JPS61152276A - 組換え微生物の殺菌法 - Google Patents
組換え微生物の殺菌法Info
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- JPS61152276A JPS61152276A JP28137884A JP28137884A JPS61152276A JP S61152276 A JPS61152276 A JP S61152276A JP 28137884 A JP28137884 A JP 28137884A JP 28137884 A JP28137884 A JP 28137884A JP S61152276 A JPS61152276 A JP S61152276A
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- recombinant microorganism
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- recombinant
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、組換え微生物の殺菌法に関する。さらに詳し
くは、生理活性物質を産生ずる組換え微生物の培養細胞
を、該物質の物理化学的性質および生理学的性質を損う
ことなく、該微生物を殺菌する方法に関する。
くは、生理活性物質を産生ずる組換え微生物の培養細胞
を、該物質の物理化学的性質および生理学的性質を損う
ことなく、該微生物を殺菌する方法に関する。
同、ここで言う組換え微生物は、組換えＤＮＡ技術或い
は遺伝子操作技術を用いて造成されたプラスミドもしく
はファージベクターによって形質転換された生理活性ポ
リペプチド産生能を有する微生物を言う。
は遺伝子操作技術を用いて造成されたプラスミドもしく
はファージベクターによって形質転換された生理活性ポ
リペプチド産生能を有する微生物を言う。
（従来の技術および発明が解決しようとする問題点）
組換え微生物の培養物から該微生物の産生する有用物質
を得ようとする場合、培養ならびに該物質の抽出・精製
工程において、該微生物が外部にもれないようにするこ
とが、安全性の面ならびに組換えＤＮＡ実験指針から必
要とされろ。培養から精製までのすべての工程を密閉し
て行うことも考えられるが、現実には容易でなく、組換
え微生物の培養後、抽出・精製に移る前に、培養微生物
を何らかの方法で完全に殺菌することが好ましい。
を得ようとする場合、培養ならびに該物質の抽出・精製
工程において、該微生物が外部にもれないようにするこ
とが、安全性の面ならびに組換えＤＮＡ実験指針から必
要とされろ。培養から精製までのすべての工程を密閉し
て行うことも考えられるが、現実には容易でなく、組換
え微生物の培養後、抽出・精製に移る前に、培養微生物
を何らかの方法で完全に殺菌することが好ましい。
微生物の殺菌法としては加熱や菌体破壊などの物理学的
方法や塩素系薬剤、キシレン系薬剤、過酸化水素などを
用いる化学的な方法が用いられているが、これらの殺菌
法は微生物を殺菌できても微生物自身からあるいは微生
物培養物から目的とする物質を抽出・精製］−て得よう
とする場合、該目的物の本来の性質を損なう場合がある
。まだ、塩素系薬剤や過酸化水素を使用すると培養容器
またはタンクさら（こは培養システムにおけるパイプや
バルブなどを腐蝕したり、キシレン系薬剤では爆発等の
不安があり、特に大量の培養組換え微生物の殺菌には好
才しいものではない。
方法や塩素系薬剤、キシレン系薬剤、過酸化水素などを
用いる化学的な方法が用いられているが、これらの殺菌
法は微生物を殺菌できても微生物自身からあるいは微生
物培養物から目的とする物質を抽出・精製］−て得よう
とする場合、該目的物の本来の性質を損なう場合がある
。まだ、塩素系薬剤や過酸化水素を使用すると培養容器
またはタンクさら（こは培養システムにおけるパイプや
バルブなどを腐蝕したり、キシレン系薬剤では爆発等の
不安があり、特に大量の培養組換え微生物の殺菌には好
才しいものではない。
本発明者らは、上記の問題点を解決すべく、種々の殺菌
法（こついて鋭意研究の結果、塩化ベンザル＝＋＝ウム
（Ｂｅｎｚａｌｋｏｎｉ７ｂｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ）
ｒ、ｙ含む水溶液、殺菌剤として用いることにより上
記の問題点を解決することを見出し本発明を完成するに
至った。
法（こついて鋭意研究の結果、塩化ベンザル＝＋＝ウム
（Ｂｅｎｚａｌｋｏｎｉ７ｂｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ）
ｒ、ｙ含む水溶液、殺菌剤として用いることにより上
記の問題点を解決することを見出し本発明を完成するに
至った。
同、以下の説明では水溶液を殺菌剤として用いた例につ
いて述べるが、塩化ベンザルコニウムを 。
いて述べるが、塩化ベンザルコニウムを 。
主成分とする溶液（例えばエタノール溶液等）であれば
水溶液に限るものではない。
水溶液に限るものではない。
（問題点解決のだめの具体的手段）
塩化ベンザルコニウム（Ｂｅｎｚａｌｋｏｎｉｕｍ ｃ
ｈｌ−ｏｒｉｄｅ ）は下記の構造。
ｈｌ−ｏｒｉｄｅ ）は下記の構造。
を有し、広範囲の微生物（％に細菌類）に対し低濃度で
迅速な殺菌作用を示す。塩化ベンザルコニウムの水溶液
は外用ならびに医療器具等の殺菌消毒剤として広く使用
されている。貰だ注射剤０こ添加することも許されてい
る。
迅速な殺菌作用を示す。塩化ベンザルコニウムの水溶液
は外用ならびに医療器具等の殺菌消毒剤として広く使用
されている。貰だ注射剤０こ添加することも許されてい
る。
本発明は、低濃度の塩化ベンザルコニウムを組換え微生
物の培養液に加えることにより、菌体内に産生された有
用物質の物理化学的および生理学的性質を損うことなく
、該微生物を完全開こ死滅させることにある。塩化ベン
ザルコニウムは外用や医療器具等の殺菌消毒Ｏこ用いら
れているが、培養微生物（特Ｑこ有用物質産生組換え微
生物）の殺菌剤として用いられた例はこれ壕で知られて
いない。
物の培養液に加えることにより、菌体内に産生された有
用物質の物理化学的および生理学的性質を損うことなく
、該微生物を完全開こ死滅させることにある。塩化ベン
ザルコニウムは外用や医療器具等の殺菌消毒Ｏこ用いら
れているが、培養微生物（特Ｑこ有用物質産生組換え微
生物）の殺菌剤として用いられた例はこれ壕で知られて
いない。
塩化ベンザルコニウムは水溶性も高く使用法も簡便で、
ヒＨこ対する毒性も低く使用者に危険を及ぼすこともな
い。従って、特に大量に培養された微生物（特に有用物
質産生組換え微生物）を殺菌する必要がある場合有用で
ある。
ヒＨこ対する毒性も低く使用者に危険を及ぼすこともな
い。従って、特に大量に培養された微生物（特に有用物
質産生組換え微生物）を殺菌する必要がある場合有用で
ある。
塩化ベンザルコニウムは水溶液として用いることが好ま
しい。
しい。
組換え微生物の産生する有用物質の諸性質を損うことな
く該微生物を殺菌しうる塩化ベンザルコニウムの濃度は
、用いる組換え微生物の種類（菌株）や培養濃度また培
養に用いる培地の種類によって異なるが、最終０．０３
％から０．１％であるのが好ましい。具体的には塩化ベ
ンザルコニウム１０％水溶液（例えばオスパン液二犬五
栄養株式会社製）７ｊ：、塩化ベンザルコニウムが上記
の濃度になるように、組換え微生物培養液に加えて適当
な時間（３０分から２時間）撹拌するだけでよい。
く該微生物を殺菌しうる塩化ベンザルコニウムの濃度は
、用いる組換え微生物の種類（菌株）や培養濃度また培
養に用いる培地の種類によって異なるが、最終０．０３
％から０．１％であるのが好ましい。具体的には塩化ベ
ンザルコニウム１０％水溶液（例えばオスパン液二犬五
栄養株式会社製）７ｊ：、塩化ベンザルコニウムが上記
の濃度になるように、組換え微生物培養液に加えて適当
な時間（３０分から２時間）撹拌するだけでよい。
処理温度は、特Ｑこ制限されないが、有用物質の性質が
損われないよう配慮することが望まれる。
損われないよう配慮することが望まれる。
上記のようＯこして殺菌された組換え微生物培養液から
菌体（死菌体）を遠心分離により集め、適当に菌体を破
砕後、目的とする有用物質を抽出・精製する適当な工程
へ移る。殺菌剤として添加された塩化ベンザルコニウム
は、精製過程で容易に除くことが可能である。まだ、具
体的Ｑこは以下の実施例および参考例で述べるが、本発
明の殺菌法によって殺菌された組換え微生物（大腸菌）
から、目的とする有用生理活性ポリペプチド（ヒト・イ
ンターフェロン活性を有するポリペプチド〕を、その物
理化学的および生理学的性質を損うことなく抽出・精製
することができる。
菌体（死菌体）を遠心分離により集め、適当に菌体を破
砕後、目的とする有用物質を抽出・精製する適当な工程
へ移る。殺菌剤として添加された塩化ベンザルコニウム
は、精製過程で容易に除くことが可能である。まだ、具
体的Ｑこは以下の実施例および参考例で述べるが、本発
明の殺菌法によって殺菌された組換え微生物（大腸菌）
から、目的とする有用生理活性ポリペプチド（ヒト・イ
ンターフェロン活性を有するポリペプチド〕を、その物
理化学的および生理学的性質を損うことなく抽出・精製
することができる。
以下の実施例および参考例では、組換え微生物としてヒ
ト・インターフェロン活性を有するポリペプチド産生能
をもつ大腸菌形質転換体について述べるが、本発明の殺
菌法は大腸菌以外の微生物（す にも適用できる。丑だ、有用物質は、ヒト・インターフ
ェロン活性を有するポリペプチドに限るものでもない。
ト・インターフェロン活性を有するポリペプチド産生能
をもつ大腸菌形質転換体について述べるが、本発明の殺
菌法は大腸菌以外の微生物（す にも適用できる。丑だ、有用物質は、ヒト・インターフ
ェロン活性を有するポリペプチドに限るものでもない。
実施例１゜
塩化ベンザルコニウムの殺菌効果
ヒト・インターフェロン活性を有するポリペプチドの生
産能を有する組換え微生物（大腸菌）Ｗ３１１０／７）
ＩＮ５Ｔ４（特願昭５８−１３２５２４に開示）を、ポ
リペプトン３％、酵母エキス２光、グルコース２％およ
びテトラザイクリンを２０μ９／ｍＡで含む培＋ｔ２ｇ
で３０時間、３０℃で通気撹拌培養した。この時の培禿
液中の該大腸菌の生菌数は、１ ｍｌ当り１０ Ｘ １
０９ＣＦＵ （ｃｏｌｏｎｚｆｏｒ％ｉｎｇ ｕｎｉｔ
）であった。この培養液ζこ１０九塩化ベンザルコニ
ウム水溶液（オスパン＊：太五栄養社製）を、塩化ベン
ザルコニウムとして０．０１％から０．１％になるよう
に添加し、３０℃で１時間撹拌後培養液中の生菌数を調
べた。生菌数は、培養液１ ｍ１２から遠心（１２，０
０Ｏｒｐｍ、 ５分）して得られる沈澱物を、無菌生理
食塩水で３回洗浄後、同食塩水を１ ｍｌを加えその懸
濁液あるいは適当に希釈した懸濁液０．１ｍｅを、Ｄｉ
ｆｃｏニュートリエンドアガー培地上に甘き、３７℃で
２４時間培養後その培地上に現われるコロニーを計数す
ること（こより行われた。生菌数の測定は同じサンプル
について最低２回行った。第１表にはその平均値を示す
。
産能を有する組換え微生物（大腸菌）Ｗ３１１０／７）
ＩＮ５Ｔ４（特願昭５８−１３２５２４に開示）を、ポ
リペプトン３％、酵母エキス２光、グルコース２％およ
びテトラザイクリンを２０μ９／ｍＡで含む培＋ｔ２ｇ
で３０時間、３０℃で通気撹拌培養した。この時の培禿
液中の該大腸菌の生菌数は、１ ｍｌ当り１０ Ｘ １
０９ＣＦＵ （ｃｏｌｏｎｚｆｏｒ％ｉｎｇ ｕｎｉｔ
）であった。この培養液ζこ１０九塩化ベンザルコニ
ウム水溶液（オスパン＊：太五栄養社製）を、塩化ベン
ザルコニウムとして０．０１％から０．１％になるよう
に添加し、３０℃で１時間撹拌後培養液中の生菌数を調
べた。生菌数は、培養液１ ｍ１２から遠心（１２，０
０Ｏｒｐｍ、 ５分）して得られる沈澱物を、無菌生理
食塩水で３回洗浄後、同食塩水を１ ｍｌを加えその懸
濁液あるいは適当に希釈した懸濁液０．１ｍｅを、Ｄｉ
ｆｃｏニュートリエンドアガー培地上に甘き、３７℃で
２４時間培養後その培地上に現われるコロニーを計数す
ること（こより行われた。生菌数の測定は同じサンプル
について最低２回行った。第１表にはその平均値を示す
。
第１表
［化ベンザルコニウムの殺菌効果
と活性への影響
０ １、ＯＸｌｏｇ １．９Ｘ１０５０．
０１ ４．２Ｘ １０８３．２Ｘ １０’０．０
２５ ２．７ Ｘ １０’ １．９ Ｘ、１
０’０．０５ ０ １．９Ｘ１０’０
．７５ ０ １．６Ｘ１０’０．１
０ ０一方、塩化ベンザルコニ
ウム処理および未処理による組換え微生物の産生する目
的物質、ヒトインターフェロン活性を有するポリペプチ
ドの活性（抗ウィルス活性）に及ぼす影響も調べられた
（第１辰）。抗ウィルス活性は、培養液から遠心分離し
て得られる菌体を、フレンチプレスによって破砕後、そ
の−Ｆ清について常法に従って測定した。
０１ ４．２Ｘ １０８３．２Ｘ １０’０．０
２５ ２．７ Ｘ １０’ １．９ Ｘ、１
０’０．０５ ０ １．９Ｘ１０’０
．７５ ０ １．６Ｘ１０’０．１
０ ０一方、塩化ベンザルコニ
ウム処理および未処理による組換え微生物の産生する目
的物質、ヒトインターフェロン活性を有するポリペプチ
ドの活性（抗ウィルス活性）に及ぼす影響も調べられた
（第１辰）。抗ウィルス活性は、培養液から遠心分離し
て得られる菌体を、フレンチプレスによって破砕後、そ
の−Ｆ清について常法に従って測定した。
第１衣から明らかな如く、塩化ベンザルコニウムの濃度
が０．０５％から０．０７５％にお℃・て、組換え微生
物の産生ずる物質の活性を損うことなく、培養液中の該
微生物そ殺菌できることが認められた。
が０．０５％から０．０７５％にお℃・て、組換え微生
物の産生ずる物質の活性を損うことなく、培養液中の該
微生物そ殺菌できることが認められた。
凍た、同じ大腸菌を用いて同様な培養条件で培養した他
の同様な実験【こおいて、塩化ベンザルコニウムの濃度
が０．０４％から０，０５％の範囲において、該大腸菌
が産生ずる物質の活性を損うことなく、培養液中の大腸
菌を殺菌できることが認められだが、０．０７５％ζこ
なると殺菌は完全にできても目的生産物の活性が若干（
約５０％）損なわれた。
の同様な実験【こおいて、塩化ベンザルコニウムの濃度
が０．０４％から０，０５％の範囲において、該大腸菌
が産生ずる物質の活性を損うことなく、培養液中の大腸
菌を殺菌できることが認められだが、０．０７５％ζこ
なると殺菌は完全にできても目的生産物の活性が若干（
約５０％）損なわれた。
これらの結果から、殺菌する培養液中の菌体の濃度によ
って若干条件は異なるが、塩化ベンザルコニウムの濃度
は、３０℃、１時間の処理条件では０．０４％から０．
０５％が打首しいと判断された。
って若干条件は異なるが、塩化ベンザルコニウムの濃度
は、３０℃、１時間の処理条件では０．０４％から０．
０５％が打首しいと判断された。
実施例２゜
大量培養における組換え微生物の殺菌
実施例１に記した大腸菌を用い、大量培養後における塩
化ベンザルコニウムによる殺菌効果および該殺菌処理に
よる目的生産物への影響について調べた。
化ベンザルコニウムによる殺菌効果および該殺菌処理に
よる目的生産物への影響について調べた。
実施例１で示しだ培地で前培養された該組換え大腸菌培
養液０．５１ （約Ｉ Ｘ １０ ’ Ｃｅ１ｌｏ ７
ｍｌの大腸菌を含む）を、７００１の培地（組成は実施
例１に記載）に接種し、３０℃で３６時間培養後１０％
塩化ベンザルコニウム水溶液（オスパン液。
養液０．５１ （約Ｉ Ｘ １０ ’ Ｃｅ１ｌｏ ７
ｍｌの大腸菌を含む）を、７００１の培地（組成は実施
例１に記載）に接種し、３０℃で３６時間培養後１０％
塩化ベンザルコニウム水溶液（オスパン液。
犬五栄養株式会社製）を、塩化ベンザルコニウムとして
０．０４５％になるよう添加した。次に、３０℃で１時
間撹拌後、培養液中の生菌数を実施例１に記した方法に
従って測定した結果、生菌は認められなかった。
０．０４５％になるよう添加した。次に、３０℃で１時
間撹拌後、培養液中の生菌数を実施例１に記した方法に
従って測定した結果、生菌は認められなかった。
一方、殺菌処理前の培養液および殺菌処理された培養液
３０ｍ／！を採取し、菌体を遠心分離後フレンチプレス
ζこまって菌体を破砕し、そのうち遠心上清液中のイン
ターフェロン活性（抗ウィルス活性）を常法０こ従って
測定した。その結果、殺菌処理前後のインターフェロン
活性（抗ウィルス活性）には変りがなかった。
３０ｍ／！を採取し、菌体を遠心分離後フレンチプレス
ζこまって菌体を破砕し、そのうち遠心上清液中のイン
ターフェロン活性（抗ウィルス活性）を常法０こ従って
測定した。その結果、殺菌処理前後のインターフェロン
活性（抗ウィルス活性）には変りがなかった。
また、殺菌処理前後の培養菌体からの抽出液を、ＳＤＳ
ポリアクリルアミド電気泳動にがけてみられる蛋白のバ
ンドのパターンも両者で変りなかった。即チ、大量培養
においても塩化ベンザルコニウムによる殺菌処理は有効
であることが示された。
ポリアクリルアミド電気泳動にがけてみられる蛋白のバ
ンドのパターンも両者で変りなかった。即チ、大量培養
においても塩化ベンザルコニウムによる殺菌処理は有効
であることが示された。
また、参考例１に記すように、上記のように殺菌処理さ
れた培養菌体から、目的とするヒトインターフェロン活
性を有するポリペプチドを精製することができた。また
、該精製標品中には、殺菌剤として添加した塩化ベンザ
ルコニウムは、日本薬局法（１９８１、第１０回改正Ｃ
−３４３）に基すいた検出法では検出されなかった。
れた培養菌体から、目的とするヒトインターフェロン活
性を有するポリペプチドを精製することができた。また
、該精製標品中には、殺菌剤として添加した塩化ベンザ
ルコニウムは、日本薬局法（１９８１、第１０回改正Ｃ
−３４３）に基すいた検出法では検出されなかった。
参考例
実施例２のようにして殺菌処理された培養液から、湿菌
体として１００ｇをとり、以下のようにヒト・インター
フェロン活性を有するポリペプチドの精製を行った。
体として１００ｇをとり、以下のようにヒト・インター
フェロン活性を有するポリペプチドの精製を行った。
まず上記湿菌体ｆ２０ｍＭ ト’Ｊス塩酸バッファーｐ
Ｈ’ ７．５ （以下ＴＨＥ）７００ｍｌに懸濁し、こ
れにサルミン（サケ精子由来プロタミン硫酸、オ■光純
薬）を最終濃度２０ｍり／ｍｌとなる様に加え、氷冷し
たＭ’ａｎｔｏｎ Ｇａａｌｉｎ社製ホモジナイザーＭ
１５で破砕した後、遠心分離しく ７＋ ０００ ｒｐ
ｒｎ。
Ｈ’ ７．５ （以下ＴＨＥ）７００ｍｌに懸濁し、こ
れにサルミン（サケ精子由来プロタミン硫酸、オ■光純
薬）を最終濃度２０ｍり／ｍｌとなる様に加え、氷冷し
たＭ’ａｎｔｏｎ Ｇａａｌｉｎ社製ホモジナイザーＭ
１５で破砕した後、遠心分離しく ７＋ ０００ ｒｐ
ｒｎ。
２０分間）上清を得た。次に、この上清を２０ｍＭＴＨ
Ｂ ｐＨ７，５で平衡化した、ＤＥＡＥ ）−ヨーパー
ルとＣＭトーヨーパール（いずれモ東洋曹達）の連続カ
ラムにかけ、０〜０．６ Ａ／ Ｎａ Ｃｌ 直線濃度
勾配により溶出し、活性画分を集めた。なおインターフ
ェロン活性は特開昭５８−２０１９９５に記載した方法
に準じて測定した。次にこの両分に硫酸アンモニウムを
加え２０％飽和とした後、２０ ｍＭ ＴＨＢ ｐＨ７
，５（含２０％（Ｎ＆ ）２５ｏ４）で平衡化したプチ
ルトーヨーパール（東洋曹達社製）カラムにかけ、２０
ｍＭ ＴＨＢ ｐＨ７，５により溶出し、活性画分を集
めた。この画分ヲ２０ｍＭ ＴＩＩＢ ｐＨ７，５で平
衡化した亜鉛キレートカラム（ファルマシア社製〕にか
け、０−４０ｍＭＥ０−４Ｏ線濃度勾配により溶出し、
活性画分を２０ｍＭ ＴＨＥ、ｐＨ７，５（０，１％２
−メルカプトエタノール、以下２−ＭＥ）で平衡化した
ＣＭトーヨーバールによる再クロマトグラフィーを行な
い、最終精製品として１００μμの蛋白を得だ。
Ｂ ｐＨ７，５で平衡化した、ＤＥＡＥ ）−ヨーパー
ルとＣＭトーヨーパール（いずれモ東洋曹達）の連続カ
ラムにかけ、０〜０．６ Ａ／ Ｎａ Ｃｌ 直線濃度
勾配により溶出し、活性画分を集めた。なおインターフ
ェロン活性は特開昭５８−２０１９９５に記載した方法
に準じて測定した。次にこの両分に硫酸アンモニウムを
加え２０％飽和とした後、２０ ｍＭ ＴＨＢ ｐＨ７
，５（含２０％（Ｎ＆ ）２５ｏ４）で平衡化したプチ
ルトーヨーパール（東洋曹達社製）カラムにかけ、２０
ｍＭ ＴＨＢ ｐＨ７，５により溶出し、活性画分を集
