JPS62294607A - 口腔用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ８、発明の詳細な説明 （技術分野） 本発明はストレプトコッカス・ミュータンス（５ｔｒｅ
ｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｍｕｔａｎｓ　＋以下Ｓ０ｍと路
記する）の活性阻害効果、歯垢形成抑制効果に優れ、歯
垢付着抑制、虫歯（う蝕〕予防に有用なる口腔用組成物
に関する。

（従来技術） 従来より、歯垢が虫歯となる主因であることが知られて
いる。この歯垢に関与するＳ６ｍの活性または増殖を阻
害することを目的として、特開昭５４−１５７８４２号
公報には、カチオン性ガラクトマンナン（グアーガムの
第４アンモニウム誘４体）カチオン性セルロース等を配
合してなる抗う蝕製剤が提案されている。また、特開昭
５９−１０１４１６号公報には、キチンまたはキトサン
を含有する口腔用組成物が提案され、また特開昭５５−
６９５０６号公報には、Ｎ−７セチルガラクトサミン等
のＮ−アセチル化アミノ糖類を配合してなる歯垢形成を
抑制する口腔用組成物が提案されている。

しかし、上記のカチオン性ガラクトマンナン、カチオン
性セルロース及びキトサン等はＳ、ｍの活性阻害効果は
認められるが、ω垢形成抑制効果に乏しいこと等の欠点
を有し、またＮ−アセチル化アミノ糖類は、Ｓ８ｍ活性
阻害効果及び歯垢形成抑制効果は、はとんど認められず
、これらを配合してなる口腔用組成物は、実用上の歯垢
付着抑制及び虫歯予防効果を１足できるものではなかっ
た。

（発明の開示） そこで、本発明者等は、Ｓ、ｍの活性阻害効果を有する
物質に関して鋭意研究した結果、前記、特開昭５４−１
５７８４２号公報に何ら記載の無い、ガラクトサミンを
主構成成分とする多ｔ１またはその塩（以下、ポリガラ
クトサミン類と略記する）がＳ０ｍの活性阻害効果及び
歯垢形成抑制効果に著効を呈し、また、このポリガラク
トサミン類を配合してなる口腔用組成物は実用上に於い
ても、歯垢付着抑制効果に優れていることを確認して本
発明を完成するに至った。

（発明の目的） 即ち、本発明の目的は歯垢付着抑制及び虫歯予防効果に
優れた有用なる口腔用組成物を提供するにある。

（発明の構成） 本発明は、ガラクトサミンを主構成成分とする多糖及び
／またはその塩を配合してなる口腔用組成物である。

（！Ｒ成の具体的な説明） 本発明に用いるガラクトサミンを主構成成分とする多糖
（以下、ポリガラクトサミンと略記する）は、公知の物
質であって、特公昭５６−１２６８９号公報及びアグリ
カルチユラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー
（ＡｇｒｉｃｕＪｔｕｒａｄ　Ａｎｄ　Ｂ−ｉｏｊｏｇ
ｌｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ　）　を第４９巻、第８１
５９〜８１６４頁、１９８５年、並びにザ・ジャーナル
・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（ＴｈｅＪｏｕ
ｒｎａｌ　ｏｆ　ＢＩｏＪｏｇｌｃｍＪ　Ｃｈｅｍｉｓ
ｔｒｙ　）　＋第２８５巻、第２６８８〜２５４１頁、
１９６０年、９月等にはその製造法と化学特性が記載さ
れている。

例えば、上記特公昭５６−１２６８９号公報の記載に準
じる製造法にて、後記の製造例１の如く、ペエシロマイ
セス属（ＰａｅｃｉＪｏｍｙｃｅｓ　）に属するポリガ
ラクトサミン生産菌（微工研寄託ＦＥＲＭ−ＰＮｏ。

８９２８）の培養物より高純度のポリガラクトサミン（
ポリガラクトサミンＡ）を得た。

本発明に用いるポリガラクトサミンは、Ｑ成アミノ糖と
してガラクトサミンを９０モル嘩以上含有することが好
ましく、一部にＮ−アセチル化物等を含有するものであ
ってもよい これらのポリガラクトサミンは、後述の諸特性に於いて
、すべて同様な効果を呈することが確認された。

