CN100455672C - 菌数测定方法、菌数测定装置及用于该装置的放置室 - Google Patents
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Abstract
本发明的菌数测定方法具有步骤(a)～(d)的工序。首先，在步骤(a)中，将含有给定菌种(例如大肠菌或者大肠菌群)的测定对象的试样添加到给定的培养基(例如用于特定酶基质培养基法的培养基)中。在步骤(b)中，在给定的温度下且在给定的恒定电压下，使用氧电极测定在添加了试样的培养基中流通的电流值。在步骤(c)中，计测从步骤(b)的测定开始到所述电流值一度降低之后上升并且超过给定阈值为止所用的时间。在步骤(d)中，基于所用时间计算出在试样中含有的菌种的初期菌数。
Description
技术领域
本发明是关于菌数测定方法、菌数测定装置及用于该装置的放置室的发明，特别是涉及使用氧电极测定菌数的菌数测定方法、菌数测定装置及用于该装置的放置室。
背景技术
基于食品的卫生管理等目的，有时要求测定食品中所含有的细菌数。以往测定食品等检体中所含有的细菌的方法有如下方法：梯度稀释检体并分别涂布一定量于琼脂培养基上，培养24小时左右，再目视计算所得到的菌落数从而测定细菌数。但是，该方法存在的问题是，需要梯度稀释检体的作业、需要培养24小时左右等。因此，开发了如专利文献1(即特开2000-287699号公报)所述的测定方法，其是用氧电极测定添加了检体的液体培养基中所含有的溶解氧浓度，从而测定细菌数(以下也称为氧电极法)。
对于专利文献1所述的氧电极法，液体培养基中含有的溶解氧的浓度越高，则可以测得越大的电流。检体中含有的细菌进行呼吸而消耗液体培养基中的溶解氧。随着由该细菌呼吸而引起的溶解氧浓度的降低，流动在氧电极中的电流也会降低。另外，溶解氧的消耗量取决于检体中含有的初期细菌数。也就是说，初期细菌数越多，则被消耗的氧量越多，溶解氧浓度的降低也越快。溶解氧浓度如果在短时间内降低，则被测定的电流值也会在短时间内降低。也就是说，通过求出在含有初期细菌数未知的检体的液体培养基中流通的电流直至减少到给定阈值所用时间，可以确定与该所用时间对应的初期菌数。通过如上所述，用氧电极法可以短时间且准确地测定初期菌数。
对于专利文献1所述的氧电极法，培养基和菌种的一些组合会产生被测定的电流值不降低到阈值以下的状态。如果产生这样的状态，则会产生拟阴性等误检和检测时间的波动等，存在测定精度降低的问题。
另外，用氧电极法测定真菌类时，由于真菌类的呼吸速度慢，经通常的培养后氧浓度不会急剧减少，因而对于以往的氧电极法存在不能以良好的精度进行测定的问题。进而，真菌类的增殖速度也慢，要是不增殖1周左右，则不能用以往的氧电极法进行判定，因而存在测定时间长的问题。
发明内容
本发明的目的是提供使用氧电极法能高精度地且可再现地测定初期菌数的菌数测定方法、菌数测定装置及用于该装置的放置室。另外，本发明的目的是提供可以高精度地且大幅缩短测定时间地测定真菌类初期菌数的菌数测定方法、菌数测定装置及用于该装置的放置室。
本发明的第1方案涉及的解决手段，其包括：步骤(a)，将含有给定菌种的测定对象的试样添加到给定的培养基中；步骤(b)，在给定的温度下且在给定的恒定电压下，使用氧电极测定在添加了试样的培养基中流通的电流值；步骤(c)，计测从步骤(b)的测定开始到电流值一度降低之后上升并且超过给定阈值为止所用的时间；步骤(d)，基于所用时间计算出在试样中含有的菌种的初期菌数。
本发明的第1方案记载的菌数测定方法由于包括：步骤(a)，将含有给定菌种的测定对象的试样添加到给定的培养基中；步骤(b)，在给定的温度下且在给定的恒定电压下使用氧电极测定在添加了试样的培养基中流通的电流值；步骤(c)，计测从步骤(b)的测定开始到所述电流值一度降低的之后上升并且超过给定的阈值为止所用的时间；步骤(d)，基于所用时间计算出在试样中含有的菌种的初期菌数。所以，通过利用电流值一度降低随后上升这一新发现的现象，从而具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第2方案涉及的解决手段，其是第1方案记载的菌数测定方法，其中，电流值一度下降随后上升是由试样中含有的菌种的代谢活动引起的。
