JPS5980697A - 新規ギノサポニン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明はアマチャヅル（Ｇｙｎｏｍｅｒｒｍａ　ｐｅ
ｎｔａｐｈｙｌｌｕｍ［ａｋｉｎｏ　）のサポニンの構
成成分であるギノザポニン類およびその製造法に関する
。

この発明の発明者らはアマチャヅルの含有成分を研究し
た結果、下記の新規なギノテボニン類を見出した。　す
なわち、式（工）： 〔式中Ｒ１が〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−
σ−Ｌ−２ムノビラノシル（ｌ→６）］−／−Ｄ−グル
コピラノシル基であるときは　ＢＭが水素原子、β−Ｄ
−グルコピラノシル（１→６）−β−Ｄ−ゲルコピ２ノ
シル基、α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ
−グルコピラノシル基もしくはβ−Ｄ−グルコピラノシ
ル基であって、Ｒ１が水素原子もしくはヒドロキシ基で
あり、Ｒ’がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β
−Ｄ−グルコピラノシル基であるときは、Ｒ”がα−Ｌ
−ラムノビジノシル（１→６）−β−Ｄ〜グルコピラノ
シル基であって、Ｒ３が水素原子であり、Ｒ’　カα−
Ｌ−７ムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−ゲルコピ２
ノシル基であるときは、Ｒ″がβ−Ｄ−グルコピラノシ
ル（１→６）−β−Ｄ−グＲ”が水素原子であり、 Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル基であるときはＲ”　
２）（β−Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−
グルコピラノシル基もしくはσ−Ｌ−ラムノピラノシル
（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基であって、■
ζ１が水素原子であり、°またＲ’が水素原子であると
きは、Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル基、β−Ｄ−キ
シロピ２ノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル
基もしくはα−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β−
Ｄ−ゲルコピ２ノシル基であって、Ｒｍが水素原子もし
くはヒドロキシ基である〕 で表わされる化合物である。

これらのギノサボニン類（Ｉ）の具体名を列挙すると次
の通りである。

２Ｏ８−プロトパナキサジオール−３−０−（［：β−
Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−σ−Ｌ−ラムノビラ
ノシル（１→６））−β−Ｄ　−グルコピラノシド）−
２０−〇　−［β−Ｄ−グルコピラノシル（１→６）−
β−Ｄ−グルコピラノシト］−以下「ギノサボニンＡ」
と称スる一 ２０Ｓ−プロトパナキサジオール−３−０−［（：β−
Ｄ−グルコピラノシル（ｌ→２）−α−Ｌ−ラムノビジ
ノシル（１→６）〕−β−Ｄ−グルコピラノシド）−２
０−０−［：α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β
−Ｄ−グルコピラノシト］−以下「ギノサボニンＢ」と
称する一 ２０Ｓ−プロトパナキサジオール−３−０−（（β−Ｄ
−グルコピラノシル（ｌ→２）−α−Ｌ−ラムノピラノ
シル（１→６））−β−Ｄ−ゲルコピ２ノシド）−２０
−０−β−Ｄ−グルコピラノシドー以下「ギノサボニン
Ｆ」と称ｆる一２Ｏ８−プロトパナキサジオール−３−
０−（β−Ｄ−ゲルコピ２ノシル（１→２）−β−Ｄ−
グルコピラノシド）−２０−０−［α−Ｌ−ラムノピラ
ノシル（１→６）−β−Ｄ−ゲルコピ２ノシド〕−以下
「ギノサポニンＥ」と称する−２０８−７”ロトパナキ
サジオールー３，２ｏ−ビス−〇−〔α−Ｌ−ジムノピ
ラノシル（ｌ→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕−以
下「ＹノザボニンＧ」と称する− ２０８−グロトバナキサジオー／／−３−０−（α−Ｌ
−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド）−２０−０−β−Ｄ−グルコピラノシドー以下「
ギノサボニンＫ」と称する−２０８−プロトパナキサジ
オール−３−０−β−Ｄ−グルコピラノシド−２０−０
−（β−Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グ
ルコピジノシド〕−以下「ギノサボニンＩ」と称する一
２０Ｓ−プロトパナキサジオール−３−０−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド−２０−０−（α−Ｌ−ラムノピラノシ
ル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕−以下「ギ
ノサボニンＪ」と称スる一２Ｏ８−プロトバナキサジオ
ール−２０−０−（β−Ｄ−キシロピラノシル（１−６
）−β−Ｄ−グｋ　コヒ５　／シト〕−以下「ギノサボ
ニンＭ」と称する− ２０８−プロトパナキサジオール−２０−０−（α−Ｌ
−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド〕−以下「ギノサボニンＮ」と称する〜 ２０Ｓ　、　　２６−ヒトロキシグロトパナキサジオー
ルー３−０−（［β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）
−α−Ｌ−ラムノピラノシル（ｌ→６）〕−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド）−２０−０−［α−Ｌ−ラムノピラノ
シル（１→６）−β−Ｄ−グルコヒジノシド］−以下「
ギノサボニンｏ」と称する− ２０８−プロトバナキサジオール−３−０−［α−Ｌ−
ジムノビラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド］−２０−０−［β−Ｄ−グルコピラノシル（１→６
）−β−Ｄ−ゲルコピ２ノシド〕−以下「プロギノサボ
ゲニンＡ、Ｊと称スる一グロトパナキサジオールーａ−
Ｏ−（（β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−α−Ｌ
−ラムノピラノシル（ｉ→６）〕−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド）−以下「グロギノサボゲニンＡ−ＡＨＪと称す
る− ２０Ｓ　、　　２６−ヒトロキシプロトバナキサジオー
／Ｉ／−２０−０−β−Ｄ−グルコピジノシドー以下「
グロギノサボゲニン０．」と称する−かくしてこの発明
は、前記式（１）で表され、式中Ｒがα−Ｌ−ラムノピ
ラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基　Ｒ
２がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グ
ルコピラノシル基、α−Ｌ−；７Ａノピラノシル（１→
６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基もしくはβ−Ｄ−グ
ルコピラノシル基　Ｒ８が水素原子の化合物、具体的に
はギノサポニンＧ１ギノサポニンＫ及びプロギノサポゲ
ニンＡＩ！を提供するものであるＯギノサボニン類（Ｉ
）のうち、ギノサボニンＡ、Ｂ。

