JPS6265679A - 新規なサツカロマイセス・セルビシエｉｒ−２株 - Google Patents
新規なサツカロマイセス・セルビシエｉｒ−２株Info
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- JPS6265679A JPS6265679A JP61170297A JP17029786A JPS6265679A JP S6265679 A JPS6265679 A JP S6265679A JP 61170297 A JP61170297 A JP 61170297A JP 17029786 A JP17029786 A JP 17029786A JP S6265679 A JPS6265679 A JP S6265679A
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- JP
- Japan
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- fermentation
- strain
- ethanol
- yeast
- productivity
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- Granted
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- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
ルギー変換法としてみた場合、必ずしもエネルギー収支
が良好とは言λ、ず、また単位発酵槽容積あたりの生産
も高くない。このため、近年、生産性の向上及び生産コ
ストの低減を目的として新しい発酵技術の開発が進めら
れ、アルギン酸カルシウム、光硬化性ポリマーなどに酵
母を包括固定し連続発酵に用いる固定化酵母法と凝集性
を有する酵母を用い菌体を自然沈降させ発酵槽に再循環
或い容易である点から実用性の高い方法として注目され
てしくる。
が良好とは言λ、ず、また単位発酵槽容積あたりの生産
も高くない。このため、近年、生産性の向上及び生産コ
ストの低減を目的として新しい発酵技術の開発が進めら
れ、アルギン酸カルシウム、光硬化性ポリマーなどに酵
母を包括固定し連続発酵に用いる固定化酵母法と凝集性
を有する酵母を用い菌体を自然沈降させ発酵槽に再循環
或い容易である点から実用性の高い方法として注目され
てしくる。
しかしながらケーンジュース等の実用原料を用いたこれ
までの報告によれば、その生産性はｌＯ〜１６ｇ／Ｑ／
ｈであり、固定化酵母法による生産性と同等かやや低い
ものであった。
までの報告によれば、その生産性はｌＯ〜１６ｇ／Ｑ／
ｈであり、固定化酵母法による生産性と同等かやや低い
ものであった。
そこで、本発明者らは、エタノール発酵の生産性向上に
は基本的に、優良酵母菌の選択が重要であるとの観点か
ら、広く、海外及び国内の土壌、果皮、発酵食品等より
エタノール発酵能の優れた酵母の分離を進めるとともに
得られた酵母菌の各種変異処理により、なお優秀な酵母
の分離、選択を進めてきたところ、既知の凝集酵母に較
べて高い発酵能を有する凝集性菌株を得ることができた
。
は基本的に、優良酵母菌の選択が重要であるとの観点か
ら、広く、海外及び国内の土壌、果皮、発酵食品等より
エタノール発酵能の優れた酵母の分離を進めるとともに
得られた酵母菌の各種変異処理により、なお優秀な酵母
の分離、選択を進めてきたところ、既知の凝集酵母に較
べて高い発酵能を有する凝集性菌株を得ることができた
。
そして、本酵母菌株を用いて菌体再循環連続エタノール
発酵を試みたところ、従来報告されていたサツカロマイ
セス属などの凝集酵母を用いる連続発酵に較べて２ない
し３倍の高い生産性が得られのである。
発酵を試みたところ、従来報告されていたサツカロマイ
セス属などの凝集酵母を用いる連続発酵に較べて２ない
し３倍の高い生産性が得られのである。
以下、本発明を具体的に説明する。
本発明に用いられるサツカロマイセス・セルビシエ Ｉ
Ｒ−２株の菌学的性質は以下に示すとおりである。
Ｒ−２株の菌学的性質は以下に示すとおりである。
菌学的性質
Ａ、細胞及びコロニーの形態
グルコース（２％）、イーストエキス（０，５％）、ペ
プトン（１％）の液体培地で２５℃３日間培養後の細胞
の形態は楕円−長円形で細胞径は長径が４．０〜９．０
μ−、短径が３．０〜５．０μｍであった。細胞は１個
または２個上でのスクイ１カルチヤー３週間後の顕微鏡
観察の結果、菌糸及び偽菌糸の形成は認められなかった
。Ｆｏシａｌｌ酢酸ナトリウム培地上で３日後子のう胞
子の形成が観察された。子のう中の胞子数は１〜４個で
あり胞子はほぼ球形でありまたその表面は滑らかであっ
た。
プトン（１％）の液体培地で２５℃３日間培養後の細胞
の形態は楕円−長円形で細胞径は長径が４．０〜９．０
μ−、短径が３．０〜５．０μｍであった。細胞は１個
または２個上でのスクイ１カルチヤー３週間後の顕微鏡
観察の結果、菌糸及び偽菌糸の形成は認められなかった
。Ｆｏシａｌｌ酢酸ナトリウム培地上で３日後子のう胞
子の形成が観察された。子のう中の胞子数は１〜４個で
あり胞子はほぼ球形でありまたその表面は滑らかであっ
た。
Ｂ、生理的諸性質
ａ）各種炭素源の発酵性（ダーラム管法による）発酵可
能糖類：Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、マルトー
ス、シュークロース、ラフィノース１／３ 非発酵性糖類：α−α−トレハロース、メリビオース、
ラクトース、セロビオース、メレジトース、メチル−α
−Ｄ−グルコシド、イヌリン、可溶性でんぷん ｂ）各種炭素源の資化性 資化可能化合物：Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、
シュークロス、マルトース、ラフィノース、エタノール 資化不能化合物＝１、−ソルボース、セロビオイヌリン
、グリセロール、エリスリトール、リビトール、Ｄ−グ
ルシトール、Ｄ−マニトール、乳酸、コハク酸、クエン
酸 Ｃ）窒素源資化性テスト 資化不能化合物：硝酸カリウム、亜硝酸ナトリウム、−
塩酸エチルアミン、二塩酸カダベリン、Ｌ−リジン ｄ）アルブチン分解性 陰 性ｅ）ビタミ
ン不含培地での生育 陰 性ｆ）高温での生育
３７℃ 陽 性４２℃ 陽性 ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ５ｔｕｄｙ第３版（１９８４、Ｅ
ｌｓｅｖｉａｒ ５ｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ
Ｆｌ、Ｖ、−Ａｍｓｔｅｒｄａｍ）及びＪ、 Ａ、Ｂ
ａｒｎｅｔｔ。
能糖類：Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、マルトー
ス、シュークロース、ラフィノース１／３ 非発酵性糖類：α−α−トレハロース、メリビオース、
ラクトース、セロビオース、メレジトース、メチル−α
−Ｄ−グルコシド、イヌリン、可溶性でんぷん ｂ）各種炭素源の資化性 資化可能化合物：Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、
シュークロス、マルトース、ラフィノース、エタノール 資化不能化合物＝１、−ソルボース、セロビオイヌリン
、グリセロール、エリスリトール、リビトール、Ｄ−グ
ルシトール、Ｄ−マニトール、乳酸、コハク酸、クエン
酸 Ｃ）窒素源資化性テスト 資化不能化合物：硝酸カリウム、亜硝酸ナトリウム、−
塩酸エチルアミン、二塩酸カダベリン、Ｌ−リジン ｄ）アルブチン分解性 陰 性ｅ）ビタミ
ン不含培地での生育 陰 性ｆ）高温での生育
３７℃ 陽 性４２℃ 陽性 ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ５ｔｕｄｙ第３版（１９８４、Ｅ
ｌｓｅｖｉａｒ ５ｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ
Ｆｌ、Ｖ、−Ａｍｓｔｅｒｄａｍ）及びＪ、 Ａ、Ｂ
ａｒｎｅｔｔ。
Ｒ，Ｗ、 Ｐａｙｎｅ ＆ Ｄ、 Ｙａｒｒｏｔ１著’
／ＥＡＳＴＳ： Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎ
ｄ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ第１版（１９８３Ｃ
ａｍｂｒｉｄｇｅ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ）
により検索したとろ、本菌株はサツカロマイセス・セル
ビシエと認められ、サツカロマイセス・セルビシエ Ｉ
Ｒ−２株と命名し、微工研条寄第７５４号として寄託さ
れている。
／ＥＡＳＴＳ： Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎ
ｄ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ第１版（１９８３Ｃ
ａｍｂｒｉｄｇｅ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ）
により検索したとろ、本菌株はサツカロマイセス・セル
ビシエと認められ、サツカロマイセス・セルビシエ Ｉ
Ｒ−２株と命名し、微工研条寄第７５４号として寄託さ
れている。
本発明に発酵原料として好ましく用いられる炭水化物と
して砂糖きび汁（ケーンジュース）、廃糖蜜、でんぷん
糖化液、セルロース糖化液が挙げられるが、でんぷん質
原料を用いる場合まずアミラーゼなどの酵素で糖化した
後、本発明の酵母を添加してもよいが、原料に本発明の
酵母とアミラーゼなどの酵素を同時に添加して発酵させ
てもよい。
して砂糖きび汁（ケーンジュース）、廃糖蜜、でんぷん
糖化液、セルロース糖化液が挙げられるが、でんぷん質
原料を用いる場合まずアミラーゼなどの酵素で糖化した
後、本発明の酵母を添加してもよいが、原料に本発明の
酵母とアミラーゼなどの酵素を同時に添加して発酵させ
てもよい。
また、栄養源としてはリン酸−カリウム、硫酸マグネシ
ウム等の無機塩類、及びイーストエキス、ポリペプトン
などの有機栄養源を添加してもよい。
ウム等の無機塩類、及びイーストエキス、ポリペプトン
などの有機栄養源を添加してもよい。
窒素源としては硫安、尿素などの添加が望ましる。
これらの培養源を用いたエタノール発酵は通常の発酵槽
による回分発酵及び連続発酵でもよく、また後述の如き
基型の発酵槽を用いてもよい。回分法においては、発酵
の終了後短時間ただ静置するだけで容易に本酵母は沈殿
し、密度の高いスラリーを形成するため短時間で清澄な
発酵液を得ることができ、また発酵槽底部に濃厚な酵母
スラリーを得ることができる。従って、１一層発酵液を
ぬきとり、原料液を加えた後、直ちに高い濃度の酵母菌
体により次の発酵をくり返すことで菌体濃度も増大する
ため、ＱＬ位待時間単位発酵槽容にあたすのエタノール
発酵速度が飛躍的に高くなる。まるので、小型で簡単な
沈降槽により容易に発酵液より菌を分離することができ
、これを連続的に発酵槽へ返送することで、高い菌体濃
度が維持されるため、高いアルコール生産性が得られる
。
による回分発酵及び連続発酵でもよく、また後述の如き
基型の発酵槽を用いてもよい。回分法においては、発酵
の終了後短時間ただ静置するだけで容易に本酵母は沈殿
し、密度の高いスラリーを形成するため短時間で清澄な
発酵液を得ることができ、また発酵槽底部に濃厚な酵母
スラリーを得ることができる。従って、１一層発酵液を
ぬきとり、原料液を加えた後、直ちに高い濃度の酵母菌
体により次の発酵をくり返すことで菌体濃度も増大する
ため、ＱＬ位待時間単位発酵槽容にあたすのエタノール
発酵速度が飛躍的に高くなる。まるので、小型で簡単な
沈降槽により容易に発酵液より菌を分離することができ
、これを連続的に発酵槽へ返送することで、高い菌体濃
度が維持されるため、高いアルコール生産性が得られる
。
ここで参考のため本酵母の凝集状態における発酵能を他
の酵母のそれと比較した結果を表−１に示す。
の酵母のそれと比較した結果を表−１に示す。
これは回分発酵終了時になお少菫の培地を加え、エタノ
ール発酵に伴ない生成する炭酸ガス駄を計測して求めた
ものである。発酵能は単位菌体練あたりに換算し、相対
値で示した。凝集能は、発酵終了液をよく振とうした後
メスシリンダーへ移し、１分後の菌の沈降層の高さを容
敏百分率で示したものである。この値の小さい程１ｍ集
性がよく、沈降速度が速いことになる。
ール発酵に伴ない生成する炭酸ガス駄を計測して求めた
ものである。発酵能は単位菌体練あたりに換算し、相対
値で示した。凝集能は、発酵終了液をよく振とうした後
メスシリンダーへ移し、１分後の菌の沈降層の高さを容
敏百分率で示したものである。この値の小さい程１ｍ集
性がよく、沈降速度が速いことになる。
表−１
以下に本菌株ＩＲ−２を用いたエタノール発酵の実施例
を示し、本発明をより具体的に説明する。
を示し、本発明をより具体的に説明する。
なお、実施例で用いた各種の測定法は次のとおりである
。
。
（１）エタノール濃度
発酵液を２０，０ＯＯＧで５分間冷却遠心機にて遠心分
離後、」：清を蒸留水にて１００倍に希釈し、ガスクロ
マトグラフィーにより測定した。使用カラムは長さ２．
１ｍで内径３ｍｍのガラス製であり、ポリエチレングリ
コール６０００をコーティングしたユニボートＲ（ガス
クロ工業社ｌ１ｌ）を充てんして用いた。カラム温度は
１００’ｔ”：、試料％１１Ｃ１によりｐＨ２，０以下
とし、３０分間湯浴上で加水分解した後一般に用いられ
ているソモギー変法により測定した。
離後、」：清を蒸留水にて１００倍に希釈し、ガスクロ
マトグラフィーにより測定した。使用カラムは長さ２．
１ｍで内径３ｍｍのガラス製であり、ポリエチレングリ
コール６０００をコーティングしたユニボートＲ（ガス
クロ工業社ｌ１ｌ）を充てんして用いた。カラム温度は
１００’ｔ”：、試料％１１Ｃ１によりｐＨ２，０以下
とし、３０分間湯浴上で加水分解した後一般に用いられ
ているソモギー変法により測定した。
（３）フラクトース濃度
高速液体クロマトグラフィーにより測定した。使用カラ
ムは、Ｓ Ｔ Ｌ −Ｎ ）＋ ２（日本分光社製）を
つめた長さ２５０ｍｍ、内径４ 、６ｍｍのステンレス
カラムで温度は５０℃に保った。溶離液は、アセトニト
リ／Ｌ／（７５％）＋０．０１５Ｍ Ｋ１１２ＰＯ，（
２５％）を用い、１．０ｍ［／ｗｉｎで通液した。
ムは、Ｓ Ｔ Ｌ −Ｎ ）＋ ２（日本分光社製）を
つめた長さ２５０ｍｍ、内径４ 、６ｍｍのステンレス
カラムで温度は５０℃に保った。溶離液は、アセトニト
リ／Ｌ／（７５％）＋０．０１５Ｍ Ｋ１１２ＰＯ，（
２５％）を用い、１．０ｍ［／ｗｉｎで通液した。
（４）菌体濃度
発酵液を目盛つき遠心分離用チューブにとり、３５００
ｒｐｍで１０分間遠心分離後の沈殿層の容積を測定し、
湿潤賽量百分串で表わした。また実施例にあたってはケ
ーンジュースのモデル培地として台湾産非精製糖の溶解
液を用いた。
ｒｐｍで１０分間遠心分離後の沈殿層の容積を測定し、
湿潤賽量百分串で表わした。また実施例にあたってはケ
ーンジュースのモデル培地として台湾産非精製糖の溶解
液を用いた。
実施例１
図１に示す第１塔１、第２塔２及び沈降層３よりなるは
２５ｍ Ｑであった。用いた培地組成は、ＩＱあたり台
湾紅糖（非精製糖）１４０ｇ（塩酸加水分解後の囃糖濃
度として１２５ ｇ ）、リン酸−カリウム０．２ｇ、
硫酸マグネシウム７水塩０．１ｇ、塩化カルシウム２水
塩０．１ｇ、硫安１．５ｇであった。オートクレーブで
１２０℃、１５分間滅菌処理した本培地を培地ボトル４
より培地ポンプ５により連続的に第１塔１に供給した。
２５ｍ Ｑであった。用いた培地組成は、ＩＱあたり台
湾紅糖（非精製糖）１４０ｇ（塩酸加水分解後の囃糖濃
度として１２５ ｇ ）、リン酸−カリウム０．２ｇ、
硫酸マグネシウム７水塩０．１ｇ、塩化カルシウム２水
塩０．１ｇ、硫安１．５ｇであった。オートクレーブで
１２０℃、１５分間滅菌処理した本培地を培地ボトル４
より培地ポンプ５により連続的に第１塔１に供給した。
第１塔上部にｐＨセンサー１０を取付け、ｐｌ＋制御器
１１とアルカリ液供給ポンプ１２により自動的に第１塔
内の培養液ｐＨを３．９に制御した。発酵槽内温度は塔
の外側ジャケットに温水を通水して３２．５℃に制御し
た。
１１とアルカリ液供給ポンプ１２により自動的に第１塔
内の培養液ｐＨを３．９に制御した。発酵槽内温度は塔
の外側ジャケットに温水を通水して３２．５℃に制御し
た。
本システムにあらかじめグルコース１０％、イーストエ
キス３％、ポリペプトン５％の培地で培養した連続発酵
を行なった。連続発酵開始後、第１塔下部よりエアポン
プ９により空気を８０ｍ Ｑ ／分でまた第２塔２」二
部より出るガス（主としてエタノール発酵に伴ない生成
する炭酸ガス）の一部を３００ｉｏ Ｑ ／分でガスリ
サイクルポンプ８により通気した。第１塔１中の培養液
は通気されたガスと共に第２塔下部へ連続的に流入する
。第２塔２上部でガスと分離した発酵液は沈降槽３に流
入し、ここで酵母は直ちに沈降し底部に高濃度の菌体ス
ラリーを形成する。
キス３％、ポリペプトン５％の培地で培養した連続発酵
を行なった。連続発酵開始後、第１塔下部よりエアポン
プ９により空気を８０ｍ Ｑ ／分でまた第２塔２」二
部より出るガス（主としてエタノール発酵に伴ない生成
する炭酸ガス）の一部を３００ｉｏ Ｑ ／分でガスリ
サイクルポンプ８により通気した。第１塔１中の培養液
は通気されたガスと共に第２塔下部へ連続的に流入する
。第２塔２上部でガスと分離した発酵液は沈降槽３に流
入し、ここで酵母は直ちに沈降し底部に高濃度の菌体ス
ラリーを形成する。
上層に形成された清澄な発酵終了液は発酵液抜出しポン
プ６により排出され次の蒸留工程（本図には示されてい
ない）に移送される。沈降槽３下部にたまった高濃度の
酵母菌体スラリーは菌体返送ポンプ７により第１塔下部
へ返送される。こうした方法により約２週間にわたり安
定してエタノール濃度５４．６ｇＩＱ、残糖４．３ｇ／
Ｑ（うち発酵性残糖フラクトース２．１ｇ／Ｒ）という
結果が得られた。このと＝１１− きの発酵槽単位容積当りの生産速度は３４．６ ｇ ／
Ｑ ／ｂであり、エタノール収率は理論値の約９０％
であった。
プ６により排出され次の蒸留工程（本図には示されてい
ない）に移送される。沈降槽３下部にたまった高濃度の
酵母菌体スラリーは菌体返送ポンプ７により第１塔下部
へ返送される。こうした方法により約２週間にわたり安
定してエタノール濃度５４．６ｇＩＱ、残糖４．３ｇ／
Ｑ（うち発酵性残糖フラクトース２．１ｇ／Ｒ）という
結果が得られた。このと＝１１− きの発酵槽単位容積当りの生産速度は３４．６ ｇ ／
Ｑ ／ｂであり、エタノール収率は理論値の約９０％
であった。
った。
実施例２
実施例１と同様の装置を用い、また同様の方法でサツ力
ロマイセスセルビシェＩＲ−２株を培養し、培地中の紅
糖濃度をかえて、連続エタノール発酵を行った。実施例
１の結果を含めて表−２に結果を示す。培地供給速度は
各条件において、糖の利用率が９８％以上となる範囲で
可能な限り高い値に設定した。また菌体返送比は、各条
件毎に検討し、より高い生産性が得られるよう設定した
。なお。
ロマイセスセルビシェＩＲ−２株を培養し、培地中の紅
糖濃度をかえて、連続エタノール発酵を行った。実施例
１の結果を含めて表−２に結果を示す。培地供給速度は
各条件において、糖の利用率が９８％以上となる範囲で
可能な限り高い値に設定した。また菌体返送比は、各条
件毎に検討し、より高い生産性が得られるよう設定した
。なお。
他のｐｌ＋、温度等は実施例１と同じである。
以）〕の結果を他の酵母を使用し、類似した手法及び培
地を用いた他の文献例と比較すると２〜３倍、Ｏ，生産
性に相当することがオ）かる。例えばケーン１゛ ・ ジュースを用いた例（Ｐｒｊｎｃｅら： Ｂｉｏｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｙｊｌ ・ タノールを約８ｇ／Ｑ／ｈで生産しており、ビートジュ
ースを用いた例（Ｒａｍｉｒｅｚら：旧ｏｔ、ｅｃｈｎ
ｏｌｏｇｙｌｅｔｔｅｒ誌Ｖｏ１．５ Ｐ６５０〜）で
は５７．２ｇ／Ｑのエタノールを生産性１５．２ ｇ
／ Ｑ ／ｈで生産している。
地を用いた他の文献例と比較すると２〜３倍、Ｏ，生産
性に相当することがオ）かる。例えばケーン１゛ ・ ジュースを用いた例（Ｐｒｊｎｃｅら： Ｂｉｏｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｙｊｌ ・ タノールを約８ｇ／Ｑ／ｈで生産しており、ビートジュ
ースを用いた例（Ｒａｍｉｒｅｚら：旧ｏｔ、ｅｃｈｎ
ｏｌｏｇｙｌｅｔｔｅｒ誌Ｖｏ１．５ Ｐ６５０〜）で
は５７．２ｇ／Ｑのエタノールを生産性１５．２ ｇ
／ Ｑ ／ｈで生産している。
また前記のサツカロマイセス・セルビシェＴＰＯ２０１
８を用い同様の条件で菌体リサイクル連続発酵を試みた
ところ、約６２ｇＩＱのエタノールを生産性１９ｇ／Ｑ
／ｈで生産した。
８を用い同様の条件で菌体リサイクル連続発酵を試みた
ところ、約６２ｇＩＱのエタノールを生産性１９ｇ／Ｑ
／ｈで生産した。
またアルギン酸カルシウムおよび光硬化性ポリマーに酵
母を固定化し連続エタノール発酵に用いた例（新燃料油
開発技術研究組合昭和５９年度公開年報Ｐ、］３２．１
３３．１４５）と比較してもＩ Ｒ−２株で得られた表
−２に示す生産性は１．５倍以上である。
母を固定化し連続エタノール発酵に用いた例（新燃料油
開発技術研究組合昭和５９年度公開年報Ｐ、］３２．１
３３．１４５）と比較してもＩ Ｒ−２株で得られた表
−２に示す生産性は１．５倍以上である。
また他の例（ＬｉＩＩＩｔｏｎｇら： 、Ｉｏｕｒｎａ
ｌ ｏｆ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ″に’１ｖｃｈｎ
、ｏｌ、ｏｇｙ、 Ｖｏｌ、６２ Ｐ、５５−６２）
テはイースト１キ″す“１・″′醋酸−Ｊ９４８・“・
硫酸Ｖ′ネーシウム７水塩２ｇＩＱ、硫安４ｇ／Ｑを含
むグルコース合成培地（グルコース濃度１５０ｇハＤを
用い、彼らの分離したサツカロミセス・セルビシエＴ旧
株を使用した菌体リサイクル連続発酵により６７．８ｇ
／Ｑのエタノールを生産性２０ ｇ ／ Ｑ ／ｈで生
産している（同文献Ｐ、５８）。この結果を本実施例２
の実験ＮＱ２の結果＜６１．１ｇＩＱのエタノールを２
８．６ ｇ ／ ｆｌ ／ｈで生産している）と比較す
ると、本実施例の培地にはイーストエキスを含ます、他
の塩類濃度も低く低栄養であるにもかかわらずＬｉｍｔ
ｏｎｇらの値を約４０％以−Ｌ上回っていることがわか
る。
ｌ ｏｆ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ″に’１ｖｃｈｎ
、ｏｌ、ｏｇｙ、 Ｖｏｌ、６２ Ｐ、５５−６２）
テはイースト１キ″す“１・″′醋酸−Ｊ９４８・“・
硫酸Ｖ′ネーシウム７水塩２ｇＩＱ、硫安４ｇ／Ｑを含
むグルコース合成培地（グルコース濃度１５０ｇハＤを
用い、彼らの分離したサツカロミセス・セルビシエＴ旧
株を使用した菌体リサイクル連続発酵により６７．８ｇ
／Ｑのエタノールを生産性２０ ｇ ／ Ｑ ／ｈで生
産している（同文献Ｐ、５８）。この結果を本実施例２
の実験ＮＱ２の結果＜６１．１ｇＩＱのエタノールを２
８．６ ｇ ／ ｆｌ ／ｈで生産している）と比較す
ると、本実施例の培地にはイーストエキスを含ます、他
の塩類濃度も低く低栄養であるにもかかわらずＬｉｍｔ
ｏｎｇらの値を約４０％以−Ｌ上回っていることがわか
る。
以上の結果から本酵母菌株ＩＲ−２株を用いるエタノー
ル発酵の生産性が従来優れた生産性を与えると報告され
た他の例を大幅に上回るものであることが示される。
ル発酵の生産性が従来優れた生産性を与えると報告され
た他の例を大幅に上回るものであることが示される。
実施例３
ＩＲ−２株を用い回分発酵のくり返し実験を行なった。
培地は台湾紅糖２０２ｇ／Ｑ（塩酸分解後の全水塩ｏ、
１ｇ／ｆｉを含むものを用いた。培地は１２０’Ｙ：、
１５分間の加圧滅菌後出いた。窒素源としては後述する
ように尿素をＩｇ／Ｑ別に発酵開始時に加えた。
１ｇ／ｆｉを含むものを用いた。培地は１２０’Ｙ：、
１５分間の加圧滅菌後出いた。窒素源としては後述する
ように尿素をＩｇ／Ｑ別に発酵開始時に加えた。
実験には三角フラスコを用い、マグネチネックスターラ
ー上で連続的に撹拌しつつ行ない生成する炭酸ガスをガ
スホルダーに捕集することにより発酵経過を追った。あ
らかじめサツカロマイセス・セルビシェ Ｉ Ｒ−２株
をグルコース（１０％）、イーストエキス（０，３％）
、ポリペプトン（０，５％）の培地で前培養した後、三
角フラスコに接種し培養を開始した。発酵終了後２０分
間撹拌を停止１・し酵母を凝集沈降させた後、上層の発
酵液を全液祉の３／４ぬきとり、回りの新鮮培地を添加
しまた尿素をＩｇ／Ｑ添加した後、撹拌を開始し、次の
回分発酵を行なった。こうしたくり返し回分発酵を１０
回行なった結果、１〜６回目までは酵１ｔｔ菌濃度が増
大し、発酵所要時間も短縮されていき、７回目以降は酵
母菌濃度は約湿潤量百分率で１３％と一定となり発酵所
要１６一 時間は約５時間となった。最終エタノール濃度は８２〜
８３ｇ／Ｑに達しており、沈降分離時間２０分間を入続
で計算した発酵槽内全液量当りのエタノール発酵に採用
されている菌体再利用くり返し回分発酵法であるＭｅｌ
ｌｅ−Ｂｏｊｎｏｔ（メルボノ法）の生産性に較べ約３
倍に相当するものである。メルボノ法では発酵液を遠心
分離し、菌体を再利用している。
ー上で連続的に撹拌しつつ行ない生成する炭酸ガスをガ
スホルダーに捕集することにより発酵経過を追った。あ
らかじめサツカロマイセス・セルビシェ Ｉ Ｒ−２株
をグルコース（１０％）、イーストエキス（０，３％）
、ポリペプトン（０，５％）の培地で前培養した後、三
角フラスコに接種し培養を開始した。発酵終了後２０分
間撹拌を停止１・し酵母を凝集沈降させた後、上層の発
酵液を全液祉の３／４ぬきとり、回りの新鮮培地を添加
しまた尿素をＩｇ／Ｑ添加した後、撹拌を開始し、次の
回分発酵を行なった。こうしたくり返し回分発酵を１０
回行なった結果、１〜６回目までは酵１ｔｔ菌濃度が増
大し、発酵所要時間も短縮されていき、７回目以降は酵
母菌濃度は約湿潤量百分率で１３％と一定となり発酵所
要１６一 時間は約５時間となった。最終エタノール濃度は８２〜
８３ｇ／Ｑに達しており、沈降分離時間２０分間を入続
で計算した発酵槽内全液量当りのエタノール発酵に採用
されている菌体再利用くり返し回分発酵法であるＭｅｌ
ｌｅ−Ｂｏｊｎｏｔ（メルボノ法）の生産性に較べ約３
倍に相当するものである。メルボノ法では発酵液を遠心
分離し、菌体を再利用している。
即ち、本ＩＲ−２菌体株を用いるくり返し回分法は、短
時間、発酵終了液を静置するだけで菌体の分離が行なえ
るため、遠心分離工程が不要であり、設備コスト及びエ
ネルギー消費が大幅に低減できるだけでなく高い生産性
が得られるため発酵槽をより小型化することが可能であ
り、省エネルギー省＝：＋、；＜ｌ′ｃｙ′ｔ＜’６ｆ
″１７ Ｑ Ｔ ＆ ａ Ｅ ｕｔ ；ｌ−６° 、
２゛１〔発明の効果〕 ・
′−１゛１１ 本発明のＴＲ−２画一株は、エタノールの生産性が極め
て高く、且つ菌の凝集能が優れているため、：：°・工
業的にエタノール生産を実施する場合、生産コストを大
１１１に低減することが可能である。
時間、発酵終了液を静置するだけで菌体の分離が行なえ
るため、遠心分離工程が不要であり、設備コスト及びエ
ネルギー消費が大幅に低減できるだけでなく高い生産性
が得られるため発酵槽をより小型化することが可能であ
り、省エネルギー省＝：＋、；＜ｌ′ｃｙ′ｔ＜’６ｆ
″１７ Ｑ Ｔ ＆ ａ Ｅ ｕｔ ；ｌ−６° 、
２゛１〔発明の効果〕 ・
′−１゛１１ 本発明のＴＲ−２画一株は、エタノールの生産性が極め
て高く、且つ菌の凝集能が優れているため、：：°・工
業的にエタノール生産を実施する場合、生産コストを大
１１１に低減することが可能である。
−１：１イ１工・ダ４ツー、、。□□□。７ ｏ−ツー
。
。
を示し、図中の１は第１塔、２は第２塔、３は沈降層、
４は培地ボトル、５は培地ポンプ、６は発酵液抜出しポ
ンプ、７は菌体返送ポンプ、８はガスリサイクルポンプ
、９はエアーポンプ、１０はｐｉセンサー、１１はｐｌ
＋制御器、１２はアルカリ液供給ポンプをそれぞれ示す
。
４は培地ボトル、５は培地ポンプ、６は発酵液抜出しポ
ンプ、７は菌体返送ポンプ、８はガスリサイクルポンプ
、９はエアーポンプ、１０はｐｉセンサー、１１はｐｌ
＋制御器、１２はアルカリ液供給ポンプをそれぞれ示す
。
Claims (1)
- （１）サッカロマイセス・セルビシエに属し、エタノー
ル生産能が高く、且つ凝集性に優れた新規なサッカロマ
イセス・セルビシエ ＩＲ−２株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61170297A JPS6265679A (ja) | 1986-07-19 | 1986-07-19 | 新規なサツカロマイセス・セルビシエｉｒ−２株 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61170297A JPS6265679A (ja) | 1986-07-19 | 1986-07-19 | 新規なサツカロマイセス・セルビシエｉｒ−２株 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60085123A Division JPS61242584A (ja) | 1985-04-20 | 1985-04-20 | 微生物によるエタノ−ルの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6265679A true JPS6265679A (ja) | 1987-03-24 |
