JPS6315150A - 生菌数測定装置 - Google Patents
生菌数測定装置Info
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- JPS6315150A JPS6315150A JP61158756A JP15875686A JPS6315150A JP S6315150 A JPS6315150 A JP S6315150A JP 61158756 A JP61158756 A JP 61158756A JP 15875686 A JP15875686 A JP 15875686A JP S6315150 A JPS6315150 A JP S6315150A
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Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
■８発明の背景
技術分野
本発明は微生物の生菌数の測定方法および測定装置に関
する。
する。
本発明の方法および装置は例えば尿路感染症の細菌検査
において右利に使用することができ、また細菌の薬剤感
受性試験や同定試験にも応用することができる。
において右利に使用することができ、また細菌の薬剤感
受性試験や同定試験にも応用することができる。
先行技術および問題点
従来試料溶液中の微生物の生菌数を測定する方法として
、生菌の酸素吸収串を酸素・ポルを用いて相当する電気
聞く電流伯もしくは電位値）として測定し、該電気聞か
ら生菌数を直接測定するブノ法が知られている（特開昭
５６−１４０８９８号公報）。この方法によれば、全て
の微生物含有液中の微生物の生菌数の測定を短ｒ＋間で
簡便に行うことができる。しかしながら、この方法にお
いては測定中に空気中の酸素が試料溶液に溶解し、測定
誤差を生じるという問題があった。
、生菌の酸素吸収串を酸素・ポルを用いて相当する電気
聞く電流伯もしくは電位値）として測定し、該電気聞か
ら生菌数を直接測定するブノ法が知られている（特開昭
５６−１４０８９８号公報）。この方法によれば、全て
の微生物含有液中の微生物の生菌数の測定を短ｒ＋間で
簡便に行うことができる。しかしながら、この方法にお
いては測定中に空気中の酸素が試料溶液に溶解し、測定
誤差を生じるという問題があった。
■８発明の目的
本発明は試料澄液中の微生物の生菌数を短時間で簡単に
、しかも正確に測定することが可能な方法および装りを
提供することを目的とするものであり、かかる本発明の
目的は下記の構成によって達成される。
、しかも正確に測定することが可能な方法および装りを
提供することを目的とするものであり、かかる本発明の
目的は下記の構成によって達成される。
（１）微生物を含有する試料溶液中の溶存酸素の減少量
を酸素電極を用いて測定することにより試料中の微生物
の生菌数を測定する方法において、溶存酸素の減少量の
測定を試料溶液を容器内に密閉した状態で行うことを特
徴とする生菌数の測定方法。
を酸素電極を用いて測定することにより試料中の微生物
の生菌数を測定する方法において、溶存酸素の減少量の
測定を試料溶液を容器内に密閉した状態で行うことを特
徴とする生菌数の測定方法。
（２）試料溶液が微生物の代謝活動に必要な一定謂度の
栄養源を含む第１項記載の測定方法。
栄養源を含む第１項記載の測定方法。
（３）酸素電極がクラーク型酸素電極である第１項また
は第２項記載の測定方法。
は第２項記載の測定方法。
（４）有底管と、これに気密に嵌入可能でかつ先端に酸
素電極を備えたプランジャからなり、該プランジャに空
気抜ぎ手段を設けてなる生菌数測定装置。
素電極を備えたプランジャからなり、該プランジャに空
気抜ぎ手段を設けてなる生菌数測定装置。
（５）前記酸素電極がクラーク型電極である第４項記載
の生菌数測定装置。
の生菌数測定装置。
（６）前記空気抜き手段が前記プランジＡνの外周面の
下端から上端に達するスリットである第４項記載の生菌
数測定装置。
