JPS5980699A - ギノサポニン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明はアマチャヅル（Ｇｙｎｏｄｅｍｎａ　ｐｅｎ
ｔａｐｈｙｌｌｕｍＭａｌｃｉｎｏ　）のサポニンの構
成成分であるギノサボニン類およびその製造法に関する
。

仁の発明の発明者らはアマチャヅルの含有成分を研究し
た結果、下記の新規なギノサボニン類を見出した。　す
なわち、式（Ｉ）： 〔式中Ｒ１が〔β−Ｄ−ゲルコピ２ノシル（１→２）−
α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グル
コピラノシル基であるときは　Ｂｍが水素原子、β−Ｄ
−グルコピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シル基、α−Ｌ−７ムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ
−グルコビラノシル基もしくはβ−Ｄ−グルコピラノシ
ル基であって、Ｗが水素原子もしくはヒドロキシ基であ
り、Ｒ１がβ−Ｄ−グルコビッツシル（１→２）−β−
Ｄ−グルコピラノシル基であるときは、Ｒｓがα−Ｌ−
ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシ
ル基であって　Ｒ１が水素原子であシ、Ｒ１がα−Ｌ−
ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシ
ル基であるときは、Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル（
ｌ→６）−β−Ｄ−グＲ゛が水素原子であり、 Ｒ′カβ−Ｄ−グルコピラノシル基であるときはＷがβ
−Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピ
ラノシル基もしくはａ−１，−ラムノピラノシル（１→
６）−β−〇−グルコピラノシル基であって、Ｒｓが水
素原子であり、またＲ’が水素原子であるときは、Ｒ”
がβ−Ｄ−グルコピラノシル基、β−Ｄ−キシロピラノ
シル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基もしくは
α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコ
ピラノシル基であって、Ｒ”が水素原子もしくはヒドロ
キシ基である〕 で表わされる化合物である。

これらのギノサボニン類（Ｉ）の具体名を列挙すると次
の通りである。

２０８−プロトパナキサジオール−３−０−（（β−Ｄ
−ゲルコピ２ノシル（１→２）−α−り一２ムノピラノ
シル（１→６））−β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０
−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（１→６）−β−Ｄ
−グルコピラノシド〕−以下「ギノサボニンＡ」と称す
るー ２０８−プロトパナキサジオールーａ−ｏ−（（β−Ｄ
−グルコピラノシル（ｌ→２）−α−Ｌ−ラムノピラノ
シル（１→６）］−］β−Ｄ−／ルコビラノシド−２０
−０−［α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ
−グルコピラノシド〕−以下「ギノプボニンＢ」と称す
る− ２０８−プロトパナキサジオール−３−０−（（β−Ｄ
−グルコピラノシル（１→２）−α−Ｔ、　−２ムノピ
ラノシル（１→６））−β−Ｄ−グルコピラノシド）−
２０−０−β−Ｄ−グルコピラノシドー以下「ギノサボ
ニンＦ」と称する−２０８−プロトパナキサジオール−
３−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β−
Ｄ−グルコピラノシド）−２０−０−（α−り、−ラム
ノビッツシル（１→６）−β−〇−グルコピラノシド〕
−以下「ギノサボニンＥ」と称する−２０８−プロトバ
ナキサジオール−３，２０−ビス−〇−〔α−Ｌ−ラム
ノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノクド〕
−以下「ギノサボニンＧ」と称する− ２０Ｓ−プ四トパナキサジオール−３−０−（σ−Ｌ−
ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド）−２０−０−β−Ｄ−グルコピラノシドー以下「ギ
ノサボニンＫ」と称する−２０８−プロトパナキサジオ
ール−３〜０−β−Ｄ−グルコピラノシド−２０−０−
（β−Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グル
コピラノシド〕−以下「ギノサボニンＩ」と称する−２
０８−プロトパナキサジオール−３−０−β−Ｄ−グル
コピラノシド−２０−０−（（ｇ−Ｌ−ラムノビ２ノシ
ル（ｌ→６）−β−１）−グルコピラノシドツー以下「
ギノザボニンＪ」と称する＝２０８−プロトパナキサジ
オール−２０−０−（β−１）−キシロビ２ノシル（１
−６）−β−Ｄ−グルコピジノシド〕−以下「ギノサボ
ニンＭ」と称する− ２０８−プロトパナキサジオール−２０−０−（α−Ｌ
−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド〕−以下「ギノサボニ７Ｎ」と称する− ２０８　、　２６−ヒトロキシグロトパナキサジオール
ーａ−ｏ−（（β−Ｄ−グルコピラノシル（ｌ→２）−
α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グル
コピラノシド）−２０−０−（α−１ｉ　−ｙムノビラ
ノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕−以下
「ギノサボニン０」と称する− ２０８−プμトバナキサジオール−３−０−［：α−Ｌ
−ラムノピラノシル（ｌ→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド）−２０−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（ｌ→
６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕−以下「プロギノサ
ボゲニンＡ、Ｊと称する一プロトパナキサジオールー３
−Ｏ−（（β−〇−グルコピラノシル（１→２）−α−
Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド）−以下１゛ブロギノサボゲニンＡ−ＡＩ−Ｉ
Ｊと称する− ２０８　、　２６−ヒドロキシプロトノくナキサジオー
ル−２０−０−β−Ｄ−グルコピラノシド−以下［プロ
ギノサボゲニンＯ，Ｊと称するーかくしてこの発明は、
前記式（１）で表され、式中Ｒが水素原子　Ｒ２がβ−
Ｄ−グルコピラノシル−キシロピラノシル（１→６）−
βーＤーグルコピラノシル基もしくはαーＬーラムノピ
ラノシル（１→６）−βーＤーグルコピラノシル基、Ｒ
８が水素原子もしくはヒドロキシ基の化合物、具体的に
はギノサポニンＭ１ギノサポニンＮ及びプロギノサポゲ
ニン０１を提供するものである。

ギノサボニン類（Ｉ）のうち、ギノサボニンＡ，Ｂ。

ＥＳＦ，Ｇ，Ｉ、Ｊ，に、％ＭＳＮおよび０はいずれも
アマチャヅルのサポニンの構成成分であり、例えば次の
方法によってアマチャヅルから抽出。

分離される。

先ず初めに、アマチャヅルを水または含水低級アルコー
ルで抽出する。　含水低級アルコールとしては５０　／
　％程度以下の含水メタノール、含水エタノール等が例
示される。　この抽出は加温または加熱下に行うのが好
ましい。　なお、原料のアマチャヅルは、抽出に先立っ
て予め細切し、あるいは常法により脱脂したものを用い
てもよい。

また抽出溶媒として含水低級アルコールを用いた場合に
は抽出液を濃縮してアルコール分を除去したのち、適量
の水を加えて次の非イオン性吸着樹脂での処理に付すの
が好ましい。

非イオン性吸着樹脂としては、スチレン−ジビニルベン
ゼン共重合体からなるハイボーラスなものが好ましく、
具体的にはアンバーライトＸＡＤ　−　２（米国ローム
アンドハース社製）、セファデックスＬＨ２０（ファー
マシ−Ｙファインケミカルズ社製）などが繁用される。

　この処理は、吸着樹脂を充填したカラムに上記で得ら
れた抽出液を通液して行うのが便利である。　この操作
によシサボニンが樹脂に吸着される。

次いで樹脂に吸着されたサポニンを低級アルコールで溶
出する。　溶出溶媒として用いられる低級アルコールと
してはメタノール、エタノール等が好ましい。　なお、
溶出に先立って予めカラムを水あるいは２０ｖ／％程度
の含水低級アルコールで洗浄するのが好ましい。

上記で得られた低級アルコール溶出液を次いでアルミナ
で処理する。　この処理も、アルミナを充填した力ンム
を用いて行えば簡便である。　この処理により、サポニ
ンはアルミナに吸着される。

なお、このアルミナでの処理に先立って上記の低級アル
コール溶出液を予め適宜濃縮しておいてもよい。

アルミナに吸着されたサポニンを次いで低級アルコール
または含水低級アルコールで、好ましくは５０／％程度
の含水低級アルコールで溶出する。　この溶出液を濃縮
する仁とにより、粗ギノサボニン類が得られる。

上記のようにして得られる粗ギノサボニン類は、ギノサ
ボニンＡ，Ｂ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｉ，Ｊ，Ｋ。

ＭＳＮおよび０等からなり、仁れらの各成分は例えば次
の方法により分離．ｆｆ製される。

すなわち、粗ギノサボニン類を水に溶解し、仁の水溶液
をスチレン系吸着樹脂、例えばサーバクロム（　Ｓｅｒ
ｖａｃｈｒｏｍ　）　ＸＡＤ　−　２　［：サーバ（　
Ｓｅｒｖａ　）社製〕で処理し、被吸着物質を４５−１
００チメタノール水溶液で溶出し、溶出液を濃縮後シリ
カゲルカラムで処理する。

シリカゲルに吸着されたサポニンを次いでクロロホルム
・低級アルコールφ水で好ましくはクロロホルム書メタ
ノールＯ水（６５：３５：１０下層）で浴出し、薄層ク
ロマドグシフイー（ＴＬＣ）を指標とし、溶出液をフジ
クション１〜６に分画する。

フラクシミン１〜３をそれぞれシリカゲルカ２ムで処理
し、次いでシリカゲルに吸着されたサボニンヲクロロホ
ルム・低級アルコール・酢酸エテル・水で好ましくはク
ロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水（２：２：４
：１ｆ層）で分画溶出する。

゛また、フラクション４および５もそれぞれシリカゲル
カラムで処理し、次いで、シリカゲルに吸着されたサポ
ニンを低級アルコール・酢酸エチル１水で好オしくけｈ
−ブタノール・酢酸エチル・水（４：１：２上層）で分
画溶出する。

また、フラクション６もシリカゲルカラムで処理シ、次
いで、シリカゲルに吸着されたサポニンをクロロホルム
・低級アルコール・水で、好ましくはクロロホルム争メ
タノール・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出する
。

