JPS62187486A - 新規メチレンステロイドの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明に、新規の張物学的に有効なメチレンステロイド
、その製法及びこの化合物を含有する製剤に関する。

１ｆｒＪｌテレンステロイドは、次の一般式■を有する
”　　　　　　　Ｃ）ｉ＠Ｒ。

’　　（４） 〔式中Ｘは水素原子、弗素原子又蝶メチル基を表わし、
Ｙはヒドロキシメチレン基、アルカノイルオキシメチレ
ン基又はカルボニル基を表わし、Ｒ１は水素原子、ヒド
ロキシ基又はアルカノイルオキシ基を表わし、Ｒ２は、
水素原子又は遊離の又は生理学的に認容性の酸でエステ
ル化されたヒドロキシ基を表わす〕。

新規メチレンステロイドの作用開始及び作用時間並びに
生理学的認容性、溶剤中のその溶解性は、公知のコルチ
コイげにおけると同＠に殊に、１１．１７及び／又扛２
１−位のヒドロキシ基をエステル化するか否か又はいか
なる酸でエステル化するかに依シ決まる。

エステル化された２１−ヒドロキシ基Ｒ，としては、有
利にアシル基中の炭素原子１〜１６を有するアシロキシ
基、スルフェート基又はホースフェート基がこれに該当
する。好適なアシロキシ基は、例えば、直鎖又は分枝鎖
の飽和又は不飽和の脂肪Ｆ！七ノー又嫁ジカルざン酸（
これらは常法で例えばヒドロキシ基、アミノ基又はハロ
ゲン原子で置換されていてよい）から誘導されるもので
ある。

更に、アシロキシ基としては、同様忙常法で置換されて
＾てよい脂１式、芳香崇、混合芳香−脂肪族又にへテロ
環式酸の残等も好適である。

好適なアシロキシ基の例としては次のものが挙げられる
：ホルミルオキシ、アセトキシ、プロピオニルオΦシ、
ブチリールオキシ、ペンタノイルオキシ、ヘキサンイル
オキシ、オクタノイルオキシ、ウンデカノイルオキシ、
ツメチルアセトキシ、トリメチルアセトキシ、ツメチル
アセトキシ、ｔ・ブチルアセトキシ、ベンゾイルオキシ
、フェナセチルオキシ、シクロペンチルプロピオニルオ
キシ、ヒドロキシアセトキシ、モノクロルアセトキシ、
ジクロルアセトキシ、トリク目ルアセトキシ、更に、ジ
メチルアミノアセトキシ、トリメテルアオノアセトキシ
、ジエチルアミノアセトキシ、ピペリジノアセトキシ、
ニコチノイルオキシ、ω−カルｄｅ中シデロビオニルオ
キシ及びω−カルざキシペンタノイルオキシ基。

水溶性作用物質の製造のために、アシル基中に塩基性窒
素を有する２１−アシロキシ基を相応する酸付加塩、例
えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、ｇ４酸塩、蓚酸塩
、酒石酸塩又はマレイン酸塩に変えることができる。更
に、２１−ゾカルポン酸モノエステル並びに硫酸エステ
ル及び燐酸エステルを水溶性を高めるためにアルカリ金
属塩例えばナトリウム塩又はカリウム塩に変じることが
できる・ エステル化され九１１−又は１７−位ヒ）９　ａキシル
基としては、有利にアシル基中の炭素原子数１〜８を有
するアシロキシ基がこれに該当する。特に好適なアシロ
キシ基は、アルカノイルオキシ基例えばアセトキシ基、
プロピオニルオキシ基、ブチリルオキシ基、ペンタノイ
ルオキシ基又はヘキサノイルオキシ基である。

本発明による新規メチレンステロイドの製法は、次のと
おルである： 良）一般式ｌ： Ｈ２Ｒ２ Ｃ＝Ｏ ； 〔式中Ｘ％　Ｒ４及びＲ２は１式におけると同じものを
表わす〕の化合物１に１１−ヒ）Ｉ　Ｉ１２キクル化し
５る微生物の培養液を用りて醗酵させ、付加的に１．２
−位で脱水素し、かつ所望の場合に、１１−位に存在す
るヒト四キシル基を酸化し、存在するエステル基を鹸化
するか又は存在するヒドロキシ基をエステル化する。

前工程の実施の九めに、１１α−又は１１β−ヒドロキ
シル化する微生物を用いる慣用の醗酵法を使用する。１
１α−ヒドロキシル化の念めに、アスペルギルｘ　（Ａ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕａ　）属の菌（例えばアスペルギル
ス・オクラセクス（Ａｓｐｅ−ｒｇｉｌｌｕａ　ｏｃｃ
ｈｒａｃｅｕｓ　）　）を微生物として使用するのが有
利である。１１β−ヒドロキシル化のために、例えば、
クルブラリア（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ　）属〔例えばク
ルブラリア・ルナタ（−■１ａｒｉａｌｕｎａｔａ　）
　］、カエング八へツ（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅｌｌａ
）楓（例えばカニングハメツ・パイニエリ（Ｃｕｎｎｉ
−ｎｇｈａｍ＋５ｌｌａ　ｂａｌｎｉｅｒｉ　）、力＝
ｙグハメラーｚレガンス（Ｃｕｎｚｈｉｚ＞ｇｈａｍｅ
ｌｌａ　ｅｌｅｇａｎａ　）、力＝ｙグハメラ・エキノ
ラタ（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅｌｌａ　ｅｃｈｉ−Ｈｏ
ｌａｔａ　）及びカニングハメラ＃デラツクエスレアナ
（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅｌｌａ　ｂｌａｃｋ＊５ｌｅ
ａｎａ　）　］−アプシゾア（Ａｂｓｔｃｉｉａ　）　
ＩＡ　（ＩＰＩ［ばアデシゾア・オル中ディス（Ａｂｓ
ｉｄｉａ　ｏｒｃｈｉｄｉａ　）及びアデシジア・コエ
ルラ（Ａｂａｉｄｉａ　ｃｏｅｒｕｌａ　）　］　、へ
Ｊ／ミントスポリウＡ　（Ｈｅｒｍｉｎｔｏｌｇｐｒｏ
ｒｉｕｍ　）　＠、リゾクトニア（Ｒｈ１ｚｏｃｔｏｎ
ｉａ　）属〔例えばリゾクトニア・ノラ＝　（Ｒｈ１ｚ
ｏｃｔｏｎｉａ　５ｏｌａｎｉ　）　）　、ベルチクリ
ウＡ　（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ　）属〔例えばベル
チシリウム・テオプロマエ（ＶｅｒｔｉＣ１ｌｌｉｕｍ
ｔｈθｏｂｒｏｍａｅ　）　、スタキリジウム属〔列え
ばスｂｉｃａｌｏｒ　）　］、ビエリクラリア（Ｐｉｅ
ｌｌｉｃｕｌａ−ｒｉａ　）　Ｊｉｍ　Ｃ例えばペリク
ラリア・フィラメントデ（Ｐｅ１ｌｉｃｕｌａｒｉａ　
ｆｉｌａｍｅｎｔｏｓａ　）　）又はコレトトリクム（
ＣＣｏ１１ｅｔｏｔｒｉｃｈｕ　）属〔例えばコ・　レ
トトリクム・ビシ（ＣＣｏ１１ｅｔｏｔｒｉｃｈｕ　ｐ
ｉｓｉ　）〕の１Ｉｔ−使用することができる。これら
微生物を周込る醗酵な慣用条件下に実施される。この反
応で、２１−位のアシル基は大抵雛脱される・ａ）法は
有利に、２１位にヒドロキシ基又はアシロキシ基を有す
る一般式Ｈの化合物を用＾て実施するのが有利である。

−ｆｆＫＩＤ！２−位飽和ステ日イドの場合により引続
く脱水素は、微生物学的操作法を用いても、純粋に化学
的な方法を用Ａても実施できる。１列えば、Δ也−ステ
ロイドは、慣用の条件下にバシルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
　）　＠　（例えばバシルス・レンッス（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ　１ｅｎｔｕｓ　）又はバシルス・スファエリクｘ
　（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｐｈａｅｒｉｃｕｓ）〕又は
アルトロバクター（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｓｒ　）　１
ＭＡｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ　ｓｉｍｐｌｅｘ　）　）
又はコリネ／々クテリクム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ　）　＠　（例えばコリネ／々クテリウム・シン
プレックス（Ｃｏｒｉｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｉｍｐ
ｌｅｘ　）　）の細菌培養液を用＾て、１．２−位で脱
水素することができる。しかしながら、他方で、Δ番−
ステロイドをこの反応に貫用の酸化剤例えば二酸化セレ
ン又は２．５−ジクロル−５，６−シチアノペンゾキノ
ンを用いて、不活性溶剤中で加熱する方法で実施するこ
ともできる。

反応終了後に、場合により存在するエステル−、エーテ
ル−基を公知方法で噛脱させ、例えば、場合により存在
するトリメチルシリルオキシ基、ｔ−ブチロキシ基又は
エチレンジオキシ基を酸性触媒（例えば塩酸、硫酸、過
塩素酸又Ｕｐ−）ルオールスクホン酸）を用い、水Ｆ有
低級アルコール又はケトン中、即ち、水含有極性エーテ
ル（例えばジオキサン又はテトラヒドロフラン）中で加
水分解するＱ 所望手段として、引続き一般式■の１１β−ヒドロキシ
ステロイドを酸化して相応する１１−ケトンにすること
は、公知め操作法で例えばクロム酸、Ｎ−プロムスクシ
ンイミド又ＨＮ−デロムアセタミげを用＾て行なう。

′エステルの所望によシ引続く鹸化は公知操作法で行な
う。

例として、酸性触媒例えば塩酸、硫酸、ｐ−ドルオール
スルホ／酸又は塩基性触媒例えば炭酸水素カリウム、炭
酸カリウム、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムの存
在で水又は含水アルコール中でのエステルの鹸化が挙げ
られる。

場合によシ引続く遊離ヒドロキシ基のエステル化は、同
様に公知の操作法を用いて行なう。

９１、ｔば、とドロ中システロイｆをアシルクロリド又
はアシルアンヒドリドを用いて、酸例えば塩化水素酸５
ｐ−）ルオールスルホン酸、トリフルオル酢酸の存在で
又は塩基例えば炭酸カリウム、ピリシン、コリジン又ｈ
ｐ−ジメチルアミノピリジンの存在でエステル化するこ
とができる。

他方とドロ中シ化合物をカルボン酸の使用にヨシ、無水
トリフルオル酢酸の存在でエステル化することができる
。

−１［ｌの２１−ヒドロキシ化合物かう、公知方法で２
１−七）硫酸エステルのアルカリ金属スルフェートが製
造でき、列えば、この際、２１−ヒドロキシ化合物をピ
リジン中の三酸化（ｉｉＩ！黄と反応させ、得られたＲ
酸エステルをアルカリ塩基で処理することによタアルカ
リ塩に変じる。

更に、一般式■の２１−ヒドロキシ化合物から公知方法
で、２１−モノ燐酸エステルが製造でき、この際例えば
２１−ヒドロキシ化合物をスルホン酸クロリドを用いて
、２１−ｔでエステル化し、２１−スルホネートをアセ
トン中で沃化アルカリを用いて、２１−ヨード化合物に
変じ、ヨード化合物を有機塩基の存在で燐酸と反応させ
、得られる燐酸モノエステルをアルカリを用＾てシアル
カリ金属塩に変じる・一般式Ｉの新規コルチコイドは、
殊に局所適用の際に、優れた抗炎症作用を有する点で顕
著な薬物学的に有効な物質である。

更に１これら化合物は屡々迅速な作用開始、高い作用強
度及び長＾作用時間によル優れていて１これらは、好適
な吸収性及びガＶヌス製剤として比較的良好な安定性を
有する。

新規化合物は、ｄレヌス製剤に慣用の賦形剤と組合せて
、接触性皮膚炎、１重々の湿疹、神経皮膚炎、紅皮症、
火傷、外陰及び肛門掻痒症、酒皺鼻、皮膚紅斑性狼債、
乾１、扁平及び症状。

紅色苔廖及び類似の皮膚病の局所適用のために好適であ
る。

個々の医薬品の製造は慣用方法で行ない、この際、作用
物質は、好適な添加物と共に所望の適用形式例えばｍｇ
１０−ション、軟膏１クリーム又は硬膏に変じる。この
ように形成した医薬品中の作用物質濃度は、適用形式に
依り決まる。ローション及び軟膏の場合には、０．００
１〜２％の作用物質濃度を使用するのが有利であるＯ 更に、これら新規化合物：２慣用の賦形剤及び助剤と組
合せて、吸入剤の製造のなめにも良好に適する。

次に実施例につき本発明を説明する・ 例　１（参考例） ａ）１１β−ヒドロキシ−１，４，１６−ブレグナトリ
エンー３，２０−ジオン５０ｇに無水ビリシン３００Ｍ
中でトリメチルクロルシラン５０ｍ１を加え、室温で２
４時間攪拌する。次いで氷水中に攪拌導入し、生じる沈
殿を吸引し、水で洗浄し、塩化メチレン中に入れる。蒸
発濃縮の後に、ｆｆｌ！ｔ！！１１β−トリメチルシリ
ルオキシ−１，４，１６−デレグナトリエンー３，２〇
−ジオン５６−５　！／が得られる。ゾイソデロビルエ
ーテルから再結晶させた試料は、１９６〜１９７．５℃
で融解する。

ｂ）　　を−酪酸カリウム６．７２　、Ｆをジメチルホ
ルムアミド７９ｍ／及びｔ−ブタノール１５．．２ｎｌ
中ＶＣ溶かす。−２５℃に冷却した溶液に亜燐酸トリメ
チル５．５　ｍｌを加え、乾燥酸素を導入する。

次いで無水テトラヒドロフラン６２ゴ中に溶かした１１
β−トリメチルシリロキシ−１，４゜１６−ブレグナト
リエンー５．２０−ジオン８．８ｇを滴加し、引続き、
更に１５分間酸素を導入シ、−２５℃で！ＫｉＯ分間ｊ
ｔｒＦすル。弱い酢酸涜性氷水中に撹拌導入の後くい生
じる沈Ｈ１ｔ−濾噌し、水で洗浄し、塩化メチレン中に
入れ、乾葉させる。残分をシリカゾルでのクロマトグラ
フィにかけ、ゾイソデロビルエーデル／塩化メチレンか
ら再結晶させると、融点１９５〜１９５．５’Ｏの１７
−ヒド四ヤシ−１１β−トリメチルシリロキシ−１，４
，１５−プレグナトリエン−３，２０−ジオン１．９５
ｆｌが得られる。

Ｃ）１７−ヒｒロキシ−１１β−トリメチルシリロ争シ
ー１．４．１５−プレグナトリエン−５，２０−ジオン
１．５，１ｍ、無水テトラヒドロフラン５５”ｔａｇ中
でリチウム−トリーｔ−デトキシアラネー）　１．５５
　ｇを加え、室温で５０分攪拌する。次Ａで、氷水中に
攪拌導入し、稀硫酸で酸性にし、塩化メチレンで抽出す
る。有機相を水で中性になるまで洗浄し、乾燥させ、か
つ蒸発渋約する。残分をシリカゾルのクロマトグラフィ
にかけると、１７，２０ξ−ジヒドロキシ−１１β−ト
リメチルシリロキシ−１，４゜１５−プレグナトリヱン
ー、５−オン１．１７１が油状物として得られた。

ｄ）１７，２０ξ−ジヒｆロキシー１１β−トリメチル
シリロキシ−１，４，１５−プレグナトリエン−５−オ
ン３．８１を無水エーテル２５ｍ１及び無水１，２−ジ
メトキシエタン２５ｍ中に溶かし、＃、鉛−鋼一対７．
６１及び沃化メチレン６．１５ｒｎｌを加え、層流下に
７．５時間加熱する。

次いでもう一度前記と同じ漬のＺｎ　−Ｃｕ一対及び沃
化メチレンを加え、ＲＲ下に更に１８時間加熱する。反
応溶液ｔ−塩化メチレンで稀釈し、飽和塩化アンモニウ
ム溶液及び水で洗浄する。

蒸発濃縮の後にシリカゾルのクロマトグラフィにかける
表、１７，２０ξ−ジヒドロキシ−１１メチレン−１，
４−−ｆ’レグナシエン−３−オン２．５Ｉが油状物と
して得られる。

ｅ）１７，２０ξ−ジヒドロキシ−１１β−トリメチル
シリロキシ−１５α、１６α−メチレン−プレグナシエ
ン−３−オン２．５　ｊｌをジメチルスルホキシド７５
．５ｗｔ１中に溶かし、１０〜１５℃に冷却し、トリメ
チルアミン６．７４ｔｄｆｒ：加え、２５分かかつて、
ジメチルスルホキシド１９．５４中のピリシン−５ｏ３
−錯体４．９ｇの溶液を滴加する。次＾で、室温で１時
間攪拌し、氷水中に攪拌導入し、生じる沈殿を濾暇し、
塩化メチレン中に入れる。乾燥及び蒸発濃縮の後に、残
分をシリカビルのクロマトグラフィＫかけ、１７−ヒド
ロキシ−１１β−トリメチルシリロキシ−１５α、１６
α−メチレン−１，４−デレグナゾエン−３，２０−ジ
オン２．ＯＩＩが得られる。ゾイソデロビルエーテル／
塩化メチレンから再結晶させた生成物は２１６〜２１８
．５℃で融解する。

ヂ）　　１　フ　−　Ｗ　　ｎ　ＰＪ　　４　／／　　
−４１ρ　−１−ＩＩ　　Ｊ　　第Ａｒ　Ｘｉソロキシ
−１５α、１６α−メチレン−１，４−プレグナシエン
−５，２０−ジオン２．０ｇをメタノール４０膚！中で
稀塩酸（１＋１）２ｍ／と共に室温で１．５時間攪拌す
る。次いで、氷水中に攪拌導入し、得られる沈殿を吸引
し、水で洗浄し、塩化メチレン中に入れる。

乾燥及び蒸発濃縮の後に残分を酢酸エステルから再結晶
させると、融点２３３〜２４８℃（分解）の１１β、１
７−シヒドロキシー１５゜１６α−メチレン−１，４−
７’レクナソエン−３，２０−ジオンｉ、ｏｓ、ｐが得
られる。

例　２（＃考例） ａ）　　５β−アセトキシ−１５α、１６α−メチレン
−５−プレグネン−１７，２０ξ−ジオール１１．０．
９ｆｔ−ツメチルスルホキシド２５０ｍ１中に醇かし、
１５℃に冷却し、トリエチルアミン５０．８　ｍｌを加
え、５０分かかつてジメチルスルホキシド１００ｗｊ中
のピリジン−酸化イオウ（Ｖｌ）−一体２２．９の溶液
を滴加する。室温で１時間攪拌し、次＾で弱い酢は酸性
氷水中に攪拌導入し、生じる沈殿を濾取し、光分に洗浄
しかつ塩化メチレン中〈入れる。乾燥及び蒸発濃縮の後
に、残分を酢酸エステルから再結晶させると、融点２４
５〜２４７℃（分解）の１７−ヒドロキシ−３β−アセ
トキシ−１５α、１６α−メチレン−５−プレグネン−
２０−オン７．５９が得られる。

ｂ）１７−ヒドロキシ−３β−アセトキシ−１５α、１
６α−メチレン−５−プレグネン−２０−オン１０．０
　、Ｆを酢酸３５〇−及びクロロホルム１００Ｈ１中に
部分的に溶かし、酢酸中の臭化水素（３７％）０−１ｍ
／を加え、１・５時間かかつて酢酸１００ｄ中の臭素２
．８５ｍの溶液を滴加する。人込で１時間攪拌、シ、反
応酸Ｐ／１．を塩化メチレンで稀釈し、水、炭酸水素ナ
トリウム溶液及び水で洗浄し、乾燥させる。蒸発Ｉ１１
＃ｉｉｌの後に、徂［５，６β、２１−トリデーム−１
フーヒトロキシー６β−アセトキシ−１５α。

１６α−メチレン−５α−プレグナン−２０−オン１７
．９　ＩＩが得られる。

Ｃ）粗製５，６β、２１−）リゾロム−１７−ヒドロキ
シ−５β−アセトキシ−１５α、１６α−メチレン−５
α−プレグナン−２０−オン１７．９　ＩＩをアセトン
４００ｄ中、沃化ナトリウム９．１１ｉ及び酢酸カリウ
ム４０Ｉと共に攪拌下、ａ流下に４時間加熱する。氷水
沈殿の後く濾取した沈殿を塩化メチレン中忙入れ、乾燥
させ、蒸発濃縮させる・残分をシリカデルのクロマトグ
ラフィにかけ、ジイソプロピルエーテル／アセトンから
再結晶させると、融点１９７．５〜１９９℃の１７−ヒ
ドロキシ−３β、２１−ジアセトキシ−１５α、１６α
−メチレン−５−プレグネン−２０−オン４．７５．９
が得られる。

ｄ）内８２０１のガラス製醗酵槽〈騨母エキス０．６％
、コーンステイープリカー０．５％及びデンプン曙０．
２％を含む栄養液１５ノを加え、１２０℃に半時間加熱
することによ！りｆｆｃｌ！ｆｌｕ、冷却後に、フラ♂
バクテリウム・デヒドロデナンス（Ｆｌａｖｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ　ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｎａ　）　ＡＴＣ
Ｃ１５９５０の２日振動フラスコ培養ｇ２５０ｉｌｔ″
接櫨する（振動フラスコ培養液は、同じ培地２５０−を
７日傾斜培養物の洗浄液の接種によ）＃！造する）。３
０℃で、攪拌（２２０回／ｍＬｎ）及び通気（１５Ｊ／
ｍ１ｎ）下に２４時間培養の後く、得られる培養液の９
００ｄｔＴＪＲＨ条件下に：Ｊｉｌ出し、同じ培地１４
１を有する同じ大きさの醗酵槽中〈移す。６時間後く、
培養液は１５ノまで減少するから、ゾメチルホルムアζ
ド１０〇−中の１７−ヒドロキシ−３β、２１−ジアセ
トキシ−・１５α、１６α−メチレン−５−プレグネン
−２０−オン６．５１の無ｉ濾過溶液を加え、同じ東件
下に更ＶＣｌ３時間醗酵させる。

醗酵終了後に、培養？ｆｆｌをメチルイソブチルケトン
各６Ｉｔで３回抽出する。果めた抽出物を真空中で蒸発
乾個させる。残分から熱いヘキサン１００−で使用消泡
剤シリコンＳＨを洗浄除去すると、粗生成物４．７　Ｉ
Ｉが得られるから、これを少量の活性炭をｌａ′！Ｊａ
シた酢酸エステルから再結晶させる。融点２２５〜２２
６℃の１７．２１−ｐヒドロ午シー１５α、１６α−メ
チレン−４−プレグネン−３，２０−ジオン５．１５１
１Ｃ’収率：理論量の６８％）が得られる。

例　　３ ２０！−ガラス製醗酵ｆＩＩＶｃグルコース５％コーン
ステイープリカー１％、ＮａＮＯ３０−２％、ＫＨ２Ｐ
Ｏ，Ｑ、１％、Ｋ、ＨＰｏ、　０．２％、ＭｇＳＯ４０
，０５％、ＦｅＳＯ４０，００２％及びＫＣｔＯ，０５
％をきむ栄養液１４１を入れ、１２０℃釦半時間加熱す
ることによシ滅菌し、冷却後にペリクラリア・フィラメ
ントサ・ｆ・ｓｐ・ナナ中（Ｐｅｌｌｉｃｕｌａｒｉａ
ｆｉｌａｍｅｎｔｏｓａ／−ｓｐ　−ａａｓａｋｉｉ　
）　ＩＦＯ６６７５の６日愚動フラスコ培養液９００ｄ
を接種する（振動フラスコ培養液は、７日傾斜培養物の
洗ｌｆｉを同じ培地９００−に接種することにより製造
される）。

２９℃で、前記条件下で１２時間−醗酵の後忙、ジメチ
ルホルムアミド１００ｄ中の１７．２１−ジヒドロキシ
−１５α１１６α−メチレン−４−プレグネン−６，２
０−ジオンの滅＃Ｉ濾過溶液を加える。更に６６時間醗
酵の後に、培養液をガーゼで濾過する。残留ミセルを水
で数回洗浄する。濾液及び洗浄水をメチルイソブチルケ
トンで抽出し、例２　ｄ）の記載と同様に後処理する。

粗生成物全ヘキサン−アセトン勾配系を用いてシリカデ
ルのクロマトグラフィ〈かける・ 酢酸エステルからの再結晶の後く、融点２０９〜２１０
℃の１１β、１７．２１−トリヒト四１／−１５α、１
６α−メチレン−４−プレグネン−３，２０−ジオン１
．２Ｉが得られる。

極性フラクションから、ジイソプロピル１−チル／アセ
トンから再結晶の後に、融点２１４〜２１５℃の１１α
、１７．２１−トリヒドロキシ−１５α、１゛６α−メ
チレン−４−プレグネン−５，２０”）オン２２Ｉ９が
得られる。

例　４ ２１−エーレンマイヤーフラスコにペプトン１．５％、
コーンステイープリカー１．２％及びＭｇ８０４０−２
％を含む栄養液５００−を装入し、滅菌し、かつパシル
ス・レンッス（Ｂａｃｌｌｌｕｓｌｅｎｔｕａ　）　Ａ
ＴＣＣ１５８０５の３日傾斜培養物の洗液を接ｆ踵する
。３０℃で回転撮動機（１６５回／ｍ１ｎ）上で４８時
間振動の後（、培養液５０ＷＩｌを無菌条件下に暇り出
し、２１−エーレンマイヤーフラスコ中で、酵母エキス
０．１％、コーンステイープリカー０．５％及びデンプ
ン糖０．０５％を含む無菌栄養液５００−と共に移し、
２４時間振る。同じ培地各５００　ａｔを有する２１−
エーレンマイヤーフラスコ１０ａＫ各々、得られ九初期
培養液５０１１Ｌｌを接、１１し、６時間後に、各々ジ
メチルホルムアミド４　ｍｌ中の１１β、１７．２１−
トリヒドロキシ−１５α、１６α−メチレン−４−プレ
グネン−５，２０−ジオン１００ＩＩＩ９の溶液１に装
入し、３０℃及び１６５回転／　ｍｉｎで２４時間振動
する。培養液を集め１メチルイソデテルケトンで抽出す
る。抽出物から、蒸発後に、粗生成物１．２Ｉを生じる
から、これをジイソプロピルエーテル／アセトンから再
結晶させると、融点２０５〜２０７℃の１１β、１７．
２１−トリヒドロキシ−１５α、１６α−メチレン−１
，４−−ｒレグナシエン−５゜２０−ジオンが得られる
。

例　５ コーンステイープリカー１％、大豆粉１．２５％及び大
豆油０．００５％よ〕なる無菌栄養液５００ＩＥ／を有
ｔ、ｂ２Ｊ−エーレンマイヤーフラスコに、アスペルヤ
ルス・オクラセウス（Ａａ−ｐｅｒｇｉｌｌｕａ　ｏｃ
ｈｒａｃｅｕｓ　）　ＡＴＣＣ１００８の１００日傾斜
培養物洗液を接種し、３０℃及び１６５回転／　ｍｉｎ
で７２時間振動する。この培養液各５０ｄを、同じ培地
各５００ＩＩ／を有する２！−エーレンマイヤーフラス
コ７個に接種し、１６時間後に、各々ツメチルスルホキ
シド４−中の１７．２１−Ｐヒドロキシ−１５α、１６
α−メテレン−４−プレグネン−５，２０−′７オンｔ
ｏｏｍ９を２１１１見る０２１時間の接触時間の後に、
集められた培養液をミセル分離せずにメチルイソブチル
ケトンで抽出する。抽出液は蒸発の後４Ｃ徂生成ｔ＃ｌ
ｌ９９２＃ｌを生じ、これは再結晶の後に、融点２１３
〜２１５℃の１１α、１７゜２１−トリヒドロキシ−１
５α、１６α−メチレン−４−プレグネン−５，２０−
ジオン３５１〜を生じる。

例　　６ 例４の粂件下で、２１−エーレンマイヤーフラスコ６個
中で１１α、１７．２１−）ジヒドロキシ−１５α、１
（５α−メチレン−４−プレグネン−３，２０−ジオン
６００ダからパシルス・レンツスＡＴＣＣ１５８０５を
用いる１酵により粗製脱水素化生成物６８０雫が得られ
、これは、クロロホルム／メタノール系（９５＋５）を
用いるシリカゾルでの４層クロマトグラフィにかける精
製の後に、融点２２５〜２２７℃の純粋１１α、１７，
２１−トリヒトｑキシー１５α、１６α−メチレン−１
，４−プレグナシエン−３，２０−ジオンが得られる。

例　　７ 例４に記載と同じ条形下に、コリネパクテリウム−シｙ
プレックス（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｉｍｐ
ｌｅｘ　）　ＡＴＣＣ６９４（５を用いて、１１α。

１７．２１−トリヒドロキシ−１５α、１６α−メチレ
ン−４−デレグネ７−５＃２０−ジオンを１，２−脱水
素する。

？＋１８ １１α、１７．２１−）ジヒドロキシ−１５α、１６α
−メチレン−１、４−７’レグナシエン−５，２０−ジ
オン１００１９ｅゾメチルホルムアミド４ｉ中！／ｃ溶
かし、攪拌下に酢酸鉛（ＩＩ）６４１及び無水酢酸０．
０８　ｍ／を加える。引続き室温で２時間攪拌の後に、
反応溶液を水中に注ぐ。

生じた沈設を吸引し、乾燥させ、酢酸エステル−イソゾ
ロｅルエーテルから再結晶させると、１１α、１７−ジ
ヒドロキシ−２１−フセトキシー１５α、１６α−メチ
レン−１，４−プレグナジェン−５，２０−ジオンが得
られる。

例　９（参考例） １１α、１７−ジヒドロ中シー２１−アセトキシ−１５
α、１６α−メチレン−１，４−プレグナツエン−５，
２０−ジオン５００ダをア七トン１５ｄ中、１０℃で、
クロム硫酸（クロム酸２６７　ｆｉ、水４００＊／、濃
硫酸２５０ｄｌを入れ１１として製造）０．４−を加え
、１０℃で１５分攪拌し、氷水中に沈殿させる。沈殿を
濾過し、塩化メチレン中に磯り、水で洗浄し、乾燥させ
る。蒸発濃縮の後く、シリカゾルでのクロマトグラフィ
にかけると、１７−ヒドロ中シー２１−アセトキシ−１
５α、１６α−メチレン−１，４−プレグナシエン−３
，１１，２０−トリオンが得られる。

例１０（参考例） ａ）１７−ヒドロキシ−３β、２１−ジアセトキシ−１
５α、１６α−メチレン−５−プレグネン−２０−オン
１１．５ｇＭにメタノール１７０ｄ及び塩化メチレン１
７０ｄ中で水冷下に、メタノール１０−中の水酸化カリ
ウム５６８ＩＩ＃９の溶液を加え、氷温度で１．５時間
攪拌する。引続き酢酸で中和し、ＩＷ液を真空中で充分
に濃縮し、氷水中で沈殿させる・生じた沈殿を吸引し、
洗浄しかつ乾燥させる。シリカ一ルでのクロマトグラフ
ィの後間、ゾイソデロビルエーテルと擦した後に、１７
．２１−ジヒドロキシ−３β−アセトキシ−１５α、１
６α−メチレン−５−プレグネン−２０−オン７．３．
９が得られる。酢酸エステルから再結晶した試料は、２
２８〜２５５．５℃（分解）で融解する。

ｂ）１７．２１−ジヒドロキシ−３β−アセトキシ−１
５α、１６α−メチレン−５−プレグネン−２０−オン
７．０．９　ｆ：酢酸２８０　ｒｎｌ中で、結晶水含有
酢酸亜鉛７００ＩＮ９と共に、１２０℃で２時間攪拌す
る。次いで真空中で充分に濃縮し、残分を！Ｉ化メチレ
ン中に入れ、水で９注になるまで洗浄する。蒸発ａｌａ
の後釦、粗＃！２〇−ヒドロキシー３β−アセトキシ−
１５α。

１６α−メチレン−５，１７（２０）−プレグナジェン
−２１−アール７．０ｇが得られる。

Ｃ）２０−ヒドロキシ−３β−７セトキシー１５α、１
６α−メチレン−５，１７（２０）−ブレブナジエン−
２１−アール７．０　＃　ｆｔぎりシン２ＦＪｙｎｌ中
で無水酢酸１４１！Ｌｔと共和、室温で１時間数１處す
る。次＾で、氷水中く導入し、生じる沈殿を濾過し、エ
ーテル中に入れる。エーテル相を稀塩酸、水、炭酸水素
ナトリウム溶液及び水で洗浄する。蒸発濃縮後に、残分
をシリカゾルのクロマトグラフィにかけると、３β。

２０−ジアセトヤシ−１５α、１６α−メチレン−５，
１７（２０）−プレグナジェン−２１−アール６．５ｇ
が得られる。

ジイソプロピルエーテルから再結晶させ九試料は、１４
７．５〜１５１℃で融解する。

ｄ）　　５β、２０−ジアセト午シー１５α、１６α−
メチＶンー１５．１７（２０）−プレグナシエン−２１
−アール６．５　ＩｉＫテトラヒトａ７ラン中で、リチ
ウム−トリーｔ−デトΦシアラー　トロ、５１　ｆ：加
え、室温で６０分攪拌する。次いで、氷水中に攪拌導入
し、檜硫酸で酸性にし、塩化メチレンで抽出する。乾燥
及び蒸発濃縮の後に、粗［２１−ヒドロキシ−５β、２
０−ジアセトキシ−１５α、１６α−メチレン−５゜１
７（２［］）−プレグナシエン６．５１が得られる。

ｅ）２１−ヒドロキシ−３β、２０−ジアセトキシ−１
５α、１６α−メチレン−５，１７（２０）−プレグナ
シエン６．５ｙをメタノール２６Ｏｙｎｌ中、２Ｎ塩酸
６５−と共に還流下に３．５時間加熱する。引続き、氷
水中で沈殿させ＼水で洗浄し１乾燥させる。蒸発濃縮の
後に得られた残分をシリカゾルのクロマトグラフィにか
け、酢酸エステルから再結晶させると、融点１７４．５
〜１７９．５℃の６β、２１−ジヒドロ中シー１５α、
１６α−メチレン−５−プレグネン−２０−オン２．６
ｇが得られるＯｆ）　　５β、２１−ソヒＰａキシー１
５α、１６α−メチレン−５−プレグネン−２０−オン
２．０．９　ｔ−ゾメチルホルＡアミド２０ｄ＆び無水
酢ｆｉ　２　ｍ　中Ｖｃｇ　カｔ、、酢酸鉛１．２８　
Ｎ　ｅ２１１１１．ｔ、處温で１．５時間攪拌する。次
＾で氷水中に攪拌導入し一生じる沈殿を吸引し、洗浄し
、かつ乾瞭させる。

酢酸エステルから再結晶すると、融点１６８．５〜１６
９．５℃の３β−ヒドロキシ−２１−７セトキシー１５
α、１６α−メチレン−５−プレグネン−２０−オン１
．８１が得られるＯｇ）　　５β−ヒｒロキシー２１−
アセトキシ−１５α、１６α−メチレン−５−プレグネ
ン−２０−オン５００ＩＩ９にドルオール２５−及びシ
クロヘキサノン１ｄ中で、ドルオール２ｓｌ中のアルミ
ニウムイソゾロビレ−ｘｏｏｔｕｏの溶液を加え、４５
分間徐々にａＪ−３！ｉ−シながら加熱する・次Ａでエ
ーテルで稀釈し、稀硫酸及び水で洗浄する。乾燥及び環
発嚢縮の後間シリカｒルのクロマトグラフィにかけ、ジ
イソプロピルエーテルから再結晶させると、融点１２４
〜１２５℃の２１−アセトキシ−１５α、１６α−メチ
レン−４−プレグネン−３，２ｏ−ジオン２フ５ダが得
られた。

＄１１１　（参考例） 内容２０１を有するガラス、１１！５１酵摺に、グルコ
ース（デンプン棚）　４．４％、麦芽エキス１％、Ｎａ
ＮＯ３０，３％、ＫＨａＰＯ，Ｑ、１％、ＫＣｌ　Ｏ，
０５％、Ｍｇ８０４０．０５％、ｐｅｓ０４０．００２
％及びコーンステイープリカー０．５％′Ｉｋ含む栄養
液１５１を装入し、１２０℃忙半時間加熱すること忙よ
シ滅菌し、冷却後に、タルデラリア°ルナタ（Ｃｕｒｖ
ｕｌａｒｉａ　１ｕｎａｔａ　）　ＮＲＲＬ　２５８０
の３日扇動フラスコ培養液を接種する（振動フラスコ培
養液は同じ培地２５０　ｍｌに７日傾斜培養物の洗液を
接種して製造）。３０℃で攪拌（２２α回／ｍ１ｎ）及
び通気（１５１／ｍ１ｎ）下に４８時間醗酵の後に、得
られ次項養液９００ｙｎｌを無菌条件下に取シ出し、同
じ培地１４ノを有する同じ醗酵慴中〈移す。１２時間後
に、２１−アセトヤシ−１５α、１６α−メチレン−４
−プレグネン−５，２０−’）オン５１１（ゾメチルホ
ルムアミド１００ｍｊ中に溶解）を加え、２８時間醗酵
させる。例３の記載と同様に操作すると粗生成物２．７
１が得られるから、これをシリカゾルのカラムグロマト
グラフイによフ分雛し、１１β、２１−ジヒドロキシ−
１５α、１６α−メチレン−４−プレグネン−６，２０
−ゾオンが得られる。

例１２ 例４の条件下で、２１−エーシンマイヤーフラスコ２個
中で、１１β、２１−ジヒドロ中ソ−１５α、１６α−
メチレン−４−プレグネン−５，２０−ジオン２０　Ｑ
ｒＲ９をバシルス・シンｙ　ス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　１
ｅｎｔｕｓ　）　ＡＴＣＣ１５８０５を用４て脱水素し
て、１１β、２１−ジヒドロ中シー１５α、１６α−メ
チＶン−１，４−プレグナシエン−３，２０−ジオンに
する。

９１Ｊ　１５　（膠、ｆ９１） ａ）−４０℃に冷却したジメチルホルムアミド２．５−
に、液体外ロガ禦２．５　ｍ／を加え、その後、Ｎ−ゾ
ロムスクシンイミド２５０９を加え、次いで、塩化メチ
レン５ｄ中に躊かした５β−ヒドロキシ−２１−７セト
キシー１５α、１６α−メチレン−５−プレグネン−２
０−オン５００１１９を導入する。久いで、−１５’Ｃ
で５分子”ｌＪ攪拌し、飽和＠酸水素ナトリウム溶液中
に注ぎ、塩化メチレンで抽出する。乾燥及び環発Ｓ縮の
後Ｉｃ粗＃！６ノーフルオルー５−ブロム−６β−ヒド
ロキシ−２１−アセトキシ−１５（ｆ、１６α−メチレ
ン−５α−プレグナン−２０−オン７００Ｉｎ９が得ら
れる。

ｂ）６β−フルオル−５−ブロム−３β−ヒドロキシー
２１−アセトキシ−１５α、１６α−メチレン−５α−
プレグナン−２０−オン７００１ｖにアセトン１５−中
で、クロムｔ！ｌ酸（クロム１１２６７　ｇ、水４００
　ｍｌ、　ａ硫ａ　２５０　ｒｎｌｋ充填して１ｉとし
て蜆造）０．５５ｍＡ！を加え、室温で１０分攪拌する
。次＾で、氷水中に攪拌導入し、沈殿をは別し、塩化メ
チレン中に入れ、乾燥させる。漂−９Ａｌ［１ｉｆｆの
漫ｌで、粗選６β−フルオルー５−プロニー２１−アセ
トキシ−１５α。

１６α−メチレン−５α−プレグネン−３，２〇−ジオ
ン７００ダが得られろ。

Ｃ）　　６β−フルオル−５−ブロム−２１−アセトキ
シ−１５α、１６α−メチレン−５α−プレグナン−５
，２０−ジオン７００ダを酢酸１５−中、５０℃で３時
間攪拌し、次＾で、結晶酢酸ナトリウム５００ダを加え
、更ＶＣ５０℃で１０分間攪拌する。引続き氷水中に攪
拌導入し、生じる沈殿を濾取し、水で洗浄しかつ塩化メ
チレン中に入れる。乾燥及び蒸発ａＩｌａの後に、残分
をシリカデルのクロマトグラフィくかけ、ゾイソデロビ
ルエーテルから再結晶させると、融点１５５．５〜１５
７．５℃の６α−フルオル−２１−アセトキシ−１５α
、１６α−メチレン−４−プレグネン−３，２０−ジオ
ン１５０ダが得られる。

例１４ 例１１記載の条件下で６α−フルオル−２１−アセトキ
シ−１５α、１６α−メチレン−４−プレグネン−５，
２０−ジオン５ｇ【クルブラリア・ルナタＮＲＲＬ　２
５８０を用いて醗酵させ、後処理する。粗生成物２．４
ｇ七カラムクロマトグラフィにより分離すると、６α−
フルオル−１１β、２１−ジヒドロキシ−１５α。

１６α−メチレン−４−プレグネン−６，２０−ジオン
が得られる・ 例１５ ９１４記載と同じ条件下で、２ノ−エーシンマイヤーフ
ラスコ２１１１Ａ中で、６α−フルオル−１１β、２１
−ジヒドロキシ−１５α、１６α−メチレン−４−プレ
グネン−５，２０−ジオン２００１１９　ｆｔハＸ７　
ｋ　Ｘ　・ｌ／　７７　スＡＴＣＣ１５８０５を用いて
脱水素して、６α−２ルオル−１１β、２１−ジにドロ
キシ−１５α、１６α−メチレン−１，４−プレグナジ
ェン−３，２０−ジオンとする。

例１６（参考例） ａ）１７−ヒドロキシ−１１β−トリメチルシリロキシ
−１５α、１６α−メチレン−１，４−プレグナシエン
−５，２Ｏ−９ｙＦ１５ＤＯＩｎ９を無水酢＃ｌＳ　Ｑ
ｒｔｔｌ中で炭酸カルシウム６００１１１９と共（１４
０℃で４０時間攪拌する。炭酸カルシウムを濾去し、濾
液を氷水９釦攪拌導入し、生じる沈殿を吸引し、水で洗
浄し、乾燥させる。

粗製１７−アセドギシー１１β−トリメチルシリΩキシ
−１５α、１６α−メチレン−１，４−ブレブナジエン
−３，２０−ジオン６００〜が得られる。

ｂ）粗製１７−アセトキシ−１１β−トリメチルシリロ
キシ−１５α、１６α−メチレン−１，４−プレグナシ
エン−３，２０−ジオ７６００〜をメタノール１５０プ
中で、稀塩、１！！（１＋１）０．６ｍｌと共に至温で
１．５時間攪拌する。次いで９１１ｅ）の記載と同様に
後処理し、残分をシリカゾルのクロマトグラフィにかけ
る。１１β−ヒドロキシ−１７−アセトキシ−１５α、
１６α−メチレン−１，４−プレグナシエン−３゜２０
−ジオン２４０１ｖが得られる。

例１７（参考例） １１β、１７．２１−）ジヒドロキシ−１５α、１６α
−メチレン−４−プレグネン−５゜２０−ジオン２００
ダを゛ビリシン１−中無水酢酸０．５１と共（室はで１
８時間放置する。次いで氷水中（攪拌導入し、生じる沈
Ｗ！を１１１１し一洗浄しかつ乾燥させる。１１β、１
７−ゾヒド日キシー２１−アセトキシ−１５α、１６α
−メチレン−４−プレグネン−１２０−＆オン２１０〜
が得られる。

的１８（参考例） １１β、１７．２１−トリヒドロキシ−１５α、１６α
−メチレン−４−プレグネン−５゜２０−ジオン１００
１１１９をビリシン１−中、無水酪酸０．５ｄと共に置
皿で１８時間放置する。次りで、氷水中に撹拌導入し、
析出油分をデカンテーション分離し、次いで、これを塩
化メチレン中く入れる。調裂用グロマトグラフイの後に
、１１β、１７−ジヒドロキシ−２１−ブチリルオキシ
−１５α、１６α−メチレン−４−プレグネン−５，２
０−ジオン１１５〜が得られる。

例１９ １１β、１７．２１−トリヒドロキシ−１５α、１６α
−メチレン−１，４−プレグナシエン−６，２０−ジオ
ン２５０Ｒ９をピリシン１．５ｄ中、無水カプロンｄ０
．７５−と共に放置する。

次＾でｐＨ８の記載七同罎に後処理し、ｎＩ製する。１
１β、１７−シヒドロキシー２１−ヘキテノイルオキシ
−１５α、１６α−メチレン−１，４−デレグナゾヱン
ー３，２０−ゾオン２１０リ−６よ得られる。

同２０（参考例） １１β、２１−ジヒドロキシ−１５α、１６α−メチレ
ン−４−プレグネン−５，２０−ジオン２５０〜にピリ
ジン１．５４中、無水エナント酸０．７５ｔ／ｌ−加え
、室温で１８時間放置する。

欠−で、ｆｐｆＪ１８の記載と同様（反応させ、後処理
する。１１β−ヒドロキシ−２１−へデタノイルオキン
−１５α、１６α−メチレン−４−プレグネン−３，２
０−ジオン１７０Ｉ１９が得られるＯ 列２１ １１β−２１−ゾヒげクキシー１５α、１６α−メチレ
ン−１，４−プレグナジェン−６゜２０−ジオン１８０
ダを岡１７の記載と同様にビリシン中で無水酢酸と反応
させ、後処理する０１１β−ヒドロキシ−２１−アセト
キシ−１５α、１６α−メチレン−１、４−１’レグナ
シエン−３，２０−ジオン１４５ＩＩ９が得られる・例
２２（参考例） ６α−フルオル−１１β、２１−ジヒドロキシ−１５α
、１フα−メチレン−４−プレグネン−５，２０−ジオ
ン２００１＋１１ｉＰにピリシン２　ａｔ中でピパリン
酸りロリＦ　Ｏ，２５１を加え、５℃で１８時間放置す
る。例１８の記載と同様（反応させ、後処理する。６α
−フルオル−１１β−ヒドロキシ−２１−トリメチルア
セトキシ−１５α、１６α−メチレン−４−プレグネン
−６，２０−ジオン１３０ＩＩＩ９が得られる。

例２３ ６α−フルオル−１１β、２１−ジヒドロキシ−１５α
、１６α−メチレン−１，４−プレグナシエン−５，２
０−ジオン２００ｒｎ９を例１８の記載と同様にビ替ジ
ン中の無水ｔｆｌｔｄＲ（！−反応さｔ１後処’ｊＭｆ
ｂ、６α−フルオル−１１β−ヒドロキシ−２１−ブチ
リールオキシ−１５α、１６α−メチレン−１，４−プ
レグナジェン−３，２０−ジオン１５０〜が得られる。

例２４ 無水ビリシン４０プを一１５℃に冷却し、攪拌下に、新
しく蒸溜した二酸化硫Ｉｔ　２−５９　ｍｌを滴加して
、内温を一５℃よシ高くさせない＠この溶液に６α−フ
ルオル−１１β、２１−ジヒドロキシ−１５α、１６α
−メチレン−１，４−プレフナジエン−３，２０−ジオ
ン２ＯＪｌ入れ、これをビリシン１０ｍで後洗する。反
応混合物を室弓で５０分攪拌し、１ＮＶ１性ソーダ７０
．５ｍでｐＨ８，５に調節する。ピリシン除去のために
、塩化メチレンで抽出する。水相の５値を１Ｎ苛性ソー
ダで８ＶＣ調節し、この溶液を真空中、浴＠４０℃で蒸
発濃縮する。残分をメタノール５００ｄ中ＶＣ＃Ｉかし
、硫酸ナトリウムを濾去し、ｆｌＩ液を真空中で蒸発濃
縮しかつ乾燥させる。ナトリウム−（６α−フルオル−
１１β−ヒドロキシ−６，２０−ジオキソ−１５α。

１６α−メチレン−１，４−プレグナシエン−２１−イ
ル）−スルフェートが得られる・例２５ ピリシン２００ｄ中の６α−フルオル−１１β、２１−
ゾヒｒロキシー１５α、１６α−メチレン−１，４−プ
レグナシエン−５，２０−ジオン２０ｇの溶液に冷却及
び攪拌下にメタンスルホン酸りロリ＃９２０ｍを滴加す
る。３０分の反応時間の後く、反応溶液を氷水中に注ぎ
、入れ、生じる２１−メシレートを濾覗する、こプして
得た６α−フルオル−１１β−ヒドロキシ−２１−メシ
ルオキシ−１５α、１６α−メチレン−１，４−プレグ
ナシエン−３，２０−ゾｙｒｙ１５．４！／にアセト１
５００ａ／中Ｖｃ［カｌ、、アセトン４００ｍ中の沃化
ナトリウム１５．４１ｉの麻調の後に加熱沸騰させる、
残分を稀チオ硫酸ナトリウム溶液と共に攪拌し、吸引し
、水で洗浄し、アセトン３００ｄ中に溶かし、温時、水
１２０ａｌを用いて沈殿させる。冷却後に、分解点１５
７〜１６０℃の６α−フルオル−２１−ヨード−１１β
−ヒドロキシ−１５α、１６α−メチレン−１，４−プ
レグナシエン−６゜２０−ジオン１４．１．９を単種さ
せる。２１−ヨード化合物１４．１．９をアセトニトリ
ル７００ｍ中４Ｃ＃ｌかし、オルト燐酸１４．１ｍ＆び
トリエチルアミン４２ｍと共にｌ！流下に３時間加熱す
る＠引続き、反応溶液を減圧下に濃縮し、残分をメタノ
ール中に入れ、この溶液を１Ｎ苛性ソーダメタノール液
で−１１にｍ節する。残分を濾去し、濾液を真空中で蒸
発濃縮し、残分をメタノール７０ｄ中に入れ、エーテル
の添加にょ夛シナトリウム塩を沈殿させる。シナトリウ
ム塩をエーテル含有メタノールから再沈殿させることに
よ５精製する。シナトリウム−（６α−フルオル−１１
β−ヒドロキシ−５，２０−ジオキソ−１５α、１６α
−メチレン−１，４−プレグナシエン−２１−イル）−
ホスフェ−Ｎ１．９１が得られる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式 I ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔式中Ｘは水素原子、弗素原子又はメチル基を表わし、
   Ｙはヒドロキシメチレン基、アルカノイルオキシメチレ
   ン基又はカルボニル基を表わし、Ｒ＿１は、水素原子、
   ヒドロキシ基又はアルカノイルオキシ基を表わし、Ｒ＿
   ２は水素原子、又は遊離の又は生理学的に認容性の酸で
   エステル化されたヒドロキシ基を表わす〕のメチレンス
   テロイドを製造するため、一般式II： ▲数式、化学式、表等があります▼（II） 〔式中Ｘ、Ｒ＿１及びＲ＿２は前記と同じものを表わす
   〕の化合物を１１−ヒドロキシル化しうるアスペルギル
   ス、ペリクラリア又はクルブラリア属の微生物の培養液
   を用いて醗酵させ、付加的にバシルス又はコリネバクテ
   リウム属の微生物を用いて１，２−位で脱水素化するこ
   とを特徴とする、新規メチレンステロイドの製法。 ２、一般式 I ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔式中Ｘは水素原子、弗素原子又はメチル基を表わし、
   Ｙはヒドロキシメチレン基を表わし、Ｒ＿１は、水素原
   子、ヒドロキシ基又はアルカノイルオキシ基を表わし、
   Ｒ＿２は生理学的に認容性の酸でエステル化されたヒド
   ロキシ基を表わす〕のメチレンステロイドを製造するた
   め、一般式II： ▲数式、化学式、表等があります▼（II） 〔式中Ｘ、Ｒ＿１は前記と同じものを表わす〕の化合物
   を１１−ヒドロキシル化しうるアスペルギルス、ペリク
   ラリア又はクルブラクア属の微生物の培養液を用いて醗
   酵させ、付加的にバシルス又はコリネバクテリウム属の
   微生物を用いて１，２−位で脱水素化し、更に付加的に
   ２１−ヒドロキ基をエステル化することを特徴とする、
   新規メチレンステロイドの製法。