下端から上端に達するスリットである第４項記載の生菌
数測定装置。
■１発明の詳細な説明
本発明の方法は空気中の酸素が試料溶液中に溶は込まな
いように試料溶液を所定の容器内に密閉した状態で試料
溶液中の酸素の減少量を測定して溶液試料中の生菌数を
測定することに特徴を有するものであり、密閉状態の条
件以外は前述した従来の測定方法と同様にして実施され
る。
いように試料溶液を所定の容器内に密閉した状態で試料
溶液中の酸素の減少量を測定して溶液試料中の生菌数を
測定することに特徴を有するものであり、密閉状態の条
件以外は前述した従来の測定方法と同様にして実施され
る。
即ち、本発明において微生物の生菌数とは細菌、醇母等
では微生物の生菌体数を意味し、放線菌等１つの細胞よ
り分岐する微生物においては微生物の活性部位数を意味
する。
では微生物の生菌体数を意味し、放線菌等１つの細胞よ
り分岐する微生物においては微生物の活性部位数を意味
する。
本発明によれば全ての微生物含有液中の微生物の生菌数
の測定が可能であり、例えば尿等の体液、培養液、菌懸
濁液、液状食品（牛乳、乳酸醗酵飲料等）の中の生菌数
を測定することができる。微生物のＦＩＪ素消￥！！ｔ
ｍを測定するためには微生物が代謝活動を行ない、好気
的に栄養源を分解する必要があるので、試料溶液は栄養
度の高いもの、例えば尿、プレイン・ハート・インフュ
ージョン培地等が好ましい。また測定前の溶存酸素が多
い程その減少量を測定しやすいので試料中の溶存酸素濃
度を飽和状態にしておくのも好ましい。酸素′Ｑｒｆ１
は酸Ｒ電極、好ましくはクラーク型酸素電極を用いて測
定されるので、スターラーによって試料溶液中の酸素が
一様になるように撹拌する。スターラーの回転数は特定
するものではないが、測定中に変化すると微生物の代謝
活性に影響を与えるので一定にしておくことが必要であ
る。
の測定が可能であり、例えば尿等の体液、培養液、菌懸
濁液、液状食品（牛乳、乳酸醗酵飲料等）の中の生菌数
を測定することができる。微生物のＦＩＪ素消￥！！ｔ
ｍを測定するためには微生物が代謝活動を行ない、好気
的に栄養源を分解する必要があるので、試料溶液は栄養
度の高いもの、例えば尿、プレイン・ハート・インフュ
ージョン培地等が好ましい。また測定前の溶存酸素が多
い程その減少量を測定しやすいので試料中の溶存酸素濃
度を飽和状態にしておくのも好ましい。酸素′Ｑｒｆ１
は酸Ｒ電極、好ましくはクラーク型酸素電極を用いて測
定されるので、スターラーによって試料溶液中の酸素が
一様になるように撹拌する。スターラーの回転数は特定
するものではないが、測定中に変化すると微生物の代謝
活性に影響を与えるので一定にしておくことが必要であ
る。
本発明の方法においては、上記の測定を空気中の酸素が
試料溶液中に溶解しないような密閉状態で行うことが必
要である。このような測定は、例えば有底管とこれに気
密に嵌入可能でかつ先端に酸素電極を備えたプランジャ
からなり、該プランジャに空気抜き手段を設けてなる本
発明の生菌数測定装置を使用することによって好適に実
施される。測定に際しては上記有底管に試料溶液を入れ
、酸素電極プランジャを挿入する。その際有底管内の空
気は上記スリットを通って空気中へ汰ける。
試料溶液中に溶解しないような密閉状態で行うことが必
要である。このような測定は、例えば有底管とこれに気
密に嵌入可能でかつ先端に酸素電極を備えたプランジャ
からなり、該プランジャに空気抜き手段を設けてなる本
発明の生菌数測定装置を使用することによって好適に実
施される。測定に際しては上記有底管に試料溶液を入れ
、酸素電極プランジャを挿入する。その際有底管内の空
気は上記スリットを通って空気中へ汰ける。
該装置を恒温槽に入れ、スターラーで試料溶液を撹拌し
つつ試料溶液の溶存酸素を経時的に測定する。酸素の減
少量から試料溶液中の生菌数を求めることができる。細
菌においては菌種間に酸素消費速度差があまりみられな
いので、酸素消費速度から生菌数を求めることかできる
。一方、菌数を求めたい試料とともに、同じ溶液で１０
