JPS626559B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

この発明は、薬用ニンジンの地下部並びに地上
部より含有するニンジンサポニンを分離する方法
に関する。 更に詳しくは、この発明は薬用ニンジンの地下
部または地上部を脱脂処理するかせずして、水、
低級アルコールまたは含水低級アルコールにて抽
出し、その濃縮物を水または約30％以下の低級ア
ルコール含有水に溶解し、この溶液を巨大網状構
造で多孔性の架橋されたポリスチレン系樹脂吸着
剤と接触させて、ニンジンサポニンを吸着せしめ
た後、低級アルコールまたは約30％以上の低級ア
ルコール含有水で溶離処理し、ニンジンサポニン
を分離することを特徴とするニンジンサポニンの
分離法に関する。 薬用ニンジン中、特にウコギ科
（（Araliaceae）に属するオタネニンジン（パナツ
クス・ギンゼング、シー・エー・メイヤー、
Panax ginseng C.A.MEYER）は一名朝鮮人参
と呼ばれ古来より滋養、強壮、消炎、抗疲労剤と
して用いられてきたが、これらの作用は含有され
るサポニン群が主体となつていることが明らかに
されつつあり、これ以外にも近時ニンジンサポニ
ンに抗癌作用、抗潰瘍作用、強心作用のあること
が見出され、副作用のない新医薬品として注目さ
れている。 すでに抽出法においては日本特許第725554号
（特公昭48−5016号）や特公昭43−12724号にみら
れるように、オタネニンジンよりサポニンを得る
方法が提案されている。ところが、これらの方法
では高価なｎ−ブタノール、エーテルまたはクロ
ロホルム等を使用しなければならず、しかも、そ
の抽出効率の低さから、大量の溶媒を使用し、か
つ抽出、濃縮といつた操作を繰り返す必要があ
り、工程が非常に繁雑であり工業的に実施する上
で題題があり、効率よく簡便にサポニンを分離す
る方法が望まれていた。 この発明の発明者らは、上記のような点を解決
するために鋭意研究の結果、水やメタノールとい
つた非常に安価な溶媒系でのポリスチレン系合成
樹脂吸着剤への吸着、それに続く溶離により薬用
ニンジンのサポニンを効率よく簡便に分離できる
ことを見出しこの発明に到達した。 この発明におけるサポニン成分を含有するニン
ジンとしては、オタネニンジンが最も好ましいも
のである。その他、これと類縁植物であるトチバ
ニンジン（パナツクス・ヤポニカス、シー・エ
ー・メイヤー、Panax japonicus C.A.
MEYER）、アメリカニンジン（パナツクス・キ
ンキユホリウム、リンネ、Panax quinquefolium
LINNE）、三七ニンジン（パナツクス・プソイ
ド・ギンゼング、ワーリツヒPnanx pseudo−
gineng WALICHまたはパナツクス・ノトギンゼ
ング・バーキル、Panax notoginseng
BURKILL）が挙げられる。 上記のような薬用ニンジンのうち、例えばオタ
ネニンジンに関しては、その地下部並びに地上部
より現在までに15種のサポニン（ギンゼノサイド
Ro，Ra，Rb₁，Rb₂，Rb₃，Rc，Rd，Re，Rf，
Rg₁，Rg₂，Rg₃，Rh₁，Rh₂，20グルコ−ギンゼ
ノサイドRf）が見出され、そのうちギンゼノサ
イドRa，Rg₃，Rh₁，Rh₂を除く11種のサポニン
の構造が決定されている〔Chem Pharm.Bull.、
421〜428（1974）および薬学雑誌94(2)、252〜260
（1974）参照〕。 この発明で分離する成分は薬用ニンジンに含有
されるほとんどすべてのサポニンであり、構造既
知、構造未知を問わない。 次に、この発明の方法に用いる巨大網状構造で
多孔性の架橋されたポリスチレン系樹脂吸着剤
は、スチレンとジビニルベンゼンより重合して得
られるものをいい、例えばスチレンとジビニルベ
ンゼンのモノマーを水に懸濁し、これに任意に適
