JPS62234037A

JPS62234037A - ２，７，１１−センブラトリエン−４，６，２０−トリオ−ル、その製造方法および該化合物からなるたばこ用香喫味改良剤

Info

Publication number: JPS62234037A
Application number: JP7256786A
Authority: JP
Inventors: Yoshinari Yamazaki; 山崎　嘉也; Yoichi Mikami; 三上　洋一
Original assignee: Japan Tobacco Inc
Current assignee: Japan Tobacco Inc
Priority date: 1986-04-01
Filing date: 1986-04-01
Publication date: 1987-10-14
Anticipated expiration: 2009-07-06
Also published as: JPH0651651B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、２，７．１１−センブラトリエン−４，６−
ジオールに微生物を作用させることにより得られる新規
な化合物２，７．１１−センブラトリエン−４，６，２
０−）ジオールに関するものである。本化合物はたばこ
用香喫味改良に有効な新規物質である。

〔従来技術〕

従来、たばこの製造工程で喫煙物に添加することによシ
、より好ましい喫味や香味を付与したｐ、あるいは喫煙
物素材の有する香喫味を改善するのに有効な化合物は、
既に数多く知られている。しかし、本発明の化合物は化
学物質としても新規であり、従って、従来たばこの製造
においても用いられたことがない。

〔発明が解決しようとする問題点〕

本発明は、最近の製品たばこの香喫味に対する消費者の
多様なニーズに対応しうる新しい加香料の開発と提供を
目的としてなされたものである。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、式（Ｉｔ）で示される２、７．１１−セ
ンブラトリエン−４，６−ジオール〔以下、化合物（ｌ
ｌ）という〕にバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）　ＮＨ５（微工研菌寄第４
４４８号〕を作用させることにより、変換物質として優
れた香喫味改良効果を有する式（１）で示される新規な
化合物２，７．１１−センブラトリエンー４　、６．２
０−トリオール〔以下、化合物（１）という〕が得られ
ることを見出し本発明をなすに至った。

以下に、この化合物の分析データを示す。

分子式：Ｃ１ｏＨｓ４０゜分子ｉ：３２２赤外吸収スペクトル：　３３４４ｃｆ’核磁気共鳴スペ
クトル：（ｆｉｌ＋！定機器Ｂｒｕｋｅｒ　ＡＭ　５００　ｓｐ
ｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ　）Ｉｔｌ−ＮＭＪ　（ＣＤ、）
、　ＣＯ、ＴＭ８　）δ（ｐｐｍ）：５．４７　　　ｄ
、Ｊ＝１５．７５．２３　　　　　ｄｄ５．２２　　　　　ｄ　　　Ｊ＝７．２５．１８　　　
　ｄｄ　　Ｊ＝１５．６，９．３４．７８　　　　　ｍ４．１６　　　　ｄｄ　　Ｊ：６．２，１２．２３．９
６　　　　ｄｄ　　Ｊ＝４．６，１２．２２．２８　　
　　　ｍ２．２３　　　　　ｍ２．１１　　　　　ｍ２．０５　　　　　ｍ２．０１　　　　ｄｄ　　Ｊ＝１４．０，１．１１．９
１　　　　　　ｍ１．７５　　　　ａａ　　Ｊ＝１３．８．９．１１．６
７　　　　　　ｓ１．５０　　　　　ｍ１．３５　　　　　　ｓＯ，８３ｄ　　　Ｊ＝６．７０．８０　　　　　ｄ　　　Ｊ＝６．８”Ｃ−ＮＭ几　
（δ　ｉｎ　ＣＤ（Ｊｓ　、ＴＭ８）（１ｌｌ１１定機
器Ｊ３ｒｕｋｅｒ　ＡＭ５００　　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅ
ｔｅｒ）１６．０（−Ｃ）ｌａ）　　、　　１９．２（
−ＣＨ，）　　、　　２０．７（−ＣＨ，）２２．５（
−ＣＨり　　、　　２７．９（−ＣＨ，）　　、　　２
８．９（−ＣＨＤ３２．０（−ＣＩ−１，）　　、　　
３２．８（−ＣＨ）　　、　　３８．９（−ＣＨｌ）４
６．５（−ＣＩ）　、　　５２．６（−ＣＨ，）　　、
　　５９．９（−Ｃ編６４．４（−ＣＨ）、　　７１．
５（−Ｃ塊）、１２７．９（−ＣＨ）１３０．２（−Ｃ
Ｈ）　、　１３１．７（−ＣＨ）　、　　１３６．１（
−Ｃ１す１３６．３（−ＣＨ）。