Ｅ、Ｆ、ＧＳＩ、ＪＳＫＳＭ、Ｎおよび０はいずれもア
マチャヅルのサポニンの構成成分であシ、例えば次の方
法によってアマチャヅルから抽出。

分離される。

先ず初めに、アマチャヅルを水または含水低級アルコー
ルで抽出する。　含水低級アルコールとしては５ｏｙ％
程度以下の含水メタノール、含水エタノール等が例示さ
れる。　この抽出は加温または加熱下に行うのが好まし
い。　なお、原料のアマチャヅルは、抽出に先立って予
め細切し、あるいは常法により脱脂したものを用いても
よい。

また抽出溶媒として含水低級アルコールを用いた場合に
は抽出液を濃縮してアルコール分を除去したのち、適量
の水を加えて次の非イオン性吸着樹脂での処理に付すの
が好ましい。

非イオン性吸着樹脂としては、スチレン−ジビニルベン
ゼン共重合体からなるノーイボ−ジスなものが好ましく
、具体的にはアンバーライトＸＡＤ　−２（米国ローム
アントノ１−ス社製）、セファデックスＬＩＩ２０（フ
ァーマシャファインケミカルズ社製）などが繁用される
。　この処理は、吸着樹脂を充填したカラムに上記で得
られた抽出液を通液して行うのが便利である。　この操
作によりサポニンが樹脂に吸着される。

次いで樹脂に吸着されたサポニンを低級アルコールで溶
出する。　溶出溶媒として用いられる低級アルコールと
してはメタノール、エタノール等が好ましい。　なお、
溶出に先立って予めカラムを水あるいは２０ンチ程度の
含水低級アルコールで洗浄するのが好ましい。

上記で得られた低級アルコール溶出液を次いでアルミナ
で処理する。　この処理も、アルミナを充填したカラム
を用いて行えば簡便である。　この処理により、サポニ
ンはアルミナに吸着される。

なお、このアルミナでの処理に先立って上記の低級アル
コール溶出液を予め適宜濃縮しておいてもよい。

アルミナに吸着されたサポニンを次いで低級アルコール
または含水低級アルコールで、好ましくは５０／　チ程
度の含水低級アルコールで溶出す■ る。　この溶出液を濃縮することにより、粗ギノサボニ
ン類が得られる。

上記のようにして得られる粗ギノサボニン類は、ギノサ
ボニンＡ、ＢＳＥ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、Ｍ、Ｎおよび
０等からなり、これらの各成分は例えば次の方法により
分離、精製される。

すなわち、粗ギノサボニン類を水に溶解し、この水溶液
をスチレン系吸着樹脂、例えばサーバクロム（Ｓｅｒｖ
ａｃｈｒｏｍ　）　ＸＡＤ　−２１：サーバ（５ｅｒｖ
ａ　）社製〕で処理し、被吸着物質を４５−１００％メ
タノール水溶液で溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲルカ
ラムで処理する。

シリカゲルに吸着されたサポニンを次いでクロロホルム
・低級アルコール・水で好ましくはクロロホルム・メタ
ノール・水（６５：３５：ＩＯ下層）で溶出し、薄層ク
ロマトグラフィー（ＴＬＣ）を指標とし、溶出液をフラ
クション１〜６に分画する。

７ラクシヨン１〜３をそれぞれシリカゲルカラムで処理
し、次いでシリカゲルに殴着されたサボニンヲクロロホ
ルム・低級アルコール・酢酸エチル・水で好ましくはク
ロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水（２：２：４
：１下層）で分画溶出する。

−また、クラクション４および５もそれぞれシリカゲル
カラムで処理し、次いで、シリカゲルに吸着されたサポ
ニンを低級アルコール会酢酸エチル・水で好ましくはｎ
−ブタノール・酢酸エチル・水（４：１：２上層）で分
画溶出する。

また、クラクション６もシリカゲルカラムで処理し、次
いで、シリカゲルに吸着されだサポニンをクロロポルム
・低級アルコール・水で、好ましくハクロロホルム・メ
タノールΦ水（６５：３５：ｌＯ下層）で分画溶出する
。

上記で得られた各分画溶出液を′ａｍし、さらにＴＬＣ
の結果を指標にして前記のシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーを繰返し、これらのイノサポニン類を各個別に
分離、精製すると、クラクション１からギノサボニンＭ
およびＮが、クラクション２からギノサボニンＩ、Ｊお
よびＫが、フラクション３からギノサボニンＧが、フラ
クション４からギノサボニンＥおよびＦが、フラクショ
ン５からギノサボニンＢが、またフラクション６からギ
ノサボニンＡがそれぞれ得られる。