倍に希釈した試料を対照として酸素消費岳を測定し、そ
の速度の差から生菌数を求めることができる。本発明の
方法により１０４〜１０８個の範囲の生菌数を求めるこ
とができる。尿路感染症は尿検体中に細菌が１０５個以
上存在するかどうかが基準とされているので、本発明の
方法は特にこのような細菌検査に好適である。
つつ試料溶液の溶存酸素を経時的に測定する。酸素の減
少量から試料溶液中の生菌数を求めることができる。細
菌においては菌種間に酸素消費速度差があまりみられな
いので、酸素消費速度から生菌数を求めることかできる
。一方、菌数を求めたい試料とともに、同じ溶液で１０
倍に希釈した試料を対照として酸素消費岳を測定し、そ
の速度の差から生菌数を求めることができる。本発明の
方法により１０４〜１０８個の範囲の生菌数を求めるこ
とができる。尿路感染症は尿検体中に細菌が１０５個以
上存在するかどうかが基準とされているので、本発明の
方法は特にこのような細菌検査に好適である。
次に実施例を示して本発明をさらに具体的に説明する。
実 施 例
１、 エシェリキア・ｍｌす（Ｅｓｈｅｒｉｃｈｉａ
ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ２５９２２を血液寒天平板（クリ
メディア二日清化学）に画線し、３７℃で１晩培養する
。Ｐｉ養後、平板上に形成されたコロニーの１部（数コ
ロニー）を感受性液体培地（米研化学）約１０ｄに懸濁
し、３７℃でさらに１晩静置培養する。培養後、培養に
使用したものと同じ感受性液体培地でこの試料を１０倍
ずつ４段階希釈を行ない、そわぞれを測定用試料とする
（原液を含めて５つの試料が出来る）。
ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ２５９２２を血液寒天平板（クリ
メディア二日清化学）に画線し、３７℃で１晩培養する
。Ｐｉ養後、平板上に形成されたコロニーの１部（数コ
ロニー）を感受性液体培地（米研化学）約１０ｄに懸濁
し、３７℃でさらに１晩静置培養する。培養後、培養に
使用したものと同じ感受性液体培地でこの試料を１０倍
ずつ４段階希釈を行ない、そわぞれを測定用試料とする
（原液を含めて５つの試料が出来る）。
２、 上記試料中の菌数を第１図に示す本発明の測定ｖ
ｔ置を用いて測定する。測定用試験管１にスターラーバ
−２を入れ１で調整した試料４〆を加える。この試験管
に、試験管とすり合わせになった棒状のプランジャ３を
上部から挿入し、底面が液面ど接するまで入れる。この
プランジャの中心にはクラーク型電極４（米国、イエロ
ー・スプリング・インストルメント社製）が装着されて
おり、外壁には試験管中の空気を外へ出すためのスリッ
ト５が入っている。この状態で試料溶液７は密閉状態（
スリットの部分の：ｊモ差は問題とならない）となる。
ｔ置を用いて測定する。測定用試験管１にスターラーバ
−２を入れ１で調整した試料４〆を加える。この試験管
に、試験管とすり合わせになった棒状のプランジャ３を
上部から挿入し、底面が液面ど接するまで入れる。この
プランジャの中心にはクラーク型電極４（米国、イエロ
ー・スプリング・インストルメント社製）が装着されて
おり、外壁には試験管中の空気を外へ出すためのスリッ
ト５が入っている。この状態で試料溶液７は密閉状態（
スリットの部分の：ｊモ差は問題とならない）となる。
３、 プランジャ３を入れた試験管１をスターラー付き
の恒温槽６に入れ３１℃に保温する。クラーク型電極は
専用のアンプ（生物用酸素モニター：ＹＳＩ（米国、イ
エロー・スプリング・インストルメント社製）他、電極
、プランジャ、試験管、スターラーバーも同じ）、さら
にはペンレコーダ（理化電機）につながっている。
の恒温槽６に入れ３１℃に保温する。クラーク型電極は
専用のアンプ（生物用酸素モニター：ＹＳＩ（米国、イ
エロー・スプリング・インストルメント社製）他、電極
、プランジャ、試験管、スターラーバーも同じ）、さら
にはペンレコーダ（理化電機）につながっている。
４００ｒｐｍでスターラーを回転させ、Ｒ初の溶存酸素
