JPS6312287A

JPS6312287A - 光学活性（ｓ）−４−フエニル−２−ブタノ−ルの製造法

Info

Publication number: JPS6312287A
Application number: JP15708986A
Authority: JP
Inventors: Junzo Hasegawa; 淳三長谷川; Kiyoshi Watanabe; 清渡辺; Hidetoshi Kutsugi; 久津木　英俊; Natsuki Mori; 夏樹森
Original assignee: Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1986-07-03
Filing date: 1986-07-03
Publication date: 1988-01-19
Anticipated expiration: 2009-03-09
Also published as: JPH0616714B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、４−フエニル−２−ブタノンヲ（Ｓ）−４−
フエニル−２−ブタノールに不斉的に還元する能力を有
するアムボロシオジマ属、ボツリオアスカス属、キャン
ディダ属、クラビスポラ属、エンドマイセス属、フィロ
バシディウム属、ゲオトリカム属、ハンゼニアスポラ属
、ハンゼヌラ属、ホルモアスカス嘱、クルイベロマイセ
ス属、ログロマイセス属、パキゾーレン属、ピキヤ属、
ロードスポリデイム属、ロードトルラ属、サツカロマイ
セス属、スポリディオボルス属、スポリディオマイセス
属、サツカロマイコ−デス属、トリコスポロン属、ヴツ
カーハミア属に属する微生物群から選ばれた微生物に４
−フエニル−２−ブタノンを接触せしめ、生成する（Ｓ
）　−４−フエニル−２−ブタノールを採取することを
特徴とする（Ｓ）　−４−フエニル−２−ブタノールの
製造法に関するものである。

光学活性な（Ｓ）　−４−フエニル−２−ブタノールは
光学活性を必要とする医薬、動物薬、農薬、香料などの
合成原料として極めて有用性の高い物質である。

〔従来の技術と問題点〕

光学活性な４−フエニル−２−ブタノールの製法につい
て、ピッカード（Ｒ，Ｈ，Ｐｉｃｋａｒｄ　）らにより
ラセミ体の４−フエニル−２−ブタノールのフタル酸エ
ステルを、シンコニジンやブルシン等で光学分割する方
法が発表されている〔ジャーナル・オブ・ケミカルソサ
イティー（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＣｈｅｍｉｃａｌ　５
ｏｃｉｅｔｙ）、１１１５頁Ｃ１９１４年）〕が、この
方法は煩雑であり、かつ収率も悪く工業的製法としては
不向きである。

〔問題点を解決するための手段〕

そこで本発明者らは、安価な４−フエニル−２−ブタノ
ンを原料とし、微生物的な不斉還元反応により光学活性
な（Ｓ）　−４−フエニル−２−ブタノールの生産を計
画し、研究を行った。その結果、種々の微生物が（Ｓ）
　−４−フエニル−２−ブタノールに効率良く変換する
ことを見い出し、本発明を完成した。

本発明に用いる４−フエニル−２−ブタノンを不斉還元
し、（Ｓ）　−４−フエニル−２−ブタノールに変換す
る微生物は以下に説明する方法によって見い出すことが
できる。

