JPS61242584A - 微生物によるエタノ−ルの製造法 - Google Patents
微生物によるエタノ−ルの製造法Info
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- JPS61242584A JPS61242584A JP60085123A JP8512385A JPS61242584A JP S61242584 A JPS61242584 A JP S61242584A JP 60085123 A JP60085123 A JP 60085123A JP 8512385 A JP8512385 A JP 8512385A JP S61242584 A JPS61242584 A JP S61242584A
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- yeast
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［技術分野］
本発明は微生物による効率的なエタノールの製造法に関
するものである。
するものである。
［従来技術］
従来、実用化されている微生物によるエタノールの製造
法はエネルギー変換法としてみた場合、必ずしもエネル
ギー収支が良好とは言えず、また単位発酵槽容積あたり
の生産性も高（ない。このため、近年、生産性の向上及
び生産コストの低減を目的として新しい発酵技術の開発
が進められ、アルギン酸カルシウム、光硬化性ポリマー
などに酵母を包括固定し連続発酵に用いる固定化酵母法
と凝集性を有する酵母を用い菌体を自然沈降させ発酵槽
に再循環或いは次の発酵に使用する凝集性酵母法が高い
生産性を与え且つ生産コストを大ｒｌＪに低下させる方
法として注目を集めている。特に凝集性酵母を用いる方
法は既設の施設がそのまま使える点また操作も容易であ
る点から実用性の高い方法として注目されている。
法はエネルギー変換法としてみた場合、必ずしもエネル
ギー収支が良好とは言えず、また単位発酵槽容積あたり
の生産性も高（ない。このため、近年、生産性の向上及
び生産コストの低減を目的として新しい発酵技術の開発
が進められ、アルギン酸カルシウム、光硬化性ポリマー
などに酵母を包括固定し連続発酵に用いる固定化酵母法
と凝集性を有する酵母を用い菌体を自然沈降させ発酵槽
に再循環或いは次の発酵に使用する凝集性酵母法が高い
生産性を与え且つ生産コストを大ｒｌＪに低下させる方
法として注目を集めている。特に凝集性酵母を用いる方
法は既設の施設がそのまま使える点また操作も容易であ
る点から実用性の高い方法として注目されている。
しかしながらケーンジュース等の実用原料を用いたこれ
までの報告によれは、その生産性は１０〜１６ ！ ／
ｌ ／ ｈであり、固定化酵母法による生産性と同等
かやや低いものであった。
までの報告によれは、その生産性は１０〜１６ ！ ／
ｌ ／ ｈであり、固定化酵母法による生産性と同等
かやや低いものであった。
［目 的］
そこで、本発明者らは、エタノール発酵の生産性向上に
は基本的に、優良酵母菌の選択が重要であるとの観点か
ら、広く、海外及び国内の土壌、果皮、発酵食品等より
エタノール発酵能の優れた酵母の分離を進めるとともに
得られた酵母菌の各種変異処理により、なお優秀な酵母
の分離、選択を進めてきたところ、既知の凝集酵母に較
べ高い発酵能を有する凝集性菌株を得ることができた。
は基本的に、優良酵母菌の選択が重要であるとの観点か
ら、広く、海外及び国内の土壌、果皮、発酵食品等より
エタノール発酵能の優れた酵母の分離を進めるとともに
得られた酵母菌の各種変異処理により、なお優秀な酵母
の分離、選択を進めてきたところ、既知の凝集酵母に較
べ高い発酵能を有する凝集性菌株を得ることができた。
そして、本酵母菌株を用いて菌体再循環連続エタノール
発酵を試みたところ、従来報告されていたマイセス・セ
ルビシエ Ｉ Ｒ−２株ｔ［養シ’Ｈ’ｉ・培養物よ
りエタノールを採取することを特徴とする微生物による
エタノールの製造法に関するものである。
発酵を試みたところ、従来報告されていたマイセス・セ
ルビシエ Ｉ Ｒ−２株ｔ［養シ’Ｈ’ｉ・培養物よ
りエタノールを採取することを特徴とする微生物による
エタノールの製造法に関するものである。
