JPS5980698A - 新規のギノサポニン類およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明はアマチャヅル（ＧｙｎｏｓｔｅｎｍｆＬｐｅ
ｎｔａｐｂｙｌｌｕｍＭａｌｃｉｎｏ　）のサポニンの
構成成分であるイノサポニン類およびその製造法に関す
る。

この発明の発明者らはアマチャヅルの含有成分を（Ｉ■
究した結果、下記の新見なイノサポニン類を見出した。

　すなわら、式（１）： 〔式中ｌ也１が〔β−１〕−ゲルコピジノシル（Ｚ−＞
２）　−ａ　−Ｌ−ラムノピラノシル（ｌ→６）〕−β
−１）−グルコピラノシル基であるときは、１ζ１が水
素原子、β−１）−グルコピラノフル（１→６）−β−
１）−グルコピラノシルノル、α−Ｌ−ラムノピラノシ
ル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基もしくはβ
−Ｄ−グルコピラノシル基であって、Ｒ３が水素原子も
しくはヒドロキシ基であシ、Ｒ’がβ−Ｄ−グルコピラ
ノシル（１→２）−β−Ｄ−グルコピラノシル基である
ときは　Ｒ１がα−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−
β−Ｄ−グルコピラノシル基であって　Ｈｓが水素原子
であシ、Ｒ１がα−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）−
β−Ｄ−グルコピラノシル基であるときは、Ｒ”がβ−
Ｄ−グルコピラノシル（ｌ→６）−β−Ｄ−グＲ゛が水
素原子であり、 Ｒｏがβ−Ｄ−グルコピラノシル基であるとき砿Ｒ３が
β−Ｄ−キシロビ２ノシル（１→６）−β−１）−グル
コピラノシル基もしくしよα−Ｌ−２ムノビラノシル（
１→６）−β−〇−グルコピラノシル基であって　Ｒ１
が水素原子であり、またＲ１が水素原子であるときは、
Ｒｏがβ−１〕−グルコピラノシル基、β−Ｄ−キシロ
ピラノシル（１→６）−β−Ｄ−ゲルコピ２ノシル基も
しくはα−Ｌ−ラノ、ノビジノシル（ｌ→６）−β−Ｄ
−ゲルコピ２ノシル基であって、Ｒ１が水素原子もしく
はヒドロキシ基でるる〕 で表わされる化合物である。

