JPS63165759A - 免疫複合体の結合方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 窺」Ｊと１屋 本発明は、液体中で免疫複合体を免疫吸着体および／ま
たは免疫検知体に結合させて、免疫複合体を検出、定量
または単Ｍ／除去する新規な方法に関づる。免疫複合体
の１結合」とは、本明細古においては、このような複合
体の捕）１または検知を意味する。

発明のｆ！景 免疫複合体は疾患との関係で、または、牛体の免疫応答
の調整のためにきわめて重要な役割を果たしていること
から、最近は、各種疾患にぞＩ丁患している患者体内の
免疫複合体を定Ｍする方法の開発がかなりの注目を集め
ている。

免疫複合体は、抗原分子と抗体分子の間の特異的な反応
により、体液中または組織内に形成される。これらの反
応においては、いわゆる補体因Ｔ（Ｃ１〜Ｃ９）も関与
している。これらの補体因子の一部には、ある種の条件
下に活性化されたとき、免疫複合体と結合し、免疫複合
体の検出、定Ｖおよび単離／除去に重要なものがある。

患者は多数の抗原に対して免疫応答を示１ノーことがで
きる。抗原の接近しやずさに応じて、産生した抗体は抗
原と反応し、免疫複合体を形成ｉＪる。

これは本来は、潜在的な病原を患者から除去する向きで
ある。

免疫複合体が活性化され、補体因子と結合すると、生成
した免疫複合体は患者に傷害を与える可能性があり、免
疫複合体疾患が起こる。このような発症を決定する因子
はこれまでに明確にされているわ１ノではないが、必り
１の因子がとくに、抗原と抗体の種類（ＩａＧ、ＩｏＭ
等）、それらの闇のモル比、ならびにその生成速成等で
あることは自明である。さらに、疾患によっては、たと
えば腫瘍の場合、ある種の免疫複合体の存在は、生体の
腫瘍に対する免疫応答の発現を妨害することがある。

免疫複合体の測定方法には様々な方法が知られている。

たとえば、補体結合、プロティン八結合、免疫複合体の
物理学的性質、コングルチニン結合または種々のレレプ
ターに対する結合等に基づく方法がある。

免疫複合体の検出、定量および中１ｍｌ／除去のための
いくつかの方法がすでに発表されている。たとえばＲ，
Ｂｌａｃｋｓｔｏｃｋによる調査報告″’　Ｉｎ　Ｖｉ
ｔｒ。

Ｈｃｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｒ　
Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ＩｍｍｕｎｅＣｏｓｐｌｅｘ
ｃｓ″、　　Ａｍ、Ｃｌ１ｎ、Ｌａｂ、Ｓｃｉ、　　Ｖ
ｏｌ、　　１１　、Ｎｏ。

３、ＤＩ）２６２〜６８．１９８１がある。この論文に
は、Ｗ　＋−１０が編集した１８種類の検出方法も引用
されているが、利用されている方法のほとんどが、有効
な臨床的応用を１１持（るには特異性が低すぎ、小さな
病院中位で使用するには繁雑すぎると指摘されている。

技術的問題とその解決 免疫複合体を定量するだめの公知方法のいくつかは、吐
乳類動物の細胞トのし亡ブタ−へのその結合峰に基づく
ｂのである。これらの細胞は、最す頻繁に使用されるの
はいわゆるＲａｊｉ細胞であるが、組織培養中に保持し
−Ｃおかねばならず、この試験庖実施するためには特殊
な実験室が必要になる。

哺乳類からの抗体は免疫吸着体としても使用される。し
かしながら、この種の抗体には次のような欠点がある。

この抗体はそれ自体が捕乳類からの補体因子を活性化し
、また比較的ヒト抗体に類但していることからこの分析
系を妨害する。免疫複合体の検出系が哺乳類の抗体から
なる場合も、同じ問題が生じる。すなわち、哺乳類動物
の抗体を免疫吸着体または免疫検知体として使用する場
合には、これを修飾してＦａｂフラグメントに切断づる
ことが必要である。これにより、免疫複合体の捕獲また
は検知過程はまた複雑になる。

本発明は、ヒナの抗体が特殊な性質を自し、全く別異の
反応パターンを示すために、哺乳類動物の抗体とは免疫
学的観点において署しく異なることを発見して、完成さ
れた。これは、たとえば、各種の哺乳類動物からの抗体
おＪ、びヒナからの抗体でコーティングしたラテックス
粒子を用いたりウマトイド因子（ＲＦ）の分析試験によ
ってテス］・された。このテストにおいて、ＲＦ陽性血
清はすべての哺乳類動物抗体コーティング粒子と反応し
たのに対し、ヒナの抗体でコーティングした粒子とは反
応しなかった。免疫複合体疾患を有する患賃は高頻度に
高いＲＦ値を示すが、哺乳類動物の抗体を用いたのでは
誤った結果を与える可能性が考えられ、上述の結果はき
わめて重要である。

また、ヒナ抗体は、抗体液ｍ［ＥｌｌｓＡ（酵素連結免
疫吸着定量法）プレート１免疫複合体吸るにＪ３いて酵
素標識検知材料として用いられるプロティンＡまたはプ
ロディンＧと反応性を示さない。

このプロティンＡ１プロテインＧおよびＲＦ囚子との反
応性の欠如から、これらの材料による妨害は考えられず
、また−１！乳類の抗体を使用した場合に比べて誤った
試験結果は回避される。したがって、ヒナ抗体は、哺乳
類抗体に比べ、免疫複合体の吸着体または検知体として
定性的にも定が的にｂｍれている。さらに、ヒナ抗体を
使用した場合には、これがヒト補体因子を活性化しない
ので、補体の活性化が回避される。ｉｎ　　ｖｉｖｏに
おける補体活性化結果の表示に基づく分析においては、
これもΦ人な利点である。分析中にさらに生じる活性化
を回避する必要がない。

水用ａ店において、「免疫吸着体」の飴は固相上の免疫
複合体結合抗体に関して用いられ、たとえば適当な吸着
粒子または表面である。［免疫検知体ｊの５Ｒは、免疫
複合体を証明するための、液相中の抗体に関して使用さ
れる。「免疫複合体Ｊの詔、は、抗体と抗原から形成さ
れる生成物を意味し、複合体がｉｎ　　ｖｉｖｏで産生
されたか、ｔｎ　ｖｉｔｒ。

で生成されたかは問わない。

さらに、トリ抗体は卵から製造することもできるので、
トリ抗体は、簡単な方法で、しかも哺乳類動物中に近生
きれる相当する抗体に比べて通常安価に、人聞生産する
ことが可能である。しかも、哺乳類動物の抗体は、全抗
体を使用りることができず、上述のように最初に修りま
たは切断する必要がある。

このように、トリからの抗体、好ましくはヒナの抗体は
、免疫吸着体および／または免疫検知体として使用する
と、中綿、迅速で、信頼できる捕獲および検知方法を提
供する。これらの抗体は、哺乳類抗体と比較して異なる
組成を有し、したがって使用前に修飾の必要がない。ト
リ抗体はこの分析系を妨害せず、また哺乳類からの補体
因子を結合することもない。

ニワトリからの抗体の製造および躊特については、米用
特許第４，３５７．２７２号ならびに第４、ｂ５０．０
１９号の記載が参考になる。これらの１５清には、この
ような抗体が診断［ｌ的の免疫学的プレバレーシコンに
使用される８述べられているが、免疫複合体の使用につ
いては全く示唆されていない。

１」の説明 水弁用は、免疫吸着体および／または免疫検知体を用い
て、免疫複合体を捕獲または検知し、免疫複合体を検出
、定量または単離／除去するための方法に関する。この
方法において、免疫複合体は、補体因子を粁山して予め
形成された免疫複合体またはｉｎ　　ｖｉｖｏで形成さ
れた複合体であり、免疫吸ｒＩ体または免疫検知体とし
てはトリ抗体を使用することを特徴とする。抗体として
は、］・りの体中（゛産生され、血液または卵から、好
ましくはヒナの血液または卵から単離された抗体を使用
）ることかできる。