また、ギノサボニンＯは、粗ギノサボニン類をスチレン
系吸着樹脂で処理し、被吸着物質を３０〜４０チメタノ
ールで溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲルカラムで処理
し、次いで吸着されたサボ、二ンをクロロホルム・低級
アルコール・水テ、好ましくはクロロホルム・メタノー
ル・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出することに
より、分離、精製できる。

さらにグロギノサボゲニンＡ、およびプロギノサボゲニ
ンＯ１はそれぞれギノサボニンＡおよびギノサボニンＯ
を酸素加水分解することにより得られ、またグロギノサ
ボニンＡ−ＡＨはギノサボニンＡを５０％酢酸で処理す
ることにより製造できる。

また、ギノサボニンＦ、Ｇ、ＩＳＪ、に、ＭおよびＮは
他のイノサポニン類（Ｉ）を酵素加水分解することによ
っても製造できる。

このようにして得られるイノサポニン類（Ｉ）は、すべ
て新規であり、脂質分解抑制および脂質合成抑制作用を
有し、医薬として有用である。　そして、ギノザポニン
ｉ　（Ｉ）を医薬として用いる場合には、個々のサポニ
ンを有効成分として使用することができる。

次にこの発明を実施例により説明する。

実施例１ 乾燥したアマチャヅル全草２Ｋｆを水３０ｔで熱時２回
抽出した。　両袖出液を合し、非イオン性吸着樹脂、ア
ンバーライ）　ＸＡＤ　−２４１を充填し九カラムに通
導した。　吸着部を水１０Ｆ１次いで２０％メタノール
６ｔで洗浄したのち、メタノール５ｔで溶出し、溶出液
を減圧下に蒸発乾固し、黄褐色粉末３７９を得た。　こ
れをメタノール１ｔに溶解し、アルミナ３００ｔを充填
したカラムに通導したのち、５０チメタノール約２０ｔ
で溶出した。　溶出液を減圧下に濃縮し、淡黄色粉末と
して粗ギノサボニン２５１を得た。

粗ギノサボニン２０ｆを水１ｔに溶解し、スチレン系吸
着樹脂サーバクロムＸＡＤ　−２（サーバ社製）　６０
０　ｍｌを充填したカラムに通導した。

吸着部を２０％メタノールより順次メタノール金波を増
しながら溶出し、４５〜１０（ｌメタノール溶出液を合
し、減圧下に蒸発乾固して淡黄色粉末１６ｆを得た。　
これをシリカゲル（３００Ｆ）カラムクロマトグラフィ
ーに付し、ＴＬＣを指標として、クロロホルム・メタノ
ール・水（６５：３５：１０下Ｍ）で１００−ずつ分画
溶出してフラクション１〜６を得、それぞれ蒸発乾固し
た。　これらフラクション１〜・３をそれぞれシリカゲ
ル（ｉｏｏｆ）カラムクロマトグラフィーに付し、クロ
ロホルム・メタノールｅ酢酸エチル・水（２：２：４：
１下層）で分画溶出し、さらにこの操作を２回繰返し、
フラクション（ｘ、ｔｌからギノサボニンＭ（６０１９
）およびギノサボニンＮ（１６０１ｖ）を、クラクショ
ン２（１，１Ｆ）からギノサボニンＩ（６０ｑ）および
ギノサボニンＪ（１２０Ｍ９）ならびにギノサボニンＫ
（１１０り）を、またフラクションａ（ｉ、ｏｒ）から
ギノサボニンＧ　（４５０Ｗ）をそれぞれ得た。

またフラクション４および５をそれぞれシリカゲル（２
００Ｆ）力２ムクロマトグラフィーに付し、ｎ−ブタノ
ール・酢酸エチル・水（４：１：２土屑）で分画溶出し
、さらにこの操作を２回繰返しフラクション４（３，４
Ｆ）からギノザボニンＤ（３５０Ｗ）、ギノサボ＝ｙＥ
（１５００Ｗ）およびギノサポニンＦ（８０〜）を、ま
たフラクショｙｓ（２，ｓｒ）からギ／？ボ＝ンＢ（２
２０ｑ）およびギノサポニンＣ（２４ｏｖｙ）をそれぞ
れ得た。

さらに、フラクション６（０，９Ｆ）をシリカゲル（ｉ
ｏｏｒ）カラムクロマトグラフィーに付し、クロロホル
ム・メタノール・水（６５：３５：１０下ＪＭ　’）で
分画溶出し、さらにこの操作を１回繰返してギノサボニ
ンＡ（５１０ｑ）を得た。

各ギノサボニンの物性は後記の表１および表２に示す通
りである。

実施例２ ギノサボニンＡ２５０キを０．００５　Ｍ−燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ｐＨ４，０）５０づに溶解し、これ
に粗へスペリジナーゼ（田辺製薬株式会社製）５００η
を加え、３７〜３８℃で６時間攪拌した。　反応液をス
チレン系吸着樹脂、サーバクロムＸＡＤ、２（サーバ社
！！　）　５０　Ｗ／　ｔ　充’Ｈシタ力ｙムに通尋し
、水１を次いで２０％メタノール２ｔで洗浄したのち、
メタノール３００ｍで溶出した。

溶出液を減圧下に濃縮し、濃縮物をシリカゲル・カラム
・クロマトグラフィーに付し、クロロホルム・・メタノ
ールΦ水（６５：３５：１０下層）で分画溶出して、ギ
ノサポニンＦ（２０ｙ）、ギノサポニンＫ　（１５Ｗ　
）およびプロギノサ２イ；二２Ａ。

（３５ｙ！！ｌ＋）をイ０た。　ギノサボニンＦおよび
ＫはＩＲおよびＮＭＲにより、実施例１で得られた標品
と同定した。

また、グロギノザポゲニンＡ、の物性は後記の表１およ
び表２に示す通シである。

実施例３ ギア　サボ＝：／Ａ１５０１＋ｖを５０％酢＃１０−に
溶解し、７０℃で６時間攪拌した。　反応液をスチレン
系吸着樹脂、サーバクロム　ＸＡＤ　−２５０−を充填
したカラムに付して、プロサボゲニン画分約１００９を
得た。　これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに
付し、クロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水（２
：２：４：１ｆ層）で分画溶出して、プロギノサボゲニ
ンＡ−ＡＨ３５りを得た。　本市の物性は後記の表１お
よび表２に示す通りである。

実施例４ ギノサボニンＡ４００ｑを０．００５　Ｍ−燐酸２水素
す）　ＩＪウム水溶液（ｐＨ’４．０　）　５０ｍｌに
溶解した。　これにセルラーゼ（シグマ社製）３００ツ
を加え、３７〜３８℃で２４時間攪拌した。

反応液を実施例２と同様に処理して、ギノサボニンＫ（
１１０〜）を得た。　本市はＩＲおよびＮＭＲによシ、
実施例１で得た標品と同定した。

実施例５ ギノサボニンＢおよびＣの混合物１，４ｆを０．００５
Ｍ−燐酸２水素ナトリウム水溶液（ｐＨ４，０’）２０
０ｍｅに溶解した。　これにセルラーゼ（シグマ社製）
６００りを加え、３７〜３８℃で７時間攪拌した。

反応液を・す゛−バクロム　ＸＡＤ−２（８０ｍ／）の
カラムで処理して約１．１ｆの加水分解物を得た。

これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付シ、ク
ロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水（２：２：４
：１ｆ層）で分画溶出してギノサボニンＫ（１４０ｆｆ
）ならびにギノサボニンＦおよびＧを含む混合物（ｓｓ
ｏｌｌｌｖ）を得た。°　この混合物を再びシリカゲル
カラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム・メタ
ノール・水（６５：３５：１０−下層）で分画溶出して
、ギノサボニンＦ（５０ｍＶ）およびギノサポニンＧ（
１５０■）を得た。　仁れらのギノサボニンＦ、Ｇおよ
びＫはＩＲおよびＮＭＲにより実施例１で得られた標品
と同定した。

実施例６ ギノサボニンＢおよびＣの混合物３００ｙｖを５０チ酢
酸１０ｍに溶解し、７０℃で６時間攪拌した。

反応液をサーバクロム　ＸＡＤ−２（５０ｍ）のカラム
に付して分画し、プロサボゲニン画分をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム・メタノー
ル・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出してプロギ
ノサボゲニンＡ−ＡＨ（３０キ）を得た。　本市はＩＲ
およびＮＭＲによシ、実施例３で得られだ標品と同定し
た。

実施例７ ギノサボニンＤおよびＥの混合物２ｙを０．００５Ｍ−
燐酸２水素ナトリウム水溶液（ｐＨ４，０）に溶解した
。　これにセルラーゼ（シグマ社製）１２を加え、３７
〜３８℃で２０時間攪拌した。

反応液をサーバクロム　ＸＡＤ−２（８０謂ε）のカラ
ムで処理して約１．６ｆの加水分解物を得た。

これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、ク
ロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水（２：２：４
：１ｆ層）で分画溶出してギノサポニンＩ（３５５り）
、Ｊ（２５０η）、Ｍ（８０■）およびＮ（９０ｑ）を
得た。　これらの各ギノサボニンはＩＲおよびＮＭＲに
より、実施例１で得られた標品とそれぞれ同定した。

実施例８ ギノザボニンＥ５Ｗを０．００５　Ｍ−燐酸２水素ナト
リウム水溶液（ＰＨ４，０）　１　ｔｕｇに溶解し、こ
れにセルラーゼ１０ｍ９を加え、３７〜３８℃で４時間
攪拌した。　反応液中にギノサボニンＪおよびＮが生成
していることを薄層クロマトグラフィーにより確認した
。

実施例９ 実施例１で得た粗ギノサボニンをスチレン系吸着樹脂、
サーバクロム　ＸＡＤ−２で処理シ、３０〜４０％メタ
ノールで溶出した。　溶出液を減圧下蒸発乾固し、淡黄
色粉末２２を得た。　これをシリカゲル（２００ｆ）カ
ラムクロマトグラフィーニ付シ、クロロホルム・メタノ
ール・水（６５：３５：１０下層）で分画溶出し、さら
にこの操作を２回繰返し、ギノサボニンＯ（１５０ｖ）
を得た。　本市の物性は後記の第１表および第２表に示
す通りである。

ギノサボニン０１５０ツを０．００５　Ｍ−燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ｐＨ４，０）　３０ＩｌＦｌに溶解
し、これにセルラーゼ（シグマ社製）１５０ｗｑを加え
、３７〜３８℃で２４時間攪拌した。　反応液を実施例
２と同様に処理して、グロギノサボゲニン０．　（２０
ｔｙ　）を得た。　本市の物性は後記の表１および表２
に示す通りである。

なお、実施例５および６において原料として１５ｐ用し
たギノザボニンＣの化学名は２０８−プロトパナキサジ
オール−３−０−（β−Ｄ−ゲルコピ５）シル（１→２
）−β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０−０−［β７Ｄ
−グルコピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド〕でろって１、ギンセノシドーＲｂ、　　と同定さ
れた。　また、実施例７において原料として使用したギ
ノサボニンＤの化学名は２０Ｓ−プロトパナキサジオー
ル＝３−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−
β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０−０−（β−Ｄ−キ
シロビシノシル（１→６）−β−１）−グルコピラノシ
ド〕であって、ギンセノシドーＲ，ｂ。

と同定された。

第　　１　　表 元素分析 サポニン名　　ｍｐ（℃）　　　分子式　　　理論値　
　実噴値Ｃ％　ＩＩチ　Ｃチ　ＩＩ襲 １ノザボニンＡ　　２０１−２０３　　Ｃ６ｏｌ−Ｉ、
ｏ２０□７・３Ｊｉ、、０　５５．０３８．３１　５４
．７８８．５７１ノ゛す゛ボニンＢ１９６−１９８Ｃ６
ｏＩ（、。２０゜６・３Ｈ□０　５５．７１　８．４２
５５．６３８．５６１ノザボニンＥ　　１９９−２０１
　　Ｃ５４）１，２０□２　＠３１−ｔ２０　５６．５
２８．６１　５６．３３８．（１６−ノサボニンＦ　　
１９１−１９３　　Ｃ５４Ｈ９２０□２・３■−１２０
５６，５２８，６１５６，３１８，８６１ノサボニンに
　　１９２−１９４　　Ｃ５４Ｈ９２０□１・３１１２
０　５７．３３８．７３５７．Ｊｌ　Ｂ、７７Ｆノサボ
ニン■１８３−］８５Ｃ４□ｌｌ８ｏＯ１７・３１１２
０　５８．１３　Ｂ、９３５７．７７８．７７どノサボ
ニンｊ　　１８９−１９ｉ　　Ｃ４Ｂ１’ｔ８２０．□
−４１１＋０　５７．４７９．０４５７．５８　Ｂ、９
２メノザボニンＫ　　１８７−１８９　　Ｃ４８Ｈ８２
０，７・３Ｈ２０５８，５２９，００５８，４１８，８
９ｆノ・す′ボニンＭ　　１５８−１６０　　Ｃ４＋Ｈ
□。０１□・３／２１１２０　６２．９７　９．４０６
３．２０９．６０ｃノーリ°ボニンＮ　　１６５−１６
７　　Ｃ４□１１７□０，２・２）１２０　６２．６６
　９．５２６２．８９９．１１１ｆノザボニン０　２０
２−２０５Ｃ６ｏＨ１０２０２７・４１１２０　５４．
２８８．３５５４．２８８．３０１’０ギノツポゲニ／
Ａ２　１８８−１９０　　Ｃ５４１１９□０２□−Ｈ２
Ｏ５８，３６＋−’！、５３　５１１．３２　　Ｂ、ｆ
ｉＯどロギノナｆ！玉言χ■Ｉ　　　１８３−１８５　
　　Ｃ４８１ｔ８□０１□・Ｈ２Ｏ６０，７４８，９２
６０，３８９゜０６メロギノ′リポゲニン０．　　１６
７−１６９　　Ｃ３６Ｈ６□０．・Ｉｆ２０　　　　６
５．８２　９．８２　６　Ｇ、０５　９．８５旋光度 −１，３８°（ｃ＝１．５　）−１８，１°３３７５．
１Ｇ４０，１１６０，１０７５１０４５．１０１５．９
８５ 一３３０°（ｃ＝１．５　）−４２，７°３３７５．１
６３５，１１６０，１０７０１０４５．１０１５．９８
５ ＋８．６１’　（ｃ＝１．４　）＋９８．８°３３７５
，１６４０，１１６０，１０７５１０４５．１０２０　
、９８５ ＋７．７６°（ｃ　＝　１．７　）　＋８９．０°　３
３７５，１６３５，１１６５．１０７０１０４０．１，
０１５．９８５ ＋１．６３°（ｃ＝２．０　）　＋１１＋、４°　３３
７５，１６４０，１１５５，１０６５１０４５．１０１
５．９８５ ＋１４．２°（ｃ＝１．５）→−１３８°３３７５，１
６３５．１１Ｃ５０，１０７５１０３５，１０１５，９
９０ −＋−１３，３°（ｃ＝１．５　）−１１３３°　　３
３７５，１６４０．１１６０．１０７０１０４０．１０
１５．９９０ ＋１３．４°（ｃ＝１．８）＋１３２°３３７５，１６
３５，１１６５，１０７０１０４５．１０２０．９９０ −Ｉ−２５．７°（ｃ＝１．０　）＋２０１°３３７５
，１６３５，１１６５，１．０７５１０４０．１０１５
．９９０ −１−２５．０’（ｃ＝１．３）＋２０１０３３７５．
１６３５．１１６５．１０６５１（１４０，１０２５，
９８５ −１，３１０（ｃ＝２．５　）−１７，４°３３７５，
１６４０，１１６０．１０７０１０４＋）、１０１５．
９８０ −ｔ−４，２４０（ｃ＝＝１．５）＋４７．１０３３７
５，１６：１５，１１６５，１０７５１０３５．１０１
５．９９０ −　　−　３３７５．１６３５，１１６０，１０７０１
０４０．１０２０．９８０ ＋３１．７°（ｃ−４，９）−１−２０８°　３３７５
，１６４０，１１５０，１０７５１０３５．１０１５．
９９０ 第　２表１ １）Ａ４Ｒスベークト九 サポニン名　　　　　　　　メチル　　　　　　　　Ｃ
−２４き データ Ｆ　　　　　　アノメリック　プロトン（Ｊ＝１）　（
Ｊ＝７ノ サポニン名　　　　　　　　メチル プロギノ・シポゲ：＝ｙＡ−ＡＨＩＩ）ＯＦ２ｓ、０．
９６ｓ、１．０４ｓ　、１０メ（Ｓｌ、２６ｓ　、　１
３９ｓ　、　１．６４ｓ　、　１．６６ｓ注１）：ｐｙ
　−ｄ５ ＩＩ）：ｐｙ　　−ｄ５／Ｄ２０ 米：化学シフトはシグナル爪 表続き ２クトルデータ Ｃ−２４１１アノメリック　プロトン １．６１６ （Ｊ＝６） 決により不明瞭 次に本発明のイノサポニン類の薬理効果について述べる
。