これらのギノサボニンＦａ　（Ｉ）の具体名を列挙する
と次の通りである。

２０Ｓ−プロトパナキーリジオールー３−０−（（β−
■）−グルコピラノシル（１→２）−α−り一ラムノビ
２ノシル（１→６））−β−Ｄ−グルコピラノシド）　
−２０−０−Ｃβ−Ｄ−グルコピラノシル（ｌ→６　）
　−１−Ｄ−グルコビラノンド〕−以下「ギノーリ“ボ
ニンＡ」と称する−２（）Ｓ−グロトパナキシ′ジオー
ル−３−０−（［β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）
−ｄ−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６））−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド）−２０−０−（α−Ｌ−ラムノピラノ
シル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシト〕−以下１
゛ギノサボニンＢ」と称する一 ２０Ｓ−プロトバナキザジオールーａ−ｏ−（［：β−
Ｄ−ゲルコピジノシル（１→２）−α−Ｌ−２ムノピラ
ノシル（１→６）〕−〕β−■〕−ゲルコピ２ノシド−
２０−０−β−Ｄ−グルコピラノシドーー以下１−ギノ
サボニンＦ」と称する一２Ｏ８−プロドパノーキサジオ
ール−３−０−１：β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２
）−β−１）−グルコピラノシド）　−２０−０−［ｄ
−１，、−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グル
コピラノシド〕−以下「ギノザボニンＥ」と称する−２
０８−グロトパナキサジオール−３，２０−ビス−〇−
〔α−■、−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド〕−以下「ギノサボニン（ン」と称する
− ２Ｏ８−グロトパナキサジオール−３−０−［α−１，
−ラムノピラノシル（１→６）−β−１）−グルコピラ
ノシド：１Ｉ−２０−０−β−Ｄ−ｆルコヒラノシドー
以下「ギノサポニンＫ」と称する一２Ｏ８−プロトバナ
キサジオール−３−〇−β−１）−グルコピラノシド−
２０−０−（β−Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β
−Ｄ−グルコピラノシド〕−以下「ギノサボニンＩ」と
称する−２０８−グロトバナキサジオール−３−０−β
−Ｄ−グルコピラノシド−２０−０−（α−Ｌ−ジムノ
ビラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド〕−
以下「ギノサボニンＪ」と称スる−２０８−グロトパナ
ギ丈ジオール−２０−０−［β−１〕−キシロピラノシ
ル（１−６）−β−Ｄ−グル：＝７　ヒ５　／　シ）”
　）−以下「ギノサボニンＭ」と称する− ２０８−プロトバナキサジオール−２０−０−［α−Ｌ
−ラムノピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グ＃　：１７
　ヒ−ｙ　／　シト］　−以下「ギノサボニンＮ」と称
する− ２０Ｓ　、　　２６−ヒトロキシグロトパナキサジオー
ルー３−０−（［β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）
−α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→６）〕−〕β−Ｄ−
ゲルコピ２ノシド−２０−０−［α−Ｌ−２人ノピラノ
シル（１→６）−β−Ｄ−グルコヒラノシド〕−以下「
ギノザボニンｏ」と称する− ２０８−ブｎトパナキザジオール−３−０−（α−ｒ、
−ラムノピラノシル（ｌ→６）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド）　−２０−０−（β−■）−ゲルコピジノシル（
１→６）−β−１）−グルコピラノシド〕−以下［グロ
ギノザボゲニンＡ、Ｊと称する一一グロトパナヤ′１Ｆ
ジオールー３−１１−　（（β−１）−ゲルコピジノシ
ル（１→２　）　−ｃｌ　−７，−，７ノ、ノビジノシ
ル（１，４６）　：ｌ−β−■）−グルコピラノシド）
−貝下［ブロギノザボゲニンＡ−ＡＩＩＪと弥する〜 ２０８−　２６−ヒトロキシプロトパナキザジオールー
２１）−０−β−■）−グルコビラノンドー以下Ｕ７″
ロギノッ゛ボゲニン０．　Ｊと称するーかくしてこの発
明は、前記式（１）で表され、式中Ｒ１がβ−Ｄ−グル
コピラノシル基　Ｒ２がβ−Ｄ−キシノピラノシル（１
−６）−β−Ｄ−グルコピラノシル基もしくはα−Ｌ−
ラムノピラノシル（１→６）−β−り一グルコピラノシ
ル基、Ｒ８が水素原子の化合物、具体的にはギノサボニ
ン１及びＪ並びにその製造法を提供するものである。

ギノザボニンｉ　（Ｉ）のうち、ギノサポニンＡ、Ｉ）
。

Ｆ、、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｊ、に、Ｍ、ＮおよびＯはいずれも
アマチャヅルのサポニンの構成成分であり、例えば次の
方法によってアマチャヅルから抽出。

分ＡＭされる。

先ず初めに、アマチャヅルを水または含水低級アルコー
ルで抽出する。　含水低級アルコールとしては５０’／
％程度以下の含水メタノール、含■ 水エタノール等が例示される。　この抽出は加温または
加熱下に行うのが好ましい。　なお、原料のアマチャヅ
ルは、抽出に先立って予め細切し、あるいは常法により
脱脂したものを用いてもよい。

また抽出溶媒として含水低級アルコールを用いた場合に
は抽出液を濃縮してアルコール分を除去したのち、適翅
の水を加えて次の非イオン性吸着樹脂での処理に付すの
が好ましい。

非イオン性吸着樹脂としては、スチレン−ジビニルベン
ゼン共重合体からなるハイポーラスなものが好ましく、
具体的にはアンバーライ）ＸＡＤ−２（米１＝４１０−
ムアンドハース社製）、セファデックスＬＪＩ２０（フ
ァーマシャファインケミカルズ社製）などが繁用される
。　この処理は、吸着樹脂を充填したカジノ、に上記で
得られた抽出液を通液して行うのが便利である。　この
操作によυサポニンが樹脂に吸着される。

次いで樹脂に吸着された・す°ボニンを低級アルコール
で溶出する。　溶出溶媒として用いられる低級アルコー
ルとしてはメタノール、エタノール等が好ましい。　な
お、溶出に先立って予めカラムを水あるいは２０ｖ／％
程度の含水低級アルコールで洗浄するのが好ましい。

上記で得られた低級アルコール溶出液を次いでアルミナ
で処理する。　この処理も、アルミナを充填したカラム
を用いて行えば簡便である０　この処理により、サポニ
ンはアルミナに吸着される。

