CN111072747A - 一种人参皂苷及其超声提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种人参皂苷及其超声提取方法，该提取方法包括样品处理、超声提取、硅胶吸附、洗脱液脱色与浓缩干燥等步骤。本发明提取方法的提取时间短，提取温度低，提取效率高。此外，整个提取分离过程采用乙醇溶液作为溶剂，不使用其他有毒有机溶剂，保证提取效率的同时，对环境污染小。本发明采用层析分离技术，提取物的杂质剔除彻底，于是明显提高了人参皂苷产品质量。

Description

一种人参皂苷及其超声提取方法

【技术领域】

本发明属于生物药物技术领域。更具体地，本发明涉及一种人参皂苷，还涉及所述人参皂苷的超声提取方法。

【背景技术】

人参皂苷(Ginsenosides)是一种固醇类化合物，三萜皂苷，主要存在于人参属药材中，具有抗肿瘤、抗心律失常、延缓衰老及增强免疫力等作用。人参皂苷被视为是人参中的活性成分，因而成为研究的热门目标。因为人参皂苷影响了多重的代谢通路，所以其效能也是复杂的，而且各种人参皂苷的单体成分难以分离出来。

目前，国内人参皂苷提取方法主要是传统溶剂提取法，水提醇沉法以及超临界萃取法、超声提取法等。但是，这些传统提取方法存在许多不可避免的技术缺陷，提取效率低，例如有效成分损伤严重，提取时间长，提取产物杂质含量高等；超临界萃取虽提取时间短，操作简单，但是其提取产物杂质含量相对较高，对人参皂苷单体分离较难，难以保证人参皂苷产品品质。超声波提取法具有高效、快速等优点，在天然产物有效成分被广泛使用。

因此，针对目前存在的技术缺陷，本发明人通过在大量实验研究与分析，终于完成了本发明。

【发明内容】

[要解决的技术问题]

本发明的目的是提供一种人参皂苷。

本发明的另一个目的是提供所述人参皂苷的超声提取方法。

[技术方案]

本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明涉及一种超声提取人参皂苷的方法。

该超声提取人参皂苷的方法的步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的药材粉碎成粉末，然后加入乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡；

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度30～60℃与超声频率40～100KHz 的条件下重复进行超声提取，提取液合并，减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到富含人参总皂苷的浸膏；

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与硅胶混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用乙醇溶液梯度淋洗，收集的淋洗经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入脱色剂，回流搅拌脱色、过滤、洗涤，收集滤液与洗涤液；

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，减压浓缩，再真空干燥，得到所述的人参皂苷。

根据本发明的一种优选实施方式，在步骤A中，含有人参皂苷的药材是三七、人参或西洋参。

根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤A中，所述药材粉的粒度是30～60目。

根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤A中，按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：5～15，让所述药粉在浓度为以体积计70-95％的乙醇水溶液中浸泡20～40min。

根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤B中，步骤A得到的浸泡物以同样方式提取2～4次，每次超声提取20～60min，合并的提取液在压力0.01～0.06MPa的条件下进行浓缩，得到相对密度为 1.10～1.20浸膏。

根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤C中，步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为200～300目的硅胶按照重量比1： 2～4混合均匀，接着装到硅胶层析柱中；使用浓度为以体积计75～ 100％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为4～6％的梯度与速度 0.1～0.5个柱体积/min进行淋洗。

根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤D中，所述的脱色剂是活性炭、氧化镁或硅藻土；所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计10～15％。

根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤E中，合并的滤液与洗涤液在温度40-60℃与相对压强-0.05～-0.10MPa的条件下进行减压浓缩。

根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤E中，减压浓缩物在温度40～60℃与相对压强-0.05～-0.10MPa的条件下进行真空干燥。

本发明还涉及采用所述超声提取人参皂苷方法所提取的人参皂苷。所提取人参皂苷的纯度是以重量计95％以上。

下面将更详细地描述本发明。

本发明涉及一种超声提取人参皂苷的方法。

该超声提取人参皂苷的方法的步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的药材粉碎成粉末，然后加入乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡；

根据本发明，在步骤A中，含有人参皂苷的药材是三七、人参或西洋参。本发明使用的三七、人参、西洋参都是目前市场上销售的产品。

在这个步骤中，使用现有药材粉碎设备将所述药材三七、人参、西洋参粉碎至粒度30～60目。所述的现有药材粉碎设备例如是由温岭市林大机械有限公司以商品名dfy-500中药材磨粉机销售的产品。在本发明中，如果三七等药材粉碎粒度小于30目，则粒径过大，提取时间长且提取不完全；如果三七等药材粉碎粒度大于60目，则粒径过小，不利于过滤，增加提取难度；因此，三七等药材粉碎粒度为 30～60目是合适的，优选地是40～50目。