本发明的第2方案记载的菌数测定方法由于电流值一度下降随后上升是源于试样中含有的菌种的代谢活动，因而具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第3方案涉及的解决手段，其是第1或者2方案记载的菌数测定方法，其中，培养基是用于特定酶基质培养基法的培养基，菌种是大肠菌或者大肠菌群。
本发明的第3方案记载的菌数测定方法由于培养基是用于特定酶基质培养基法的培养基、菌种是大肠菌或者大肠菌群，因而构成可以利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象的条件之一，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第4方案涉及的解决手段，其是第1或者2方案记载的菌数测定方法，其中，培养基是PYG培养基，菌种是真菌类。
本发明的第4方案记载的菌数测定方法由于培养基是PYG培养基、菌种是真菌类，因而构成可以利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象的条件之一，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。并且，本发明的第4方案记载的菌数测定方法由于可以利用新发现的现象，因而与以往的方法相比具有可以大幅缩短测定时间的效果。
本发明的第5方案涉及的解决手段，其具有：放置室，盛装含有给定菌种的测定对象的试样和给定的培养基；氧电极，设在放置室内；电流测定部，在给定的温度下且在给定的恒定电压下使用氧电极测定在添加了试样的培养基中流通的电流值；所用时间计测部，计测从电流测定部的测定开始到电流值一度降低之后上升并且超过给定阈值为止所用的时间；菌数计算部，基于所用时间计算出在试样中含有的菌种的初期菌数。
本发明的第5方案记载的菌数测定装置由于具有：放置室，盛装含有给定菌种的测定对象的试样和给定的培养基；氧电极，设在放置室内；电流测定部，在给定的温度下且在给定的恒定电压下使用氧电极测定在添加了试样的培养基中流通的电流值；所用时间计测部，计测从电流测定部的测定开始到电流值一度降低之后上升并且超过给定阈值为止所用的时间；菌数计算部，基于所用时间计算出在试样中含有的菌种的初期菌数。从而，通过利用电流值一度降低随后上升这一新发现的现象，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第6方案涉及的解决手段，其是第5方案记载的菌数测定装置，其特征在于，电流值一度下降随后上升是由试样中含有的菌种的代谢活动引起的。
本发明的第6方案记载的菌数测定装置由于电流值一度下降随后上升是源于试样中含有的菌种的代谢活动，因而具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第7方案涉及的解决手段，其是第5或者6方案记载的菌数测定装置，其中，培养基是用于特定酶基质培养基法的培养基，菌种是大肠菌或者大肠菌群。
本发明的第7方案记载的菌数测定装置由于培养基是用于特定酶基质培养基法的培养基、菌种是大肠菌或者大肠菌群，因而构成可以利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象的条件之一，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第8方案涉及的解决手段，其是第5或者6方案记载的菌数测定装置，其中，培养基是PYG培养基，菌种是真菌类。