なお、このアルミナでの処理に先立って上記の低級アル
コール溶出液を予め適宜濃縮しておいてもよい。

アルミナに吸着されたサポニンを次いで低級アルコール
′または含水低級アルコールで、好ましくは５０／％４
’ｊｉ度の含水低級アルコールで溶出す■ る。　この溶出液を濃縮することにより、粗ギノサボニ
ン類が得られる。

上記のようにして得られる徂ギノサボニン類は、ギノサ
ボニンＡ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｊ、Ｋ。

Ｍ、Ｎおよび０等がらなり、これらの各成分は例えば次
の方法により分離、精製される。

すなわち、粗ギノザポニン類を水に溶解し、この水溶液
をスチレン系吸着樹脂、例えばザーバクロム（Ｓｅｒｖ
ａｃｈｒｏｍ　）　ＸＡＤ　−２Ｃサーバ（５ｅｒｖａ
　）社製〕で処理し、被吸着物質を４５−１００俤メタ
ノール水溶液で溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲルカラ
ムで処理する。

シリカゲルに吸着されたサポニンを次いでクロロホルム
・低級アルコール・水で好ましくはクロロホルム・メタ
ノール・水（６５：３５：１０下層）で溶出し、薄層ク
ロマドグ２フイー（ＴＬＣ）を指標とし、溶出液を７２
クシヨン１〜６に分画する。

フラクション１〜３をそれぞれシリカゲルカラムで処理
し、次いでシリカゲルに吸着されたサボニンヲクロロホ
ルム・低級アルコール・酢酸：ｒ−チル・水で好ましく
はクロロポルム・メタノール・ｒ”＋ｆ”　酸エチル・
水（２：２：４：ｌ下層）で分画溶出する。

ｉだ、クラクション４および５もそれぞれシリカゲルカ
ラム、で処理し、次いで、シリカゲルに吸着されたリー
ボニンを低級゛アルコール・ｆｉｈ　ｒＲニーｙ−ル・
水で好ましく　ＩｔＪ：　ｎ−ブタノール・酢酸エチル
・水（４：１：２上層）で分画溶出する。

また、フラクション６もシリカゲルカラムで処理し、次
いで、シリカゲルに吸着された・す゛ポニンをクロロホ
ルム・低級アルコール・水で、好ましくハクロロホルム
嗜メタノール”水（６５：３５：１０下層）で分画溶出
する。

上記で得られた各分画溶出液を濃縮し、さらに’ｌ’Ｌ
Ｃの結果を指標にして前記のシリカゲルカラムクロマト
グラフィーを繰返し、これらのギノサボニン類を各個別
に分離、精製すると、フラクション１からギノサボニン
ＭおよびＮが、フラクション２からギノザポニンＩ、Ｊ
およびＫが、フラクション３からギノサボニンＧが、ク
ラクション４　。

からギノザボニンＥ訃よびＦが、クラクション５からギ
ノサボニンＢが、また７ラクシヨン６かもギノサボニン
Ａがそれぞれ得られる。

また、ギノサボニン０は、粗ギノサボニン類をスチレン
系吸着樹脂で処理し、被吸着物質を３０〜４０チメタノ
ールで溶出し、溶出液を濃縮後シリカゲルカラムで処理
し、次いで吸着されたサポニンをクロロホルム、・低級
アルコール・水テ、好ましくはクロロホルム・メタノー
ル・水（６５ａ３５：１０下層）で分画溶出することに
より、分離、狛Ｖ芋Ｖできる。

さらにプロギノサボゲニンＡ、およびプロギノサボゲニ
ン０１はそれぞれギノナボニンＡおよびギノサボニン０
をｉ１２［加水分解することにより得られ、またプロギ
ノ・す°ボニジＡ−ＡＨはギノサボニンＡを５０％酢酸
で処理することにより製造できる。

また、ギノサボニンＦ、Ｇ、Ｉ、ＪＳＩ（、ＭおよびＮ
は他のギノザポニン類（Ｉ）を酵素加水分解することに
よっても製造できる。

このようにして得られるギノサボニン類（Ｉ）は、すべ
て新規であシ、脂質分解抑制および脂質合成抑制作用を
有し、医薬として有用である。　そして、ギノサボニン
Ｆ　（Ｉ）を医薬として用いる場合には、個々のツポニ
ンを有効成分として使用することができる。

次にこの発明を実施例により説明する。

実施例１ 乾燥したアマチャヅル全草２　Ｖｑを水３０　／−で熱
時２回抽出した。　両袖出液を合し、非イオン性吸着樹
脂、アンバーライトＸＡＤ　−２４１を充填したカラム
に通導した。　吸着部を水ｌｏｔ。

