JPS5953838B2 - β−ヒドロキシ吉草酸の製造方法 - Google Patents
β−ヒドロキシ吉草酸の製造方法Info
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- JPS5953838B2 JPS5953838B2 JP14025680A JP14025680A JPS5953838B2 JP S5953838 B2 JPS5953838 B2 JP S5953838B2 JP 14025680 A JP14025680 A JP 14025680A JP 14025680 A JP14025680 A JP 14025680A JP S5953838 B2 JPS5953838 B2 JP S5953838B2
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- valeric acid
- hydroxyvaleric acid
- hydroxyvaleric
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、抗微生物作用を有する医薬或いは除草作用を
有する農薬等の合成原料若くは中間体として有用な化合
物であるβ−ヒドロキシ吉草酸を□微生物を利用して工
業的に有利に製造する方法に関するものである。
有する農薬等の合成原料若くは中間体として有用な化合
物であるβ−ヒドロキシ吉草酸を□微生物を利用して工
業的に有利に製造する方法に関するものである。
これまで吉草酸を原料として、微生物を利用してβ−ヒ
ドロキシ吉草酸を蓄積させた報告はなく、特に本発明に
よれば、合成法では困難な高純度の光学活性なβ−ヒド
ロキシ吉草酸を簡単な操作により容易に得られる利点が
ある。
ドロキシ吉草酸を蓄積させた報告はなく、特に本発明に
よれば、合成法では困難な高純度の光学活性なβ−ヒド
ロキシ吉草酸を簡単な操作により容易に得られる利点が
ある。
即ち本発明は、吉草酸に、このものをβ−ヒドロキシ吉
草酸に変換しつる能力を有するキャンデイダ （Ｃａｎｄｉｄａ）属に属する微生物を作用せしめ、生
成したβ−ヒドロキシ吉草酸を採取することを特徴とす
るβ−ヒドロキシ吉草酸の製造方法に関するものである
。
草酸に変換しつる能力を有するキャンデイダ （Ｃａｎｄｉｄａ）属に属する微生物を作用せしめ、生
成したβ−ヒドロキシ吉草酸を採取することを特徴とす
るβ−ヒドロキシ吉草酸の製造方法に関するものである
。
本発明に使用される、吉草酸からβ−ヒドロキシ吉草酸
へ変換する代謝系をもつ微生物としては、例えばキャン
デイダ・ルゴーザ（Ｃａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ）があ
り、この培養には通常これらの菌が資化しうる栄養源な
らなんでも使用しうる。
へ変換する代謝系をもつ微生物としては、例えばキャン
デイダ・ルゴーザ（Ｃａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ）があ
り、この培養には通常これらの菌が資化しうる栄養源な
らなんでも使用しうる。
例えば炭素源としてグルコース・シュクロース・アンニ
ット等の炭水化物、エタノールを始めとするアルコール
類、パラフィン・オレフィン類の炭化水素、酢酸等の有
機酸類、大豆油等の単独又はこれらの混合物、窒素源と
して硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等、有機栄
養源としてイーストエキス・麦芽エキス・肉エキス・ペ
プトン等、また微量金属塩、ビタミン等、通常の培養に
用いられる栄養源を適宜混合した培地を用いることがで
きる。
ット等の炭水化物、エタノールを始めとするアルコール
類、パラフィン・オレフィン類の炭化水素、酢酸等の有
機酸類、大豆油等の単独又はこれらの混合物、窒素源と
して硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等、有機栄
養源としてイーストエキス・麦芽エキス・肉エキス・ペ
プトン等、また微量金属塩、ビタミン等、通常の培養に
用いられる栄養源を適宜混合した培地を用いることがで
きる。
培養の方法としては、栄養培地の声を４．０〜９．５の
範囲で好気的に２０〜４０℃の範囲で１〜５日間培養す
る。
範囲で好気的に２０〜４０℃の範囲で１〜５日間培養す
る。
吉草酸からβ−ヒドロキシ吉草酸への変換には６．０〜
９．０の…範囲が好ましい。
９．０の…範囲が好ましい。
また微生物を吉草酸に作用させる方法としては、菌体の
培養と並行して行なう方法として、例えば吉草酸と上記
の炭素源との共存下でｐＨ４，０〜９．５の範囲で好気
的に培養し、培養液中にβ−ヒドロキシ吉草酸を蓄積さ
せる方法があり、また菌体の培養と吉草酸からβ−ヒド
ロキシ吉草酸への変換反応を２段階に分けて行なう方法
、例えば菌体の生産を栄養培地で世４．０〜９．５の範
囲で好気的に培養し、得られた培養液に吉草酸を添加し
、刃身６，０〜９．０に保持して好気的に反応せしめる
方法、又は得られた培養液から遠心分離で菌体を集め、
菌体を適当な組成の液、例えばＭ／１５１Ｊン酸緩衝液
（ｐＨ７，０）に懸濁し、吉草酸と少量のグルコースを
加え、好気的にｐＨ６，Ｏ〜９．０の範囲で反応を行な
う方法がある。
培養と並行して行なう方法として、例えば吉草酸と上記
の炭素源との共存下でｐＨ４，０〜９．５の範囲で好気
的に培養し、培養液中にβ−ヒドロキシ吉草酸を蓄積さ
せる方法があり、また菌体の培養と吉草酸からβ−ヒド
ロキシ吉草酸への変換反応を２段階に分けて行なう方法
、例えば菌体の生産を栄養培地で世４．０〜９．５の範
囲で好気的に培養し、得られた培養液に吉草酸を添加し
、刃身６，０〜９．０に保持して好気的に反応せしめる
方法、又は得られた培養液から遠心分離で菌体を集め、
菌体を適当な組成の液、例えばＭ／１５１Ｊン酸緩衝液
（ｐＨ７，０）に懸濁し、吉草酸と少量のグルコースを
加え、好気的にｐＨ６，Ｏ〜９．０の範囲で反応を行な
う方法がある。
この場合の菌体は、反応速度を早めるためにトルエン処
理等の適当な前処理を加えたものも使用できる。
理等の適当な前処理を加えたものも使用できる。
培養及び反応で得られたβ−ヒドロキシ吉草酸の採取方
法としては、通常の公知の抽出精製方法が利用しうるが
、次の如き方法も使用しうる。
法としては、通常の公知の抽出精製方法が利用しうるが
、次の如き方法も使用しうる。
例えば、得られたβ−ヒドロキシ吉草酸含有液の世を硫
酸等で２．０付近まで下げ、更に飽和となるまで硫酸ア
ンモニウムを加える。
酸等で２．０付近まで下げ、更に飽和となるまで硫酸ア
ンモニウムを加える。
しかる後、等量の酢酸エチルで３回抽出を行なう。
これを低温、減圧下で溶剤を除くとβ−ヒドロキシ吉草
酸含有物が褐色油状で得られる。
酸含有物が褐色油状で得られる。
更に、このものを少量のベンゼンに溶解し、ベンゼン−
アセトン混合溶剤で゛溶出するシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーを行なう事により容易に他の不純物と分離
することか゛できる。
アセトン混合溶剤で゛溶出するシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーを行なう事により容易に他の不純物と分離
することか゛できる。
次に本発明を実施例によって説明するが、本発明は実施
例に限定されるものではない。
例に限定されるものではない。
実施例 １
グルコース２％、イーストエキス０．５％、ペプトン０
．３％、肉エキス０．３％、吉草酸０．１％含有する培
地（ｐＨ６，０） １１に、キャンテ゛イダ・ルゴー
ザＩＦＯ０７５０（Ｃａｎｄｉｄａ ｒｕｇｏｓａ）を
植菌し、３１容ミニジヤーフアメンターで３０℃、通気
１ｖｖｍ、攪拌５００ｒｐｍで２０時間培養した。
．３％、肉エキス０．３％、吉草酸０．１％含有する培
地（ｐＨ６，０） １１に、キャンテ゛イダ・ルゴー
ザＩＦＯ０７５０（Ｃａｎｄｉｄａ ｒｕｇｏｓａ）を
植菌し、３１容ミニジヤーフアメンターで３０℃、通気
１ｖｖｍ、攪拌５００ｒｐｍで２０時間培養した。
その後、培養液に吉草酸３０ｇを添加し、カセイソーダ
で田７．０に調整し、更に７２時間反応を行なった。
で田７．０に調整し、更に７２時間反応を行なった。
得られた反応液を濃硫酸でＥ）Ｈ２，０とし、硫酸アン
モニウムを加え飽和溶液とした。
モニウムを加え飽和溶液とした。
次に等量の酢酸エチルで３回抽出し、抽出液を無水硫酸
ナトリウムで脱水し、これを減圧下、４０℃以下で溶剤
を除去して黄褐色油状物質を得た。
ナトリウムで脱水し、これを減圧下、４０℃以下で溶剤
を除去して黄褐色油状物質を得た。
この油状物質を重量５倍のシリカゲル（ワコーゲルＣ−
２００）を用いベンゼンで゛調製したカラムにかけた。
２００）を用いベンゼンで゛調製したカラムにかけた。
最初、カラム容量の６倍のベンゼン溶剤で洗浄し、未反
応の吉草酸を溶出除去し、次にベンゼン：アセトン（３
： １）溶剤でβ−ヒドロキシ吉草酸を溶出した。
応の吉草酸を溶出除去し、次にベンゼン：アセトン（３
： １）溶剤でβ−ヒドロキシ吉草酸を溶出した。
得られたβ−ヒドロキシ吉草酸画分を集め、減圧下、溶
剤を除去してシロップ状の物質２．７ｇを得た。
剤を除去してシロップ状の物質２．７ｇを得た。
この様にして得られたものは、ガスクロマトグラフィー
、シリカゲ゛ル薄層クロマトグラフィー、ＮＭＲ分析に
より高純度なβ−ヒドロキシ吉草酸であることが確認さ
れた。
、シリカゲ゛ル薄層クロマトグラフィー、ＮＭＲ分析に
より高純度なβ−ヒドロキシ吉草酸であることが確認さ
れた。
次に、このβ−ヒドロキシ吉草酸の旋光度をユニオン技
研製のテ゛イジタル自動旋光計ｐＭ１０１にて測定した
ところ結果は〔α〕乙５−６，７° （Ｃ，１，０、メ
タノール）であった。
研製のテ゛イジタル自動旋光計ｐＭ１０１にて測定した
ところ結果は〔α〕乙５−６，７° （Ｃ，１，０、メ
タノール）であった。
実施例 ２
吉草酸０．５％、グルコース２．０％、リン酸ニアンモ
ニウム１．３％、リン酸−カリウム０．７％、塩化ナト
リウム０．０１％、硫酸亜鉛０．００６％、硫酸第一鉄
０、００９％、イーストエキス０．５％含有培地（世６
．５）１１に、キャンデイダ・ルゴーザＩＦＯＯ７５０
を植菌し、３１容ミニジヤーフアメンターにて３０℃、
通気１，５ＶＶＩＴｌ、攪拌５００ｒｐｍで２４時間培
養、その後面を７．０にカセイソーダで維持し、更に２
４時間培養を行なった。
ニウム１．３％、リン酸−カリウム０．７％、塩化ナト
リウム０．０１％、硫酸亜鉛０．００６％、硫酸第一鉄
０、００９％、イーストエキス０．５％含有培地（世６
．５）１１に、キャンデイダ・ルゴーザＩＦＯＯ７５０
を植菌し、３１容ミニジヤーフアメンターにて３０℃、
通気１，５ＶＶＩＴｌ、攪拌５００ｒｐｍで２４時間培
養、その後面を７．０にカセイソーダで維持し、更に２
４時間培養を行なった。
この培養液を実施例１と同様に処理し、β−ヒドロキシ
吉草酸０．４２ｇを得た。
吉草酸０．４２ｇを得た。
旋光度は〔α〕ろ５−６．７° （Ｃ，１，０、メタノ
ール）であった。
ール）であった。
実施例 ３
グルコース３％、リン酸ニアンモニウム１．３％、リン
酸−カリウム０．７％、塩化ナトリウム０．０１％、硫
酸亜鉛０．００６％、硫酸第一鉄０．００９％、イース
トエキス０．５％含有培地（ｐＨ６，５） １１に、
キャンデイダ・ルゴーザＩＦＯＯ７５０を植菌し、３０
℃、通気１ｖｖｍ、攪拌７００ｒｐｍで２４時間培養し
、得られた培養液を遠心分離により菌体を集め、更に０
．９％食塩水で２回洗浄した菌体を得た。
酸−カリウム０．７％、塩化ナトリウム０．０１％、硫
酸亜鉛０．００６％、硫酸第一鉄０．００９％、イース
トエキス０．５％含有培地（ｐＨ６，５） １１に、
キャンデイダ・ルゴーザＩＦＯＯ７５０を植菌し、３０
℃、通気１ｖｖｍ、攪拌７００ｒｐｍで２４時間培養し
、得られた培養液を遠心分離により菌体を集め、更に０
．９％食塩水で２回洗浄した菌体を得た。
これをＭ／１５ ’Ｊン酸緩衝液（ｐＨ７，０）に懸濁
し、吉草酸３０ｇ、グルコース２ｇ添加し、ｐＨｅ７．
０にカセイソーダで調整して培養と同一条件で４８時間
反応させた。
し、吉草酸３０ｇ、グルコース２ｇ添加し、ｐＨｅ７．
０にカセイソーダで調整して培養と同一条件で４８時間
反応させた。
その後、実施例１と同様な方法で抽出精製を行ないβ−
ヒドロキシ吉草酸２．１ｇを得た。
ヒドロキシ吉草酸２．１ｇを得た。
旋光度は〔α）Ａ５６，８° （Ｃ，１，０、メタノー
ル）であった。
ル）であった。
実施例 ４
グルコース２％、イーストエキス０．５％、ペプトン０
．３％、肉エキス０．３％、吉草酸０．１％含有する培
地（ｐＨ６，０） １１に、キャンデイダ・ルゴーサ
ＩＦ０１５４２を植菌し、３１容ミニジヤーフアメンタ
ーで３０℃、通気１ｖｖｍ、攪拌５００ｒｐｍで２０時
間培養した。
．３％、肉エキス０．３％、吉草酸０．１％含有する培
地（ｐＨ６，０） １１に、キャンデイダ・ルゴーサ
ＩＦ０１５４２を植菌し、３１容ミニジヤーフアメンタ
ーで３０℃、通気１ｖｖｍ、攪拌５００ｒｐｍで２０時
間培養した。
その後、培養液に吉草酸３０ｇを添加し、カセイソーダ
で世７．０に調整し、更に７２時間反応を行なった。
で世７．０に調整し、更に７２時間反応を行なった。
得られた反応液を濃硫酸で世２．０とし、硫酸アンモニ
ウムを加え飽和溶液とした。
ウムを加え飽和溶液とした。
次に等量の酢酸エチルで３回抽出をし、抽出液を無水硫
酸ナトリウムで脱水し、これを減圧下、４０℃以下で溶
剤を除去して黄褐色油状物質を得た。
酸ナトリウムで脱水し、これを減圧下、４０℃以下で溶
剤を除去して黄褐色油状物質を得た。
この油状物質を重量５倍のシリカゲル（ワコーゲルＣ−
２００）を用いベンゼンで調製しかカラムにかけた。
２００）を用いベンゼンで調製しかカラムにかけた。
最初、カラム容量の６倍のベンゼン溶剤で洗浄し、未反
応の吉草酸を溶出除去し、次にベンゼン：アセトン（３
： １）溶剤でβ−ヒドロキシ吉草酸を溶出した。
応の吉草酸を溶出除去し、次にベンゼン：アセトン（３
： １）溶剤でβ−ヒドロキシ吉草酸を溶出した。
得られたβ−ヒドロキシ吉草酸画分を集め、減圧不溶剤
を除去しシロップ状の物質４．５ｇを得た。
を除去しシロップ状の物質４．５ｇを得た。
この様にして得られたものを実施例１と同様の分析を行
ないβ−ヒドロキシ吉草酸である事が確認された。
ないβ−ヒドロキシ吉草酸である事が確認された。
又、旋光度は〔α〕孔５＋６．５ （Ｃ，１，０、メタ
ノール）であった。
ノール）であった。
実施例 ５
吉草酸０．５％、グルコース２．０％、リン酸ニアンモ
ニウム１．３％、リン酸−カリウム０．７％、塩化ナト
リウム０．０１％、硫酸亜鉛０．００６％、硫酸第一鉄
０、００９％、イーストエキス０．５％含有培地（Ｉｉ
（６，５）１１に、キャンデイダ・ルゴーザＩＲＯ１５
４２を植菌し、３１容ミニジヤーフアメンターにて３０
℃、通気１，５ｖｖｍ、攪拌５００ｒｐｍで２４時間培
養、その後田予７．０にカセイソーダで維持し、更に２
４時間培養を行なった。
ニウム１．３％、リン酸−カリウム０．７％、塩化ナト
リウム０．０１％、硫酸亜鉛０．００６％、硫酸第一鉄
０、００９％、イーストエキス０．５％含有培地（Ｉｉ
（６，５）１１に、キャンデイダ・ルゴーザＩＲＯ１５
４２を植菌し、３１容ミニジヤーフアメンターにて３０
℃、通気１，５ｖｖｍ、攪拌５００ｒｐｍで２４時間培
養、その後田予７．０にカセイソーダで維持し、更に２
４時間培養を行なった。
この培養液を実施例１と同様に処理し、β−ヒドロキシ
吉草酸吉草酸０．５１ｇを得た。
吉草酸吉草酸０．５１ｇを得た。
旋光度は〔α〕八へ＋６．７° （Ｃ，１，０、メタノ
ール）であった。
ール）であった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 吉草酸に、このものをβ−ヒドロキシ吉草酸に変換
する能力を有するキャンデイダ属に属する微生物を作用
せしめ、生成したβ−ヒドロキシ吉草酸を採取すること
を特徴とするβ−ヒドロキシ吉草酸の製造法。 ２ 吉草酸を添加した培地で微生物を培養することによ
り、微生物を吉草酸に作用させる特許請求の範囲第１項
記載の製造方法。 ３ 微生物を栄養培地で培養して得た培養液を吉草酸に
作用させる特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ４ 微生物を栄養培地で培養して得た培養液から微生物
菌体を分離して菌体懸濁液を調製し、それを吉草酸に作
用させる特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ５ 微生物がキャンデイダ・ルゴーザである特許請求の
範囲第１項記載の製造方法。 ６ 微生物の培養をＴＢ４．０〜９．５の範囲で行ない
、培養液又は菌体懸濁液と吉草酸との反応ｅｐＨ６，０
〜９．０の範囲で行なう特許請求の範囲第３項又は第４
項記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14025680A JPS5953838B2 (ja) | 1980-10-06 | 1980-10-06 | β−ヒドロキシ吉草酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14025680A JPS5953838B2 (ja) | 1980-10-06 | 1980-10-06 | β−ヒドロキシ吉草酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5765188A JPS5765188A (en) | 1982-04-20 |
| JPS5953838B2 true JPS5953838B2 (ja) | 1984-12-27 |
Family
ID=15264546
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14025680A Expired JPS5953838B2 (ja) | 1980-10-06 | 1980-10-06 | β−ヒドロキシ吉草酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5953838B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6122526U (ja) * | 1984-07-13 | 1986-02-10 | 光洋機械産業株式会社 | ペ−スト用のミキサ− |
| US7091011B2 (en) | 2000-08-04 | 2006-08-15 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | 3-hydroxycarboxylic acid production and use in branched polymers |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3375024D1 (en) * | 1982-03-16 | 1988-02-04 | Kanegafuchi Chemical Ind | Process for producing d-beta-hydroxyalkanoic acid |
-
1980
- 1980-10-06 JP JP14025680A patent/JPS5953838B2/ja not_active Expired
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6122526U (ja) * | 1984-07-13 | 1986-02-10 | 光洋機械産業株式会社 | ペ−スト用のミキサ− |
| US7091011B2 (en) | 2000-08-04 | 2006-08-15 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | 3-hydroxycarboxylic acid production and use in branched polymers |
| US7138480B2 (en) | 2000-08-04 | 2006-11-21 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | 3-Hydroxycarboxylic acid production and use in branched polymers |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5765188A (en) | 1982-04-20 |
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