JPS6312288A - 光学活性（ｒ）−４−フエニル−２−ブタノ−ルの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発ＥＩＪ［，４−フエニル−２−ブタノンを（ト））
−４−フエニル−２−ブタノールに不斉的ニ還元する能
力を有するキヤンデイダ属、ゲオトリカム属、ナドソニ
ア属、ピキヤ属、サツカロマイ−ｔ！スｇ、ステファノ
アスカス属、トルロピシス属に属する微生物群から選ば
れた微生物に４−フエニル−２−ブタノンを接触せしめ
、生成する（Ｒ）−ｊ−フエニル−２−ブタノールを採
取することを特徴とする（Ｒ）−４−フエニル−２−プ
タノールの製造法に関するものである。

光学活性な（ト））−４−フエニル−２−ブタノールは
光学活性を必要とする医薬、農薬、動物薬、香料などの
合成原料として極めて有用な物質である。

〔従来の技術と問題点〕

光学活性な４−フエニル−２−ブタノールの製法につい
て、ピッカード（Ｒ，ＨｏＰｉｃｋａｒｄ　）らにより
ラセミ体の４−フエニル−２−ブタノ−ｔｖの−ｙｐル
酸エステルを、シンコニジンヤフルシン等で光学分割す
る方法が発表されている〔ジャーナル・オプ・ケミカル
・ソサＩティ−（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ　５ｏｃｉｅｔｙ）　１１１５頁１９１４年〕が、
この方法は煩雑であり、かつ収率も悪く工業的製法とし
ては不向きである。

〔問題点を解決するための手段〕

そとで本発明者らは、安価な４−フエニル−２−ブタノ
ンを原料とし、微生物的な不斉還元反応により光学活性
な（Ｐｉ）−４−フエニル−２−ブタノールの生産を計
画し、研究を行った。その結果、種々の微生物が＠−４
−フェニルー２−プタノールに効率良く変換することを
見い出し、本発明を完成した。

本発明に用いる４−フエニル−２−プタノンヲ不斉Ｍ　
元Ｌ　、（Ｒ）　　４−フエニル−２−ブタノールに変
換する微生物は以下に説明する方法によって見い出すこ
とができる。

例、ｔ　ハグルコース４０ｇ、イーストエキス５１　、
　（ｐＴ’ｓ４）、Ｈｐｏ４１５　ｆｌ、ＫＨｚＰＯ＜
　　７１　、　ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，８１、Ｚｎ３
０ｎ　”　７ＨｚＯ６０”Ｓ’、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２０
９０ｍ９、ＣｕＳＯ４−５Ｈ２０５ｍ９、Ｍｎ５Ｏ，−
ｄＨ２０１０〜、ＮａＣ１０，１９（１１当り）の組成
からなるＡ培地３０肩を含有５００．／坂ロフラスコ［
９生物を植え、３０°Ｃで２日間振とう培養する。その
後、遠心分離によって菌体を集め、４−フエニル−２−
ブタノン０５％、グルコース５％を含有スるリン酸緩衝
液（ｐＨ６，０）　１５　ｍｌＫ’９濁し、５００ｍ１
坂ロフラスコ内で１〜８日間３０″Ｃで振とり反応さす
。その後、等量の酢酸エチルを加え抽出を行ない生成し
た４−フエニル−２−ブタノ−／しをガスクロマトグラ
フィー（カラム：シリコン０Ｖ−２１０、φ０．３Ｘ２
００　ｃｍ、カラム温度１５０°Ｃ，Ｎ２ガス０．５気
圧）で分析する。一方、４−フエニル−２−ブタノール
の光学線ＩＦ　測定ｈ、酢酸ｚ＋ルを除去後、ｐ−）ル
エンするフオニルクロライド／ピリジン中でトシル化を
行ない、これを高速液体クロマトグラフィー（カラム二
日本分光■製、Ｃｈｉｒａユｃｅｌ−ＯＥ、溶出溶剤ヘ
キサン−インプロパツール（３ｏ：ｒ）、流速１．５　
ｚｌ　／　ｍｉｎ、検出２４０ｎｍ）により（Ｓ）体が
１７分（ト））体が２７分の保持時間で分離し、これよ
り光学純度を決定することができる。

本発明に使用しうる微生物として、例えばキヤンデイダ
・バラルゴーザ（Ｃａｎｄｌａ　ｐａｒａｒｕｇｏｓａ
）工ＦＯ０９６６、ゲオトリカム・キヤンデイダム（Ｇ
ｅｏｔｒｊ−ｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍ　）　ＣＢ３
　１Ｂ７．６７、ナドソニア・エロンガタ（Ｎａｄｓｏ
ｎｉａ　ｅコｏｎｇａｔａ　）工ＦＯ０６６５、ピキヤ
−７アリノーサ（Ｐｉｃｈｉａ　ｆａｒ：１．ｎｏｓａ
）工ＦＯＯ９９１，サツカロマイコビシス・リボリテイ
力（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉ、ｓ　１ｉｐｏｌ
ｙｔｉｃａ　）工ＦＯＯ７１７、ステファノアスカス・
シフエ！ｊ　イ（５ｔｅｐｈａｎｏａｓｃｕｓｃｉｆｅ
ｒｒｉｉ　）　工ＦＯ１８５４、トルロピシス・グロッ
ペンギエゼリイ（’ｌ’ｏｒｕコｏｐｓｉｓ　ｇｒｏｐ
ｅｎｇｉｅｓｓｅｒｉ　）工Ｆ００６５９などがある。

これらの微生物の培養には、通常これらの微生物が資化
しうる栄養源であれば何でも使用しうる。例えばグルコ
ース、シュクロース等の炭水化物；エタノール・グリセ
ロール等のアルコール；パラフィン等の炭化水素；酢酸
、プロピオン酸などの有機酸；大豆油等の炭素源または
これらの混合物、酵母エキス、ペプトン、肉エキス、コ
ーンステープリカー、硫安、アンモニア等の含窒素無機
、有機栄養源、リン酸塩、マグネシウム、鉄、マンガン
、カリ等の無機栄養源、およびビオチン、チアミン等の
ビタミン類を適宜配合した通常の培地が用いられる。培
養方法としては栄養培地のｐＨを４．０〜９５の範囲で
好気的に２０〜４０°Ｃの範囲で１〜５日間培養する。

還元反応の方法としては、培養液そのまま、あるいは遠
心分離等により菌体を分離し、これをリン酸緩衝液ある
いは水等に再懸濁したものに４−フエニル−２−ブタノ
ンを添加する方法とがある。この反応の際、グルコース
、シュクロース、グリセロール等の炭ｉ源ｔエネ／Ｌ／
　キー源として添加するとよい。また菌体は生菌体のま
までもよいし、アセトン処理、凍結乾燥等をほどこした
ものでも良い。また菌体を水不溶性担体に固定化して用
いることもできる。

４−フエニル−２−プタノンハソのｔ−１、あるいは反
応に影響を与えないような有機溶剤、油脂等に溶解して
反応の始めから一括、あるいは分割添加しても良い。反
応はｐＨ５〜９の範囲で１０〜６０°Ｃの温度で１〜１
２０時間攪拌下で行なう。

反応によって生成した（Ｒ）−４−フエニル−２−ブタ
ノールの採取は、反応液から直接あるいは菌体分離後、
酢酸エチル、ヘキサン等の溶剤で抽出し、脱水後蒸留す
ることにより高純度の（Ｐ、）−４−フエニル−２−ブ
タノールを容易ニ’４ることかできる。

〔実施例〕

以下、本発明を具体的に実施例にて説明するが、本発明
はこれら実施例のみに限定されるものでない。

実施例１ 前記Ａ培地５Ｃ１＋／を５００　ｗｔｌ容坂ロフラスコ
に入れ、殺菌後、表１に示す微生物をそれぞれ植菌した
。５０°Ｃで２日間好気的に振とり培養を行った。この
培養液から菌体を遠心分離によって集め、４−フエニル
−２−ブタノン０．５％、グルコース５％含有Ｑ、　Ｉ
　Ｍ　−！Ｊン酸緩衝液（ｐＨ６，０’１１５１／に懸
濁し、５００　ｍｌ坂ロフラスコに入れ３０°Ｃ１７２
時間振とう反応させた。反応後、反応液から等量の酢酸
エチルで（Ｒ）　−４−フエニル−２−ブタノールを抽
出Ｌ、カスクロマトグラフィーで生成量を分析した。次
に、酢酸エチルを除去後トシル化し、これをヘキサンで
抽出し、高速液体クロマトグラフィーにて光学純度を測
定した。その結果を表１に示す。

（ン）（下徐旬） 表　　１ 実施例λ ｆｉ、培地５１を含む５１容ジャーファーメンタ−にピ
キヤ・ファリノーサエＦＯ０９９１を植菌し、３０℃、
通気１ｖｖｍ、攪拌５００　ｒｐｍにて４８時間培養し
た。培養終了後、菌体を遠心分離により集め、１．５１
の水に懸濁し、４−フエニル−２−ブタノンを７．５１
、グルコースを７５１添加し、ｐＨをＮａＯＨで６．０
に保ちながら３０°０１攪拌２０　Ｏｒｐｍで７２時間
反応させた。

反応終了後、等量の酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エ
チル層を無水芒硝で脱水したのち減圧上脱溶剤し、油状
物質８．５１を得た。これを蒸留（１３０〜１３５℃７
１４ｍｍＨｇ）シ、無色オイル状の（Ｒ）−４−フエニ
ル−２−ブタノ−／Ｌ／　６．２ｆを得た。

その比旋光度は〔α’）Ｄ−２０，１（Ｑ　＝　５ベン
ゼン）を示し、そのトシル体の高速液体クロマトグラフ
ィー分析による光学純度は９９％ｅ、ｅ。

であった。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）４−フエニル−２−ブタノンを（Ｒ）−４−フエ
   ニル−２−ブタノールに不斉的に還元する能力を有する
   キヤンデイダ属、ゲオトリカム属、ナドソニア属、ピキ
   ヤ属、サツカロマイコビシス属、ステフアノアスカス属
   、トルロピシス属に属する微生物から選ばれた微生物に
   ４−フエニル−２−ブタノンを接触せしめ、生成する（
   Ｒ）−４−フエニル−２−ブタノールを採取することを
   特徴とする（Ｒ）−４−フエニル−２−ブタノールの製
   造法。
2. （２）微生物がキヤンデイダ・パラルゴーザ、ゲオトリ
   カム・キヤンデイダム、ナドソニア・エロンガタ、ピキ
   ヤ・フアリノーサ、サツカロマイコビシス・リポリテイ
   カ、ステフアノアスカス・シフエリイ、トルロピシス・
   グロペンギエゼリイである特許請求の範囲第１項記載の
   製造法。