質量スペクトルＣ−ＭＳ２５７（２）　　１５９（９）　　１４５（８）　　１
３３（１り比旋光度〔α〕”＋１４０．３　　（エタノール、Ｃ＝０．３２
）次に、化合物（１）の微生物変換による化合物（１）
の製造方法を順を追って説明する。

まず、バチルス・メガテリウム　ＮＨ５を次のような方
法で培養して種菌とする。すなわち、固形培地あるいは
液体培地に該菌を接種し、３０〜４３℃で１〜２日間培
養する。これら種菌をさらに液体培地に接種し、３７℃
で２〜６時間振とう又は通気攪拌培養を行う。ここで用
いる液体培地および種菌培養のための固形および液体培
地に用いる栄養源としては、グルコース、シー糖、コー
ンステイープリカー、ペプトン、肉エキス、酵母エキス
、尿素、硝酸ナトリウム、硝酸アンそニウム、硫酸アン
モニウム、リン酸カリウム、塩化カリウム、硫酸鉄、硫
酸亜鉛、塩化カルシウム、炭酸カルシウムなどの炭素源
、窒素源、無機塩、発育因子などの中から適当なものを
選んで使用することができる。これらの栄養源は水溶液
とし、まま固形培地とする場合には液体培地に１．５〜
２．０チの寒天を加え、加熱ｉ九は濾過などＫよシ無菌
化して使用する。

次に、以上のようにして予め培養された菌体培養液に化
合物（１）を添加し、引き続き振とり又は通気攪拌を行
う。この操作によって化合物（１）は次第に化合物（Ｉ
）へ変換が行われる。化合物（１）の添加量は通常、菌
体培養液１６当り０．１〜ＩＩが適当である。

培養液中において、化合物（１）が変換されているか否
かの判定は、例えば次のような操作によって迅速に知る
ことができる。すなわち、変換が進行中のフラスコ又は
タンク中より３〜１０ｍの菌体を含む培養液を抜き取り
、ｐＨを調節することなく酢酸エチルなどの有機溶媒で
抽出し、直ちにガスクロマトグラフィー又は高速液体ク
ロマトグラフィーで分析する。所要時間はサンプリング
時間も含めて１時間以内である。

第１図−ａに化合物（１）、第１図−ｂに変換操作開始
後１２０時間時間比合物（１）を含む変換物の典を的な
ガスクロマトグラムを示す０なお、図のガスクロマトグ
ラムは次のよりな条件で得られたものである。すなわち
、島津ＧＣ−４ＣＭ型ガスクロマトグラフ装置にシリコ
ン０Ｖ−１０１をカラムの内壁にコーティングした内径
０．２８１１ｍ、長さ３０ｍのガラスキャピラリーカラ
ムを装着し、カラム温度２５０℃で、キャリヤーガスと
してヘリウムを毎分０．９６−流しつつ前記培養液の酢
酸エチル抽出液１μｅを試料として注入することにより
測定した。

次に、変換物の培養物は、菌体を濾別したのち有機溶媒
を用いてＰ液から香料成分を抽出し九。

香料成分である化合物（１）を精製単離するためには、
まず変換培養物を濾過し菌体とＰ液とに分ける。

Ｐ液に酢酸エチルなどの有機溶媒を加え、また菌体を洗
浄し九有機溶媒を合して有機相とする。これを減圧下で
溶媒を留去して変換物を得る。得られた変換物をシリカ
ゲルを吸着剤とするカラムにかけ、ｎ−ヘキサン：酢酸
エチル混液を用いて溶出シ、フラクシ四ンコレクターで
分画する。さらに必要に応じて高速液体クロマトグラフ
ィーによｐ、化合物（１）を単離する。

本発明の化合物（１）をたばこに添加し喫煙した場合は
、いずれも、友ばこ本来の香りとよく調和し、刺激を抑
え、さらに効果に持続性があるので、たばこの製造工程
中および製品保存中における逸散が少ないなど多くの優
れた効果を有する。