［構 成］
以下、本発明を具体的に説明する。
本発明に用いられるサツカロマイセス・セルビシエ Ｉ
Ｒ−２株の菌学的性質は以下に示すとおりである。
Ｒ−２株の菌学的性質は以下に示すとおりである。
蘭学的性質
Ａ、細胞及びコロニーの形態
グルコース（２％）イーストエキス（０，５％）ペプト
ン（１％）の液体培地で２５℃３日間培養後のＲｔｒ＋
胞の形態は楕円〜長円形で細１１υ径は長径が４．０〜
９，０μｍ１短径が３．０〜５．０μｍであった。
ン（１％）の液体培地で２５℃３日間培養後のＲｔｒ＋
胞の形態は楕円〜長円形で細１１υ径は長径が４．０〜
９，０μｍ１短径が３．０〜５．０μｍであった。
細胞は１個または２個つらなって存在した。
バクトイーストモルフォロジー寒天培地上で４日間及び
３週間培養後のコロニーは貨白色、表面及び周囲の滑ら
かな状態にあった。また同じ培地上でのスライドカルチ
ャー３週間後の顕微鏡観察の結果、菌糸及び偽菌糸の形
成は認められなかった。Ｆｏｗｅｌｌ酢酸ナトリウム培
地上で３日後子のう胞子の形成が観察された。子のう中
の胞子数は１〜４個であり胞子はほぼ球形でありまたそ
の表面は滑らかであった。
３週間培養後のコロニーは貨白色、表面及び周囲の滑ら
かな状態にあった。また同じ培地上でのスライドカルチ
ャー３週間後の顕微鏡観察の結果、菌糸及び偽菌糸の形
成は認められなかった。Ｆｏｗｅｌｌ酢酸ナトリウム培
地上で３日後子のう胞子の形成が観察された。子のう中
の胞子数は１〜４個であり胞子はほぼ球形でありまたそ
の表面は滑らかであった。
Ｂ、生理的諸性質
ａ）各種炭素源の発酵性（ダーラム管法による）発酵可
能糖類：Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース。
能糖類：Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース。
マルトース、シュークロース、ラフィノース１／３非発
酵性糖類：α−α−トレハロース、メリビオース。
酵性糖類：α−α−トレハロース、メリビオース。
ラクトース、セロビオース、メレジトース、メチルーα
−Ｄ−グルコシド、イヌリン、可溶性でんぷんｂ）各種
炭素源の資化性 資化可能化合物：Ｄ−グルコ−・ス、Ｄ−ガラクトース
、シュークロース、マルトース、ラフィノース、エタノ
ール 資〔ヒ不能化合物：Ｉ７−ソルポース、セロビオース、
（１−α〜トレハロース、ラクトース、メリビオース、
メレジトース、Ｄ−リボース、 Ｉ）−キシロース、Ｌ
−アラビノース、Ｄ−アラビノース。
−Ｄ−グルコシド、イヌリン、可溶性でんぷんｂ）各種
炭素源の資化性 資化可能化合物：Ｄ−グルコ−・ス、Ｄ−ガラクトース
、シュークロース、マルトース、ラフィノース、エタノ
ール 資〔ヒ不能化合物：Ｉ７−ソルポース、セロビオース、
（１−α〜トレハロース、ラクトース、メリビオース、
メレジトース、Ｄ−リボース、 Ｉ）−キシロース、Ｌ
−アラビノース、Ｄ−アラビノース。
Ｌ−ラムノース、可溶性でんぷん、イヌリン。
クリセロ−ルアエリスリトール、リビトール。
■）−グルシトール、Ｄ−マニトール、 乳酸、
コハク酸、クエン酸 Ｃ）窒素源資化性テスト 資化不能化合物：硝酸カリウム、亜硝酸ナトリウム、−
塩酸エチルアミン、二塩酸カダベリン。
コハク酸、クエン酸 Ｃ）窒素源資化性テスト 資化不能化合物：硝酸カリウム、亜硝酸ナトリウム、−
塩酸エチルアミン、二塩酸カダベリン。
Ｌ−リジン
ｄ）アルブチン分解性 陰性
４２℃ 陽性
ｇ）５（１１５％グルコースイーストエキス寒天培地上
での−６＝ 生育 陰性 ｈ） １００ ｐｐｍシクロヘキシミド培地での生育
陰性以上の菌学的性質に基づき、ｍθｙθａｓｔｓ
ａｔａｘｏｎｏｍｉｃ ５ｔｕｄｙ第３版（１９８４
，Ｅｌａａｖｉｅｒ ５ｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅ
ｒｓ Ｂ、 Ｖ、−Ａｍｓｔｅｒｄａｍ ）及びＪ、Ａ
、 Ｂａｒｎｅｔｔ。
での−６＝ 生育 陰性 ｈ） １００ ｐｐｍシクロヘキシミド培地での生育
陰性以上の菌学的性質に基づき、ｍθｙθａｓｔｓ
ａｔａｘｏｎｏｍｉｃ ５ｔｕｄｙ第３版（１９８４
，Ｅｌａａｖｉｅｒ ５ｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅ
ｒｓ Ｂ、 Ｖ、−Ａｍｓｔｅｒｄａｍ ）及びＪ、Ａ
、 Ｂａｒｎｅｔｔ。
Ｒ、Ｗ、 Ｐａｙｎｅ ＆ Ｄ、 Ｙａｒｒｏｗ著ＹＥ
ＡＳＴＳ ： Ｃｈａｒａｃｔｅｒ −１ｓｔｉｃｓ
ａｎｄ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ第１版（１９８
３ＣａｍｂｒｉｄｇｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ？ｒｅｓ
ｓ） により検索したところ、本菌株はサツカロマイ
セス・セルビシエと認められ、サツカロマイセスφセル
ビシエ ＩＲ−２株と命名し、微工研条寄第２ｔＶ 号
として寄託されている。
ＡＳＴＳ ： Ｃｈａｒａｃｔｅｒ −１ｓｔｉｃｓ
ａｎｄ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ第１版（１９８
３ＣａｍｂｒｉｄｇｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ？ｒｅｓ
ｓ） により検索したところ、本菌株はサツカロマイ
セス・セルビシエと認められ、サツカロマイセスφセル
ビシエ ＩＲ−２株と命名し、微工研条寄第２ｔＶ 号
として寄託されている。
本発明に発酵原料として好ましく用いられる炭水化物と
しては砂糖きび汁（ケーンジュース）、廃糖蜜、でんぷ
ん糖化液、セルロース糖化液が挙げられるが、でんぷん
質原料を用いる場合まずアミラーゼなどの酵素で糖化し
た後、本発明の酵母を添加してもよいが、原料に本発明
の酵母とアミラーゼなどの酵素を同時に添加して発酵さ
せてもよい。
しては砂糖きび汁（ケーンジュース）、廃糖蜜、でんぷ
ん糖化液、セルロース糖化液が挙げられるが、でんぷん
質原料を用いる場合まずアミラーゼなどの酵素で糖化し
た後、本発明の酵母を添加してもよいが、原料に本発明
の酵母とアミラーゼなどの酵素を同時に添加して発酵さ
せてもよい。
６一
また、栄養源としてはリン酸−カリウム、ＦＪｉ猷マグ
ネシウム等の無１幾塩類、及びイーストエキス、ポリペ
プトンなどの有機栄養源を添加してもよい。
ネシウム等の無１幾塩類、及びイーストエキス、ポリペ
プトンなどの有機栄養源を添加してもよい。
窒素源としては硫安、尿素などの添加が望ましい。
培養温度は１５°Ｃから４２℃の範囲で望ましくは２８
℃から３５℃の範１１で行なう。培養液のｐＥ−１は、
２．５から７．０の範囲で、望ましくは３．５から６．
０の間で行なう。
℃から３５℃の範１１で行なう。培養液のｐＥ−１は、
２．５から７．０の範囲で、望ましくは３．５から６．
０の間で行なう。
これらの培養源を用いたエタノール発酵は通常の発酵槽
による回分発酵及び連続発酵でもよく、また後述の如き
基型の発酵槽を用いてもよい。回分法においては、発酵
の終了後短時間ただ静置するだけで容易に本酵母は沈殿
シ、密度の高いスラリーを形成するため短時間で清澄な
発酵液を得ることができ、また発酵槽底部に濃厚な酵母
スラリーを得ることができる。従って、上層発酵液をぬ
きとり、原料液を加えた後、直ちに高い濃度の酵母菌体
により次の発酵工程に入ることができる。
による回分発酵及び連続発酵でもよく、また後述の如き
基型の発酵槽を用いてもよい。回分法においては、発酵
の終了後短時間ただ静置するだけで容易に本酵母は沈殿
シ、密度の高いスラリーを形成するため短時間で清澄な
発酵液を得ることができ、また発酵槽底部に濃厚な酵母
スラリーを得ることができる。従って、上層発酵液をぬ
きとり、原料液を加えた後、直ちに高い濃度の酵母菌体
により次の発酵工程に入ることができる。
こうした回分発酵を（り返すことで菌体濃度も増大する
ため、単位時間、単位発酵槽容量あたりのエタノール発
酵速度が飛ｖｕ的に高（なる。また酵母の沈降分離に遠
心分離等の余分な工程がいらないため、エネルギーの節
約にもなる。また連続発酵法においては酵母の凝集沈降
性が優れているので、小型で簡単な沈降槽により容易に
発酵液より菌を分離することができ、これを連続的に発
酵槽へ返送することで、高い菌体濃度が維持されるため
、高いアルコール生産性が得られる。
ため、単位時間、単位発酵槽容量あたりのエタノール発
酵速度が飛ｖｕ的に高（なる。また酵母の沈降分離に遠
心分離等の余分な工程がいらないため、エネルギーの節
約にもなる。また連続発酵法においては酵母の凝集沈降
性が優れているので、小型で簡単な沈降槽により容易に
発酵液より菌を分離することができ、これを連続的に発
酵槽へ返送することで、高い菌体濃度が維持されるため
、高いアルコール生産性が得られる。
ここで参考のため本酵母の凝集状態における発酵能を他
の酵母のそれと比較した結果を表１に示す。
の酵母のそれと比較した結果を表１に示す。
これは回分発酵終了時になお少量の培地を加え、エタノ
ール発酵に伴ない生成する炭酸ガス量を計測して求゛め
たものである。発酵能は単位菌体量あたりに換算し、相
対値で示した。凝集能は、発酵終了液をよく振とうした
後メスシリンダーへ移し、１分後の菌の沈殿層の高さを
容量百分率で示したものである。この値の小さい程、凝
集性がよ（、沈降速度が速いことになる。
ール発酵に伴ない生成する炭酸ガス量を計測して求゛め
たものである。発酵能は単位菌体量あたりに換算し、相
対値で示した。凝集能は、発酵終了液をよく振とうした
後メスシリンダーへ移し、１分後の菌の沈殿層の高さを
容量百分率で示したものである。この値の小さい程、凝
集性がよ（、沈降速度が速いことになる。
以下に本菌株ＴＲ−２を用いたエタノール発酵の実施例
を示し、本発明をより具体的に説明する。
を示し、本発明をより具体的に説明する。
なお実施例で用いた各棟の測定法は次のとおりである。
（１）エタノール：Ｃ１度
発酵液を２０，０ＯＯＧ５分間冷却遠心機にて遠心分離
後、」ユ清を蒸留水にて１００倍に希釈し、ガスクロマ
トグラフィーにより測定した。使用カラムは長さ２，１
雇で内径３−のガラス製であり、ポリエチレングリコー
ル６０００をコーティングしたユニボートＲ（ガスクロ
工業社製）を充てんし用いた。カラム温度は１００’（
：”、試料性入部温度１４０”Ｃ，キャリヤガスは窒素
ガスを用い、５０ ｍ／ ／ ｍｉｎで通気した。
後、」ユ清を蒸留水にて１００倍に希釈し、ガスクロマ
トグラフィーにより測定した。使用カラムは長さ２，１
雇で内径３−のガラス製であり、ポリエチレングリコー
ル６０００をコーティングしたユニボートＲ（ガスクロ
工業社製）を充てんし用いた。カラム温度は１００’（
：”、試料性入部温度１４０”Ｃ，キャリヤガスは窒素
ガスを用い、５０ ｍ／ ／ ｍｉｎで通気した。
（２）糖濃度
発酵液を（１，１と同様に遠心分離した上清を１０％Ｈ
ＣＩによりｐＨ２，０以下とし、３０分間湯浴上で加水
分解した後一般に用いられているソモギー変法により測
定した。
ＣＩによりｐＨ２，０以下とし、３０分間湯浴上で加水
分解した後一般に用いられているソモギー変法により測
定した。
（３） フラクトース濃度
高速液体クロマトグラフィーにより測定した。
使用カラムは、５ＩＬ−ＮＨ２（日本分光社製）をつめ
た長さ２５０ｍ＋＋＋内径４．６咽のステンレスカラム
で温度は５０°Ｃに保った。溶離液は、アセトントリル
（７５％） ＋０．０１５ Ｍ ’ＫＨ２ＰＣ）４ （
２５％）を用い、１．０ｍｌ／ｍｉｎで通液した。
た長さ２５０ｍ＋＋＋内径４．６咽のステンレスカラム
で温度は５０°Ｃに保った。溶離液は、アセトントリル
（７５％） ＋０．０１５ Ｍ ’ＫＨ２ＰＣ）４ （
２５％）を用い、１．０ｍｌ／ｍｉｎで通液した。
（４）菌体濃度
発酵液を目盛つき遠心分離用チューブにとり、３５００
ｒｐｍで１０分間遠心分離後の沈殿層の容積図１に示
す第１塔１第２塔２及び沈降槽３よりなる二連′ｔＴ型
発酵システｌ、を用い、菌イ４再循環連続エタノール発
酵を行なった。第１塔及び第２塔の実効容積はそれぞれ
２２５ ｍｔであり、沈降槽の実効容積は２５ｒｎ！、
であった。用いた培地組成は、１ｅ容あたり台湾紅糖（
非精製糖）１４０ｙ（塩酸加水分解後の単糖濃度とじて
１２５９）、リン酸−カリウム０．２５’、硫酸マグネ
シウム７水塩０．１９゜塩化カルシウム２水塩０．１ｇ
、硫安１．５ｇであった。
ｒｐｍで１０分間遠心分離後の沈殿層の容積図１に示
す第１塔１第２塔２及び沈降槽３よりなる二連′ｔＴ型
発酵システｌ、を用い、菌イ４再循環連続エタノール発
酵を行なった。第１塔及び第２塔の実効容積はそれぞれ
２２５ ｍｔであり、沈降槽の実効容積は２５ｒｎ！、
であった。用いた培地組成は、１ｅ容あたり台湾紅糖（
非精製糖）１４０ｙ（塩酸加水分解後の単糖濃度とじて
１２５９）、リン酸−カリウム０．２５’、硫酸マグネ
シウム７水塩０．１９゜塩化カルシウム２水塩０．１ｇ
、硫安１．５ｇであった。
オートクレーブで１２０℃１５分間滅菌処理した本培地
を培地ボトル４より培地ポンプ５により連続的に第１塔
１に供給した。第１塔上部にｐＨセンター１０を取付け
、ｐＨ制御器１１とアルカリ液供給ポンプ１２により自
動的に第１塔内の培養液ｐＨを３．９に制御した。発酵
槽内温度は塔の外側ジャケットに温水を通水して３２．
５°Ｃに制御した。
を培地ボトル４より培地ポンプ５により連続的に第１塔
１に供給した。第１塔上部にｐＨセンター１０を取付け
、ｐＨ制御器１１とアルカリ液供給ポンプ１２により自
動的に第１塔内の培養液ｐＨを３．９に制御した。発酵
槽内温度は塔の外側ジャケットに温水を通水して３２．
５°Ｃに制御した。
本システムにあらかじめグルコース１０％、イーストエ
キス３％、ポリペプトン５％の培地で培養したサツ力ロ
ミセスセルビシエＩＲ−２株（ＦＥＲＭＢＰ−、？信号
）を乾燥菌体量として５０９／ｌ加えた後２８４ｍ／／
時の流量で上記台湾紅糖の培地を供給させながら連続発
酵を行なった。連続発酵開始後、第１塔下部よりエアポ
ンプ９により空気を８０−７分でまた第２塔２上部より
出るガス（主としてエタノール発酵に伴ない生成する炭
酸ガス）の一部を３００ｍ／／分でガスリサイクルポン
プ８により通気した。第１塔１中の培養液は通気された
ガスとともに第２塔下部へ連続的に流入する。第２塔２
上部でガスと分離した発酵液は沈降ｔｉ！Ｖ３に流入し
、ここで酵母は直ちに沈降し、底部に高濃度の菌体スラ
リーを形成する。上層に形成された清澄な発酵終了液は
発酵液抜出しポンプ６により排出され次の蒸留工程（本
図には示されていない）に移送される。沈降槽３下部に
たまった高濃度の酵母菌体スラリーは菌体返送ポンプ７
により第１塔下部へ返送される。
キス３％、ポリペプトン５％の培地で培養したサツ力ロ
ミセスセルビシエＩＲ−２株（ＦＥＲＭＢＰ−、？信号
）を乾燥菌体量として５０９／ｌ加えた後２８４ｍ／／
時の流量で上記台湾紅糖の培地を供給させながら連続発
酵を行なった。連続発酵開始後、第１塔下部よりエアポ
ンプ９により空気を８０−７分でまた第２塔２上部より
出るガス（主としてエタノール発酵に伴ない生成する炭
酸ガス）の一部を３００ｍ／／分でガスリサイクルポン
プ８により通気した。第１塔１中の培養液は通気された
ガスとともに第２塔下部へ連続的に流入する。第２塔２
上部でガスと分離した発酵液は沈降ｔｉ！Ｖ３に流入し
、ここで酵母は直ちに沈降し、底部に高濃度の菌体スラ
リーを形成する。上層に形成された清澄な発酵終了液は
発酵液抜出しポンプ６により排出され次の蒸留工程（本
図には示されていない）に移送される。沈降槽３下部に
たまった高濃度の酵母菌体スラリーは菌体返送ポンプ７
により第１塔下部へ返送される。
こうした方法により約２週間にわたり安定してエタノー
ル濃度５４．６ｆｊ／ｌ、残糖４．３９／Ｉｃう率は理
論値の約９０％であった。また菌体の湿潤容量百分率は
３３％に達していた。なお菌体の返送速度は約２１！／
時で行なった。これは返送比（返送速度／培地供給速度
）約７の条件であった。
ル濃度５４．６ｆｊ／ｌ、残糖４．３９／Ｉｃう率は理
論値の約９０％であった。また菌体の湿潤容量百分率は
３３％に達していた。なお菌体の返送速度は約２１！／
時で行なった。これは返送比（返送速度／培地供給速度
）約７の条件であった。
実施例２
実施例１と同様の装置を用い−また同様の方法でサツ力
ロマイセスセルビシエ ＩＲ〜２株を培養し、培地中の
紅糖濃度をかえて、連続エタノール発酵を行なった。実
施例１の結果を含めて表２に結果を示す。培地供給速度
は各条件において、糖の利用率が９８％以上となる範囲
で可能な限り高い値に設定した。また菌体返送比は、各
条件毎に検討し、より高い生産性が得られるよう設定し
た。なお、他のＩ）Ｈ、温度等は実施例１と同じである
。
ロマイセスセルビシエ ＩＲ〜２株を培養し、培地中の
紅糖濃度をかえて、連続エタノール発酵を行なった。実
施例１の結果を含めて表２に結果を示す。培地供給速度
は各条件において、糖の利用率が９８％以上となる範囲
で可能な限り高い値に設定した。また菌体返送比は、各
条件毎に検討し、より高い生産性が得られるよう設定し
た。なお、他のＩ）Ｈ、温度等は実施例１と同じである
。
び培地を用いた他の文献例と比較すると２〜３倍の生産
性に相当することがわかる。例えばケーンジュースを用
いた例（Ｐｒｉｎｃｅら： Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇ
ｙ １ｅｔｔｅｒ誌Ｖ０１．４Ｐ、４６９〜 ）では
約’１１ｆｌ／ｌのエタノールを生産性１１’／／ｌ／
ｈで、また約８２ ｆ ／ Ｉ！のエタノールを約５ｐ
７ｔ７ｈで生産しており、ビー発酵を試みたところ、約
６２９ ／ ｆのエタノールを生産性１９Ｐ／Ｖ／ｈで
生産した。
性に相当することがわかる。例えばケーンジュースを用
いた例（Ｐｒｉｎｃｅら： Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇ
ｙ １ｅｔｔｅｒ誌Ｖ０１．４Ｐ、４６９〜 ）では
約’１１ｆｌ／ｌのエタノールを生産性１１’／／ｌ／
ｈで、また約８２ ｆ ／ Ｉ！のエタノールを約５ｐ
７ｔ７ｈで生産しており、ビー発酵を試みたところ、約
６２９ ／ ｆのエタノールを生産性１９Ｐ／Ｖ／ｈで
生産した。
またアルギン酸カルシウムおよび光硬化性ポリマーに酵
母を固定化し連続エタノール発酵に用いた例（新燃料油
開発技術研究組合昭和５９年度公開年報 Ｐ、１３２，
１３３，１４５）と比較してもＩＲ２株で得られた表２
に示す生産性は１．５倍以上である。
母を固定化し連続エタノール発酵に用いた例（新燃料油
開発技術研究組合昭和５９年度公開年報 Ｐ、１３２，
１３３，１４５）と比較してもＩＲ２株で得られた表２
に示す生産性は１．５倍以上である。
また他の例（Ｌｉｍｔｏｎｇら：Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、
Ｖｏｌ、Ｃｉ２ Ｐ 、 ５５−６２）ではイーストエ
キス６９／ｌ、 リン酸−カリウム８９／ｌ、硫酸マ
グネシウム７水塩２ ｆ／／ｌ、硫安４ ｆＪ／ｌを含
むクルコース合成培地（グルコース濃＆ｌ ５０ ｆ／
ｌ）を用い、彼らの分離したサツカロミセス・セルビシ
エＴＪＩ株を使用した菌体リサイクル連続発酵ｔ 、’：１．湘ヨ１１） ６７．８ ｆ／／ ｌ （ＩＪ
）ｘり／ −／１／を生産性２Ｃ）’Ｉ／ｌ／ｈ・１ソ
生産している。（同文献Ｐ、５８）この結果を本！１ もかかわらずＦｍｔｏｎｇ らの値を約４０％以上上回
っていることがわかる。
ＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、
Ｖｏｌ、Ｃｉ２ Ｐ 、 ５５−６２）ではイーストエ
キス６９／ｌ、 リン酸−カリウム８９／ｌ、硫酸マ
グネシウム７水塩２ ｆ／／ｌ、硫安４ ｆＪ／ｌを含
むクルコース合成培地（グルコース濃＆ｌ ５０ ｆ／
ｌ）を用い、彼らの分離したサツカロミセス・セルビシ
エＴＪＩ株を使用した菌体リサイクル連続発酵ｔ 、’：１．湘ヨ１１） ６７．８ ｆ／／ ｌ （ＩＪ
）ｘり／ −／１／を生産性２Ｃ）’Ｉ／ｌ／ｈ・１ソ
生産している。（同文献Ｐ、５８）この結果を本！１ もかかわらずＦｍｔｏｎｇ らの値を約４０％以上上回
っていることがわかる。
以上の結果から本酵母菌株ＩＲ−２を用いるエタノール
発酵の生産性が従来優れた生産性を与えると報告された
他の例を大幅に上回るものであることが示される。
発酵の生産性が従来優れた生産性を与えると報告された
他の例を大幅に上回るものであることが示される。
実施例３
ＩＲ−２菌株を用い回分発酵の（り返し実験を行なった
。培地は台湾紅糖２０２９／ｌｃ塩酸分解後の全糖濃度
１８１９／ｌ、このうち発酵性糖濃度１７７９／ｌ）、
リン酸１カリウム０．２９７１゜硫酸マグネシウム７水
塩０．１９／ｅ、塩化カルシウム２水塩０．１ｆ／／ｌ
を含むものを用いた。培地行ない生成する炭酸ガスをガ
スホルダーに補集すトン（０，５９６）の培地で前培養
した後、三角フラスコに接種し培養を開始した。発酵終
了後２０分間撹拌を停止し酵母を凝集沈降させた後、上
層の発酵液を全液量の３／４ぬきとり、同量の新鮮培地
を添加しまた尿素を１９／ｌ添加した後、撹拌を開始し
、次の回分発酵を行なった。こうしたくり返し回分発酵
を１０回行なった結果、１〜６回目才では酵母菌濃度が
増大し、発酵所用時間も短縮されていき、７回目以降は
醇１８菌濃度は約湿潤容量百分率で１３％と一定となり
発酵所用時間は約５時間となった。最終エタノール濃度
は８２〜８３（１／ｌに達しており、沈降分離時間２０
分間を入れて計算した発酵槽内金液量当りのエタノール
生産性は、約１１．５ （１／ｌ／ｈに達した。この値
は現在広くブラジル国でケーンジュースや廃糖みついる
。即ち、本ＩＲ−２菌株を用いるくり返し回発酵槽をよ
り小型化することが可能であり、省エネルギー省コスト
のすぐれた方法であるといえる。
。培地は台湾紅糖２０２９／ｌｃ塩酸分解後の全糖濃度
１８１９／ｌ、このうち発酵性糖濃度１７７９／ｌ）、
リン酸１カリウム０．２９７１゜硫酸マグネシウム７水
塩０．１９／ｅ、塩化カルシウム２水塩０．１ｆ／／ｌ
を含むものを用いた。培地行ない生成する炭酸ガスをガ
スホルダーに補集すトン（０，５９６）の培地で前培養
した後、三角フラスコに接種し培養を開始した。発酵終
了後２０分間撹拌を停止し酵母を凝集沈降させた後、上
層の発酵液を全液量の３／４ぬきとり、同量の新鮮培地
を添加しまた尿素を１９／ｌ添加した後、撹拌を開始し
、次の回分発酵を行なった。こうしたくり返し回分発酵
を１０回行なった結果、１〜６回目才では酵母菌濃度が
増大し、発酵所用時間も短縮されていき、７回目以降は
醇１８菌濃度は約湿潤容量百分率で１３％と一定となり
発酵所用時間は約５時間となった。最終エタノール濃度
は８２〜８３（１／ｌに達しており、沈降分離時間２０
分間を入れて計算した発酵槽内金液量当りのエタノール
生産性は、約１１．５ （１／ｌ／ｈに達した。この値
は現在広くブラジル国でケーンジュースや廃糖みついる
。即ち、本ＩＲ−２菌株を用いるくり返し回発酵槽をよ
り小型化することが可能であり、省エネルギー省コスト
のすぐれた方法であるといえる。
［発明の効果］
図はエタノールの連続発酵装置のフロシートを、、、、
：（、Ｊイクルポンプ、９はエアーポンプ、１０はｐＨ
セン、−一、１１はｐＨ制御器、１２はアルカリ液供給
ボン１″： 、プをそれぞれ示す。 、Ｉ
：（、Ｊイクルポンプ、９はエアーポンプ、１０はｐＨ
セン、−一、１１はｐＨ制御器、１２はアルカリ液供給
ボン１″： 、プをそれぞれ示す。 、Ｉ
Claims (1)
- サッカロマイセス属セルビシエ ＩＲ−２株を培養して
培養物よりエタノールを採取することを特徴とする微生
物によるエタノールの製造法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60085123A JPS61242584A (ja) | 1985-04-20 | 1985-04-20 | 微生物によるエタノ−ルの製造法 |
| PH33677A PH23649A (en) | 1985-04-20 | 1986-04-18 | Method for production of ethanol with microorganism |
| BR8602552A BR8602552A (pt) | 1985-04-20 | 1986-04-22 | Metodo de producao de etanol com microorganismo |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60085123A JPS61242584A (ja) | 1985-04-20 | 1985-04-20 | 微生物によるエタノ−ルの製造法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61170297A Division JPS6265679A (ja) | 1986-07-19 | 1986-07-19 | 新規なサツカロマイセス・セルビシエｉｒ−２株 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61242584A true JPS61242584A (ja) | 1986-10-28 |
| JPS635079B2 JPS635079B2 (ja) | 1988-02-02 |
Family
ID=13849855
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60085123A Granted JPS61242584A (ja) | 1985-04-20 | 1985-04-20 | 微生物によるエタノ−ルの製造法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61242584A (ja) |
| BR (1) | BR8602552A (ja) |
| PH (1) | PH23649A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63198989A (ja) * | 1987-01-16 | 1988-08-17 | ソシエテ デ プロデユイ ネツスル ソシエテ アノニム | 連続式アルコール生産方法および装置 |
| JPH03164188A (ja) * | 1988-09-30 | 1991-07-16 | Sanou Techno Insuteichiyuuto Kk | 凝集性酵母を用い遊離細胞及び固定化細胞によるエタノールの製造法 |
| JP2008501348A (ja) * | 2004-06-08 | 2008-01-24 | マイクロバイオジェン プロプライエタリィ リミティッド | キシロースで生育する非組換えサッカロマイセス株 |
-
1985
- 1985-04-20 JP JP60085123A patent/JPS61242584A/ja active Granted
-
1986
- 1986-04-18 PH PH33677A patent/PH23649A/en unknown
- 1986-04-22 BR BR8602552A patent/BR8602552A/pt not_active IP Right Cessation
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63198989A (ja) * | 1987-01-16 | 1988-08-17 | ソシエテ デ プロデユイ ネツスル ソシエテ アノニム | 連続式アルコール生産方法および装置 |
| JPH0560351B2 (ja) * | 1987-01-16 | 1993-09-02 | Nestle Sa | |
| JPH03164188A (ja) * | 1988-09-30 | 1991-07-16 | Sanou Techno Insuteichiyuuto Kk | 凝集性酵母を用い遊離細胞及び固定化細胞によるエタノールの製造法 |
| JP2008501348A (ja) * | 2004-06-08 | 2008-01-24 | マイクロバイオジェン プロプライエタリィ リミティッド | キシロースで生育する非組換えサッカロマイセス株 |
| US8735138B2 (en) | 2004-06-08 | 2014-05-27 | Microbiogen Pty Ltd | Non-recombinant Saccharomyces strains that grow on xylose |
| US9249419B2 (en) | 2004-06-08 | 2016-02-02 | Microbiogen Pty Ltd. | Non-recombinant saccharomyces strains that grow on xylose |
| US9556444B2 (en) | 2004-06-08 | 2017-01-31 | Microbiogen Pty Ltd. | Non-recombinant saccharomyces strains that grow on xylose |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PH23649A (en) | 1989-09-27 |
| BR8602552A (pt) | 1987-02-03 |
| JPS635079B2 (ja) | 1988-02-02 |
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |