JPS6166149A - 免疫反応測定装置 - Google Patents
免疫反応測定装置Info
- Publication number
- JPS6166149A JPS6166149A JP18725484A JP18725484A JPS6166149A JP S6166149 A JPS6166149 A JP S6166149A JP 18725484 A JP18725484 A JP 18725484A JP 18725484 A JP18725484 A JP 18725484A JP S6166149 A JPS6166149 A JP S6166149A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antigen
- scattered light
- antibody
- light
- reaction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 230000036046 immunoreaction Effects 0.000 title 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 34
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 34
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims abstract description 23
- 230000001427 coherent effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 64
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 claims description 29
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 27
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 claims description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 5
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 claims description 2
- 230000015654 memory Effects 0.000 abstract description 13
- 239000013307 optical fiber Substances 0.000 abstract description 13
- 230000004907 flux Effects 0.000 abstract description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 description 18
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 13
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 11
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 230000005653 Brownian motion process Effects 0.000 description 6
- 238000005537 brownian motion Methods 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 3
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 3
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 3
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 2
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000270666 Testudines Species 0.000 description 2
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 235000004789 Rosa xanthina Nutrition 0.000 description 1
- 241000109329 Rosa xanthina Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000011146 organic particle Substances 0.000 description 1
- 239000011242 organic-inorganic particle Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/251—Colorimeters; Construction thereof
- G01N21/253—Colorimeters; Construction thereof for batch operation, i.e. multisample apparatus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/47—Scattering, i.e. diffuse reflection
- G01N21/49—Scattering, i.e. diffuse reflection within a body or fluid
- G01N21/51—Scattering, i.e. diffuse reflection within a body or fluid inside a container, e.g. in an ampoule
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01J—MEASUREMENT OF INTENSITY, VELOCITY, SPECTRAL CONTENT, POLARISATION, PHASE OR PULSE CHARACTERISTICS OF INFRARED, VISIBLE OR ULTRAVIOLET LIGHT; COLORIMETRY; RADIATION PYROMETRY
- G01J3/00—Spectrometry; Spectrophotometry; Monochromators; Measuring colours
- G01J3/28—Investigating the spectrum
- G01J3/44—Raman spectrometry; Scattering spectrometry ; Fluorescence spectrometry
- G01J3/4412—Scattering spectrometry
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/02—Investigating particle size or size distribution
- G01N15/0205—Investigating particle size or size distribution by optical means
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/02—Investigating particle size or size distribution
- G01N15/0205—Investigating particle size or size distribution by optical means
- G01N15/0211—Investigating a scatter or diffraction pattern
- G01N2015/0216—Investigating a scatter or diffraction pattern from fluctuations of diffraction pattern
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
- G01N21/03—Cuvette constructions
- G01N2021/0325—Cells for testing reactions, e.g. containing reagents
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/59—Transmissivity
- G01N21/5907—Densitometers
- G01N2021/5969—Scanning of a tube, a cuvette, a volume of sample
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
- G01N2201/08—Optical fibres; light guides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
- G01N35/00029—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor provided with flat sample substrates, e.g. slides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
(技術分野)
本発明は、抗原−抗体反応に基く免疫反応を、微粒子に
よる散乱光の強度ゆらぎを利用して測定する装置に関す
るものである。
よる散乱光の強度ゆらぎを利用して測定する装置に関す
るものである。
(従来技術)
免疫物質、ホルモン、医薬品、免疫調節等生体内微量成
分の測定法どして免疫反応の特異的選択反応を利用した
免疫分析法があり、大別すると酵素や放射性アイソ1〜
−ブを4v識物質として用いる標識免疫分析法と、抗原
・抗体複合体を直接測定する非標識免疫分析法の2方法
がよく知られている。
分の測定法どして免疫反応の特異的選択反応を利用した
免疫分析法があり、大別すると酵素や放射性アイソ1〜
−ブを4v識物質として用いる標識免疫分析法と、抗原
・抗体複合体を直接測定する非標識免疫分析法の2方法
がよく知られている。
前者の標識免疫分析法どしてはラジオイノ、ノアッセイ
(RIA)、酵素免疫分析(E rA)、螢光免疫分析
(FIA)等がよく知られており、高感度であるがアイ
ソトープの取り扱い、廃棄物処理等の種々の制限があり
、又測定に長時間を要ηるうえに標識試薬が高価である
ため検査1ストが高い等の欠点がある1、 後者の非標識免疫分析法には免疫電気泳動法、免疫拡散
法、沈降法等があり、簡便4丁分析沫であるが感度、定
量性、再現性の点で精密測定と1では不充分である。こ
のような免疫分析法に関しては[臨床検査法提要−1(
金月東原署、金月正光編署、金属出版)や、[臨床検査
lVoβ、22゜No 、5 (1978) 、第47
1〜487頁に訂しく説明されている。
(RIA)、酵素免疫分析(E rA)、螢光免疫分析
(FIA)等がよく知られており、高感度であるがアイ
ソトープの取り扱い、廃棄物処理等の種々の制限があり
、又測定に長時間を要ηるうえに標識試薬が高価である
ため検査1ストが高い等の欠点がある1、 後者の非標識免疫分析法には免疫電気泳動法、免疫拡散
法、沈降法等があり、簡便4丁分析沫であるが感度、定
量性、再現性の点で精密測定と1では不充分である。こ
のような免疫分析法に関しては[臨床検査法提要−1(
金月東原署、金月正光編署、金属出版)や、[臨床検査
lVoβ、22゜No 、5 (1978) 、第47
1〜487頁に訂しく説明されている。
また、 「l mmunocllcmistryJ
、 V(+ 、Q 、 12゜NO、’I (1
975)、第319〜3!11頁には、抗体よlこは抗
原を表面に担持さI!1こF+了を抗tin pしたは
抗体と反応させ、凝集粒子の大きさに比例して減少Jる
ブラウン運動の指標とイ1゛る平均拡j1(定数を、レ
ーク“光の散乱光のスペクトル幅の変化から求めること
により抗原また14抗体を定品分析力る方法が開示され
ている。この分析方法で【ま標識試薬を用いない利点は
あるが、粒子のブラウン運動によるドツプラ効甲ににつ
て入q・1)11のスペクトルが広がるのを分光b1を
用いで検出しているため、装買が人形で高価となる欠点
があると」ξに分光泪を機械的に駆Φ!+ ?lる際に
誤差が牛し、fI4i疫お31、ひ再現性が悪くイする
欠点がある。また、この方法では光のスペクトル幅から
平均拡散定数を求め“Cいるだ(プであり、情報部が少
ないという欠点もある上述したJ、うに従来の免疫分析
力ン人では、高価な1票識試堅を用いるため分析のラン
ニンノ!コス1〜が高価となると共に液体の取扱いおよ
び処理が面倒どなっt、:す、処理時間が良くなる欠点
があったリ、高価で大形な分光剖を必要とすると共に精
度や再現性も悪く、(qられる情報量も少ないという欠
点があった。
、 V(+ 、Q 、 12゜NO、’I (1
975)、第319〜3!11頁には、抗体よlこは抗
原を表面に担持さI!1こF+了を抗tin pしたは
抗体と反応させ、凝集粒子の大きさに比例して減少Jる
ブラウン運動の指標とイ1゛る平均拡j1(定数を、レ
ーク“光の散乱光のスペクトル幅の変化から求めること
により抗原また14抗体を定品分析力る方法が開示され
ている。この分析方法で【ま標識試薬を用いない利点は
あるが、粒子のブラウン運動によるドツプラ効甲ににつ
て入q・1)11のスペクトルが広がるのを分光b1を
用いで検出しているため、装買が人形で高価となる欠点
があると」ξに分光泪を機械的に駆Φ!+ ?lる際に
誤差が牛し、fI4i疫お31、ひ再現性が悪くイする
欠点がある。また、この方法では光のスペクトル幅から
平均拡散定数を求め“Cいるだ(プであり、情報部が少
ないという欠点もある上述したJ、うに従来の免疫分析
力ン人では、高価な1票識試堅を用いるため分析のラン
ニンノ!コス1〜が高価となると共に液体の取扱いおよ
び処理が面倒どなっt、:す、処理時間が良くなる欠点
があったリ、高価で大形な分光剖を必要とすると共に精
度や再現性も悪く、(qられる情報量も少ないという欠
点があった。
このような欠点を除去するために、微粒子による散乱光
の強度ゆらぎが抗原−抗体反応と密接な関係にあること
を利用して抗原−抗体反応を測定することにより、上述
した従来の欠点を除去し、高価な標識試薬や高山でか−
)人形な分光泪を用いずに、高い結電おJ:び再現性を
以って測定を行なうことができ、しかも測定11間の短
緒11抗原−抗体反応測定の自動化が可能であると共に
抗原−抗体反応について多くの有用な情報を得ることが
できる免疫反応測定方法およびこのような方法を実施す
る装量が特願11R59−1/1887B5”ACオイ
て提案されている。
の強度ゆらぎが抗原−抗体反応と密接な関係にあること
を利用して抗原−抗体反応を測定することにより、上述
した従来の欠点を除去し、高価な標識試薬や高山でか−
)人形な分光泪を用いずに、高い結電おJ:び再現性を
以って測定を行なうことができ、しかも測定11間の短
緒11抗原−抗体反応測定の自動化が可能であると共に
抗原−抗体反応について多くの有用な情報を得ることが
できる免疫反応測定方法およびこのような方法を実施す
る装量が特願11R59−1/1887B5”ACオイ
て提案されている。
この免疫反応測定方法は、少なくとも抗原および抗体を
含む抗原−抗体反応液に輻射線を投制し、抗原−抗体反
応により生成される微粒子による散乱光または反応液に
加えた抗体または抗原を固定した微粒子の抗原−抗イホ
反応によって生ずる散乱光をホモゲイン的にまたはへテ
ロダイン的に検知し、この検知出力の強度ゆらぎのパワ
ースペク1〜ル密度に基いて抗原−抗体反応を測定する
ものである。
含む抗原−抗体反応液に輻射線を投制し、抗原−抗体反
応により生成される微粒子による散乱光または反応液に
加えた抗体または抗原を固定した微粒子の抗原−抗イホ
反応によって生ずる散乱光をホモゲイン的にまたはへテ
ロダイン的に検知し、この検知出力の強度ゆらぎのパワ
ースペク1〜ル密度に基いて抗原−抗体反応を測定する
ものである。
このような免疫反応測定方法においでは、抗原−抗体反
応の結果として生成される微粒子による散乱光または抗
体または抗原を表面に固定した微粒子の抗原−抗体反応
によって生ずる散乱光の強度が、光の5「渉によりゆら
ぐため、この強度ゆらぎのパワースペクトル畜疫に粒子
の形状や大きさの依存1(1があることに着目し、強度
ゆらぎのパワースペクトル密石を検知することにより抗
原−抗体反応の有無、抗原または抗体の定晴、抗原−抗
体反応による微粒子の凝集状態(粒径分布)などの多く
の有用な情報を得ることができる。このような方法では
散乱光を光検出器で受光し、その出力信号強度のゆらぎ
を検知するものであるから、標識試薬を用いる必要はな
いと共に散乱光のスペクトル分析を行なうものではイj
いので分光t1を用いる必要もない。また、散乱光の強
度ゆらぎのパワースベクトル密度の緩和周波数が粒子の
人ささに依存することを利用して、抗原−抗体反応の前
後における緩和周波数の比を求め、この比の値から抗原
−抗体反応を測定したり、散乱光の強度ゆらぎのパワー
スペクトル密度の低周波数側の周波数に関する積分値が
粒子の大きさ1こ依存することを利用して、抗原−抗体
反応の前後における積分値の比を求め、この比の値から
抗原−抗体反応を測定したりすることができる。
応の結果として生成される微粒子による散乱光または抗
体または抗原を表面に固定した微粒子の抗原−抗体反応
によって生ずる散乱光の強度が、光の5「渉によりゆら
ぐため、この強度ゆらぎのパワースペクトル畜疫に粒子
の形状や大きさの依存1(1があることに着目し、強度
ゆらぎのパワースペクトル密石を検知することにより抗
原−抗体反応の有無、抗原または抗体の定晴、抗原−抗
体反応による微粒子の凝集状態(粒径分布)などの多く
の有用な情報を得ることができる。このような方法では
散乱光を光検出器で受光し、その出力信号強度のゆらぎ
を検知するものであるから、標識試薬を用いる必要はな
いと共に散乱光のスペクトル分析を行なうものではイj
いので分光t1を用いる必要もない。また、散乱光の強
度ゆらぎのパワースベクトル密度の緩和周波数が粒子の
人ささに依存することを利用して、抗原−抗体反応の前
後における緩和周波数の比を求め、この比の値から抗原
−抗体反応を測定したり、散乱光の強度ゆらぎのパワー
スペクトル密度の低周波数側の周波数に関する積分値が
粒子の大きさ1こ依存することを利用して、抗原−抗体
反応の前後における積分値の比を求め、この比の値から
抗原−抗体反応を測定したりすることができる。
しかし、このようrk散乱光の強度ゆらぎのパワースペ
クトル密度に阜いて抗原−抗体反応を測定する場合、散
乱光のエネルギーは小ざいのでパワースペクトル密度を
表わづ一信号はノイズの影響を受は易く、ぞのS/Nは
小さく、例えば緩和周波数を正確に求めることが困難と
なり、測定精度が低くなる欠点がある。
クトル密度に阜いて抗原−抗体反応を測定する場合、散
乱光のエネルギーは小ざいのでパワースペクトル密度を
表わづ一信号はノイズの影響を受は易く、ぞのS/Nは
小さく、例えば緩和周波数を正確に求めることが困難と
なり、測定精度が低くなる欠点がある。
(発明の目的)
本発明の目的は、」口述した散乱光の強度ゆらぎを利用
した免疫反応測定方法の利点はそのまま紺持し、その欠
点を有効に除去1ノ、信号のS/Nを向−1りることに
J、り測定精度を高くりることができる測定装置をIr
6 (It uようとづる0のである。
した免疫反応測定方法の利点はそのまま紺持し、その欠
点を有効に除去1ノ、信号のS/Nを向−1りることに
J、り測定精度を高くりることができる測定装置をIr
6 (It uようとづる0のである。
(発明の概要)
本発明の測定装置は、11″j: Dot +l−)
J:ひ′抗体を含む反応液に光を投!:141ノ、抗原
−抗体反応により生成される微事(t T f;、−、
J、;る散乱光また(よ反応液に加えた抗体51:たは
抗原を固定した微粒子による散乱光を検知し、この検知
出力の強度ゆらい゛のパワースペクトル密度 にJジい(−1 前記抗原−抗体反応を行くiう反応液を収容づるセルと
、 Jヒーレンl−4τ光ビームを敢CJij lる光源駅
間ど、この二]ヒーレン1〜光を、ぞの進行方向に対し
直交りる方向に直線状に集束、\れたビームどして前記
セルに八〇=1さける光学系と、 前記レル内の、前記直線状に集束されたビームの異なる
集束点からの散乱光を並列的に受光する複数の光検出装
置と、 これら複数の光検出装置からの出力信号を記憶する第1
の記憶手段と、 この第1の記憶手段から各光検出装置の出力信号を順次
に読出して、その強度ゆらぎのパワースペクトル密度を
求める手段と、 これら複数のパワースペクトル密度を記憶する第2の記
憶手段と、 この第2の記憶手段、かう複数のパワースペクトル密度
を読出して平均化する手段と、 この平均化されたパワースペクトル密度に基いて抗原−
抗体反応を測定する手段とを貝えることを特徴とするも
のである。
J:ひ′抗体を含む反応液に光を投!:141ノ、抗原
−抗体反応により生成される微事(t T f;、−、
J、;る散乱光また(よ反応液に加えた抗体51:たは
抗原を固定した微粒子による散乱光を検知し、この検知
出力の強度ゆらい゛のパワースペクトル密度 にJジい(−1 前記抗原−抗体反応を行くiう反応液を収容づるセルと
、 Jヒーレンl−4τ光ビームを敢CJij lる光源駅
間ど、この二]ヒーレン1〜光を、ぞの進行方向に対し
直交りる方向に直線状に集束、\れたビームどして前記
セルに八〇=1さける光学系と、 前記レル内の、前記直線状に集束されたビームの異なる
集束点からの散乱光を並列的に受光する複数の光検出装
置と、 これら複数の光検出装置からの出力信号を記憶する第1
の記憶手段と、 この第1の記憶手段から各光検出装置の出力信号を順次
に読出して、その強度ゆらぎのパワースペクトル密度を
求める手段と、 これら複数のパワースペクトル密度を記憶する第2の記
憶手段と、 この第2の記憶手段、かう複数のパワースペクトル密度
を読出して平均化する手段と、 この平均化されたパワースペクトル密度に基いて抗原−
抗体反応を測定する手段とを貝えることを特徴とするも
のである。
(実施例)
第1図は本発明による免疫反応測定装置の一実施例の構
成を示す図である。本例においては、コヒーレント光を
放出する光源どして波長632.8r+IIIのHe−
Neガスレーザ1を設ける。コヒーレント光を放射する
光源としては、このようなガスレーザの他に半導体レー
ザのような固体レーザを用いることもできる。光[1か
ら放射されるレーザ光束2を半透鏡3により光束4と光
束5とに分離する。一方の光中4を=19メータレンズ
6により径の大きな平?j光束どした後、シリンドリカ
ルレンズ7によって、光の′)1L(j方向に苅し直交
する方向に心線的に集束されたビームとして透明なセル
8に投口・1する。 (ljlプノの光束5をシリ−1
ンフA1〜ダイオードより成る光検出器9に入0=Iさ
1!、光源1の出力光強tαの変動を表わ11玉二り低
目に変換する。
成を示す図である。本例においては、コヒーレント光を
放出する光源どして波長632.8r+IIIのHe−
Neガスレーザ1を設ける。コヒーレント光を放射する
光源としては、このようなガスレーザの他に半導体レー
ザのような固体レーザを用いることもできる。光[1か
ら放射されるレーザ光束2を半透鏡3により光束4と光
束5とに分離する。一方の光中4を=19メータレンズ
6により径の大きな平?j光束どした後、シリンドリカ
ルレンズ7によって、光の′)1L(j方向に苅し直交
する方向に心線的に集束されたビームとして透明なセル
8に投口・1する。 (ljlプノの光束5をシリ−1
ンフA1〜ダイオードより成る光検出器9に入0=Iさ
1!、光源1の出力光強tαの変動を表わ11玉二り低
目に変換する。
1=ル8の中には、表面に抗体または抗原を結合した微
粒子を分散さ「た緩衝液と、抗原または抗体を含む被検
液どの混合物である抗原−抗体反応液を収容する。した
がってセル8中で抗原〜抗体反応が起こり、微粒子間に
相互作用が/lじたり、微粒子が相互に(=I Wする
ため、ブラウン運動の状態が変化することになる。セル
8中の、直線的に集束されたビームの集束点Fの異なる
位冒において微粒子によって散乱された散乱光を、水平
方向に配列した光フアイバアレイ10を経てフォトダイ
オードアレイ11に並列に人IJ’lざUる。光フアイ
バアレイ10の光ファイバの本数と7A1〜グイA−ド
アレイ11のフオトダイオードの個数どは必ら一部しも
一致させる必要はなく、例えば隣接する2本の光ファイ
バで伝達される散乱光を1個のフ7tf〜ダイオードに
入射させることもできる。本発明においてはこのような
複数N個のチャンネルを設け、これらチャンネルにより
12ル8の異なる位置からの散乱光を並列的に受光する
ようにする。
粒子を分散さ「た緩衝液と、抗原または抗体を含む被検
液どの混合物である抗原−抗体反応液を収容する。した
がってセル8中で抗原〜抗体反応が起こり、微粒子間に
相互作用が/lじたり、微粒子が相互に(=I Wする
ため、ブラウン運動の状態が変化することになる。セル
8中の、直線的に集束されたビームの集束点Fの異なる
位冒において微粒子によって散乱された散乱光を、水平
方向に配列した光フアイバアレイ10を経てフォトダイ
オードアレイ11に並列に人IJ’lざUる。光フアイ
バアレイ10の光ファイバの本数と7A1〜グイA−ド
アレイ11のフオトダイオードの個数どは必ら一部しも
一致させる必要はなく、例えば隣接する2本の光ファイ
バで伝達される散乱光を1個のフ7tf〜ダイオードに
入射させることもできる。本発明においてはこのような
複数N個のチャンネルを設け、これらチャンネルにより
12ル8の異なる位置からの散乱光を並列的に受光する
ようにする。
フォトダイオードアレイ11の各フーi]−ダイオード
から出力される光電変検出力信号を、イれぞれ低雑音増
幅器12−1〜12−Nで増幅した後A/D変換器13
−1〜13−NによりMビットのデジタル信号に変換す
る。A/D変換器13−1〜13−Nでは各測定サイク
ルタイム中P個のデジタル信号をサンプリングし、これ
らを第1の記憶手段を構成する第1のメモリ14−1〜
14−Nにそれぞれ記憶する。したがって各メモリの容
量はPXMビット以上必要である。
から出力される光電変検出力信号を、イれぞれ低雑音増
幅器12−1〜12−Nで増幅した後A/D変換器13
−1〜13−NによりMビットのデジタル信号に変換す
る。A/D変換器13−1〜13−Nでは各測定サイク
ルタイム中P個のデジタル信号をサンプリングし、これ
らを第1の記憶手段を構成する第1のメモリ14−1〜
14−Nにそれぞれ記憶する。したがって各メモリの容
量はPXMビット以上必要である。
次にこれら第1のメモリ14−1〜14−Nの各々に記
憶されたP個のデジタル信号をマルチプレクサ15によ
り順次に読出し、デバイダ16に供給覆る。
憶されたP個のデジタル信号をマルチプレクサ15によ
り順次に読出し、デバイダ16に供給覆る。
このデバイダ16には、光検出器9の出力を、低雑音増
幅器17.A、/11☆換器18およびメLす19を介
【ノて供給覆る。こねらA 、、、/ l)変換器18
お」:びメtす19の機能は、十)ホしたA7″1〕変
換器13−1・・・およびメtす14−1・・・どまっ
たく同社であり、A 7/D変換器18において各々が
Mピッ1へのデジタル信局をP個性り、これらをメモリ
19に記憶する。デバイダ16カ目ろは光源1の出力変
動分が補正されIこ信号が111られる。次にこのfハ
シ〕をハ速フーリ]−変換器20に供給し、高速フーリ
T変換を行なっ−C散乱光強度ゆらぎのパワースペクト
ル密度を求める。
幅器17.A、/11☆換器18およびメLす19を介
【ノて供給覆る。こねらA 、、、/ l)変換器18
お」:びメtす19の機能は、十)ホしたA7″1〕変
換器13−1・・・およびメtす14−1・・・どまっ
たく同社であり、A 7/D変換器18において各々が
Mピッ1へのデジタル信局をP個性り、これらをメモリ
19に記憶する。デバイダ16カ目ろは光源1の出力変
動分が補正されIこ信号が111られる。次にこのfハ
シ〕をハ速フーリ]−変換器20に供給し、高速フーリ
T変換を行なっ−C散乱光強度ゆらぎのパワースペクト
ル密度を求める。
このようにして順次の−fヤンネルからの光電変換出力
信号を処理してパワースペクトル密度αを求め、これら
をデマルチブレク1J21を経−C第2の記憶手段を構
成する第2のメ七り22 1−22−Nに次々と記憶す
る。これらの第2のメモリの各々の容量もPXMピッ1
〜以I−あれば」:い。このJ:う1こして全チャンネ
ルの信号を処理した後、これらをノーマライザ23に供
給して平均化し、平均化したパワースペクI・ル密度を
演算処理部24に供給する。演算処理部24では平均化
されたパワースペクトル密度に基いて演算処理を行ない
、凝集反応の有無、試料中の抗原または抗体の濃度など
の測定結果を求め、これをプリンタ25に供給して測定
結果を表示する。
信号を処理してパワースペクトル密度αを求め、これら
をデマルチブレク1J21を経−C第2の記憶手段を構
成する第2のメ七り22 1−22−Nに次々と記憶す
る。これらの第2のメモリの各々の容量もPXMピッ1
〜以I−あれば」:い。このJ:う1こして全チャンネ
ルの信号を処理した後、これらをノーマライザ23に供
給して平均化し、平均化したパワースペクI・ル密度を
演算処理部24に供給する。演算処理部24では平均化
されたパワースペクトル密度に基いて演算処理を行ない
、凝集反応の有無、試料中の抗原または抗体の濃度など
の測定結果を求め、これをプリンタ25に供給して測定
結果を表示する。
本発明では、上述したように散乱光の強度ゆらぎのパワ
ースペクトル密度を検出するが、このパワースペクトル
密度は、微粒子が波長程庶の距離を拡散してゆくことに
よる干渉成分のゆらぎによる項と、散乱体積への微粒子
の出入りにJ:って生ずる粒子数のゆらぎによる項とか
ら成っている。
ースペクトル密度を検出するが、このパワースペクトル
密度は、微粒子が波長程庶の距離を拡散してゆくことに
よる干渉成分のゆらぎによる項と、散乱体積への微粒子
の出入りにJ:って生ずる粒子数のゆらぎによる項とか
ら成っている。
この内、干渉による散乱光のゆらぎはスペックルパター
ンの空間的なゆらぎとして観測されるが、これをそのま
ま広い受光面を持った1個の光検出器に入射させると、
受光面の面積に亘って空間的な平滑化が行なわれるので
、検出されるゆらぎは小さくなってしまうが上述したよ
うに複数のチャンネルを用いて各フォトダイオードの視
野を限定することにより、ゆらぎを高感度で検出するこ
とができるようになると共に複数チャンネルの出力から
求まるパワースペクトル密度を平均化でるのでS 、/
Nは著しく白子することになる。一般にチVンネル数
をNとりると、S/Nは凡倍となる。
ンの空間的なゆらぎとして観測されるが、これをそのま
ま広い受光面を持った1個の光検出器に入射させると、
受光面の面積に亘って空間的な平滑化が行なわれるので
、検出されるゆらぎは小さくなってしまうが上述したよ
うに複数のチャンネルを用いて各フォトダイオードの視
野を限定することにより、ゆらぎを高感度で検出するこ
とができるようになると共に複数チャンネルの出力から
求まるパワースペクトル密度を平均化でるのでS 、/
Nは著しく白子することになる。一般にチVンネル数
をNとりると、S/Nは凡倍となる。
1ノたがって例えば100チヤンネル設ければS/Nは
10倍となる。
10倍となる。
上述した実施例においては、I?ル8に入用する光束4
の方向と、光フアイバアレイ10の光軸方向とを90°
どし、入用光束は直接フォトダイオードアレイ11に入
射しない小モダイン法を採用したが、入射光束の一部を
もフ−s l−ダイオードアレイ11に入射させるヘテ
ロダイン法を採用することもできる。ここでホモダイン
的に散乱光を検出でる場合には、光電子増倍管より成る
フォトダイオードアレイ11の出力信号は、散乱光の電
界強度をFどすると、その自乗の平均値正に比例したも
のとなす、散乱光と入Q=I光とを併わせで検出するヘ
テロダイン的検出の場合には、直接の入14光の電界強
度を「。とすると、フ−i t−ダイオードアレイ11
の出力信号は、 ([。+ tE8) 2 = [。+2F。・ F
6+[二 ・・・ (1)となる。ここで[はゆら
ぎが<7い(1Jシあったどしても散乱光のゆらぎに比
べて緩つくりしている)ので、フA1〜ダイオードアレ
イ11の出力の唆動成分は殆んど第2項2 Eo・「8
に等しい。つまり、散乱光の電界強度ト。にほぼ比例し
た出力信号が得られることになる。
の方向と、光フアイバアレイ10の光軸方向とを90°
どし、入用光束は直接フォトダイオードアレイ11に入
射しない小モダイン法を採用したが、入射光束の一部を
もフ−s l−ダイオードアレイ11に入射させるヘテ
ロダイン法を採用することもできる。ここでホモダイン
的に散乱光を検出でる場合には、光電子増倍管より成る
フォトダイオードアレイ11の出力信号は、散乱光の電
界強度をFどすると、その自乗の平均値正に比例したも
のとなす、散乱光と入Q=I光とを併わせで検出するヘ
テロダイン的検出の場合には、直接の入14光の電界強
度を「。とすると、フ−i t−ダイオードアレイ11
の出力信号は、 ([。+ tE8) 2 = [。+2F。・ F
6+[二 ・・・ (1)となる。ここで[はゆら
ぎが<7い(1Jシあったどしても散乱光のゆらぎに比
べて緩つくりしている)ので、フA1〜ダイオードアレ
イ11の出力の唆動成分は殆んど第2項2 Eo・「8
に等しい。つまり、散乱光の電界強度ト。にほぼ比例し
た出力信号が得られることになる。
上述した駅間を用い、フ第1・ダイオードアレイ11の
出力信号を高速フーリエ変換して散乱光の強度ゆらぎの
パワースペクトル密度を求めた結束を次に説明する。こ
こで定常値X′L過稈× (t)のパワースペクトル密
度S (f )は、次のよう(こ表わすことができる。
出力信号を高速フーリエ変換して散乱光の強度ゆらぎの
パワースペクトル密度を求めた結束を次に説明する。こ
こで定常値X′L過稈× (t)のパワースペクトル密
度S (f )は、次のよう(こ表わすことができる。
この(2)式をもとに8速フーリエ変換を用いてパワー
スペクトル密度の計算を行なう。しかし、1チヤンネル
からの出力により得られるパワースペクトル密度はS/
Nが低く、第2N8に示すようなものとなり、曲線の盾
の部分の周波数である緩和周波数を正確に求めることは
困デ5となるが、木光明のにうにNブI?ンネルからの
出ツノにJ、す111られるパ1ノースペク1−ル侘;
f!1を平均化すると第2図[3に示1J−うにノイズ
がfX 1./ < (It減したバ1ノースベタトル
密fαが111られ、これから核11周波数「RをiT
、’ B(f +3求めるこ一:が7a :Pる、1次
に本発明の測定方法8数(11J例に基いてδ;1明J
る。この実7+tl!例ではリアルタイムでデータを9
1即し、平均化し/(Tパワースペクトル密度を表ねJ
波形をli2極線菅26のスクリーン1で・リアルタイ
ツ、(゛1ニニタづることがて′きるものて゛ある。
スペクトル密度の計算を行なう。しかし、1チヤンネル
からの出力により得られるパワースペクトル密度はS/
Nが低く、第2N8に示すようなものとなり、曲線の盾
の部分の周波数である緩和周波数を正確に求めることは
困デ5となるが、木光明のにうにNブI?ンネルからの
出ツノにJ、す111られるパ1ノースペク1−ル侘;
f!1を平均化すると第2図[3に示1J−うにノイズ
がfX 1./ < (It減したバ1ノースベタトル
密fαが111られ、これから核11周波数「RをiT
、’ B(f +3求めるこ一:が7a :Pる、1次
に本発明の測定方法8数(11J例に基いてδ;1明J
る。この実7+tl!例ではリアルタイムでデータを9
1即し、平均化し/(Tパワースペクトル密度を表ねJ
波形をli2極線菅26のスクリーン1で・リアルタイ
ツ、(゛1ニニタづることがて′きるものて゛ある。
先ずΔ、′1〕変1■洲131〜13Nlこお1ノるリ
ンプリングレートはリーンノリング定理【、二基いて信
号周波数の2賠以−1と(jるが、IW乱)1f、の強
度ゆらぎの周波数成分は数百117.以下であるので1
ノ一ンプリング周波数を2 K +12と覆る。した“
がっ7−(の周!fflは500μsとイτる。この時
間が1)−イクルタイムTOとなる。また、各測定力イ
クルにお(づるリーンプル数Pは1024ポイントどη
るど、各測定り゛イクルタイノ、T Oは500/l
S X 101024−P500ど!iる。すイfわち
、全j゛−タの取込み時間は約5001118となる。
ンプリングレートはリーンノリング定理【、二基いて信
号周波数の2賠以−1と(jるが、IW乱)1f、の強
度ゆらぎの周波数成分は数百117.以下であるので1
ノ一ンプリング周波数を2 K +12と覆る。した“
がっ7−(の周!fflは500μsとイτる。この時
間が1)−イクルタイムTOとなる。また、各測定力イ
クルにお(づるリーンプル数Pは1024ポイントどη
るど、各測定り゛イクルタイノ、T Oは500/l
S X 101024−P500ど!iる。すイfわち
、全j゛−タの取込み時間は約5001118となる。
高速フーリエ変換器20は高速処迎が必要であるから、
完全にハードウェア構成とする。ザイクルタイムを20
0nSとし、4サイクルバタフライ演樟を行なうと1バ
タフライ当り800n5必要となる。
完全にハードウェア構成とする。ザイクルタイムを20
0nSとし、4サイクルバタフライ演樟を行なうと1バ
タフライ当り800n5必要となる。
一方、p = 1024ポイントの高速フーリエ変換に
必要なバタフライ演算回数は、 P / 2 X 10(12P = 512X 10=
5120となる。したがって高速フーリエ変換に必要
な時間T、は1チャンネル当り800nS X 512
0Φ4+118となる。したがって第3図に示すように
データ取込サイクルタイムTcを500m5とすると、
500111Sの間4Cデータを取込んだ後、次のデー
タを取込む間に各ヂャンネル当りの処理時間TF−41
1ISを要するフーリエ変換処理を全Nチャンネルにつ
いて行なえばリアルタイム処理が可能となるので少なく
共100チャンネル位はリアルタイムで処理することが
できる。
必要なバタフライ演算回数は、 P / 2 X 10(12P = 512X 10=
5120となる。したがって高速フーリエ変換に必要
な時間T、は1チャンネル当り800nS X 512
0Φ4+118となる。したがって第3図に示すように
データ取込サイクルタイムTcを500m5とすると、
500111Sの間4Cデータを取込んだ後、次のデー
タを取込む間に各ヂャンネル当りの処理時間TF−41
1ISを要するフーリエ変換処理を全Nチャンネルにつ
いて行なえばリアルタイム処理が可能となるので少なく
共100チャンネル位はリアルタイムで処理することが
できる。
第4図および第5図は、粒径がそれぞれ0.188μm
および0.305μmのラテックス粒子を分散させた液
をセル8に収容したときに得られる平均化したパワース
ペクトル密度を示すものであり、これはローレンツi’
(+1パワースペク1〜ル密亀を−IX、4つ(Jもの
であり、散乱光の強度ゆらぎのパワースペクトル密度の
内、干渉効果にJ、る−1)の(゛ある1、こ4″lら
のパワースペクトル密度の緩和周波数(,1微粒子の直
行に反比例−づることがわかる。1 /T 4′)も、
11(乱光の強度ゆらぎは上述しIJよう(4:微粒子
の運動に幇<]ヒー1ノン1−光の干渉にJ、る11k
、分と、散乱体積内の粒子数の変動による成分どの合成
されたものどイTるが、ホ実施例Cは干渉成分が主とし
て検出されており、パワースペクトル密度の緩和周波数
は粒子が光の波長の距H1を移動りる11.1間の逆数
どなるのて゛、粒径が大ぎ< %ると移Φ1j貼間は艮
くなり、緩和周波数が減少りることに27る。このにう
にパワースペクトル密度の緩和周波数は粒径に反比例で
するので、この緩和周波数の第゛化から抗原−抗体(こ
J、る凝集のh無ヤ))vI集の程良を検出することが
できる。
および0.305μmのラテックス粒子を分散させた液
をセル8に収容したときに得られる平均化したパワース
ペクトル密度を示すものであり、これはローレンツi’
(+1パワースペク1〜ル密亀を−IX、4つ(Jもの
であり、散乱光の強度ゆらぎのパワースペクトル密度の
内、干渉効果にJ、る−1)の(゛ある1、こ4″lら
のパワースペクトル密度の緩和周波数(,1微粒子の直
行に反比例−づることがわかる。1 /T 4′)も、
11(乱光の強度ゆらぎは上述しIJよう(4:微粒子
の運動に幇<]ヒー1ノン1−光の干渉にJ、る11k
、分と、散乱体積内の粒子数の変動による成分どの合成
されたものどイTるが、ホ実施例Cは干渉成分が主とし
て検出されており、パワースペクトル密度の緩和周波数
は粒子が光の波長の距H1を移動りる11.1間の逆数
どなるのて゛、粒径が大ぎ< %ると移Φ1j貼間は艮
くなり、緩和周波数が減少りることに27る。このにう
にパワースペクトル密度の緩和周波数は粒径に反比例で
するので、この緩和周波数の第゛化から抗原−抗体(こ
J、る凝集のh無ヤ))vI集の程良を検出することが
できる。
一トiボしたように、散乱光の強電ゆらさ゛は粒子のブ
ラウン運動による干渉性成分と、散乱体積内の粒子数の
変化による非干渉性成分どの和になるが、散乱体積内の
粒子数が少トZ < ’c’jす、干渉性成分が少なく
なって、非干渉性成分と同程度となると、粒子のブラウ
ン運動による散乱光強に1変化以夕1の成分も検出して
しまい、抗原−抗体反応を精成Jzく検出づることはで
きなくなる。したがって、7′17子の濃度は、散乱体
積内での入射光強度が十分前られる程度に低く、かつ干
渉=1+1成分が非干渉性成分よりも大きくなるJ:う
な範囲に選ぶ必要があるが、散乱体の粒径が一定であれ
ば相当広い粒子濃度に亘って相対ゆらぎは一定となる。
ラウン運動による干渉性成分と、散乱体積内の粒子数の
変化による非干渉性成分どの和になるが、散乱体積内の
粒子数が少トZ < ’c’jす、干渉性成分が少なく
なって、非干渉性成分と同程度となると、粒子のブラウ
ン運動による散乱光強に1変化以夕1の成分も検出して
しまい、抗原−抗体反応を精成Jzく検出づることはで
きなくなる。したがって、7′17子の濃度は、散乱体
積内での入射光強度が十分前られる程度に低く、かつ干
渉=1+1成分が非干渉性成分よりも大きくなるJ:う
な範囲に選ぶ必要があるが、散乱体の粒径が一定であれ
ば相当広い粒子濃度に亘って相対ゆらぎは一定となる。
第6図および第7図は、直i¥0.3μmのラデツクス
粒子の表面に免疫グロブリンGの抗体を固定したものを
、T ris −1−I Cf/、でP117に調整し
た緩衝液に分散させたちのに、抗原として10−’0/
malおJ:び10−9り /m j2のlT!亀の免
疫グロブリンGを加えた抗原−抗体反応液をセルに収容
し、抗原−抗体反応の開始前と開始後のパワースペクト
ル密度を示すものである。第6図に示す抗原rfJ庶1
0−’g/m℃の場合には、反応前の緩和周波数が約5
0 Hzであるのに対し、反応後の緩和周波数が101
1/に変化している1、これに対し、抗IRj淵亀が1
0−9g/m、0.の揚台には、反応開始前の緩和周波
数は約95112で、反応後の緩和周波数は約4011
2となっている。したがって、抗原−抗体反応前後の緩
和周波数の比「を、 と定義し、この値を幾つかの抗原濃度について求めてグ
ラフ1こ示すと第8図に示Jようになる。すなわら、第
8図において横軸は抗原濃度をとり、縦軸は緩和周波数
の比Fの値をとつC示すjうのであるが、緩和周波数の
仕[を求めることにより抗原淵(つを検出することがて
゛きる。
粒子の表面に免疫グロブリンGの抗体を固定したものを
、T ris −1−I Cf/、でP117に調整し
た緩衝液に分散させたちのに、抗原として10−’0/
malおJ:び10−9り /m j2のlT!亀の免
疫グロブリンGを加えた抗原−抗体反応液をセルに収容
し、抗原−抗体反応の開始前と開始後のパワースペクト
ル密度を示すものである。第6図に示す抗原rfJ庶1
0−’g/m℃の場合には、反応前の緩和周波数が約5
0 Hzであるのに対し、反応後の緩和周波数が101
1/に変化している1、これに対し、抗IRj淵亀が1
0−9g/m、0.の揚台には、反応開始前の緩和周波
数は約95112で、反応後の緩和周波数は約4011
2となっている。したがって、抗原−抗体反応前後の緩
和周波数の比「を、 と定義し、この値を幾つかの抗原濃度について求めてグ
ラフ1こ示すと第8図に示Jようになる。すなわら、第
8図において横軸は抗原濃度をとり、縦軸は緩和周波数
の比Fの値をとつC示すjうのであるが、緩和周波数の
仕[を求めることにより抗原淵(つを検出することがて
゛きる。
一方、第6図おJ:び第7図において、抗原−抗体反応
の前後にお(−Jる相対匝らぎの比(R)が抗原δtH
αど一定の関係を右りることもわかる。′?!なわち、
パワースペクトル密度のグラフから緩和周波数fY−を
求めることにより相対)つ)らぎを算出喝ることができ
る。このとき相対ゆらぎ比Rは次式で表わJことがで込
゛る。
の前後にお(−Jる相対匝らぎの比(R)が抗原δtH
αど一定の関係を右りることもわかる。′?!なわち、
パワースペクトル密度のグラフから緩和周波数fY−を
求めることにより相対)つ)らぎを算出喝ることができ
る。このとき相対ゆらぎ比Rは次式で表わJことがで込
゛る。
一ワ凸−
この(3)式にJ:り相対ゆらぎ比Rを求め、これと抗
原濃度との関係をグラフにして求めたのが第9図である
。このグラフより明らかなように、抗原−抗体反応前後
にお(する相対ゆらぎの比Rを求めることにより未知の
抗原濃1復を知ることができる。すなわち、測定に先立
って既知の異なる抗原密度の標1p−IJンゾルについ
て相対ゆらぎ比Rを求めて第9図のように検fji K
J!を求めておき、未知の抗原濃度の被検体についで相
対ゆらぎ比Rを求め、先に求めた検量線に基いて抗原濃
度を知ることができる。通常の測定においては10−8
〜10−9+3/mjlの抗原濃度イ」近で正確な測定
を行なうことが必要であるが本発明によればこのような
要求を寸分に満足している。
原濃度との関係をグラフにして求めたのが第9図である
。このグラフより明らかなように、抗原−抗体反応前後
にお(する相対ゆらぎの比Rを求めることにより未知の
抗原濃1復を知ることができる。すなわち、測定に先立
って既知の異なる抗原密度の標1p−IJンゾルについ
て相対ゆらぎ比Rを求めて第9図のように検fji K
J!を求めておき、未知の抗原濃度の被検体についで相
対ゆらぎ比Rを求め、先に求めた検量線に基いて抗原濃
度を知ることができる。通常の測定においては10−8
〜10−9+3/mjlの抗原濃度イ」近で正確な測定
を行なうことが必要であるが本発明によればこのような
要求を寸分に満足している。
一方、(3)式による相対ゆらぎ比Rは第6図および第
7図に示すパワースペクトル密石の低周波帯域にお1プ
る積分11「1の変化の比として−b求めることができ
る。すなわち、 −/リー に基いて相対ゆらぎ比Rを求めることができる。
7図に示すパワースペクトル密石の低周波帯域にお1プ
る積分11「1の変化の比として−b求めることができ
る。すなわち、 −/リー に基いて相対ゆらぎ比Rを求めることができる。
ここで抗原−抗体反応前のパワースペク1〜ル密度の(
?1分埴Δおよび反応後の積分値Bは、10−1−10
’l(zの低周波帯域にお【Jる積分値である。したが
って低賊通過フィルタは10’l+7.以下のR1波数
を通過するものとげる。
?1分埴Δおよび反応後の積分値Bは、10−1−10
’l(zの低周波帯域にお【Jる積分値である。したが
って低賊通過フィルタは10’l+7.以下のR1波数
を通過するものとげる。
$1′l径が一定の場合にはパワ−スペクトル密度(J
ローレンツ型であり、緩和周波数より大きい周波数にお
いては周波数の自重に反比例して減少する。
ローレンツ型であり、緩和周波数より大きい周波数にお
いては周波数の自重に反比例して減少する。
ところが、粒径が分布している場合には、それぞれの粒
径に対応した緩和周波数を持った[1−レンツ型スペク
1〜ルを小ね合わ+!: f7ものが観測されるので高
周波部分におけるパワースペク1〜ル密度は最早や周波
数の自重に反比例しなくなる。したがってこの部分の形
状から逆に反応にJ、って凝集した粒子の粒径分イ0を
知ることができる。このようなj゛−タは従来1i得ら
れイj−かったしのであり、抗原−抗体反応の状態を解
析する上で有用な情報である。
径に対応した緩和周波数を持った[1−レンツ型スペク
1〜ルを小ね合わ+!: f7ものが観測されるので高
周波部分におけるパワースペク1〜ル密度は最早や周波
数の自重に反比例しなくなる。したがってこの部分の形
状から逆に反応にJ、って凝集した粒子の粒径分イ0を
知ることができる。このようなj゛−タは従来1i得ら
れイj−かったしのであり、抗原−抗体反応の状態を解
析する上で有用な情報である。
第10図L;1.−L!ル8の責なる集束位置からのj
1シ乱光を並列的に受光するヂVンネル部分の他の実施
例を示すものである。本例ではセル8と光フアイバアレ
イ10との間に結像レンズ30を配置し、セル8内の、
直線状に集束されたビームの集束点「の1φを光フアイ
バアレイ10の入q1端而に結像ツるようにする。この
場合、結像レンズ30は第10図の紙面と酋交する方向
には結像性能を持つ必要がないのでシリンドリノ〕ルレ
ンズを以って構成することができる。
1シ乱光を並列的に受光するヂVンネル部分の他の実施
例を示すものである。本例ではセル8と光フアイバアレ
イ10との間に結像レンズ30を配置し、セル8内の、
直線状に集束されたビームの集束点「の1φを光フアイ
バアレイ10の入q1端而に結像ツるようにする。この
場合、結像レンズ30は第10図の紙面と酋交する方向
には結像性能を持つ必要がないのでシリンドリノ〕ルレ
ンズを以って構成することができる。
第11図は本発明ににるヂャンネル部分の他の実施例の
構成を示す斜視図である。本例ではセル8の側壁に光フ
アイバアレイ10の入射端側を貫通させ、その人躬喘面
を光ビームの直線的な集束点[に接近させる。このよう
にファイバの入射端面を集束点に接近させることにより
チャンネル分の分解能は高くなり、S/Nをより一囮高
くJることができる。本例(こおいで、各ファイバの入
射端側の一部分または全体を集束14光フアイバを以っ
て構成JることL) rきる。この場合には、白線1ノ
(の集束点「ど児)i・イバの人q4喘而どの間の距−
1を人さくどることがで′きるのC1)にフIイバアレ
イ10の入q1端側をセル8内に侵入さi!る必要(ま
必ン1゛しもな(イfす、(j4成は筒中どイ多′る3
、本発明によるヂャンネル部分の構成(j2上述した実
施191に限定されるものではなく yv多の変形が可
能である。例えば、光ファイバアlノイの代りに各別の
光ファイバを用い、直線状の集束点からの散乱光を各光
フ7・イバを経て各別の)1′、電子増倍管に入Q=1
さ[!ることbできる+l j、た、[ごルと光)jフ
ィバアレイの入q・1端而との間(、−・次元のチャン
ネルプレー1へ形イメージインテンシファイアを介挿(
〕、散乱光を増幅覆ることもできる。この」;うな(1
4成は1?1に散乱光が微弱4T揚含に有効である。
構成を示す斜視図である。本例ではセル8の側壁に光フ
アイバアレイ10の入射端側を貫通させ、その人躬喘面
を光ビームの直線的な集束点[に接近させる。このよう
にファイバの入射端面を集束点に接近させることにより
チャンネル分の分解能は高くなり、S/Nをより一囮高
くJることができる。本例(こおいで、各ファイバの入
射端側の一部分または全体を集束14光フアイバを以っ
て構成JることL) rきる。この場合には、白線1ノ
(の集束点「ど児)i・イバの人q4喘而どの間の距−
1を人さくどることがで′きるのC1)にフIイバアレ
イ10の入q1端側をセル8内に侵入さi!る必要(ま
必ン1゛しもな(イfす、(j4成は筒中どイ多′る3
、本発明によるヂャンネル部分の構成(j2上述した実
施191に限定されるものではなく yv多の変形が可
能である。例えば、光ファイバアlノイの代りに各別の
光ファイバを用い、直線状の集束点からの散乱光を各光
フ7・イバを経て各別の)1′、電子増倍管に入Q=1
さ[!ることbできる+l j、た、[ごルと光)jフ
ィバアレイの入q・1端而との間(、−・次元のチャン
ネルプレー1へ形イメージインテンシファイアを介挿(
〕、散乱光を増幅覆ることもできる。この」;うな(1
4成は1?1に散乱光が微弱4T揚含に有効である。
本発明は上述した実施例にのみ限定されるものではなく
、幾多の9形や全史が可能でdする。−1)ボした説明
は免疫グロブリンG(I!IG)について例示したが、
免疫グ[1プリンΔ(I(1△)。
、幾多の9形や全史が可能でdする。−1)ボした説明
は免疫グロブリンG(I!IG)について例示したが、
免疫グ[1プリンΔ(I(1△)。
I(l M、Iff D、F(J E、t−スhうIJ
7抗原、梅毒抗原、インシュリンなど抗原−抗体反応に
よって凝集を生ずるすべての物質の測定に適用すること
ができる。J:だ、上述した実施例では、微粒子の表面
に抗体を固定して、被検体中の抗原を検出するようにし
たが、微粒子の表面に抗原を固定し、被検体中の抗体を
検出することもできる。さらに、上述した実施例では微
粒子としてポリスチレンラテックス粒子を用いたが仙の
有機物粒子や、ガラスなどの無機物粒子を用いることも
できる。
7抗原、梅毒抗原、インシュリンなど抗原−抗体反応に
よって凝集を生ずるすべての物質の測定に適用すること
ができる。J:だ、上述した実施例では、微粒子の表面
に抗体を固定して、被検体中の抗原を検出するようにし
たが、微粒子の表面に抗原を固定し、被検体中の抗体を
検出することもできる。さらに、上述した実施例では微
粒子としてポリスチレンラテックス粒子を用いたが仙の
有機物粒子や、ガラスなどの無機物粒子を用いることも
できる。
さらに上述した実施例では抗原−抗体反応液の中には最
初から微粒子を存在させたが、この」:うな微粒子を用
いずに、抗原−抗体反応の結果として生ずる微粒子状生
成物による散乱光を利用づ−ることもできる。このよう
な抗原−抗体反応の実施例としては、抗原とl〕でヒト
絨毛ゴナドトロピン<HCG)を用い、抗体として抗ヒ
ト絨毛ゴナドトロピン(抗HCG >を用いる反応があ
り、この反応により生成される抗原−抗体複合体は微粒
子として扱うことができる。さらに抗原そのものを粒子
として用いることもできる。このような抗原−抗イホ反
応どしてはl/′l原としてカンディダ・アルビカンス
(酵母)を用い、抗IA\として抗カンディグ・アル1
ごカンスを用いる例ヤ)、(IIHに血判(、細胞、微
生物などを粒子どして用いることt)(きる。また第1
図に示1実施例では抗原−141不反応H々を1?ル(
3二収容して測定を行なうバラ411式どしたが、抗f
1j%−抗体反応)1シを連続的に流しイ1がl)測定
を行なうフ[1一方式と覆ることも勿論可能である1、
(発明の効果) ト述した本発明の効果を要約りるど以下の通りである。
初から微粒子を存在させたが、この」:うな微粒子を用
いずに、抗原−抗体反応の結果として生ずる微粒子状生
成物による散乱光を利用づ−ることもできる。このよう
な抗原−抗体反応の実施例としては、抗原とl〕でヒト
絨毛ゴナドトロピン<HCG)を用い、抗体として抗ヒ
ト絨毛ゴナドトロピン(抗HCG >を用いる反応があ
り、この反応により生成される抗原−抗体複合体は微粒
子として扱うことができる。さらに抗原そのものを粒子
として用いることもできる。このような抗原−抗イホ反
応どしてはl/′l原としてカンディダ・アルビカンス
(酵母)を用い、抗IA\として抗カンディグ・アル1
ごカンスを用いる例ヤ)、(IIHに血判(、細胞、微
生物などを粒子どして用いることt)(きる。また第1
図に示1実施例では抗原−141不反応H々を1?ル(
3二収容して測定を行なうバラ411式どしたが、抗f
1j%−抗体反応)1シを連続的に流しイ1がl)測定
を行なうフ[1一方式と覆ることも勿論可能である1、
(発明の効果) ト述した本発明の効果を要約りるど以下の通りである。
(1)酵素ヤ)ラジオアイソ1〜−プのようイ【標識試
薬のよう2ini価で、取扱いの面倒イf試嬰を用いる
必要がイγいので、安価か゛)容易に実施ηることがで
きる。
薬のよう2ini価で、取扱いの面倒イf試嬰を用いる
必要がイγいので、安価か゛)容易に実施ηることがで
きる。
(2)免疫電気泳動)人、免疫拡散法、沈降法などの非
標識免疫分析法に11コベ精度が高く、再現す11が高
いのでイハ頼v1の高い測定結束を高Vi度で行ること
がで゛ぎる1゜ (3)微粒子のブラウン運動に某く散乱光の強葭ゆらぎ
を検出するものであるから、超微Wの被検体で高精度の
測定ができると共に測定時間も短時間どなる、。
標識免疫分析法に11コベ精度が高く、再現す11が高
いのでイハ頼v1の高い測定結束を高Vi度で行ること
がで゛ぎる1゜ (3)微粒子のブラウン運動に某く散乱光の強葭ゆらぎ
を検出するものであるから、超微Wの被検体で高精度の
測定ができると共に測定時間も短時間どなる、。
(4)平均拡散定数を散乱光のスペクトル幅の変化から
求めることにより抗原または抗体を定m?lる方法に比
べ分光泪が不要であるので装置は小形かつ安価となると
共に精度および信頼性の高い測定結果が1qられる。
求めることにより抗原または抗体を定m?lる方法に比
べ分光泪が不要であるので装置は小形かつ安価となると
共に精度および信頼性の高い測定結果が1qられる。
(5)光ゆらぎのパワースペクトル密度に基いて測定を
行なうため、抗原−抗体反応についての多くの有用な情
報を得ることができる。
行なうため、抗原−抗体反応についての多くの有用な情
報を得ることができる。
(6)光ビームをその進行方向に対して直交する方向に
直線状に集束してヒルに入用さ一1!−,1ル内の、直
線状の焦束点の異なる点からの散乱光を複数のチャンネ
ルにJ:って各別に受光し、各チャンネルの光電変換出
力信号から散乱光の強度ゆらぎのパワースペクトル密度
をそれぞれ求めた後、これらの平均化したものを求め、
これに基いて抗原−抗体反応の測定を行なうので、S/
Nを高くすることができ、測定’174 atを面子り
ることがでいる3゜(7)空間的な多チャンネルと覆る
ので、リノlルタイムの如理が可能どl(る。
直線状に集束してヒルに入用さ一1!−,1ル内の、直
線状の焦束点の異なる点からの散乱光を複数のチャンネ
ルにJ:って各別に受光し、各チャンネルの光電変換出
力信号から散乱光の強度ゆらぎのパワースペクトル密度
をそれぞれ求めた後、これらの平均化したものを求め、
これに基いて抗原−抗体反応の測定を行なうので、S/
Nを高くすることができ、測定’174 atを面子り
ることがでいる3゜(7)空間的な多チャンネルと覆る
ので、リノlルタイムの如理が可能どl(る。
第1図は本発明ににる免疫反応測定装置の一実施例の構
成を示す線図、 第2図△おJ:びBは同じくその効甲を示す線図、第3
図は同じくその動作を示す線図、 第1図および第5図はイれぞれ粒径が0.188μmお
よび0,305/1mの微粒子に対Jるパワースペクト
ル密1株を示覆グラフ、 第6図J3よび第7図はそれぞれ抗原濃度が1O−4o
、/ mρおよび10”U/IIIβに対4る抗原−
抗体反応前および後のパワースペクトル密度を示すグラ
フ、 第8図は抗原濃度ど緩和周波数の比どの関係を示すグラ
フ、 第9図は抗原濃度ど相対ゆらぎ比との関係を示タグラフ
、 第10図おJ、び第11図はヂ1ノンネル部分の他の例
の構成を示?l’19図である。 1・・・レーデ光源 2. 4. 5・・・光束3
・・・半透鏡 6・・・]リメータ1ノンズ
7・・・シリンドリノノルレンズ 8・・・セル 9・・・光検出器10・・・
光フアイバアレイ 11・・・フォ1〜ダイA−ドアレイ 13−1へ−13−N・・・△/D変換器14−1〜1
4−N・・・第1メモリ 15・・・マルチプレクサ 16・・・デバイダ20・
・・高速フーリエ変換器 21・・・デマルヂプレク1J 22−1〜22−N・・・第2メモリ 23・・・ノーマライザ 24・・・演算処理部25
・・・プリンタ 26・・・陰極線管30・・・
シリンドリカル結像レンズ F・・・直線状の焦束点。 17311]l!/〜Y−心l 1五1((乙6”/ t−ムさl !/3’+Il乙〜:z−tJΔl 羽碍IIぐ11′口ll ]1.、i′lψ毛X目ボ l31「長〜X−tJさl 蔦にJ1(1(t〜Y−ム−l
成を示す線図、 第2図△おJ:びBは同じくその効甲を示す線図、第3
図は同じくその動作を示す線図、 第1図および第5図はイれぞれ粒径が0.188μmお