めた。この画分ヲ２０ｍＭ ＴＩＩＢ ｐＨ７，５で平
衡化した亜鉛キレートカラム（ファルマシア社製〕にか
け、０−４０ｍＭＥ０−４Ｏ線濃度勾配により溶出し、
活性画分を２０ｍＭ ＴＨＥ、ｐＨ７，５（０，１％２
−メルカプトエタノール、以下２−ＭＥ）で平衡化した
ＣＭトーヨーバールによる再クロマトグラフィーを行な
い、最終精製品として１００μμの蛋白を得だ。
（インターフェロン比活性： １．３ Ｘ １０６Ｕ／
ｌｎ９蛋白）。この蛋白の５ＤＳ−ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動（以下５ＤＳ−ＰＡＧＥ）による純度検定
では純度９９％以上であり、又、四ＳＤＳ −ＰＡＧＥ
のバンドの位置は目的とするポリペプチドのバンドの位
置と一致した。
ｌｎ９蛋白）。この蛋白の５ＤＳ−ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動（以下５ＤＳ−ＰＡＧＥ）による純度検定
では純度９９％以上であり、又、四ＳＤＳ −ＰＡＧＥ
のバンドの位置は目的とするポリペプチドのバンドの位
置と一致した。
特許出願人 サントリー株式会社
（外５名）
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、組換え微生物の培養物から生理活性物質を抽出・精
製する前の工程において、該微生物の培養液に塩化ベン
ザルコニウムを加えて該微生物を殺菌することを特徴と
する組換え微生物の殺菌法。 ２、塩化ベンザルコニウムを０．０３％〜０．１％にな
るように加えることを特徴とする特許請求の範囲第１項
記載の殺菌法。 ３、組換え微生物が生理活性物質を産生する微生物であ
ることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の殺菌法
。 ４、上記生理活性物質がガンマ型インターフエロン活性
を有するポリペプチドである特許請求の範囲第３項記載
の殺菌法。 ５、生理活性物質を産生する組換え微生物が大腸菌であ
る特許請求の範囲第３項または第４項に記載の殺菌法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28137884A JPS61152276A (ja) | 1984-12-27 | 1984-12-27 | 組換え微生物の殺菌法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28137884A JPS61152276A (ja) | 1984-12-27 | 1984-12-27 | 組換え微生物の殺菌法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61152276A true JPS61152276A (ja) | 1986-07-10 |
Family
ID=17638299
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP28137884A Pending JPS61152276A (ja) | 1984-12-27 | 1984-12-27 | 組換え微生物の殺菌法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61152276A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001036592A1 (en) | 1999-11-12 | 2001-05-25 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Sterilized microbial cells |
-
1984
- 1984-12-27 JP JP28137884A patent/JPS61152276A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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