すなわち、本化合物はエタノール等の溶媒で適宜濃度に
希釈し、たばこの香喫味改良剤として使用に供すること
が出来る。本化合物は単独又は他のたばこ用香料、添加
物などを適宜配合して使用することができる。添加量は
製品たばこ月割に対し０．１〜５０　ｐｐｍ　（Ｗ／Ｗ
）、好ましくは１〜３０ｐｐｍ（Ｗ／Ｗ）で前述した効
果を発褌する。本発明の化合物を有効に適用し得るたば
この種類は、特に限定されるものではなく、栽培によシ
得られるたばこのみならず、屑たばこを原料として製造
された再生たばこ及びパイプたばこ等の香喫味の改良の
ためにも有効である。

本発明に使用する菌は通産省工業技術院、微生物工業技
術研究所に寄託し、その寄託番号は微工研菌寄第４４４
８号である。

以下に、本菌の菌学的性質をマニュアル・オプ・マイク
ロバイオロジカル・メソッド（Ｍａｎｎｕａｌ　ｏｆＭ
ｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｍｅｔｈｏｄ　）記載
の方法に準じて検討した結果を示す。

■　形態的性質１、顕微鏡的所見桿菌、１，０〜１．５μ×３．５〜５．０μ、波状に連
鎖し時に塊状、運動性あり、楕円形の内生胞子形成、１
．０〜１．２μ×１．５〜２．０μ、１細胞に１個、位
置は中央、胞子のうのふくらみなし、ダラム陽性、抗酸
性陰性。

２、培養上所見（１）　　平板培養円形、わずかに丘状隆起、平滑、金縁、不透明、わずか
に黄色を含む白色、やや光沢あシ。

（２）　　斜面培養生育旺盛、平滑、やや光沢あシ、淡黄白色、不透明、臭
いなし、培地の変化なし。

（３）液体培養生育中程度、表面生育微弱、わずかに濁る、沈殿中程度
。

厘　生理的性質 ■　生育温度＝１５〜４２℃、最適３０〜３７℃■　生
育ｐＨ：　ｐＨ３，５〜１０．０．最適６．５〜７．５
０　酸素要求性：好気性 ■　ゼラチンの液化二Ｐ斗状に液化 ■　リドマスミルク：酸性、ペプトン化０　インドール
の生成：陰性 ■　硝酸塩の還元：陰性 ■　殿粉の加水分解：陽性 ■　メチルレッド反応：陽性０　フォーゲスグロスカフエル反Ｅｈ　：　陰性◎　カ
タラーゼの生成：陽性０　ウレアーゼの生成：陽性Ｏ食塩濃度と生育ニア％ｔで生育する０　ソデイクムアザイドによる生育阻害二０．０２％で
生育しない０　リゾチームによる生育阻害：０．００１％で生育し
ない、０　サブロー寒天培地での生育：生育する◎　サブロー
液体培地での生育：生育する＠０−Ｆテスト：発酵的０　オキシダーゼ活性：陽性［相］　クエン酸の利用：陽性Ｏレシチナーゼ活性：陰性［相］　レバンの生成：陽性０　カゼインの加水分解：陽性０　フェニルアラニンの脱アミノ反応：陽性Ｉ　糖の利
用性酸を生成し、ガスを生成しない：グルコー人アラビノー
ス、マニトール、酸もガスも生成しない：キシロース以上の菌学的性質を基にして、パージエイズ・マニュア
ル・オプ・ブターミネイティブ・バクテリオロジー第８
版（Ｂｅｒｇｅｙ’ａ　Ｍａｎｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔ
ｅｒｍｉｏａ−ｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　
８　ｔｈ　Ｅｄｉｔｌｏｎ　）に従い検索すると本菌は
バチルス属に属し、バチルス・メガテリウＡ　（Ｂａｃ
目１ｕｓ　Ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ　）と同定された。

次に、実施例により本発明を具体的に説明するう実施例
　ｌ。

試験管内にニュートリエンド・アガー（Ｄｉｆｅ。

製）培地を作り、これにバチルス・メガテリウムＮＨｓ
を１白金耳接橿し、２日間静置して胞子を形成させた。

次いで二ニートリエンド・プロス（Ｄｉｆｃｏ製）０．
８，９．水道水１ｏｏ−からなる殺菌済み液体培地に前
記菌を１白金耳接種し、２００ｒｐｍの回転振とり機に
かけ、３７℃で２４時間培養を行い種母とした。この種
母２−を、前記と同様の方法と割合で調製した１１の培
地を含む３１のコブ付三角フラスコに接部し、３７℃、
２００ｒｐｍで３時間回転振とり培養を行い、６１０ｎ
ｍにおける吸光度が０．３の菌体培養液を得た。これに
化合物ｔｉｌｌ　Ｏ，１ｆｌを添加し引き続き振とうを
行った。