本发明的第8方案记载的菌数测定装置由于培养基是PYG培养基、菌种是真菌类，因而构成可以利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象的条件之一，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。并且，本发明的第8方案记载的菌数测定装置由于可以利用新发现的现象，因而与以往的方法相比具有可以大幅缩短测定时间的效果。
本发明的第9方案涉及的解决手段，其是盛装含有给定菌种的测定对象的试样和给定的培养基的放置室，在放置室的内壁具有氧电极，氧电极在给定的温度下且在给定的恒定电压下测定一度下降并在之后上升的流过培养基的电流值。
本发明的第9方案记载的放置室，由于其是盛装含有给定菌种的测定对象的试样和给定的培养基的放置室，在放置室的内壁具有氧电极，氧电极在给定的温度下且在给定的恒定电压下测定一度下降并在之后上升的流过培养基的电流值；从而，通过利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第10方案涉及的解决手段，其是第9方案记载的放置室，电流值一度下降随后上升是由试样中含有的菌种的代谢活动引起的。
本发明的第10方案记载的放置室，由于电流值一度下降随后上升是源于试样中含有的菌种的代谢活动，因而具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第11方案涉及的解决手段，其是第9或者10方案记载的放置室，其中，培养基是用于特定酶基质培养基法的培养基，菌种是大肠菌或者大肠菌群。
本发明的第11方案记载的放置室，由于培养基是用于特定酶基质培养基法的培养基、菌种是大肠菌或者大肠菌群，因而构成可以利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象的条件之一，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
本发明的第12方案涉及的解决手段，其是第9或者10方案记载的放置室，培养基是PYG培养基，菌种是真菌类。
本发明的第12方案记载的放置室，由于培养基是PYG培养基、菌种是真菌类，因而构成可以利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象的条件之一，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。并且，本发明的第12方案记载的放置室由于可以利用新发现的现象，因而与以往的方法相比具有可以大幅缩短测定时间的效果。
本发明的目的、特征、局面及优点通过以下的详细说明和附图会更加清楚。
附图说明
图1是本实施方式1涉及的菌数测定方法的流程图；
图2是本实施方式1涉及的菌数测定装置的框图；
图3是本实施方式1涉及的放置室的截面立体图；
图4是表示本实施方式1涉及的菌数测定装置的电流值变化的图；
图5是表示本实施方式1涉及的菌数测定装置的电流值变化的图；
图6是表示本实施方式1涉及的菌数测定装置的标准曲线的图；
图7是表示本实施方式1涉及的菌数测定装置的电流值变化的图；
图8是表示本实施方式1涉及的菌数测定装置的电流值变化的图；
图9是表示本实施方式2涉及的菌数测定装置的电流值变化的图。
具体实施方式
对于氧电极法，由于菌种的呼吸(代谢活动)，溶解氧浓度会降低，与之相应地是在作为氧电极的作用极和对极之间流通的电流值(以下也简称为电流值)降低。但是，组合特定的培养基、特定的菌种时，新发现被测定的电流值随着代谢活动一度下降随后急剧上升这一现象。本发明是在氧电极法中利用了上述现象的菌数测定方法、菌数测定装置和用于该装置的放置室。