人間を含めた咄乳酌物は、外より取入れだ脂肪とか糖質
の過剰分を脂肪細胞に変換して貯え、外からの補給がな
い場合これを脂肪分解して脂肪酸やグルコースに変えて
エネルギー源として利用する。　この脂肪細胞の脂肪分
解には、脳下垂体ホルモンである副腎皮質刺戟ホルモン
（ＡＣＴＨ）や副腎皮質ホルモンであるアドレナリンが
大きく作用し、分解を促進する。　逆に、脂肪細胞の脂
肪分解を抑制し、血液中の血糖量が増大しないようにす
る働きを持つものが、糖尿病薬として有名な膵臓ホルモ
ンのインシュリンである。　この発明によるイノサポニ
ン類は脂肪細胞に対して、インシュリン様の作用をもち
ＡＣＴＨの脂肪分解促進を抑制する。　その効果はギノ
サボニンＢの抑制率１８％からギノサボニンＮの３８％
抑制率まで、ＡｃＴｅ（の脂肪分解促進作用を、平均２
８チ抑制する効力をもつ。

脂肪細胞におけるアドレナリンの脂肪分解促進作用に対
してのイノサポニン類の抑制力は全体的にＡＣＴＨに対
する場合に比べて弱いが、ギノサボニンＢおよびＥのみ
は３０％以上のアドレナリン脂肪分解抑制効力をもつ。

また脂肪細胞は、グルコースを中性脂肪に変換して貯え
る作用を有するが、脂肪細胞のグルコースから中性脂肪
を合成する能力を上記ギノサポニン墳はいずれも抑制す
る作用を有し平均的５０％の抑制力をもつ。

従って本発明のイノサポニン類は、脂肪細胞におけるｒ
Ｊ＝肪分解抑制剤および脂肪合成抑制剤としての新しい
脂質代謝剤としての医薬品の用途が期待される。　次に
本発明のイノサポニン類の薬理試験結果を示す。

薬理試験結果 ■、試験用脂肪細胞の調整 使用動物は体重１５０〜１８０９のｗｉｓｔｅｒ系雄ラ
ットを使用し、このラットから副浄丸脂肪組織をとり出
し、Ｒｏｄｂｅｌｌの方法（Ｍ、Ｒｏｄｂｅｌｌ、　Ｊ
　−Ｊｌｔｏｌ。

Ｃｈｅｍ、２３９，３７５　　（１９６４））により脂
肪細胞を得た。　この脂肪組織４ｔを小切片にし、Ｋｒ
ｅｂｏ　Ｒｉｎｇｅｒ　Ｂｉｃａｒｂａｎａｔｅ　Ｂｕ
ｆｆｅｒ　　１０　ｒｎｌ　（アルブミン０．４Ｆ、コ
ラゲナーゼ１０岬、グルコース５グを含む。　ｐｘ＋７
．４）に入れ３７℃で５０分間加温し、３００　ｒ、ｐ
ｏｍ−で遠心分離し浮上する脂肪細胞層を分取する。　
この脂肪細胞に前言己緩衝液１０ｍｇ（ｐＨ７，４）を
加えよくふりまぜて洗い３００　ｒ、ｐｏｍ−で３θ秒
間遠心分離する。　この操作を２回操返し、脂肪細胞を
完全に洗い、この脂肪細胞を試験に用いた。　検体液は
ギノサボニンＡ１Ｂ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｊ、に、Ｍ、Ｎ
、０およびグロギノサボゲニンＡ２．Ａ−ＡＨ，０１の
それぞれを水溶液とし、ｐｌｌ７．４　に調整したもの
を用いた。

■、試験方法および結果 １）　　ＡＣＴＩＩによる脂肪細胞の脂肪分解に及＃了
すイノサポニン類の影響 ａ、試験方法 コラゲナーゼ処理して得た脂肪＃ｌｌ廁をＫｒｅｂｓＲ
ｉｎｇｅｒ　Ｂ　１ｃａｒｂｏｎａｔｅ　ｌ１ｕｆｆｅ
ｒ　（ＫＲＢ　、　ｐｌｌ　７．４　）中に懸１局し、
その溶液０．３　ｍｌ　（脂肪細胞１００叩相当）。

ＡＣＴＨ溶液ｏ、ｉｔｇ（ｉμグのＡＣＴＨを含む）、
各サポニン溶液０．１　ｍｌ　（５００μ２のサポニン
を含む）および５％アルブミン溶液０．３　ｗｅ　（Ｋ
ＲＢにとかし、ｐＨ７，４に調整した溶液）を共栓試験
管に入れ、３７℃で２時間加温し、Ｄｏｌｅの方法（ｖ
、　ｐ　。

Ｄｏｌｅ：Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、３５　、１５０
　（１９５８）　］に従って遊離する脂肪酸を測定した
０ すなわち、反応系にＤｏｌｅの抽出液３−を分取し、チ
モールブルー溶液１−を加える。　この溶液に窒素ガス
を吹込んで攪拌しなからｏ、ｏｏｓ規定水酸化ナトリウ
ム水溶液で滴定し、検量線より遊離脂肪酸錆を測定する
。

なお、脂肪分解抑制率は次式により求められるＯＡ　：
　ＡＣＴ）ｉ　（１μｍ７ｍｅ　）のみの添加により生
じた遊離脂肪酸緻 Ｂ　：　ＡＣＴＨ（１１１１／ｗ４　）＋サポニン（２
０ｐｆ／ｍｌ）の添加により生じた遊離脂肪酸撮 ｂ、試験結果 ＡＣＴＨＫよる脂肪細胞の脂肪分解に対するイノサポニ
ン類の抑制率の測定結果を第３表に示した。

第３表 無添加　　　　　　０　− ＡＣＴＨ（１ｔｔｒ／ｍｇ）　　　　　　８．４　０（
＃）＋ギノザポ＝ｙＡ　（２０μｆ／ｍｌ）　　６．１
　　２　７＜１）十＃　　　Ｂ、（＃　　　）６．９　
　１８（＃）−１−＃　　Ｅ（１）５．９３０（＃）＋
　＃　　Ｆ（＃　　）６．３２５（ｙ）＋　＃　　’Ｇ
（＃　　）５．８３１（＃）十ｌＩ（＃　　　）６．６
　　２１（’）−１−ｔ　　Ｊ（ｐ　）５．３３７（Ｉ
）十＃　　　Ｋ（＃　　　）６．１　　２７（＃）十＃
　　　Ｍ（ｔ　　　）６．４　　２４（＃）＋　Ｉ　　
Ｎ（＃　　）５．２３８Ａ（ＴＪ、Ｉ（１ｚ＋ｆ／ｄ）
＋ギノサポ＝ン０（２０／ｊｆ／ｍり　　　５．６　　
３　３＃（＃）−＋グロギノ力十りもミにＡ２（ｔ　　
　　）　　　　６．２　　　２６’　（’）　十＃　Ａ
−Ａ）Ｉ（７１）　６．３　２５＃　　（＃）＋　　　
Ｉ　　　　０１（＃　　）　　５．９　３０以上のどと
（ＡＣＴＨ１μｆ／ｍｅを脂肪細胞に作用させ３７℃で
２時間保つとき脂肪を分解して８，４μＥｑ／ｒ　の毎
離脂肪酸を生成するが、イノサポニン類をそれぞれ２０
μ２／−添加すると上記のごとくζｊ１！らかにＡＣＴ
Ｈの脂肪分解作用を抑制し、遊離脂肪酸の生成量が減少
する。　その平均抑制率は２８％である。

２）アドレナリンによる脂肪細胞の脂肪分解に対するイ
ノサポニン類の影響 ａ、試験方法 コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫｒｅｂＢＲｉｎ
ｇｅｒ　Ｐｈｏｓｂａｔｅ　Ｂｕｆｆｅｒ　（ＫＲＰ　
、　ｐＨ７，４）にＨｍし、その溶液０．３　ｍｌ　（
脂肪細胞１００η相当）、アドレナリン溶液０．１ｍ（
１μｍのアドレナリンを含む）各サポニン溶液０．１ｍ
（２０μ２のサポニンを含む）および５％アルブミン溶
液０．５　ｔｎｌ　（ＫＲＰに溶解しｐＨ７，４に調整
した溶液）を共栓試験管に入れ、３７℃で２時間加温し
、Ｄｏｌｅの方法（前記１）と同様）に従って遊離する
脂肪酸量を測定した。　すなわち反応系にＤｏｌｅの抽
出液３ｍｔを加え５分間４辰とう後、ヘプタン３−を分
取し、チモールブルー溶液１−を加える。　この溶液を
窒素ガスで攪拌しながら０．００８規定水酸化ナトリウ
ム水溶液で滴定し検量線よυ遊離脂肪酸量を求める。

なお、上記抑２ムリ率は前記１）に用いた式と同じ式を
用いた。

ｂ、試験結果 アドレナリンによる脂肪細胞の脂肪分解に対するイノサ
ポニン類の抑制率の測定結果を第４表に示しだ。

（以下余白次頁につづく） 第４表 無添加　　　　　　　〇　　− アドレナリン（ＡＩ））　　（１μｔ／ｍｅ）　　　　
　　　　１４．１　　　　　０ＡＤ（１／’ｆ／ｍ／り
＋ギノサボニンＡ（２０／ｊｆ％／）　　１３．４　　
　　　５Ｉ（Ｉ　）十　ｌ　　Ｂ（Ｉ　）　９．１　３
５＃（Ｉ）＋　　　＃　　　　Ｅ（＃　　）　　　９．
４　　　３３ｔ（ｔ　　）＋ｔ　　　Ｆ（ｔ　　）　１
３．４　　　５１（Ｉ　）＋　　Ｎ　　Ｇ（＃　）１３
．８　　２Ｆ（＃　）＋　　Ｉ　　Ｉ（＃　）１２．７
　１０＃（＃　　）＋ｔ　　　Ｊ（＃　　）１３．１　
　　７ＩＩＩ　）＋　　＃　　Ｋ（１）１３．８　　２
ｙ（ｙ　　）＋　　　＃　　　Ｍ（ｚ　　）１３．５　
　　　４ＩＣ１）＋１　　　Ｎ（１）１３．３　　　６
＃（＃　　）十＃　　　０（ｔ　　）１３．９　　　１
１　　（＃　　　）　＋７’ｏキノ−９ボゲ＝ｙＡ、（
ｔ　　　）　　１　３．０　　　　　　　８ＩＣ＃　）
＋　　ｌ　　Ａ−ＡＨ（＃　）１２．４　１２＃（＃）
＋＃　　　　０．ＣＩ）１２．６　　１１以上のごとく
アドレナリン１μｔ／−を脂肪細胞に作用させ３７℃で
２時間保つとき、脂肪を分解して１４．１μＥｑ／ｆの
遊離脂肪酸を生じる。　このときキノサポニン類をそれ
ぞれ２０１１９７ｍｅ共存させるといずれの場合も脂肪
分解を抑制し、遊離脂肪酸の生成は減少する。　しかし
ＡＣＴＨによる脂肪分解に対するキノサポニン類の抑制
率と比べると小さい。　ただギノサボニンＢおよびＥの
みはＡ　ＣＴ　Ｈに対するときより強い効果を示す。

３）脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪合成におよ
ぼすキノサポニン類の影響 ａ、試験方法 水沫はカーボンに放射能マークした１４Ｃ−グルコース
を脂肪細胞に作用させ、脂肪合成にくシこまれ、中性脂
肪として脂肪細胞にとりこまれだグルコース祉を放射能
カウント量により測定、その脂肪合成能に及ぼすキノサ
ポニン類の影響を試験する。

すなわち、コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫＲＢ
中に懸濁し、その溶液０．３５　ｍｌ　（脂肪細胞１ｏ
ｏＰｙ相当）、各サポニン溶液０．１−（２０μ２のサ
ポニンを含む）、５チアルプミン溶液０、５　ｍｅ　（
ＫＲＢ　Ｍ液１０ｍＭグルコースを含む、ｐＨ７，４）
、１４Ｃ−グルコース溶液０．０５ｍｇ（０，５μＣｉ
　、ＫＲＰ溶液、ｐＨ７，４，１０ｍＭグルコースを含
む）を共栓試験管に入れ、３７℃で３０分加温し、Ｄｏ
ｌｅ　の抽出液５−を加え５分間振とう後、ヘプタン３
　ｍｌおよび水２−を加え５分間振とうする。　６１２
７層３−を分取し、アルカリ性エタノール済液（０，５
規定水酸化ナトリウム溶液、５０チエタノール溶＊）を
３−加え５分間振とうする。

エタノールＩｎ　’ｃ　ｌ　ｍｅ分取し、トルエンシン
チレーシーｉｙ溶液１０ｍｅを加え、５ｋｉｐｓｋｉ　
ｅｔ　ａｌの方法〔Ｂｉｏｃｂｅｍ−１３ｉｏｐｈｙｓ
、Ａｃｔａ、　１０６　、３８６（１９６５）〕により
測定した。

ｂ）試験結果 脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪合成におよぼす
キノサポニン類の促遜率を測定し第５表に示した。

第　　５　　表 な　　し　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２
１５００　　　　１００ギノサポニンＡ（２０μｔｉｍ
ｅ）　　　　　８０１３　　’　　　３７Ｂ（＃　　）
　　　　１２３０８　　　５７Ｅ（＃　）　　１０２４
８　４８ Ｆ（＃　）　　１１６２０　５４ Ｇ（＃　）　　８９２５　４２ Ｉ（＃　）　　１０５６４　４９ ｊ（ｔ　）　　１１６５０　５４ Ｋ（＃　）　　１３６００　６３ Ｍ（ｚ　）　　１２６５０　５９ Ｎ（＃　）　　９８７０　４６ ０（＃　）　　８２６３　３８ カギツカを鴇植２（ｔ　　　）　　　　１２６５０　　
　５９＃　Ａ−Ａｌｔ（〆）　　１０５５０　４９０ｔ
（ｚ　）　　１１２００　５２ 以上のごとくキノサポニン類の共存しない場合に比べ、
脂肪細胞におけるグルコースの中性脂肪としてのとり込
みは、はとんどが半分以下となり、ギノザボニン）ハが
それぞれ脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪合成を
抑制する作用のあることは明らかである。

特許出願人　竹本常松

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 〔式中Ｒ１がα−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β
   −Ｄ−グルコピラノシル基、Ｒ２カβ−Ｄ−グルコピラ
   ノシル（１−６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基、α−
   Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラ
   ノシル基モジくはβ−Ｄ−グルコピラノシル基、ＲＩ′
   が水素原子〕で表される化合物。