JPS62215389A - 酵素又は微生物菌体の粒状固定化成形物及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、酵素又は微生物菌体の粒状固定化成形物（以
下、単に「固定化物粒子」ということもある、）及びそ
の製造方法に関する。

現在、固定化酵素または固定化菌体バイオリアクターに
よる有用物質の工業的生産は、主として連続法で行なわ
れており、この工業的生産における反応系としては液・
同系が大部分を占めている。

この液−同系バイオリアクターを大別すると、リアクタ
ー内に充填された固定化物粒子が動かず基質液のみが流
れる充填層型と、固定化物粒子も動く流動層型とがある
。充填層型バイオリアクターは、液・固液（粒子）間の
物質移動係数を大きくしなければならないために、固定
化物粒子径を小さくしてその充填率を大きくし、しかも
流速を上げる必要があるが、この条件では流体圧によっ
て固定化物粒子が圧縮変形し、固定化物粒子が点接触か
ら面接触となり、流れの方向に固定化物粒子が押しやら
れて密に充填される結果、充填層内が閉塞する場合があ
る。したがって、液拳固液（粒子）間の物質移動係数を
小さくしなければならないため反応速度が低くなる可能
性がある。

一方、流動層型バイオリアクターは、充填率を小さくす
ることによって、液・固液（粒子）間の物質移動係数を
大きくすることができるので、原理的には、充填層型バ
イオリアクターよりも反応速度を高めることができる。

しかしながら流動層型バイオリアクターでは、安定な流
動操作をできる範囲が狭く種々な基質中で、固定化物粒
子を安定に流動操作するためには、固定化物粒子の比重
を調整する必要がある。

また、固定化物粒子の製造は、固定化担体、少なくとも
１種の多価金属イオンとの接触によりゲル化する能力の
ある水溶性高分子多糖類及び酵素又は微生物菌体を含む
液状組成物を多価金属イオンを含む水性媒体中に滴下し
て、粒状にゲル化されて行なわれるが、水性媒体には多
価金属イオンが含まれているため１粒状ゲル化物の比重
を高くしなければ、生成する固定化物粒子が容易に沈降
せず生産性を阻害するという問題がある。

このため、本発明者らは、固定化物粒子の比重を調整す
る手段について鋭意研究を重ねた結果、従来の固定化物
粒子の構成成分である合成高分子からなる固定化担体、
水溶性高分子多糖類および酵素又は微生物菌体に、コロ
イダルシリカを含有せしめることによって、固定化物粒
子の性能に何ら悪影響を与えることなく固定化物粒子の
比重を容易に調整でき、しかも固定化担体としてポリビ
ニルアルコール等の分子中に水酸基を含有する合成高分
子を使用するとコロイダルシリカ表面のシラノールと合
成高分子中の水酸基との化学反応によって固定化粒子の
機械的強度が向上することを見い出し１本発明を完成す
るに至ったものである。

しかして、本発明に従えば。

（Ｌ）　　合成高分子からなる固定化担体（ｂ）　　少
なくとも１種の多価金属イオンとの接触によりゲル化す
る能力のある水溶性高分子多糖類。

（Ｃ）　　　コロイダルシリカ、及び （ｄ）　　酵素、又は微生物菌体 を含んでな′る組成物を粒状にゲル化させてなることを
特徴とする酵素又は微生物菌体の粒状固定化成形物、及
び 前記（ａ）、（ｂ）、　　（Ｃ）及び（ｄ）を含んでな
る液状組成物を、多価金属イオンを含有する水性媒体中
に滴下して該組成物を粒状にゲル化させることを特徴と
する酵素又は微生物菌体の粒状固定化成形物の製造方法
が提供される。

以下、本発明についてさらに詳細に説明する。

（ａ）　　合成高分子からなる固定化担体固定化担体と
しては、酵素又は微生物菌体を、粒状固定化できる合成
高分子ならば制限なく使用でき、例えば従来から公知の
ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリスチ
レン、ポリ酢酸ビニル、ポリウレタン等の樹脂や、高酸
価不飽和ポリエステル、高酸価不飽和エポキシド、不飽
和ポリビニルアルコール、不飽和アクリル樹脂、ポリエ
チレングリコールと（メタ）アクリル酸とのポリエステ
ル、ポリエチレングリコールと（メタ）アクリル酸２−
ヒドロキシエチルとのウレタン化付加物などの親木性光
硬化性樹脂が使用される。

本発明において、特に有利に使用できる合成高分子は、
ポリビニルアルコールおよび光硬化性ポリビニルアルコ
ールである。ポリビニルアルコールは１粒状固定化物内
部の中心付近に密に分布するコロイダルシリカと化学的
に結合して固定化物粒子の機械的強度を向上させると共
に安価であるという利点を有している。

（ｂ）　　水溶性高分子多糖類 本発明において使用する水溶性高分子多糖類は、水溶性
であり、水性媒体中で多価金属イオンと接触したときに
水に不溶性又は難溶性のゲルに変化する能力のある高分
子多糖類で、一般に約３．０００〜約２，０００，００
０の分子量を有し、また、多価金属イオンと接触させる
前の水溶性の状態で通常少なくとも約１０ｇ／文　（２
５℃）の溶解度を示すものが好適に使用される。

かかる特性をもつ水溶性高分子多糖類の具体例としては
、アルギン酸のアルカリ金属塩、カラギーナン、マンナ
ン、キトサン等が包含される。

これら水溶性高分子多糖類の１種であるアルギン酸の金
属塩は水性媒体中に溶解した状態で、多価金属イオン、
例えばマグネシウムイオン、カルシウムイオン、ストロ
ンチウムイオン、バリウムイオン等のアルカリ土類金属
イオン或いはアルミニウムイオン、セリウムイオン、ニ
ッケルイオン等の他の多価金属イオンのうちの少なくと
も１種の多価金属イオンと接触するとゲル化しうる。な
お、本発明において使用しうる水溶性高分子多糖類は、
すべての多価金属イオンの接触に対してゲル化能を有し
ている必要はなく、少なくとも１種の多価金属イオン、
好ましくはアルカリ土類金属イオンと接触した時にゲル
化する能力を有していれば充分である。ゲル化が起る多
価金属イオンの濃度は水溶性高分子多糖類の種類等によ
り異なるが、一般には少なくとも０．０１＋＊ｏＭ／４
である。

（ｃ）　　　コロイダルシリカ コロイダルシリカは無水硅酸の超微粒子を水中に分散せ
しめたコロイド溶液である０種々の濃度のものが市販さ
れており、前記（ａ）、（ｂ）及び（ｄ）成分からなる
組成物に混入したときに安定であればいかなる濃度のも
のでも使用できるが、一般には２０〜５０重量％、好ま
しくは安定性の高い２０〜３０重量％の濃度範囲のもの
が使用される。また、コロイダルシリカの比重は１．１
−１．４でありコロイダルシリカの使用量を後記する範
囲で変えることによって固定化物粒子の比重を容易に調
整することができる。一般にコロイダルシリカを含有し
ていない従来の固定化物粒子の比重は約１．０であり、
これにコロイダルシリカを含有せしめることによって比
重を約１．θ〜１，３の範囲で調整することができる。

（ｄ）　　酵素又は微生物菌体 本発明により固定化しうる酵素又は微生物菌体の種類に
は特に制約はなく、どのような種類の酵素又は微生物菌
体でも、その酵素活性を実質的に失活させることなく固
定化することができる。

しかして、本発明によって固定化しうる酵素及び微生物
菌体の代表例を示せば次のとおりである。

（イ）　酵素の例 ラクテートデヒドロゲナーゼ（１、ｌ　、　２　、３）
ラクテートオキシダーゼ（１、１、３、２）グルコース
オキシダーゼ（１，１，３，４）ホルメートデヒドロゲ
ナーゼ（１，２，１，２）アルデヒドデヒドロゲナーゼ
（１、２、１、３）アルデヒドオキシダーゼ（１，２，
３，１）キサンチンオキシダーゼ（１，２，３，２）ピ
ルビン酸オキシダーゼ（１，２，３，３）コルチゾン−
α−リダクターゼ （１，３，１，４） アシルＣ０Ａ−デヒドロゲナーゼ （１３，９９，３） （１，３，９９，５） Ｌ−７ラニンデヒドロゲナーゼ （１，４，１，１） Ｌ−グルタミン酸デヒドロゲナーゼ （１，４，１，３） Ｌ−アミノ酸オキシダーゼ（１，４，３，２）Ｄ−７ミ
ノ酸オキシダーゼ（１，４，３，３）ピリドキサールリ
ン酸オキシダーゼ （１，４，３，５） カタラーゼ（１，１１，１，６） （２，３，１，７） （２，６，１，２） へキソキナーゼ（２、７、１１） グルコキナーゼ（２，７，１，２） フルクトキナーゼ（２，７，１，４） ホスホグルコキナーゼ（２，７，１，１０）ホスホフル
クトキナーゼ（２，７，１，１１）ピルベートキナーゼ
（２，７，１，４０）カルボキシエステラーゼ（３，１
，１，ｌ）アリールエステラーゼ（３、１、１、２）リ
パーゼ（３、１、１、３） ホスホリパーゼＡ（３，１，１，４） アセチルエステラーゼ（３，１，１，６）グルコアミラ
ーゼ（３，２，１，３） セルラーゼ（３，２，１，４） イヌラーゼ（３，２，１，７） α−グルコシダーゼ（３，２，１，２０）β−グルコシ
ダーゼ（３，２，１，２１）β−ガラクトシダーゼ（３
，２，１，２３）インベルターゼ（３，２，１，２６） ペプシン（３，４，４，１） トリプシン（３、４、４、４） キモトリプシンＡ（３，４，４，５） カテプシンＡ（３，４） パパイン（３，４，４，１０） トロンビン（３，４，４，１３） アミダーゼ（３，５，１，４） ウレアーゼ（３、５、１、５） ペニシリンアシダーゼ（３，５，１，ｌｌ）アミノアシ
ラーゼ（３，５，１，１４）アデニンデアミナーゼ（３
、５、４、２）Ａ、Ｔ、Ｐ、アーゼ（３、６、１、３）
ピルベートデカルボキシラーゼ （４，１，Ｌ、ｌ） オキザレートデカルボキシラーゼ （４，１，１，２） トリプトファンデカルボキシラーゼ （４，１，１，２７） アルドラーゼ（４，１，２，１３） マレートシュダーゼ（４，１，３，２）トリプトファン
シンターゼ（４，２，１，２０）アルドラ−ゼ（４，３
，１，１） リジンラセマーゼ（５，１，１，５） ステロイドΔ−インメラーゼ（５，３，３，１）マクシ
ニルＣｏＡシンセターゼ （６、２、１、５） など （註）カッ−内の数字は酵素番号を表わす。

（ロ）　微生物菌体の例 （Ａｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）バチル
ス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｇｕｂｔｉｌｉｓ
）プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ　ｖｕｌｇ
ａｒｉｓ）〒−−’−Ｈ，＋＋１−−１Ｉ　ｌ　　／　
Ｃ−Ａｋ　６１−　ｉ　−ｓ　ｋ　ｉ　ｍ　Ｍ＾１；）
シュードモナス・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍａｎａｓ　ｐ
ｕｔｉｄａ）アクロモバクタ−・リクイダム （Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ　　ｌｉｑｕｉｄｕｍ）
クルブラリア・ルナータ（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ　１ｕ
ｎａｔａ）コリネバクテリウム・グルタミカム （Ｃａｒｙｎｅｂａｃｔａｒｉｕｍ　ｇＬｕｔａｍｉｃ
ｕｍ）ノカルディア・ロドクラス（Ｎｏｃａｒｄｉａ　
ｒｈｏｄｃｒｏｕｓ）メサノサルシナ・バーケリイ （ＭｅｔｈａｎｏＳａｒｃｉｎａ　ｂｅｒｋｅｒｉｉ）
など。

″　　　　： 以上に述べた（ＩＬ）、（ｂ）、（ｃ）および（ｄ）の
各成分は、水性媒体中で相互に充分に混合することによ
り液状組成物にすることができる。使用しうる水性媒体
としては、水又は緩衝水溶液が好適であるが、場合によ
っては水溶性アルコール類と水又は緩衝水溶液との混合
液、水溶性ケトン類と水又は緩衝水溶液との混合液、水
や緩衝水溶液と均一に混合しうるエステル系溶剤溶液か
）’　ｔｆ４ｔｉ　１１１１＋ス：＞＃テ＊ス−上記（
４）、（ｂ）、（ｃ）及び（ｄ）の各成分の相互の使用
割合は厳密に制限されるものではなく、各成分の種類等
に応じて広範にわたって変えることができるが、一般に
は、（＆）成分の固定化担体１００重量部（固形分換算
、以下も同様）に対し、下記の割合で使用するのが適当
である（カッコ内は好適範囲である）。

（ｂ）水溶性高分子多糖類：０．５〜１５ｆｉｌｓ（１
〜８重」の （ｃ）コロイダルシリカ：１〜ｘｏｏ」■（５〜５０１
ｄｉ却 （ｄ）酵素又は微生物菌体：０．００１〜５０ユＩ（０
，０１〜２０ｆｄ［） また、水性媒体は上記（ａ）〜（Ｃ）の合計に対して１
０〜１，５００重量部（５０〜９００重量部）の範囲で
使用することができる。

乞土進二 上記の如くして調製された液状組成物は次いで多価金属
イオンを含有する水性媒体中に滴下することにより粒状
にゲル化される。

上記水性媒体中に含ませうる多価金属イオンとしては、
該液状組成物中の水溶性高分子多糖類をゲル化させる能
力のあるものが選ばれる。

選ばれた多価金属イオンを含有する水性媒体の調製は、
水性媒体中に、該多価金属の水溶性化合物、例えば該多
価金属のハロゲン化物、炭酸塩、炭酸水素塩、硫酸塩、
硝酸塩等を溶解することにより行なうことができる。

その際の水性媒体中の多価金属イオンの濃度は、一般に
０．０１〜５履◎ｆＬ／１．好ましくは０．１〜２層ａ
ｎ／ｌの範囲内とすることができる。

なお、固定化担体として安価なポリビニルアルコール及
び不飽和ポリビニルアルコールを使用する場合には、上
記多価金属イオンを含有する水性媒体中にさらに硼酸を
含有せしめると、多価金属イオンと硼酸の相乗作用によ
って瞬時に粒状固定化成形物が生成ししかも互いに吸着
したり１粒状状態が変化したりすることもないので連続
的に製造することが可能となる。これによって製造コス
トの大幅な削減がはかれる。

硼酸の水性媒体中における濃度は、一般に０　、０　Ｌ
　〜１ｏｓａｉ／ＪＬ、好ましくは０．１〜４ＩＩｏｆ
ｔ／ＩＬの範囲内とすることができる。

かかる多価金属イオンを含有する水性媒体中への前記液
状組成物の滴下は、例えば注射針のような先の細い管の
先端から該液状組成物を滴下する方法、遠心力を利用し
て該液状組成物を粒状に飛散させる方法、スプレーノズ
ル先端から、該液状組成物を霧化して粒状とし滴下する
方法などの方法により行なうことができる０滴下する液
滴の大きさは最終の粒状固定化物に望まれる粒径に応じ
て自由に変えることができるが、通常は直径が約０．１
〜約５ｍｓ、好ましくは約０６５〜約３ｍｍの液滴とし
て滴下させるのが好都合である。

滴下した液状組成物は水性媒体中で多価金属イオンと接
触し、直ちにゲル化して、粒状のゲルとなる。その際の
ゲル化の機構は正確にはわからない−ｈ＜、＊ｍにト寡
４峯早島負１オｎカ（／＼ロゲンイト蜘Ｖｔ士憔溶液に
より凝集し、ついで水溶性高分子多糖類に含まれるアニ
オン基が多価金属イオンを介して、イオン結合すること
により三次元的に架橋してゲル化するものと推定される
。

上記の如く生成せしめた粒状ゲルは、例えばポリビニル
アルコールを固定化担体として用い、多価金属イオンと
硼酸を含有する水性媒体中でゲル化させたものであれば
、そのままで固定化物粒子として使用することができる
が、光硬化性樹脂を固定化担体として用いた場合には、
そのまま水性媒体中に分散させた状態で、或いは水性媒
体から分離した後それ自体公知の方法で活性光線を照射
することにより、該粒状ゲル中の親木性光硬化性樹脂を
硬化せしめる。これにより粒状ゲルは水に実質的に不溶
性で機械的強度の大きい酵素又は微生物菌体の粒状固定
化物が得られる。

かくして、本発明により粒径が約ｏ、１〜５＋ｓｍの固
定化物粒子が簡単に製造することができ、このものはコ
ロイダルシリカを含有しているためその比重が従来品に
比較して高くなっているため。

流動層型バイオリアクターとして安定な流動操作が可能
となると同時に、製造に際し水性媒体中で生成した粒状
ゲルが容易に沈降するので、取り出しが容易となり生産
効率を高めることができる。

また生成した固定化物粒子は従来品に比較して機械的強
度が向上しており、特にポリビニルアルコールを固定化
担体として用いた場合にその効果が顕著である。

次に実施例により本発明をさらに説明する。

実施例１ 重合度ｔｏｏｏ、けん化度８７．０〜８９．０のポリビ
ニルアルコールｌｏｎｇとＮ−メチロールアクリルアミ
ド０．３モル（３０ｇ）の混合物からなる１５％光硬化
性樹脂プレポリマー水溶液ｔｏｏｚ量部に、３％アルギ
ン酸ナトリウム水溶液２０重量部、ベンゾインイソブチ
ルエーテル０．５重量部、２０％コロイダルシリカ（Ｃ
ａｔａｌｏｉｄ　Ｓ　−２ＯＬ触媒化或工業株式会社製
）２０重量部および酵素インベルターゼ（０，１％濃度
）２０重量部を加えてよく混合し、得られる光硬化性樹
脂−酵素混合液（比重１．０３）を、３％［酸及び０．
１Ｍ塩化カルシウムを含む水溶液（ＮａＯＨでｐ）（＝
６に調製）中に注射器先端の注射針から液面高さｌＯｃ
腸より滴下したところただちに沈降して粒径的２．５ｍ
ｍの粒状物が得られた。

なお、コロイダルシリカを除いた組成物で同様にして固
定化物粒子を製造したが、粒子が水溶液中に浮遊してな
かなか沈降しなかった。

この粒状物を平らな底面を有するペトリ皿にとり、ペト
リ皿の上面及び下面から波長３００〜４００ｎ履の活性
光線を３分照射したところ圧縮強度５０ｋｇ／ｃ層２　
（コロイダルシリカを用いない場合は１６　ｋｇ／　ｃ
ｍ”　）の粒状固定化酵素が得られた。

この粒子のインベルターゼ活性をショ糖を基質として測
定したところ、固定化しないインベルターゼに対する比
活性が７０％であった。

この固定化物粒子を流動層型バイオリアクターに使用し
たところ安定な流動操作が得られた。

実施例２ 重合度１５００、けん化度８７．０〜８９．０のポリビ
ニルアルコール２０重量部を蒸留水８０重量部に溶解し
て２０％ポリビニルアルコール水溶液にする。この水溶
液に３％アルギン酸ナトリウム水溶液２０重量部、２０
％コロイダルシリカ（Ｃａｔａｌａｉｄ　Ｓ　−２０Ｌ
）　２０重量部および酵素インベルターゼ（０，１％濃
度）２０重量部を力１えてよく混合し得られるポリビニ
ルアルコール−酵素混合液（比重１．０４）を、３％硼
酸及び０．１Ｍ塩化カルシウムを含む水溶液（ＮａＯＨ
でｐ）ｉ＝　６に調製）中に、注射器先端の注射針から
液面高さ１０ｃｍより滴下したところただちに沈降して
粒径的２．５ｍｍの粒状物が得られた。この粒状物をこ
のままの状態で７時間浸漬したところ機械的強度良好な
粒状固定化酵素が得られた。

この粒子のインベルターゼ活性をシ、ａを基質として測
定したところ、固定化しないインベルターゼに対する比
活性が６０％であった。

この固定化物粒子を流動層型バイオリアクターに使用し
たところ安定な流動操作が得られた。

実施例３ 重合度１５００．けん化度８７〜８９のポリビニルアル
コールｌｏｏｇとＮ−メチロールアクリルアミド０．２
モル（２０ｇ）とからなる２０％光硬化性プレポリマー
水溶液１００重量部に、３％に一力うギーナン水溶液２
０重量部、ベンゾインエチルエーテル１重量部、３０％
コロイタ）ｌ／シリカ（Ｃａｔａｌｏｉｄ　Ｓ　−３０
Ｌ触媒化成工業株式会社製）２０重量部、蒸留水３０重
量部、及び２％グルコースイソメラーゼ菌体酵素液（重
炭酸ナトリウム緩衝液ｐＨ＝８）３重量部を加えて均一
な混合液（比重１．０５）を注射針先端から３％硼酸及
び５％塩化カリウムを含む水溶液（ＮａＯＨでｐＨ＝６
に調製）中に液面から１５ｃｍの位置から滴下したとこ
ろただちに沈降して粒径２．５＋ａｍの粒状物が得られ
た。

この粒状物を平らな底面を有するペトリ皿に移し、上面
及び下面から波長３００〜４００ｎｍの活性光線を照射
したところ圧縮強度５５　ｋｇ／、ｃｍ２（コロイダル
シリカを使用しない場合１４ｋｇ／ｃ腸２の粒状固定化
酵素が得られた。

この粒状グルコースイソメラーゼの活性をブドウ糖を基
質としてｐＨ＝８の重炭酸ナトリウム緩衝液中で６０℃
にて測定したところ固定化しないグルコースイソメラー
ゼに対する比活性が８０％であった。

実施例４ ポリエチレングリコール２０００　（分子量２０００）
１０００ｇとメチルメタクリレート２モルとからなる光
硬化性樹脂プレポリマーｌｏ。

重量部に蒸留水１００重量部を加えてから約５０℃に加
温してよく混合して均一な樹脂水溶液とし、これにα−
ヒドロキシイソブチルフェノン０．５重量部を加えて混
合溶解した。

この樹脂混合液に３％に一力うギーナン水溶液５０重量
部、４０％コロイダルシリカ（ＣａｔａｌｏｉｄＳｌ−
４０、触媒化成工業株式会社製）２０重量部、及びバチ
ルスΦズブチリス菌体懸濁液２０重量部を加えて均一な
混合液（比重１．０４）を作）成した。この均一な混合
液を注射針先端から５％塩化カリウム水溶液中に液面よ
り２０ｃｍの位置から滴下したところ直ちに沈降して粒
径２．Ｏａ＋ｍの粒状物が得られた。

この粒状物を平な底面を有するベトリ皿に単層となる様
に塩化カリウム液と共に移し、上面及び下面より３分間
波長３００〜４００ｎｍの活性光線を照射したところ圧
縮強度３０ｋｇ／ｃ履２の球状固定化微生物が得られた
。

実施例５ エピコート１００１樹脂（分子量約９００、エポキシ当
量的４７５．シェルケミカル社製、商品名）１モルにア
ジピン酸１．５モルを反応させ。

次いで無水コハク酸４．５モルでエステル化した後、グ
リシジルメタクリレート２．７５モルヲ反応させること
により生成せしめた酸価が７５の光硬化性樹脂（数平均
分子量約４１００）を苛性ソーダで中和して得た樹脂液
（固形分５０％）１００ｆｉ量部にベンゾインエチルエ
ーテル１重量部を均一に混合し、更に３％アルギン酸ン
ーダ水溶液３０重量部、３０％コロイダルシリカ（Ｃａ
ｔａｌｏｉｄ　Ｓ　−３０Ｌ）　５０重量部及びエラセ
リシア・コリー菌体懸濁液２０重量部を均一に混合分散
した。しかる後その分散液（比重１．０５）を注射器先
端からｌ　、０Ｍ塩化アルミニウム溶液へ滴下したとこ
ろ直ちに沈降して球状にゲル化した。その球状ゲルをペ
トリ皿に移し、ペトリ皿の上面及び下面から波長３００
〜４００＋ｓ＋の活性光線をそれぞれ３分ずつ照射した
ところ、直径３■の固定化菌体を作ることができた。

実施例６ アクリル酸エチル３００ｉ量部、メタアクリル酸１００
重量部、スチレン８０重量部、ホスマーＭ［メタクリレ
ート系リン酸モノエステル、油脂製品■製］２０重量部
及びメタクリル酸グリシジル５０重量部の強重量物より
なる数平均分子量が約２５０００の光硬化性樹脂を苛性
カリで中和して得た樹脂液（固形分７５％）９０重量部
にα−ヒドロキシイソブチルフェノン０．５重量部を加
えて均一に混合した。この混合液に３％アルギンロイ 酸ナトリウム水溶液５０重量部、５０務二〇ダルシリカ
２０重量部及び０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５，６）にと
かした０、５％グルコースオキシダーゼ水溶液３０重量
部を均一に混合し、得られるこの樹脂混合液（比重１．
０４）を注射器の先端から１０％アンモニアミョウバン
水溶液ヲ入れたペトリ皿に入れたところ直ちに沈降して
粒状にゲル化した。この粒状ゲルに上面及び下面より波
長３００〜４００ｎｍの活性光線を各３分間照射したと
ころ、直径約２■の粒状固定化物が得られた。

実施例７ アルゴンガス雰囲気中で重合度１０００．けん化度８７
．０〜８９．０のポリビニルアルコール１００ｇとＮ−
メチロールアクリルアミド０．３モル（３０ｇ）とから
なる１５％光硬化性プレポリマー水溶液１００重量部に
、３％アルギン酸ナトリウム水溶液２０重量部、α−ヒ
ドロキシイソ’；’　チ／ｌ／　７エ”　０−５ｆｆｉ
ｆｆｉ部、　　２０％コロイダルシリカ２０ｉＪｉ部、
およびメサノサルシナ・バーケリイ菌体懸濁液２０重量
部を均一に混合した。得られる光硬化樹脂−菌体混合液
（比重１．０３）を、３％硼酸及び０．１Ｍ塩化カルシ
ウム及び２　ｐｐｍのソルビタンモノラウレートを含む
水溶液（ＮａＯＨでｐＨ＝８に調製）中に、得られる混
合液を注射器の先端より滴下したところ直ちに沈降して
粒状にゲル化した。これをペトリ皿に入れ、上面及び下
面より同時に３００〜４００ｎｍの光を３分間照射して
粒径２．５■の粒状固定化微生物が得られた。この固定
化物粒子の圧縮強度は５０　ｋｇ／　ｃｍｚ（コロイダ
ルシリカを使用しない場合は１４ｋｇ／ｃｓ２）であっ
た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、（ａ）合成高分子からなる固定化担体 （ｂ）少なくとも１種の多価金属イオン との接触によりゲル化する能力のあ る水溶性高分子多糖類、 （ｃ）コロイダルシリカ、及び （ｄ）酵素又は微生物菌体 を含んでなる組成物を粒状にゲル化させてなることを特
   徴とする酵素又は微生物菌体の粒状固定化成形物。 ２、（ａ）合成高分子からなる固定化担体 （ｂ）少なくとも１種の多価金属イオン との接触によりゲル化する能力のあ る水溶性高分子多糖類 （ｃ）コロイダルシリカ、及び （ｄ）酵素又は微生物菌体 を含んでなる液状組成物を、多価金属イオンを含有する
   水性媒体中に滴下して該組成物を粒状にゲル化させるこ
   とを特徴とする酵素又は微生物菌体の粒状固定化成形物
   の製造方法。