JPS608382A - 螢光性粒子の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は螢光性粒子の製造法に関する。

０．１〜１００μｍの重合体粒子は粒径のスタンダード
物質、クロマト用担体、アフィニティークロマト用担体
９診断用ビーズなどとして使用されている。また粒径の
スタンダード物質２諭断用ビーズとして使用する場合は
粒子自身に色があると有利でアシ、用途によっては螢光
性があるとさらに有利となる。

従来、０．１〜１００μｍの重合様粒子に色または螢光
性を付与しようとする場合１着色物質、螢光物質゛を重
合体粒子中にまぜ込む方法または螢光物質で重合体粒子
を被覆する方法などが採用されている。しかし、このよ
うに物理的に着色または螢光性を付与した場合９色や螢
光性が経時的に衰退し、また９色や螢光性を定量的に付
与するのが困難であるという欠点があった。

本発明はこのような問題点を解決し、化学結合によって
螢光物質を重合体粒子に化学結合させた螢光性粒子を提
供することを目的とする。

すなわち本発明は、アミノ基を有する粒子およびアミノ
基と反応性の官能基を有する螢光物質を反応させること
を特徴とする螢光性粒子の製造法に関する。

アミノ基を有する粒子としては、ガラス粒子。

シリカ粒子等の無機粒子にアミノ基を導入したもの、ア
ミノ基を有する有機重合体粒子などがある。

ガラス粒子またはシリカ粒子にアミノ基を導入するため
Ｋは、″ガラス粒子またはシリカ粒子とγ−アミノプロ
ピルトリエトキシシランなどの°アミノ基含有シランカ
ップリング剤をトルエンなどの不活性溶媒中で反応させ
る。

アミン基を有する重合体粒子は、スチレン−ジビニルベ
ンゼン系重合体粒子に、塩化亜鉛などのフリーデルクラ
フト触媒ｄ存在下でクロルメチルエチルエーテルを反応
させ１重合体粒子にクロルメチル基を導入し、さらに、
フタルイミドカリウムと反応させ、その後加水分解する
ことなどによシ得られる。

さらに、アミン基を有する重合体粒子は、一般式（ＩＩ Ｓ　１ＹｎＲ３−ｎ　（ＩＩ （ただし１式中、Ｙは加水分解可能な基、Ｒは不活性な
有機基であわ、ｎは１〜３の整数である）で表わされる
基ζ有する有機重合体を架橋処理して得られる架橋重合
体粒子と一般式（ｎ）Ｚｍ　Ｓ　ｉ　Ｙｎ　Ｒ４−ｍ　
−ｎ　（ＩＩ）（ただし９式中、Ｚはアミン基を有する
有機基。

ｍは１〜３の整数であり、Ｙ、Ｒおよびｎは一般式ＣＩ
＋の場合と同様であり、ｍ−１−ｎは４以下でちる）で
表わされる化合物を反応させることによって製造するこ
とができる。

一般式（Ｉｌで表わされる基を有する有機重合体は。

一般式＋１）で表わされる基をケイ素分で、該重合体中
に、１〜１１．３重量％になるように含まれるのが好ま
しい。一般式（Ｉ）で表わされる基が少なすぎると水性
懸濁重合によって架橋処理したときに。

架橋が不充分になる。一般式（１）で表わされる基は上
記有機重合体中に１特に１．４重量％以上含まれるのが
好ましい。

上記一般式ｍ中、基Ｙは加水分解可能な基で炭素数１〜
６のアルコキシ基、炭素数１〜６のアシルオキシ基、炭
素数１〜１４のオキシモ基などが好ましく９例えばメト
キシ基、エトキシ基、ブトキシ基のようなアルコキシ基
、ホルミルオキシ基。

アセトキシ基又はゾロピオンオキシ基のようなアシルオ
キシ基、０Ｎ＝Ｃ（ＣＨ３’）２．−０Ｎ＝Ｃ（ＣＨ３
）Ｃ２Ｉ（Ｓ　、　−０Ｎ＝Ｃ（０２Ｈ５）Ｚのような
オキシモ基などの加水分解して水酸基を生成する基、　
−Ｎ）（ＣＨｓ　。

−ＮＨＣｚ　Ｈｓ　、およびＮＨ（Ｃａ　Ｈｓ　）のよ
うなアルキルアミノまたはアリールアミノ基などである
。置換基Ｙはｎが２または３のとき同一であってもよい
し。

文具なっていてもよい。基Ｒは不活性な一価の有機基で
好ましくは、炭素数１〜１８の炭化水素基で１．例ｔば
メチル、エチル、プロピル、ブチル、テトラデシル、オ
クタデシル基のようなアルキル基、フェニル基、ベンジ
ル基、トリル基等のアリール基、アラルキル基、アルカ
リール基等である。

一般式（Ｉ）で表わされる基を有する有機重合体は。

次のような方法で得ることができる。

（１）　一般式（ＩＩＩ） ＸＳ　ｉ　Ｙｎ　Ｒ３−ｎ　（ｆｉｌｌ（ここで、Ｘは
、共重合可能な二重結合を有する基であり、Ｙ、Ｒおよ
びｎは一般式（１）と同様である。）で表わされるビニ
ル系単量体を重合または該ビニル系単量体と他のビニル
系単量体を共重合させ多。ここで１重合法としては、塊
状重合、溶液重合等任意である。

上記基Ｘは共重合可能な二重結合を有する基であるが９
例えばビニル基、アリル基、ブテニル基環ノアルケニル
基、シクロヘキセニル基、シクロペンタジェニル基、シ
クロヘキサジェニル差等ノシクロアルケニル基、γ−メ
タクリロキシプロピル基等の不飽和アシロキシアルキル
基、γ−メタクリロギシエチルゾロビルエーテル基等の
不飽和アシロキシアルコキシ基、　ＣＨ２＝Ｃ（ＣＨａ
）　Ｃ００（ＣＨｌｌ）２０ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２
０（ＣＨ２）３−等である。このうち最も好ましいもの
はγ−メタクリロキシゾロヒル基等の不飽和アシロキシ
アルキル基まタハγ−メタクリロキシエチルゾロビルエ
ーテル基ｅの不飽和アシロキシアルコキシ基である。

上記一般式（町で表わされるビニル系単量体として特に
好ましい化合物は、一般式＋１’ｉ’）え・ＳｉＹ二　
（ＩＶＩ （ただし１式中　Ｘｌはアルケニル基、不飽和アシルア
ルキル基、Ｙ′はアルキル基またはアリール基である。

）で表わされる化合物である。

一般式（ＩＩＴ）で表わされるビニル系単量体としては
。

γ−メタクリロキシゾロピルトリメトキシシラン。

γ−メタクリロキシプロピルトリエトキシシラン。

γ−アクリロキシトリメトキシシラン、γ−アクリロキ
シトリエトキシシラン、アリルトリメトキシシラン、ア
リルトリエトキシシラン、ビニルトリメトキシシラン、
ビニルトリエトキシシラン。

エチリルトリメトキシシラン、エチリルトリエトキシシ
ラン等があり、これらのうち、最も好ましいものは、γ
−メタクリロキシプロピルトリメトキシシランである。

他のビニル系単量体としてはアクリル酸系単量体および
その他のビニル系単量体が使用できる。

アクリル酸系単量体としては、アクリル酸、メタクリル
酸およびこれらの誘導体がある。誘導体としては、メチ
ルアクリレート、エチルアクリレート、ブチルアクリレ
ート、ラウリルアクリレート等のアルキルアクリレート
、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、ブチ
ルメタクリレート、２ウリルメククリレート等のアルキ
ルメタクリレート、２−ヒドロキシエチルアクリレート
。

２−ヒドロキシプロピルアクリレート、ヒドロキシプロ
ピルアクリレート等のヒドロキシアルキルアクリレート
、トリメチロールプロパンモノアクリレート、トリメチ
ロールエタンモノアクリレート等の多価アルコールのア
クリル酸モノエステル。

ポリエチレングリコールモノアクリレート、ポリプロピ
レングリコールモノアクリレート等のポリアルキレング
リコールのアクリル酸モノエステル。

２−ヒドロキシエチルメタクリレート、２−ヒドロキシ
ブロイルメタクリレート、ヒドロキシブチルメタクリレ
ート等のヒドロキシアルキルアクリレート、トリメチロ
ールプロパ／モノメタクリレート、トリメチロールエタ
ンモノメタク・Ｖレート等の多価アルコールのメタクリ
ル酸モノエステル。

ポリエチレングリコールモノアクリレート、ポリプロピ
レングリコールモノメタクリレート等のポリアルキレン
グリコールのメタクリル酸モノエステル、ジエチルアミ
ノエチルアクリレート等のジアルキルアミノアルキルア
クリレート、ジエチルアミンエチルメタクリレート等の
ジアルキルアミノアルキル９戸タフリレート、アクリル
アミド、メタクリルアミド、グリシジルアクリレート、
グリシジルメタクリレート等さらに、上記ヒドロキシア
ルキルアクリレート、ヒドロキシアルキルメタクリレー
ト、多価アルコールのアクリル酸モノエステル、多価ア
ルコールのメタクリル酸モノエステル、ポリアルキレ／
グリコールのアクリル酸モノエステルおよびポリアルキ
レングリコールのメタクリル酸モノエステルのメチルエ
ーテル、エチルエーテル、フロビルエーテル、メチルエ
ーテル。

ペンチルエーテル等のアルキルエーテルなどがある。

アクリル酸系単量体以外の一般式＋ＩＩＩ）で表わされ
るビニル系単量体と共重合させ得るビニル系単量体とし
ては、マレイ／酸、フマール酸、イタコン酸およびこれ
らのアクリル酸またはメタクリル酸誘導体と同様の誘導
体、ビニルピリジン、ビニルピロリドン、酢酸ビニル、
アクリロニトリル、スチレンまたはクロロスチレン、ビ
ニルトルエン。

α−メチルスチレン等のスチレン誘導体などかある。

上記ビニル系単量体の一部に、ジビニルベンゼン、エチ
レングリコールジメタクリレート、エチレングリコール
ジアクリレート、トリメチロールプロパントリメタクリ
レート、トリメチロールプロパンドリアクリレート等の
架橋性単量体を全量中、２重量％以下で使用してもよい
。架橋性単量体が多すぎると有機溶媒に溶けにくくなる
。

目的の架橋重合体粒子を親水性にするためには。

上記ビニル系単量体全量中に１分子中にヒドロキシル基
、カルボキシル基、アンド基、アルコキシ基等を有する
単量体、ビニルピリジン、ビニルピロリドン、酢酸ビニ
ル等の単量体を１０モルチ以上使用するのが好ましい。

上記重合に使用される好適な重合開始剤としては、過酸
化ベンゾイル、過酸化ジクロルベンゾイル、ジクミルペ
ルオキシド、ジー第３−ブチルペルオキシド、２．５−
ジ（ペルオキシベンゾエート）ヘキシン−３，１，３−
ビス（第３ブチルペルオキシイソプロビル）ベンゼン、
過酸化ラウロイル。

第３−ブチルベルアセテート、ス５−ジメチルー２．５
−シ（第３７’チルペルオキシ）ヘキシン−３゜４５−
ジメチル−２，５−ジ（第３ブチルペルオキシ）ヘキサ
ンおよび第３ブチルペルベンゾエート。

メチルエチルケトンパーオキサイド、メチルシクロヘキ
サノンパーオキサイド等の有機過酸化物。

アゾビス−イソブチロニトリルおよびジメチルアゾジイ
ソブチレート等のアゾ系化合物がアリ、これらの一種又
は二株以上が使用できる。この使用量はビニル系単量体
の徨類および得られる重合体の目的とする分子量によシ
決められるものであるが、好ましくは上記と＝ｙ系単量
体に対して０．１〜４．０重量％使用される。

上記重合を溶液重合で行なう場合、ビニル系単量体およ
び生成物であるポリマーが可溶な有機溶媒を選べばよく
特に制限がない。たとえばアクリル酸系単量体とγ−メ
タクリロキシゾロビルトリメトキシシランとの反応の場
合は、メチルエチルケトンなどを用いることができる。

このようにして合成されたポリマーは親水性ではめるが
、水に不溶性であるため、以後の工程で水性媒体中に懸
濁させて、架橋重合体粒子とすることができる。

（２）　カルボキシル基、水酸基、アミド基、エポキシ
基などの官能基を持つビニル系重合体（たとえばスチレ
ン−無水マレイン酸共重合体、アクリル酸ブチル−メタ
クリル酸共重合体、グリシジルメタクリレート−βヒド
ロキシメタクリレート共重合体、メタクリル酸ブチル−
アクリルアマイド共重合体等の共重合体、その他上記ビ
ニル系単量体中、カルボキシル基、水酸基、アミド基、
エポキシ基等を有する単量体を使用して得られる重合体
などかあシ、これらの重合体の構成成分として上記架橋
性単量体が２重量−以下含まれていて−もよい。）に一
般式（ＩＶ） Ｘ”　Ｓ　ｉ　Ｙｎ　Ｒａ　−ｎ　（ＩＶ）（ここで、
Ｘ″はカルボキシル基、水酸基、アミド基、エポキシ基
等の官能基と反応性の基でアシ。

Ｙ、Ｒおよびｎは一般式＋１＞と同様である。）で表わ
される化合物をグラフト反応させる。

なお、目的の架橋重合体粒子を親水性にするためには、
上記例示の共重合体または重合体は、成分として、親水
性を付与する基を有する重合性モジ基に対しては、カル
ボキシル基、アミン基等。

アミ７基に対しては、エポキシ基、カルボキシル基等で
ある。

一般式（■）で表わされる化合物としては、たとえばγ
−グリシドキシゾロビルトリメトキシシラン（アミノエ
チル）γ−アミノプロピルトリメトキシシラン（ＨｚＮ
Ｃ２Ｈ４ＮＨＣ３Ｈｓ８ｉ（ＯＣＨ３）３）　、　γ−
アミノプロピルトリエトキシシラン（ＨｚＮ′ＣａＨｅ
８ｉ　（ＯＣｔＨｓ）ｓ）などがある。

反応方法を例示すると、たとえばアクリル酸ブチル−メ
タクリル酸共重合体のトルエンやキシレンなどの高沸点
溶媒液にｒ−グリシドキシプロピルトリメトキシシラン
を加え８０℃以上に加熱し攪拌する。

なお、上記一般式＋１）で表わされる基を有する有機重
合体は、一般式（Ｉ）で表わされる基を該有機重合体中
に、ケイ素分で１．０重量−以上有することにより、水
に難溶性または不溶性である。

一般式（１）で表わされる基を有する有機重合体を非反
応性有機溶媒に溶解して、水性媒体中に懸濁させ、一般
式＋１）で表わされる基を加水分解し、縮合反応させて
、架橋処理と共に粒子化し、架橋重合体粒子を得ること
ができる。

ここで非反応性有機溶媒としては、一般式ｔ１）で表わ
される基を有する有機重合体を溶解し、水に難溶性また
は不溶性であシ、かつ目的の架橋重合体粒子を溶解しな
いものが使用され９例えば、ベンゼン、トルエン、キシ
レン、ジエ≠ルベンゼン。

クロロベンゼン等の芳香族系溶媒、ｎ−ドデカン。

ｎ−オクタン、シクロヘキサン等の脂肪族または脂環族
系溶媒、ｎ−プロピルアセテート、ｎ−ブチルアセテー
トなどのエステル系溶媒、メチルイソブチルケトン、シ
クロヘキサノンなどのケトン系溶媒、アミルアルコール
、オクチルアル゛コールなどのアルコール系溶媒などが
°ある。テトラエトキシシランなどのアルコキシ変性オ
ルガノシランも利用できる。なお、このようにして得ら
れる架橋重合体粒子はほとんどの有機溶媒に離溶性また
は不溶性である。

非反応性有機溶媒の主な使用目的は、一般式（１）で表
わされる基を有する有機重合体を水性媒体中に懸濁させ
るための油滴化剤および反応媒体である。また、得られ
る架橋性重合体粒子は非多孔性。

多孔性のどちらでもよいが１表面積が大きいという点で
多孔性であることが望ましく、非反応性有機溶媒は、得
られる架橋重合体粒子を多孔性にするための細孔調節剤
でもある。従って実際に使用する場合には、一般式（Ｉ
）で表わされる基を有する有機重合体に対する溶解性と
架橋（網状化）後の重合体粒子に対する膨潤度を考慮し
て溶媒の種類と量を決めればよい。

非反応性有機溶媒としては、油滴化剤９反応媒体および
細孔調節剤の三種の機能上、イソアミルアルコール、酢
酸ブチル、シクロヘキサノン、クロロベンゼン等が特に
好ましい。

また、上記非反応性有機溶媒は、二種以上併用して、上
記三種の機能を調整することができる。

非反応性有機溶媒は、一般式（１）で表わされる基を有
する有機重合体に対して５０〜３００重量％使用される
のが好ましい。該有機溶媒の使用量が少なすぎると懸濁
化が困難になシ、多すぎると得られる多孔性架橋重合体
粒子の強度が低下し、好ましくない。

非反応性有機溶媒は、その一部を細孔調節のために、一
般式（Ｉｌで表わされ゛る基を有する有機重合体の非反
応性有機溶媒液と別個に、加水分解または縮合反応途中
に水性媒体に添加することができる。

また１本発明において、一般式（１１で表わされる基を
有する有機重合体の非反応性有機溶媒溶液中に、メチル
エチルケトン、アセトン等の水溶性有機溶媒が含まれて
いてもよい。このような水溶性有機溶媒は、他の経路で
添加される場合を含め。

多すぎると懸濁時に分散安定性を低下させるので。

水性媒体中の水に対して１０重９％以下で使用されるの
が好ましい。このような水溶性有機溶媒は例えば、一般
式（Ｉ）で表わされる基を有する有機重合体の合成時に
使用される。

一般式（Ｉｌで表わされる基を有する有機重合体は。

上記のように水性媒体中に懸濁させられ、一般式（１１
で表わされる基の加水分解および縮合反応を行なわせる
。この反応をγ−メタクリロキシグゾロルトリメトキシ
７ランとβ−ヒドロキシエチルメタクリレートの共重合
体を例に、模式的に示すと次のようになる。

加水分解および縮合反応の反応温度は、油滴の破壊が起
こらない範囲であれば、室温から１００℃の間で任意に
選べるが効果的な反応を行なう上では７０℃以上が好ま
しい。さらにジブチル錫ジラウレート、ジプチル錫ジア
セテート、オクタン酸亜鉛、チタン酸テトラノニルエス
テル、ジブチルアミン、ピリジン、五酸化りん、脂肪酸
などのシラノール縮合触媒を使用してもよい。シラノー
ル縮合触媒を使用するときは、一般式ｍで表わされる基
を有する樹脂と共に非反応性有機溶媒に溶解して使用さ
れる。その使用量は該樹脂に対して約０．１〜３重ｔチ
である。

架橋重合体粒子を得るための分散剤としそは。

炭酸カルシウム、りん酸三カルシウム、りん酸マグネシ
ウムなどの難溶性無機塩を一般式（Ｉ）で表わされる基
を有する有機重合体に対して、約２０〜７０重量％、好
ましくは３０〜５０重量％、またはアルキルセルロース
、ヒドロキシアルキルセルロース、カルボキシアルキル
セルロース、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸ナ
トリウム等の高分子系分散剤を一般式（１）で表わされ
る基を有する有機重合体に対して約０．１〜５重量％、
好ましくは０．５〜３重１１％使用される。これらの分
散剤と共に、必要に応じて、ドデシルベンゼンスルホン
酸ナトリウム等のアニオン性界面活性剤等の分散助剤を
使用することができる。

一般式ＦＩ）で表わされる基を有する有機重合体の非反
応性有機溶媒液（ａ）と水性媒体（ｂ）の割合は、（ａ
）／（ｂ）が重量比で１　／　０．５〜１／２０の範囲
で、目的とする架橋重合体粒子の粒子径分布に応じて決
定すればよい。目的とする架橋重合体粒子の粒径を１〜
３０μｍに調節するには（ａｌ／（ｂｌが重量比で１／
３〜１／１０の範囲になるようにするのが好ましい。

一般式（１）で表わされる基を有する有機重合体の非反
応性有機溶媒溶液の水性媒体への懸濁は、攪拌混合すれ
ばよいが、加水分解および縮合反応の前、または９反応
の初期まで、ホモミキサー等を使用して高速攪拌して行
なうのが好ましく、この場合、高速攪拌の後、普通の攪
拌下に反応を終了させる。

上記架橋重合体粒子は、上記のように、一般式（Ｉ）で
表わされる有機重合体の有機溶媒溶液を水性媒体中に懸
濁させて製造する以外に、一般式（Ｉ［［ｌで表わされ
るビニル系単量体または該単量体と他のビニル系単量体
を水性懸濁重合させて、一般式（Ｉｌで表わされる有機
重合体粒子を製造すると同時に。

架橋処理して得ることができる。この場合一般式ＣＩ＋
で表わされる化合物が少ないと架橋が不充分であり、一
般式（Ｉ）で表わされる化合物をビニル系単量体の総量
に対して、少なくとも２重量％使用することが望ましい
。ただし、この場合には、水溶性のビニル系単量体の使
用量は、ビニル系単量体の総量に対して１０モルチ以丁
にされる。

このような水性懸濁重合は、ビニル系単量体。

重合開始剤および必要に応じ非反応性有機溶媒の混合物
を水性媒体に分散させて行なわ扛る。ここで、ビニル系
単量体および重合開始剤の種類および使用量は上記と同
様である。非反応性有機溶媒を使用するときは、多孔性
の架橋重合体粒子が得られる。非反応性有機溶媒は、上
記と同様のものが使用でき、その使用量は、ビニル系単
量体に対して５０〜３００重量係使用さ世襲のが好まし
い。

また、ビニル系単量体７重合開始剤および必要に応じて
使用する非反応性有機溶媒の総量（Ｃ１と水性媒体の使
用量（ｄ）は、　（Ｃ）／（ｄ）が重量比で１１０．５
〜１／２０の範囲が好ましい。さらに、水性懸濁重合に
使用される分散剤および分散助剤は上記と同様のものが
使用される。また、攪拌操作として。

重合前まだは重合転化率が５０重ｉ％以下の時点までホ
モミキサー等を使用した高速攪拌し、その後、普通の攪
拌下に反応を終了させるのが好ましい。

このようにして得られる架橋重合体粒子には。

一般式ｍで表わされる基、この基のＹのうち一部又は全
部が加水分解された基、−一般式Ｉｌで表わさする基が
架橋反応した後に残る一８ｉ　Ｙ基（一般弐（１）中、
ｎが２または３のとき）またはこの基が加水分解された
基が残存している。

−上記架橋重合体粒子は、上記残存する基を反応点とし
て一般式（Ｉ［）で表わされる化合物と反応させられる
。

一般式（ｎ）で表わされる化合物のうち、一般式間Ｚ’
５ｉＹａ閏 （ただし９式中、Ｚ′は、少なくとも一つのアミノ基を
有する有機基であり、Ｙ′はアルコキシ基またはアシル
オキシ基である）で表わされる化合物が好ましい。

一般式（ＩＩ）で表わされる化合物としては、γ−アミ
ノプロピルトリエトキシシラン、ｒ−アミノプロピルト
リメトキシシラン、β−アミノエチルトリエトキシシラ
ン、β−アミンエチルメトキシ７ラン、アミンメチルト
リエトキシシラン、アミンメチルメトキシシラン等のア
ミノアルキルトリアルコキシシラン、アミノフェニルト
リエトキシシラン、アミノフェニルトリメトキシシラン
、アミノメチルフェニルトリエトキンシラン、アミンメ
チルフェニルトリメトキシシラン等のアミノアリールト
リアルコキンシラン等があシ、これらのうち、γ−アミ
ノプロピルトリエトキシシランが最も好ましい。

上記架橋重合体粒子と一般式（ｎ）で表わされる化合物
は、上記したものと同様の非反応性有機溶媒中で、必要
に応じさらに水を添加して反応させられる。ここで非反
応性有機溶媒は、一般式ＦＩＩ）で表わされる化合物を
溶解し、架橋重合体粒子を膨潤させやすいものが選択し
て使用される。反応は。

架橋重合体粒子の耐熱温度以下、好ましくは６０〜１５
０℃で攪拌して行なわれる。ここで、架橋重合体粒子に
残存する基のうち、基Ｙおよび一般式（［１で表わされ
る化合物中の基Ｙは、加水分解してから反応する。

このようにして得られるアミン基を有する架橋重合体粒
子には、アミン基が、好ましくは１０μｅｑ／９−以上
になるように、特に好ましくは１００μｅｑ／Ｐ以上に
なるように、調整されるのが好ましい。アミノ基が少な
すぎると液体クロマトグラフィー用充填剤または固定化
酵素用担体として充分機能しない。アミノ哉夕このよう
な量で導入するために、上記反応において、一般式ＣＩ
［＋で表わされる化合物は、架橋重合体粒子１ｙ−に対
して好ましくは１０μモル以上、特に好ましくは１００
μモル以上使用される。重含では、架橋重合体粒子に対
して一般式ｍで表わされる化合物を約１０〜１００重量
％使用するのが好ましい。

なお、架橋重合体粒子には、一般式側）で表わされる化
合物と反応するだけの充分な基が残存する。

この量は、上記有機重合体中の一般式（１）で表わされ
る基がケイ素分で該有機重合体中に１重量％以上含有さ
れていれば充分である。上記有機重合体中の一般式（Ｉ
）で表わされる基の含有量および一般式（［３で表わさ
れる化合物の使用量を調整して、導入されるアミン基の
量を調整すること力（できる。

本発明において、アミノ基を有する粒子は、多孔性また
は水不溶件のものが好ましく、また、アミノ基を０．１
〜５　ｍｅｑ／　Ｆｌ−以上有しているものカー好まし
い。アミン基の量が少なすぎると螢光物質を充分に結合
させることができず、その目的を達成するのが困難にな
る。さらに、該粒子の粒径は。

０．１〜１００μＩｎのものが好ましい。

本発明において、アミン基と反応性の官育比基を有する
螢光物質としては、フルオレスカミン。

ダンシルクロリド（官能基Ｓ　Ｃｌ）　、　７／レオＶ
インイソチオヅアネート（官能基、　−ＮＣ８）等カニ
ある。

上記アミン基を有する粒子と上記螢光物質の反応は９次
の式の原理による。

フルオレスカミン ｏ＝ｓ＝ｏ　ｏ＝ｓ＝。

なお、上記式中、Ｒは、アミン基を有する重合体の残基
を示す。

次に本発明の実施例を示す。以下、チは重量％を意味す
る。

実施例１ （１）多孔性架橋重合体粒子の製造 平均分子量３５０〜３８７のポリプロピレングリコール
メタクリレート（商品名：プレンマーＰＰ１００Ｏ，日
本油脂■商品名）３０？、トリメチロールプロパントリ
メタクリレート３０ｆＦ、γ−メタクリロキシプロピル
トリメトキシシラン６０デ、クロロベンゼン９０？、酢
酸ブチル９０？、イオン交換水１．３　＃　、メチルセ
ルロース１．３１、す／酸三カルシウム３０Ｆおよびア
ゾビス−イソブチロニトリル１．２ｆＩ−を混合してホ
モミキサーを使用して高速攪拌下に７０℃で１．５時間
水性へ゛懸濁重合を進めた。その後普通の攪拌釜にｓし
て８０〜９０℃で６時間反応させて水性懸濁重合を完結
させ、多孔性架橋重合体の球状粒子を得た。

粒度は１〜３０μｍであった。

（２）アミノ基の導入 （１）で得られた多孔性架橋重合体粒子をふるいわけし
て８〜２５μｍの粒度のゲル１０１ｉ’と水１０Ｐをｒ
−アミノプロピルトリエトキシシランの５チメチルエチ
ル溶液１００ｆＰに入れ、８０℃で４時間、攪拌下に反
応さすた。このようにして、得られたアミノ基を有する
多孔性架橋重合体粒子は。

１、１　ｓｍｅｑ／ｙ−のアミノ基を有するものであっ
た。

（３）螢光物質の結合 （２）で得られたアミノ基を有する多孔性架橋重合体粒
子２００■をｐＨ８の０．１　Ｍホウ酸バッファー５　
ｍｌに浸し、これに２．０Ｘ１０　％（重量）のフルオ
レセインイソチオシアネート水溶液０．５−を加え室温
で３時間反応させた。このゲルをｒ過し、ｐＨ８，０の
バッファーで１０回洗浄し、乾燥させて螢光性粒子を得
た。

この螢光性粒子を５　Ｘ　１０Ｓ個／ｄになるように生
理食塩液に浮遊させ、螢光を測定すると第１図のように
５　ｌ　７　ｎｍにピークを持つ螢光曲線が得られた。

ミリポアフィルタ−（０，４５μｍ）を用いて螢光性粒
子を除いたろ液のＪ１１元曲ＭＣＢ）はほとんど螢光強
度がみられず、螢光色素の脱離はないものと考えられる
。

測定条件　：　装置　日立螢光分光光度計ＭＰＦ４型、
励型光励起光Ｑｎｍ、ＥＸ、スリット２０　ｎｍ。

ＥＭ、　スリット　１０ｎｍ、感度　０．１−５

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例１で得られた螢光性粒子の螢光曲線及び
螢光性粒子をミリポアフィルタ−で１除いたろ液の螢光
曲線である。 符号の説明 １・・・螢光性粒子の螢光曲線 ２・・・ろ液の螢光曲線

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　アミノ基を有する粒子およびアミノ基と反応性の
   官能基を有する螢光物質を反応させることを特徴とする
   螢光性粒子の製造法。 ２、　アミン基と反応性の官能基を有する螢光物質が、
   フルオレスカミン、ダンシルクロリドまたはフルオレイ
   ンインチオシアネートである特許請求の範囲第１項記載
   の螢光性粒子の製造法。