JPS6043359B2 - ギノサポニン類およびその製造法 - Google Patents
ギノサポニン類およびその製造法Info
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- JPS6043359B2 JPS6043359B2 JP55030636A JP3063680A JPS6043359B2 JP S6043359 B2 JPS6043359 B2 JP S6043359B2 JP 55030636 A JP55030636 A JP 55030636A JP 3063680 A JP3063680 A JP 3063680A JP S6043359 B2 JPS6043359 B2 JP S6043359B2
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- gynosaponin
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- gynosaponins
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- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
この発明はアマチヤヅル（ＧｙｎＯｓｔｅｍｍａｐｅｎ
ｔａｐｈｙｌｌｕｍ）のサポニンの構成成分であるギノ
サポニン類およびその製造法に関する。
ｔａｐｈｙｌｌｕｍ）のサポニンの構成成分であるギノ
サポニン類およびその製造法に関する。
この発明の発明者らはアマチヤヅルの含有成分を研究し
た結果下記の新規なギノサポニン類を見出した。
た結果下記の新規なギノサポニン類を見出した。
すなわち式（１）
〔式中Ｒ１が〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−
α上−ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコ
ピラノシル基であるときは、Ｒ２が水素原子、β−Ｄ−
グルコピラノシル（１→・６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シル基、α上−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−
グルコピラノシル基もしくはβ−Ｄ−グルコピラノシル
基であつて、Ｒ３が水素原子もしくはヒドロキシ基であ
り、Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β−
Ｄ−グルコピラノシル基であるときは、Ｒ２がα上−ラ
ムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル
基あつて、Ｒ３が水素原子であり、Ｒ１がα−Ｄ−ラム
ノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基
であるときは、Ｒ２がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→
６）−β−Ｄンーグルコピラノシル、α上−ラムノピラ
ノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基もしく
はβ−Ｄ−グルコピラノシル基であつて、Ｒ３が水素原
子であり、Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル基であると
き・はＲ２がβ−Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β
−Ｄ−グルコピラノシル基もしくはα上−ラムノピラノ
シル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシルであつて、
Ｒ３が水素原子であり、またＲ１が水素原子であるとき
は、Ｒ３がβ−Ｄ−グｌルコピラノシル基、β−Ｄ−キ
シロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル
基もしくはα上−ラムノピラノシル（１→６）一β−Ｄ
−グルコピラノシル基であつて、Ｒ３が水素原子もしく
はヒドロキシ基である〕で表わされる化合物である。
α上−ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコ
ピラノシル基であるときは、Ｒ２が水素原子、β−Ｄ−
グルコピラノシル（１→・６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シル基、α上−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−
グルコピラノシル基もしくはβ−Ｄ−グルコピラノシル
基であつて、Ｒ３が水素原子もしくはヒドロキシ基であ
り、Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β−
Ｄ−グルコピラノシル基であるときは、Ｒ２がα上−ラ
ムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル
基あつて、Ｒ３が水素原子であり、Ｒ１がα−Ｄ−ラム
ノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基
であるときは、Ｒ２がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→
６）−β−Ｄンーグルコピラノシル、α上−ラムノピラ
ノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基もしく
はβ−Ｄ−グルコピラノシル基であつて、Ｒ３が水素原
子であり、Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル基であると
き・はＲ２がβ−Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β
−Ｄ−グルコピラノシル基もしくはα上−ラムノピラノ
シル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシルであつて、
Ｒ３が水素原子であり、またＲ１が水素原子であるとき
は、Ｒ３がβ−Ｄ−グｌルコピラノシル基、β−Ｄ−キ
シロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル
基もしくはα上−ラムノピラノシル（１→６）一β−Ｄ
−グルコピラノシル基であつて、Ｒ３が水素原子もしく
はヒドロキシ基である〕で表わされる化合物である。
これらのギノサポニン類（１）の具体名を列挙すると次
の通りである。
の通りである。
２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−（〔β−Ｄ
−グルコピラノシル（１→２）−α上−ラムノピラノシ
ル（１→６）〕一β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０−
０−〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→６）一β−Ｄ−
グルコピラノシド〕−以下「ギノサポニンＡ」と称する
−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０一（〔β−
Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α上ーラムノピラノ
シル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０
−０−〔α上−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−
グルコピラノシド〕−以下１ギノサポニンＢョと称する
−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−（〔β−
Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α上−ラムノピラノ
シル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノシド〕−２０
−０−β−Ｄ−グルコピラノシドー以下「ギノサポニン
Ｆ」と称する−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−
０−〔β一Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β−Ｄ−
グルコピラノシド〕−２０−０−〔α上−ラムノピラノ
シル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「
ギノサポニンＥ」と称する−２０Ｓ−プロトパナキサジ
オールー３・２０−ビスー０−〔α上−ラムノピラノシ
ル（１→６）一β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「ギ
ノサポニンＧョと称する−２０Ｓ−プロトパナキサジオ
ールー３−０−〔α上−ラムノピラノシル（１→６）−
β−Ｄ−グルコピラノシド〕−２０−０−β−Ｄ−グル
コピラノシドー以下１ギノサポニンＫ」と称する一２０
Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−β一Ｄ−グルコ
ピラノシドー２０−０−〔β−Ｄ−キシロピラノシル（
１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「ギノサ
ポニンＬと称する一２０Ｓ−プロトパナキサジオールー
３−０−β一Ｄ−グルコピラノシドー２０−０−〔α上
−ラムノピラノシル（１→６）一β−Ｄ−グルコピラノ
シドー２０−０−〔α上−ラムノピラノシル（１→６）
−β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下１ギノサポニンＪ
」と称する一２０Ｓ−プロトパナキサジオールー２０−
０−〔β一Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−
グルコピラノシド〕一以下「ギノサポニンＭ」と称する
−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー２０−０−〔α上
−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド〕一以下「ギノサポニンＮ」と称する一２０Ｓ・２
６−ヒドロキシプロトパナキサジオールー３−０−（〔
β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α上−ラムノピ
ラノシル（１→６）〕一β−Ｄ−グルコピラノシド）−
２０−０−〔α上−ラムノピラノシル（１→６）−β−
Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「ギサポニンＯ」と称す
る−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−〔α一
Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド〕−２０−０−〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１
→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「プロギノ
サポゲニン〜」と称するプロトパナキサジオールー３−
０−（〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α上−
ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノ
シド）一以下「プロギノサポニンＡ−ＡＨ」と称する−
２０Ｓ・２６−ヒドロキシプロトパナキサジオールー２
０−０−β−Ｄ−グルコピラノシドー以下「プロギノサ
ポゲニン０１」と称する−かくしてこの発明は、前記式
（１）中、式中Ｒ１が〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１
→２）一α上−ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ
ーグルコピラノシル基、Ｒ２が水素原子、β−Ｄ−グル
コピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基
、α上−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコ
ピラノシル基、もしくはβ−Ｄ−グルコピラノシル基、
Ｒ３が水素原子もしくはヒドロキシ基の化合物、具体的
にはギノサポニンＡ，．ＢｌＯ、Ｆ１及びプロギノサポ
ゲニンＡ−崩並びにその製造法を提供するものである。
−グルコピラノシル（１→２）−α上−ラムノピラノシ
ル（１→６）〕一β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０−
０−〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→６）一β−Ｄ−
グルコピラノシド〕−以下「ギノサポニンＡ」と称する
−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０一（〔β−
Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α上ーラムノピラノ
シル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０
−０−〔α上−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−
グルコピラノシド〕−以下１ギノサポニンＢョと称する
−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−（〔β−
Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α上−ラムノピラノ
シル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノシド〕−２０
−０−β−Ｄ−グルコピラノシドー以下「ギノサポニン
Ｆ」と称する−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−
０−〔β一Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β−Ｄ−
グルコピラノシド〕−２０−０−〔α上−ラムノピラノ
シル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「
ギノサポニンＥ」と称する−２０Ｓ−プロトパナキサジ
オールー３・２０−ビスー０−〔α上−ラムノピラノシ
ル（１→６）一β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「ギ
ノサポニンＧョと称する−２０Ｓ−プロトパナキサジオ
ールー３−０−〔α上−ラムノピラノシル（１→６）−
β−Ｄ−グルコピラノシド〕−２０−０−β−Ｄ−グル
コピラノシドー以下１ギノサポニンＫ」と称する一２０
Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−β一Ｄ−グルコ
ピラノシドー２０−０−〔β−Ｄ−キシロピラノシル（
１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「ギノサ
ポニンＬと称する一２０Ｓ−プロトパナキサジオールー
３−０−β一Ｄ−グルコピラノシドー２０−０−〔α上
−ラムノピラノシル（１→６）一β−Ｄ−グルコピラノ
シドー２０−０−〔α上−ラムノピラノシル（１→６）
−β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下１ギノサポニンＪ
」と称する一２０Ｓ−プロトパナキサジオールー２０−
０−〔β一Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−
グルコピラノシド〕一以下「ギノサポニンＭ」と称する
−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー２０−０−〔α上
−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド〕一以下「ギノサポニンＮ」と称する一２０Ｓ・２
６−ヒドロキシプロトパナキサジオールー３−０−（〔
β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α上−ラムノピ
ラノシル（１→６）〕一β−Ｄ−グルコピラノシド）−
２０−０−〔α上−ラムノピラノシル（１→６）−β−
Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「ギサポニンＯ」と称す
る−２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−〔α一
Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド〕−２０−０−〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１
→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕一以下「プロギノ
サポゲニン〜」と称するプロトパナキサジオールー３−
０−（〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α上−
ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノ
シド）一以下「プロギノサポニンＡ−ＡＨ」と称する−
２０Ｓ・２６−ヒドロキシプロトパナキサジオールー２
０−０−β−Ｄ−グルコピラノシドー以下「プロギノサ
ポゲニン０１」と称する−かくしてこの発明は、前記式
（１）中、式中Ｒ１が〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１
→２）一α上−ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ
ーグルコピラノシル基、Ｒ２が水素原子、β−Ｄ−グル
コピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基
、α上−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコ
ピラノシル基、もしくはβ−Ｄ−グルコピラノシル基、
Ｒ３が水素原子もしくはヒドロキシ基の化合物、具体的
にはギノサポニンＡ，．ＢｌＯ、Ｆ１及びプロギノサポ
ゲニンＡ−崩並びにその製造法を提供するものである。
ギノサポニン類（１）のうち、ギノサポニンＡ．．Ｂ．
．ＥｌＦ．．Ｇ．．Ｉ，．Ｊ．．Ｋ．．Ｍ，．Ｎおよび
０はいずれもアマチヤヅルのサポニンの構成成分であり
、例えば次の方法によつてアマチヤヅルから抽出、分離
される。先ず初めに、アマチヤヅルを水または含水低級
アルコールで抽出する。
．ＥｌＦ．．Ｇ．．Ｉ，．Ｊ．．Ｋ．．Ｍ，．Ｎおよび
０はいずれもアマチヤヅルのサポニンの構成成分であり
、例えば次の方法によつてアマチヤヅルから抽出、分離
される。先ず初めに、アマチヤヅルを水または含水低級
アルコールで抽出する。
含水低級アルコールとしては５０Ｖ１Ｖ％程度以下の含
水メタノール、含水エタノール等が例示される。この抽
出は加温または加熱下に行うのが好ましい。なお、原料
のアマチヤヅルは、抽出に先立つて予め細切し、あるい
は常法により脱脂したものを用いてもよい。また抽出溶
媒として含水低級アルコールを用いた楊合には抽出液を
濃縮してアルコール分を除去したのち、適量の水を加え
て次の非イオン性吸着樹脂での処理に付すのが好ましい
。非イオン性吸着樹脂としては、スチレンージビニルベ
ンゼン共重合体からなるハイポーラスなものが好ましく
、具体的にはアンパーライトＸＡＤ−２（米国ロームア
ンドハース社製）、セフアデツクＬＨ２Ｏ（フアーマシ
ヤフアインケミカルズ社製）などどが繁用される。
水メタノール、含水エタノール等が例示される。この抽
出は加温または加熱下に行うのが好ましい。なお、原料
のアマチヤヅルは、抽出に先立つて予め細切し、あるい
は常法により脱脂したものを用いてもよい。また抽出溶
媒として含水低級アルコールを用いた楊合には抽出液を
濃縮してアルコール分を除去したのち、適量の水を加え
て次の非イオン性吸着樹脂での処理に付すのが好ましい
。非イオン性吸着樹脂としては、スチレンージビニルベ
ンゼン共重合体からなるハイポーラスなものが好ましく
、具体的にはアンパーライトＸＡＤ−２（米国ロームア
ンドハース社製）、セフアデツクＬＨ２Ｏ（フアーマシ
ヤフアインケミカルズ社製）などどが繁用される。
この処理は、吸着樹脂を充填したカラムに上記で得られ
た抽出液を通液して行うのが便利である。この操作によ
りサポニンが樹脂に吸着される。次いで樹脂に吸着され
たサポニンを低級アルコ−ルで溶出する。
た抽出液を通液して行うのが便利である。この操作によ
りサポニンが樹脂に吸着される。次いで樹脂に吸着され
たサポニンを低級アルコ−ルで溶出する。
溶出溶媒として用いられる低級アルコールとしてはメタ
ノール、エタノール等が好ましい。なお、溶出に先立つ
て予めカラムを水あるいは２０Ｖ１ｖ％程度の含水低級
アルコールで洗浄するのが好ましい。上記で得られた低
級アルコール溶出液を次いでアルミナで処理する。
ノール、エタノール等が好ましい。なお、溶出に先立つ
て予めカラムを水あるいは２０Ｖ１ｖ％程度の含水低級
アルコールで洗浄するのが好ましい。上記で得られた低
級アルコール溶出液を次いでアルミナで処理する。
この処理も、アルミナを充填したカラムを用いて行えば
簡便である。この処理により、サポニンはアルミナに吸
着される。なお、このアルミナでの処理に先立つて上記
の低級アルコール溶出液を予め適宜濃縮しておいてもよ
い。アルミナに吸着されたサポニンを次いで低級アルコ
ールまたは含水低級アルコールで、好ましくは５０Ｖ１
Ｖ％程度の含水低級アルコールで溶出する。
簡便である。この処理により、サポニンはアルミナに吸
着される。なお、このアルミナでの処理に先立つて上記
の低級アルコール溶出液を予め適宜濃縮しておいてもよ
い。アルミナに吸着されたサポニンを次いで低級アルコ
ールまたは含水低級アルコールで、好ましくは５０Ｖ１
Ｖ％程度の含水低級アルコールで溶出する。
この溶出液を濃縮することにより、粗ギノサポニン類が
得られる。上記のようにして得られる粗ギノサポニン類
は、ギノサポニンＡ．，Ｂ．．Ｅ．，Ｆ．，Ｇ．．Ｉ．
．ＪｌＫ．．ＭｌＮおよびＯ等からなり、これらの各成
分は例えば次の方法により分離、精製される。
得られる。上記のようにして得られる粗ギノサポニン類
は、ギノサポニンＡ．，Ｂ．．Ｅ．，Ｆ．，Ｇ．．Ｉ．
．ＪｌＫ．．ＭｌＮおよびＯ等からなり、これらの各成
分は例えば次の方法により分離、精製される。
すなわち、粗ギノサポニン類を水に溶解し、この水溶液
をスチレン系吸着樹脂、例えばサーバクロム（Ｓｅｒｖ
ａｃｈｒＯｍ）ＸＡＤ−２〔サーバ（Ｓｅｒｖａ）社製
〕で処理し、被吸着物質を４５−１００％メタノール水
溶液で溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲルカラムで処理
する。シリカゲルに吸着されたサポニンを次いでクロロ
ホルム●低級アルコール●水で好ましくはクロロホルム
●メタノール●水（６５：３５：１０下層）で溶出し、
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を指標とし、溶出液
をフラクシヨン１〜６に分画する。
をスチレン系吸着樹脂、例えばサーバクロム（Ｓｅｒｖ
ａｃｈｒＯｍ）ＸＡＤ−２〔サーバ（Ｓｅｒｖａ）社製
〕で処理し、被吸着物質を４５−１００％メタノール水
溶液で溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲルカラムで処理
する。シリカゲルに吸着されたサポニンを次いでクロロ
ホルム●低級アルコール●水で好ましくはクロロホルム
●メタノール●水（６５：３５：１０下層）で溶出し、
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を指標とし、溶出液
をフラクシヨン１〜６に分画する。
フラクシヨン１〜３をそれぞれシリカゲルカラムで処理
し、次いでシリカゲルに吸着されたサポニンをクロロホ
ルム●低級アルコール●酢酸エチル●水で好ましくはク
ロロホルム●メタノール●酢酸エチル・水（２：２：４
：１下層）で分画液出する。
し、次いでシリカゲルに吸着されたサポニンをクロロホ
ルム●低級アルコール●酢酸エチル●水で好ましくはク
ロロホルム●メタノール●酢酸エチル・水（２：２：４
：１下層）で分画液出する。
また、フラクシヨン４および５もそれぞれシリカゲルカ
ラムで処理し、次いで、シリカゲルに吸着されたサポニ
ンを低級アルコール●酢酸エチル・水で好ましくはｎ−
ブタノール・酢酸エチル・水（４：１：２上層）で分画
溶出する。
ラムで処理し、次いで、シリカゲルに吸着されたサポニ
ンを低級アルコール●酢酸エチル・水で好ましくはｎ−
ブタノール・酢酸エチル・水（４：１：２上層）で分画
溶出する。
また、フラクシヨン６もシリカゲルカラムで処理し、次
いで、シリカゲルに吸着されたサポニンをクロロホルム
・低級アルコール・水で、好ましくはクロロホルム・メ
タノール●水（６５：３５：１０下層）で分画溶出する
。上記で得られた各分画溶出液を濃縮し、さらにＴＬＣ
の結果を指標にして前記のシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーを繰返し、これらのギノサポニン類を各個別に
分離、精製すると、フラクシヨン１からギノサポニンＭ
およびＮが、フラクシヨン２からギノサポニン１．．Ｊ
およびＫが、フラクシヨン３からギノサポニンＧが、フ
ラクシヨン４からギノサポニンＥおよびＦが、フラクシ
ヨン５からギノサポニンＢが、またフラクシヨン６から
ギノサポニンＡがそれぞれ得られる。
いで、シリカゲルに吸着されたサポニンをクロロホルム
・低級アルコール・水で、好ましくはクロロホルム・メ
タノール●水（６５：３５：１０下層）で分画溶出する
。上記で得られた各分画溶出液を濃縮し、さらにＴＬＣ
の結果を指標にして前記のシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーを繰返し、これらのギノサポニン類を各個別に
分離、精製すると、フラクシヨン１からギノサポニンＭ
およびＮが、フラクシヨン２からギノサポニン１．．Ｊ
およびＫが、フラクシヨン３からギノサポニンＧが、フ
ラクシヨン４からギノサポニンＥおよびＦが、フラクシ
ヨン５からギノサポニンＢが、またフラクシヨン６から
ギノサポニンＡがそれぞれ得られる。
また、ギノサポニンＯは、粗ギノサポニン類をスチレン
系吸着樹脂で処理し、被吸着物質を３０〜４０％メタノ
ールで溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲルカラムで処理
し、次いで吸着されたサポニンをクロロホルム●低級ア
ルコール●水で、好ましくはクロロホルム・メタノール
・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出することによ
り、分離、精製できる。
系吸着樹脂で処理し、被吸着物質を３０〜４０％メタノ
ールで溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲルカラムで処理
し、次いで吸着されたサポニンをクロロホルム●低級ア
ルコール●水で、好ましくはクロロホルム・メタノール
・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出することによ
り、分離、精製できる。
さらにプロギノサポゲニンＡ２およびプロギノサポゲニ
ン０１はそれぞれギノサポニンＡおよびギノサポニンＯ
を酸素加水分解することにより得られ、またプロギノサ
ポゲニンＡ−ＡＨはギノサポニンＡを５０％酢酸で処理
することにより製造できる。
ン０１はそれぞれギノサポニンＡおよびギノサポニンＯ
を酸素加水分解することにより得られ、またプロギノサ
ポゲニンＡ−ＡＨはギノサポニンＡを５０％酢酸で処理
することにより製造できる。
また、ギノサポニンＦｌＧ，，Ｉ．．Ｊ．．Ｋ，．Ｍお
よびＮは他のギノサポニン類（１）を酵素加水分解する
ことによつて製造できる。
よびＮは他のギノサポニン類（１）を酵素加水分解する
ことによつて製造できる。
このようにして得られるギノサポニン類（１）は、すべ
て新規であり、脂質分解抑制および脂質合成抑制作用を
有し、医薬として有用である。
て新規であり、脂質分解抑制および脂質合成抑制作用を
有し、医薬として有用である。
そして、ギノサポニン類（１）を医薬として用いる場合
には、個々のサポニンを有効成分として使用することが
できる。次にこの発明を実施例により説明する。
には、個々のサポニンを有効成分として使用することが
できる。次にこの発明を実施例により説明する。
実施例１
乾燥したアマチヤヅル全草２ｋ９を水３０ｅで熱時２回
抽出した。
抽出した。
両抽出液を合し、非イオン性吸着樹脂、アンパーライト
ＸＡＤ−２４ｅを充填したカラムに通導した。吸着部を
水１０ｅ１次いで２０％メタノール６′で洗浄したのち
、メタノール５ｅで溶出し、溶出液を減圧下に蒸発乾固
し、黄褐色粉末３７ｆを得た。これをメタノール１ｅに
溶解し、アルミナ３００ｙを充填したカラムに通導した
のち、５０％メタノール約２０′で溶出した。溶出液を
減圧下に濃縮し、淡黄色粉末として粗ギノサポニン２５
ｙを得た。粗ギノサポニン２０ｙを水１′に溶解し、ス
チレン系吸着樹脂サーバクロムＸＡＤ−２（サーバ社製
）６００ｍ１を充填したカラムに通導した。
ＸＡＤ−２４ｅを充填したカラムに通導した。吸着部を
水１０ｅ１次いで２０％メタノール６′で洗浄したのち
、メタノール５ｅで溶出し、溶出液を減圧下に蒸発乾固
し、黄褐色粉末３７ｆを得た。これをメタノール１ｅに
溶解し、アルミナ３００ｙを充填したカラムに通導した
のち、５０％メタノール約２０′で溶出した。溶出液を
減圧下に濃縮し、淡黄色粉末として粗ギノサポニン２５
ｙを得た。粗ギノサポニン２０ｙを水１′に溶解し、ス
チレン系吸着樹脂サーバクロムＸＡＤ−２（サーバ社製
）６００ｍ１を充填したカラムに通導した。
吸着部を２０％メタノールより順次メタノール含量を増
しながら溶出し、４５〜１００％メタノール溶出液を合
し、減圧下に蒸発乾固して淡黄色粉末１６ｙを得た。こ
れをシリカゲル（３００ｆ）カラムクロマトグラフィー
に付し、ＴＬＣを指標として、クロロホルム●メタノー
ル●水（６５：３５：１０下層）で１００ｍ１ずつ分画
溶出してフラクシヨン１〜６を得、それぞれ蒸発乾固し
た。これらフラクシヨン１〜３をそれぞれシリカゲル（
１００ｙ）カラムクロマトグラフィーに付し、クロロホ
ルム・メタノール・酢酸エチル●水（２：２：４：１下
層）で分画溶出し、さらにこの操作を２回繰返し、フラ
クシヨン１（１．１ｙ）からギノサポニンＭ（６０ｍ９
）およびギノサポニンＮ（１６０ｍｇ）を、フラクシヨ
ン２（１．１ｙ）からギノサポニンＩ（６０ｍ９）およ
びギノサポニンＪ（１２０ｍｇ）、またフラクシヨン３
（１．０ｙ）からギノサポニンＧ（４５０ｍ９）をそれ
ぞれ得た。またフラクシヨン４および５をそれぞれシリ
カゲル（２００ｙ）カラム クロマトグラフィーに付し
、ｎ−ブタノール・酢酸エチル・水（４：１：２上層）
て分画溶出し、さらにこの操作を２回繰返しフラクシヨ
ン４（３．４ｙ）からギノサポニンＤ（３５０ｍｇ）、
ギノサポニンＥ（１５００ｍ９）およびギノサポニンＦ
（８０ｍ９）を、またフラクシヨン５（２．５ｙからギ
ノサポニンＢ（２２０ｍ９）およびギノサポニンＣ（２
４０ｍ９）をそれぞれ得た。
しながら溶出し、４５〜１００％メタノール溶出液を合
し、減圧下に蒸発乾固して淡黄色粉末１６ｙを得た。こ
れをシリカゲル（３００ｆ）カラムクロマトグラフィー
に付し、ＴＬＣを指標として、クロロホルム●メタノー
ル●水（６５：３５：１０下層）で１００ｍ１ずつ分画
溶出してフラクシヨン１〜６を得、それぞれ蒸発乾固し
た。これらフラクシヨン１〜３をそれぞれシリカゲル（
１００ｙ）カラムクロマトグラフィーに付し、クロロホ
ルム・メタノール・酢酸エチル●水（２：２：４：１下
層）で分画溶出し、さらにこの操作を２回繰返し、フラ
クシヨン１（１．１ｙ）からギノサポニンＭ（６０ｍ９
）およびギノサポニンＮ（１６０ｍｇ）を、フラクシヨ
ン２（１．１ｙ）からギノサポニンＩ（６０ｍ９）およ
びギノサポニンＪ（１２０ｍｇ）、またフラクシヨン３
（１．０ｙ）からギノサポニンＧ（４５０ｍ９）をそれ
ぞれ得た。またフラクシヨン４および５をそれぞれシリ
カゲル（２００ｙ）カラム クロマトグラフィーに付し
、ｎ−ブタノール・酢酸エチル・水（４：１：２上層）
て分画溶出し、さらにこの操作を２回繰返しフラクシヨ
ン４（３．４ｙ）からギノサポニンＤ（３５０ｍｇ）、
ギノサポニンＥ（１５００ｍ９）およびギノサポニンＦ
（８０ｍ９）を、またフラクシヨン５（２．５ｙからギ
ノサポニンＢ（２２０ｍ９）およびギノサポニンＣ（２
４０ｍ９）をそれぞれ得た。
さらに、フラクシヨン６（４）．９Ｖ）をシリカゲル（
１００９）カラム クロマトグラフィーに付し、クロロ
ホルム・メタノール・水（６５：３５：１０−下層）で
分画溶出し、さらにこの操作を１回繰返してギノサポニ
ンＡ（５１０ｍ９）を得た。各ギノサポニンの物性は後
記の表１および表２に示す通りである。実施例２ ギノサポニンＡ２５Ｏｍ９を０．００５Ｍ一燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）５０ＴｒＬｔに溶解し
、これに粗ヘスペリジナーゼ（田辺製薬株式会社製）５
００即を加え、３７〜３８℃で６時間攪拌した。
１００９）カラム クロマトグラフィーに付し、クロロ
ホルム・メタノール・水（６５：３５：１０−下層）で
分画溶出し、さらにこの操作を１回繰返してギノサポニ
ンＡ（５１０ｍ９）を得た。各ギノサポニンの物性は後
記の表１および表２に示す通りである。実施例２ ギノサポニンＡ２５Ｏｍ９を０．００５Ｍ一燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）５０ＴｒＬｔに溶解し
、これに粗ヘスペリジナーゼ（田辺製薬株式会社製）５
００即を加え、３７〜３８℃で６時間攪拌した。
反応液をスチレン系吸着樹脂、サーバクロムＸ，ＡＤ−
２（サーバ社製）５０ｍ１を充填したカラムに通導し、
水１ｅ次いで２０％メタノール２ｅで洗浄したのち、メ
タノール３００ｍＬで溶出した。溶出液を減圧″下に濃
縮し、濃縮物をシリカゲル●カラム・クロマトグラフィ
ーに付し、クロロホルム●メノール・水（６５：３５：
１０下層）で分画溶出して、ギノサポニンＦ（２０ｍ９
）、ギノサポニンＫ（１５ｍ９）およびプロギノサポゲ
ニンＡ．（３５ｍ９）を得た。ギノサポニンＦおよびＫ
はＩＲおよびＮＭＲにより、実施例１で得られた標品と
同定した。また、プロギノサポゲニンＡ２の物性は後記
の表１および表２に示す通りである。
２（サーバ社製）５０ｍ１を充填したカラムに通導し、
水１ｅ次いで２０％メタノール２ｅで洗浄したのち、メ
タノール３００ｍＬで溶出した。溶出液を減圧″下に濃
縮し、濃縮物をシリカゲル●カラム・クロマトグラフィ
ーに付し、クロロホルム●メノール・水（６５：３５：
１０下層）で分画溶出して、ギノサポニンＦ（２０ｍ９
）、ギノサポニンＫ（１５ｍ９）およびプロギノサポゲ
ニンＡ．（３５ｍ９）を得た。ギノサポニンＦおよびＫ
はＩＲおよびＮＭＲにより、実施例１で得られた標品と
同定した。また、プロギノサポゲニンＡ２の物性は後記
の表１および表２に示す通りである。
実施例３
ギノサポニンＡｌ５Ｏｍｇを５０％酢酸１０ｍ１に溶解
し、７０゜Ｃで６時間攪拌した。
し、７０゜Ｃで６時間攪拌した。
反応液をスチレン系吸着樹脂、サーバクロムＸＡＤ−２
５０ｍ１を充填したカラムに付して、プサポゲニン画分
約１００ｍｇを得た。これをシリカゲルカラムクロマト
グラフィーに付し、クロロホルム●メタノール●酢酸エ
チル・水（２：２：４：１下層）で分画溶出して、プロ
ギノサポゲニンＡ−ＡＨ３５ｍ９を得た。本品の物性は
後記の表１および表２に示す通りである。実施例４ ギノサポニンＡ４ＯＯｍｇを０．００５Ｍ一燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）５０ｍｔに溶解した。
５０ｍ１を充填したカラムに付して、プサポゲニン画分
約１００ｍｇを得た。これをシリカゲルカラムクロマト
グラフィーに付し、クロロホルム●メタノール●酢酸エ
チル・水（２：２：４：１下層）で分画溶出して、プロ
ギノサポゲニンＡ−ＡＨ３５ｍ９を得た。本品の物性は
後記の表１および表２に示す通りである。実施例４ ギノサポニンＡ４ＯＯｍｇを０．００５Ｍ一燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）５０ｍｔに溶解した。
これにセルラーゼ（シグマ社製）３００ｍ９を加え、３
７〜３８℃で２橢間攪拌した。反応液を実施例２と同様
に処理して、ギノサポニンＫ（１１０ｍｇ）を得た。本
品はＩＲおよびＮＭＲにより、実施例１で得た標品と同
定した。実施例５ ギノサポニンＢおよびＣの混合物１．４ｙを０．００５
Ｍ一燐酸２水素ナトリウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）２００
ｍ１に溶解した。
７〜３８℃で２橢間攪拌した。反応液を実施例２と同様
に処理して、ギノサポニンＫ（１１０ｍｇ）を得た。本
品はＩＲおよびＮＭＲにより、実施例１で得た標品と同
定した。実施例５ ギノサポニンＢおよびＣの混合物１．４ｙを０．００５
Ｍ一燐酸２水素ナトリウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）２００
ｍ１に溶解した。
これにセルラーゼ（シグマ社製）６００ｍ９を加え、３
７〜詔℃で７時間攪拌した。反応液をサーバクロムＸＡ
Ｄ−２（８０ｍ１）のカラムで処理して約１．１ｙの加
水分解物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーに付し、クロロホルム●メタノール●酢酸エチル
●水（２：２：４：１下層）で分画溶出してギノサポニ
ンＫ（１４０Ｔｎｇ）ならびにギノサポニンＦおよびＧ
を含む混合物（５５０ｍｇ）を得た。この混合物を再び
シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホ
ルム・メタノール●水（６５：３５：１０下層）で分画
溶出して、ギノサポニンＦ（５０ｍｇ）およびギノサポ
ニンＧ（１５０７７！９）を得た。これらのギノサポニ
ンＦ，．ＧおよびＫはＩＲおよびＮＭＲにより実施例１
で得られた標、品と同定した。実施例６ギノサポニンＢ
およびＣの混合物３００ｍ９を５０％酢酸１０ｍＬに溶
解し、７０℃で６時間攪拌した。
７〜詔℃で７時間攪拌した。反応液をサーバクロムＸＡ
Ｄ−２（８０ｍ１）のカラムで処理して約１．１ｙの加
水分解物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーに付し、クロロホルム●メタノール●酢酸エチル
●水（２：２：４：１下層）で分画溶出してギノサポニ
ンＫ（１４０Ｔｎｇ）ならびにギノサポニンＦおよびＧ
を含む混合物（５５０ｍｇ）を得た。この混合物を再び
シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホ
ルム・メタノール●水（６５：３５：１０下層）で分画
溶出して、ギノサポニンＦ（５０ｍｇ）およびギノサポ
ニンＧ（１５０７７！９）を得た。これらのギノサポニ
ンＦ，．ＧおよびＫはＩＲおよびＮＭＲにより実施例１
で得られた標、品と同定した。実施例６ギノサポニンＢ
およびＣの混合物３００ｍ９を５０％酢酸１０ｍＬに溶
解し、７０℃で６時間攪拌した。
反応液をサーバクロムＸＡＤ−２（５０ｍＬ）のカラム
に付して分画し、プロサポゲニン画分をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム・メタノー
ル・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出してプロギ
ノサポゲニンＡ−ＡＨ（３０ｍｇ）を得た。本品は釈お
よびＮＭＲにより、実施例３で得られた標品と同定した
。実施例７ ギノサポニンＤおよびＥの混合物２ｙを ０．００５Ｍ一燐酸２水素ナトリウム水溶液（ＰＨ４．
Ｏ）に溶解した。
に付して分画し、プロサポゲニン画分をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム・メタノー
ル・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出してプロギ
ノサポゲニンＡ−ＡＨ（３０ｍｇ）を得た。本品は釈お
よびＮＭＲにより、実施例３で得られた標品と同定した
。実施例７ ギノサポニンＤおよびＥの混合物２ｙを ０．００５Ｍ一燐酸２水素ナトリウム水溶液（ＰＨ４．
Ｏ）に溶解した。
これにセルラーゼ（シグマ社製）１ｙを加え、３７〜３
８℃で２叫間攪拌した。反応液をサーバクロムＸＡＤ−
２（８０ｍｔ）のカラムで処理して約１．６ｙの加水分
解物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーに付し、クロロホルム●メタノール●酢酸エチル●水
（２：２：４：１下層）で分画溶出してギノサポニンＩ
（３５５ｍ９）、Ｊ（２５０ｍ９）、Ｍ（８０ｍｇ）お
よびＮ（９０ｍ９）を得た。これらの各ギノサポニンは
択およびＮＭＲにより、実施例１で得られた標品とそれ
ぞれ同定した。実施例８ ギノサポニンＥ５ｍ９を０．００５Ｍ一燐酸２水素ナト
リウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）１ｍｔに溶解し、これにセ
ルラーゼ１０Ｔｎ９を加え、３７〜３８℃で４時間攪拌
した。
８℃で２叫間攪拌した。反応液をサーバクロムＸＡＤ−
２（８０ｍｔ）のカラムで処理して約１．６ｙの加水分
解物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーに付し、クロロホルム●メタノール●酢酸エチル●水
（２：２：４：１下層）で分画溶出してギノサポニンＩ
（３５５ｍ９）、Ｊ（２５０ｍ９）、Ｍ（８０ｍｇ）お
よびＮ（９０ｍ９）を得た。これらの各ギノサポニンは
択およびＮＭＲにより、実施例１で得られた標品とそれ
ぞれ同定した。実施例８ ギノサポニンＥ５ｍ９を０．００５Ｍ一燐酸２水素ナト
リウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）１ｍｔに溶解し、これにセ
ルラーゼ１０Ｔｎ９を加え、３７〜３８℃で４時間攪拌
した。
反応液中にギノサポニンＪおよびＮが生成していること
を薄層クロマトグラフィーにより確認した。実施例９ 実施例１で得た粗ギノサポニンをスチレン系吸着樹脂、
サーバクロムＸＡＤ−２で処理し、３０〜４０％メタノ
ールで溶出した。
を薄層クロマトグラフィーにより確認した。実施例９ 実施例１で得た粗ギノサポニンをスチレン系吸着樹脂、
サーバクロムＸＡＤ−２で処理し、３０〜４０％メタノ
ールで溶出した。
溶出液を減圧下蒸発乾固し、淡黄色粉末２ｆを得た。こ
れをシリカゲル（２００ｆ）カラムクロマトグラフィー
に付し、クロロホルム●メタノール●水（６５：３５：
１０下層）で分画溶出し、さらにこの操作を２回繰返し
、ギノサポニンＯ（１５０ｍｇ）を得た。本品の物性は
後記の第１表および第２表に示す通りである。実施例１
０ ギノサポニン０１５０ｍ９を０．００５Ｍ一燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）３０ｍｔに溶解し、こ
れにセルラーゼ（シグマ社製）１５０ｍｇを加え、３７
〜・３８℃で２ｅ間攪拌した。
れをシリカゲル（２００ｆ）カラムクロマトグラフィー
に付し、クロロホルム●メタノール●水（６５：３５：
１０下層）で分画溶出し、さらにこの操作を２回繰返し
、ギノサポニンＯ（１５０ｍｇ）を得た。本品の物性は
後記の第１表および第２表に示す通りである。実施例１
０ ギノサポニン０１５０ｍ９を０．００５Ｍ一燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ＰＨ４．Ｏ）３０ｍｔに溶解し、こ
れにセルラーゼ（シグマ社製）１５０ｍｇを加え、３７
〜・３８℃で２ｅ間攪拌した。
反応液を実施例２と同様に処理して、プロギノサポゲニ
ン０１（２０ｍｇ）を得た。本品の物性は、後記の表１
および表２に示す通りである。なお、実施例５および６
において原料として使門用したギノサポニンＣの化学名
は２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−〔β−Ｄ
−グルコピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド〕−２０−０−〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→
６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕であつて、ギ）ンセ
ノシドーＲｂｌと同定された。
ン０１（２０ｍｇ）を得た。本品の物性は、後記の表１
および表２に示す通りである。なお、実施例５および６
において原料として使門用したギノサポニンＣの化学名
は２０Ｓ−プロトパナキサジオールー３−０−〔β−Ｄ
−グルコピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド〕−２０−０−〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→
６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕であつて、ギ）ンセ
ノシドーＲｂｌと同定された。
また、実施例７において原料として使用したギノサポニ
ンＤの化学名は２０Ｓ−プロトパナキサジールー３−０
一〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β−Ｄーグ
ルコピラノシド〕−２０−０−〔β−Ｄ−キシ７ロピラ
ノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕であつ
て、ギンセノシドーＲｂ３と同定された。次に本発明の
ギノサポニン類の薬理効果について述べる。
ンＤの化学名は２０Ｓ−プロトパナキサジールー３−０
一〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β−Ｄーグ
ルコピラノシド〕−２０−０−〔β−Ｄ−キシ７ロピラ
ノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕であつ
て、ギンセノシドーＲｂ３と同定された。次に本発明の
ギノサポニン類の薬理効果について述べる。
人間を含めた咄乳動物は、外より取入れた脂肪とか糖質
の過剰分を脂肪細胞に変換して貯え、外からの補給がな
い場合これを脂肪分解して脂肪酸やグルコースに変えて
エネルギー源として利用する。
の過剰分を脂肪細胞に変換して貯え、外からの補給がな
い場合これを脂肪分解して脂肪酸やグルコースに変えて
エネルギー源として利用する。
この脂肪細胞の脂肪分解には、脳下垂体ホルモンである
副腎皮質刺戟ホルモン（ＡＣＴＨ）や副腎皮質ホルモン
であるアドレナリンが大きく作用し、分解を促進する。
逆に、脂肪細胞の脂肪分解を抑制し、血液中の血糖量が
増大しないようにする働きを持つものが、糖尿病薬とし
て有名な膵病臓ホルモンのインシュリンである。この発
明によるギノサポニン類は脂肪細胞に対して、インシュ
リン様の作用をもちＡＣＴＨの脂肪分解促進を抑制する
。その効果はギノサポニンＢの抑制率１８％からギノサ
ポニンＮの詔％抑制率まで、ＡＣＴＨの脂肪分解促進作
用を、平均２８％抑制する効果をもつ。
副腎皮質刺戟ホルモン（ＡＣＴＨ）や副腎皮質ホルモン
であるアドレナリンが大きく作用し、分解を促進する。
逆に、脂肪細胞の脂肪分解を抑制し、血液中の血糖量が
増大しないようにする働きを持つものが、糖尿病薬とし
て有名な膵病臓ホルモンのインシュリンである。この発
明によるギノサポニン類は脂肪細胞に対して、インシュ
リン様の作用をもちＡＣＴＨの脂肪分解促進を抑制する
。その効果はギノサポニンＢの抑制率１８％からギノサ
ポニンＮの詔％抑制率まで、ＡＣＴＨの脂肪分解促進作
用を、平均２８％抑制する効果をもつ。
脂肪細胞におけるアドレナリンの脂肪分解促進；作用に
対してのギノサポニン類の抑制力は全体的にＡＣＴＨに
対する場合に比べて弱いが、ギノサポニンＢおよびＥの
みは３０％以上のアドレナリン脂肪分解抑制効力をもつ
。
対してのギノサポニン類の抑制力は全体的にＡＣＴＨに
対する場合に比べて弱いが、ギノサポニンＢおよびＥの
みは３０％以上のアドレナリン脂肪分解抑制効力をもつ
。
また脂肪細胞は、グルコースを中性脂肪酸に変２換して
貯える作用を有するが、脂肪細胞のグルコースから中性
脂肪を合成する能力を上記ギノサポニン類はいずれも抑
制する作用を有し平均約５０％の抑制力をもつ。
貯える作用を有するが、脂肪細胞のグルコースから中性
脂肪を合成する能力を上記ギノサポニン類はいずれも抑
制する作用を有し平均約５０％の抑制力をもつ。
従つて本発明のギノサポニン類は、脂肪細胞にこおける
脂肪分解抑制剤および脂肪合成抑制剤としての新しい脂
質代謝剤としての医薬品の用途が期待される。
脂肪分解抑制剤および脂肪合成抑制剤としての新しい脂
質代謝剤としての医薬品の用途が期待される。
次に本発明のギノサポニン類の薬理試験結果を示す。薬
理試験結果 ５Ｉ試験用
脂肪細胞の調整使用動物は体重１５０〜１８０ｙ（７）
Ｗｉｓｔｅｒ系雄ラットを使用し、このラットを使用し
、このラットから副翠丸脂肪組織をとり出し、ＲＯｄｂ
ｅｌｌの方法〔Ｍ．ＲＯｄｂｅｌｌ：Ｊ．ＢｌＯｌ．ｓ
Ｃｈｅｍｌ２３９、３７５４（１９６４）〕により脂肪
細胞を得た。
理試験結果 ５Ｉ試験用
脂肪細胞の調整使用動物は体重１５０〜１８０ｙ（７）
Ｗｉｓｔｅｒ系雄ラットを使用し、このラットを使用し
、このラットから副翠丸脂肪組織をとり出し、ＲＯｄｂ
ｅｌｌの方法〔Ｍ．ＲＯｄｂｅｌｌ：Ｊ．ＢｌＯｌ．ｓ
Ｃｈｅｍｌ２３９、３７５４（１９６４）〕により脂肪
細胞を得た。
この脂肪組織４ｙを小切片にしＫｒｅｂＯＲｉｎ？ＲＢ
ｉｃａｒｂａｎａｔｅＢｕｆｆｅｒｌＯｍｌ（アルブミ
ン０．４ｑ１コラゲナーゼ１０ｍ９、グルコース５Ｔｒ
Ｌ９を含む。
ｉｃａｒｂａｎａｔｅＢｕｆｆｅｒｌＯｍｌ（アルブミ
ン０．４ｑ１コラゲナーゼ１０ｍ９、グルコース５Ｔｒ
Ｌ９を含む。
ＰＨ７．４）に入れ３ｒＣで５紛間加温し、３０ｒ．ｐ
．ｍ．で遠心分離し浮上する脂肪細胞層を分取する。こ
の脂肪細胞に前記緩衝液１０ｍ１（ＰＨ７．４）を加え