本発明はまた、免疫吸着体および／または免疫検知体を
固相または液相中に適当な担体どともに加えてなる組成
物に閏づる。この組成物は、たとえば循環免疫複合体の
ために疾患をイ１ｖる患者で、免疫複合体を検出、定け
または単１ｉｆｉ／除去するための組成物であって、免
疫吸着体または免疫検知体はトリ抗体からなるものであ
る。

免疫複合体を測定するための従来６法は、一般に、放射
能で標識した抗体または抗原を用いるものであった。最
近では、放射性同位元素の代わりに、反応体をある種の
酵素でｅＡ識するいわゆるＥ　Ｌ　Ｉ　ＳＡ法（Ｍ素連
結免疫吸着定量法）による検出がより好ましい方法とし
て提供されている。

抗体、本発明の場合は一般的にヒナ抗体は、固相中に、
アガ［ｌ−ス粒子またはプラスチック（たとえばＨｉｃ
ｒｏｔｉｔｒｅ■プレート、ＥＬＩＳ△ブレー］・）に
結合させて存在させることができる。試験溶液を加える
と、これらの抗体は溶液中に存在する免疫複合体を捕獲
し、ついぐ添加した酵素標識抗体またはバクテリア５ｔ
ａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓからのプロテ
ィンＡの酵素標識体にこれを結合させると、検出できる
。初期の公知方法は哺乳類抗体への結合によっていたが
、その方法では上述のような問題が生じる。

本発明のきわめてイｆ望な応用には、腫瘍患者または免
疫複合体疾患患者の治療に際してのいわゆる体外免疫吸
着療法におけるトリ抗体の使用がある。すなわち、患者
の血漿をある時間扱き取り、免疫複合体を捕獲する装置
を通過させ、ついで免疫複合体含量の低下した血漿を患
者に戻す。この方法で、免疫複合体疾患を緩和すること
ができる。

また、生体自体が腫瘍を攻撃する能力を阻害する傷害性
免疫複合体が除去されたので、腫瘍の退行が生じる。こ
の治療にトリ抗体を使用することにより、免疫複合体の
捕獲に関する選択性の改良を達成することが可能である
。これに加えて、患者の補体系は活性化されず、有害な
生物学的活性成分が放出されたり、患者に戻されたりす
ることがない。

発明の具現 本発明の方法は、特許請求の範囲に詳述したようにして
行われる。好ましい、非限定的な例として、以１この方
法を挙げることができる（第１ａ−１ｄ図参照）。

１）　ヒナからの抗体１　（ａＣ３、ａＣｌ　ａまたは
ａＣ４）をＨｉｃｒｏｔｉｔｒｅ■プレート２に適用し
て吸着させる（第１ａ図参照）。

２）　免疫複合体３を含有するサンプルを加える（第１
ｂ図参照）。

３）　酵素標識特異的抗体物ｙ！（検知体）４を加える
（第１Ｃ図参照）。

４）結合した酵素標識物質の比色分析による検出を行う
と、存在する免疫複合体の晴の測定値が得られる（第１
ｄ図参照）。発色溶液５を加える。

第１ｄ図で白色の四角は酵素によって弯換されなかった
部分を、黒色の四角は酵素によって着色した部分を示す
、、ついで分光光度計で読み取りを行う。

別の好ましい、非限定的例においては、本発明の方法は
次のように行われる。

１）　ヒナからの抗体（ａＣ３またはａｃｌｃｎを架橋
アガロースの粒子にカップリングさせる。

２）このアガし１−ス粒子をカラムに充填する。

３）免疫複合体を含量１４るサンプルをカラムに適用し
、ついぐ洗浄する。

４）抗体に結合した免疫複合体を、カラムの溶出により
放出させる。

５）　溶出した物質を凍結屹燥し、５ＤＳ−ポリアクリ
ルアミドゲル１電気泳動によって分離し、存在する免疫
複合体を検出し、特性づける。

体外循環療法における免疫複合体の捕獲に際してもこの
例の変法が使用できる（第２図参照）。

この場合、血液は患者２から導管１を通して広き取られ
る。３で白球が導管４に分離され、残りの血漿は導管５
に導かれ、たとえばヒナ抗体がカップリングされた架橋
アカ１１−スが充填されにカラム６に送られる。ついで
、免疫複合体含量が低■した血漿を分離したｒｆｉ１球
と７で合し、導管８を通して患者に再循環する。

例１ １）アフィニティー精製ヒナ抗−ヒト Ｃ３抗体を５ｅｐｈａｒｏｓｅ　ｏＣＬ　−４Ｂ　（Ｐ
ｈａｒｍａｃｉａ　。

１１ｐｐｓａｌａ、　Ｓｗｅｄｅｎ　）にＢｒＣＮ法で
カップリングさせる。

２）　この５ｅｐｈａｒｏｓｅ　ｏ粒子ラフＪ　−ｙ　
ム１．：　充Ｈシ、０、ＩＭ　　ＨＡｃ　（Ｆｋｌ酸）
ｒ洗浄し、Ｐ　Ｂ　Ｓ（０，１５Ｍ　　　ＮａＣｌ　：
０．０２ＭＮａＨＰＯ４；０．０２％Ｎ　ａ　Ｎ３、ｐ
Ｈ＝７．２）中に平衡化する。

３）サンプルをカラムに適用し、ついでカラムをＰ　［
Ｉ　Ｓで結合していない蛋白質がずべて洗い流されるま
で洗浄する。

４）抗体に結合した蛋白質を、カラムを０．１ＭｔｌＡ
ｃで溶出することにより放出させる。

５）　　ＨＡｃで溶出した物質を凍結乾燥し、５ＤＳ−
ポリアクリルアミドゲル上電気法帖によって分離し、溶
出蛋白質を同定するために銀で発色させる。

正常対象、ならびに原発性ＪＵｄ性肝硬変（ＰＢＣ）　
、全身性ループス］ニリテマトーデス（Ｓ　Ｌ　Ｅ　）
　ｉ＋３よびｍ性関節すウマヂ（ＲΔ）の患者からの血
清を分析しｌ、：。これらの患者のパターンは正常対染
にみられたパターンとは？ｉ！なっている。１Ｆ常対象
ぐは、正常Ｃ３フラグメントのみがルΣめられたが、Ｐ
　Ｅ３ＣＪＪｉ者ではざらに大Ｓｄの蛋白質バンドが見
出され、これはまだ同定されていない。

鰺ス １）マイクロＥＩＩ４’；△プレート（Ｄｙｎａｔｃｃ
ｈ８１２！ＩＡ）を、アフィニティー精製ヒナ抗−ヒト
Ｃ１ｑ　　２０μりを０．０２Ｍ Ｎａ１ｌ　　ｐｏ４　（ｐＩｌ＝７．５）ｌＩＩＩ中に
含有するｉ＆　２００μｌで」−ティングする。このプ
レートを３７℃で２時間イン−１コベートし、ついでＮ
ａＣＪ−１−ｗｅｅｎ　（０，９％Ｎ　ａ　に　１　：
０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０：０．０２％ＮａＮ５）で３
回洗浄する。プレート中の残部は次に、０．０２Ｍ　　
ＮａＨＳｏ、ｓ　　（＋）ｌｌ＝７．５）ｌＩｄ中０．
１■オバルブミンの液で′ａＭする。プレーｉ・を３７
℃で２時間インキュベートし、ＮａＣＪ−Ｔｗｅｅｎで
３回洗浄する。

２）ツべてのウェルにＦ’Ｆ３Ｓ１５０μＪを加える。

次に、ウェルに血清サンプルまたは標準液（正常血清に
希釈した熱凝集１（ＪＧ）５０μオを加える。ＰＢＳ１
５０μｌしか含まないウェルにはさらにＰＢＳ５０μオ
を加えて、すべてのつ■ルを２００μｌにする。プレー
トを２時間３７℃でイン１ユベートしたのち、ＮａＣ１
−丁ｗｅｅｎで３回洗浄する。

３）　　ＰＯ３中に１：２０００に希釈したプロティン
Δ−アルカリホスファターゼ抱合体２００μｌをすべて
のウールに加え、プレートを２時間３７℃でインキュベ
ートし、ついでＮａＣ１−ｒｗｅｅｎで３回洗浄する。