根据本发明，在这个步骤中，按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：5～15，让所述药粉在浓度为以体积计70-95％的乙醇水溶液中浸泡20～40min。

让所述药粉在乙醇水溶液中浸泡的主要目的是使药粉能够充分浸润，提高提取效率。

本发明使用的乙醇水溶液浓度为以体积计70-95％，如果乙醇水溶液浓度低于所述的浓度范围，则会导致提取效率低，增加产物杂质；如果乙醇水溶液浓度高于所述的浓度范围，则会增加提取成本；因此，乙醇水溶液浓度在所述的浓度范围是恰当的，优选地是75-90％，更优选地是80-85％；

在本发明中，如果药粉与乙醇水溶液的比大于1：5，则容易导致提取不完全且提取效率低；如果药粉与乙醇水溶液的比小于1：15，则容易导致溶剂使用过大，增加提取成本；因此，药粉与乙醇水溶液的比为1：5～15是合理的，优选地是1：8～12。

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度30～60℃与超声频率40～100KHz 的条件下重复进行超声提取，提取液合并，减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到富含人参总皂苷的浸膏；

步骤A得到的浸泡物采用超声提取的主要目的是增加提取效率，减少有效成分的损失，降低提取成本。

在本发明中，在所述的超声频率范围内，如果超声提取温度低于 30℃，则提取速率相对较慢，容易提取不完全；如果超声提取温度高于60℃，则有效成分损失较大，产品杂质相对较多；因此，超声提取温度为30～60℃是合适的，优选地是38～52℃，更优选地是42～ 48℃；

在所述的超声提取温度范围内，如果超声频率低于40KHz，则提取速率相对较慢，容易提取不完全；如果超声频率高于100KHz，则有效成分损失较大，产品杂质相对较多；因此，超声频率为40～ 100KHz是恰当的，优选地是52～88KHz，更优选地是60～80KHz；

在这个步骤中，步骤A得到的浸泡物以同样方式提取2～4次，每次超声提取20～60min。每次超声提取的时间超过所述的范围是不可取的，这是因为容易造成有效成分损失较大，杂质含量增加，提取成本增加。

步骤A得到的浸泡物以同样方式提取2～4次，这样能够保证所述药粉含有的人参皂苷提取完全，即人参皂苷提取率达到95％以上。

本发明使用的超声提取设备是目前市场上销售的产品，例如由无锡沃信仪器制造有限公司以商品名恒温超声波提取机销售的产品。

合并的提取液在压力0.01～0.06MPa的条件下进行浓缩，得到相对密度为1.10～1.20浸膏。

将合并的提取液浓缩至浸膏相对密度为1.10～1.20，其主要的目的在于防止提取液对人参皂苷分离产生影响。

本发明使用的浓缩设备是目前市场上销售的产品，例如由上海亚荣生化仪器厂公司以商品名旋转蒸发器销售的产品。

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与硅胶混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用乙醇溶液梯度淋洗，收集的淋洗经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

在这个步骤中，步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为 200～300目的硅胶按照重量比1：2～4混合均匀，接着装到硅胶层析柱中；

在本发明中，富含人参总皂苷的浸膏与硅胶混合的基本目的是保证样品层平整，人参皂苷分离效果好。

在本发明中，如果所述浸膏与所述硅胶的重量比大于1：2，则混合不均匀，分离效果差；如果所述浸膏与所述硅胶的重量比小于1： 4，则样品层过厚，分离效果也差；因此，所述浸膏与所述硅胶的重量比为1：2～4是恰当的，优选地是1：2.4～3.6，更优选地是1：2.8～3.2。

本发明使用的硅胶是目前市场上销售的产品，例如由青岛基亿达硅胶试剂有限公司以商品名柱层层析硅胶销售的产品。本发明使用的硅胶粒度超过所述的范围是不合适的，因为硅胶粒径过大，吸附效果差，所得人参皂苷品质较差；硅胶粒度过小，淋洗速率较慢，溶剂使用较大，分离效率低。

使用浓度为以体积计75～100％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为4～6％的梯度与速度0.1～0.5个柱体积/min进行淋洗。