次いで２０％メタノール６ｔで洗浄したのち、メタノー
ル５ｔで溶出し、溶出液を減圧下に蒸発乾固し、芦褐色
粉末３７Ｆを得た。　これをメタノール１ｔに溶解し、
アルミナ３００　Ｆを充填した力２ムに通導したのち、
５０％メタノール約２０ｔで溶出した。　溶出液を減圧
下に濃縮し、淡芭色粉末として粗ギノサボニン２５Ｆを
得た。

粗ギノザボニン２０１を水ｌｔに溶解し、スチレン系吸
着樹脂ザーバクロムＸＡＤ　−２（＋−パ社製）６００
顎を充填したカラムに通導した。

吸着ｆｆ１ｓ　ヲ２０％メタノールよシ順次メタノール
含址をノ曽しながら溶出し、４５〜１０ｏ％メタノール
溶出液を合し、減圧下に蒸発乾固して淡黄色粉末１　ｆ
ｉ　ｆ　ｆ：得た。　これをシリカゲル＜　３０Ｏｆ）
カラムクロマトグラフィーに付し、ＴＬＣを指標として
、クロロホルム・メタノール・水（６５：３５：１０下
層）で１００　ｍｅずつ分画溶出してフラクション１〜
６を得、それぞれ蒸発乾固した。　これらフラクション
１〜３をそれぞれシリカゲル（１００？）カラムクロマ
トグラフィーに伺し、クロロホルム・・メタノール・酢
酸エチル・水（２：２：４：１ｆ層）で分画溶出し、さ
らにこの操作を２回繰返し、フラクション（ｉ、ｉｒ）
からギノサホニンＭ（６０Ｗ）およびギノサボニンＮ（
１６０叩）を、７２クシヨン２（１，ｘｆ）からギ／　
−！ｊ−、ｔ？　＝ンＩ（６０Ｑ）およびギノサボニン
Ｊ（１２０η）ならびにギノサポニンＫ（１１０■）を
、またフラクション３（１，Ｏｆ）からギ／サポニンＧ
（４５０ｑ）をそれぞれ得た。

またフラクション４および５をそれぞれシリカゲル（２
００ｆ）カラムクロマトグラフィーに付し、ｎ−メタノ
ール・酢酸エチル・水（４：１：２ｆ層）で分画溶出し
、さらにこの操作を２回繰返しクラクション４（３，４
１）からギノザボニン１）　（３５０Ｆ’￥　）、ギ、
’ｖボ＝　ンＦ、　（１５００Ｎ　）およびギノジポニ
ンＦ（８０グ）を、またフック’ｉ”Ｆ１７５　（２，
５ｆ　）からギノサボ−”’ｎ（２２０ｒγ）およびギ
ノザボニンＣ（２４０ｍｇ）をそれぞｉ１イ（Ｉた。

さらに、７ラクシヨン６（０，９Ｆ）をシリカゲル（１
００ｆ）カラムクロマトグラフィーに付し１、クロロホ
牛ムΦメタノール・水（６５：３５：１０下層）で分画
溶出し、さらにこの操作を１回繰返してギノツボニンＡ
　（５１０ｖ）ヲ得り。

各ギノサボニンの物性は後記の表１および表２に示す通
りである。

実施例２ ギノザボニンＡ２５０ツを０．００５　Ｍ−燐酸２水’
ｆ＝すＩ−リウム水ｍＷ　（ｐｆＩ　４．０）　５０　
ｍｅ　Ｋ　ＦＪＷＦ　Ｌ２、これに粗へスベリジナーゼ
（田辺製薬株式会社製）　５００■を加え、３７〜３８
℃で６時間攪拌した。　反応液をスチレン系吸着樹脂、
サーバクロムＸＡＤ　−２（サーバ社ｊＪ’４　）　５
０　ｒｒｒｌ’、を充填したカラムに１１！Ｉ　噂し、
水１を次いで２０％メタノール２ｔで洗浄したのち、メ
タノール３００　ｍｌ！で溶出した。

溶出液を減圧下にケ、′敬縮シフ、濃縮物をシリカゲル
・カジノ、・クロマトグラフィーに付し、りａｒ７ホル
ム・メタノール・水（６５：　３５　：　１０ｆ層）で
分画溶出して、ギノサポニンｒ（ｚｏ＋＋ｙ）、ギノザ
ボニン■ぐ（１５Ｗ）およびプロギノサ厳１ニンＡ。

