべく５マイクロメートル
フィルタニードルで輸送ビヒクルのエマルジョンを濾過
した後、試料を、０．４５及び／または０６２２マイク
ロメートルマイクロフィルタで一過した。次いで試料を
、全体のＨＸＭ濃度について、並びに何等かのＨＸＭ分
解の痕跡について、シリカゲル６０ブレーｈ　（Ｍｅｒ
ｃｋ）での薄層クロマトグラフィー、高圧液体クロマト
グラフィー、及び／またはＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌ＋ｎｅｒ
　Ｌａｍｄａ　３Ｂ分光計を用いてのＵ■／可視スペク
トル分析によって分析した。

得られた結果を、次の表Ｉにまとめる。

表Ｉは、水溶液中のＨＸＭの有用な濃度が本発明の組成
物を用いることで達成され得ることを示している。好ま
しい組成物では、内側相にトリバルミチンが用いられ、
かつ１００ｍＭのグリセロールが水性相に溶解している
。試験した４種のトリラウリン組成物を最終ＨＸＭ濃度
についてＵＶ／可視スペクトル分析で分析したところ、
出発薬物との非著な差異は認められなかった。薄層クロ
マトグラフィーの結果も、上記４種の組成物においてＨ
Ｘ　Ｍ濃度が変化しないことに合致した。２４時間後に
ＵＶ／可視スペクトル分析を繰り返すと２２７ｎｍで吸
収が低下したことによって、水性ＨＸＭが約３．Ｏｚｇ
７ｍｌから２．２Ｈ／ｘｉに減少したことが示唆される
。その後のスペク１〜ルは、ＨＸ’Ｍ濃度が変化しない
ことに合致した。

特に少量バッチに有用な本発明組成物を処方する別の方
法は、各所望成分をクロロホルムのような有機溶剤に溶
解させること、適量の各クロロホルム溶液同士を混合す
ること、クロロホルムを真空下に蒸発させて、脂質−薬
物−トリグリセリドフィルムを得ること、並びに得られ
たフィルムを上述のような適当な水性相に付加すること
を含む。

比較として、トリグリセリドを一切用いずにＨＸＭをリ
ポソームのリン脂質二重層間領域内に組゛み込むことを
試みた。適当比率のＨＸＭ、リン脂質及びコレステロー
ルをクロロホルムのような有機溶剤に溶解させた（ジス
テアロイルホスファチジルグリセロールは、１：１のメ
タノール：クロロホルムに溶解させた後クロロホルム溶
液と混合した）。溶剤を減圧下に除去して、脂質−薬物
フィルムを得た。得られたフィルムを適当な水性溶剤中
で上述のように混合及び超音波処理して、小さな単ラメ
ラリポソーム小胞を得た。先に述べたのと同様に、グリ
セロール１００ｍＭの付加によって凝集が場合によって
は防止できた。遠心分離後、リポソームをｒ過し、水溶
液中のＨＸＭ濃度について分析した。

この試験の結果から、アニオン性のジステアロイルホス
ファチジルグリセロールの付加は、薬物の脂質相内への
隔離を助長することによって膜に組み込まれるＨＸＭｃ
ｒ）Ｊｉを増大させることが判明した。しかし、その場
合に得られる最終ＨＸ　Ｍ濃度は、少なくとも１．０ｍ
ｇ／ｘｉである所望レベルに達しなかった。このような
結果に基づき、本明細書に開示した方の水溶化ビヒクル
の望ましさが明らかとなる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明による輸送ビヒクルの理論的構造を示す
概略的横断面図である。

Claims (34)