这个淋洗步骤的基本作用是依据浸膏中皂苷的极性梯度淋洗，保证人参皂苷与其余杂质能够完全分离，提高分离质量。

在淋洗过程中，采用常规薄层色谱法检测淋洗液，其人参皂苷含量低于以重量计1％时就结束淋洗。

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入脱色剂，回流搅拌脱色、过滤、洗涤，收集滤液与洗涤液；

在这个步骤中，洗脱罐是一种具有回流功能和Y型搅拌结构的用于洗脱液脱色的设备。本发明的淋洗液含有色素、糖类、脂类等物质而使其具有黄白色的颜色，而这些物质会影响人参皂苷的品质，于是需要洗脱除去。

本发明使用脱色剂通过吸附作用将淋洗液中的一些需要除去的物质洗脱，得到无色透明的洗脱液。

在步骤D中，所述的脱色剂是活性炭、氧化镁或硅藻土；它们都目前市场上销售的产品，例如由江苏宜青活性炭有限公司以商品名颗粒活性炭销售的活性炭、潍坊达康化工有限公司以商品名氧化镁销售的氧化镁、广州益康新材料科技有限公司以商品名硅藻土销售的硅藻土。

所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计10～15％。

在这个步骤中，过滤使用的设备是化工技术领域里通常使用的设备。

洗涤时使用的洗涤剂是无水乙醇、蒸馏水、丙二醇或丙三醇。洗涤条件如下：洗涤液为浓度95％乙醇；洗涤液用量为洗脱液的十分之一；洗涤方式为洗涤液均匀冲洗。

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，减压浓缩，再真空干燥，得到所述的人参皂苷。

根据本发明，在这个步骤中，合并的滤液与洗涤液在温度40-60℃与相对压强-0.05～-0.10MPa的条件下进行减压浓缩直至溶液完全除去得固体。接着，减压浓缩物在温度40～60℃与相对压强 -0.05～-0.10MPa的条件下进行真空干燥直至得固体粉末。

本发明使用的减压浓缩设备是目前市场上销售的产品，例如由上海亚荣生化仪器厂公司以商品名旋转蒸发仪销售的产品。本发明使用的真空干燥设备是目前市场上销售的产品，例如由上海科肯试验设备有限公司以商品名真空干燥箱销售的产品。

根据下述公式，由使用药材原料量、原料人参皂苷含量与提取得到的人参皂苷量可以计算出本发明提取方法的提取率为95％以上：

人参皂苷提取率＝

提取的人参皂苷量/(药材原料量×原料人参皂苷含量)

根据DB22/T 1668—2012标准，采用分光光度法方法检测，本发明方法提取产物含有以重量计80～96％人参皂苷、1～4％糖类、 0.5～2％油脂与0.1～1％无机盐等；由此计算得到人参皂苷产物的纯度达到以重量计95％以上。

本发明还涉及采用所述超声提取人参皂苷方法所提取得到的人参皂苷产物，它含有以重量计95％以上人参皂苷。

本发明超声提取人参皂苷的提取率达到10.0％以上，现有技术的溶剂提取法的提取率达到6.9％(参见文献高彩霞、王成章人参皂苷的提取和精制工艺研究[J].林产化工通讯，2005，39(5)：5-8.)，超临界提取法的提取率达到0.86％(参见文献张艳荣,张帅,樊红秀,et al.提取方法对吉林种植人参提取物皂苷含量及组成的影响[J].食品科学,2013(12):24-29.)。

本发明超声提取人参皂苷的提取时间是20-60min，提取温度是 30-60℃；现有技术的溶剂提取法的提取时间是2.5h，提取温度 80-90℃(参见文献高彩霞、王成章人参皂苷的提取和精制工艺研究[J]. 林产化工通讯，2005，39(5)：5-8.)，超声提取法的提取时间是3-12h，提取温度是25-45℃(参见文献张艳荣,张帅,樊红秀,et al.提取方法对吉林种植人参提取物皂苷含量及组成的影响[J].食品科学, 2013(12):24-29.)。

由此可见，本发明人参皂苷提取方法提取时间短，提取温度低，提取效率高。

[有益效果]

本发明的有益效果是：本发明改进了传统的人参皂苷提取工艺，通过引入超声波辅助提取人参皂苷，提取时间短，提取温度低，提取效率高。此外，整个提取分离过程采用乙醇溶液作为溶剂，不使用其他有毒有机溶剂，保证提取效率的同时，对环境污染小。同时，分离过程采用层析分离，对提取物杂质剔除率高，人参皂苷保留度高，可以明显提高人参皂苷的提取率与人参皂苷产品质量。

【具体实施方式】

通过下述实施例将能够更好地理解本发明。

实施例1：超声提取人参皂苷

该实施例的实施步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的三七药材粉碎成40目粉末，然后按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：15加入浓度为以体积计70％的乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡40min；

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度30℃与超声频率80KHz的条件下重复超声提取3次，每次超声提取34min，合并提取液在压力0.01MPa 的条件下减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到相对密度为1.18的富含人参总皂苷的浸膏；

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为200目的硅胶按照重量比1：3混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用浓度为以体积计75％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为5％的梯度与速度0.1个柱体积/min进行淋洗，收集的淋洗液经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入活性炭脱色剂；所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计10％，回流搅拌脱色、过滤、使用浓度为以体积计75％的乙醇洗涤液洗涤，收集滤液与洗涤液；

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，合并的滤液与洗涤液在温度50℃与相对压强-0.05MPa的条件下进行减压浓缩，再在温度46℃与相对压强-0.05MPa的条件下真空干燥，得到的产物采用本申请说明书描述的方法检测，其产物是纯度为以重量计95.1％的人参皂苷，其提取率是10.2％。

实施例2：超声提取人参皂苷

该实施例的实施步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的人参药材粉碎成30目粉末，然后按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：12加入浓度为以体积计86％的乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡26min；

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度60℃与超声频率40KHz的条件下重复超声提取4次，每次超声提取20min，合并提取液在压力0.02MPa 的条件下减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到相对密度为1.10的富含人参总皂苷的浸膏；

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为250目的硅胶按照重量比1：2混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用浓度为以体积计82％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为4％的梯度与速度0.2个柱体积/min进行淋洗，收集的淋洗经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入氧化镁脱色剂；所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计15％，回流搅拌脱色、过滤、使用浓度为以体积计90％的乙醇洗涤液洗涤，收集滤液与洗涤液；

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，合并的滤液与洗涤液在温度40℃与相对压强-0.06MPa的条件下进行减压浓缩，再在温度40℃与相对压强-0.06MPa的条件下真空干燥，得到的产物采用本申请说明书描述的方法检测，其产物是纯度为以重量计95.4％的人参皂苷，其提取率是10.6％。

实施例3：超声提取人参皂苷

该实施例的实施步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的西洋参药材粉碎成60目粉末，然后按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：5加入浓度为以体积计95％的乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡20min；

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度40℃与超声频率60KHz的条件下重复超声提取3次，每次超声提取60min，合并提取液在压力0.04MPa 的条件下减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到相对密度为1.14的富含人参总皂苷的浸膏；

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为300目的硅胶按照重量比1：4混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用浓度为以体积计100％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为6％的梯度与速度0.5个柱体积/min进行淋洗，收集的淋洗经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入硅藻土脱色剂；所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计12％，回流搅拌脱色、过滤、使用浓度为以体积计100％的乙醇洗涤液洗涤，收集滤液与洗涤液；

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，合并的滤液与洗涤液在温度50℃与相对压强-0.08MPa的条件下进行减压浓缩，再在温度60℃与相对压强-0.08MPa的条件下真空干燥，得到的产物采用本申请说明书描述的方法检测，其产物是纯度为以重量计96.1％的人参皂苷，其提取率是10.2％。

实施例4：超声提取人参皂苷

该实施例的实施步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的西洋参药材粉碎成50目粉末，然后按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：8加入浓度为以体积计78％的乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡33min；

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度50℃与超声频率100KHz的条件下重复超声提取2次，每次超声提取48min，合并提取液在压力 0.06MPa的条件下减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到相对密度为1.20 的富含人参总皂苷的浸膏；

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为250目的硅胶按照重量比1：3混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用浓度为以体积计92％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为5％的梯度与速度0.4个柱体积/min进行淋洗，收集的淋洗经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入活性炭脱色剂；所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计14％，回流搅拌脱色、过滤、使用浓度为以体积计95％的乙醇洗涤液洗涤，收集滤液与洗涤液；

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，合并的滤液与洗涤液在温度60℃与相对压强-0.10MPa的条件下进行减压浓缩，再在温度52℃与相对压强-0.10MPa的条件下真空干燥，得到的产物采用本申请说明书描述的方法检测，其产物是纯度为以重量计95.4％的人参皂苷，其提取率是10.4％。

实施例5：超声提取人参皂苷

该实施例的实施步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的三七药材粉碎成50目粉末，然后按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：15加入浓度为以体积计86％的乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡20min；

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度50℃与超声频率80KHz的条件下重复超声提取4次，每次超声提取60min，合并提取液在压力0.06MPa 的条件下减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到相对密度为1.16的富含人参总皂苷的浸膏；

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为200目的硅胶按照重量比1：2混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用浓度为以体积计92％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为6％的梯度与速度0.1个柱体积/min进行淋洗，收集的淋洗经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入活性炭脱色剂；所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计15％，回流搅拌脱色、过滤、使用浓度为以体积计85％的乙醇洗涤液洗涤，收集滤液与洗涤液；

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，合并的滤液与洗涤液在温度50℃与相对压强-0.10MPa的条件下进行减压浓缩，再在温度46℃与相对压强-0.06MPa的条件下真空干燥，得到的产物采用本申请说明书描述的方法检测，其产物是纯度为以重量计95.6％的人参皂苷，其提取率是10.7％。

实施例6：超声提取人参皂苷

该实施例的实施步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的西洋参药材粉碎成30目粉末，然后按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：5加入浓度为以体积计78％的乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡40min；

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度60℃与超声频率60KHz的条件下重复超声提取2次，每次超声提取34min，合并提取液在压力0.02MPa 的条件下减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到相对密度为1.15的富含人参总皂苷的浸膏；

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为250目的硅胶按照重量比1：3混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用浓度为以体积计82％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为6％的梯度与速度0.4个柱体积/min进行淋洗，收集的淋洗经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入硅藻土脱色剂；所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计10％，回流搅拌脱色、过滤、使用浓度为以体积计80％的乙醇洗涤液洗涤，收集滤液与洗涤液；

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，合并的滤液与洗涤液在温度40℃与相对压强-0.08MPa的条件下进行减压浓缩，再在温度52℃与相对压强-0.05MPa的条件下真空干燥，得到的产物采用本申请说明书描述的方法检测，其产物是纯度为以重量计95.1％的人参皂苷，其提取率是10.4％。

Claims (10)

1.一种超声提取人参皂苷的方法，其特征在于该方法的步骤如下：

A、样品处理

将含有人参皂苷的药材粉碎成粉末，然后加入乙醇水溶液，混合均匀，接着在室温下浸泡；

B、超声提取

让步骤A得到的浸泡物在温度30～60℃与超声频率40～100KHz的条件下重复进行超声提取，提取液合并，减压蒸馏回收乙醇，并浓缩得到富含人参总皂苷的浸膏；

C、硅胶吸附

使用水将步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与硅胶混合均匀，让其挥发至干，接着装到硅胶层析柱中，使用乙醇溶液梯度淋洗，收集的淋洗经薄层色谱检测，将含人参皂苷的洗脱液合并；

D、洗脱液脱色

把步骤C得到的合并洗脱液加到洗脱罐中，再加入脱色剂，回流搅拌脱色、过滤、洗涤，收集滤液与洗涤液；

E、浓缩干燥

将步骤D得到的滤液与洗涤液合并，减压浓缩，再真空干燥，得到所述的人参皂苷。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤A中，含有人参皂苷的药材是三七、人参或西洋参。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于在步骤A中，所述药材粉的粒度是30～60目。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤A中，按照以克计药粉与以毫升计乙醇水溶液的比1：5～15，让所述药粉在浓度为以体积计70-95％的乙醇水溶液中浸泡20～40min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤B中，步骤A得到的浸泡物以同样方式提取2～4次，每次超声提取20～60min，合并的提取液在压力0.01～0.06MPa的条件下进行浓缩，得到相对密度为1.10～1.20浸膏。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤C中，步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏与粒度为200～300目的硅胶按照重量比1：2～4混合均匀，接着装到硅胶层析柱中；使用浓度为以体积计75～100％的乙醇水溶液按照该水溶液相邻浓度差为4～6％的梯度与速度0.1～0.5个柱体积/min进行淋洗。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤D中，所述的脱色剂是活性炭、氧化镁或硅藻土；所述脱色剂的用量是以步骤B得到的富含人参总皂苷的浸膏重量计10～15％。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤E中，合并的滤液与洗涤液在温度40-60℃与相对压强-0.05～-0.10MPa的条件下进行减压浓缩。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤E中，减压浓缩物在温度40～60℃与相对压强-0.05～-0.10MPa的条件下进行真空干燥。

10.根据权利要求1-9中任一项权利要求所述方法提取得到的人参皂苷，其特征在于它的纯度是以重量计95％以上。