上記で得られた各分画溶出液を濃縮し、さらにＴＬＣの
結果を指標にして前記のシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーを繰返し、これらのギノサボニン類を各個別に分
離、精製すると、７ラクシヨン１からギノサボニンＭお
よびＮが、７ラクシヨン２からギノサボニンＩ、Ｊおよ
びＫが、ツー）クション３からギノサボニンＧが、７ラ
クシヨン４からギノサボニンＥおよびＦが、７ラクシヨ
ン５からギノサボニンＢが、またフラクション６がらギ
ノサボニンＡがそれぞれ得られる。

１ｆｔ−、キ／ｆｙｔ’！ニン０は、粗ギノサボニン類
ヲスチレン系吸着樹脂で処理し、被ｅ、着物質を３０〜
４０チメタノールで溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲル
カラムで処理し、次いで吸着されたサポニンをクロロホ
ルム・低級アルコール・水テ、好ましくはクロロホルム
・メタノール１水（６５：３５：１０下層）で分画溶出
することにより、分離、精製できる。

さらにグロギノサボゲニンＡ、およびグロギノサボゲニ
ン０．はそれぞれギノサボエンＡおよヒキノサボニン０
を酸素加水分解する仁とにより得られ、またグロギノサ
ボニンＡ−ＡＨはギノサボニンＡを５０％酢酸で処理す
ることにより製造できる。

また、ギノサボニンＦ、Ｇ１１．Ｊ、ＫＳＭおよびＮは
他のギノサボニン類（Ｉ）を酵素加水分解することによ
っても製造できる。

このようにして得られるギノサボニンＪ７’１（Ｉ）は
、すべて新規であり、脂質分解抑制および脂質合成抑制
作用を有し、医薬として有用である。　そして、ギノナ
ボニンａ　（Ｉ）を医薬として用いる場合には、個々の
サポニンを有効成分として使用することができる。

次にこの発明を実施例により説明する。

実施例１ 乾燥したアマチャヅル全草２　Ｋｙを水３０１で熱時２
回抽出した。　両袖出液を合し、非イオン性吸着樹脂、
アンバーライトＸＡＤ　−２４ｔを充填したカラムに通
導した。　吸着部を水１０ｆ１次いで２０％メタノール
６ｔで洗浄したのち、メタノール５ｔで溶出し、溶出液
を減圧下に蒸発乾固し、黄褐色粉末３７ｆを得た。　こ
れをメタノール１ｔに溶解し、アルミナ３００Ｆを充填
したカラムに通導したのち、５０％メタノール約２０ｔ
で溶出した。　溶出液を減圧下に濃縮し、淡黄色粉末と
して粗ギノサボニン２５１を得た。

粗ギノサボニン２０１を水１ｔに溶解し、スチレン系吸
着樹脂サーバクロムＸＡＤ　−２（サーバ社製）６００
−を充填したカラムに通導した。

吸着部を２０％メタノールより順次メタノール含瀘を増
しながら溶出し、４５〜１００％メタノール溶出液を合
し、減圧下に蒸発乾固して淡黄色粉末１６ｆｔ−得た。

　これをシリカゲル（３００ｆ）カラムクロマトグラフ
ィーに付し、ＴＬＣを指標として、クロロホルム・メタ
ノール−水（６５：３５：１０下層）で１００−ずつ分
画溶出してフラクション１〜Ｇを得、それぞれ蒸発乾固
した。　これらフラクション１〜３をそれぞれシリカゲ
ル（１００ｆ）カラムクロマトグラフィーに付し、クロ
ロホルム−メタノールψ酢酸エチルー水（２：２：４：
１ｆ層）で分画溶出し、さらに仁の操作を２回緑返し、
フラクション（ｘ、ｘｒ）からギノサボニンＭ（６０ｖ
）およびギノサボニンＮ（１６０り）を、フラクション
２（１，１ｆ）からギノサボニンＩ（６０ｖ）およびギ
ノサボニンＪ（１２０ｑ）ならびにギノサボニンＫ（１
１０岬）を、またフラクション３（１，Ｏｆ）からギノ
サポニンＧ（４５０９）をそれぞれ得た。

またフラクション４および５をそれぞれシリカゲル（２
００ｒ）カラムクロマトグラフィーに付し、ｎ−ブタノ
ールの酢酸エチル・水（４：１：２ｆ層）で分画溶出し
、さらにこの操作を２回繰返しフラクション４（３，４
Ｆ）からギノサボニンＤ　（３５０１１ｖ）、ギノサボ
＝ｙＥ（１５００ｔ’Ｐ）およびギノサボニンＦ＜８０
ｖｙ）を、また７ラクシヨン５　（２，，５ｆ　）から
ギノサボニンＢ（２２０り）およびギノサボニンＣ（２
４０１１ｖ）をそれぞれ得た。

さらに、フラクション６（０，９Ｆ）をシリカゲル（１
００Ｆ）カラムクロマドグ２フイーに付し、クロロホル
ム・メタノール・水（６５：３５：１０下層）で分画溶
出し、さらにこの操作を１回繰返してギノサボニンＡ（
５１０η）を得た。

各ギノサボニンの物性は後記の表１および表２に示す通
りである。

実施例２ ギノサボニンＡ２５　（ｌｖを０．００５　Ｍ−燐酸２
水素ナトリウム水溶液（ｐＨ４，０）　５０ｒＪに溶解
し、これに粗へスペリジナーゼ（田辺製薬株式会社製）
５００■を加え、３７〜３８℃で６時間攪拌した。　反
応液をスチレン系吸着樹脂、サーバクロムＸＡＤ−２（
サーバ社製）　５０　ｔｎｌを充填したカラムに通導し
、水１を次いで２０％メタノール２ｔで洗浄したのち、
メタノール３００−で溶出した。

溶出液を減圧下に濃縮し、濃縮物をシリカゲル争カラム
書クロマトグラフィーに付し、クロロホルム・メタノー
ル・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出して、ギノ
サボニンＦ（２０Ｗ）、ギノサボニンＫ（１５ｑ）およ
びプロギノサボエンん（ａ　ｓｑ）を得た。　ギノサボ
ニンＦおよびＫはＩｔζおよびＮＭＲによシ、実施例１
で得られた標品と同定した。

まだ、プロギノサポゲニンんの物性は後記の表１および
表２に示す通導である。

実施例３ ギノサボニンＡ１５０ｖを５０チ酢酸１０−に溶解し、
７０℃で６時間攪拌した。　反応液をスチレン系吸着樹
脂、サーバクロム　ＸＡＤ　−２５０−を充填したカラ
ムに付して、グロザボゲニン両分約１００■を得た。　
これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー忙付し、ク
ロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水（２：２：４
：１ｆ層）で分画溶出して、グロギノサボゲニンＡ−Ａ
Ｈ３５ｍｇを得た１、　本市の物性は後記の表１および
表２に示す通りである。

実施例４ ギノサボ＝ｙＡ４００ＭＰを０．００５Ｍ−燐ｒ０．２
水素ナトリウム水溶液（ｐＩＩ４．０）５０−に溶解し
た。　これにセルラーゼ（シグマ社！Ａ）３００叩を加
え、３７〜３８℃で２４時間攪拌した。

反応液を実施例２と同様に処理して、ギノサボニンＫ（
１１０Ｗｖ）を得た。　本市はＩ　ｎおよびＮＭＲによ
り、実施例１で得た標品と同定した。

実施例５ ギノサボニンＢおよびＣの混合物１．４ｔをｏ、ｏｏｓ
Ｍ−燐酸２水素ナトリウム水溶液（ｐＨ４，０）２００
ｄに溶解した。　これにセルラーゼ（シグマ社製）６０
０ｍ９を加え、３７〜３８℃で７時間攪拌した。

反応液をサーバクロム　ＸＡＤ−２（８０ｖｒｔ）のカ
ラムで処理して約１．１ｆの加水分解物を得た。

これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付シ、ク
ロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水（２：２：４
：１ｆ層）で分画溶出してギノサボニンＫ（１４０Ｗ）
ならびにギノサボニンＦおよびＧを含む混合物（５５０
ツ）を得た。　この混合物を再びシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーに付し、クロロホルム・メタノール・水
（６５：３５：１０下層）で分画溶出して、ギノサボニ
ンＦ　（５０ｙ）およびギノサボニ７Ｇ（１５０ｖ）を
得た。　これらのギノサボニンＦ、ＧおよびＫはＩＲお
よびＮＭ■ζによシ実施例１で得られた標品と同定した
。

実施例６ ギノサボニンＢおよびＣの混合物３００りを５０チ酢酸
１０−に溶解し、７０℃で６時間攪拌した０反応液をサ
ーバクロム　ＸＡＤ−２（５０ｍ）のカラムに付して分
画し、プロサボゲニン画分をシリカゲルカラムクロマト
グラフィーに付。シ、クロロホルム・メタノール・水（
６５：３５：１０下層）で分画溶出してプロギノサボゲ
ニンＡ　−ＡＨ（３ｏｔｖ）を得た。　水晶はＩ　Ｒお
よびＮＭＲにより、実施例３で得られた標品と同定した
。

実施例７ ギノサボニンＤおよびＥの混合物２Ｆを０．００５Ｍ−
燐酸２水素ナトリウム水溶液（ｐＨ４，０）に溶解した
。　これにセルラーゼ（シグマ社ｎ）ｘ２を加え、３７
〜３８℃で２０時間攪拌した。

反応液をサーバクロム　ＸＡＤ−２（８０ｗｎｌ　）の
カラムで処理して約１．６ｆの加水分解物を得た。

これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、ク
ロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水（２：２：４
：１ｆ層）で分画溶出してギノサポ＝ｙＩ（３ｓｓ１ｑ
）、Ｊ（２５０ｖ）、Ｍ（８０叩）およびＮ（９０ツ）
を得た。　これらの各ギノサボニンはＩＲおよびＮＭＲ
により、実施例１で得られた標品とそれぞれ同定した。

実施例８ ギノサボニンＥ５１Ｖを０．００５　Ｍ−燐酸２水素ナ
トリウム水溶液（ＰＨ４，０）　１　ｍｌに溶解し、こ
れにセルラーゼ１０ηを加え、３７〜３８℃で４時間攪
拌した。　反応液中にギノサポニンＪおよびＮが生成し
ていることを薄層クロマトグラフィーにより確認した。

実施例９ 実施例１で得た粗ギノサボニンをスチレン系吸着樹脂、
サーバクロム　ＸＡＤ−２で処理し、３０〜４０％メタ
ノールで溶出した。　溶出液を減圧下蒸発乾固し、淡黄
色粉末２ｆを得た。　これをシリカゲル（２００Ｆ）カ
ラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム・メタノ
ール・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出し、さら
にこの操作を２回繰返し、ギノサボニンｏ（ｘｓｏｌｖ
）を得た。　水晶の物性は後記の第１表および第２表に
示す通導でらる。

ギノサボニンｏ　　１ｓｏＩｌｖを０．００５Ｍ−燐酸
２水素ナトリウム水溶液（ＰＨ４，０）３０−に溶解し
、これにセルラーゼ（シグマ社製）１５０岬を加え、３
７〜３８℃で２４時間侵押した。　反応液を実施例２と
同様に処理して、プロギノザボゲニン０．　（２０ｑ　
）を得た。　水晶の物性は後記の表１および表２に示す
通りである。

なお、実施例５および６において原料として使用したギ
ノサボニンＣの化学名は２　ＯＳ−プロトパナキサジオ
ール−３−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（ｊ→２）
−β−１）−グルコピラノシド）　−２０−０−（β−
１）−グルコピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド〕であって、ギンセノシドーＲｂ、　　と同定
された。　また、実施例７において原料として使用した
ギノサボニンＤの化学名は２０　Ｓ−プロトパナキサジ
オールー３−０−（β−Ｄ−ゲルコピ２ノシル（１→２
）−β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０−０−（β−Ｄ
−キシロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコヒラノ
シド〕であって、ギンセノシドーＲｂ。

と同定された。

第　　１　　表 元素分析 サポニン名　　ｍｐ（℃）　　　分子式　　　理論性　
　実験値Ｃチ　）■慢　Ｃ裂　１（俤 ギノザボニンＡ　　２０１−２０３　　Ｃ６ｏＨ１ｏ２
０２７”３１１２０　５５．０３　Ｂ、３１５４．７８
　Ｂ、５７ギノ゛す゛ボニンＢ　　　１９Ｇ−１９８Ｃ
６ｏｌｆ、ｏ２０□６・３Ｈ２０５５，７１８，４２５
５，６３８，５ＧギノサボニンＩＤ　　１９９−２０１
　　Ｃ５４１ｔ、２０２２・３１（２０５６，５２８，
６１５６，３３８，８６ギノサボニｙＦ　　１９１−１
９３　　Ｃ５４Ｈ９□Ｏ□２”：Ｈｌ、、０　５６．５
２８．６１５６．３１８．８６ギノリーボニンＧ　　１
９２−１９４　　ｃ５．ｎ、２ｏ２．−ａｎ２ｏ　　５
７．３Ｊ　８．７３５７．ＩＬ　８．７７ギノザボニン
Ｉ　　１８３（８５Ｃ４７１１８００１７・３Ｈ２０５
８，１３Ｂ−９３５７−７７８，７７ギノサボ＝７Ｊ　
　１８９−１９１　　Ｃ４８Ｈ８□０１□’４Ｈ２０５
７，４７９，０４５７，５８８，９２ギノリーボニｙＫ
　　１８７−１８９　　Ｃ４８Ｈ８□０，７”３Ｈ２０
５８，５２９，００５Ｂ、４］、　８．８９ギノザボ＝
ｙＭ　　１５８−１６０　　Ｃ４□Ｉ（□。０．２＠３
／２ｆｆ２０　６２．９７９．４０　（ｉ３．２ｔ）　
０．６０ギノザボニ７Ｎ　　１６５−１６７　　Ｃ４２
Ｈ□２０１□＠２Ｈ２０６２，６６９，５２６２，８９
９，８１Ｖノザボニン０　２０２−２０５　　Ｃ６，）
Ｈ１ｏ２０２７”４１１２０　５４．２８８．３５５４
．２８８．３０グロギノツポゲニ７に２　　１８Ｂ−１
９０Ｃ５４１１ｇ２０２２＠１Ｉ２０　　　５Ｂ、３６
　８．５３　５Ｂ、３２　８．６０プロギノ侭玉；箔、
　　　１８３−１８５　　Ｃ４８１１８□０，７・Ｉ和
０　　　６０．７４　８．９２　６０．３８　９．０６
グロキノタポゲ’＝７０１　１６７−１６９　　Ｃ３６
Ｈ６２０９＠Ｈ２０６５，８２９，８２６６，０５９，
８５旋光Ｊに −３３７５，１１ｉ３５．１１６０，１０７０１０４０
．１０２０．９８０ ｆｌｃＺ　　　も Ｐ　Ｍ　Ｉｔ　スペクトル＝ サポニン名　　　　　　　　メチル　　　　　　　　Ｃ
−２４］ｒ−タ １■　　　　　　アノメリック　プロトン（Ｊ＝７）　
　（Ｊ＝７）　　（Ｊ＝７）ザボニン名　　　　　　　
　メチル 第２表続き Ｉ）ＭＲスペクトルデータ Ｃ−２４Ｈアノ、メリック　プロトン 次に本発明のギノサボニン類の薬理効果について述べる
。

人間を含めた浦乳動物は、外より取入れた脂肪とか糖質
のＡ刺分を脂肪細胞に変換して貯え、外からの補給がな
い場合これを脂肪分解して脂肪酸やグルコースに変えて
エネルギー源として利用する。　この脂肪細胞の脂肪分
解には、脳下垂体ホルモンである副腎皮質刺戟ホルモン
（ＡＣＴＨ）や副腎皮質ホルモンであるアドレナリンが
大きく作用し、分解を促進する。　逆に、脂肪細胞の脂
肪分解を抑制し、血液中の血ｍＲが増大しないようにす
る働きを持つものが、糖尿病薬として有名な膵臓ホルモ
ンのインシュリンである。　この発明によるギノサボニ
ン類は脂肪細胞に対して、インシュリン様の作用をもち
ＡＣＴＨの脂肪分解促進を抑制する。　その効果はギノ
サボニンＢの抑制率１８％からギノサボニンＮの３８チ
抑制率まで、ＡＣＴｌｌの脂肪分解促進作用を、平均２
８％抑制する効力をもつ。

脂肪＊Ｕ＋胞におけるアドレナリンの脂肪分解促進作用
に対してのギノサボニン類の抑制力は全体的にＡＣＴ）
［に対する場合に比べて弱いが、ギノサボニ７Ｂおよび
Ｅのみは３０４以上のアドレナリン脂肪分解抑制効力を
もつ。

また脂肪細胞は、グルコースを中性脂肪に変換して貯え
る作用を有するが、脂肪細胞のグルコースから中性脂肪
を合成する能力を上記ギノサボニン項はいずれも抑制す
る作用を有し平均約５ｏチの抑制力をもつ。

従って本発明のギノサボニン類は、脂肪細胞におけるＪ
１ハ肪分解抑制剤および脂肪合成抑制剤としての新しい
脂質代謝剤としての医薬品の用途が期待される。　次に
本発明のギノサボニン頑の薬理試験結果を示す。

楽屋試験結果 ■、試験用脂肪細胞のｖＩ４整 使用動物は休３１１５０〜１８０　ｆのｗｉＩｌｔｅｒ
系雄ラットを使用し、仁のラットから副膚丸脂肪組織を
とり出し、Ｒｏｄｂｅｌｌの方法（Ｍ−Ｒｏｄｂｅｌｌ
：　Ｊ　、Ｂｉｏｌ。

Ｃｈｅｍ、２３９，３７５　　（１９６４））Ｋよシ脂
肪細胞を得た。　この１ｉｆｔ肪組織４ｆを小切片にし
、Ｋｒｅｂｏ　Ｒｉｎｗｅｒ　Ｂｉｃａｒｂａｎａｔｅ
　Ｂｕｆｆｅｒ　　１０　ｍｌ　（アルブミ７０．４　
ｆ　＋　’ラゲナーゼ１０ｗｇ、グルコース５りを含む
。　ｐＨ７，４）に入れ３７℃で５０分間加温し、３０
０　ｒ、ｐ、ｒｎ、で遠心分離し浮上する脂肪＃ＵＩ　
／ｉは７４を分取する。　この脂肪細胞に前記緩衝液１
０ｍ（ｐＨ７，４）を加えよくふりまぜて洗い３００　
ｒ−ｐ−ｍ、で３０秒間遠心分離する。　この操作を２
回操返し、脂肪細胞を完全に洗い、この脂肪細胞を試験
に用いた。　検体液はギノサポニｙＡ、Ｂ、　ＥＳＦＳ
Ｇ、Ｉ、Ｊ、に、Ｍ、Ｎ、０およびグロギノサボゲニン
Ａ、　、　Ａ−ＡＨ、０１のそれぞれを水溶液とし、ｐ
Ｈ７，４に調整したものを用いた。

■・試験方法および結果 １）　　ＡＣＴｆｉによる脂肪細胞の脂肪分解に及ぼす
ギノザボニン類の影響 ａ、試験方法 コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫｒｅｂｓＲｉｎ
ｇｅｒＢｉｃａｒｂｏｎａｔｅＢｕｆｆｅｒ　（ＫＲＢ
、ｐｆｌ　７．４　）中ＫＭ濁し、その溶液０．３　ｄ
　（脂肪細胞１００η相当）。

ＡＣＴＨ溶液０．１−（ＩｌｌｆのＡＣＴＨを含む）、
各サポニン溶液０．１　ａｒｔ　（５００μりのサポニ
ンを含む）および５チアルプミン溶液０．３　ｍ！！　
（ＫＲＢＫとかし、ｐｉｆ７．４に調整した溶液）を共
栓試験管に入れ、３７℃で２時間加温し、Ｄｏｌｅの方
法（ｖ、　ｐ　。

Ｄｏｌｅ？Ｊ、Ｂｉｏｌ−Ｃｈｅｍ、、３５　、１５０
　（１９５８）　）に従って遊離する脂肪酸を測定した
０ すなわち、反応系にＤｏｌｅの抽出液３−を分取し、チ
モールブルー溶液１＋ｊを加える。　この溶液に窒素ガ
スを吹込んで攪拌しながら０．００８規定水酸化ナトリ
ウム水溶液で調定し、検量線より遊離脂肪酸量を６１り
定する。

なお、脂肪分解抑制率は次式により求められる。

八 Ａ　：　ＡＣＴ）ｌ　（１μｆ／−）のみの添加により
生じた遊離脂肪酸蛭 Ｂ　：　ＡＣＴＨ（１μｆ／ｄ　）＋サポニン（２０μ
ｆ／ｒｎｔ　）の添加により生じた遊離脂肪酸量 ｂ、試験結果 ＡＣＴＨによる脂肪細胞の脂肪分解に対するギノサボニ
ン類の抑制率の測定結果を第３表に示した。

第３表 無添加　　　　　　Ｏ− ＡＣＴＨ（１μｍｋ）　　　　　　８．４　０（Ｉ）−
１＋！ノサボエンＡ（２０μｆ／ｍ１．）　　６．１　
　２　７（１）＋　Ｉ　　Ｂ（１）６．９１８ （Ｉ）＋　ｚ　　Ｅ（１）５．９３０ （Ｉ）＋　＃　　Ｆ（＃　　）６．３２５（＃）＋　Ｉ
　　Ｇ（ｔ　　）５．８３１（＃）＋　Ｉ　　Ｉ（ｔ　
　）６．６２１（＃）＋　＃　　Ｊ（＃　　）５．３３
７ＣＩ＞＋　Ｉ　　Ｋ（＃　　）６．１２７（＃）＋　
＃　　Ｍ（＃　　）６．４２４（＃）＋　ｔ　　Ｎ（ｚ
　　）５．２３８ＮπＩｆ（１μｍ／−）＋ギノサボニ
ｙＯ（２０μｆ／ｎｅ）　　　５．６　　３３１　　　
（１）　　十プロギノリ寸り七ミイＡ２（１）　　　　
６．２　　　２６＃　　（＃）　　＋　　　Ｉ　　Ａ−
ＡＨ（＃　　）　　６．３　　２５＃　　（＃）　　＋
　　　ｔ　　　Ｏ□（１）　　５．９　３０以上のどと
＜　ＡＣ１’Ｈ１μｆ／ｍｌを脂肪細胞に作用させ３７
℃で２時間保つとき脂肪を分解して８．４μＥｑ／ｆ　
の遊離脂肪酸を生成するが、ギノサボニン類をそれぞれ
２０μ２／−添加すると上記のごとく明らかにＡＣＴＨ
の脂肪分解作用を抑制し、遊離脂肪酸の生成量が減少す
る。　その平均抑制率は２８チである。

２）アドレナリンによる脂肪細胞の脂肪分解に対するギ
ノサボニン類の影響 ａ、試験方法 コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫｒｅｂｓＲｉｒ
ｇｅｒ　Ｐｈｏｓ１Ｍ％ｔｅ　Ｂｕｆｆｅｒ　（ＫＲＰ
　、　ｐＨ７，４）　Ｋ　懸濁し、その溶液０．３　ｍ
　（脂肪細胞１００叩相当）、アドレナリン溶液ｏ、１
ｖ（ｉμｔのアドレナリンを含む）各サポニン溶液０．
１−（２０μｔのサポニンを含む）および５チアルブミ
ン溶液０．５ｄ（ＫＲＰに＃解しｐｉｆ７．４に調整し
た溶液）を共枠試験管に入れ、３７℃で２時間加温し、
Ｄｏｌｅの方法（前記１）と同様）に従って遊離する脂
肪酸量を測定した。　すなわち反応系にＤｏｌｅの抽出
液３　ｍｇを加え５分間機とう後、ヘプタン３−を分取
し、チモールブルー溶液エゴを加える。　この溶液を窒
素ガスで攪拌しなからｏ、ｏｏｓ規定水酸化ナトリウム
水溶液で滴定し検ｆ趨ｔり遊離脂肪酸量を求める。

なお、上記抑制率は前記１）に用いた式と同じ式を用い
た。

ｂ、試験結果 アドレナリンによる脂肪細胞の脂肪分解に対するギノサ
ボニン類の抑制率の測定結果を第４表に示した。

（以下余白次頁につづく） 第　　４　　表 無添加　　　　　　　０　− アドレナリン（ＡＤ）　　（１μｆ／＊／）　　　　　
　　　１４１　　　　　　。

ＡＤ（１μ２ｈ／）＋ギノサボニンＡ（２０μむ’ｍｇ
）　　１３．４　　　　５＃（＃　　）＋　　　＃　　
　　Ｂ（’　　）　　　９．１　　　３５Ｉｃｅ　　）
＋　　　＃　　　　Ｅ（＃　　）　　　９．４　　　３
３Ｆ（＃　　）十＃　　　Ｆ（＃　　）１３．４５＃（
＃　　）＋　　　ｔ　　　Ｇ（＃　　）１ａ、Ｂ　　　
　　２１（１）＋　　　＃　　　　Ｉ（＃　　）１２．
７　　　１０＃（ｚ　　）＋　　　ｚ　　　　Ｊ（ｔ　
　）１３．１　　　　７＃（＃　　）十＃　　　Ｋ（ｚ
　　）ｔａ、ｓ　　　　２’（＃　　）＋　　　＃　　
　Ｍ（１）１３．５　　　　４’（’　）＋　　＃　　
Ｎ（＃　）１３．３　　６１（ｌ　）＋　Ｉ　　Ｏ（Ｉ
　）ヱ３，９１１　　（１）＋、ｙ”ｏギノ−９＃’−
ｙＡ、（＃　　　）　　　１　３．０　　　　　　　８
＃（＃　）＋　　＃　　Ａ−ＡＨ（１）　１２．４　１
２ＩＣ１）＋　　＃　　　　０１Ｃ１）１４６　　１１
以上のごとくアドレナリン１μ２／−を脂肪細胞に作用
させ３７℃で２時間保つとき、脂肪を分解して１４．１
μＥｑ／ｆの遊離脂肪酸を生じる。　このときギノサボ
ニン類をそれぞれ２０μｔ／−共存させるといずれの場
合も脂肪分解を抑制し、遊離脂肪酸の生成は減少する。

　しかしＡＣＴＨによる脂肪分解に対するギノサボニン
類の抑制率と比べると小さい。　ただギノサボニンＢお
よびＥのみはＡＣＴＨに対するときより強い効果を示す
。

３）脂肪細胞におけるグルコースからのＩｊ斤助合成に
およぼすギノサボニン類の影響 ａ、試駆方法 水沫はカーボンに放射能マークした１４Ｃ−グルコース
を脂肪細胞に作用させ、脂肪合成にくりこまれ、中性脂
肪として脂肪細胞にとりこまれたグルコース址を放射能
カウント量により測定、その脂肪合成能に及ぼすギノサ
ボニン類の影響を試験する。

すなわち、コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫＲＢ
中に懸濁し、その溶液０．３５＋ｄ（脂肪細胞１ｏｏｊ
ｌｖ相尚）、各サポ＝ｙ溶液０．１　ｍｌ　（２０μＶ
のサポニンを含む）、５％アルブミン溶液０、５　ｒｎ
ｅ　（ＫＲＢ　ｆａａｌ０ｍＭグルコースを含む−１１
）Ｈ７，４）、１４Ｃ−グルコース溶液０．０５−（０
，５／ｇＣｉ　、　ＫＲＰ溶液、　ｐｔ＋　７．４　、
１０　ｍＭグルコースを含む）を共栓試験管に入れ、３
７℃で３０分加温し、Ｄｏｌｅ　の抽出液５−を加え５
分間振とう後、ヘゲタン３−および水２耐を加え５分間
振とりする。　ヘプタン層３　ｍｌを分取し、アルカリ
性エタノール溶液（０，５規定水酸化ナトリウム溶液、
５０チエタノール溶液）を３＃１１！！加え５分間振と
うする。

エタノール層を１−分取し、トルエンシンチレーション
溶液１０−を加え、５ｋｉｐｓｋｉ　ｅｔ　ａｌの方法
〔Ｉ３ｉｏｃｂｅｍ−Ｂｉｏｐｈ３’５−Ａｃｔａ、　
１０６　、３８６（１９６５）〕によシ測定した。

ｂ）試験結果 脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪合成におよほす
ギノサボニン類の促進率を測定し第５表に示した。

第５表 な　　し　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２
１５００　　　　１００ギノサボ＝ｙＡ　（２０μｔ／
ｍ／）　　　　　８０１３　　　　３７Ｂ（Ｉ　　　）
　　　　１２３０８　　　５７ＢＣＩ　　　）　　　　
　１０２４８　　　　４８Ｆ（１）　　　　　１１６２
０　　　　５４Ｇ（＃　　　）　　　　　　８９２５　
　　　４２Ｉ（ｔ　　　）　　　　　１０５６４　　　
　４９Ｊ（ｔ　　　）　　　　　１１６５０　　　　５
４Ｋ（＃　　　）　　　　　１３６００　　　　６３Ｍ
（＃　　　）　　　　　１２６５０　　　　５９Ｎ（ｙ
　　　）　　　　　　９８７０　　　　４６０（＃　　
　）　　　　　　８２６３　　　　　ａｓカギツカ陸式
植２　（＃　　　）　　　　　１２６５０　　　　５９
％式％ 以上のごとくギノサボニン類の共存しない場合に比べ、
脂肪＃！ＩＩＭにおけるグルコースの中性脂肪としての
とり込みは、１１とんどか半分以下となシ、ギノサボニ
ンケＡがそれぞれ脂肪細胞におけるグルコースからの脂
肪合成を抑制する作用のあることは明らかである。

特許出願人　竹本常松

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 〔式中Ｒ１が水素原子　ｘ’ｌがβ−Ｄ−グルコピラノ
   シル基、β−Ｄ−キシノピラノシル（１→６）−β−Ｄ
   −グルコピラノシル基もしくはα−Ｌ−ラムノピラノシ
   ル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基　ｕ８が水
   素原子もしくはヒドロキシ基〕で表わされる化合物。 （以下余白、仄Ｖｊに続く）