量を１００％として測定を開始する。これら１〜３の一
連の操作は他の雑菌が侵入しないように無菌操作で行な
い使用器具等も滅菌したものを用いる。
量を１００％として測定を開始する。これら１〜３の一
連の操作は他の雑菌が侵入しないように無菌操作で行な
い使用器具等も滅菌したものを用いる。
第２図に結果を示す。横軸は測定時間、縦軸は溶存酸素
ｍを、図中の数値（１０８，１０７等）は試料中の菌濃
度を表わす。この菌濃度は測定と同時に平板混釈法で測
定し算出したものである。表１は第２図から１分あたり
の相対酸素消費囚を算出したものである。
ｍを、図中の数値（１０８，１０７等）は試料中の菌濃
度を表わす。この菌濃度は測定と同時に平板混釈法で測
定し算出したものである。表１は第２図から１分あたり
の相対酸素消費囚を算出したものである。
表 １
菌 数 酸素消費徂（％／ｍ１ｎ） 相対値１０
４０、７２ １ １０” ０．８５ １．１８
１０６１．０６ １．４７ １０７２．９２ ４．０６ １０” １９．３５ ２６．９０
次に比較のため溶存酸素の減少量の測定を開放状態で行
う以外は上記実施例と同一の条件で菌数の測定を行った
。結果を第３図および表２に示す。
４０、７２ １ １０” ０．８５ １．１８
１０６１．０６ １．４７ １０７２．９２ ４．０６ １０” １９．３５ ２６．９０
次に比較のため溶存酸素の減少量の測定を開放状態で行
う以外は上記実施例と同一の条件で菌数の測定を行った
。結果を第３図および表２に示す。
表 ２
菌 数 酸素消費爾（％／ｍ１ｎ） 相対値１０
’ ０．３３ １１０５０．
３３ １ １０６０、３３ １ １０１０．４５ １．３６ １０８２、６５ ８．０３ 表１および表２における酸素消費良（％／ｍ１ｎ）は測
定開始時から２０分子。１における１分間）とりの平均
酸素減少量を百分率で表わしたものである。
’ ０．３３ １１０５０．
３３ １ １０６０、３３ １ １０１０．４５ １．３６ １０８２、６５ ８．０３ 表１および表２における酸素消費良（％／ｍ１ｎ）は測
定開始時から２０分子。１における１分間）とりの平均
酸素減少量を百分率で表わしたものである。
エシェリキア・コリの分裂は３７℃では２０分間に１度
であるから上記の測定期間中は菌数は一定とみることが
できる。相対値は菌数１０４のときの酸素消費量を１と
した場合の各菌数におけるＰＩｊ、素消費伍の比を表わ
す。表２において、菌数１０５および１０６における相
対値は１であるが、これは菌数が１０’ 、 １０５ま
たは１０６であっても酸素量ｎ」は変らず、従ってこの
範囲の菌数を開放状態で測定することは不可能であるこ
とを意味している。これに対して密閉状態で測定する本
発明の方法においては１０４〜１０６の範囲の菌数も測
定することが可能である。
であるから上記の測定期間中は菌数は一定とみることが
できる。相対値は菌数１０４のときの酸素消費量を１と
した場合の各菌数におけるＰＩｊ、素消費伍の比を表わ
す。表２において、菌数１０５および１０６における相
対値は１であるが、これは菌数が１０’ 、 １０５ま
たは１０６であっても酸素量ｎ」は変らず、従ってこの
範囲の菌数を開放状態で測定することは不可能であるこ
とを意味している。これに対して密閉状態で測定する本
発明の方法においては１０４〜１０６の範囲の菌数も測
定することが可能である。
■０発明の具体的作用および効果
本発明の方法は、微生物を含有する試料溶液中の溶存酸
素の減少量を酸素電極を用いて測定することにより試料
中の微生物の生菌数を測定する方法において、溶存酸素
の減少量の測定を試料溶液を容器内に密閉した状態で行
うので、測定誤差が少なく正確な生菌体数を求めること
ができる。また、本発明の測定装置は、有底管どこれに
気密に嵌入可能でかつ先端に酸素電極を備えたプランジ
ャからなり、該プランジャに空気抜き手段が設けられて
いるので有底管に試料溶液を入れ、プランジャを有底管
内に挿入してｌ！ｌ！２素電極を試料溶液中につけるこ
とによって、密封状態で試料溶液中の酸素濃度を測定す