| JPH0528102B2 JPH0528102B2 (ja) | 1993-04-23 |
Family
ID=15902351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61170297A Granted JPS6265679A (ja) | 1986-07-19 | 1986-07-19 | 新規なサツカロマイセス・セルビシエｉｒ−２株 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6265679A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001343910A (ja) * | 2000-05-31 | 2001-12-14 | Citizen Watch Co Ltd | 時 計 |
| JP2008501348A (ja) * | 2004-06-08 | 2008-01-24 | マイクロバイオジェン プロプライエタリィ リミティッド | キシロースで生育する非組換えサッカロマイセス株 |
| JP2009195220A (ja) * | 2008-01-24 | 2009-09-03 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | キシロース発酵能が優れた六炭糖・五炭糖同時発酵酵母およびそれを用いたエタノールの高効率生産方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59135896A (ja) * | 1982-12-17 | 1984-08-04 | Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd | アルコ−ルの発酵生産法 |
-
1986
- 1986-07-19 JP JP61170297A patent/JPS6265679A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59135896A (ja) * | 1982-12-17 | 1984-08-04 | Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd | アルコ−ルの発酵生産法 |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001343910A (ja) * | 2000-05-31 | 2001-12-14 | Citizen Watch Co Ltd | 時 計 |
| JP2008501348A (ja) * | 2004-06-08 | 2008-01-24 | マイクロバイオジェン プロプライエタリィ リミティッド | キシロースで生育する非組換えサッカロマイセス株 |
| JP2009195220A (ja) * | 2008-01-24 | 2009-09-03 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | キシロース発酵能が優れた六炭糖・五炭糖同時発酵酵母およびそれを用いたエタノールの高効率生産方法 |
| US8445243B2 (en) | 2008-01-24 | 2013-05-21 | National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology | Hexose-pentose cofermenting yeast having excellent xylose fermentability and method for highly efficiently producing ethanol using the same |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0528102B2 (ja) | 1993-04-23 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |