JPS61280268A - アルカリプロテア−ゼ産生微生物 - Google Patents
アルカリプロテア−ゼ産生微生物Info
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- JPS61280268A JPS61280268A JP12302185A JP12302185A JPS61280268A JP S61280268 A JPS61280268 A JP S61280268A JP 12302185 A JP12302185 A JP 12302185A JP 12302185 A JP12302185 A JP 12302185A JP S61280268 A JPS61280268 A JP S61280268A
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- Japan
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- grows
- strains
- colonies
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- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、土壌より分離して得られた、バチルス属に属
する新規微生物に関する。更に詳しくは、洗剤に安定配
合できる新規のアルカリグロチアーゼを産生ずる新規微
生物に関する。
する新規微生物に関する。更に詳しくは、洗剤に安定配
合できる新規のアルカリグロチアーゼを産生ずる新規微
生物に関する。
近年、洗浄剤の洗浄力を更に向上させるために、蛋白質
、糖質、脂質等を分解する６稽の加水分解酵素の配合が
検討されている。特に、蛋白質分解酵素は洗浄剤のみで
は落ちづらい蛋白汚垢を分解し、洗浄力の改善に寄与す
るため、洗浄剤にアルカリプロテアーゼを配合すること
が不可欠である。一般的には、バチルス・υヶニフォル
ミス、バチルス・ズブチリス等が生産するアルカラーゼ
（ノブ社）、マキサターゼ（ギスト社）、ナガーゼ（長
瀬産業）が使用されている。しかし、これら酵素は高−
の洗浄剤溶液中で直ちに失活するため、液体洗浄剤に配
合することは困難である。その他、ストレプトマイセス
属、アスペルギルス属、アースロパクター属、フデリウ
ム属等の微生物により産生されるアルカリグロチアーゼ
も知られているが、前述と同様、安定性に問題があるた
め利用できない。
、糖質、脂質等を分解する６稽の加水分解酵素の配合が
検討されている。特に、蛋白質分解酵素は洗浄剤のみで
は落ちづらい蛋白汚垢を分解し、洗浄力の改善に寄与す
るため、洗浄剤にアルカリプロテアーゼを配合すること
が不可欠である。一般的には、バチルス・υヶニフォル
ミス、バチルス・ズブチリス等が生産するアルカラーゼ
（ノブ社）、マキサターゼ（ギスト社）、ナガーゼ（長
瀬産業）が使用されている。しかし、これら酵素は高−
の洗浄剤溶液中で直ちに失活するため、液体洗浄剤に配
合することは困難である。その他、ストレプトマイセス
属、アスペルギルス属、アースロパクター属、フデリウ
ム属等の微生物により産生されるアルカリグロチアーゼ
も知られているが、前述と同様、安定性に問題があるた
め利用できない。
本発明者らは、洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件にお
いて優れた安定性を有し、尚且つ洗浄力の改善に寄与す
るアルカリプロテアーゼを産生ずる菌を広く自然界より
検索した結果、バチルス属に属するＹ株、Ｐ株、Ｋ株お
よびＫ株が公知のアルカリグロチアーゼより性質に優れ
たアルカリプロテアーゼを培地中に産生ずることを見出
し、本発明を完成した。
いて優れた安定性を有し、尚且つ洗浄力の改善に寄与す
るアルカリプロテアーゼを産生ずる菌を広く自然界より
検索した結果、バチルス属に属するＹ株、Ｐ株、Ｋ株お
よびＫ株が公知のアルカリグロチアーゼより性質に優れ
たアルカリプロテアーゼを培地中に産生ずることを見出
し、本発明を完成した。
すなわち、本発明はバチルス属に属し、洗浄剤成分共存
下の高アルカリ条件において浸れた安定性を有し、尚且
つ洗浄力の改善に寄与するアルカリプロテアーゼを生産
する能力を有する新規ナバチルス・エスピーＹ株（微工
研菌寄第８０８８号）、同Ｐ株（第８０９０号）、同に
株（第８０９１号）、同Ｘ株（第８０９２号）を提供す
ることを目的とする。
下の高アルカリ条件において浸れた安定性を有し、尚且
つ洗浄力の改善に寄与するアルカリプロテアーゼを生産
する能力を有する新規ナバチルス・エスピーＹ株（微工
研菌寄第８０８８号）、同Ｐ株（第８０９０号）、同に
株（第８０９１号）、同Ｘ株（第８０９２号）を提供す
ることを目的とする。
次に、本発明者らが自然界より分離採取した本菌株の菌
学的性質を詳述する。
学的性質を詳述する。
問、菌学的性質および分類方法は、Ｂａｒｇｅｙ’ａＭ
ａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖ＠Ｂａｃ
ｔｅｒｉｏｌｏｇｙ第８版（１９７４） ｔ Ｒ，Ｅ、
Ｇｏｒｒｌｏｎの検索表（１９７２）Ｋ準じて行なった
。ｐＨ１０の培地は、炭酸ナトリウム１チを加えて調製
した。温度および声に関する生育最適範囲の測定は、温
度勾配バイオフォトレコーダーで行なった。
ａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖ＠Ｂａｃ
ｔｅｒｉｏｌｏｇｙ第８版（１９７４） ｔ Ｒ，Ｅ、
Ｇｏｒｒｌｏｎの検索表（１９７２）Ｋ準じて行なった
。ｐＨ１０の培地は、炭酸ナトリウム１チを加えて調製
した。温度および声に関する生育最適範囲の測定は、温
度勾配バイオフォトレコーダーで行なった。
さて、ここで本発明が提供するバチルス・エスピー（Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ） ’Ｙ株（微工研菌寄第８０
８８号）、バチルス・エスピーＰａ（微工研菌寄第８０
９０号）、／Ｊチルス、エスピーに株（微工研菌寄第８
０９１号）およびバチルス・エスピーＹ株（微工研菌寄
８０９２号）の菌学的性質を列挙する。
ａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ） ’Ｙ株（微工研菌寄第８０
８８号）、バチルス・エスピーＰａ（微工研菌寄第８０
９０号）、／Ｊチルス、エスピーに株（微工研菌寄第８
０９１号）およびバチルス・エスピーＹ株（微工研菌寄
８０９２号）の菌学的性質を列挙する。
Ａ、形態的性質
肉汁寒天培地上で３５℃にて２日間培養したとき、以下
の形態的特徴が観察される。
の形態的特徴が観察される。
１）細胞の形および大きさ：いずれの株も桿菌、大きさ
は、 Ｙ株： ０．４−０．５μｍ Ｘｌ、７−１．９μｍＰ
株：０．４−０．５μｍＸ１．７−２．０μｍＫ株：０
゜４−０．５μｍ ｘｉ、５−１．８μｍＸ株：０８４
−０．５μｍＸ１．８−２．０μｍ０２）多形性：いず
れの株もなし。
は、 Ｙ株： ０．４−０．５μｍ Ｘｌ、７−１．９μｍＰ
株：０．４−０．５μｍＸ１．７−２．０μｍＫ株：０
゜４−０．５μｍ ｘｉ、５−１．８μｍＸ株：０８４
−０．５μｍＸ１．８−２．０μｍ０２）多形性：いず
れの株もなし。
３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性あり。
４）胞子：いずれの株も胞子を形成し、形成途上で細胞
は先端近くから膨張する。成熟 した胞子はレモン型であり、大きさは、Ｙ株：０．７−
０．９μｍｘｌ０−１．２μｍＰ株： ０．８−１．Ｏ
ｉｔｍ ｘ １．０μｍ×１．５ μｍＫ株：０．８−
１．０μｍｘｌ、５−１．ＬμｍＸ株： ０．９−１．
０ μｍ ×１．０−１．２ ａｍ ａ５）グラム染色
性：いずれの株も陽性。
は先端近くから膨張する。成熟 した胞子はレモン型であり、大きさは、Ｙ株：０．７−
０．９μｍｘｌ０−１．２μｍＰ株： ０．８−１．Ｏ
ｉｔｍ ｘ １．０μｍ×１．５ μｍＫ株：０．８−
１．０μｍｘｌ、５−１．ＬμｍＸ株： ０．９−１．
０ μｍ ×１．０−１．２ ａｍ ａ５）グラム染色
性：いずれの株も陽性。
６）抗酸性：いずれの株も陰性。
Ｂ、培養的性質
１）肉汁寒天平板培養：
Ｙ株： ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状、全縁
のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、該周辺 部は淡褐色、該中心部は半透明の淡褐 色。
のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、該周辺 部は淡褐色、該中心部は半透明の淡褐 色。
ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状。
全綴のコロニーを形成する。該コロニ
ーの表面は滑らかで光沢が有り、クリ
ーム色。
２株： ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状、全縁
のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、半透明 なりリーム色。
のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、半透明 なりリーム色。
ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、クリ ーム色。
ニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、クリ ーム色。
Ｙ株：、 ｐＨ７，０にて生育して、円形、中心凹状、
波状のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、透明。
波状のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、透明。
ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、クリ ーム色。
ニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、クリ ーム色。
Ｙ株： ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状、全縁
のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、該周辺 部はクリーム色、該中心部は淡褐色。
のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、該周辺 部はクリーム色、該中心部は淡褐色。
ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、クリ −ム色ないし淡褐色。
ニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、クリ −ム色ないし淡褐色。
２）肉汁寒天斜面培養：
Ｙ株： ｐＨ７，０およびｐ）ｆｌｏ、０にて波帯状に
生育し、光沢のあるクリーム色ないし淡 褐色のコロニーを形成する。赤褐色の 色素を僅かに生成する。
生育し、光沢のあるクリーム色ないし淡 褐色のコロニーを形成する。赤褐色の 色素を僅かに生成する。
２株： ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色の半透明な コロニーを形成する。色素は生成しな い。
し、光沢のあるクリーム色の半透明な コロニーを形成する。色素は生成しな い。
Ｘ株： ｐＨ７，Ｏにて帯状に生育し、光沢のある透明
なコロニーを形成する。色素は生 成しない。
なコロニーを形成する。色素は生 成しない。
ｐＨ１０，０にて波帯状に生育し、光沢のあるクリーム
色のコロニーを形成する。
色のコロニーを形成する。
色素は生成しない。
Ｘ株： ｐＨ７，０およびｐｉ−１１０，０にて波帯状
に生育し、光沢のあるクリーム色のコロニ ーを形成する。色素は生成しない。
に生育し、光沢のあるクリーム色のコロニ ーを形成する。色素は生成しない。
３）肉汁液体培養：
Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：…７，０にていずれも生育するが、
菌膜は形成しない。
菌膜は形成しない。
ｐＨ１０，０にていずれも生育が良
好で、菌膜は形成しない。
４）肉汁ゼラチン穿刺培養：
Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株： ｐＨ７，０にていずれも僅かに液
化する。
化する。
ｐＨ１０，０にていずれも液化する。
５）リドマス・ミルク：
Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育が非常
に悪い。
に悪い。
ｐＨ１０，０にていずれも生育する。
ミルクの凝固は見られない。培
地がアルカリ性のため、ＩＪ ）マ
スの変色は不明。
１）硝酸塩の還元：陽性。
２）脱窒反応：陰性。
３）ＭＲテスト：陰性。
４）Ｖ Ｐテスト：陰性。
５）インドールの生成：陰性。
６）硫化水素の生成：陰性。
７）デンプンの加水分解：陽性。
８）クエン酸の利用： Ｋｏｓｅｒの培地では利用しな
い。
い。
Ｃｈｒｉｓｔａｎａｅｎの培地では僅かに利用する。
９）無機窒素源の利用；硝酸塩は利用しない。
アンモニウム塩は利用し
ない。
１０）色素の生成：Ｙ株は、水溶性の赤褐色の色素を菌
体外に生産する。
体外に生産する。
ＰｔＫｔＸ株は、色素を生産しない。
１１）ウレアーゼ二階性
１２）オキシダーゼ：陽性
１３）カタラーゼ：陽性
１４）生育の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が良好。
いし４７℃）が良好。
１５）生育の声範囲：１０．０付近（６，０ないし１２
．０）が良好。
．０）が良好。
１６）酸素に対する態度：好気性下でも嫌気性下でも生
育する。
育する。
１７） Ｏ−’Ｆ’テスト：陰性。
１８）糖類から酸およびガスの生成：（＋：生成する一
；生成しない） Ｄ、その他の性質 ２）Ｙ株、Ｐ株、Ｋ株およびＫ株は、いずれも至適−が
１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件において
優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与するア
ルカリ７°ｅ！テアーゼを産生ずる。
；生成しない） Ｄ、その他の性質 ２）Ｙ株、Ｐ株、Ｋ株およびＫ株は、いずれも至適−が
１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件において
優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与するア
ルカリ７°ｅ！テアーゼを産生ずる。
以上の性質を総括すると、まず、本菌株らは、いずれと
もカタラーゼ陽性、通性好気性で耐熱胞子を有するグラ
ム陽性の桿菌であることにより、バチルス属の細菌であ
る。
もカタラーゼ陽性、通性好気性で耐熱胞子を有するグラ
ム陽性の桿菌であることにより、バチルス属の細菌であ
る。
更に、本菌株らは、周鞭毛を有する桿菌である。また、
胞子形成途上で細胞は、先端の近くから膨張してくる。
胞子形成途上で細胞は、先端の近くから膨張してくる。
成熟した胞子は、レモン型である。
Ｙ株およびその胞子の電子顕微鏡写真を第４図に示す。
Ｐ株およびその胞子の電子顕微鏡写真を第５図に示す。
Ｋ株およびその胞子の電子顕微鏡写真を第６図に示す。
Ｋ株およびその胞子の電子顕微鏡写真を第７図に示す。
伺、本菌株らは、２０℃以下および５０℃以上では生育
できず、最適生育温度が３３ないし３５℃付近にある中
温性細菌（ｍａｓｏｐｈｉｌｅ ）である（第１図）。
できず、最適生育温度が３３ないし３５℃付近にある中
温性細菌（ｍａｓｏｐｈｉｌｅ ）である（第１図）。
また、本菌株らは、ｐＨ６以下およびｐＨＩＺ５以上で
は生育できず、最適生育−が１０．０付近にある好アル
カリ性細菌（ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｅ ）である（第２
図）。
は生育できず、最適生育−が１０．０付近にある好アル
カリ性細菌（ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｅ ）である（第２
図）。
更に、本菌株らは、単糖類のなかでもチルドヘキソース
系統のものから、三糖類は乳糖以外のものから、また、
糖アルコール類ではマンニットだけから酸を生成する性
質がある。ガスは発生しない。
系統のものから、三糖類は乳糖以外のものから、また、
糖アルコール類ではマンニットだけから酸を生成する性
質がある。ガスは発生しない。
尚更に、本菌株らが、バチルス・アルカロフイケスに属
すると思われるため、連灯、堀越らＶ のバチルス・アルカロフイルスＡ ２２１ （ＡＴＣＣ
２１５２２） 、扁５８ （＊ａ ） 、および屋Ｄ−
６（柿）と菌学的性質を比較した。本菌株らとバチルス
・アルカロフィルスＡ ２２１ 、 Ａ ５８ 、屋Ｄ
−６とは、アルカリ性の培地（ｐＨ１０）で良く生育す
る点で一致するが、無機窒素源の利用に関して、本菌株
もが、硝酸塩およびアンモニウム塩を利用できないのに
対して、上記公知の°菌株らは、利用できる。また、生
育声の範囲において１本菌株らがｐＨ６からｐＨ１２で
あるのに対して、扁２２１は、ｐＥ（７からＰＨＩＩで
あり、屋５Ｂ、ＡＤ−６は、ｐＨ７，５からｐｉ−Ｉｌ
ｌであり、上記公知の菌株は、ｐＨ７，０以下では生育
できない点で異なる。生育温度の範囲においても、本菌
株らが２０℃から４７℃であり、最適温度範囲が３３℃
から３５℃であるのに対して、屋２２１は５５℃、扁５
８は４５℃まで生育でき、最適温度が３７℃から４０℃
であり、ＡＤ−６も最適温度が３５℃から４０℃と高く
、本菌株らとは異なる。また、本菌株らと、糖類からの
酸の生成をＡ Ｄ−６と比較すると、本菌株らがＬ−ア
ラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−ガラクトース、グリ
セリンから酸を生成しないのに対して、ＡＤ−６は生成
する。更に、本菌株らは、１０％食塩下でも生育し、上
記公知の菌株とは区別される。
すると思われるため、連灯、堀越らＶ のバチルス・アルカロフイルスＡ ２２１ （ＡＴＣＣ
２１５２２） 、扁５８ （＊ａ ） 、および屋Ｄ−
６（柿）と菌学的性質を比較した。本菌株らとバチルス
・アルカロフィルスＡ ２２１ 、 Ａ ５８ 、屋Ｄ
−６とは、アルカリ性の培地（ｐＨ１０）で良く生育す
る点で一致するが、無機窒素源の利用に関して、本菌株
もが、硝酸塩およびアンモニウム塩を利用できないのに
対して、上記公知の°菌株らは、利用できる。また、生
育声の範囲において１本菌株らがｐＨ６からｐＨ１２で
あるのに対して、扁２２１は、ｐＥ（７からＰＨＩＩで
あり、屋５Ｂ、ＡＤ−６は、ｐＨ７，５からｐｉ−Ｉｌ
ｌであり、上記公知の菌株は、ｐＨ７，０以下では生育
できない点で異なる。生育温度の範囲においても、本菌
株らが２０℃から４７℃であり、最適温度範囲が３３℃
から３５℃であるのに対して、屋２２１は５５℃、扁５
８は４５℃まで生育でき、最適温度が３７℃から４０℃
であり、ＡＤ−６も最適温度が３５℃から４０℃と高く
、本菌株らとは異なる。また、本菌株らと、糖類からの
酸の生成をＡ Ｄ−６と比較すると、本菌株らがＬ−ア
ラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−ガラクトース、グリ
セリンから酸を生成しないのに対して、ＡＤ−６は生成
する。更に、本菌株らは、１０％食塩下でも生育し、上
記公知の菌株とは区別される。
このように本菌株らは公知のバチルス・ブルカロフイル
スの菌株とは異なるが、上述の菌学的性質からバチルス
・アルカロフイルス類縁菌と判断することが妥当である
。以上の結果を総括して第１表に示す。
スの菌株とは異なるが、上述の菌学的性質からバチルス
・アルカロフイルス類縁菌と判断することが妥当である
。以上の結果を総括して第１表に示す。
本発明者らが自然界より分離採取した本菌株のスクリー
ニング方法を詳述する。
ニング方法を詳述する。
１）好アルカリ性菌の分離
イーストエキス０．５％、ポリペプトン０．０５チ、リ
ン酸二カリウム０．１％、硫酸マグネシウム０．０２
％、炭酸ナトリウム１％を含む−１１の液体培地５ｄを
分注した試験管（φ１６，５Ｘ１６５１１ＤＩ）に各地
の土壌的１００ｒｎ９を入れ、３７℃にて５日間培養し
た。その培養液を上記培地に寒天１．５％含むグレート
に接種後、３７℃にて３日間イ／キーベートし、グレー
ト上に生育した好アルカリ性細菌を得た。
ン酸二カリウム０．１％、硫酸マグネシウム０．０２
％、炭酸ナトリウム１％を含む−１１の液体培地５ｄを
分注した試験管（φ１６，５Ｘ１６５１１ＤＩ）に各地
の土壌的１００ｒｎ９を入れ、３７℃にて５日間培養し
た。その培養液を上記培地に寒天１．５％含むグレート
に接種後、３７℃にて３日間イ／キーベートし、グレー
ト上に生育した好アルカリ性細菌を得た。
２）アルカリグロチアーゼ生産菌の分離１）の方法で得
た好アルカリ性細菌をスキムミルク１％、イーストエキ
ス０．０２５％、啄プトン０．０５ ％、炭酸ナトリウ
ム１％、寒天１．５％を含むｐＨＩＱのスキムミルク培
地プレート上に穿刺した。３７℃にて２４時間インキュ
ベート後、ノ・ローを形成するものをアルカリプロテア
ーゼ生産菌として得た。
た好アルカリ性細菌をスキムミルク１％、イーストエキ
ス０．０２５％、啄プトン０．０５ ％、炭酸ナトリウ
ム１％、寒天１．５％を含むｐＨＩＱのスキムミルク培
地プレート上に穿刺した。３７℃にて２４時間インキュ
ベート後、ノ・ローを形成するものをアルカリプロテア
ーゼ生産菌として得た。
ｌ）の培地、培養条件で得られた培養液を８００Ｏｒｐ
ｍにて５分間遠心分離し、培養上清を得た。
ｍにて５分間遠心分離し、培養上清を得た。
その培養上清およびその培養上清に洗浄剤を３００ ｐ
ｐｍになるように添加し、４０℃にて１時間処理したも
のを、抗生物質検定用ペーパーディスク（φ８胡）に２
０μを加え、更に上記ｐｉ（１０のスキムミルク培地上
にのせた。これを３７℃にて２４時間インキュベートし
、ハローの径を測定した。ハローの径が洗浄剤未処理、
処理品とも同じものを、界面活性剤に耐性があるアルカ
リゾロチアーゼ生産菌として採取した。
ｐｍになるように添加し、４０℃にて１時間処理したも
のを、抗生物質検定用ペーパーディスク（φ８胡）に２
０μを加え、更に上記ｐｉ（１０のスキムミルク培地上
にのせた。これを３７℃にて２４時間インキュベートし
、ハローの径を測定した。ハローの径が洗浄剤未処理、
処理品とも同じものを、界面活性剤に耐性があるアルカ
リゾロチアーゼ生産菌として採取した。
酵素は、可溶性デンプン２％、イーストエキス０．５％
、ポリペプトン０．５％、す／酸二カリウム０．１％、
硫酸マグネシウム０．０２％、炭酸ナトリウム１％を含
む液体培地で３０℃にて３日間培養後、遠心分離、７０
チ硫安塩析、透析し調製した。高声洗浄剤原液中での安
定性試験は、市販の液体洗浄剤１００ｇに対して、グリ
シンを６．６ｇ、ＮａＯＨを３．３ｇ加え（ｐＨ１１）
、更に上記酵素液を約１０ゴ（カゼイン基質で３０００
００ ＡＰＵ）加え、４０℃にて１週間保存後残存活性
を評価した。５０％以上活性が残存したものを選んだ。
、ポリペプトン０．５％、す／酸二カリウム０．１％、
硫酸マグネシウム０．０２％、炭酸ナトリウム１％を含
む液体培地で３０℃にて３日間培養後、遠心分離、７０
チ硫安塩析、透析し調製した。高声洗浄剤原液中での安
定性試験は、市販の液体洗浄剤１００ｇに対して、グリ
シンを６．６ｇ、ＮａＯＨを３．３ｇ加え（ｐＨ１１）
、更に上記酵素液を約１０ゴ（カゼイン基質で３０００
００ ＡＰＵ）加え、４０℃にて１週間保存後残存活性
を評価した。５０％以上活性が残存したものを選んだ。
また、洗浄力試験は、油化学、３０１４３２（１９８１
）に示された方法に準じて行ない、洗浄の対象となる布
は、蛋白質配合人工湿式汚垢布を使用した。評価は、酵
素無添加品を基準にして、それ以上の洗浄力を有するも
のを選定した。以上のスクリーニング工程によりふるい
分けられた菌株数を第２表に示す。
）に示された方法に準じて行ない、洗浄の対象となる布
は、蛋白質配合人工湿式汚垢布を使用した。評価は、酵
素無添加品を基準にして、それ以上の洗浄力を有するも
のを選定した。以上のスクリーニング工程によりふるい
分けられた菌株数を第２表に示す。
第２表
上記のスクリーニングにより、自然界から分離採取され
た微生物が本発明のバチルス属に属し、洗浄剤成分共存
下の高アルカリ条件において優れた安定性を有し、尚且
つ洗浄力の改善に寄与するアルカリプロテアーゼを産生
ずる能力を有する新規なバチルス・エスピーＫ株（微工
研菌寄第８０８８号）、同Ｐ株（第８０９０号）。
た微生物が本発明のバチルス属に属し、洗浄剤成分共存
下の高アルカリ条件において優れた安定性を有し、尚且
つ洗浄力の改善に寄与するアルカリプロテアーゼを産生
ずる能力を有する新規なバチルス・エスピーＫ株（微工
研菌寄第８０８８号）、同Ｐ株（第８０９０号）。
同に株（第８０９１号）、同Ｘ株（第８０９２号）であ
る。
る。
問、これらの菌の採取場所は、Ｙ株が千葉市内、Ｐ株が
岐阜県坂祝町の農地、Ｋ株が静岡県伊東市、Ｋ株が東京
都多摩市の農地である。採取は、５７年から５８年にか
けて実施した。
岐阜県坂祝町の農地、Ｋ株が静岡県伊東市、Ｋ株が東京
都多摩市の農地である。採取は、５７年から５８年にか
けて実施した。
〔効果〕
Ｙ株、Ｐ株、Ｋ株およびＫ株が産生ずるアルカリグロテ
アーぜの高−洗浄剤原液（ｐＨ１１）中での安定性を第
３図に示す。
アーぜの高−洗浄剤原液（ｐＨ１１）中での安定性を第
３図に示す。
また、上記本菌株らの産生ずるアルカリプロテアーゼを