在以下的实施方式中，通过列举特定的培养基、特定的菌种的具体名称进行说明。但是，本发明并不限于以下的实施方式中所说明的具体名称。
实施方式1
在本实施方式中，作为特定的培养基使用被用于特定酶基质培养基法的培养基(以下仅称为特定酶基质培养基)。作为该特定酶基质培养基例如有コリラ一ト(注册商标)等。在本实施方式中，作为特定的菌种使用大肠菌或者大肠菌群。另外，在本实施方式中，作为氧电极的母材使用不锈钢(SUS)。
针对以上的组合所使用的菌数测定方法进行说明。图1是本实施方式涉及的菌数测定方法的流程图。首先，在步骤a中，将含有大肠菌或者大肠菌群的试样(检体)添加到特定酶基质培养基中。具体来说，特定酶基质培养基是液体，用混合器粉碎、搅拌含大肠菌或者大肠菌群的试样，并添加到该液体培养基中。
接着，在步骤b中，测定在添加了试样的培养基中流通的电流值。另外，电流值的测定在通过温度控制而被控制的给定温度下且在给定的恒定电压下进行。图2中示出本实施方式涉及的菌数测定装置的框图。在该菌数测定装置中设有放置室1，在该放置室1中盛装添加了试样的培养基。并且，在放置室1内设有用于氧电极法的氧电极2。图3表示放置室1的截面立体图。在放置室1底面附近的侧壁设有构成氧电极2的对极21、作用极22、参照极23这三个电极。进而，在放置室1中设有与对极21、作用极22、参照极23以电学方式连接的输出端子24，氧电极2通过输出端子24与电流测定部3相连接。
接着，针对对极21、作用极22、参照极23的构造进行说明。对极21、作用极22、参照极23的电极母材使用不锈钢。并且，在该电极母材的表面实施了镀金。另外，本发明中利用的氧电极2的电极母材不限于不锈钢，也可以是其他的金属材料(例如铜等)。但是，即使电极母材是其他的金属材料，也要对其表面进行镀金。
对于图2的电流测定部3，用氧电极2测定在添加了试样的培养基中流通的电流值(步骤b)。特别是用对极21和作用极22测定在培养基中流通的电流。在此，所谓在培养基中流通的电流如在背景技术所说明的，是指培养基的溶解氧在作用极22被还原成水而流动的电流。因此，培养基的溶解氧浓度高时，电流值也高；溶解氧浓度低时，则电流值也低。另一方面，在试样中含有的大肠菌或者大肠菌群，随着增殖其氧消耗量也增加。因此，培养基的溶解氧浓度降低，电流值随着溶解氧浓度的降低也会降低。从而，对于以往的氧电极法，如果将阈值设定为接近零的电流值(例如100nA)，可以判定电流值降低直到与阈值交叉的时间(以下也称为所用时间)。
但是，用氧电极测定作为特定的培养基和特定的菌种的组合的特定酶基质培养基中的大肠菌或者大肠菌群时，新发现会产生和背景技术不同的现象。图4是表示本实施方式涉及的电流值变化的曲线图。在图4中，用氧电极测定了特定酶基质培养基(コリラ一ト)中的大肠菌群。对于图4的电流值的变化，从测定开始直至大约400分钟稳定地流动大约1000nA的电流值，其后随着大肠菌群的增殖，溶解氧浓度开始降低，测定时间为大约500分钟时电流值降低至大约650nA。随后电流值开始急剧上升，测定时间为大约580分钟时电流值上升至大约2000nA。另外，测定开始时在培养基中含有的氧处于饱和状态，因而从外部流入的氧对电流值的上升影响小。电流值如图4所示那样变化时，即使设定如以往那样的接近零电流值的阈值(例如100nA)，也不能计测所用时间。
因此，在本实施方式中，通过将较测定开始时高的电流值设定为阈值，即使是电流值一度下降随后上升那样的情况，也可以测定所用时间。在图4中，将阈值设定为1500nA，在大约540分钟超过阈值。因此，图4所示的所用时间为大约540分钟。在图1的流程图中，在步骤c1中判定电流值上升是否超过阈值，在步骤c1中判定了超过阈值时，则在步骤c2中计测所用时间。该所用时间在图2所示的菌数测定装置的所用时间计测部4中被测定。另外，在进行步骤b、步骤c1及步骤c2期间，在大约30℃培养大肠菌或者大肠菌群。