よくふりまぜて洗い３００ｒ′．Ｐ．ｍ．で３＠間遠心
分離する。この操作を２回繰返し、脂肪細胞を完全に洗
い、この脂肪細胞を試験に用いた。検体液はギノサポニ
ンＡ．．Ｂ，．Ｅ．．Ｆ．．Ｇ，．ｌｌＪ，．Ｋ．．Ｍ
．．Ｎ．．Ｏおよびプロギノサポゲニン〜、Ａ−ＡＨｌ
Ｏｌのそれぞれを水溶液とし、ＰＨ７．４に調整したも
のを用いた。Ｉ試験方法および結果 （１）ＡＣＴＨによる脂肪細胞の脂肪分解に及ぼすギノ
サポニン類の影響ａ試験方法 コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫｒｅ比Ｒｉ
ｎｇｅｒＢｉｃａｒｂＯｎａ拍Ｂｕｆｆｅｒ（ＫＲＢＮ
ｐＨ７．４）中に懸濁し、その溶液０．３７ｎ１（脂肪
細胞１００ｍ９相当）、ＡＣＴＨ溶液０．１ｍ１（１μ
Ｖ（７）ＡＣＴＨを含む）、各サポニン溶液０．１ｍ１
（５００ｐｙのサポニンを含む）および５％アルブミン
溶液０．３ｍ１（ＫＲＢにとかし、ＰＨ７．４に調整し
た溶液）を供栓試験管に入れ、３７℃で２時間加温し、
ＤＯＩｅの方法〔Ｖ．Ｐ．ＤＯｌｅ：Ｊ．ＢｉＯｌ．Ｃ
ｈｅｍ．、３５、１５０．（１９５８）〕に従つて遊離
する脂肪酸を測定した。
．ｍ．で遠心分離し浮上する脂肪細胞層を分取する。こ
の脂肪細胞に前記緩衝液１０ｍ１（ＰＨ７．４）を加え
よくふりまぜて洗い３００ｒ′．Ｐ．ｍ．で３＠間遠心
分離する。この操作を２回繰返し、脂肪細胞を完全に洗
い、この脂肪細胞を試験に用いた。検体液はギノサポニ
ンＡ．．Ｂ，．Ｅ．．Ｆ．．Ｇ，．ｌｌＪ，．Ｋ．．Ｍ
．．Ｎ．．Ｏおよびプロギノサポゲニン〜、Ａ−ＡＨｌ
Ｏｌのそれぞれを水溶液とし、ＰＨ７．４に調整したも
のを用いた。Ｉ試験方法および結果 （１）ＡＣＴＨによる脂肪細胞の脂肪分解に及ぼすギノ
サポニン類の影響ａ試験方法 コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫｒｅ比Ｒｉ
ｎｇｅｒＢｉｃａｒｂＯｎａ拍Ｂｕｆｆｅｒ（ＫＲＢＮ
ｐＨ７．４）中に懸濁し、その溶液０．３７ｎ１（脂肪
細胞１００ｍ９相当）、ＡＣＴＨ溶液０．１ｍ１（１μ
Ｖ（７）ＡＣＴＨを含む）、各サポニン溶液０．１ｍ１
（５００ｐｙのサポニンを含む）および５％アルブミン
溶液０．３ｍ１（ＫＲＢにとかし、ＰＨ７．４に調整し
た溶液）を供栓試験管に入れ、３７℃で２時間加温し、
ＤＯＩｅの方法〔Ｖ．Ｐ．ＤＯｌｅ：Ｊ．ＢｉＯｌ．Ｃ
ｈｅｍ．、３５、１５０．（１９５８）〕に従つて遊離
する脂肪酸を測定した。
すなわち、反応系にＤＯｌｅの抽出液３Ｔｎ１を分取
し、チモールブルー溶液１ｍ１を加える。
し、チモールブルー溶液１ｍ１を加える。
この溶液に窒素ガスを吹込んで攪拌しながら０．００８
規定水酸化ナトリウム水溶液て滴下し、検量線より遊離
脂肪酸量を測定する。
規定水酸化ナトリウム水溶液て滴下し、検量線より遊離
脂肪酸量を測定する。
なお、脂肪分解率は次式により求められる
脂肪分解抑制率（％）＝△ｋ旦刈００
Ａ：ＡＣＴＨ（１μダＩｍｌ）のみの添加によ り生じ
た遊離脂肪酸量Ｂ：ＡＣＴＨ（１μＱｌｍＬ）＋サポニ
ン（２０μＦＩＴｆｌｌ）の添加により生じた遊離脂肪
酸量ｂ試験結果 ＡＣＴＨによる脂肪細胞の脂肪分解に対 するギノサポニン類の抑制率の測定結果を第３表に示し
た。
た遊離脂肪酸量Ｂ：ＡＣＴＨ（１μＱｌｍＬ）＋サポニ
ン（２０μＦＩＴｆｌｌ）の添加により生じた遊離脂肪
酸量ｂ試験結果 ＡＣＴＨによる脂肪細胞の脂肪分解に対 するギノサポニン類の抑制率の測定結果を第３表に示し
た。
以上のごとくＡＣＴＨｌμＹｌｍｔを脂肪細胞に作用さ
せ３ｒＣで２時間保つとき脂肪を分解して８．４ｐＥｑ
１ｑの遊離脂肪酸を生成するが、ギノサポニン類をそれ
ぞれ２０μＹＩ７７！ｌ添加すると上記のごとく明らか
にＡＣＴＨの脂３１肪分解作用を抑制し、遊離脂肪酸の
生成物が減少する。
せ３ｒＣで２時間保つとき脂肪を分解して８．４ｐＥｑ
１ｑの遊離脂肪酸を生成するが、ギノサポニン類をそれ
ぞれ２０μＹＩ７７！ｌ添加すると上記のごとく明らか
にＡＣＴＨの脂３１肪分解作用を抑制し、遊離脂肪酸の
生成物が減少する。
その平均抑制率は２８％である。（２）アドレナリンに
よる脂肪細胞の脂肪分解に対するギノサポニン類の影響
ａ試験方法 ３− コラゲナ
ーゼ処理して得た脂肪細胞をＫｒｅＹｆ５Ｒｉｎ？ＲＰ
ｈＯｓｈａｔｅＢｌｌｆｆｅｒ（ＫＲＰｌＰＨ７．４）
に懸濁し、その溶液０．３ｍｔ（脂肪細胞１００ｍ９相
当）、アドレナリン溶液０．１ｍ１（１μｙのアドレナ
リンを含む）各サポニ４ン溶液０．１ｍｔ（２０μｖの
サポニンを含む）および５％アルブミン溶液０．５ｍＬ
（ＫＲＰに溶解しＰＨ７．４に調整した溶液）を共栓試
験管に入れて、３７℃で２時間加温し、ＤＯＩｅの方法
（前記１）と同様）に従つて遊離する脂肪酸量を測定し
た。
よる脂肪細胞の脂肪分解に対するギノサポニン類の影響
ａ試験方法 ３− コラゲナ
ーゼ処理して得た脂肪細胞をＫｒｅＹｆ５Ｒｉｎ？ＲＰ
ｈＯｓｈａｔｅＢｌｌｆｆｅｒ（ＫＲＰｌＰＨ７．４）
に懸濁し、その溶液０．３ｍｔ（脂肪細胞１００ｍ９相
当）、アドレナリン溶液０．１ｍ１（１μｙのアドレナ
リンを含む）各サポニ４ン溶液０．１ｍｔ（２０μｖの
サポニンを含む）および５％アルブミン溶液０．５ｍＬ
（ＫＲＰに溶解しＰＨ７．４に調整した溶液）を共栓試
験管に入れて、３７℃で２時間加温し、ＤＯＩｅの方法
（前記１）と同様）に従つて遊離する脂肪酸量を測定し
た。
すなわち反応系にＤＯｌｅの抽出液３ｍｔを加え５分間
振とう後、ヘプタン３ｍ１を分取し、チモールブルー溶
液１ｍ１を加える。
振とう後、ヘプタン３ｍ１を分取し、チモールブルー溶
液１ｍ１を加える。
この溶液を窒素ガスで攪拌しながら０．００８規定水酸
化ナトリウム水溶液で適定し検量線より誘離脂肪酸量を
求める。なお、上記抑制率は前記（１）に用いた式と同
じ式を用いた。
化ナトリウム水溶液で適定し検量線より誘離脂肪酸量を
求める。なお、上記抑制率は前記（１）に用いた式と同
じ式を用いた。
ｂ試験結果
アドレナリンによる脂肪細胞の脂肪分解
に対するギノサポニン類の抑制率の測定結果を第４表に
示した。
示した。
以上のごとくアドレナリン１μＹｌｍｌを脂肪細胞に作
用させ３ｒｃで２時間保つとき、脂肪を分解して１４．
１μＥｑｌｙの遊離脂肪酸を生じる。
用させ３ｒｃで２時間保つとき、脂肪を分解して１４．
１μＥｑｌｙの遊離脂肪酸を生じる。
このときギノサポニン類をそれぞれ２０μ３０ｇＩｊ１
ｔ共存させるといずれの場合も脂肪分解を抑制し、遊離
脂肪酸の生成は減小する。
ｔ共存させるといずれの場合も脂肪分解を抑制し、遊離
脂肪酸の生成は減小する。
しかしＡＣＴＨによる脂肪分解に対するギノサポニン類
の抑制率と比べると小さい。ただギノサポニンＢおよび
ＥのみはＡＣＴＨに対す３５るときより強い効果を示す
。（３）脂肪細胞におけるグリコースからの脂肪合成に
およぼすギノサポニン類のの影響ａ試験方法 本法はカーボンに放射能マークした１℃４０−グルコ
ースを脂肪細胞に作用させ、脂肪合成にくりこまれ、中
性脂肪として脂肪細胞にとりこまれたグルコース量を放
射能カウント量により測定、その脂肪合成能に及ぼすギ
ノサポニン類の影響を試験する。
の抑制率と比べると小さい。ただギノサポニンＢおよび
ＥのみはＡＣＴＨに対す３５るときより強い効果を示す
。（３）脂肪細胞におけるグリコースからの脂肪合成に
およぼすギノサポニン類のの影響ａ試験方法 本法はカーボンに放射能マークした１℃４０−グルコ
ースを脂肪細胞に作用させ、脂肪合成にくりこまれ、中
性脂肪として脂肪細胞にとりこまれたグルコース量を放
射能カウント量により測定、その脂肪合成能に及ぼすギ
ノサポニン類の影響を試験する。
すなわち、コラゲナーゼ処理して得た脂
肪細胞をＫＲＢ中に懸濁し、その溶液０．３５ｍ１（脂
肪細胞１００ｍｇ相当）、各サポニン溶液０．１ｍ１（
２０μｙのサポニンを含む）、５％アルブミン溶液０．
５ｍ１（ＫＲＢ溶液１０７ｎ．Ｍグルコースを含む、Ｐ
Ｈ７．４）、１１Ｃ−グルコース溶液０．０５Ｔ！ＬＬ
（０．５μＣｉ．．ＫＲＰ溶液、ＰＨ７．４、１０几Ｍ
グルコースを含む）を共栓試験管に入れ、３ｒＣで３０
分加温し、ＤＯｌｅの抽出液５ｍ１を加え５分間振とう
後、ヘプタン３ＴｒＬＬおよび水２ｍ１を加え５分間振
とうする。
肪細胞１００ｍｇ相当）、各サポニン溶液０．１ｍ１（
２０μｙのサポニンを含む）、５％アルブミン溶液０．
５ｍ１（ＫＲＢ溶液１０７ｎ．Ｍグルコースを含む、Ｐ
Ｈ７．４）、１１Ｃ−グルコース溶液０．０５Ｔ！ＬＬ
（０．５μＣｉ．．ＫＲＰ溶液、ＰＨ７．４、１０几Ｍ
グルコースを含む）を共栓試験管に入れ、３ｒＣで３０
分加温し、ＤＯｌｅの抽出液５ｍ１を加え５分間振とう
後、ヘプタン３ＴｒＬＬおよび水２ｍ１を加え５分間振
とうする。
ヘプタン層３ｍ１を分取し、アルカリ性エタノール溶液
（イ）．５規定水酸化ナトリウム溶液、５０％エタノー
ル溶液）を３ｍ１加え５分間振とうする。エタノール層
を１ＴｒＬ１分取し、トルエンシンチレーシヨン溶液１
０ｍ１を加え、ＳｋｉｐｓｋｉｅｔａＩの方法〔ＢｉＯ
ｃｈｅｍ．ＢｉＯｐｈｙｓ．ＡＣｔａｌｌＯ６、３８６
（１９６５）〕により測定した。（ｂ）試験結果 脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪 合成におよぼすギノサポニン類の促進率を測定し第５表
に示した。
（イ）．５規定水酸化ナトリウム溶液、５０％エタノー
ル溶液）を３ｍ１加え５分間振とうする。エタノール層
を１ＴｒＬ１分取し、トルエンシンチレーシヨン溶液１
０ｍ１を加え、ＳｋｉｐｓｋｉｅｔａＩの方法〔ＢｉＯ
ｃｈｅｍ．ＢｉＯｐｈｙｓ．ＡＣｔａｌｌＯ６、３８６
（１９６５）〕により測定した。（ｂ）試験結果 脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪 合成におよぼすギノサポニン類の促進率を測定し第５表
に示した。
以上のごとくギノサポニン類の共存しない場合に比べ、
脂肪細胞におけるグルコースの中性脂肪としてのとり込
みは、ほとんどが半分以下となり、ギノサポニン類がそ
れぞれ脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪合成を抑
制する作用のあることは明らかである。
脂肪細胞におけるグルコースの中性脂肪としてのとり込
みは、ほとんどが半分以下となり、ギノサポニン類がそ
れぞれ脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪合成を抑
制する作用のあることは明らかである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 式（ I ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）〔式中Ｒ＾
１が〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α−Ｌ−
ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノ
シル基、Ｒ＾２が水素原子、β−Ｄ−グルコピラノシル
（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基、α−Ｌ−ラ
ムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル
基もしくはβ−Ｄ−グルコピラノシル基、Ｒ＾３が水素
原子もしくはヒドロキシ基〕で表わされる化合物。 ２ アマチヤヅルを水または含水低級アルコールで抽出
し、抽出液を非イオン性吸着樹脂で処理したのち被吸着
物質を低級アルコールで溶出し、この溶出液をアルミナ
で処理したのち被吸着物質を低級アルコールまたは含水
低級アルコールで溶出して粗ギノサポニン類を得、これ
を次いでスチレン系吸着樹脂およびシリカゲルでそれぞ
れ処理し、単離される化合物中、下記式（ I ）でＲ＾
１がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α−Ｌ−ラ
ム、ピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノシ
ル基、Ｒ＾２がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→６）−
β−Ｄ−グルコピラノシル基、Ｒ＾３が水素原子の化合
物を必要に応じて酢酸で加水分解してＲ＾２が水素原子
に変換された化合物とし、下記式（ I ）：▲数式、化
学式、表等があります▼（ I ）〔式中Ｒ＾１が〔β−
Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α−Ｌ−ラムピラノ
シル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノシル基、Ｒ＾
２が水素原子、β−Ｄ−グルコピラノシル（１→６）−
β−Ｄ−グルコピラノシル基、α−Ｌ−ラムノピラノシ
ル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基もしくはβ
−Ｄ−グルコピラノシル基、Ｒ＾３が水素原子もしくは
ヒドロキシ基〕で表わされるギノサポニン類を得ること
を特徴とするギノサポニン類の製造法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55030636A JPS6043359B2 (ja) | 1980-03-11 | 1980-03-11 | ギノサポニン類およびその製造法 |
| US06/205,377 US4339442A (en) | 1980-03-11 | 1980-11-07 | Gynosaponins, their use and a process for preparing the same |
| DE19803042117 DE3042117A1 (de) | 1980-03-11 | 1980-11-07 | Gynosaponine, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneipraeparate |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55030636A JPS6043359B2 (ja) | 1980-03-11 | 1980-03-11 | ギノサポニン類およびその製造法 |
Related Child Applications (7)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6150880A Division JPS56127400A (en) | 1980-03-11 | 1980-05-08 | Preparation of saponin by acid hydrolysis |
| JP6150780A Division JPS56127098A (en) | 1980-03-11 | 1980-05-08 | Preparation of saponin by enzymatic hydrolysis |
| JP17042483A Division JPS5980698A (ja) | 1983-09-14 | 1983-09-14 | 新規のギノサポニン類およびその製造法 |
| JP17042583A Division JPS5980699A (ja) | 1983-09-14 | 1983-09-14 | ギノサポニン類 |
| JP17042283A Division JPS5980696A (ja) | 1983-09-14 | 1983-09-14 | 新規ギノサポニンおよびその製造法 |
| JP17042683A Division JPS5980700A (ja) | 1983-09-14 | 1983-09-14 | ギノサポニンの分離法 |
| JP17042383A Division JPS5980697A (ja) | 1983-09-14 | 1983-09-14 | 新規ギノサポニン類 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS56127399A JPS56127399A (en) | 1981-10-06 |
| JPS6043359B2 true JPS6043359B2 (ja) | 1985-09-27 |
Family
ID=12309316
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55030636A Expired JPS6043359B2 (ja) | 1980-03-11 | 1980-03-11 | ギノサポニン類およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6043359B2 (ja) |
-
1980
- 1980-03-11 JP JP55030636A patent/JPS6043359B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS56127399A (en) | 1981-10-06 |
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