また、ポリガラクトサミンは水に難溶性であり、必要に
応じて、水溶解性を高めるために、ポリガラクトサミン
と通常の酸との中和塩の形で用いられる。か＼る塩とし
ては、塩酸墳、酢酸塩、コハク１１′２塩、燐醋塩等が
好適である。

製造例１ （１）ポリガラクトサミンへの製造 ■　グルコース６００ｇ、ポリペプトン６０ｇ、ＣａＣ
ｌ２−２Ｈ２０１２５、ｌｉ’を水道水１７１に溶解し
、ｆ４　ＮａＯＨ溶液でｐＨ７，０に調整した後８０ｊ
容ジャーファーメンタ−に移し、この培地溶液に蒸気を
注入することにより加圧、加熱滅菌（１２１°Ｃｌ２Ｏ
分間）を行った。

■　冷却後の培地（最終液ｆｆ１２０１　’）に、５０
０ｍ１容三角フラスコ中、１５０ｍ１の同組成の培地（
グルコース８チ、ポリペプトン０．８％ＣａＣ１ｚ　Ｏ
，５％、ＰＨ７，０）を用いて２６°Ｃで４日間振盪培
養したペエシロマイセスＩ　−１（ＦＥＲＭ−ＰＮｏ、
８９２８）を、容量比で約１０％無菌的に接種した後、
温度２７℃、通気量５ＶＶＭ、撹拌数２０ＯＲＰＭの条
件で５日間培養した。

■　培養終了後培養物を戸布濾過することにより培養ｐ
液１７１を得た。

■　この培養Ｆ液を５０°Ｃ〜６０°Ｃに加熱しながら
分画分子量１６万の限外濾過膜（三菱レイヨン・エンジ
ニアリングａ＊ＵＦ［チューブラ−モジュールＦタイプ
）を通過させることにより、低分子画分を除き液量が約
８２になる迄濃縮した。

■　更に、約１４，０ＯＯＸＧで遠心丹心することによ
り菌体残渣、熱変性蛋白質を除去した。

■　遠心分離後の上澄液画分８１に食塩約６００ｇ（約
２０％濃度）を加え撹拌し、溶解後、濃ＮａＯＨでＰ）
ｌを７．０〜８．６にｋＡ益した。−夜装置し塩析物を
十分析出させた後、サラン製の布（塩化ビニリデンと塩
化ビニールの共重合体）上に塩析物を回収し、更に、こ
の塩析物の上から大量の微アルカリ性の水（ＰＨ７，０
以上）を撒布することにより、余分の食垣及び培寂液に
ｒ１１１ｉ１時に混在している中性糖、その他の夾雑物
を洗い流した。

■　次に、水洗後の塩析物に０．１Ｍ塩酸溶液を容量比
で約８倍語加え溶解した。この溶解物に１Ｎａ０１（溶
液を加え、ポリガラクトサミンの等電点であるＰ　Ｈ８
，５に合せた。−夜装置し十分析出物を析出させた後、
上記と同様サラン製の布上に析出物を回収し、大量の水
道水で洗った。この水洗物をもう一度０．１　Ｍ塩酸に
溶解後、等電点沈澱を行い水洗を繰返すことにより精製
した。

■　この精製した塩析物を１２１℃、１５分間滅菌後、
凍結乾燥することにより、ガラクトサ（ンを主成分とす
る多糖の精製粉末（ポリガラクトサミンＡ、ガラクトサ
ミンとしての純度的９６％）を７部得た。　　。

■　また、用途により上記精製粉末の１部を０．１Ｍ塩
酸に溶解し、分画分子量８０万の限外濾過膜（アミコン
社製分子篩膜タイプＸＭ８００）で分画し、ポリガラク
トサミンＡｌ（分子量１６万〜８０万）とポリガラクト
サミンＡ２（分子量８０万以上）に分画した。

（２）精製ポリガラクトサミンＡの特性■　外観性状；
淡褐色粉末 ■　液性；水分散液Ｐ　Ｈ＝　７．５ ■　呈色反応墨ニンヒドリン反応　　　士キサントプロ
ティン反応　　　− 工−リッヒ反応　　　　− モリッシュ反応　　　　士 フェノール硫酸法　　　士 レローセントテスト　　− ■　電気泳動；密度勾配等電点電気泳動により単一物質
として確認され、等電 点Ｃｐ１）は８．５である。