洗浄剤に配合させて、その洗浄力の改善度を調べた。そ
の結果を第３表に示す。洗浄力試験は、油化学、巳、
４３２ （１９８１）に示された方法に準じて行ない、
洗剤の対象となる布は、蛋白質配合人工汚垢布を使用し
た。
洗浄剤に配合させて、その洗浄力の改善度を調べた。そ
の結果を第３表に示す。洗浄力試験は、油化学、巳、
４３２ （１９８１）に示された方法に準じて行ない、
洗剤の対象となる布は、蛋白質配合人工汚垢布を使用し
た。
第 ３ 表
これらの結果から、本菌株らは洗浄剤成分共存下の高ア
ルカリ条件において優れた安定性を有し同かつ洗浄力の
向上に寄与するアルカリプロテアーゼを産生ずるという
点で有効であることが示された。
ルカリ条件において優れた安定性を有し同かつ洗浄力の
向上に寄与するアルカリプロテアーゼを産生ずるという
点で有効であることが示された。
第１図は、本菌株らの生育温度を示すグラフ図。
第２図は、本菌株らの生育ＰＩ−Ｉｔ示すグラフ図。
第３図は、本菌株らの産生ずるアルカリプロテアーゼの
高−洗浄剤原液（ｐＨ１１）中での安定性を示す図。 第４図はＹ株およびその胞子←嚢＃の電子顕微鏡写真図
。 第５図はＰ株およびその胞子傘３４の電子顕微鏡写真図
。 第６図はに株およびその胞子七七寸の電子顕微鏡写真図
。 第７図はＫ株およびその胞子を士ヰの電子顕微鏡写真図
。 出願人代理人 弁理士 鈴 江 武 彦第 ３ 図 イＬ ｑ ’Ｂ Ｔ−Ｚ （Ｅ）Ｙ′僕、 Ｙ）″冬メ）ト１８、÷ Ｐ休 Ｐ（冬クルー） ８、；・ ６ 丙 に１不〜 ■＜琢・ｉ目りｌ ・；に７ ｉ゛乏 ゛！木 ＸＩ本′・〉ｌ・、＼ 手続補正書 昭和 印０．７月−５日 特願昭６０−１２３０２１号 ２゜発明の名称 アルカリグロチアーゼ産生微生物 ３、補正をする者 事件との関係特許出願人 （６７６、） ライオン株式会社 ４、代理人 ７、補正の内容 （１１特許請求の範囲を別紙の通り訂正する。 （２）明細書第１１頁第６行目の「生産」を「産生」と
訂正する。 （３） 明細書第２４頁第１４行目の「生産」を「産
生」と訂正する。 （４）明細書第２５頁第１行目、第１４行目、第１７行
目の「生産」を「産生」と訂正する。 ２、特許請求の範囲 以下の菌学的性質を有するバチルス°エスピー （Ｂａ
ｃＨＩｕｓ ｓｐ ） Ｙ株（微工研菌寄第８０８８号
）、バチルス・エスピー２株（微工研菌寄第５ｏ９０号
）、バチルス・エスピーに＆（微工研菌寄第８０９１号
）およびバチルス・エスピーＸ株（微工研菌寄第８０９
２号）からなる群から選択されたアルカリグロチアーゼ
産生微生物。 人、形態的性質 肉汁寒天Ｉ８地上で３５℃にて２日間培養したとき、以
下の形態的特徴が観察される。 １）細胞の形および大きさ：いずれの株も桿菌、大きさ
は、 Ｙ株： ０．４−０．５ ｐｙｎ Ｘ １．７−１．９
ｐｍＰ株： ０．４−０．５ ｐｒｎ ｘ １．７−
２．０ ｐｒｎＫ株： ０．４−０．５ ｐｍ ｘ １
．１．６−１．８ ｐｍＸ株： ０．４−０．５ ｐｙ
ｎ Ｘ １．８−２．０ ｐｒｎ２）多形性：いずれの
株もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性あリ。 ４）胞子：いずれの株も胞子を形成し、形成途上で細胞
は先端近くから膨張する。成熟 した胞子はレモン型であり、大きさは、７株： ０．７
−０．９ ｐｍ Ｘ １．０−１．２ ｐｍ２株： ｏ
、 ｓ −１．０ＰＸ １．０μｍ×１．５μｍＫ株二
０．８−１．Ｑ ｐｍ Ｘ １．５−１．８１ｎｎＸ株
二〇、９−１．０ ｐｍ Ｘ １．０−１．２ ｐｍ５
）グラム染色性：いずれの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 １）肉汁寒天平板培養： ７株：ｐＨ７，０にて生育し′て、円形、偏平状、全縁
のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、該周辺 部は淡褐色、該中心部は半透明の淡褐 色。 ｐＨ１．ｏ、ｏにて生育して、円形、偏平状、全縁コロ
ニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢が有り、ク リーム色。 ２株：ｐＨ７，０にて生育して、円形・偏平状・全縁の
コロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、半透明 なりリーム色。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 クリーム色。 Ｋ抹：ｐＨ７，０にて生首して、円形、中心凹状、波状
のコロニーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 透明。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 クリーム色。 Ｘ株：ｐＨ７，ｏにて生育して、円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、該周 辺部はクリーム色、該中心部は淡褐色。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 ７株：ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて拡帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色ない し淡褐色のコロニーを形成する。赤福 。 色の色素を僅かに生成する。 ２株：ｐＨ７，０およびｐＨ１００にて帯状に生育し、
光沢のあるクリーム色の半透明 なコロニーを形成する。色素は生成し ない。 Ｘ株：ｐＨ７，０にて帯状に生暫し、光沢のある透明な
コロニーを形成する。色素は 生成しない。 ｐＨ１０，０にて拡帯状に生育し、光沢のあるクリーム
色のコロニーを形成す る。色素は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７，０および１００にて拡帯状に生育し、光
沢のあるクリーム色のコロニ ーを形成する。色素は生成しない。 ３）肉汁液体培養： ｙ、ｐ、ｘ、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育するが
菌膜は形成しない。 ｐＨ１０，０にていずれも生育が 良好で、菌膜は形成しない。 １）肉汁ゼラチン芽刺培養： Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株： ｐＨ７，０にていずれも僅かに液
化する。 ｐＨ１０，０にていずれも液化す る。 ：）リドマス・ミルク： Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株： ｐＨ７，０にていずれも生育が非
常に悪い。 ｐＨ１０，０にていずれも生育す る。ミルクの凝固は見られない、 培地がアルカリ性のため、リド マスの変色は不明。 Ｃ１生理的性質Ｃ１０） ＪＪ、外Ｙ 、 Ｉ） 、
Ｋ 、 Ｘ株とも同じ〕 １）硝酸塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３、）Ｍ Ｒテスト：陰性。 ４）ＶＰテスト：陰性。 ５）インドールの生成：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用： Ｋｏｓｅｒの培地では利用しな
い。ｌ：：ｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎの培地では僅かに利用
する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。アンモニ
ウム塩は利用しな い。 １０）色素の生成：７株は、水溶性の赤褐色の色素を菌
体外に生産する。Ｐ。 Ｋ、Ｘ株は、色素を生産しな い。 １１）ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシダーゼ二陥性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生々の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が 良好。 １５）生育のｐＨ範囲：１０．０付近（６，０ないし１
２．０）が良好。 １６）酸素に対する態ｖ、：好気性下でも鎌気性下でも
生育する。 １７）０−Ｆテスト：陰性。 １８）糖類から酸およびガスの生成：（＋：生成する
−；生成しない） Ｄ、その他の性質 １）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０％
ＮａＣＪ 下で生育する。 ２）７株、２株、に株およびＸ株は、いずれも至適ｐＨ
が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件におい
て優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与する
アルカリグロチアーゼを産生ずる。 手続補正書 昭和 撃Ｏ・ＩＱ、−Ｂ日 特許庁長官 宇 賀 道 部 殿 １、事件の表示 特願昭６０−１２３０２１号 ２、発明の名称 アルカリグロチアーゼ産生微生物 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 （６７６）ライオン株式会社 ４、代理人 ５、自発補正 ７、補正の内容 （１）特許請求の範囲を別紙の通シ訂正する。 （２） 明細書第１６頁第１６行目の「１０）以外ｙ
、ｐ、ｉ、ｘ株とも同じ」をｒＹ、Ｐ、Ｋ。 に Ｘ株とも同じ」と訂正する。 （３）明細書簡１７頁第１０ないし１３行目の「Ｙ株は
、水溶性の赤褐色の色素を菌体外に生産する。Ｐ、に、
Ｘ株は、色素を生産しない。」を「色素は生成しない。 」と訂正する。 （４） 明細書第１７頁第２１行ないし第１８頁第１
行目の「好気性下でも嫌気性下でも生育する。」を「好
気性」に訂正する。 ２、特許請求の範囲 以下の菌学的性質を有するバチルス・エスピー （Ｂａ
ｃｌｌｌｕｓ ｇｐ ） Ｙ株（微工研菌寄第８０８８
号）、バチルス・エスピー２株（微工研菌寄第８０９０
号）、バチルス・エンビーに株（微工研菌寄第８０９１
号）およびパ讐ルス・エスピーＸ株（微工研菌寄第８０
９２号）からなる群から選択されたアルカリプロテアー
ゼ産生微生物。 Ａ、形態的性質 肉汁寒天培地上で３５℃にて２日間培養したとき、以下
の形態的特徴が観察される。 １）細胞の形および大きさ：いずれの株も桿菌、大きさ
は、 Ｙ株：０．４−０．５．μｍＸ １．７−１．９ｔｔｍ
Ｐ株： ０．４−０．５．μｍＸ１．７ ２．０μｍＫ
株： ０．４−０．５μｍＸ１．６ １．８μｍＸ株：
０．４−０．５μｍ Ｘ １．８ ２． ＯＡｍ。 ２）多形性：いずれの株もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性シ。 ４〕 胞子；いずれの株も胞子を形成し、形成途上で細
胞は先端近くから膨張する。 成熟した胞子はレモン型であシ、大 きさは、 Ｙ 株 二 ０． ７ − ０． ９ μｍ Ｘ
１． ０ − １． ２ μｍＰ株：０．８ １．
０μｍＸ１．０μｍ×１．５／ｊｍＫ株：０．８−１．
０μｍＸ １．５−１．８ＡｍＸ株： ０．９−１．Ｏ
ｊｊｍＸｌ、０−１．２μｍ０５）グラム染色性：いず
れの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 全縁のコロニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢有υ、該 周辺部は淡褐色、該中心部は半透明 の淡褐色◎ ＰＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁コロニ
ーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 クリーム色。 ２株：ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状、全綴の
コロニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢有シ、半 透明なりリーム色。 ｐＨ１０，０Ｋで生育して、円形、偏平状、全綴のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 り、クリーム色。 Ｋ株：ｐＨ７，０にて生育して、円形、中心凹状、波状
のコロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 シ、透明。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全綴のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 シ、クリーム色。 Ｘ株：ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状、全綴の
コロニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢有り、該 周辺部はクリーム色、該中心部は淡 褐色。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全綴のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 り、クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 ７株：ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて波帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色ない し淡褐色のコロニーを形成する。赤 褐色の色素を僅かに生成する。 ２株：ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて帯状に生育し
、光沢のあるクリーム色の半透 明なコロニーを形成する。色素は生 成しない。 Ｋ株：１ｆ（７，０にて帯状に生育し、光沢のある透明
なコロニーを形成する。色素 は生成しない。 ４１０．０にて波帯状に生育し、光沢 のあるクリーム色のコロニーヲ形成 する。色素は生成しない。 Ｘ株：ｐＩ（７，０および１０．０にて波帯状に生育し
、光沢のあるクリーム色のコロ ニーを形成する。色素は生成しない。 ３）肉汁液体培養： Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育するが
、菌膜は形成しない。 ｐＨ１０，０にていずれも生育が 良好で、菌膜は形成しない。 ４）肉汁ゼラチン穿刺培養： Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：Ｈ７，Ｏにていずれも僅かに液化す
る。 ｐＨ１０，０にていずれも液化す る。 ５） リドマス・ミルクニ Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育が非常
に悪い。 ｐｆ（１０，０にていずれも生育す る。ミルクの凝固は見られな い。培地がアルカリ性のため、 リドマスの変色は不明。 Ｃ０生理的性質（Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株とも同じ〕１）硝酸
塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３）ＭＲテスト：陰性。 ４）ＶＰテスト：陰性。 ５）インドールの生成：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用： Ｋｏａｅｒの培地では利用しな
い＠Ｃｈｒｉｓｔｅｎａｅｎの培 地では僅かに利用する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。 アンモニウム塩は利用 しない。 １０）色素の生成二色素は生成しない。 １１）ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシダーゼ：陽性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生育の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が 良好。 １５）生育の声範囲：１０．０付近（６，０ないし１２
．０）が良好。 １６）酸素に対する態度：好気性。 １７） Ｏ−Ｆテスト：陰性。 １８）糖類から酸およびガスの生成：（＋；生成する一
；生成しな い） Ｌ−アラ（メース −−−−−−−−Ｄ−キシワース
−−一一一一一−Ｄ−〉ス ＋−＋−＋−＋− Ｄ−マろ一タ ＋−＋−＋−＋− Ｄ−７ラクト１ス 十 −＋−＋−＋−Ｄ−ガヲク
ト七ス − −一一一一一一麦芽糖 ＋−＋
−＋−＋− ショ糖 十 −＋−＋−＋− 乳糖 −一 トい、。ッ 十 −＋−＋−＋−Ｄ−ソＡイｆッ
ト −−一一一一一−Ｄ−ッヵット 十
−＋−＋−＋−イノジット −− グリセリン −−一一一一一一 デンデン ＋−＋−＋−＋− Ｄ、その他の性質 １）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０
ｌ ＮａＣ１下で生育する。 ２） Ｙ株、２株、に株およびＸ株は、いずれも至適
声が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件にお
いて優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善く寄与す
るアルカリプロテアーゼを産生ずる。 出願人代理人 弁理士 鈴 江 武 彦手続補正書 昭和 祁０． ＩＩノ、 １５０ 特願昭６０−１２３０２１号 ２゜発明の名称 アルカリグロチアーゼ、産生微生物 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 （６７６１ライオン株式会社 ４、代理人 ５、自発補正 ７４補正の内容 ＋１） 特許請求の範囲を別紙の通多訂正する。 （２） 明細書第１６頁第１６行目の「ｌＯ）以外Ｙ
、Ｐ、に、Ｘ株とも同じ」をｒＹ、Ｐ、Ｋ。 Ｘ株とも同じ」と訂正する。 （３）明細書第１７頁第１０ないし１２行目の「Ｙ株は
、水溶性の赤褐色の色素を菌体外に生産する。Ｐ、に、
Ｘ株は１色素を生産しない。」を［色素は生成しない、
」と訂正する。 （４） 明細書第１７頁第２０行ないし第１８頁第１
行目の「好気性下でも嫌気性下でも生育する。」を「好
気性」に訂正する。 ２、特許請求の範囲 以下の菌学的性質を存するバチルス・エスピー （Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ａｐ ）Ｙ株（微工研菌寄第８０８８号
）、バチルス・エスピー２株（微工研菌寄第８０９０
号）、バチルス・エスピーＫｍｌ＆工研菌寄第８０９１
号）およびバチルス・エスピーＸ株（微工研菌寄第８０
９２号）からなる群から選択されたアルカリプロテアー
ゼ産生微生物。 Ａ、形態的性質 肉汁寒天培地上で３５℃にて２日間培養したとき、以下
の形態的特徴が観察される。 ｌ）細胞の形および大きさ：いずれの株も桿菌。 大きさは。 Ｙ株： ０．４−０．５ ｐ ！ｎ Ｘ １．７−１．
９μｍＰ株：０゜４−０．５ ｆｉ ｍ Ｘ １．７−
２゜ＱｐｍＫ株二０．４−０．５ ｐ ｒｎ Ｘ １．
６−１．８ ｐ ｍＸ株： ０．４−０．５μｍＸ１．
８−２．０ｐｍ２）多形性：いずれの株もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性あシ。 ４）胞子：いずれの株も胞子を形成し、形成途上でｍ胞
は先端近くから膨張する。 成熟した胞子はレモン型であシ、大 きさは。 Ｙ株： ０．７−０．９ｐｍｘ １．、ｏ−１２ｐｍＰ
株： ０．８−１．０μｍＸ１．０μｍ×１．５μｍＫ
ａ：０．８−１．０μｍＸ１．５−１．８μｍＸ株：
０．９−１．０μｍＸ １．０−１．２μｍ。 ５）グラム染色性：いずれの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 ｌ）肉汁寒天培地上＃：： Ｙ株：ｐＨ７，０にて生育して１円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有シ。 該周辺部は淡褐色、該中心部は半透 明の淡褐色。 ｐ）（１０．ｏにて生育して１円形、偏平状、全縁コロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 り、クリーム色。 ２株：ｐＨ７，Ｑにて生育して１円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有）。 半透明なりリーム色。 ｐＨＩＱ、ｏにて生育して１円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は−滑らかで光沢が有 り、クリーム色。 Ｘ株：ｐｌ（７，Ｑにて生育して１円形、中心凹状、波
状のコロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有シ、透明。 ｐＨ１０，０にて生育して１円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有り。 ゛クリーム色。 Ｘ株：ｐＨ７，０にて生育して１円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有り。 該周辺部はクリーム色、該中心部は 淡褐色。 ｐＨ１０，０にて生育して１円形、偏 平状、全縁のコロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有り、クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 Ｘ株：ｐＨ７，０およびＰＨ１０，０にて波帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色 ないし淡褐色のコロニーを形成する。 赤褐色の色素を僅かに生成する。 Ｐ株： Ｉ）Ｈ７，ＯおよびｐＨ１０．ｏにて帯状に生
育し、光沢のあるクリーム色の 半透明なコロニーを形成する。色素 は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７，Ｑにて帯状に生育し、光沢のある透明な
コロニーを形成する１色 素は生成しない。 ｐＨ１０．ｏにて波帯状に生育し、光 沢のあるクリーム色のコロニーヲ形 成する。色素は生成しない。 ＸｔＩ ： ｐＨ７，０オヨび１０．．０にて波帯状に
生育し、光沢のあるクリーム色のコ ロニーを形成する。色素は生成しな い。 ３）肉汁液体培養 Ｙ、 Ｐ、 Ｋ、 Ｘ株： ｐＨ７，０にていずれも生
育するが、菌膜は形成しない。 ｐＨ１０，０にていずれも生育が良 好で、菌膜は形成しない。 ４）肉汁ゼラチン穿刺培養： Ｙ、 Ｐ、 Ｋ、 Ｘ株：ｐｌ−ｉ７．Ｑにていずれも
僅かに液化する。 ｐＨ１０，０にていずれも液化 する。 ５）リドマス・ミルク： Ｙ、Ｐ、、に、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育が非
常に悪い。 ｐＨ１０，０にていずれも生育 する。ミルクの凝固は見られ ない。培地がアルカシ性のた め、リドマスの変色は不明。 Ｃ１生理的性質［Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株とも同じ］１）硝酸
塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３）ＭＲテスト：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用： Ｋｏｓｅｒの培地では利用しな
い、 Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎの培 地では僅かに利用する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。 アンモニウム塩は利用 しない。 １０）色素の生成二色素は生成しない。 １１１ ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシダーゼ：陽性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生育の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が 良好。 １５）生育ＯｐＨ範囲：１０．０付近（６，Ｏｎいし１
２、（ｌが良好。 １６１ 酸素に対する態度：好気性。 １７’）Ｏ−Ｆテスト：陰性。 １８１ 糖類から酸およびガスの生成：（＋：生成す
るー；生成しな−） Ｄ９その他の性質 １）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０憾
Ｎａ Ｃ／下で生育する。 ２）Ｙ株、Ｐ株、に株およびＸ株は、いずれも至適ｐＨ
が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件におい
て優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与する
アルカリプロテアーゼを産生する。 出願人代理人 弁理士 鈴 江 武 彦手続補正書 昭和 ９１．−２ｔＢ 持・許庁長官 宇 賀 道 部 殿１、事件の表示 特願昭６０−１２３０２１号 ２、発明の名称 アルカリプロテアーゼ産生微生物 ３、補正をする者 事件との関係特許出願人 （６７６） ライオン株式会社 ４、代理人 ５、自発補正 乙補正の内容 （１］ 特許請求の範囲を別紙の通シ訂正する。 （２）明細書筒１２頁第１ないし２行目の「微工研菌寄
第８０８８号」を 「微工研条寄第１０２９号」と訂正する。 （３） 明細書筒１２頁第２ないし３行目の「微工研
菌寄第８０９０号」を 「微工研条寄第１０３０号」と訂正する。 （４） 明細書第１２頁第４行目の 「微工研菌寄第８０９１号」を 「微工研条寄第１０３１号」と訂正する。 （５） 明細書第１２頁第５行目の 「微工研菌寄第８０９２号」を 「微工研条寄第１０３２号」と訂正する。 （６）明細書第２７頁下から第３ないし４行目の「微工
研菌寄第８０８８号」を 「微工研条寄第１０２９号」と訂正する。 （７） 明細書第２７頁下から第３行目の「第８０９
０号」を「第１０３０号」と訂正する。 （８） 明細書第２７頁下から第２行目の「第８０９
１号」を「第】０３１号」と訂正する。 （９） 明細書第２７頁下から第２行目の「第８０９
２号」を「第１０３２号」と訂正する。 α〔別紙の通シ受託証４通補正する。 ２、特許請求の範囲 以下の菌学的性質−を有するバチルス・エスピー （Ｂ
ａｅｉｌｌｕｓ ｓｐ ） Ｙ株（微工研ゑ寄第１０２
９号）、ｚ４チルス・エスピー２株（微工研条寄第二立
３０号）、バチルス・エスピーに株（微工研、癒、寄第
１０３１号）およびバチルス・エスピーＹ株（微工研ゑ
寄第１０３２号）からなる群から選択式れたアルカリグ
ロチアーゼ産生微生物。 Ａ、形態的性質 肉汁寒天培地上で３５℃にて２日間培養したとき、以下
の形態的特徴が観察される。 １）細胞の形および大きて：いずれの株も桿菌。 大きさは、 Ｙ株： ０．４−０．５ ｐ ｍ Ｘ １゜７−１．９
ｐ ｍ１株： ０．４−０．５ ｐ ｍ Ｘ １．７
−２． Ｏｐ ｍＫ株：０．４−０゜５ ｐ ｍ Ｘ
１−６−１．８ ｐ ｍＸ株： ０．４−０．５ ｐ
ｍ Ｘ １．８−２．０ μｍ２）多形性：いずれの株
もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性あり。 ４）胞子：いずれの株も胞子を形成し、形成途上で細胞
は先端近くから膨張する。 成熟した胞子はレモン型であシ、大 きさは。 Ｙ株： ０．７−０．９ ｐ ｍ Ｘ １．０−１．２
ｐ ｍ１株： ０．８−１．０ ｐ ｍ Ｘ １．０
μｍ×１．５ ｐ ｍＫ株：０．８−１０ｐ ｍ Ｘ
１．５−１．８μｍＸ株： ０．９−１．０μｍＸ１．
０−１．２μｍ５）グラム染色性：いずれの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 １）肉汁寒天平板培養： Ｙ株：ｐＨ７゜Ｏにて生育して、円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有シ。 該周辺部は淡褐色、該中心部は半透 明の淡褐色。 ｐＴ（１０，０にて生育して１円形、偏平状、全縁コロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 シ、クリーム色。 ２株： ｐＨ７，０にて生育して１円形、偏平状、全縁
のコロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有シ、 半透明なりリーム色。 ｐ）（１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコ
ロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 り、クリーム色。 Ｙ株：ｐＴ（’７．ｏにて生育して１円形、中心凹状、
波状のコロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有シ、透明。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏 平状、全縁のコロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有シ、クリーム色。 Ｙ株： ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状。 全縁のコロニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢有り、該 周辺部はクリーム色、該中心部は淡 褐色。 ｐＨ１．０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコ
ロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有り、クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 Ｘ株：ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて波帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色 ないし淡褐色のフロニーを形成する。 赤褐色の色素を僅かに生成する。 ２株：Ｉ）Ｈ７，０およびｐ）（１０，０にて帯状に生
育し、光沢のあるクリーム色の 半透明なコロニーを形成する。色素 は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７，０にて帯状に生育し、光沢のある透明な
コロニーを形成する。色 素は生成しない。 ｐＨ１０，０にて波帯状に生育し、光 沢のあるクリーム色のコロニーヲ形 成する。色素は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７，０＞よび１０．０にて波帯状に生育し、
光沢のあるクリーム色のコ ロニーを形成する。色素は生成しな い。 ３）肉汁液体培養 Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐＨ７，ｏにていずれも生育するが
、菌膜は形成しない。 ｐＨ１０，０にていずれも生育 が良好で、菌膜は形成しな い。 ４）肉汁ゼラチン穿刺培養 Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ＰＨ７゜０にていずれも僅かに液化
する。 ｐＨ１０，０にていずれも液 化する。 ５）リドマスｅミルク Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐ）Ｉ７．ＯＫていずれも生育が非
常に悪い。 ｐ）（１０，０にていずれも生 育する。ミルクの凝固は見 られない。培地がアルカリ 性のため、リドマスの変色 は不明。 Ｃ６生理的性質〔Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株とも同じ〕１）硝酸
塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３）ＭＲテスト：陰性。 ４）ＶＰテスト：陰性。 ５）インドールの生成：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用： Ｋｏｓｅｒの培地では利用しな
い＠Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎの培 地では僅かに利用する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。 アンモニウム塩は利用 しない。 １０）色素の生成二色素は生成しない。 １１）ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシグーゼ：陽性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生育の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が 良好。 １５）生育ＯｐＨ範囲：１０．Ｏ付近（６，０ないし１
２．０）が良好。 １６）酸素に対する態度：好気性。 １７）Ｏ−Ｆテスト：陰性。 Ｌ８） 糖類から酸およびガスの生成：（＋：生成す
る一；生成しない） Ｄ、その他の性質 ｌ）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０％
ＮａＣｅ下で生育する。 λ）Ｙ株、Ｐ株、に株およびＹ株は、いずれも至適ｐＴ
（が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件にお
いて優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与す
るアルカリグロチアーゼを産生ずるつ
高−洗浄剤原液（ｐＨ１１）中での安定性を示す図。 第４図はＹ株およびその胞子←嚢＃の電子顕微鏡写真図
。 第５図はＰ株およびその胞子傘３４の電子顕微鏡写真図
。 第６図はに株およびその胞子七七寸の電子顕微鏡写真図
。 第７図はＫ株およびその胞子を士ヰの電子顕微鏡写真図
。 出願人代理人 弁理士 鈴 江 武 彦第 ３ 図 イＬ ｑ ’Ｂ Ｔ−Ｚ （Ｅ）Ｙ′僕、 Ｙ）″冬メ）ト１８、÷ Ｐ休 Ｐ（冬クルー） ８、；・ ６ 丙 に１不〜 ■＜琢・ｉ目りｌ ・；に７ ｉ゛乏 ゛！木 ＸＩ本′・〉ｌ・、＼ 手続補正書 昭和 印０．７月−５日 特願昭６０−１２３０２１号 ２゜発明の名称 アルカリグロチアーゼ産生微生物 ３、補正をする者 事件との関係特許出願人 （６７６、） ライオン株式会社 ４、代理人 ７、補正の内容 （１１特許請求の範囲を別紙の通り訂正する。 （２）明細書第１１頁第６行目の「生産」を「産生」と
訂正する。 （３） 明細書第２４頁第１４行目の「生産」を「産
生」と訂正する。 （４）明細書第２５頁第１行目、第１４行目、第１７行
目の「生産」を「産生」と訂正する。 ２、特許請求の範囲 以下の菌学的性質を有するバチルス°エスピー （Ｂａ
ｃＨＩｕｓ ｓｐ ） Ｙ株（微工研菌寄第８０８８号
）、バチルス・エスピー２株（微工研菌寄第５ｏ９０号
）、バチルス・エスピーに＆（微工研菌寄第８０９１号
）およびバチルス・エスピーＸ株（微工研菌寄第８０９
２号）からなる群から選択されたアルカリグロチアーゼ
産生微生物。 人、形態的性質 肉汁寒天Ｉ８地上で３５℃にて２日間培養したとき、以
下の形態的特徴が観察される。 １）細胞の形および大きさ：いずれの株も桿菌、大きさ
は、 Ｙ株： ０．４−０．５ ｐｙｎ Ｘ １．７−１．９
ｐｍＰ株： ０．４−０．５ ｐｒｎ ｘ １．７−
２．０ ｐｒｎＫ株： ０．４−０．５ ｐｍ ｘ １
．１．６−１．８ ｐｍＸ株： ０．４−０．５ ｐｙ
ｎ Ｘ １．８−２．０ ｐｒｎ２）多形性：いずれの
株もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性あリ。 ４）胞子：いずれの株も胞子を形成し、形成途上で細胞
は先端近くから膨張する。成熟 した胞子はレモン型であり、大きさは、７株： ０．７
−０．９ ｐｍ Ｘ １．０−１．２ ｐｍ２株： ｏ
、 ｓ −１．０ＰＸ １．０μｍ×１．５μｍＫ株二
０．８−１．Ｑ ｐｍ Ｘ １．５−１．８１ｎｎＸ株
二〇、９−１．０ ｐｍ Ｘ １．０−１．２ ｐｍ５
）グラム染色性：いずれの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 １）肉汁寒天平板培養： ７株：ｐＨ７，０にて生育し′て、円形、偏平状、全縁
のコロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、該周辺 部は淡褐色、該中心部は半透明の淡褐 色。 ｐＨ１．ｏ、ｏにて生育して、円形、偏平状、全縁コロ
ニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢が有り、ク リーム色。 ２株：ｐＨ７，０にて生育して、円形・偏平状・全縁の
コロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢有り、半透明 なりリーム色。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 クリーム色。 Ｋ抹：ｐＨ７，０にて生首して、円形、中心凹状、波状
のコロニーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 透明。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 クリーム色。 Ｘ株：ｐＨ７，ｏにて生育して、円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該コロニ ーの表面は滑らかで光沢が有り、該周 辺部はクリーム色、該中心部は淡褐色。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 ７株：ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて拡帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色ない し淡褐色のコロニーを形成する。赤福 。 色の色素を僅かに生成する。 ２株：ｐＨ７，０およびｐＨ１００にて帯状に生育し、
光沢のあるクリーム色の半透明 なコロニーを形成する。色素は生成し ない。 Ｘ株：ｐＨ７，０にて帯状に生暫し、光沢のある透明な
コロニーを形成する。色素は 生成しない。 ｐＨ１０，０にて拡帯状に生育し、光沢のあるクリーム
色のコロニーを形成す る。色素は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７，０および１００にて拡帯状に生育し、光
沢のあるクリーム色のコロニ ーを形成する。色素は生成しない。 ３）肉汁液体培養： ｙ、ｐ、ｘ、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育するが
菌膜は形成しない。 ｐＨ１０，０にていずれも生育が 良好で、菌膜は形成しない。 １）肉汁ゼラチン芽刺培養： Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株： ｐＨ７，０にていずれも僅かに液
化する。 ｐＨ１０，０にていずれも液化す る。 ：）リドマス・ミルク： Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株： ｐＨ７，０にていずれも生育が非
常に悪い。 ｐＨ１０，０にていずれも生育す る。ミルクの凝固は見られない、 培地がアルカリ性のため、リド マスの変色は不明。 Ｃ１生理的性質Ｃ１０） ＪＪ、外Ｙ 、 Ｉ） 、
Ｋ 、 Ｘ株とも同じ〕 １）硝酸塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３、）Ｍ Ｒテスト：陰性。 ４）ＶＰテスト：陰性。 ５）インドールの生成：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用： Ｋｏｓｅｒの培地では利用しな
い。ｌ：：ｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎの培地では僅かに利用
する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。アンモニ
ウム塩は利用しな い。 １０）色素の生成：７株は、水溶性の赤褐色の色素を菌
体外に生産する。Ｐ。 Ｋ、Ｘ株は、色素を生産しな い。 １１）ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシダーゼ二陥性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生々の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が 良好。 １５）生育のｐＨ範囲：１０．０付近（６，０ないし１
２．０）が良好。 １６）酸素に対する態ｖ、：好気性下でも鎌気性下でも
生育する。 １７）０−Ｆテスト：陰性。 １８）糖類から酸およびガスの生成：（＋：生成する
−；生成しない） Ｄ、その他の性質 １）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０％
ＮａＣＪ 下で生育する。 ２）７株、２株、に株およびＸ株は、いずれも至適ｐＨ
が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件におい
て優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与する
アルカリグロチアーゼを産生ずる。 手続補正書 昭和 撃Ｏ・ＩＱ、−Ｂ日 特許庁長官 宇 賀 道 部 殿 １、事件の表示 特願昭６０−１２３０２１号 ２、発明の名称 アルカリグロチアーゼ産生微生物 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 （６７６）ライオン株式会社 ４、代理人 ５、自発補正 ７、補正の内容 （１）特許請求の範囲を別紙の通シ訂正する。 （２） 明細書第１６頁第１６行目の「１０）以外ｙ
、ｐ、ｉ、ｘ株とも同じ」をｒＹ、Ｐ、Ｋ。 に Ｘ株とも同じ」と訂正する。 （３）明細書簡１７頁第１０ないし１３行目の「Ｙ株は
、水溶性の赤褐色の色素を菌体外に生産する。Ｐ、に、
Ｘ株は、色素を生産しない。」を「色素は生成しない。 」と訂正する。 （４） 明細書第１７頁第２１行ないし第１８頁第１
行目の「好気性下でも嫌気性下でも生育する。」を「好
気性」に訂正する。 ２、特許請求の範囲 以下の菌学的性質を有するバチルス・エスピー （Ｂａ
ｃｌｌｌｕｓ ｇｐ ） Ｙ株（微工研菌寄第８０８８
号）、バチルス・エスピー２株（微工研菌寄第８０９０
号）、バチルス・エンビーに株（微工研菌寄第８０９１
号）およびパ讐ルス・エスピーＸ株（微工研菌寄第８０
９２号）からなる群から選択されたアルカリプロテアー
ゼ産生微生物。 Ａ、形態的性質 肉汁寒天培地上で３５℃にて２日間培養したとき、以下
の形態的特徴が観察される。 １）細胞の形および大きさ：いずれの株も桿菌、大きさ
は、 Ｙ株：０．４−０．５．μｍＸ １．７−１．９ｔｔｍ
Ｐ株： ０．４−０．５．μｍＸ１．７ ２．０μｍＫ
株： ０．４−０．５μｍＸ１．６ １．８μｍＸ株：
０．４−０．５μｍ Ｘ １．８ ２． ＯＡｍ。 ２）多形性：いずれの株もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性シ。 ４〕 胞子；いずれの株も胞子を形成し、形成途上で細
胞は先端近くから膨張する。 成熟した胞子はレモン型であシ、大 きさは、 Ｙ 株 二 ０． ７ − ０． ９ μｍ Ｘ
１． ０ − １． ２ μｍＰ株：０．８ １．
０μｍＸ１．０μｍ×１．５／ｊｍＫ株：０．８−１．
０μｍＸ １．５−１．８ＡｍＸ株： ０．９−１．Ｏ
ｊｊｍＸｌ、０−１．２μｍ０５）グラム染色性：いず
れの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 全縁のコロニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢有υ、該 周辺部は淡褐色、該中心部は半透明 の淡褐色◎ ＰＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁コロニ
ーを形成する。該コ ロニーの表面は滑らかで光沢が有り、 クリーム色。 ２株：ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状、全綴の
コロニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢有シ、半 透明なりリーム色。 ｐＨ１０，０Ｋで生育して、円形、偏平状、全綴のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 り、クリーム色。 Ｋ株：ｐＨ７，０にて生育して、円形、中心凹状、波状
のコロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 シ、透明。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全綴のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 シ、クリーム色。 Ｘ株：ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状、全綴の
コロニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢有り、該 周辺部はクリーム色、該中心部は淡 褐色。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏平状、全綴のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 り、クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 ７株：ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて波帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色ない し淡褐色のコロニーを形成する。赤 褐色の色素を僅かに生成する。 ２株：ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて帯状に生育し
、光沢のあるクリーム色の半透 明なコロニーを形成する。色素は生 成しない。 Ｋ株：１ｆ（７，０にて帯状に生育し、光沢のある透明
なコロニーを形成する。色素 は生成しない。 ４１０．０にて波帯状に生育し、光沢 のあるクリーム色のコロニーヲ形成 する。色素は生成しない。 Ｘ株：ｐＩ（７，０および１０．０にて波帯状に生育し
、光沢のあるクリーム色のコロ ニーを形成する。色素は生成しない。 ３）肉汁液体培養： Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育するが
、菌膜は形成しない。 ｐＨ１０，０にていずれも生育が 良好で、菌膜は形成しない。 ４）肉汁ゼラチン穿刺培養： Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：Ｈ７，Ｏにていずれも僅かに液化す
る。 ｐＨ１０，０にていずれも液化す る。 ５） リドマス・ミルクニ Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育が非常
に悪い。 ｐｆ（１０，０にていずれも生育す る。ミルクの凝固は見られな い。培地がアルカリ性のため、 リドマスの変色は不明。 Ｃ０生理的性質（Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株とも同じ〕１）硝酸
塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３）ＭＲテスト：陰性。 ４）ＶＰテスト：陰性。 ５）インドールの生成：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用： Ｋｏａｅｒの培地では利用しな
い＠Ｃｈｒｉｓｔｅｎａｅｎの培 地では僅かに利用する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。 アンモニウム塩は利用 しない。 １０）色素の生成二色素は生成しない。 １１）ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシダーゼ：陽性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生育の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が 良好。 １５）生育の声範囲：１０．０付近（６，０ないし１２
．０）が良好。 １６）酸素に対する態度：好気性。 １７） Ｏ−Ｆテスト：陰性。 １８）糖類から酸およびガスの生成：（＋；生成する一
；生成しな い） Ｌ−アラ（メース −−−−−−−−Ｄ−キシワース
−−一一一一一−Ｄ−〉ス ＋−＋−＋−＋− Ｄ−マろ一タ ＋−＋−＋−＋− Ｄ−７ラクト１ス 十 −＋−＋−＋−Ｄ−ガヲク
ト七ス − −一一一一一一麦芽糖 ＋−＋
−＋−＋− ショ糖 十 −＋−＋−＋− 乳糖 −一 トい、。ッ 十 −＋−＋−＋−Ｄ−ソＡイｆッ
ト −−一一一一一−Ｄ−ッヵット 十
−＋−＋−＋−イノジット −− グリセリン −−一一一一一一 デンデン ＋−＋−＋−＋− Ｄ、その他の性質 １）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０
ｌ ＮａＣ１下で生育する。 ２） Ｙ株、２株、に株およびＸ株は、いずれも至適
声が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件にお
いて優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善く寄与す
るアルカリプロテアーゼを産生ずる。 出願人代理人 弁理士 鈴 江 武 彦手続補正書 昭和 祁０． ＩＩノ、 １５０ 特願昭６０−１２３０２１号 ２゜発明の名称 アルカリグロチアーゼ、産生微生物 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 （６７６１ライオン株式会社 ４、代理人 ５、自発補正 ７４補正の内容 ＋１） 特許請求の範囲を別紙の通多訂正する。 （２） 明細書第１６頁第１６行目の「ｌＯ）以外Ｙ
、Ｐ、に、Ｘ株とも同じ」をｒＹ、Ｐ、Ｋ。 Ｘ株とも同じ」と訂正する。 （３）明細書第１７頁第１０ないし１２行目の「Ｙ株は
、水溶性の赤褐色の色素を菌体外に生産する。Ｐ、に、
Ｘ株は１色素を生産しない。」を［色素は生成しない、
」と訂正する。 （４） 明細書第１７頁第２０行ないし第１８頁第１
行目の「好気性下でも嫌気性下でも生育する。」を「好
気性」に訂正する。 ２、特許請求の範囲 以下の菌学的性質を存するバチルス・エスピー （Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ａｐ ）Ｙ株（微工研菌寄第８０８８号
）、バチルス・エスピー２株（微工研菌寄第８０９０
号）、バチルス・エスピーＫｍｌ＆工研菌寄第８０９１
号）およびバチルス・エスピーＸ株（微工研菌寄第８０
９２号）からなる群から選択されたアルカリプロテアー
ゼ産生微生物。 Ａ、形態的性質 肉汁寒天培地上で３５℃にて２日間培養したとき、以下
の形態的特徴が観察される。 ｌ）細胞の形および大きさ：いずれの株も桿菌。 大きさは。 Ｙ株： ０．４−０．５ ｐ ！ｎ Ｘ １．７−１．
９μｍＰ株：０゜４−０．５ ｆｉ ｍ Ｘ １．７−
２゜ＱｐｍＫ株二０．４−０．５ ｐ ｒｎ Ｘ １．
６−１．８ ｐ ｍＸ株： ０．４−０．５μｍＸ１．
８−２．０ｐｍ２）多形性：いずれの株もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性あシ。 ４）胞子：いずれの株も胞子を形成し、形成途上でｍ胞
は先端近くから膨張する。 成熟した胞子はレモン型であシ、大 きさは。 Ｙ株： ０．７−０．９ｐｍｘ １．、ｏ−１２ｐｍＰ
株： ０．８−１．０μｍＸ１．０μｍ×１．５μｍＫ
ａ：０．８−１．０μｍＸ１．５−１．８μｍＸ株：
０．９−１．０μｍＸ １．０−１．２μｍ。 ５）グラム染色性：いずれの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 ｌ）肉汁寒天培地上＃：： Ｙ株：ｐＨ７，０にて生育して１円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有シ。 該周辺部は淡褐色、該中心部は半透 明の淡褐色。 ｐ）（１０．ｏにて生育して１円形、偏平状、全縁コロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 り、クリーム色。 ２株：ｐＨ７，Ｑにて生育して１円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有）。 半透明なりリーム色。 ｐＨＩＱ、ｏにて生育して１円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は−滑らかで光沢が有 り、クリーム色。 Ｘ株：ｐｌ（７，Ｑにて生育して１円形、中心凹状、波
状のコロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有シ、透明。 ｐＨ１０，０にて生育して１円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有り。 ゛クリーム色。 Ｘ株：ｐＨ７，０にて生育して１円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有り。 該周辺部はクリーム色、該中心部は 淡褐色。 ｐＨ１０，０にて生育して１円形、偏 平状、全縁のコロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有り、クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 Ｘ株：ｐＨ７，０およびＰＨ１０，０にて波帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色 ないし淡褐色のコロニーを形成する。 赤褐色の色素を僅かに生成する。 Ｐ株： Ｉ）Ｈ７，ＯおよびｐＨ１０．ｏにて帯状に生
育し、光沢のあるクリーム色の 半透明なコロニーを形成する。色素 は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７，Ｑにて帯状に生育し、光沢のある透明な
コロニーを形成する１色 素は生成しない。 ｐＨ１０．ｏにて波帯状に生育し、光 沢のあるクリーム色のコロニーヲ形 成する。色素は生成しない。 ＸｔＩ ： ｐＨ７，０オヨび１０．．０にて波帯状に
生育し、光沢のあるクリーム色のコ ロニーを形成する。色素は生成しな い。 ３）肉汁液体培養 Ｙ、 Ｐ、 Ｋ、 Ｘ株： ｐＨ７，０にていずれも生
育するが、菌膜は形成しない。 ｐＨ１０，０にていずれも生育が良 好で、菌膜は形成しない。 ４）肉汁ゼラチン穿刺培養： Ｙ、 Ｐ、 Ｋ、 Ｘ株：ｐｌ−ｉ７．Ｑにていずれも
僅かに液化する。 ｐＨ１０，０にていずれも液化 する。 ５）リドマス・ミルク： Ｙ、Ｐ、、に、Ｘ株：ｐＨ７，０にていずれも生育が非
常に悪い。 ｐＨ１０，０にていずれも生育 する。ミルクの凝固は見られ ない。培地がアルカシ性のた め、リドマスの変色は不明。 Ｃ１生理的性質［Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株とも同じ］１）硝酸
塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３）ＭＲテスト：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用： Ｋｏｓｅｒの培地では利用しな
い、 Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎの培 地では僅かに利用する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。 アンモニウム塩は利用 しない。 １０）色素の生成二色素は生成しない。 １１１ ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシダーゼ：陽性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生育の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が 良好。 １５）生育ＯｐＨ範囲：１０．０付近（６，Ｏｎいし１
２、（ｌが良好。 １６１ 酸素に対する態度：好気性。 １７’）Ｏ−Ｆテスト：陰性。 １８１ 糖類から酸およびガスの生成：（＋：生成す
るー；生成しな−） Ｄ９その他の性質 １）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０憾
Ｎａ Ｃ／下で生育する。 ２）Ｙ株、Ｐ株、に株およびＸ株は、いずれも至適ｐＨ
が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件におい
て優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与する
アルカリプロテアーゼを産生する。 出願人代理人 弁理士 鈴 江 武 彦手続補正書 昭和 ９１．−２ｔＢ 持・許庁長官 宇 賀 道 部 殿１、事件の表示 特願昭６０−１２３０２１号 ２、発明の名称 アルカリプロテアーゼ産生微生物 ３、補正をする者 事件との関係特許出願人 （６７６） ライオン株式会社 ４、代理人 ５、自発補正 乙補正の内容 （１］ 特許請求の範囲を別紙の通シ訂正する。 （２）明細書筒１２頁第１ないし２行目の「微工研菌寄
第８０８８号」を 「微工研条寄第１０２９号」と訂正する。 （３） 明細書筒１２頁第２ないし３行目の「微工研
菌寄第８０９０号」を 「微工研条寄第１０３０号」と訂正する。 （４） 明細書第１２頁第４行目の 「微工研菌寄第８０９１号」を 「微工研条寄第１０３１号」と訂正する。 （５） 明細書第１２頁第５行目の 「微工研菌寄第８０９２号」を 「微工研条寄第１０３２号」と訂正する。 （６）明細書第２７頁下から第３ないし４行目の「微工
研菌寄第８０８８号」を 「微工研条寄第１０２９号」と訂正する。 （７） 明細書第２７頁下から第３行目の「第８０９
０号」を「第１０３０号」と訂正する。 （８） 明細書第２７頁下から第２行目の「第８０９
１号」を「第】０３１号」と訂正する。 （９） 明細書第２７頁下から第２行目の「第８０９
２号」を「第１０３２号」と訂正する。 α〔別紙の通シ受託証４通補正する。 ２、特許請求の範囲 以下の菌学的性質−を有するバチルス・エスピー （Ｂ
ａｅｉｌｌｕｓ ｓｐ ） Ｙ株（微工研ゑ寄第１０２
９号）、ｚ４チルス・エスピー２株（微工研条寄第二立
３０号）、バチルス・エスピーに株（微工研、癒、寄第
１０３１号）およびバチルス・エスピーＹ株（微工研ゑ
寄第１０３２号）からなる群から選択式れたアルカリグ
ロチアーゼ産生微生物。 Ａ、形態的性質 肉汁寒天培地上で３５℃にて２日間培養したとき、以下
の形態的特徴が観察される。 １）細胞の形および大きて：いずれの株も桿菌。 大きさは、 Ｙ株： ０．４−０．５ ｐ ｍ Ｘ １゜７−１．９
ｐ ｍ１株： ０．４−０．５ ｐ ｍ Ｘ １．７
−２． Ｏｐ ｍＫ株：０．４−０゜５ ｐ ｍ Ｘ
１−６−１．８ ｐ ｍＸ株： ０．４−０．５ ｐ
ｍ Ｘ １．８−２．０ μｍ２）多形性：いずれの株
もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性あり。 ４）胞子：いずれの株も胞子を形成し、形成途上で細胞
は先端近くから膨張する。 成熟した胞子はレモン型であシ、大 きさは。 Ｙ株： ０．７−０．９ ｐ ｍ Ｘ １．０−１．２
ｐ ｍ１株： ０．８−１．０ ｐ ｍ Ｘ １．０
μｍ×１．５ ｐ ｍＫ株：０．８−１０ｐ ｍ Ｘ
１．５−１．８μｍＸ株： ０．９−１．０μｍＸ１．
０−１．２μｍ５）グラム染色性：いずれの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 １）肉汁寒天平板培養： Ｙ株：ｐＨ７゜Ｏにて生育して、円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有シ。 該周辺部は淡褐色、該中心部は半透 明の淡褐色。 ｐＴ（１０，０にて生育して１円形、偏平状、全縁コロ
ニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 シ、クリーム色。 ２株： ｐＨ７，０にて生育して１円形、偏平状、全縁
のコロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢有シ、 半透明なりリーム色。 ｐ）（１０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコ
ロニーを形成する。該 コロニーの表面は滑らかで光沢が有 り、クリーム色。 Ｙ株：ｐＴ（’７．ｏにて生育して１円形、中心凹状、
波状のコロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有シ、透明。 ｐＨ１０，０にて生育して、円形、偏 平状、全縁のコロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有シ、クリーム色。 Ｙ株： ｐＨ７，０にて生育して、円形、偏平状。 全縁のコロニーを形成する。該コロ ニーの表面は滑らかで光沢有り、該 周辺部はクリーム色、該中心部は淡 褐色。 ｐＨ１．０，０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコ
ロニーを形成する。 該コロニーの表面は滑らかで光沢が 有り、クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 Ｘ株：ｐＨ７，０およびｐＨ１０，０にて波帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色 ないし淡褐色のフロニーを形成する。 赤褐色の色素を僅かに生成する。 ２株：Ｉ）Ｈ７，０およびｐ）（１０，０にて帯状に生
育し、光沢のあるクリーム色の 半透明なコロニーを形成する。色素 は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７，０にて帯状に生育し、光沢のある透明な
コロニーを形成する。色 素は生成しない。 ｐＨ１０，０にて波帯状に生育し、光 沢のあるクリーム色のコロニーヲ形 成する。色素は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７，０＞よび１０．０にて波帯状に生育し、
光沢のあるクリーム色のコ ロニーを形成する。色素は生成しな い。 ３）肉汁液体培養 Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐＨ７，ｏにていずれも生育するが
、菌膜は形成しない。 ｐＨ１０，０にていずれも生育 が良好で、菌膜は形成しな い。 ４）肉汁ゼラチン穿刺培養 Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ＰＨ７゜０にていずれも僅かに液化
する。 ｐＨ１０，０にていずれも液 化する。 ５）リドマスｅミルク Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株：ｐ）Ｉ７．ＯＫていずれも生育が非
常に悪い。 ｐ）（１０，０にていずれも生 育する。ミルクの凝固は見 られない。培地がアルカリ 性のため、リドマスの変色 は不明。 Ｃ６生理的性質〔Ｙ、Ｐ、に、Ｘ株とも同じ〕１）硝酸
塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３）ＭＲテスト：陰性。 ４）ＶＰテスト：陰性。 ５）インドールの生成：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用： Ｋｏｓｅｒの培地では利用しな
い＠Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎの培 地では僅かに利用する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。 アンモニウム塩は利用 しない。 １０）色素の生成二色素は生成しない。 １１）ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシグーゼ：陽性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生育の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が 良好。 １５）生育ＯｐＨ範囲：１０．Ｏ付近（６，０ないし１
２．０）が良好。 １６）酸素に対する態度：好気性。 １７）Ｏ−Ｆテスト：陰性。 Ｌ８） 糖類から酸およびガスの生成：（＋：生成す
る一；生成しない） Ｄ、その他の性質 ｌ）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０％
ＮａＣｅ下で生育する。 λ）Ｙ株、Ｐ株、に株およびＹ株は、いずれも至適ｐＴ
（が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件にお
いて優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与す
るアルカリグロチアーゼを産生ずるつ
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 以下の菌学的性質を有するバチルス・エスピー（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ ｓｐ）Ｙ株（微工研菌寄第８０８８号）、
バチルス・エスピーＰ株（微工研菌寄第８０９０号）、
バチルス・エンピーＫ株（微工研菌寄第８０９１号）お
よびバチルス・エスピーＸ株（微工研菌寄第８０９２号
）からなる群から選択されたアルカリプロテアーゼ産生
微生物。 Ａ、形態的性質 肉汁寒天培地上で３５℃にて２日間培養したとき、以下
の形態的特徴が観察される。 １）細胞の形および大きさ：いずれの株も桿菌、大きさ
は、 Ｙ株：０．４−０．５μｍ×１．７−１．９μｍＰ株：
０．４−０．５μｍ×１．７−２．０μｍＫ株：０．４
−０．５μｍ×１．６−１．８μｍＸ株：０．４−０．
５μｍ×１．８−２．０μｍ。 ２）多形性：いずれの株もなし。 ３）運動性：いずれの株も周鞭毛を有し運動性あり。 ４）胞子：いずれの株も胞子を形成し、形成途上で細胞
は先端近くから膨張する。成熟 した胞子はレモン型であり、大きさは、 Ｙ株：０．７−０．９μｍ×１．０−１．２μｍＰ株：
０．８−１．０μｍ×１．３−１．５μｍＫ株：０．８
−１．０μｍ×１．５−１．８μｍＸ株：０．９−１．
０μｍ×１．０−１．２μｍ。 ５）グラム染色性：いずれの株も陽性。 ６）抗酸性：いずれの株も陰性。 Ｂ、培養的性質 １）肉汁寒天平板培養： Ｙ株：ｐＨ７．０にて生育して、円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該コロニーの表面は滑らかで光沢
有り、該周辺部は淡褐色、該中心部は半透明の淡褐色。 ｐＨ１０．０にて生育して、円形、偏平状、全縁コロニ
ーを形成する。該コロニーの表面は滑らかで光沢が有り
、クリーム色。 Ｐ株：ｐＨ７．０にて生育して、円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該コロニーの表面は滑らかで光沢
有り、半透明なクリーム色。 ｐＨ１０．０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コロニーの表面は滑らかで光沢が有
り、クリーム色。 Ｋ株：ｐＨ７．０にて生育して、円形、中心凹状、波状
のコロニーを形成する。該コロニーの表面は滑らかで光
沢が有り、透明。 ｐＨ１０．０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コロニーの表面は滑らかで光沢が有
り、クリーム色。 Ｘ株：ｐＨ７．０にて生育して、円形、偏平状、全縁の
コロニーを形成する。該コロニの表面は滑らかで光沢有
り、該周辺部はクリーム色、該中心部は淡褐色。 ｐＨ１０．０にて生育して、円形、偏平状、全縁のコロ
ニーを形成する。該コロニーの表面は滑らかで光沢が有
り、クリーム色ないし淡褐色。 ２）肉汁寒天斜面培養 Ｙ株：ｐＨ７．０およびｐＨ１０．０にて拡帯状に生育
し、光沢のあるクリーム色ないし淡褐色のコロニーを形
成する。赤褐色の色素を僅かに生成する。 Ｐ株：ｐＨ７．０およびｐＨ１０．０にて帯状に生育し
、光沢のあるクリーム色の半透明なコロニーを形成する
。色素は生成しない。 Ｋ株：ｐＨ７．０にて帯状に生育し、光沢のある透明な
コロニーを形成する。色素は生成しない。ｐＨ１０．０
にて拡帯状に生育し、光沢のあるクリーム色のコロニー
を形成する。色素は生成しない。 Ｘ株：ｐＨ７．０および１０．０にて拡帯状に生育し、
光沢のあるクリーム色のコロニーを形成する。色素は生
成しない。 ３）肉汁液体培養： Ｙ、Ｐ、Ｋ、Ｘ株：ｐＨ７．０にていずれも生育するが
、菌膜は形成しない。 ｐＨ１０．０にていずれも生育が良好で、菌膜は形成し
ない。 ４）肉汁ゼラチン穿刺培養： Ｙ、Ｐ、Ｋ、Ｘ株：ｐＨ７．０にていずれも僅かに液化
する。 ｐＨ１０．０にていずれも液化する。 ５）リトマス・ミルク： Ｙ、Ｐ、Ｋ、Ｘ株：ｐＨ７．０にていずれも生育が非常
に悪い。 ｐＨ１０．０にていずれも生育する。 ミルクの凝固は見られない。培地がアルカリ性のため、
リトマスの変色は不明。 Ｃ、生理的性質〔１０）以外Ｙ、Ｐ、Ｋ、Ｘ株とも同じ
〕 １）硝酸塩の還元：陽性。 ２）脱窒反応：陰性。 ３）ＭＲテスト：陰性。 ４）ＶＰテスト：陰性。 ５）インドールの生成：陰性。 ６）硫化水素の生成：陰性。 ７）デンプンの加水分解：陽性。 ８）クエン酸の利用：Ｋｏｓｅｒの培地では利用しない
。Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎの培地では僅かに利用する。 ９）無機窒素源の利用：硝酸塩は利用しない。アンモニ
ウム塩は利用しない。 １０）色素の生成：Ｙ株は、水溶性の赤褐色の色素を菌
体外に生産する。Ｐ、Ｋ、Ｘ株は、色素を生産しない。 １１）ウレアーゼ：陽性。 １２）オキシダーゼ：陽性。 １３）カタラーゼ：陽性。 １４）生育の温度範囲：３３ないし３５℃付近（２０な
いし４７℃）が良好。 １５）生育のｐＨ範囲：１０．０付近（６．０ないし１
２．０）が良好。 １６）酸素に対する態度：好気性下でも嫌気性下でも生
育する。 １７）Ｏ−Ｆテスト：陰性。 １８）糖類から酸およびガスの生成：（＋；生成する
−；生成しない） Ｄ、その他の性質 １）塩化ナトリウムに対する耐性：いずれの株も１０％
ＮａＣｌ下で生育する。 ２）Ｙ株、Ｐ株、Ｋ株およびＸ株は、いずれも至適ｐＨ
が１０以上で洗浄剤成分共存下の高アルカリ条件におい
て優れた安定性を有し、尚かつ洗浄力の改善に寄与する
アルカリプロテアーゼを産生する。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12302185A JPS61280268A (ja) | 1985-06-06 | 1985-06-06 | アルカリプロテア−ゼ産生微生物 |
| US06/870,018 US4797362A (en) | 1985-06-06 | 1986-06-03 | Alkaline proteases and microorganisms producing same |
| CA000510910A CA1297821C (en) | 1985-06-06 | 1986-06-05 | Alkaline proteases, microorganisms producing same and detergents |
| DK268686A DK268686A (da) | 1985-06-06 | 1986-06-06 | Alkalisk protease, mikroorganisme og fremgangsmaade til fremstilling af samme, samt detergent indeholdende proteaser |
| EP86107708A EP0204342B1 (en) | 1985-06-06 | 1986-06-06 | Alkaline proteases, microorganisms producing same and detergents |
| DE8686107708T DE3683802D1 (de) | 1985-06-06 | 1986-06-06 | Alkalische proteasen, diese produzierende mikroorganismen und reinigungsmittel. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12302185A JPS61280268A (ja) | 1985-06-06 | 1985-06-06 | アルカリプロテア−ゼ産生微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61280268A true JPS61280268A (ja) | 1986-12-10 |
| JPH0379987B2 JPH0379987B2 (ja) | 1991-12-20 |
Family
ID=14850260
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12302185A Granted JPS61280268A (ja) | 1985-06-06 | 1985-06-06 | アルカリプロテア−ゼ産生微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61280268A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6455179A (en) * | 1987-08-27 | 1989-03-02 | Kao Corp | Production of isocitric dehydrogenase |
| EP2284251A1 (en) | 2002-03-22 | 2011-02-16 | Kao Corporation | Alkaline protease |
| US8309339B2 (en) | 2007-03-06 | 2012-11-13 | Kao Corporation | Alkaline protease |
| WO2013154201A2 (en) | 2012-04-10 | 2013-10-17 | Kao Corporation | Method for improving solubility of alkaline protease |
-
1985
- 1985-06-06 JP JP12302185A patent/JPS61280268A/ja active Granted
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6455179A (en) * | 1987-08-27 | 1989-03-02 | Kao Corp | Production of isocitric dehydrogenase |
| EP2284251A1 (en) | 2002-03-22 | 2011-02-16 | Kao Corporation | Alkaline protease |
| US8309339B2 (en) | 2007-03-06 | 2012-11-13 | Kao Corporation | Alkaline protease |
| WO2013154201A2 (en) | 2012-04-10 | 2013-10-17 | Kao Corporation | Method for improving solubility of alkaline protease |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0379987B2 (ja) | 1991-12-20 |
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