例えばグルコース４０ｙ、イーストエキス３ｙ。

（ＮＨ４）２ＨＰＯ４１３ｆ　、　ＩＧ（２ＰＯ４７ｆ
　、　ＭｇＳＯ３・７Ｈ２００，８ｆ、ＺｎＳＯ４−７
Ｈ２０６０ｍｇ。

ＦｅＳＯ４−７Ｈ２０９０’！、　０ｕＳＯ，ｘ−５Ｈ
２０５＋１Ｆ。

ＭｎＳＯ４・４　Ｈ２Ｏ１０Ｑ　、　Ｎａ１ｌ　　Ｏ，
ｌダ（ｉｆｆ当り）の組成からなるＡ培地３０ｍ／含有
５０ＣＪｔｌ坂ロフラスコに微生物を植え、３０°Ｃで
２日間振とう培養する。その後、遠心分離によって菌体
を集め、４−フエニル−２−ブタノン０．５％、グルコ
ース５％を含有するリン酸緩衝液（ｐＨ６，０）１５ゴ
に懸濁し、５００ｍ１坂ロフラスコ内で１〜８日間３０
°Ｃで振とう反応さす。その後、等量の酢酸エチルを加
え、抽出を行ない生成した４−フエニル−２−ブタノー
ルをガスクロマトグラフィー（カラム：シリコン０Ｖ−
２１０，φ０．３Ｘ２００ｔＭ１カラム温度１５０°Ｃ
，Ｎ２ガス０．５気圧）で分析する。一方、４−フエニ
ル−２−ブタノールの光学純度測定は、酢酸エチルを除
去後、ｐ−トルエンスルフォニルクロライド／ピリジン
中でトシル化を行ない、これを高速液体クロマトグラフ
ィー（カラム：日本分光■製、ｃｈｉｒａｌｃｅｌ−Ｏ
Ｂ、溶出溶剤　ヘキサン−イソプロピノール（３０：１
）、流速１．５　ｍｌ　／　ｍｉｎ　、検出２４０　ｎ
ｍ）により（Ｓ）体が１７分、（６）体が２７分の床持
時間で分離し、これより光学純度を決定することができ
る。

本発明に使用しうる微生物として、例えばアムボロシオ
ジマ・フイレントーｖ　（ＡｍｂｒＯ８ｉＯｚｙｍａｐ
ｈｉｌｅｎｔｏｍａ　）　Ｉ　Ｆ　０　１８４７、ボツ
リオアスカス・シナエデンデラス（Ｂｏｔｒｙｏａｓｃ
ｕｓＳｙｎｎａｅａｅｎａｒｕＳ　）　Ｉ　Ｆ　Ｏ１６
０４、キヤンデイダ・ギエルモンデイ（０ａｎｄｉｄａ
　ｇｕｉｌｌｉｅｒｍｏｎｄｉｉ　）ＩＦＯ０６７９、
キヤンデイダ・サケ（Ｃａｎｄｉｄａｓａｋｅ）ＣＢＳ
　　２２１９、クラビスポラ・ルシタニアエ（Ｃ１ａｖ
ｉｓｐｏｒａ　１ｕｓｉｔａＭａｅ　）　　Ｉ　Ｆ　０
１０１９、エンドマイセス・オベテンシス（Ｅｎｄｏｍ
ｙｃｅｓ　ｏｖｅｔｅｎｓｉｓ　）　Ｉ　Ｆ　０　１２
０１、フイロバシデイウム・カプスリゲニウム（Ｆｉｌ
ｏｂａｓｉｄｉｕｍ　ｃａｐｓｕｌｉｇｅｎｕｍ　）　
　Ｉ　Ｆ　０１１１９、ゲオトリカム・アミセリシウム
（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ａｍｙｃｅｌｉｃｕｍ　）　
ＯＢ　Ｓ　　１８６．３８、ハンゼンニアスポラ・バル
ビエンシス（ＨａｎＳｅｎｌａＳｐＯｒａ　ｖａｌｂｙｅｎｓｉｓ
　）　Ｉ　Ａ　Ｍ４９７２、ハンゼヌラ・アノマラ（Ｈ
ａｎｓｅｎｕｌａａｎｏｍａｌａ　）　　Ｉ　Ｆ　Ｏ０
１２０、ホルモアスカス・プラテイポデイス（Ｈｏｒｍ
ｏａｓｃｕｓ　ｐｌａｔｙｐｏｄｉｓ　）ＩＦＯ１４７
１、クルイベロマイセス・フラジルス（Ｋｌｕｙｖｅｒ
ｏｍｙｃｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ　）　Ｉ　Ｆ’　００
２８８、ロダロマイセス・エロンギスポラス（Ｌｏｄｄ
ｅｒｏｍｙｃｅｓ　ｅｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｓ　）　　
Ｉ　Ｆ　０１６７６、パキゾーレン・タンノフイルス（
Ｐａｃｈｙｓｏｌｅｎ　ｔａｎｎｏｐｈｉｌｕｓ　）　
Ｉ　ＦＯ１００７、ピキヤ・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ
　ｐａｓｔｏｒｉｓ　）ＩＦＯ１０１３、ロードスポリ
デイウム・トルロイデ：ｘ、　（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉ
ｄｉｕｍ　ｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ　）ＩＦｏ　　０４１
３、ロードトルラ・グルチニス（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌ
ａ　ｇｌｕｔｉｎｉｓ　）　Ｉ　ＦＯ１０９９、サツカ
ロマイセス・ルキシー（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｒ
ｏｕｘｉｉ）ＩＦＯ０４９３、スポルデイオボルス・ジ
ヨンソニー（５ｐｏｒｉｄｉｏｂｏｌｕｓ　ｊ　ｏｈｎ
ｓｏｎｉｉ　）ＩＦＯ６９０３、スポロボロマイセス・
サルモニカラー（Ｓｐｏｒｏｂｏｌｏｍｙｃｅｓ　ｓａ
１ｍｏｎｉｃ○１０ｒ）ＩＡＭ　　１２２４９、サツカ
ロマイコ−デス・ルーデウイギ−（Ｓａｃｃｈａｒｏｍ
ｙｃｏｄｅｓ　ｌｕｄｗｉｇｉｉ　）ＩＦＯ０７９８、
トリコスポロン・メリビオサセウム（Ｔｒｉｃｈｏｓｐ
ｏｒｏｎ　ｍｅｌｉｂｉｏｓａｃｅｕｍ　）ＣＢＳ　　
６０８７、ヴツカーハミア・フルオレツセンス（Ｗｉｃ
ｋｅｒｈａｍｉａ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ　）　　Ｉ
　Ｆ　０１１１６などがある。

これらの微生物の培養には、通常これらの微生物が資化
しうる栄養源であれば何でも使用しうる。

例えばグルコース、シュクロース等の炭水化物；エタノ
ール、グリセロール等のアルコール；パラフィン等の炭
化水素；酢酸、プロピオン酸などの有機酸；大豆油等の
炭素源またはこれらの混合物、酵母エキス、ペプトン、
肉エキス、コーンステープリカー、硫安、アンモニア等
の含窒素無機、有機栄養源、リン酸塩、マグネシウム、
鉄、マンガン、カリ等の無機栄養源、およびビオチン、
チアミン等のビタミン類を適宜配合した通常の培地が用
いられる。培養方法としては栄養培地のｐＨを４．０〜
９．５の範囲で好気的に２０〜４０°Ｃの範囲で１〜５
日間培養する。

還元反応の方法としては、培養液そのまま、あるいは遠
心分離等により菌体を分離し、これをリン酸緩衝液ある
いは水等に再懸濁したものに４−フエニル−２−ブタノ
ンを添加する方法とがある。

この反応の際、グルコース、シュクロース、グリセロー
ル等の炭素源をエネルギー源として添加するとよい。ま
た菌体は生菌体のままでもよいし、アセトン処理、凍結
乾燥等をほどこしたものでも良い。また菌体を水不溶性
担体に固定化して用いることもできる。

４−フエニル−２−ブタノンはそのまま、あるいは反応
に影響を与えないような有機溶剤、油脂等に溶解して、
反応の始めから一括、あるいは分割添加しても良い。反
応はｐＨ５〜９の範囲で１０〜６０°Ｃの温度で１〜１
２０時間撹拌下で行なう。

反応によって生成した（Ｓ）　−４−フエニル−２−ブ
タノールの採取は、反応液から直接あるいは菌体分離後
、酢酸エチル、ヘキサン等の溶剤で抽出し、脱水後、蒸
留することにより高純度の（Ｓ）　−４−フエニル−２
−ブタノールを容易に得ることができる。

〔実施例〕

以下、本発明を具体的に実施例にて説明するが、本発明
はこれら実施例のみに限定されるものでない。

実施例１前記Ａ培地Ｂｏｗｌ！を５００　ｙｔｔｔ容坂ロフラス
コに入れ、殺菌後、表１に示す微生物をそれぞれ植菌し
た。３０°Ｃで２日間好気的に振とう培養を行った。こ
の培養液から菌体を遠心分離によって集め、これを４−
フエニル−２−ブタノン０．５％、グルコース５％含有
０．ＩＭ−リン酸緩衝液（ｐ、Ｈ６，０）１５ｍｌに懸
濁し、５００ｘｔ坂ロフラスコに入れ３０°Ｃ９７２時
間振とう反応させた。反応後、反応液から等量の酢酸エ
チルで（Ｓ）　−４−フエニル−２−ブタノールを抽出
し、ガスクロマトグラフィーで生成量を分析した。次に
、酢酸エチルを除去後、トシル化し、これをヘキサンで
抽出し、高速液体クロマトグラフィーにて光学純度を測
定した。

その結果を表１に示す。

以下余白表　　　１表　　　１　（続き）実施例２Ａ培地３１を含む５１容ジャーファーメンタ−にキヤン
デイダ・ギエルモンデイＩＦＯ０６７９を植菌し、３０
°Ｃ９通気１ｖｖｍ、撹拌５００　ｒｐｍにて４８時間
培養した。培養終了後、菌体を遠心分離により集め、１
．５ｎの水に懸濁し、４−フエニル−２−ブタノンを７
．５１　、グルコースを７５ｇ添加し、ｐＨをＮａＯＨ
で６．０に保ちながら３０’Ｃ，！拌２０　Ｏｒｐｍで
７２時間反応させた。

反応終了後、等量の酢酸エチルで２回抽出した。

酢酸エチル属を無水芒硝で脱水したのち減圧上脱溶剤し
、油状物質８．３ｇを得た。これを蒸留（１３０〜１３
５°Ｃ／　１　’４　ｍＨｙ）　ｔ、、無色オイル状の
（Ｓ）　−４−フエニル−２−ブタノール６．５ダを得
た。

その比旋光度は〔α）　　＋１９．８°（ｃ＝５、ベン
ゼン）を示し、そのトシル体の高速液体クロマトグラフ
ィー分析による光学純度は９８％ｅ、ｅ、であった。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）４−フエニル−２−ブタノンを（Ｓ）−４−フエ
ニル−２−ブタノールに不斉的に還元する能力を有する
アムボロシオジマ属、ボツリオアスカス属、キヤンデイ
ダ属、クラビスポラ属、エンドマイセス属、フイロバシ
デイウム属、ゲオトリカム属、ハンゼニアスポラ属、ハ
ンゼヌラ属、ホルモアスカス属、クルイベロマイセス属
、ロダロマイセス属、パキゾーレン属、ピキヤ属、ロー
ドスポリデイム属、ロードトルラ属、サツカロマイセス
属、スポリデイオボルス属、スポリデイオマイセス属、
サツカロマイコーデス属、トリコスポロン属、ヴツカー
ハミア属に属する微生物群から選ばれた微生物に４−フ
エニル−２−ブタノンを接触せしめ、生成する（Ｓ）−
４−フエニル−２−ブタノールを採取することを特徴と
する（Ｓ）−４−フエニル−２−ブタノールの製造法。
（２）微生物が、アンボロシオジマ・フイレントーマ、
ボツリオアスカス・シナエデンデラス、キヤンデイダ・
ギエルモンデイ、キヤンデイダ・サケ、クラビスポラ・
ルシタニアエ、エンドマイセス・オベテンシス、フイロ
バシデイウム・カプスリゲニウム、ゲオトリカム・アミ
セリシウム、ハンゼニアスポラ・バルビエンシス、ハン
ゼヌラ・アノマラ、ホルモアスカス・プラテイポデイス
、クルイベロマイセス・フラジルス、ロダロマイセス・
エロンギスポラス、パキゾーレン・タンノフイルス、ピ
キヤ・パストリス、ロードスポリデイウム・トルロイデ
ス、ロードトルラ・グルチニス、サツカロマイセス・ル
キシー、スポルデイオボルス・ジヨンソニー、スポロボ
ロマイセス・サルモニカラー、サツカロマイコーデス・
ルーデウイギー、トリコスポロン・メリビオサセウム、
ヴツカーハミア・フルオレツセンスである特許請求の範
囲第１項記載の製造法。