JPS6110553A - プロリン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 逸五欠１ 本発明は新規なプロリン誘導体及びその塩に関する。

良米盈１ 従来アンジオテンシン変換酵素阻害作用を有する化合物
としては例えば特開昭５５−８１８４５号公報に記載の
アミノ酸誘導体が知られている。

しかしながら、該公報に記載のアミノ酸誘導体は極めて
広範であって具体的に開示された化合物はそのご（一部
であり、さらに本発明者らの研究によると、該公報に具
体的に開示されている化合物は、上記作用が不充分であ
るか、或いは優れた上記作用を有していたとしても該化
合物投与から上記作用発現までに長時間を要し速効性に
劣るものであることが判明した。本発明者らは、上記ア
ミノ酸誘導体について引続き研究を重ねたところ、該公
報の広範なアミノ酸誘導体には包含されているけれども
具体的には全く記載されていない下記一般式（１）で表
わされる化合物が、優れたアンジオテンシン変換酵素阻
害作用を有しており且つ該化合物投与後傾時間のうちに
優れた該作用を発現し得るという上記公報から予期し得
ない効果を有していることを見い出した。

１見立１１ 本発明のプロリン誘導体は、下記一般式（１）で表わさ
れる。

〔式中Ｒ１はペンチル基又はヘキシル基を示す。

Ｒ及びＲ４は同−又は異なって水素原子又は低級アルキ
ル基を示す。Ｒ３は低級アルキル基を示す。） 上記一般式（１）において、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４で示さ
れる低級アルキル基としては、例えばメチル、エチル、
プロピル、イソプロピル、ブチ゛ル、イソブチル、ｔ−
ブチル、ペンチル、ヘキシル基等を挙げることができる
。

また上記一般式（１）の化合物は、分子内に３個の不斉
炭素原子を有しており、８個の光学異性体が存在するが
、本発明はそのすべての異性体を包含する。

本発明のプロリン誘導体及びその塩は、優れたアンジオ
テンシン変換酵素阻害作用を有し、降圧剤として有用で
ある。特にその作用の発現に要する時間は短く速効性が
あり、しかも作用持続時間も長く且つ低毒性である。さ
らに本発明のプロリン誘導体及びその塩は、免疫力増強
作用、去タン作用及び眼内圧低下作用をも有し、免疫賦
活剤、去タン剤及び緑内障治療剤として有用である。

上記本発明プロリン誘導体の塩には、医薬的に許容され
る酸付加塩が含まれる。該酸付加塩を形成する酸性化合
物としては、例えば塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水
素酸等の無機酸及びシュウ酸、マレイン酸、フマール酸
、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ピクリン酸
等の有機酸を例示できる。

また本発明のプロリン誘導体中、酸性基を有するものは
これに医薬的に許容される塩基を作用させることにより
塩とすることができ、本発明はかかる塩をも包含する。

上記塩基としては、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カ
リウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素
カリウム等の無機塩基、リジン、アルギニン、オルニチ
ン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、エチルアミ
ン、ジメチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキ
シルアミン等の有機塩基を例示できる。

本発明のプロリン誘導体は、例えば以下に示す各種方法
により製造することができる。

く反応式−１〉 一一一→Ｒ□−５ＣＨ２ＣＨ−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯＲ５０
ＯＲ２ （Ｉａ）　　　　　。

〔式中Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は上記に同じ。Ｒ５は水酸基
、低級アルコキシ基又は す。またＸはハロゲン原子、アルキルスルホニルオキシ
基又はアリールスルホニルオキシ基を示す。〕 上記化合物（３）においてＸで示されるハロゲン原子と
しては、塩素原子、臭素原子、沃素原子等を、アルキル
スルホニルオキシ基としては、メタンスルホニルオキシ
基、エタンスルホニルオキシ基等を、アリールスルホニ
ルオキシ基としては、ｐ−トルエンスルホニルオキシ基
、メシチレンスルホニルオキシ基等を夫々例示できる。

上記反応式−１に示す方法によれば、システィン誘導体
（２）と化合物（３）とを結合させることにより、化合
物（１ａ）が得られる。縮合反応は適当な溶媒中、脱酸
剤の存在下に行なわれる。

溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、２−プ
ロパツール、ｔ−ブタノール等のアルコール類、ジエチ
ルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサ
ン等のエーテル類、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、
ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）　、ヘキサメチルリ
ン酸トリアミド（ＨＭＰＡ）等の非プロトン性極性溶媒
等を使用できる。脱酸剤としては、例えば炭酸ナトリウ
ム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリ
ウム等のアルカリ金属炭酸塩もしくはアルカリ金属炭酸
水素塩、トリエチルアミン、ピリジン、１．８−ジアザ
ビシクロ（５，４，０）ウンデカン−７−エン（ＤＢＬ
Ｉ）等の有機第３級アミン等を使用できる。脱酸剤は通
常システィン誘導体（２）に対して約１〜２倍モル、好
ましくは約１〜１．２倍モル用いられる。化合物（３）
は、システィン誘導体（２）に対して、通常少なくとも
等モル量、好ましくは約１〜１．２倍モル用いられる。

反応は一般に約Ｏ〜８０℃、好ましくは室温もしくはそ
の付近の温度下に行なわれ、約３〜７２時間で完結する
。

上記反応において出発材料として用いられるシスティン
誘導体く２）は、例えばＪ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅａｐ、
。

１６、　７４９　（１９５９）　、Ｈｅ１ｖ、　Ｃｈｉ
Ｉ！、　Ａｃｔａ、。

３２．８６６　（１９４９）等を参考にして合成される
。

〈反応式−２〉 Ｒ４−ＣＨＣＨ−ＮＩｌ、ＣＨ−ＣＵＲ５ｂ電 ０ＯＲ２ （１ａ’） 上記反応式−２に示す方法によれば、化合物（１ａ’）
をアニソール、チオアニソール、ジメチルスルフィド等
のスカベンジャーの存在下に酸処理することにより、副
生成物を生成させることなく、化合物（１８″）を収得
できる。

酸処理反応において、酸としては例えばトリフルオロ酢
ＩＩＩ　（ＴＦＡ）　、メタンスルホン酸、トリフルオ
ロメタンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸、弗化水素酸、
酢酸等を例示できる。該反応は例えばジエチルエーテル
、ＴＨＦ、ジオキサン等のエーテル類、酢酸メチル、酢
酸エチル等のエステル類、塩化メチレン、クロロホルム
等のハロゲン化炭化水素等の溶媒中で行ない得る。酸と
してトリフルオロ酢酸を用いる場合、溶媒は不要であり
、この方法が好ましい。またアニソール等のスカベンジ
ャーは、通常化合物（１ａ’）に対し約１〜１０倍モル
量、好ましくは約３〜５倍モル量用いられる。反応は約
Ｏ〜５０℃、好ましくは約Ｏ〜２５℃の温度条件下に約
１〜１０時間を要して行なわれる。

〈反応式−３〉 （２＞　　　　　　　　　　（４） ｍ−−−→Ｒ−５−ＣＨＣＨ−ＮＨ−ＣＭ−ＣＯＯＨｌ
　　　　　　２ ０ＯＲ２ 〔式中Ｒ、Ｒ及びＲ３は上記に同じ。〕上記反応式−３
によればシスティン誘導体（２）とα−ケトＩＩ（４）
とを反応させることにより化合物（５）が収得される。

この反応は金属水素錯化合物を用いた還元的結合生成反
応、即ちシスティン誘導体（２）とα−ケト酸（４）と
の反応により生ずるシッフ塩基を金属水素錯化合物を用
いて還元することにより′行なわれる。金属水素錯化合
物としては、例えば水素化硼素ナトリウム、水素化硼素
リチウム、水素化硼素シアノナトリウム、水素化硼素シ
アノリチウム等を利用できる。２等錯化合物はシスティ
ン誘導体（２）に対し、通常約２〜６倍モル量、好まし
くは約２〜３倍モル量用いられる。またα−ケト酸（４
）は、システィン誘導体（２）の約１〜１０倍モル量、
好ましくは約３〜５倍モル量用いられる。上記反応は、
反応に悪影響を与えない不活性溶媒中で行なわれる。

該溶媒としては、例えば水、エタノール、メタノール、
２−プロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテル
、ＴＨＦ、ジオキサン等のエーテル類、ＤＭＦｌＤＭＳ
Ｏ等の非プロトン性極性溶媒等が単独で又は混合溶媒と
して用いられる。反応は通常０〜５０℃、好ましくは室
温もしくはその付近の温度下に、約３〜２４時間で完結
する。尚水素化硼素シアノナトリウム、水素化硼素シア
ンリチウムを用いる場合、通常ｐＨ６，５〜８．５程度
、好ましくは中性付近で反応は速やかに進行する。

〈反応式−４〉 （１ｂ） 〔式中Ｒ及びＲは前記に同じ。Ｒ２ａ及びＲ４ａは夫々
低級アルキル基を示す。〕 上記反応式−４によれば、前記反応式−１〜−３により
得られるカルボン酸（６）と、アミン（７）との反応に
より本発明化合物（１ｂ）が収得される。該反応は通常
のアミド結合生成反応に従って、下記各種の方法により
実施される。

（イ）　縮合剤の存在下、カルボン酸（６）とアミン（
７）とを脱水綜合反応させる方法、（ロ）　混合酸無水
物法、即ちカルボンＩ（６）にへロカルボン酸アルキル
エステルを反応させ混合酸無水物とし、これにアミン（
７）を反応させる方法、 （ハ）　活性エステル法、即ちカルボン酸（６）を、例
えばｐ−ニトロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシコハ
ク酸イミドエステル、Ｎ−ヒトＯキシー５−ノルボルネ
ン−２，３−ジカルボキシイミドエステル等の活性エス
テルとし、これにアミン（７）を反応させる方法、 （ニ）　カルボン酸ハライド法、即ちカルボン酸（６）
のハライドにアミン（７）を反応させる方法、 （ホ）　その他、例えばカルボン酸（６）を無水酢酸等
の脱水剤により酸無水物とし、これにアミン（７）を反
応させる方法：カルボン酸（６）と低級アルコールとの
エステルに、アミン（７）を高圧高温下に反応させる方
法。

上記各方法は、公知の２等方法と略々同条件下に実施さ
れる。特に好ましい方法は上記（イ）の方法である。該
方法につき詳述すれば、縮合剤としては具体的にはＮ、
Ｎ−ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）　、Ｄ
ＣＣ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ＤＣＣ−Ｎ−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾール、ＤＣＣ−Ｎ−ヒドロキシ
−５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキシイミド、ジ
フェニルフォスフォリルアミド（ＤＰＰＡ）−トリエチ
ルアミン、ジエチルフオスフオリルシアニデート（ＤＥ
ＰＣ）−トリエチルアミン等を用いることができる。反
応は一般に適当な溶剤中にて行なわれ、該溶剤としては
、反応に悪影響を及ぼさない公知の各種のものを用い得
る。具体例としては、例えば塩化メチレン、クロロホル
ム、ジクロルエタン等のハロゲン化炭化水素類、ベンゼ
ン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジエチ
ルエーテル、ＴＨＦ、ジオキサン等のエーテル類、酢酸
メチル、酢酸エチル等のエステル類、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ
，ＨＭＰＡ等の非プロトン性極性溶媒等を例示できる。

アミン（７）の使用量はカルボン酸（６）に対して通常
少なくとも等モル量程度、好ましくは１〜１．２倍モル
量程度とされるのがよく、縮合剤はカルボン酸（６）に
対して約１〜２倍モル量、好ましくは約１〜１．２倍モ
ル量とすることができる。反応は通常−２０〜３０℃程
度、好ましくは約−１０’Ｃ〜室温下に、約３〜２４時
間で完結する。

く反応式−５〉 （１ｂ） （１ｄ） （１Ｃ） 〔式中Ｒ１、Ｒ２ａ、Ｒ３及びＲ４ａは前記に同じ。〕
上記反応式−５によれば、一般式（１）中Ｒ２及びＲ４
が水素原子である本発明化合物（１ｄ）は、Ｒ２及びＲ
４が共に低級アルキル基である本発明化合物（１ｂ）又
はＲ２が低級アルキル基、Ｒ４が水素原子である本発明
化合物（１ｃ）を加水分解することにより製造される。

上記加水分解反応は、適当なｗＩ媒中、塩基性化合物の
存在下に行なわれる。溶媒としては例えばメタノール、
エタノール等の低級アルコール類、ジエチルエーテル、
ＴＨＦ、ジオキサン等のエーテル類、アセトニトリル等
と水との混合溶媒を利用できる。塩基性化合物としては
例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチ
ウム等のアルカリ金属水酸化物等を用い得る。２等塩基
性化合物は、本発明化合物（１ｂ）又は（１Ｃ）に対し
、通常約２〜３倍モル量、好ましくは２〜２．２倍モル
量用いられる。反応は通常的０〜４０℃、好ましくは室
温下に好適に進行し、約０．５〜１２時間で完結する。

上記各反応式で示される反応により得られる目的化合物
は、通常の分離手段により容易に単離精製することがで
きる。該手段としては、溶媒抽出法、希釈法、蒸留法、
再結晶法、カラムクロマトグラフィー、プレパラテイブ
薄層クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィ
ー、ゲルクロマトグラフィー等を例示できる。

本発明化合物はそのままであるいは慣用の製剤担体と共
に人に投与することができる。投与単位形態としては特
に限定がなく必要に応じ適宜選択して使用される。斯か
る投与単位形態としては錠剤、散剤、顆粒剤、経口用溶
液等の経口剤、注射剤等の非経口剤等を例示できる。投
与されるべき有効成分の量としては特に限定がなく広い
範囲から適宜選択されるが所期の効果を発揮するために
は１日当り体重１ｋＧ当り０．０６〜１０■ｇとするの
がよい。また投与単位形態中に有効成分を１〜５００８
ｇ含有せしめるのがよい。

本発明に於て錠剤、カプセル剤、経口用溶液等の経口剤
は常法に従って製造される。即ち錠剤は本発明化合物を
ゼラチン、澱粉、乳糖、ステアリン酸マグネシウム、滑
石、アラビアゴム等の製剤学的賦形剤と混合し、賦形さ
れる。カプセル剤は本発明化合物を不活性の製剤充填剤
もしくは希釈剤と混合し、硬質ゼラチンカプセル、軟質
カプセル等に充填される。シロップ剤もしくはエリキシ
ル剤は本発明化合物を蔗糖等の甘味剤、メチル−及びプ
ロピルパラベン類等の防腐剤、着色剤、調味剤等と混合
して製造される。また非経口剤は常法に従って製造され
る。即ち非経口投与用薬剤は本発明化合物を滅菌した液
状担体に溶解して製造される。好ましい担体は水または
塩水である。所望の透明度、安定性及び非経口使用の適
応性を有する液剤は約１〜５００ｎ＋ｏの有効成分を、
水及び有機溶剤に溶解し且つ分子量が２００〜５０００
であるポリエチレングリコールに溶解して製造される。

斯かる液剤にはナトリウムカルボキシメチルセルローズ
、メチルセルローズ、ポリビニルピロリドン、ポリビニ
ルアルコール等の潤滑剤が含有されているのが好ましい
。さらには上記液剤中にベンジルアルコール、フェノー
ル、チメロサール等の殺菌剤及び防カビ剤、さらに必要
に応じ蔗糖、塩化ナトリウム等の等張剤、局所麻酔剤、
安定剤、緩衝剤等が含まれていてもよい。更に安定性を
高めるために非経口投与用薬剤は充填後冷凍され、この
分野で公知の凍結乾燥技術により水を除去することがで
きる。而−して使用直前に凍結乾燥粉末を再調製するこ
とができる。

実　　施　　例 以下、本発明化合物製造のための原料化合物の製造例を
参考例として挙げ、本発明化合物の製造例を実施例とし
て挙げる。次いで試験例を挙げる。

参考例１ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−へキシル
チオエチル）−アラニン−ｔ−ブチルエステル・α及び
β−異性体の製造 Ｓ−へキシル−Ｌ−システィンエチルエステル２．５ｇ
及び２−ブロムプロピオン酸−ｔ−ブチルエステル２．
３０のＨＭＰＡ６ＩＩ２溶液にトリエチルアミン１．５
ｍを加え室温下２４時間撹拌した。反応液を氷水にあけ
酢酸エチルで抽出した。

抽出液を十分水洗した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。抽出液を減圧留去し残渣をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィー（溶媒；エーテル：ｎ−ヘキサン＝１：２
）で分離精製し、先流出分より目的化合物のα−異性体
を無色油状物質として得た。収！１．２Ｑ。

２１＝ 〔α）　　　＋２７．３°　（ｃ−１，２、エタノ−ル
） ＮＭＲ（ＣＤＣ１２３）：δ値 ０．８８　（３Ｈ，ｔ、Ｊ＝５Ｈｚ　）、１．２７　（
３Ｈ，ｄ、Ｊ−７Ｈ２）、１．２９　（３Ｈ１ｔ、Ｊ−
７Ｈｚ　）、１．４〜１．８　　（８）−１１ｍ）　　
、１．４５　　（９Ｈ，Ｓ）　　、 ２．５５　　（２Ｈ１ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ　　）　　、２．
８０　　（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ　　）　　、３、　３
２　　（１Ｈ，ｑ、Ｊ−７Ｈｚ　　）　　、３．４６　
　（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ　　）　　、４．２０　　（
２Ｈ１ａｌ　Ｊ＝７Ｈｚ　　）後流出分より目的化合物
のβ−異性体を無色油状物質として得た。収１１．１ｇ
。

〔α）”１＝−４０，４°　（Ｃ−０，８、エタノ−ル
） ＮＭＲ（ＣＤ（１３）：δ値 ０．８９　（３Ｈ，ｔ、Ｊ＝５Ｈｚ　）、１．２９　（
３Ｈ，ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ　）、１．２９　（３Ｈ１ｄ１Ｊ
＝７Ｈｚ　）、１．４〜１．８　（８Ｈ，ｍ＞、 １．４７　（９Ｈ，ｓ）、 ２．５４　（２Ｈ，ｔ、Ｊ−７Ｈｚ　＞、２．７０　（
１Ｈ，ｄ−ｄ、Ｊ＝１３Ｈｚ　。

７．５Ｈ２”）、 ２．９２　　（Ｉ　Ｈｌ　６−ｄ、Ｊ−１３Ｈｚ　。

５Ｈ２）　　、 ３．２９　　（１Ｈ，ｑ、Ｊ−７Ｈ２）　、３．４７　
　（ＩＨ，ｄ−ｄ、Ｊ−５Ｈｚ　。

７．５Ｈｚ）、 ４．２１　　（２Ｈ，ｑ、Ｊ−７Ｈｚ　　）参考例２ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−ペンチル
チオエチル〕−７ラニンーｔ−ブチルエステル・α及び
β−異性体の製造 Ｓ−ベンチルーＬ−システィンエチルエステル８．６ｑ
、２−ブロムプロピオンｍ−ｔ−ブチルエステル８．２
０及びトリエチルアミン５．５１１１１１を用いて参考
例１の場合と同様に処理することにより無色油状の目的
化合物を得た。

先流出分（α−異性体） 収量３．９ｏ。

〔α）２５−＋２８．６’　　（ｃ−１，０、エタノ−
ル） ＮＭＲ（ＣＤＣ９３）：δ値 ０．９０　（３Ｈ，ｔ、Ｊ＝５．５Ｈｚ　）、１．２８
　（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ　）、１．２９　（３Ｈ，ｔ
、Ｊ−７Ｈｚ　）、１．４５　　（９Ｈ，ｓ）　、 １．３〜１．８　　（６Ｈ，ｍ）、 ２．５６　（２Ｈ，ｔ、Ｊ−７Ｈｚ　）、２．８１　　
（２Ｈ，ｄ、Ｊ−６Ｈｚ　）、３．３２　（ＩＨ，ｑ１
Ｊ＝７Ｈｚ　＞、３．４６　（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ　
）、４．２０　（２Ｈ，ｑｌ　Ｊ−７Ｈｚ　）後流出分
（β−異性体） 収量３．６ｇ。

ル） ＮＭＲ（ＣＤ（１３）：δ値 ０．９０　（３Ｈ，ｔ、Ｊ−５，５Ｈｚ　＞、１．３０
　（３Ｈ，ｄ１Ｊ＝７Ｈｚ　）、１．３０　（３Ｈ，ｔ
、Ｊ−７Ｈｚ　）、１．４７　（９Ｈ，Ｓ）、 １．３〜１．８　　（６Ｈ，ｍ）、 ２．２３　　（ＩＨ，ｂｒｓ　　） ２．５４　（２Ｈ，ｔ、Ｊ−７Ｈｚ　）、２．７０　（
ＩＨ，ｄ−ｄｌＪ−１３Ｈｚ　。

８Ｈｚ）　　、 ２．９２　（ＩＨ，ｄ−ｄ、Ｊ−１３Ｈｚ　。

５．５Ｈｚ　　＞　　、 ３．２９　（ＩＨ，Ｑ、Ｊ−７Ｈｚ　）、３．４５　（
ＩＨ，ｄ−ｄ、Ｊ−５，５Ｈｚ　。

８Ｈｚ）　　、 ４．２１　　（２Ｈ，Ｑ、Ｊ−７Ｈｚ　）参考例３ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−へキシル
チオエチルツーアラニン・α−異性体の製造 参考例１で得られたＮ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボ
ニル−２−ヘキシルチオエチルニン−ｔ−ブチルエステ
ルのα−異性体８００＋ΩをＴＦＡ５１１１２に溶かし
室温下３時間撹拌した。ＴＦＡを減圧上留去し、残渣を
氷水にあけ飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ４とし
塩化メチレンで抽出した。抽出液を水洗後無水硫酸ナト
リウムで乾燥した。抽出液を減圧留去し残渣を塩化メチ
レンより再結晶し、目的化合物のα−異性体を得た。収
量５８０ｍｇ。

ｍｐ．１３４−１３６℃。

２１＝ 〔α）　　　＋２０．９°　（ｃ＝０．６、ＤＭＦ）口 参考例４〜６ 上記参考例３と同様にして下記第１表に記載の各化合物
を得た。

参考例７ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−ヘキシル
チオエチル）−（Ｒ８）−アラニンの製造 Ｓ−ヘキシル−し−システィンエチルエステル１．４０
のエタノール２５１１１１及び水１０−の混液に氷冷下
ピルビン酸２．６Ｑを加え、４Ｎ−水酸化ナトリウム水
溶液でｐＨ７に調製した。水素化ホウ素シアノナトリウ
ム７５０＋ａを徐々に加え、さらに室温下１４時間撹拌
した。溶媒を減圧上留去し残渣を飽和炭酸水素ナトリウ
ム水溶液に溶かし弱アルカリ性とした。エーテル洗浄後
、水層を１Ｎ−塩酸でｐＨ４とし酢酸エチルで抽出した
。

抽出液を十分水洗、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧上
留去し、目的化合物を得た。収量１．５Ｑ。

実施例１ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−ヘキシル
チオエチルツーアラニル−（Ｓ）−プロリン−１−ブチ
ルエステル・α−異性体の製造 参考例３で得られたＮ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボ
ニル−２−ヘキシルチオエチル）−アラニン・α−異性
体１．ＯＱと（Ｓ）−プロリン−ｔ−ブチルエステル６
２０＋ｉｏのＤＭＦ１０Ｗ１１溶液に氷冷撹拌下、ＤＥ
ＰＣ（９０％含量）６５０ｉ。

の０ＭＦ２−溶液を加えた。さらにトリエチルアミン０
．５−の０ＭＦ２−溶液をゆっくり滴下した。水冷下２
時開撹拌した後、さらに室温下１０時間撹拌した。反応
液を氷水にあけ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え
弱アルカリ性とした後、酢酸エチルで抽出した。抽出液
を十分水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。抽出液
を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（溶媒：クロロホルム：メタノール−３０：１）で
精製し、目的化合物のα−異性体を無色油状物質として
得た。収量１．５ａ。

〔α）２１−−２８．２°　（Ｃ−０，８、エタノ−ル
） ＮＭＲ（ＣＤＣＱ３）：δ値 ０．８８　（３Ｈ，ｔ、Ｊ−５Ｈｚ　）、１．２〜１．
５　（６Ｈ，ＣＨ３Ｘ２）、１．４５．１．４６　（９
Ｈ１各Ｓ）、１．２〜１．８　　（８Ｈ，ｍ）　　、１
．８〜２．５　　（４Ｈ，ｍ）　　、２．５〜３．０　
　（４Ｈ，ｍ）　　、３．４〜３．９　　（４Ｈ，ｍ＞
　　、４．１〜４．５　　（３Ｈ，ｍ） 実施例２ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２＝ヘキシル
チオエチル〕−アラニル−（Ｓ）−プロリン−ｔ−ブチ
ルエステル・β−異性体の製造 参考例４で得られたＮ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボ
ニル−２−へキシルチオエチルツーアラ。

二ン・β−異性体１．ＯＱより、実施例１と同様にして
目的化合物のβ−異性体を無色油状物質として得た。収
量１．４Ｑ。

ル） ＮＭＲ（ＣＤＣＱ３）：δ値 ０．８８　　（３Ｈ，ｔ、Ｊ−５Ｈｚ　　）、１．２９
　　（３Ｈ，ｔ、Ｊ−７Ｈｚ　　）、１．２９　　（３
Ｈ，ｄＳ　Ｊ−６，５Ｈｚ　　）　　、１．４４．１．
４６　（９Ｈ，各Ｓ）、１．２〜１．８　　（８Ｈ，ｍ
＞　、 １．８〜２．２　　（４８１ｍ）　　、２．５４　　（
２Ｈ，ｔ、Ｊ−７Ｈｚ　　）　、２．７０　　（ＩＨｌ
　６−６％　Ｊ−１３Ｈｚ　　１７．５Ｈ２）　　、 ２．９２　　（ＩＨ，ｄ−ｄ、Ｊ−１３Ｈｚ　　。

５Ｈ２）　　、 ３．２〜３．７　　（４Ｈ，ｍ）　、 ４．２０　（２Ｈ，ｑ、Ｊ−７Ｈｚ　　＞４．３〜４．
５　　（ＩＨｌ　ｍ）　　、実施例３ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−ペンチル
チオエチル〕−７ラニルー（Ｓ）−プロリン−ｔ−ブチ
ルエステル・β−異性体の製参考例６で得られたＮ−（
（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−ペンチルチオエ
チル）−アラニン・β−異性体１，５ｇより実施例１と
同様にして目的化合物のβ−異性体を無色油状物質とし
て得た。収量２．２ＣＪ。

（α）２１＝−９４，３°　（ｃ−１，０、エタノ−ル
） ＮＭＲ（ＣＤＣｅ３）：δ値 ０．８９　（３Ｈ１ｔ１Ｊｍ５，５Ｈｚ　＞、１．２９
　（３Ｈ，ｄ、Ｊ−７Ｈｚ　）、１．２９　（３ＨＳｄ
、Ｊ−７Ｈｚ　）、１．４４．１．４７　（９Ｈ，各Ｓ
）、１．３〜１．８　（６Ｈ，ｍ）、 １．８〜２．３　（４Ｈ，ｍ）、 ２．５２　（２Ｈ，ｔ、Ｊ−７Ｈｚ　）、２．６８　（
ＩＨ，ｄ−ｄ％Ｊ＝１３Ｈｚ　１７Ｈｚ）、 ２．９０　（ＩＨ，ｄ−ｄ、Ｊ−１３Ｈｚ　１６Ｈｚ　
＞、 ３．３１　（ＩＨ，Ｑ、Ｊ−７Ｈｚ　）、３．５８　　
（ＩＨｌ　ｄ−ｄ、Ｊ−７Ｈｚ　　、６Ｈｚ）　　、 ３．４〜３．７　　（２Ｈ，ｍ）　　、４．２０　　（
２日、ｃｓ、Ｊ−７Ｈｚ　　＞４．３〜４．５　　（Ｉ
Ｈ，ｍ）　　、実施例４ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−ヘキシル
チオエチルツーフラニル−（Ｓ）−プロリン・α−異性
体及びそのＬ−アルギニン塩の製造 実施例１で得られたＮ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボ
ニル−２−ヘキシルチオエチルクーアラニル−（Ｓ）−
プロリン−ｔ−ブチルエステル・α−興性体６７０園ｇ
及びアニソール０．５１１１１を■ＦＡ４−に溶かし、
室温下２．５時間撹拌した。

ＴＦＡを減圧上留去し、残渣を飽和炭酸水素ナトリウム
水溶液に溶かしｐＨ８とした。エーテルで洗浄後、水層
を１Ｎ−塩酸でｐＨ４とし塩化メチレンで抽出した。抽
出液を水洗、無水硫酸ナトリウム乾燥後減圧留去し、目
的化合物のα−異性体を無色油状物質として得た。収量
５４０ｕ。

上記で得たα−異性体５００１Ｂをエタノール１０−に
溶かし、Ｌ−アルギニン２１１ｏの水４戒溶液を加えた
。減圧上溶媒を留去し、残渣にエタノールを加え数回減
圧上留去し、残渣に無水エーテルを加え析出した結晶を
枦取し、目的化合物のし一アルギニン塩を得た。収［１
５８０ｏ。

ｍｐ、６３〜６５℃。

ル） 実施例５ Ｎ−〔（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−へキシル
チオエチルクーアラニル−（Ｓ）−プロリン・β−異性
体及びそのＬ−アルギニン塩の製造 実施例２で得られたＮ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボ
ニル−２−へキシルチオエチル）−アラニル−（Ｓ）−
プロリン−１−ブチルエステル・β−異異性体６９０ｍ
次り実施例４と同様にして目的化合物のβ−異性体を無
色油状物質として得た。

収量５２０■ｇ０ 目的化合物のし一アルギニン塩。

ｒｌ）、　７３〜７６℃。

ル） 実施例６ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−ペンチル
チオエチルツーアラニル−（Ｓ）−プロリン・β−異性
体及びそのＬ−アルギニン塩の製造 実施例３で得られたＮ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボ
ニル−２−ペンチルチオエチルツーアラニル−（Ｓ）−
プロリン−ｔ−ブチルエステル・β−異異性体６６０ｍ
次り実施例４と同様にして目的化合物のβ−異性体を無
色油状物質として得た。

収量５９０１Ｌ 目的化合物のＬ−アルギニン塩。

ｍｐ、７２〜８０℃。

ル） 実施例７ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−へキシル
チオエチル）−（Ｒ８）−アラニル−（Ｓ）−プロリン
−ｔ−ブチルエステルの製造参考例７で得られたＮ−（
（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−ヘキシルチオエ
チル）−（Ｒ８）−アラニン１．　Ｏｇより、実施例１
と同様の方法で目的化合物を無色油状物質として得た。

収量１．４Ｑ。

ル） ＮＭＲ（ＣＤＣＱ３）：　６値 ０．８８　（３）１．ｔＳＪ−５）−１ｚ　）、１．２
〜１．４　（６Ｈ，ＣＨ３ｘ２）、１．４４．１．４９
　（９Ｈ１各Ｓ）、１．２〜１．８　（８Ｈ，ｍ）、 １．８〜２．３　（４Ｈ，ｍ）、 ２．３〜２．９　（４Ｈ，ｍ）、 ３．３〜３．８　（４Ｈ，ｍ）１． ４．０〜４．５　（３Ｈ，ｍ） 実施例８ Ｎ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボニル−２−へキシル
チオエチル）−（Ｒ８）−アラニル−（Ｓ）−プロリン
及びそのＬ−アルギニン塩の製造 実施例７で得られたＮ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボ
ニル−２−ヘキシルチオエチル）−（Ｒ８）−アラニル
−（Ｓ）−プロリン−１−ブチルエステル６００　ｍｇ
、アニソール０．４１ｉ１２及びＴＦＡ４１１１１２よ
り実施例４と同様の方法で目的化合物を無色油状物質と
して得た。収量４８０ｍａ。

目的化合物のＬ−アルギニン塩。

ｍ＋）、５５〜６５℃。

ル） 実施例９ Ｎ−（（Ｒ）−１−カルボキシ−２−へキシルチオエチ
ルクーアラニル−（Ｓ）−プロリン・α−興性体の製造 実施例４で得られたＮ−（（Ｒ）−１−エトキシカルボ
ニル−２−ヘキシルチオエチル〕−アラニル−（Ｓ）−
プロリン・α−異性体６００ｍｇのエタノール８鵬溶液
に水冷撹拌下１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液３．２０を
加えた。室温下２．５時間撹拌した後、ダウエックス５
０Ｗ−Ｘ８（Ｈ＋）のカラムに供した。十分水洗後生酸
物を４％ピリジンで溶離し、目的物画分を集め凍結乾燥
した。得られた粉末状物質をエタノール−エーテルより
再沈澱し目的化合物を得た。収量２７０濡Ｑ０ ｍｐ、１０９〜１１２℃。

ル） 実施例１０〜１２ 上記実施例９と同様にして下記第２表に記載の各化合物
を得た。

試験例 ウサギ肺アセトンパウダー〈シグマ社製）より精製した
酵素液１００μＱと試料溶液１００μＱとを混合し、３
７℃にて１０分間緩かに振盪し、これに基質として６．
９９ｍＭのヒブリルーヒスチジルーロイシン（蛋白奨励
金製）溶液１００μＱを加え、振盪下に３７℃にて４５
分間反応させた後、１Ｎ−硫酸溶液２００μＱを添加し
て反応を停止させた。反応によって生成した馬尿酸を抽
出するため、飽和量の塩化ナトリウムとジエチルエーテ
ル２ＩＩＩ１２を反応液に加え、１５分間激しく振盪し
た後、遠心分離（２００Ｏｒｐｍ１５分）を行い、エー
テル１１．５１１１１を分取した。エーテル層は、溶媒
を留去した後、１．５−の蒸留水に溶解して２２８ｎｍ
の吸光度を測定した。対照としては、試料溶液の代りに
蒸留水１００μＱを加え、以下、上記と同様の操作を行
った。

阻害活性は、対照の吸光度より試料溶液を添加した場合
の吸光度を差し引き、これを更に対照の吸光度にて餘し
た値を百分率として阻害率を算出し、５０％の阻害率を
示すために必要な試料の反応液中の濃度（ＩＣ５ｏ）と
して表わした。

供給化合物は以下の通りであり、上記試験の結果を下記
第３表に示す。

供試化合物ＮＯ，化　合　物　名 Ｎ−（（Ｒ）−１−カルボキシ −２−へキシルチオエチル〕− アラニル−（Ｓ）−プロリン・ β−異性体（実施例１０の化合 物） Ｎ−（（Ｒ）−１−カルボキシ −２−へキシルチオエチル）− （Ｒ８）−アラニル−（Ｓ）− プロリン（実施例１１の化合物） Ｎ−（（Ｒ）−１−カルボキシ −２−ペンチルチオエチル）− アラニル−（Ｓ）−プロリン・ β−異性体（実施例１２の化合 物） Ｎ−〔（ｓ）−１−カルボキシ −３−メチルチオプロピル〕＝ （Ｒ８）−アラニル−（Ｓ）− プロリン（特開昭５５− ８１８４５号公報中の実施例 １７の化合物に相当する） Ｎ−１８）−１−メトキシ力 シボニル−３−メチルチオプロ ピル）−（Ｒ３）−アラニル− （Ｓ）−プロリン（特開昭５５ 一８１８４５号公報中の実施例 １６の化合物に相当する） 第　　　３　　　表 第３表より、本発明化合物群は最も活性の強い公知化合
物（供試化合物ＮＯ，４）と比較しても、夫々約２４倍
（供試化合物Ｎ０．１）、約９．４倍（供試化合物Ｎ０
．２）及び約１２２倍（供試化合物Ｎｏ、３）強い阻害
活性を示すことが判る。

（以　上） 手続補正書翰剖 昭和５９年８月２０日 一、ｊ、＋。

一ヅ・ 特許庁長官　　志　賀　　　学　殿 １　事件の表示 昭和５９年特許願第１２９８９３号 ２　発明の名称 プロリン誘導体 ３　補正をする者 事件との関係　　特許出願人 株式会社大塚製薬工場 ４代理人 大阪市東区平野町２の１０　沢の鶴ビル自発 ６　補正の対象 明細書中「発明の詳細な説明」の項 ７　補正の内容 別紙添付の通り 補正の内容 １）　明細書第３７頁第４行にｒ３．２ｇＪとあるをｒ
３．２ｍＪと訂正する。

（以　上） 手続補正書（自船 昭和６０年４月２４日 昭和５９年　特　許　願第１２９８９３　号２、Ｊｉ［
０）名称　プ。す、誘導体 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 株式会社大塚製薬工場 ４、代理人 大阪市東区平野町２の１０沢の鶴ビル電話０６−２０３
−０９４１（代）８、補正の内容 別紙添附の通り 補　　正　　の　　内　　容 １　明細書第１３頁第２行に「へ〇カルボン酸」とある
を「へ〇４酸」と訂正する。

２　明細書第１４頁第２行に（−Ｎ、Ｎ−、、＋シクロ
」とあるを「Ｎ、　Ｎ−ジシク０」と訂正する。

５　明細書第１４頁第７行に「フォスフォリルアニド」
とあるを「）オスフオリルアジド」と訂正する。

斗　明細書第１４頁第８行に「フォスフォリル」とある
を「フオスフオ０」と訂正する。

５　明細書第１８頁第１０行に「賦形」とあるを「調製
」と訂正する。

６　明細書第１８頁第１９行に「塩水」とあるを「生理
食塩水」と訂正する。

７　明細書第１９頁第１９行に「・・・・・・・・を挙
ける。」とあるを次の通シ訂正する。

［・・・・・・・・を挙げる。尚各側において、Ｓ−ア
ル牛ルーＬ−システィンエチルエステルと２−プ０ムプ
０じオン酸−を−づチルエステルとの反応生成物の２個
の異性体のうちシリカゲルクロマドタラフィー（エーテ
ル−ｎ−へ牛サン系）において先流出分をα−異性体、
後流出分をβ−異性体と称する。以下とのα−異性体を
用いて誘導された化合物をα−異性体と称し、又このβ
−異性体を用いて誘導された化合物をβ−異性体と称す
。」 ８　明細書第２４頁第２行にｒＣＩＨ，ｂｒｚ＞Ｊとあ
るを「（ｌＨ，Ａｙ　　ｚ）、」と訂正する。

９　明細書第２６頁に記載の第１表の項目の項に「※」
とあるを「異性体（８）」と訂正する。

１０　明細書第２７頁第３行に「（Ｒ５）」とあるをｒ
（Ｒ，Ｓ）Ｊと訂正する。

１１　　明細書第３５頁第３行に「（Ｒ５）」とあるを
ｒ（’？、Ｓ）Ｊと訂正する。

１２　明細書第３５頁第６〜７行に「（Ｒ５）」とある
をｒ（Ｒ，Ｓ）Ｊと訂正する。

１３　　明細書第３６頁第３行に「（Ｒ５）」とあるを
ｒ（Ｒ，Ｓ）Ｊと訂正する。

１４　明細書第３６頁第７〜８行に「（Ｒ５）」とある
な「（Ｒ９Ｓ）」と訂正する。

１５　　明細書第３７頁第７行に「じリジン」とあるを
「じリジン水溶液」と訂正する。

１６　明細書第３８頁に記載の第２表の項目の項に「※
」とあるを「異性体（８）」と訂正し、その「実施例番
号１１」の欄に「Ｒ５」とあるを「ＲｌＳ」と訂正する
。

１７　　明細書第４０頁に記載の第３表中、供試化合物
Ａ２の化合物塔中に「（Ｒ５）」とあるをｒ（Ｒ，Ｓ）
Ｊと訂正する。

１８　明細書第４１頁に記載の第３表中、供試化合物Ａ
４の化合物塔中にｒ（Ｒ５）　ｊとあるをｒ（Ｒ，Ｓ）
Ｊと訂正する。

１９　明細書第４１頁に記載の第３表中、供試化合物Ａ
５の化合物者の項の記載を次の通シ訂正する。

ｒ”−（（Ｓ）　−１−メト牛ジカルボニルー３−メチ
ルチオプ０じル）−（Ｒ，Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−プ
ロリン・塩酸塩（特開昭５５−８１８４５号公報中の実
施例１６の化合物の塩酸塩に相当する）」 （以　上）

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１はペンチル基又はヘキシル基を示す。 Ｒ＿２及びＲ＿４は同一又は異なって水素原子又は低級
   アルキル基を示す。Ｒ＿３は低級アルキル基を示す。〕 で表わされるプロリン誘導体及びその塩。