■　元素分析；窒素８．６４１炭素４２．８０％、水素
６．８７％、一般式（ＣｓＨ１ｔＮＯ４＊Ｘ５Ｈ２０）
ｎ ■　分子ｉ！に＋１６万以上 次に、製造例１で得たポリガラクトサミンＡＩ。

Ａ２　、その塩類、前記カチオン性ガラクトマンナン。

キトサン及びＮ−アセチル化アミノ糖類等の試料に関す
るＳ、ｍ活性阻害効果及び歯垢形成抑制効果を下記の実
験例にて説明する。

実験例ｌ ５０ｍ活性阻害効果を下記の■凝集力試験■抗菌力試験
を行い、評価した。

実験例１−■凝集力試験 菌体Ｓ、ｍ（ＪＣ２株（血清型Ｃ）Ｊを蒸留水で希釈し
、吸光度＝２　（５５０ｎｍ）になるＱ度の菌体分散液
を調製した。

上記菌体分散液と各々の試料溶液（濃度０．１　ｗ　ｔ
　。

％）の等量を試験管内で混合し、室温で１時間静置した
後、コントロール（菌体分散液の２倍希釈液）と比較し
て、菌体の凝集状態を下記の判定基準に従って肉眼で評
価し、その結果を◎Ｉ０１△。

Ｘで示し、第１表に記載した。

判定基準 菌体が明らかに凝集して沈殿物となる・・・・・・◎菌
体がほぼ凝集している　　・・・・・・・・・・・・・
・・・・・・・・・・・○菌体がやや凝集している　・
・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・△菌
体が全＜１ｙ！集していない　・・・・・・・・・・・
−・・・・・・・・　×実験例１−■抗菌力試験 滅菌法９６大のマイクロプレートを用い、試料の各段階
濃度サンプル１００１？　、Ｓ、ｍ　（、ＪＣ２（血清
型Ｃ）Ｊの前培養菌液ｌＯμｄ、ＢＨＩ培地９０μｌを
混合し、３７℃で４８時間培養し、その後、各人中の液
をＢＨｌｉ天プレート上に１白金耳植え付け、ガスパッ
クジャー内に８７℃、２４時間嫌気的に培養した。

寒天プレートに菌の発育が認められない試料の最小濃度
を算出し、殺菌力の力価を最小発育阻止濃度ＣＭＩＣ）
として表示した。その結果を：Ａ１　ｉ２右橢に記載し
た。

尚、実験例１及び後記の実験例２に於いて、ポリガラク
トサミン（フリー）の水溶液は、ポリガラクトサミン塩
酸塩の水溶液にＮａＯＨ水溶液を添加し、Ｐ　Ｈ＝　７
．５にｍ整して得た。

＠１表 実験例２ 歯牙の表面に付着したＳ１ｍの菌体表層に存在するグル
コース転位酵素（以下、ＧＴＦと略記する）と蔗糖等と
の反応により、粘着性の水不溶性グルカンが生成する。

この水不溶性グルカンが歯牙の表面に付着して歯垢が形
成することが知られている。

また、このＧＴＦの活性を阻害すれば、歯垢形成が抑制
されることが認められている。そこで、歯垢形成抑制効
果を下記の平滑面定着抑制試験を行い評価した。

実験例２−■平滑面定着抑制試験 Ｓ１ｍ　（８１３Ｎ　（血清型ｄ）〕より分離したＧＴ
Ｆおよび蔗糖を用いて、ＧＴＦｏ、１ｗｔ％と庶法１０
Ｗ（−を含有するＧＴＦ水溶液を得る。

試験管内で、このＧＴＦ水溶液とｄ々の濃度からなる各
試料水溶液の各々等量を混合してＧＴＦおよび蔗糖の一
定量（ＧＴＦ　Ｏ，０５ｗｔ％、蔗糖５ｗｔ％）と第２
表に示す濃度の試料を含有する試験溶液を調製した。

次いで、試験管を８０°の角度に傾け、８７°Ｃの恒温
室内で１８時間反応させた。

試験管内の反応液を、フラッシュミキサーを用いて、所
定の撹拌処理をした後、浮遊する非定看性のグルカンを
試験管内より流出させて除いた。更に蒸留水を加えて、
同様な操作を２回繰り返して、非定看性のグルカンを試
験管内より取り除いた。

この試験管内に一定量の品留水を加えて、超音波処理を
行い、試験管内壁に定着した粘着性水不溶性グルカンを
均一に分散させた後、この分散液の吸光度（５５０ｎｍ
）を測定して、平滑面定着グルカン量を求めた。

各試料に関する平滑面定着グルカン量は、コントロール
（試料無添加）を１００とする吸光度の相対比較値で示
し、その；？１果を第２表に記試した。

上記実験例１．２で示すごとく、ポリガラクトサミン類
はＳ１ｍに対して凝集力と抗菌力を示し、Ｓ、ｍの活性
阻害効果を有すると共に、ＧＴＦの活性を阻害し、一段
と優れた歯垢形成抑制効果を発現することが明らかであ
った。

また、分子ｉ１６万以上のポリガラクトサミン類が、優
れた特性を有し、好適であることが認めらｎた。

実験例８ ポリガラクトサミン類が歯牙表面に吸着し、罰牙表面を
被覆し、かつ長時間吸着し留る特性があれば、歯牙表面
でＳ０ｍ及びＧＴＦの活性阻害と併せ歯牙表面への不溶
性グルカンの付着が阻害され長時間の歯垢抑制効果が期
待される。そこで、ポリガラクトサミンＡ２塩酸塩（分
子量８０万以上）の歯牙表面への吸着試験を行い評価し
た。

歯牙表面のエナメル質の主成分であるハイドロオキシア
パタイト（Ｃａ１ｏ（ＰＯ４）６（ＯＨ）２　］　（以
下ＨＡＩ）と略記する）に各濃度（０，０１？、０．０
５２．０．１８ａ、０．２７８ｗｔ　％　）のポリガラ
クトサミンＡ２塩酸塩を作用させ、ＨＡｐの単位ｍｇ当
りの吸着量とＬａ　ｎ−ｇｍｕ　ｉ　ｒの吸着等温式か
ら平衡段ＷＭを求めたつその結果は第８表に示した。

第３表 以上の結果をＬｘへｇｍ　ｕ　ｉ　ｒの等温式Ｃ／Ｑ＝
Ｃ／ｂ＋１／ａｂ　（記号はＣ；溶液ご１度（％）、Ｑ
：吸Ｍ　Ｉｉ（μｇ／ｍｇＨＡｐ　）、ａ：吸着定数、
ｂ：平衡吸着量）にあてはめて、平衡吸着コ１を求める
とポリガラクトサミンＡ２塩酸塩のＨＡ　ｐへの平衡吸
着量は１０．８　ｐｇ／ｍｇ　ＨＡｐとなる。

上記実験例３に示すように、ポリガラクトサミンＡ２塩
酸塩は歯牙表面のエナメル質の主成分であるＨＡｐに’
ａ’４することが明らかと与った。また、吸着後の離脱
は非常に緩慢であった。

このことは、ポリガラクトサミン類が前記のごと＜　Ｓ
、ｍ及びＧＴＦの活性阻害効果を有することの他に、歯
牙の表面にも吸着されることにより歯牙表面でこの阻害
効果を示すと同時に、後述の実用試験に於ける長時間の
歯垢付着抑制効果に著効を示したことの根拠となるもの
である。

また、ポリガラクトサミンは無毒性（ＬＤ５０＞８００
ｍｇ／　ｋｇ）　、はとんど無味無臭であると共に、後
述のごとく低濃度の配合量で有効であり、他の殺菌剤の
ごとく配合量に制限されることなく、柵々の剤型の口腔
用組成物に適用される。

ポリガラクトサミンの配合量は、口腔用組成物の総量を
基準として、ｏ、ｏｏｔ〜０．５ｗｔ’ｊが好適であり
、０．００１ｗｔ％未満では効果が充分に認められず、
０．５　ｗ　ｔ％を超えては、その増加分に見合った効
果を望めないものである。

本発明の口腔用組成物は、歯磨類、マウスウォッシ：Ｌ
類、トローチ類、チューイングガム類、口中清涼剤類等
々の剤型に適用され得る。

本発明の口腔用組成物に配合する他の成分として、発泡
剤或いは可溶化剤は、通常用いられるノニオン型界面活
性剤、アミノベタイン型またはイミダシリン型等の両性
界面活性剤が好適であり、また、増粘剤は、ヒドロキシ
エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロー
ス、ポリエチレングリコール（分子量５０〜５００万）
等のノニオン型高分子が好ましい。

その他通常に用いられる、各種研磨剤、湿潤剤、殺菌剤
、甘味剤、香料、抗炎症剤、薬効成分等々を本発明の目
的を達成する範囲で適宜調整して配合することも可能で
ある。

（実施例） 以下、実施例にて本発明を説明する。

尚、実施例に記載の実用試験は下記の通りに実施した。

実用試験（歯垢付着抑制試験） 健常な口腔状態にある被験者２０人（男子１０人、女子
１０人、年令２０〜８０才）の歯牙に付着した歯垢をブ
ラッシング及びフロス処理を行い除去し、各被験者の後
述する歯垢指数（以下、ＰＩと略記する）が０点である
ことを確認した。

被験者は２〜８０日間、計６〜９０回の食事の後に、試
料を所定の方法で利用した後、前記と同−ａ察部位のＰ
Ｉを再度測定した。

各試料に関する試験結果は、被験者２０人のＰＩの平均
値で示した。

Ｏ歯垢指数（Ｐｌａｑｕｅ　Ｉｎｄｅｘ　）被験者の前
歯上下各６歯、計１２歯の頬側及び舌側の観察部位にエ
リスロイシンを塗布し、下記の評価基準に基づいて、−
歯毎に観察部位を検査して評価点を求め、下式により歯
垢指ａ（ＰＩ）を算出する。

ＰＩ　＝評価点の合計／検査した歯の数（１２）実施例
１〜４．比較例１〜４ 〔マウスウォッシュ〕 下記の組成の内、ポリガラクトサミン等を第４表に記載
のごとく配合して各々の実施例及び比較例の口腔用組成
物を調製し、前記実用試験に於いて、２日間、計６回の
食事後に試料を利用した。

その試験結果を第４表に記載した。

（１）組成 （２）調製法 成分穴、（６）を各々溶解混合した後、成分（Ａ）　、
　（Ｂ）を均一に混合撹拌して各々のマウスウォッシュ
を調製した。

（３）特性 第４表に示すごとく、本発明の実施例１〜４のポリガラ
クトサ（ン類を配合したマウスウォッシュは、比較例１
〜４と比較して明らかに歯垢付着抑制効果が認められた
。

実施例６〜８．比較例５〜８ 〔練歯磨＾」 実施例１と同様に下記の組成の練歯磨を調製し、実用試
験に於いて、８０日間、計９０回の食小後にブラッシン
グと共に試料を利用した。その試験（１）組成 （２）　　調製法 成分穴、＠を各々溶解混合した後、成分穴、（Ｂ）を均
一に混合撹拌して各々の練歯磨を調製した。

（３）特性 第４表に示すごとく、練歯磨の実用試験に於いて、ブラ
ッシングを併用することによって実施例５〜８の練歯磨
は歯垢抑制効果に著効を示した。

また、ポリガラクトサミン類の配合量は０．００１ｗｔ
％でもその効果が認められた。

実施例９〜１１．比較例９ Ｌ練歯磨Ｂ」 下記の組成の内、ポリガラクトサミン及び研磨剤を第４
表に記載のごとく配合して各々の練歯磨を調製し、実用
試験に於いて、８０日間、計９０回の食蓼後にブラッシ
ングと共に試料を利用した。

その試験の結果を比４表に記載した。

（１）組成 （２）　調製法 成分穴、の）を各々溶解混合した後、成分穴、（鳩を均
一に混合撹拌して各々のｔｓ歯磨を調製した。

（３）特性 第４表に記載のごと（、研８剤を配合することによって
、本発明の実施例の練歯磨は、歯垢付着抑制効果が一段
と優れると共にニガ味、シブ味等の味も少く実用上に於
いて有用なる口腔用組成物（発明の効果） 以上記載のごとく、本発明は歯垢付店抑制効果に一段と
優れ、虫歯予防に有用なる口腔用組成物を提供すること
は明らかである。

ヒゲタ醤油株式会社−

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）ガラクトサミンを主構成成分とする多糖及び／ま
   たはその塩を配合してなる口腔用組成物。
2. （２）ガラクトサミンを主構成成分とする多糖がペエシ
   ロマイセス属（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）に属するポ
   リガラクトサミン生産菌の培養物より得られる特許請求
   の範囲第１項に記載の口腔用組成物。
3. （３）ガラクトサミンを主構成成分とする多糖が０．０
   ０１〜０．５重量％配合されている特許請求の範囲第１
   項または第２項に記載の口腔用組成物。