当な溶媒を加えて重合して得られ、その表面が非
極性のものである。 具体的には、例えば市販の商品であるアンバー
ライトXAD−１またはXAD−２（ローム・アン
ド・ハース社製）やセルヴアクロムXAD−
Type2（セルヴア社製）等が挙げられる。 上記のうちアンバーライトXAD−１および
XAD−２の性質を表１に示す。

【表】 この発明の製造法においては、原料となる薬用
ニンジンを脱脂処理せずに、あるいはベンゼンや
ｎ−ヘキサンのような通常の脂溶性有機溶媒を用
いて脱脂処理後抽出が行なわれる。 抽出には、水、メタノールやエタノールのよう
な低級アルコールあるいは含水メタノールや含水
エタノールのような含水低級アルコールが用いら
れる。抽出液は蒸発濃縮して濃縮物とする。低級
アルコールを用いた場合は乾固するまで濃縮する
のが好ましい。 次にこの濃縮物を水または30％（容量％を意味
し以下同様）以下の低級アルコール含有水（例え
ば含水メタノールや含水エタノール）に溶解し、
得られる溶液を前記のポリスチレン系樹脂吸着剤
と接触させて、ニンジンサポニンを吸着させる。
この接触は、例えば前記濃縮物を溶解した溶液を
上記ポリスチレン系樹脂吸着剤の層に通過させた
り、前記溶液と樹脂とを混合したりすることによ
り達成することができる。この吸着操作の際の樹
脂の使用量は含有サポニン量の20倍〜300倍量、
望ましくは40倍〜150倍量である。 一般的には、吸着の後、水または約30％以下の
低級アルコール含有水で樹脂をよく洗い、ニンジ
ン中に含まれる糖類、色素、澱粉等の夾雑物を除
去するのが望ましい。次いで、溶離剤で処理して
樹脂よりニンジンサポニンを溶離せしめる。溶離
剤としては、エタノールやメタノールのような低
級アルコールや、約30％以上の低級アルコール含
有水が用いられる。特にメタノールの使用が好ま
しい。 また、溶離の操作において溶離剤としてのアル
コール濃度を変化させることにより、ニンジンサ
ポニン中の各サポニンを粗分割することができ
る。 すなわち、例えば前記方法でニンジンサポニン
を吸着した樹脂を最初50％のメタノール含有水で
溶離し、次いで90％以上のメタノール含有水で溶
離すると主として50％のメタノール含有水中には
ギンゼノサイドRb₁，Rd，Re，Rg₁が溶離し、引
続き溶離せしめた90％以上のメタノール含有水中
にはギンゼノサイドRb₂，Rg₂，Rc並びに少量含
有サポニンであるギンゼノサイドRo，Ra，Rf，
Rg₃，Rh₁，Rh₂、20グルコ−ギンゼノサイドRf
が溶離してくる。 このようにニンジンサポニンを粗分割して得ら
れることは、カラムクロマトグラフイーに付して
ニンジンサポニンを構成する各単一サポニンに分
割するとき、操作の簡便化が計れ、大きなメリツ
トをもたらす。 次に実施例を挙げてこの発明を説明する。 実施例 １ 乾燥した４年生オタネニンジン（韓国産：朝鮮
人参）２Kgを細切し、ｎ−ヘキサン10で１時間
加熱して脱脂した。その脱脂乾燥物を10の99％
メタノールを加え60℃で１時間加熱抽出した。こ
の操作を３回行い、各液を合し、60℃以下の温
度で減圧濃縮乾燥し、蒸発残留物50ｇを得た。こ
れを20％のメタノール含有水100mlに溶解し、含
成樹脂吸着剤セルヴアクロムXAD−Type2 1.8Kg
を３の水に分散させ、内径８cmのカラムに充填
したセルヴアクロムXAD−Type2カラムに上よ
り注入し、流速20ml／分の速度で通過させサポニ
ンを吸着せしめた。この流下が終つてから、更に
流下液の着色のなくなるまで20％のメタノール含
有水を追加流下せしめ不純物を除去した。着色が
なくなつてから99％メタノールを注入し、流速10
ml／分の速度で99％メタノールを流下させ、セル
ヴアクロムに吸着しているサポニンを溶離させ
た。溶離の完了は薄層クロマトグラフイー〔担