よび0,305/1mの微粒子に対Jるパワースペクト
ル密1株を示覆グラフ、 第6図J3よび第7図はそれぞれ抗原濃度が1O−4o
、/ mρおよび10”U/IIIβに対4る抗原−
抗体反応前および後のパワースペクトル密度を示すグラ
フ、 第8図は抗原濃度ど緩和周波数の比どの関係を示すグラ
フ、 第9図は抗原濃度ど相対ゆらぎ比との関係を示タグラフ
、 第10図おJ、び第11図はヂ1ノンネル部分の他の例
の構成を示?l’19図である。 1・・・レーデ光源 2. 4. 5・・・光束3
・・・半透鏡 6・・・]リメータ1ノンズ
7・・・シリンドリノノルレンズ 8・・・セル 9・・・光検出器10・・・
光フアイバアレイ 11・・・フォ1〜ダイA−ドアレイ 13−1へ−13−N・・・△/D変換器14−1〜1
4−N・・・第1メモリ 15・・・マルチプレクサ 16・・・デバイダ20・
・・高速フーリエ変換器 21・・・デマルヂプレク1J 22−1〜22−N・・・第2メモリ 23・・・ノーマライザ 24・・・演算処理部25
・・・プリンタ 26・・・陰極線管30・・・
シリンドリカル結像レンズ F・・・直線状の焦束点。 17311]l!/〜Y−心l 1五1((乙6”/ t−ムさl !/3’+Il乙〜:z−tJΔl 羽碍IIぐ11′口ll ]1.、i′lψ毛X目ボ l31「長〜X−tJさl 蔦にJ1(1(t〜Y−ム−l
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、抗原および抗体を含む反応液に光を投射し、抗原−
抗体反応により生成される微粒子による散乱光または反
応液に加えた抗体または抗原を固定した微粒子による散
乱光を検知し、この検知出力の強度ゆらぎのパワースペ
クトル密度に基いて抗原−抗体反応を測定する装置にお
いて、 前記抗原−抗体反応を行なう反応液を収容 するセルと、 コヒーレントな光ビームを放射する光源装 置と、 このコヒーレント光を、その進行方向に対 し直交する方向に直線状に集束されたビームとして前記
セルに入射させる光学系と、 前記セル内の、前記直線状に集束されたビ ームの異なる集束点からの散乱光を並列的に受光する複
数の光検出装置と、 これら複数の光検出装置からの出力信号を 記憶する第1の記憶手段と、 この第1の記憶手段から各光検出装置の出 力信号を順次に読出して、その強度ゆらぎのパワースペ
クトル密度を求める手段と、 これら複数のパワースペクトル密度を記憶 する第2の記憶手段と、 この第2の記憶手段から複数のパワースペ クトル密度を読出して平均化する手段と、 この平均化されたパワースペクトル密度に 基いて抗原−抗体反応を測定する手段とを具えることを
特徴とする免疫反応測定装置。
Priority Applications (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP18725484A JPS6166149A (ja) | 1984-09-08 | 1984-09-08 | 免疫反応測定装置 |
US06/769,965 US4762413A (en) | 1984-09-07 | 1985-08-27 | Method and apparatus for measuring immunological reaction with the aid of fluctuation in intensity of scattered light |
DE19853531891 DE3531891A1 (de) | 1984-09-07 | 1985-09-06 | Verfahren und vorrichtung zur messung immunologischer reaktionen |
DE3546566A DE3546566C2 (ja) | 1984-09-07 | 1985-09-06 | |
US07/197,336 US4826319A (en) | 1984-09-07 | 1988-05-23 | Method and apparatus for measuring immunological reaction with the aid of fluctuation in intensity of scattered light |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP18725484A JPS6166149A (ja) | 1984-09-08 | 1984-09-08 | 免疫反応測定装置 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS6166149A true JPS6166149A (ja) | 1986-04-04 |
Family
ID=16202748
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP18725484A Pending JPS6166149A (ja) | 1984-09-07 | 1984-09-08 | 免疫反応測定装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS6166149A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003501634A (ja) * | 1999-05-27 | 2003-01-14 | オーエヌエエールア(オフィス ナスィオナル デテュード エ ドゥ ルシェルシュ アエロスパスィアル) | ドップラー効果による速度測定の方法と装置 |
-
1984
- 1984-09-08 JP JP18725484A patent/JPS6166149A/ja active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003501634A (ja) * | 1999-05-27 | 2003-01-14 | オーエヌエエールア(オフィス ナスィオナル デテュード エ ドゥ ルシェルシュ アエロスパスィアル) | ドップラー効果による速度測定の方法と装置 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE3531891C2 (ja) | ||
US4446239A (en) | Light scattering immunoassay involving particles with selective frequency band apparatus | |
JP4201058B2 (ja) | 中間統計データに基づいて試料を特徴付けする方法 | |
JP3181609B2 (ja) | キャピラリークロマトグラフィー用光検出器 | |
US4828388A (en) | Method of measuring concentration of substances | |
CN102494975A (zh) | 一种单光束互相关高浓度纳米颗粒测量装置及方法 | |
JPS6151569A (ja) | 細胞識別装置 | |
WO1988007670A2 (en) | Time-resolved fluorescence apparatus and immunoassay | |
JPS6166149A (ja) | 免疫反応測定装置 | |
JPS6128866A (ja) | 光強度ゆらぎを用いる免疫反応の測定方法および装置 | |
JPS61173138A (ja) | 光強度ゆらぎによる免疫反応測定方法 | |
JPS6165141A (ja) | 免疫反応の測定方法および装置 | |
JPH03154850A (ja) | 検体検査装置 | |
JPH0650314B2 (ja) | 免疫反応測定装置 | |
JPS62116263A (ja) | 直線偏光の多重散乱を用いる免疫反応の測定方法および装置 | |
JPS61173139A (ja) | 光強度ゆらぎによる免疫反応測定方法 | |
JPS6259841A (ja) | 直線偏光を用いる免疫反応の測定方法および装置 | |
JPS6165144A (ja) | 光強度ゆらぎを用いる免疫反応測定装置 | |
JPS6165143A (ja) | 免疫反応の測定方法および装置 | |
JPS63247644A (ja) | 免疫反応測定方法 | |
JPH03150446A (ja) | 粒子解析装置 | |
JPS61173136A (ja) | 光強度ゆらぎによる免疫反応測定方法 | |
JPS61173137A (ja) | 光強度ゆらぎによる免疫反応測定方法 | |
JPS6190041A (ja) | 光強度ゆらぎを用いる免疫反応測定方法 | |
JPS61175549A (ja) | 光強度ゆらぎによる免疫反応測定方法 |