変換５日後に培養物を取り出し、遠心分離により菌体と
ｐ液とに分けた。Ｆ液中の化合物（１）を酢酸エチルで
抽出し、この酢酸エチル層と菌体を洗浄した酢酸エチル
とを合した。この酢酸エチル溶液を減圧濃縮することに
よシ、ｏ、　ｏ　ｓ　Ｉｉの濃縮物を得九。全く同様の
操作を６回繰返して、合計０．３ｙの濃縮物を得た。次
いでこの濃縮物から変換生成物である化合物（１）を以
下のようにして単離した。

濃縮物０．３．９を５０．９のシリカゲルＧを充てんし
た直径３０關のガラスカラムの上部に添加し、次いでヘ
キサン−酢酸エチルの混液（Ｖ／Ｖ）、　８５：１５．
８０：２０，６０：４０，５０：５０をそれぞれ１２５
０゜１５００．９００．２３００−づつ加え順次溶出し
た。

次に、５０：５０両分について、移動相管メチルアルコ
ール：アセトニトリル：水＝１　：　４　：　９（Ｖ／
Ｖ）とし、ＬｉｃｈｒｏｓｏｒｂＲＰ−１８カラム（直
径４龍、長さ２５℃ＭＬ、メルク社製〕を用いて高速液
体クロマトグラフィーを行り次。主成分を分取し、３５
℃以下で減圧ｍ縮して有機溶媒を留去した。水相を分液
ロートに移しジエチルエーテルを用いて液々分配を行な
って変換物を抽出した。芒硝で脱水した後減圧で濃縮し
九。ａｍ物は無色の油状で収量ａｏ、００４．ｓｒであ
り九。

実施例　２゜屑たばこを１００℃の熱水で抽出し、水溶性部と水不溶
性部（抽出残）に分けた後、水不溶部を叩解し、これに
その乾物重のｔＳＳの針葉樹のクラフトパルプを加えた
混合物を薄紙状に底盤し、この薄紙に上記の水溶性部を
もどして作り九シート状再生たばこ１００，９に対して
、実施例１で得た化合物（１）　０．５〜を３−のエタ
ノールに溶解して噴霧・添加した後、常法によｐ１刻紙
巻し、化合物（１）　０．５ダを上記と同様に処理した
巻上品を対照として、におい・味・刺激について２点識
別法により香喫味を比較し友。特に訓練された専門パネ
ル２０人の評価は、第１表に示す通りであった。

パネルの大多数のメンバーの評価によシ、刺激が抑えら
れ、たばこらしさが付与されるとのコメントを得た。

第　　１　　表（注）　加香品二本発明の化合物（１）を５　ｐｐｍ添
加。

対照品：化合物（１）を５　ｐｐｍ添加。

数字は良いとした人数。＊柳は、それぞれ危険率１％で
試料間に有意差のあることを示す。

〔発明の効果〕

本発明の化合物は、製品たばこ月割、パイプたばこ、再
生たばこ及び葉たばこに対してｐｐｍオーダーの添加に
より、たばこらしさを付与し、刺激を抑制して味がよく
なる効果、すなわち、たばこの香喫味改良効果を有し、
これによりたばこ製品の品質が向上する。

【図面の簡単な説明】

第１図−ａは化合物（幻、第１図−すは化合物（１）を
本発明の方法によって微生物変換し友ときの培養時間が
１２０時間時間比合物（１）変換物のガスクロマトグラ
ムをそれぞれ示したものである。・図中ピーク（１）は
溶媒、ピーク（２）は化合物（１）、ピーク（４）は化
合物（１）、ピーク（３）と（５）は副生成物である。縦軸はピーク高さを、横軸は保持時間を示す。

Claims

【特許請求の範囲】１、次式（ I ）で示される２，７，１１−センブラト
リエン−４，６，２０−トリオール。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （ I ）２、次式（ I ）で示される２，７，１１−センブラト
リエン４，６，２０−トリオールからなるたばこ用香喫
味改良剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （ I ）３、次式（II）で示される２，７，１１−センブラトリ
エン４，６−ジオールにバチルス属細菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ．）を作用させることにより
、次式（ I ）で示される２，７，１１−センブラトリ
エン−４，６，２０−トリオールを採取することを特徴
とする次式（ I ）で示される化合物の製造法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （II） ▲数式、化学式、表等があります▼ （ I ）