体：キーゼルゲルF₂₅₄、溶剤：クロロホルム／メ
タノール／水（65：35：10下層）、検出：１％第
二硫酸セリウム−10％硫酸噴霧後105℃で５分加
熱〕でチエツクした。５の99％メタノールの流
下によつて完全にサポニンを溶離した。得られた
溶離液を60℃以下で蒸発乾固し、残留物を60℃で
乾燥して黄褐白色のニンジンサポニン末36ｇを得
た。 得られたものは下記のごとき性質を示し、サポ
ニンであることが確認された。 (i) 白色ないし黄褐白色の苦味を有する粉末であ
る、 (ii) 赤外部吸収、IR νmax（ヌジヨール）：
3400（br）、1655、1710、1050（br）cm^-1 (iii) 薄層クロマトグラフイー（上記と同条件）に
付したところ、原点に止まるものがなく第１図
に示す各スポツトが何れも紅紫色を示す、 (iii) 酸加水分解により水可溶部よりブドウ糖、少
量のラムノース、アラビノースおよびキシロー
スが得られ、水不溶部より構成ゲニン体として
パナキサダイオール（C₃₀H₅₂O₃、融点250
℃）、パナキサトリオール（C₃₀H₅₂、O₄、融点
238〜239℃）が得られる、 (iv) 水に易溶、メタノール、エタノールに可溶、
クロロホルム、エーテル、四塩化炭素に難溶
で、その水溶液は中性を呈する、 (v) リーベルマン反応、ザルコウスキー反応は陽
性である、 (vi) 水中に添加して振とうすると持続性の小泡が
発生する。 実施例 ２ 乾燥した４年生オタネニンジン地下部（韓国産
朝鮮人参）２Kgを細切し、10の99％メタノール
を加え60℃で１時間加熱抽出した。この操作を３
回行い、各液を合し、60℃以下の温度で減圧濃
縮乾燥し、蒸発残留物（抽出エキス）48ｇを得
た。これを20％のメタノール含有水100mlに溶解
し、合成樹脂吸着剤アンバ−ライトXAD−２
５を７の水に分散させ、内径10cmカラムに充
填したアンバーライトXAD−２カラムに上より
注入し、流速20ml／分の速度で通過させサポニン
を吸着せしめた。この流下が終つてから更に流下
液の着色のなくなるまで水を追加し流下水洗し、
不純物を除去した。着色が全くなくなつてからメ
タノールを流下速度10ml／分で流下させ、アンバ
ーライトXAD−２に吸着されたサポニンを溶離
した。溶離の完了は実施例１と同様にして薄層ク
ロマトグラフイーによつてチエツクした。10の
99％メタノールの流下で完全にサポニンは溶離さ
れた。次に、得られた溶離液を60℃以下で蒸発乾
固し、残留物を60℃で乾燥して黄褐白色のニンジ
ンサポニン末35ｇを得た。 実施例 ３ 乾燥した６年生オタネニンジン地上部２Kgを細
切し、ベンゼン10で１時間加熱して脱脂し、そ
の脱脂乾燥物に10の99％メタノールを加え、60
℃で１時間加熱抽出した。この操作を３回行い、
各液を合し、60℃以下の温度で減圧濃縮乾燥
し、蒸発残留物42ｇを得た。これを20％のメタノ
ール含有水100mlに溶解し、合成樹脂吸着剤セル
ヴアクロムXAD−Type2 1.8Kgを３の水に分散
させ内径８cmのカラムに充填したセルヴアクロム
XAD−Type2カラムに上より注入し、流速20
ml／分の速度で通過させサポニンを吸着せしめ
た。流下が終つてから、次に流下液の着色がなく
なるまで20％のメタノール含有水を追加流下させ
不純物を除去した。着色がなくなつてから99％メ
タノールを注入し同様に流速10ml／分の速度で99
％メタノールを流下させセルヴアクロムに吸着し
たサポニンを溶離させた。溶離の完了は実施例１
と同様にして薄層クロマトグラフイーでチエツク
した。５の99％メタノールの流下で完全にサポ
ニンを溶離した。得られた溶離液を60℃以下で蒸
発乾固し、残留物を60℃で乾燥して黄白色のニン
ジンサポニン24ｇを得た。 このようにして得られたものを薄層クロマトグ
ラフイー（実施例１と同条件）に付したところ原
