JPS606629B2 - 発酵法によるアブサイジン酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるアブサイジン酸の製造法Info
- Publication number
- JPS606629B2 JPS606629B2 JP6343780A JP6343780A JPS606629B2 JP S606629 B2 JPS606629 B2 JP S606629B2 JP 6343780 A JP6343780 A JP 6343780A JP 6343780 A JP6343780 A JP 6343780A JP S606629 B2 JPS606629 B2 JP S606629B2
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- Japan
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- acid
- abscisic acid
- production method
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- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法による（十）−シスートランス型アブサ
ィジン酸（以下アブサィジン酸と略称することもある）
の製造方法に関する。
ィジン酸（以下アブサィジン酸と略称することもある）
の製造方法に関する。
その目的は、天然型植物ホルモンとして広い使途の期待
されるアブサィジン酸の工業的製造方法を提供すること
にある。アブサィジン酸は下記構造の化合物であり、植
物の落果・休暇等の原因物質として植物体中に発見され
、現在では広く植物体中で肥軸・果実の肥大促進効果や
熟成促進効果の知られている物質である。
されるアブサィジン酸の工業的製造方法を提供すること
にある。アブサィジン酸は下記構造の化合物であり、植
物の落果・休暇等の原因物質として植物体中に発見され
、現在では広く植物体中で肥軸・果実の肥大促進効果や
熟成促進効果の知られている物質である。
（十）−シスートランス型アブサィジン酸の構造微生物
がアブサイジン酸を生成することについては、カビ類の
一種であるセルコスポラ・ロシコラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏ
ｒａｒｏｓｉｃｏｌａ）の培養物中で見出されている（
Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ３３、１５５６、１９７７年）
が、この場合、アプサィジン酸の生成は固定塔地上ある
いは液体培地中で静暦培養法により光照射下で行なわれ
た。
がアブサイジン酸を生成することについては、カビ類の
一種であるセルコスポラ・ロシコラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏ
ｒａｒｏｓｉｃｏｌａ）の培養物中で見出されている（
Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ３３、１５５６、１９７７年）
が、この場合、アプサィジン酸の生成は固定塔地上ある
いは液体培地中で静暦培養法により光照射下で行なわれ
た。
そして、培養法が、このような静暦培養法によるために
培養期間が長期にわたり、培養３０〜４０日目にしてよ
うやく寒天培養法で６０仏タ′の‘、液体培養法で２０
仏夕／の上アブサィジン酸の生成が認められていた。こ
のように、微生物によるアブサィジン酸の生成が静置培
養法で行なわれた理由としては種々のことが考えられる
が、その一つには好気的条件下では菌の生育が充分行な
われないことや通気によってアブサィジン酸の生成が抑
制されることなどが考えられる。本発明者らは、上述の
セルコスポラ・ロシコラによるアブサィジン酸の生成条
件を鋭意研究した結果、酸素移動速度が０．０１ｋｇモ
ル／でｈｒ以上の振濠条件あるいは通気燈杵条件で培養
するときアブサィジン酸の生成が極めて速やかに行なわ
れることを見出した（後記第１表参照）。
培養期間が長期にわたり、培養３０〜４０日目にしてよ
うやく寒天培養法で６０仏タ′の‘、液体培養法で２０
仏夕／の上アブサィジン酸の生成が認められていた。こ
のように、微生物によるアブサィジン酸の生成が静置培
養法で行なわれた理由としては種々のことが考えられる
が、その一つには好気的条件下では菌の生育が充分行な
われないことや通気によってアブサィジン酸の生成が抑
制されることなどが考えられる。本発明者らは、上述の
セルコスポラ・ロシコラによるアブサィジン酸の生成条
件を鋭意研究した結果、酸素移動速度が０．０１ｋｇモ
ル／でｈｒ以上の振濠条件あるいは通気燈杵条件で培養
するときアブサィジン酸の生成が極めて速やかに行なわ
れることを見出した（後記第１表参照）。
従来、アブサィジン酸の発酵生産を通気燈梓または振縁
条件下で行なった例は全く知られておらず、本発明はか
）る新規な方法に基づくものである。
条件下で行なった例は全く知られておらず、本発明はか
）る新規な方法に基づくものである。
本発明において使用する微生物としてはアブサィジン酸
生成能を有する微生物ならばいずれも使用できる。
生成能を有する微生物ならばいずれも使用できる。
具体的な菌株としては、セルコスポフ・ロシコラｌＡＭ
５０３１があげられる。本発明に用いる培地の炭素源と
しては、グルコース、フラクトース、ガラクトース、ラ
クトース、シユクロース、マルトース、トレハロース、
セロビオース、ァラビノース等の糠類およびそれらを含
有する天然物（例えば廃糖蜜、ばれし、しよ抽出物、で
んぷん）、エタノールその他のアルコール類、酢酸、乳
酸、ピルビン酸、コハク酸その他の有機酸類、グルタミ
ン酸、リジン、アスパラジン酸、グリシン等のアミノ酸
類を単独あるいは混合して使用することができる。これ
らの物質の使用量は種類によって異るが１〜２０％の範
囲にあり、培養途中で分割して添加する場合によい成績
をあげることができる。たとえば培養初発の炭素源の濃
度を４％以下に制限して培養途中で炭素素源を追加する
ことによる培養方法によりアブサィジン酸の生成量は著
るしく増加する。培地に使用する窒素源としては、アン
モニア、尿素、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、
酢酸アンモニウム、クエン酸アンモニウム、燐酸アンモ
ニウム、炭酸アンモニウム等の無機・有機アンモニウム
化合物、硝酸カリ、硝酸ソーダ、硝酸アンモニゥ等の硝
酸化合物、コーンスチープ・リカー、酵母エキス、麦芽
エキス、肉エキス、酒粕エキス、大豆粕分解物、ベプト
ン、各種菌体加水分解物、各質の蛋白質含有物、各種の
植物類の抽出物その他の天然栄養物が使用できる。
５０３１があげられる。本発明に用いる培地の炭素源と
しては、グルコース、フラクトース、ガラクトース、ラ
クトース、シユクロース、マルトース、トレハロース、
セロビオース、ァラビノース等の糠類およびそれらを含
有する天然物（例えば廃糖蜜、ばれし、しよ抽出物、で
んぷん）、エタノールその他のアルコール類、酢酸、乳
酸、ピルビン酸、コハク酸その他の有機酸類、グルタミ
ン酸、リジン、アスパラジン酸、グリシン等のアミノ酸
類を単独あるいは混合して使用することができる。これ
らの物質の使用量は種類によって異るが１〜２０％の範
囲にあり、培養途中で分割して添加する場合によい成績
をあげることができる。たとえば培養初発の炭素源の濃
度を４％以下に制限して培養途中で炭素素源を追加する
ことによる培養方法によりアブサィジン酸の生成量は著
るしく増加する。培地に使用する窒素源としては、アン
モニア、尿素、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、
酢酸アンモニウム、クエン酸アンモニウム、燐酸アンモ
ニウム、炭酸アンモニウム等の無機・有機アンモニウム
化合物、硝酸カリ、硝酸ソーダ、硝酸アンモニゥ等の硝
酸化合物、コーンスチープ・リカー、酵母エキス、麦芽
エキス、肉エキス、酒粕エキス、大豆粕分解物、ベプト
ン、各種菌体加水分解物、各質の蛋白質含有物、各種の
植物類の抽出物その他の天然栄養物が使用できる。
無機物としては、ナトリウム、カリウム、マンガン、マ
グネシウム、カルシウム、コバルト、ニッケル、亜鉛、
銅、鉄、塩素、燐酸、硫酸、硝酸などの塩類が使用でき
る。
グネシウム、カルシウム、コバルト、ニッケル、亜鉛、
銅、鉄、塩素、燐酸、硫酸、硝酸などの塩類が使用でき
る。
その他使用菌の生育に必要な栄養物あるいは生育促進物
質が培地に添加される。培養は、培地中の酸素移動速度
が０．０１ｋ９ｍｏｌｅｓ′がｈｒ以上の条件が満たさ
れるように振糧培養あるいは通気雌洋培養される。
質が培地に添加される。培養は、培地中の酸素移動速度
が０．０１ｋ９ｍｏｌｅｓ′がｈｒ以上の条件が満たさ
れるように振糧培養あるいは通気雌洋培養される。
本発明においては培地に０．０１〜２雌／泌の各種界面
活性剤を添加することにより目的物の生産を高めること
ができる。
活性剤を添加することにより目的物の生産を高めること
ができる。
界面活性剤としてはポリオキシエチレンステアリルアミ
ン、セチルトリメチルアンモニウムクロラィドなどの陽
イオン界面活性剤、ポリオキシェチレンオレィルアミン
、ソジウムラウリレートなどの陰イオン界面活性剤、ポ
リオキシエチレンセチルエステル、ソルビタンモノオレ
ート、ポ、リオキシエチレンソルビタンモノオレートな
どの非イオン界面活性剤、ラウリルベタィンなどの両性
界面活性剤などが単独または混合して使用される。培養
中のｐＨは２〜９が好適である。
ン、セチルトリメチルアンモニウムクロラィドなどの陽
イオン界面活性剤、ポリオキシェチレンオレィルアミン
、ソジウムラウリレートなどの陰イオン界面活性剤、ポ
リオキシエチレンセチルエステル、ソルビタンモノオレ
ート、ポ、リオキシエチレンソルビタンモノオレートな
どの非イオン界面活性剤、ラウリルベタィンなどの両性
界面活性剤などが単独または混合して使用される。培養
中のｐＨは２〜９が好適である。
培養温度は１８〜３０００の範囲が好適である。ｐＨの
中和剤としては、アンモニア水、水酸化ナトリウム、水
酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸カルシウム、尿
素等が用いられる。培養期間は５〜２０日間で、培養液
中に箸量のアブサィジン酸が蓄積する。培養液からのア
ブサィジン酸の単離は溶媒抽出、シリカゲル及びイオン
交換クロマトグラフィー等の公知の方法を組合せて行う
ことができる。次に実施例を示す。実施例 １ ｌｏｏの上当り２．４夕のポテトーデキストロースフロ
ス（Ｄｉｆｃｏ社製品。
中和剤としては、アンモニア水、水酸化ナトリウム、水
酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸カルシウム、尿
素等が用いられる。培養期間は５〜２０日間で、培養液
中に箸量のアブサィジン酸が蓄積する。培養液からのア
ブサィジン酸の単離は溶媒抽出、シリカゲル及びイオン
交換クロマトグラフィー等の公知の方法を組合せて行う
ことができる。次に実施例を示す。実施例 １ ｌｏｏの上当り２．４夕のポテトーデキストロースフロ
ス（Ｄｉｆｃｏ社製品。
この２．４タ中には２夕のグルコースと、ばれいしよ２
０多相当の抽出物を含む）と寒天２夕を含むポテトーデ
キストロース寒天塔地（ｐＨ６．５）１４の‘を大型試
験管（１６Ｗ肋×１６脚）に分注して１２０ｏｏで１５
分間加圧殺菌し、寒天斜面培地を調製する。寒天が凝固
した後に、寒天培地表面全域にセルコスポラ・ロシコラ
ｌＡＭ５０３１を接種して２５ｏｏで２０日間静暦培養
する。えられた寒天斜面の培養物に８の‘の殺菌水を分
注して、これにガラス棒を用いて菌体を懸濁しえられた
菌体の懸濁液を種培養物とする。この種培養物２．５の
‘宛を、３００の‘客三角フラスコに分注した発酵培地
〔ポテト−デキストロースフロス（Ｄｉｆｃｏ社製）２
．４夕／ｄ‘、ストック（学名：Ｍａｔｈｉｏｌａｉｎ
ｃａｎａ）の抽出物０．２５叫／の、ｐＨ６．５〕４０
肌に接種して２２仇ｐｍの回転数のロータリーシェーカ
ー上で１５日間振顔培養した。培養終了液中のアブサィ
ジン酸の蓄積量は平均培養液１机上当り６２．３仏夕／
机であった。かくして得られた培養液３００の‘を集め
てｐＨ５．８となし、３００の‘の酢酸エチルを添加し
て分液ロートで激しく蝿拝してアブサィジン酸を酢酸エ
チル層に移す。この抽出操作を３回線返して酢酸エチル
層を集め、５０００減圧下で濃縮し、冷酢酸エチル−エ
タノール混合液中で結晶させた結果、アブサィジン酸の
粗結晶１０私を得た。この物質がアブサィジン酸である
ことは薄層クロマトグラフィーでのＲｆ値、高速液体ク
ロマトグラフィーでの挙動、核磁気スベクトログラフィ
ー、マススベクトログラフィーらの理化学的方法で確認
した。対照として１５日間静暦培養した場合のアブサィ
ジン酸の生成量は０．３仏夕／舵であった。実施例 ２ 発蟹培地３Ｚを含む５そ容ジャーファーメンターに、種
培養１５の上を接種し、１分間当り３そ量の空気を表面
通気（０．１０ｋ９ｍｏｌｅｓ′でｈｒ）し、４０仇ｐ
ｍの櫨梓条件下でかつ２５００の温度条件下で通気燈梓
培養し、培養５日目にノニオンＯＴ２２１（日本油脂社
製品の非イオン界面活性剤で、ポリオキシェチレンソル
ビタンモノオレートを主成分とする）を０．５の９／の
上の濃度になるように添加して培養を続け合計１５日間
通気健梓培養を行なった。
０多相当の抽出物を含む）と寒天２夕を含むポテトーデ
キストロース寒天塔地（ｐＨ６．５）１４の‘を大型試
験管（１６Ｗ肋×１６脚）に分注して１２０ｏｏで１５
分間加圧殺菌し、寒天斜面培地を調製する。寒天が凝固
した後に、寒天培地表面全域にセルコスポラ・ロシコラ
ｌＡＭ５０３１を接種して２５ｏｏで２０日間静暦培養
する。えられた寒天斜面の培養物に８の‘の殺菌水を分
注して、これにガラス棒を用いて菌体を懸濁しえられた
菌体の懸濁液を種培養物とする。この種培養物２．５の
‘宛を、３００の‘客三角フラスコに分注した発酵培地
〔ポテト−デキストロースフロス（Ｄｉｆｃｏ社製）２
．４夕／ｄ‘、ストック（学名：Ｍａｔｈｉｏｌａｉｎ
ｃａｎａ）の抽出物０．２５叫／の、ｐＨ６．５〕４０
肌に接種して２２仇ｐｍの回転数のロータリーシェーカ
ー上で１５日間振顔培養した。培養終了液中のアブサィ
ジン酸の蓄積量は平均培養液１机上当り６２．３仏夕／
机であった。かくして得られた培養液３００の‘を集め
てｐＨ５．８となし、３００の‘の酢酸エチルを添加し
て分液ロートで激しく蝿拝してアブサィジン酸を酢酸エ
チル層に移す。この抽出操作を３回線返して酢酸エチル
層を集め、５０００減圧下で濃縮し、冷酢酸エチル−エ
タノール混合液中で結晶させた結果、アブサィジン酸の
粗結晶１０私を得た。この物質がアブサィジン酸である
ことは薄層クロマトグラフィーでのＲｆ値、高速液体ク
ロマトグラフィーでの挙動、核磁気スベクトログラフィ
ー、マススベクトログラフィーらの理化学的方法で確認
した。対照として１５日間静暦培養した場合のアブサィ
ジン酸の生成量は０．３仏夕／舵であった。実施例 ２ 発蟹培地３Ｚを含む５そ容ジャーファーメンターに、種
培養１５の上を接種し、１分間当り３そ量の空気を表面
通気（０．１０ｋ９ｍｏｌｅｓ′でｈｒ）し、４０仇ｐ
ｍの櫨梓条件下でかつ２５００の温度条件下で通気燈梓
培養し、培養５日目にノニオンＯＴ２２１（日本油脂社
製品の非イオン界面活性剤で、ポリオキシェチレンソル
ビタンモノオレートを主成分とする）を０．５の９／の
上の濃度になるように添加して培養を続け合計１５日間
通気健梓培養を行なった。
その結果、培養終了液中には３５．２レジ′ｍ‘のアブ
サィジン酸が生成蓄積した。同様にして１５日間静置培
養した時のアブサィジン酸の蓄積量は０．３１山夕／の
【であった。なお、本実施例における種培養物の調製方
法、発酵塔地の組成は実施例１に準ずるものである。実
施例 ３ 綿栓を施した３００の‘客三角フラスコ中の培養液の量
を第１表中の数字のように変えて、２２０ｒｐｍの振糧
条件下で、ロータリーシェーカー上で、２０日間培養す
る以外は実施例１と同機に振鶴培養を行なった。
サィジン酸が生成蓄積した。同様にして１５日間静置培
養した時のアブサィジン酸の蓄積量は０．３１山夕／の
【であった。なお、本実施例における種培養物の調製方
法、発酵塔地の組成は実施例１に準ずるものである。実
施例 ３ 綿栓を施した３００の‘客三角フラスコ中の培養液の量
を第１表中の数字のように変えて、２２０ｒｐｍの振糧
条件下で、ロータリーシェーカー上で、２０日間培養す
る以外は実施例１と同機に振鶴培養を行なった。
対照実験では静瞳培養した。種培養物の発酵培地への接
種量は０．５％とし、種培養物の調製方法、培養温度、
培地組成等は実施例１に準じた。第１表 実施例 ４ 使用菌をセルコスポラ・ロシコラ日３微工研菌寄第６１
２８号とし、発酵培地の組成を以下のものとし、振糧条
件下での発酵日数を１６日とした以外は実施例３と同様
に実施した結果、アブサィジン酸の蓄積量は第２表に示
す通りであった。
種量は０．５％とし、種培養物の調製方法、培養温度、
培地組成等は実施例１に準じた。第１表 実施例 ４ 使用菌をセルコスポラ・ロシコラ日３微工研菌寄第６１
２８号とし、発酵培地の組成を以下のものとし、振糧条
件下での発酵日数を１６日とした以外は実施例３と同様
に実施した結果、アブサィジン酸の蓄積量は第２表に示
す通りであった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ セルコスポラ属に属する微生物を炭素源・無機物そ
の他の栄養物を程よく含む液体培地中で、浸盪培養ある
いは通気撹拌培養して得られる培養液および培養菌体か
ら（＋）−シス−トランス型アブサイジン酸を単離回収
することを特徴とする発酵法による（＋）−シス−トラ
ンス型アブサイジン酸の製造法。 ２ 酸素移動速度が０．０１ｋｇｍｏｌｅｓ／ｍ＾３ｈ
ｒ以上の浸盪条件あるいは通気撹拌条件で培養すること
を特徴とする特許請求の範囲第１項記載の製造法。 ３ 培養初発の炭素源の濃度を４％以下に制限して培養
途中で炭素源を追加することを特徴とする特許請求の範
囲第１項記載の製造法。 ４ 培地に０．０１〜２ｍｇ／ｍｌの界面活性剤を添加
して培養することを特徴とする特許請求の範囲第１項記
載の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6343780A JPS606629B2 (ja) | 1980-05-15 | 1980-05-15 | 発酵法によるアブサイジン酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6343780A JPS606629B2 (ja) | 1980-05-15 | 1980-05-15 | 発酵法によるアブサイジン酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS56160996A JPS56160996A (en) | 1981-12-11 |
| JPS606629B2 true JPS606629B2 (ja) | 1985-02-19 |
Family
ID=13229240
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6343780A Expired JPS606629B2 (ja) | 1980-05-15 | 1980-05-15 | 発酵法によるアブサイジン酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS606629B2 (ja) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5982340A (ja) * | 1982-11-02 | 1984-05-12 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | アブサイジン酸の精製法 |
| CN101914053B (zh) * | 2010-08-16 | 2012-06-13 | 烟台大学 | 一种从海藻中制备吲哚乙酸和脱落酸的方法 |
| CN104817452B (zh) * | 2014-12-19 | 2016-09-28 | 三达膜科技（厦门）有限公司 | 一种从脱落酸发酵液中提取脱落酸的方法 |
| EP4265121A1 (en) | 2020-12-16 | 2023-10-25 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Livestock feed |
| EP4265122A1 (en) | 2020-12-16 | 2023-10-25 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Abscisic acid-mixed pig feed |
| TW202245613A (zh) | 2021-02-17 | 2022-12-01 | 日商住友化學股份有限公司 | 家畜用飼料 |
| MX2023009381A (es) | 2021-02-17 | 2023-08-17 | Sumitomo Chemical Co | Alimento para ganado. |
| TW202301989A (zh) | 2021-02-17 | 2023-01-16 | 日商住友化學股份有限公司 | 家畜用飼料 |
| TW202304315A (zh) | 2021-04-07 | 2023-02-01 | 日商住友化學股份有限公司 | 家畜用飼料 |
-
1980
- 1980-05-15 JP JP6343780A patent/JPS606629B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS56160996A (en) | 1981-12-11 |
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