ることができる。
素の減少量を酸素電極を用いて測定することにより試料
中の微生物の生菌数を測定する方法において、溶存酸素
の減少量の測定を試料溶液を容器内に密閉した状態で行
うので、測定誤差が少なく正確な生菌体数を求めること
ができる。また、本発明の測定装置は、有底管どこれに
気密に嵌入可能でかつ先端に酸素電極を備えたプランジ
ャからなり、該プランジャに空気抜き手段が設けられて
いるので有底管に試料溶液を入れ、プランジャを有底管
内に挿入してｌ！ｌ！２素電極を試料溶液中につけるこ
とによって、密封状態で試料溶液中の酸素濃度を測定す
ることができる。
第１図は実施例で用いられる生菌数測定装置を示す。
第２図および第３図は実施例および比較例における溶存
酸素の減少量を示す。 １・・・測定用試験管 ２・・・スターラーバ−３
・・・プランジ（？ ４・・・クラーク型電極５
・・・ ス リ ッ ト ロ・・・スターラー付の恒温槽 ７・・・試 料 特許出願人 テ ル モ 株 式 会 社第２図 第３図 時間（分）
酸素の減少量を示す。 １・・・測定用試験管 ２・・・スターラーバ−３
・・・プランジ（？ ４・・・クラーク型電極５
・・・ ス リ ッ ト ロ・・・スターラー付の恒温槽 ７・・・試 料 特許出願人 テ ル モ 株 式 会 社第２図 第３図 時間（分）
Claims (6)
- （１）微生物を含有する試料溶液中の溶存酸素の減少量
を酸素電極を用いて測定することにより試料中の微生物
の生菌数を測定する方法において、溶存酸素の減少量の
測定を試料溶液を容器内に密閉した状態で行うことを特
徴とする生菌数の測定方法。 - （２）試料溶液が微生物の代謝活動に必要な一定濃度の
栄養源を含む特許請求の範囲第１項記載の測定方法。 - （３）酸素電極がクラーク型酸素電極である特許請求の
範囲第１項または第２項記載の測定方法。 - （４）有底管と、これに気密に嵌入可能でかつ先端に酸
素電極を備えたプランジャからなり、該プランジャに空
気抜き手段を設けてなる生菌数測定装置。 - （５）前記酸素電極がクラーク型電極である特許請求の
範囲第４項記載の生菌数測定装置。 - （６）前記空気抜き手段が前記プランジャの外周面の下
端から上端に達するスリットである特許請求の範囲第４
項記載の生菌数測定装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61158756A JPS6315150A (ja) | 1986-07-08 | 1986-07-08 | 生菌数測定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61158756A JPS6315150A (ja) | 1986-07-08 | 1986-07-08 | 生菌数測定装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6315150A true JPS6315150A (ja) | 1988-01-22 |
| JPH0545182B2 JPH0545182B2 (ja) | 1993-07-08 |
Family
ID=15678654
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61158756A Granted JPS6315150A (ja) | 1986-07-08 | 1986-07-08 | 生菌数測定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6315150A (ja) |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JPH0221033A (ja) * | 1988-07-08 | 1990-01-24 | Isuzu Motors Ltd | 自動クラッチ制御装置 |
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