点に止まるものがなく、第２図に示す各スポツト
がいずれも紅紫色を示した。 実施例 ４ 乾燥した４年生オタネニンジン地下部（韓国産
朝鮮人参）２Kgを細切し、ベンゼン10で１時間
加熱して脱脂し、その残留物に乾燥し、10の99
％メタノールを加え、60℃で１時間加熱する操作
を３回繰り返した。各液を合し、60℃以下の温
度で減圧濃縮乾燥し、蒸発残留物53ｇを得た。こ
れを20％のメタノール含有水100mlに溶解し、合
成樹脂吸着剤セルヴアクロムXAD Type2 1.8Kg
を５の水に分散し、内径８cmのカラムに充填し
たセルヴアクロムXAD−Type2カラムに注入
し、流速20ml／分の速度で通過せしめ、サポニン
を吸着させた。次に、流下液の着色のなくなるま
で水を注加し、流下水洗して不純物を除いた。着
色がなくなつてから50％のメタノール含有水を溶
離剤と10ml／分の流速で注入流下させた。淡黄色
の着色がなくなるまで注加し、これには50％のメ
タノール含有水約５を要した。 次に溶離剤を99％メタノールに切り換え、流速
10ml／分で流下した。溶離の完了は実施例１と同
様にして薄層クロマトグラフイーで検出し、サポ
ニンの溶出が全くなくなつた時に流下を止めた。
５の流下で完全に溶離できた。 上記のようにして得られた50％のメタノール含
有水による溶離溶液を60℃で蒸発乾固し、残留物
を60℃以下で乾燥して、ギンゼノサイドRb₁，
Rd，Re，Rg₁を主体とした黄褐白色のニンジン
サポニン混合物13.4ｇを得た。 また、99％メタノール溶離溶液を60℃で蒸発乾
固し、残留物を60℃以下で乾燥して、ギンゼノサ
イドRb₂，Rg₂，Rcを主体とする黄褐白色のニン
ジンサポニン混合物16.6ｇを得た。

【図面の簡単な説明】

第１図はオタネニンジンの地下部より得たサポ
ニンを薄層クロマトグラフイーに付した際のクロ
マトグラムであり、第２図はオタネニンジンの地
上部より得たサポニンを薄層クロマトグラフイー
に付した際のクロマトグラムである。 図中のRb₁，Rb₂……等は各々のギンゼノサイ
ドを意味する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 薬用ニンジンの地下部または地上部を脱脂処
   理するかせずして、水、低級アルコールまたは含
   水低級アルコールにて抽出し、その濃縮物を水ま
   たは約30％以下の低級アルコール含有水に溶解
   し、この溶液を巨大網状構造で多孔性の架橋され
   たポリスチレン系樹脂吸着剤と接触させて、ニン
   ジンサポニンを吸着せしめた後、低級アルコール
   または約30％以上の低級アルコール含有水で溶離
   処理し、ニンジンサポニンを分離することを特徴
   とするニンジンサポニンの分離法。 ２ 使用する低級アルコールがメタノールまたは
   エタノールである特許請求の範囲第１項記載の方
   法。 ３ 低級アルコールがメタノールである特許請求
   の範囲第１項記載の方法。 ４ ニンジンサポニンを吸着させた樹脂を溶離処
   理する前に、約30％以下の含水低級アルコールで
   洗浄処理する特許請求の範囲第１項〜３項の何れ
   かに記載の方法。 ５ 薬用ニンジンがオタネニンジン（パナツク
   ス・ギンゼング、シー・エー・メイヤー）、トチ
   バニンジン（パナツクス・ヤポニカス、シー・エ
   ー・メイヤー）、アメリカニンジン（パナツク
   ス・キンキユホリウム、リンネ）、三七ニンジン
   （パナツクス・プソイド・ギンゼング、ワーリツ
   ヒまたはパナツクス・ノトギンゼング、バーキ
   ル）である特許請求の範囲第１項〜４項の何れか
   に記載の方法。 ６ 薬用ニンジンがオタネニンジン（パナツク
   ス・ギンゼング、シー・エー・メイヤー）である
   特許請求の範囲第１項〜４項の何れかに記載の方
   法。