【特許請求の範囲】
1. （１）薬剤に許容可能なキャリア中の小胞を含む有効成
   分の輸送に適した組成物であって、前記小胞が（ａ）ト
   リグリセリドと混合された有効成分と、（ｂ）リン脂質
   物質を含むカプセル層とを含む組成物。
2. （２）カプセル層がコレステロールを含むことを特徴と
   する特許請求の範囲第１項に記載の組成物。
3. （３）有効成分が実質的に非水溶性であることを特徴と
   する特許請求の範囲第１項に記載の組成物。
4. （４）小胞の直径が約３０〜約２００ナノメートルであ
   ることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の組成
   物。
5. （５）リン脂質物質が炭素原子１２〜２０個の長さのア
   ルキル側鎖を有するリン脂質のグループから選択される
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の組成物
   。
6. （６）リン脂質物質がアニオン性リン脂質成分を含むこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第５項に記載の組成物。
7. （７）リン脂質物質が炭素原子１２〜２０個の長さのア
   ルキル側鎖を有するジアルコイルホスファチジルグリセ
   ロール及びジアルコイルホスファチジルコリン化合物の
   混合物を含むことを特徴とする特許請求の範囲第１項に
   記載の組成物。
8. （８）カプセル層がジステアロイルホスファチジルコリ
   ン、ジステアロイルホスファチジルグリセロール及びコ
   レステロールを含むことを特徴とする特許請求の範囲第
   ７項に記載の組成物。
9. （９）キャリアが食塩水、単糖類の水溶液あるいは二糖
   類の水溶液であることを特徴とする特許請求の範囲第１
   項に記載の組成物。
10. （１０）キャリアがグリセロールを含むことを特徴とす
    る特許請求の範囲第１項に記載の組成物。
11. （１１）トリグリセリドが炭素原子１０〜１４個の長さ
    のアルキル側鎖を有するトリグリセリドのグループから
    選択されることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記
    載の組成物。
12. （１２）トリグリセリドがトリラウリンあるいはトリミ
    リスチンを含むことを特徴とする特許請求の範囲第１１
    項に記載の組成物。
13. （１３）薬剤に許容可能なキャリア中の小胞を含むヘキ
    サメチルメラミン有効成分の輸送に適した組成物であっ
    て、前記小胞が（ａ）トリグリセリド物質と混合された
    ヘキサメチルメラミンと、（ｂ）リン脂質物質を含むカ
    プセル層とを含む組成物。
14. （１４）小胞の直径が約３０〜２００ナノメートルであ
    ることを特徴とする特許請求の範囲第１３項に記載の組
    成物。
15. （１５）トリグリセリド物質がトリラウリンあるいはト
    リミリスチンであり、リン脂質物質は炭素原子１２〜２
    ０個の長さのアルキル側鎖を有するリン脂質のグループ
    から選択されることを特徴とする特許請求の範囲第１３
    項に記載の組成物。
16. （１６）リン脂質物質がアニオン性リン脂質成分を含む
    ことを特徴とする特許請求の範囲第１５項に記載の組成
    物。
17. （１７）リン脂質物質が炭素原子１２〜２０個の長さの
    アルキル側鎖を有するジアルコイルホスファチジルグリ
    セロール及びジアルコイルホスファチジルコリン化合物
    の混合物を含むことを特徴とする特許請求の範囲第１３
    項に記載の組成物。
18. （１８）カプセル層がジステアロイルホスファチジルコ
    リン、ジステアロイルホスファチジルグリセロール及び
    コレステロールを含むことを特徴とする特許請求の範囲
    第１７項に記載の組成物。
19. （１９）キャリアがグリセロールを含み、かつ食塩水、
    単糖類の水溶液あるいは二糖類の水溶液であることを特
    徴とする特許請求の範囲第１３項に記載の組成物。
20. （２０）有効成分の輸送に適した組成物を製造する方法
    であって、 （ａ）有効成分をトリグリセリド物質、リン脂質物質並
    びに医薬的に許容可能なキャリアと配合すること、 （ｂ）有効成分を収容した小胞を形成すること、及び （ｃ）得られた組成物から望ましくない物質を除去する
    こと を含む製造方法。
21. （２１）有効成分がヘキサメチルメラミンであることを
    特徴とする特許請求の範囲第２０項に記載の方法。
22. （２２）リン脂質物質が炭素原子１２〜２０個の長さの
    アルキル側鎖を有するリン脂質のグループから選択され
    ることを特徴とする特許請求の範囲第２０項に記載の方
    法。
23. （２３）トリグリセリド物質が炭素原子１０〜１４個の
    長さのアルキル側鎖を有するトリグリセリドのグループ
    から選択されることを特徴とする特許請求の範囲第２０
    項に記載の方法。
24. （２４）小胞を超音波処理で形成することを特徴とする
    特許請求の範囲第２０項に記載の方法。
25. （２５）遠心分離、約５．０マイクロメートル以下のフ
    ィルタでのろ過、約０．４５マイクロメートル以下のフ
    ィルタでのろ過、並びに約０．２２マイクロメートル以
    下のフィルタでのろ過のうちの一つ以上を実施すること
    によって望ましくない物質を除去することを特徴とする
    特許請求の範囲第２０項に記載の方法。
26. （２６）ヘキサメチルメラミン有効成分の輸送に適した
    組成物を製造する方法であって、 （ａ）ヘキサメチルメラミンをトリグリセリド物質、リ
    ン脂質物質並びに医薬的に許容可能なキャリアと配合す
    ること、 （ｂ）ヘキサメチルメラミンを収容した小胞を形成する
    こと、及び （ｃ）得られた組成物から望ましくない物質を除去する
    こと を含む製造方法。
27. （２７）リン脂質物質が炭素原子１２〜２０個の長さの
    アルキル側鎖を有するリン脂質のグループから選択され
    ることを特徴とする特許請求の範囲第２６項に記載の方
    法。
28. （２８）トリグリセリド物質がトリラウリンあるいはト
    リミリスチンを含むことを特徴とする特許請求の範囲第
    ２６項に記載の方法。
29. （２９）１モル分率のヘキサメチルメラミンを、約４モ
    ル分率のトリラウリンあるいはトリミリスチン、約２〜
    １モル分率のジステアロイルホスファチジルコリン、約
    １モル分率のコレステロール、並びに約０〜１モル分率
    のジステアロイルホスファチジルグリセロールと配合す
    ることを特徴とする特許請求の範囲第２６項に記載の方
    法。
30. （３０）キャリアが約１００ｍＭのグリセロールを含む
    ことを特徴とする特許請求の範囲第２６項に記載の方法
    。
31. （３１）小胞を超音波処理で形成することを特徴とする
    特許請求の範囲第２６項に記載の方法。
32. （３２）遠心分離、約５．０マイクロメートル以下のフ
    ィルタでのろ過、約０．４５マイクロメートル以下のフ
    ィルタでのろ過、並びに約０．２２マイクロメートル以
    下のフィルタでのろ過のうちの一つ以上を実施すること
    によって望ましくない物質を除去することを特徴とする
    特許請求の範囲第２６項に記載の方法。
33. （３３）特許請求の範囲第１項または第１３項に記載の
    組成物を複数回非経口投与することを含む人体内の新生
    物腫瘍の治療方法。
34. （３４）投与を静脈注射によって行なうことを特徴とす
    る特許請求の範囲第３３項に記載の方法。