接着，在图1的步骤d中，计算出在试样中含有的初期菌数。在图2中所示的菌数测定装置的菌数计算部5，基于计测的所用时间计算出在试样中含有的初期菌数。另外，为了计算出初期菌数，如背景技术所述需要事先求出标准曲线。以下基于具体例子进行说明。首先，针对初期菌数已知的试样测定其电流值的变化。图5中表示初期菌数已知的试样的电流值变化。在图5中针对初期菌数为0、101、103、105、107(单位：CFU/g)5种试样进行测定，每种测定3个试样。随后，设定阈值为1500nA，从图5计测所用时间并绘制图表，得到图6所示的标准曲线的图表。在图6中以横轴为初期菌数(LogCFU/g)，以纵轴为测定时间(所用时间)。针对图6中绘制的所用时间的数据应用最小二乘法，可以得到测定时间(y)＝-74.65×初期菌数(x)+668.23的标准曲线。
使用如上所述求出的标准曲线测定含有初期菌数未知的试样。首先，测定含有初期菌数未知的试样的电流值的变化，得到所用时间。接着，将得到的所用时间应用于图6中得到的标准曲线，计算出初期菌数。从图4中所示的图表求出的所用时间为大约540分钟，将540代入变量y而求变量x时，x为大约1.72，可以知道初期菌数为101.72(CFU/g)。为了在步骤d中测定初期菌数，需要事先求出标准曲线，但如果菌种等不同该标准曲线就不能使用。因此，每种必需的菌种都需要准备标准曲线。图5是针对大肠菌群的测定，图6是针对大肠菌群的标准曲线。
如上所述，用氧电极法测定作为特定的培养基和特定的菌种的组合的特定酶基质培养基中的大肠菌或者大肠菌群时，新发现会产生和背景技术不同的现象。也就是如下现象，由于大肠菌或者大肠菌群的呼吸，培养基中的溶解氧浓度会降低，与之相应地是电流值也开始降低，但随后电流值会上升。在现阶段对该现象详细的机理还不清楚。但是，组合特定的培养基(特定酶基质培养基)和特定的菌种(大肠菌或者大肠菌群)进行测定时，可以确认具有再现性。
针对上述的现象，详细的机理还不清楚，但即使改变电极母材的情况下，在组合特定的培养基和特定的菌种时也会产生相同的现象。使用相同的培养基和相同的菌种但使用不同的电极母材进行测定的例子示于图7和图8中。另外，在图7和图8中，横轴为测定时间(分钟)，纵轴为电流值(nA)。在图7中，作为特定的培养基使用コリラ一ト，作为特定的菌种使用大肠菌群，作为电极母材使用不锈钢。另一方面，在图8中，作为特定的培养基使用コリラ一ト，作为特定的菌种使用大肠菌群，作为电极母材使用铜。并且，在图7和图8中，针对初期菌数为0、102、104、106(单位：CFU/g)4种试样进行测定，每种测定3个试样。其结果如图7和图8所示，只要是コリラ一ト培养基和大肠菌群菌种的组合，就出现电流值一度下降随后上升的现象，与电极母材为不锈钢或铜的差异无关。但是，将图7和图8进行比较可以知道，图7电流的上升明显急剧，波动小。也就是说，使用不锈钢为电极母材较使用铜为电极母材，可以缩短测定时间，且可以减少测定波动。
如上所述，对于本实施方式，由于包括：步骤(a)，将作为测定对象的试样添加到用于特定酶基质培养基法的培养基中；步骤(b)，使用氧电极测定在添加了试样的培养基中流通的电流值；步骤(c)，开始步骤(b)的测定后，电流值由于在试样中含有的大肠菌或者大肠菌群的代谢活动一度下降随后又上升，计测直至超过给定的阈值的所用时间；步骤(d)，基于所用时间计算出在试样中含有的大肠菌或者大肠菌群的初期菌数。从而，通过利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
另外，本实施方式中，将阈值设定成较测定开始时高的电流值，但在本发明中，只要是可以计测电流值以一度下降随后上升的局面与阈值交叉的时间点，也可以将阈值设定成较测定开始时低的电流值。
实施方式2
在本实施方式中，作为特定的培养基使用PYG(多价胨酵葡萄糖培基)培养基，作为特定的菌种使用真菌类。在此，作为真菌类存在有例如酵母、霉、白假丝酵母(IFO 1594)等。
针对以上的组合应用在实施方式1中使用的菌数测定方法。因而，基于图1所示的流程图说明菌数测定方法。但是，真菌类的增殖速度较大肠菌等慢，因而例如作为准备作业需要以下的作业。首先，从继代的菌落钩出真菌类(例如酵母)。接着，在用显微镜确认下，调整成1×102CFU/ml的菌液。随后，将调整后的菌液接种成果实调整品。进而，将接种的试样(检体)放入30℃的恒温槽，进行2天的预培养。随后，在步骤a中将1ml预培养后的试样添加到1ml PYG培养基中。
接着，在步骤b中，测定在添加了试样的培养基中流通的电流值。本实施方式涉及的菌数测定装置也与实施方式1中所说明的菌数测定装置相同，图2表示框图。在该菌数测定装置中设有放置室1，在该放置室1中盛装有添加了试样的培养基。并且，在放置室1内设有用于氧电极法的氧电极。本实施方式涉及的放置室1也与实施方式1中说明的放置室1相同，图3表示放置室1的截面立体图。放置室1底面附近的侧壁上设有构成氧电极2的对极21、作用极22、参照极23这三个电极。并且，对极21、作用极22、参照极23的电极母材使用不锈钢。在该电极母材的表面还进行了镀金。另外，本发明中利用的氧电极2的电极母材并不限于不锈钢，也可以是其他的金属材料(例如铜等)。但是，即使电极母材是其他的金属材料，也要对其表面进行镀金。进而，在放置室1中设有与对极21、作用极22、参照极23以电学方式连接的输出端子24，通过该输出端子24，对极21、作用极22、参照极23与图2所示的电流测定部3相连接。
图2的电流测定部3中，使用对极21和作用极22测定在培养基中流通的电流。在本实施方式中，由于真菌类消耗培养基的溶解氧，电流值会降低，但随后电流值上升。电流值这样变化的现象与图4所示的大肠菌群的电流值变化的现象相同，与大肠菌群同样，在现阶段其详细的机理是不清楚的。图9是表示真菌类的电流值的变化的图表。在图9中针对食品材料分离酵母、白假丝酵母、食品材料分离霉这3种真菌类记载了电流值的变化。另外，图9的横轴是测定时间(小时)，纵轴是电流值(nA)。
首先，对于食品材料分离酵母，电流值几乎不降低，随后急剧上升。如果与实施方式1同样将阈值设定为1500nA，则食品材料分离酵母在测定后大约20分种(0.33小时)与阈值交叉。也就是说，可以知道食品材料分离酵母的所用时间大约为20分钟。接着，对于白假丝酵母，电流值稍微降低随后急剧上升。白假丝酵母在大约30分钟(0.5小时)与阈值交叉，可以知道所用时间大约为30分钟。接着，对于食品材料分离霉，电流值一度下降随后上升。食品材料分离霉在大约135分钟(2.25小时)与阈值交叉，可以知道所用时间为大约135分钟。另外，在图9中也表示出所测定的不含有真菌类的放置室(空白放置室)的电流值的变化。对于空白放置室，电流值会随着测定时间缓慢降低，但没有发现急剧的变化。
所用时间的测定在图2所示的所用时间计测部4进行。用图1所示的流程图判定步骤c1中电流值上升是否超过阈值，判定超过阈值时，则在步骤c2中计测所用时间。另外，在进行步骤b、步骤c1和步骤c2期间，在大约30℃培养真菌类。
接着，在步骤d中基于被计测的所用时间计算出在试样中含有的初期菌数。对于图2所示的菌数测定装置，在菌数计算部5进行。为了计算出初期菌数，与实施方式1同样需要事先求出标准曲线。对于求出标准曲线的具体说明，在实施方式1中已进行了说明，因而省略。利用事先得到的标准曲线，从得到的所用时间计算出真菌类的初期菌数。另外，为得到真菌类的初期菌数所必需的时间为1天左右，是向放置室放置试样的时间加上测定的所用时间后得到的。本实施方式中，即使加上预培养的2天时间，3天左右就可以得到真菌类的初期菌数，与以往需要1周左右时间相比，时间可以得以大幅缩短。
如上所述，对于本实施方式，由于包括：步骤(a)，将作为测定对象的试样添加到PYG培养基中；步骤(b)，使用氧电极测定在添加了试样的培养基中流通的电流值；步骤(c)，步骤(b)的测定开始后，由于在试样中含有的真菌类的代谢活动电流值一度下降随后又上升，计测测定开始直至超过给定的阈值的所用时间；步骤(d)，基于所用时间计算出在试样中含有的真菌类的初期菌数。从而，通过利用电流值一度下降随后上升这一新发现的现象，具有可以高精度地且可再现地测定初期菌数的效果。
另外，对于本实施方式，通过选择如上所述的适宜的组合，利用电流值上升这一新发现的现象，可以进行以往不能高精度地测定的真菌类的测定。进而，以往要是不对真菌类增殖1周左右时间就不能进行判定，而本实施方式即使包括2天左右的预培养在内在3天内就可以进行判定。
Claims (8)
1、一种菌数测定方法，该方法包括：步骤(a)，将含有大肠菌或者大肠菌群的测定对象的试样添加到用于特定酶基质培养基法的培养基中；步骤(b)，在给定的温度下且在给定的恒定电压下，使用氧电极测定在添加了所述试样的所述培养基中流通的电流值；步骤(c)，计测从所述步骤(b)的测定开始到所述电流值一度降低之后上升并且超过给定阈值为止所用的时间；步骤(d)，基于所述所用时间计算出在所述试样中含有的所述大肠菌或者大肠菌群的初期菌数。
2、一种菌数测定方法，该方法包括：步骤(a)，将含有真菌类的测定对象的试样添加到PYG培养基中；步骤(b)，在给定的温度下且在给定的恒定电压下，使用氧电极测定在添加了所述试样的所述PYG培养基中流通的电流值；步骤(c)，计测从所述步骤(b)的测定开始到所述电流值一度降低之后上升并且超过给定阈值为止所用的时间；步骤(d)，基于所述所用时间计算出在所述试样中含有的所述真菌类的初期菌数。
3、根据权利要求1所述的菌数测定方法，其特征在于，所述电流值一度下降随后上升是由所述试样中含有的所述大肠菌或者大肠菌群的代谢活动引起的。
4、根据权利要求2所述的菌数测定方法，其特征在于，所述电流值一度下降随后上升是由所述试样中含有的所述真菌类的代谢活动引起的。
5、一种菌数测定装置，其为以大肠菌或者大肠菌群为测定对象的试样的菌数测定装置，该装置具有：放置室，用于盛装所述试样；用于特定酶基质培养基法的培养基，设置在所述放置室内；氧电极，设在所述放置室内；电流测定部，在给定的温度下且在给定的恒定电压下使用所述氧电极测定在添加了所述试样的所述培养基中流通的电流值；所用时间计测部，计测从所述电流测定部的测定开始到所述电流值一度降低之后上升并且超过给定阈值为止所用的时间；菌数计算部，基于所述所用时间计算出在所述试样中含有的大肠菌或者大肠菌群的初期菌数。
6、一种菌数测定装置，其为以真菌类为测定对象的试样的菌数测定装置，该装置具有：放置室，用于盛装所述试样；PYG培养基，设置在所述放置室内；氧电极，设在所述放置室内；电流测定部，在给定的温度下且在给定的恒定电压下使用所述氧电极测定在添加了所述试样的所述PYG培养基中流通的电流值；所用时间计测部，计测从所述电流测定部的测定开始到所述电流值一度降低之后上升并且超过给定阈值为止所用的时间；菌数计算部，基于所述所用时间计算出在所述试样中含有的真菌类的初期菌数。
7、一种放置室，其是盛装有大肠菌或者大肠菌群作为测定对象的试样的放置室，其特征在于，所述放置室具有用于特定酶基质培养基法的培养基，所述培养基设置在所述放置室内；并且在所述放置室的内壁具有氧电极；利用所述氧电极能够在给定的温度下且在给定的恒定电压下测定一度下降并在之后上升的流过所述培养基的电流值。
8、一种放置室，其是盛装有真菌类作为测定对象的试样的放置室，其特征在于，所述放置室具有PYG培养基，所述培养基设置在所述放置室内；并且在所述放置室的内壁具有氧电极；利用所述氧电极能够在给定的温度下且在给定的恒定电压下测定一度下降并在之后上升的流过所述PYG培养基的电流值。
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