４）すべてのウェルに発色液［１Ｍジェタノールアミン
１〆中Ｓ−１０４（Ｓｉｕａ　）１ａｆｆ：０．５ｍＨ
ＭｇＧＩ　　；ｐＨ−９，８）２００μ１を加え、プレ
ートを′！ｉ［、暗所において３０分間イン４コベート
する。５Ｍ　　ＮａＯＨ５０μオで発色を停止させ、プ
レートをＴｉｔａｒｔｅｋ１４ｕｌｔｉｓｋａｎ中ｒｘ
定１７）。

工程１）におけるａｃ１ｑ抗体は、ヒナ抗−ヒトＣ３ま
たはヒナ抗−ヒト０４に置き換えてもよい。

工程３においては、プ［１ティンＡ抱合体に代えてヒナ
抗−ヒト［ａＧ−アルカリホスファターぜ抱合体を使用
することもできる。

以下の表には、上述の方法に従い、ａＣ３Ｅ　Ｌ　Ｉ　
Ｓ八で試験したベル麻痺患者について行った一連の試験
の結果を掲げる。表中、カラム１には患者？Ｉ号を示す
。ｒＡＪは急性サン１ル（＠者の発病時に採取）、ｒＫ
Ｊは回復期サンプル（発病から数週間侵、病院での反復
治ＷＡ時に採取）を意味する。カラム２は得られたＥＬ
ＩＳΔ１１を、標準として用いた熱凝集１ｇＧのμｇ数
にｖ１操したｂのである。正常値のし限は２．０ルｇ／
〆にセットしたが、ｔ１療な対象でこの限界偵を越えた
例はイ【かったことは特記に値する。

上述の一連の試験にかう、本発明の方法によれば、迅速
かつ簡単な方法で、患者血清中のきわめて少量の免疫複
合体を定性的および足間的に分析できることが明らかに
された。少量のサンプル、迅速かつ簡単な分析が可能な
ことは、疾患の連続的な診断および評価に、また疾患の
Ｍ和および治癒を調べる手段として、とくに価値がある
。

２Ｋ　　　　　　　　　　　　３．６２　　　　　　　
　　　　４・３Δ　　　　　　　　　　　１．７４　　
　　　　　　　　　−３Ｋ　　　　　　　　　　　　２
．２６　　　　　　　　　　　　＋４Ｋ　　　　　　　
　　　　　１．９６　　　　　　　　　　　−５Ｋ　　
　　　　　　　　　　２．６４　　　　　　　　　　　
　＋７Δ　　　　　　　　　　　１．７／Ｉ　　　　　
　　　　　　　−８Ａ　　　　　　　　　　　　２．７
１　　　　　　　　　　　　　＋１４Δ　〉５０十 ２３Δ　　　　　　　　　　　７．１２　　　　　　　
　　　　　＋２９Δ　　　　　　　　　　　１．９６　
　　　　　　　　　　−３３Ａ　　　　　　　　　　　
　１．６６　　　　　　　　　　　−３４Ｋ　　　　　
　　　　　　　２．４９　　　　　　　　　　　−＋ご
３５Ｋ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
３．　３２　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　−ト３７Δ　　　　　　　　　　　１．０５　　　　
　　　　　　　−３３９Ｋ　　　　　　　　　　　　１
．５８　　　　　　　　　　　−／ＩＩＫ　　　　　　
　　　　　　２．７９　　　　　　　　　　　−１４３
Δ３．４７　＋ ／１３Ｋ　　　　　　　　　　　　２．４２　　　　　
　　　　　　−＋４４Δ　　　　　　　　　　　２．４
２　　　　　　　　　　　　＋／１４Ｋ　　　　　　　
　　　　　４．０８　　　　　　　　　　　　＋４５Ａ
　　　　　　　　　　　　３．４０　　　　　　　　　
　　−１／Ｉ６△　　　　　　　　　　１５．７　　　
　　　　　　　　　　＋第　１　表（つづき） ４７Δ１４．６　＋ ４８△　　　　　　　　　２０．３　　　　　　　　　
　　＋４８Ｋ　　　　　　　　　２１．７　　　　　　
　　　　　＋４９△　　　　　　　　　　１．６５　　
　　　　　　　−４９Ｋ　　　　　　　　　　１．３２
　　　　　　　　　−５１Δ２．３５　＋ ５１Ｋ　　　　　　　　　　２．０５　　　　　　　　
　　＋５２△　　　　　　　　　３．２８　　　　　　
　　　　＋５２Ｋ　　　　　　　　　　３．６９　　　
　　　　　　　＋５３Ａ　　　　　　　　　　２．３５
　　　　　　　　　　＋５４△　　　　　　　　　１．
３２　　　　　　　　　−５４Ｋ　　　　　　　　　　
２．８７　　　　　　　　　　＋５５△　　　　　　　
　　１．８／Ｉ　　　　　　　　　　　−５６Δ　　　
　　　　　　１．８４　　　　　　　　　−５６Ｋ　　
　　　　　　　　２．３５　　　　　　　　　　＋５７
Ａ　　　　　　　　　　１．５４　　　　　　　　　−
５７Ｋ　　　　　　　　　　１．４４　　　　　　　　
　　−５８Ａ　　　　　　　　　　３．５９　　　　　
　　　　　＋５８Ｋ　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　３．３９　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　−）５９Ａ　　　　　　　　　　１．７５　　
　　　　　　　−６１Δ　　　　　　　　　３．６９　
　　　　　　　　　＋６１Ｋ　　　　　　　　　　２．
６６　　　　　　　　　４−６３Ａ　　　　　　　　　
２゜５６　　　　　　　　　＋７１Δ　　　　　　　　
　　　１．３３　　　　　　　　　　　−７１Ｋ　　　
　　　　　　　　　Ｏ，８２−７４Δ６．４７　＋ ７４Ｋ　　　　　　　　　　　１０．０　　　　　　　
　　　　　　＋７５Ｋ　　　　　　　　　　　　０．９
３３　　　　　　　　　　−７６△　　　　　　　　　
　　４．００　　　　　　　　　　　−１−７６Ｋ　　
　　　　　　　　　　４．１０　　　　　　　　　　　
　＋７８△　　　　　　　　　　　１．６６　　　　　
　　　　　　−７８Ｋ　　　　　　　　　　　１゜８８
　　　　　　　　　　−８０Ａ　　　　　　　　　　　
　１．５０　　　　　　　　　　　−８２△　　　　　
　　　　　　２．１３　　　　　　　　　　　　＋８２
Ｋ　２．２７　＋ ８３Ｋ　　　　　　　　　　　　１．９６　　　　　　
　　　　　−８４Ａ　　　　　　　　　　　　０．８７
　　　　　　　　　　　−８４Ｋ　　　　　　　　　　
　　Ｏ，７ｈ　　　　　　　　　　　　−８５Ｋ　　　
　　　　　　　　　Ｏ，４３−８６Δ２．９４　＋ ８６Ｋ　２．３４　＋ ８８八　　　　　　　　　　　〇、４８　　　　　　　
　　　　−８８Ｋ　　　　　　　　　　　　０．４５　
　　　　　　　　　−８９Δ　　　　　　　　　　　１
．１２　　　　　　　　　　　−９０Ｋ　　　　　　　
　　　　　１．４４　　　　　　　　　　　−９３Ｋ　
　　　　　　　　　　　Ｏ，４１−９４へ　　　　　　
　　　　　２．０２　　　　　　　　　　　　＋９５八
　　　　　　　　　　　〇、１６　　　　　　　　　　
　−８０Ｋ　　　　　　　　　　　　１．９５　　　　
　　　　　　　−１　　　　　　　　　　　　０、９８
　　　　　　　　　　　−２　　　　　　　　　　　　
１．０２　　　　　　　　　　　−３　　　　　　　　
　　　　　１．０６　　　　　　　　　　　−４　　　
　　　　　　　　　　１、　１８　　　　　　　　　　
　−５　　　　　　　　　　　　　１．４８　　　　　
　　　　　　　−６　　　　　　　　　　　　０．７２
　　　　　　　　　　　−−７　　　　　　　　　　　
１．６２　　　　　　　　　　−８　　　　　　　　　
　　　　１．１２　　　　　　　　　　　−９　　　　
　　　　　　　　０．５６　　　　　　　　　　　−１
０　　　　　　　　　　　　０．９２　　　　　　　　
　　　−１１　　　　　　　　　　　　０．６６　　　
　　　　　　　　−１２　　　　　　　　　　　　０．
６２　　　　　　　　　　　−１３　　　　　　　　　
　　　０．８０　　　　　　　　　　　−１４　　　　
　　　　　　　　０．７０　　　　　　　　　　　−１
５　　　　　　　　　　　　　１．６　　　　　　　　
　　　　−１６　　　　　　　　　　　　０．６４　　
　　　　　　　　　−１７　　　　　　　　　　　　　
１．９６　　　　　　　　　　　−

【図面の簡単な説明】

第１８−ｄ図は、本発明の免疫複合体の捕獲よｌζは検
知方法の実施態様の一例を図式的に示したちのぐあり、
第２図は、本発明の方法を体外免疫吸着療法として応用
した一例を図式的に示したものである。 代押入　浅　　村　　　　皓 昭和６２年１２月　ユ日

Claims (13)

【特許請求の範囲】
1. （１）免疫吸着体および／または免疫検知体を用いて免
   疫複合体を捕獲または検知する方法において、免疫複合
   体は補体因子を経由して予め形成させた免疫複合体また
   は￥ｉｎ￥　￥ｖｉｖｏ￥で形成された免疫複合体であ
   り、免疫吸着体または免疫検知体としてトリ抗体を用い
   ることを特徴とする方法。
2. （２）トリ抗体はトリの体内で産生された抗体である特
   許請求の範囲第１項に記載の方法。
3. （３）トリ抗体はトリからの卵抗体である特許請求の範
   囲第１項に記載の方法。
4. （４）トリ抗体はヒナの体内で産生された抗体である特
   許請求の範囲第１項および第２項のいずれかに記載の方
   法。
5. （５）トリ抗体はヒナからの卵抗体である特許請求の範
   囲第１項および第３項のいずれかに記載の方法。
6. （６）特許請求の範囲第１項から第５項までに記載した
   免疫吸着体による免疫複合体の捕獲方法において、免疫
   複合体は固相上のトリ抗体によって捕獲される方法。
7. （７）固相上のトリ抗体による免疫複合体の捕獲は、プ
   ラスチックス、アクリルアミドおよびポリサッカライド
   のようなポリマー上で実施する特許請求の範囲第６項に
   記載の方法。
8. （８）特許請求の範囲第１項から第５項までに記載した
   免疫検知体による免疫複合体の検知方法において、検知
   は液相中のトリ抗体からなる免疫検知体を用いて実施す
   る方法。
9. （９）免疫複合体は、複合体に含まれる抗原、複合体に
   含まれる抗体または複合体に含まれる補体因子に対する
   トリ抗体によって捕獲される特許請求の範囲第１項から
   第８項までのいずれかに記載の方法。
10. （１０）免疫複合体は補体因子に対するトリ抗体によっ
    て捕獲される特許請求の範囲第１項から第９項までのい
    ずれかに記載の方法。
11. （１１）免疫複合体は補体因子Ｃ３、Ｃ１ｑまたはＣ４
    に対するトリ抗体によって捕獲される特許請求の範囲第
    １項から第１０項までのいずれかに記載の方法。
12. （１２）免疫複合体を含有する液体中の免疫複合体を捕
    獲または検知するための、特許請求の範囲第１項から第
    １１項までに記載の方法におけるトリ抗体の使用。
13. （１３）循環免疫複合体を有する固体中の免疫複合体を
    捕獲または検知するために、特許請求の範囲第１項から
    第１１項までに記載の方法に使用する組成物であり、ポ
    リマー材料のような固相または液相中の適当な担体と結
    合した免疫吸着体または免疫検知体からなる組成物にお
    いて、免疫吸着体または免疫検知体はトリ抗体である組
    成物。