（３５ｒｐｙ　）を得た。　ギノサボニンＦおよびＫは
Ｉ　ＲおよびＮＭＲにより、実施例１で得られた標品ど
同定した。

捷だ、プロギノザボゲニンＡ、の物性は後記の表１およ
び表２に示す通りである。

実施例３ ギノザボニンＡ１５０１”Ｆを５０チ酢酸１０−に溶解
し、７０℃で６時間攪拌した。　反応液をメチ１フン系
吸着（☆（脂、サーバクロム　ＸＡＤ　−２５０−を充
填したカラムに付して、プロザボゲニン両分約１００　
ｒｑを得た。　これをシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィーに付し、クロロホルム・メタノール・酢酸エチル・
水（２：２：４：１ｆ層）で分画溶出して、グロギノサ
ボゲニンＡ−ＡＨ３５叩を得た。　本市の物性は後記の
表１および表２に示す通りである。

実施例４ ギノサボニンＡ４００■を０．００５　Ｍ−燐酸２水素
ナトリウム水溶液（ｐＨ４，０）　５０ｍｌに溶解した
。　これにセルラーゼ（シグマ社Ｎ）　３００キを加え
、３７〜３８℃で２４時間攪拌した。

反応液を実施例２と同様に処理して、ギノサボニンＫ　
（１］、　０循）を得た。　本市はＩＲおよびＮＭＲに
より、実施例１で得た標品と同定した。

実施例５ ギノサボニンＢおよびＣの混合物１．４１を０．００５
Ｍ−燐酸２水素ナトリウム水溶液（１）ＩＩ４．０　）
２０　ｏｎｅに溶解した。　これにセルラーゼ（シグマ
社製）６００■を加え、３７〜３８℃で７時間攪拌した
。

反応液をサーバクロム　ＸＡＤ−２（８０ｍｇ）のカラ
ムで処理して約１，１１の加水分解物を得た。

これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付シ、ク
ロロホルム・メタノール中酢酸エチル拳水（２：２：４
：１下層）で分画溶出してギノサボニンＫ（１４０〜）
ならびにギノサボニンＦおよびＧを含む混合物（５５ｏ
り）を得た。　この混合物を再びシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーニ付シ、クロロポルム・メタノール・水
（６５：３５：１０下層）で分画溶出して、ギノサボニ
ンＦ（５０ｑ）およびギノサポニンＧ（１５ｏｖＶ）を
得た。　これらのギノザボニンＦ、ＧおよびＫはＩＲお
よびＮＭＲによシ実施例１で得られだ標品と同定した。

実施例６ ギノサポニンＢおよびＣの混合物ａｏｏｑを５゜俤酢ｒ
ａ　１０　ｍｅに溶解し、７０℃で６時間攪拌した。

反応液をサーバクロム　ＸＡＤ−２（５０ｍｌ　）のカ
ラムに付して分画し、プロサボゲニン画分をシリカゲル
カラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム・メタ
ノール・水（６５：３５：ｌｏ下ｅンで分画溶出してプ
ロギノサポゲニンＡ　−Ａｉ（（３０ＷＶ）を得だ。　
本市はＩ　ＲおよびＮＭＲにより、実施例３で得られた
標品と同定した。

実施例７ ギノザポニンＤおよびＥの混合物２ｆを０．００５ｈ４
−燐酸２水ネナトリウム水溶液（ｐＨ４，０）に溶解し
た。　これにセルラーゼ（シグマｔｌ！り１２を加え、
３７〜３８℃で２０時間攪拌した。

反応液をサーバクロム　ＸＡＩ）−２（８０ｍｇ　）の
カジノ・で処理し°〔約１．６１の加水分解物を得だ。

これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、ク
ロロホルム・メタノール・Ｆ’ｉ′Ｆｒ’ｌｉ！、エチ
ル・水（２：２：４：１７層）で分画溶出してギノザボ
＝ンｌ（ａｓ５ｍｒ）、Ｊ　（２５０ｔｐ’？　）、Ｍ
（８０り）オヨびＮ（９０ｒｒｖ）を得た。　仁れらの
各ギノザボニンはＩＲおよびＮ　Ｍ　Ｒにより、実施例
１で得られた標品とそれぞれ同定した。

実施例 ギノザボニンＥ５ｍｇを０．００５Ｍ−’Ａ酸２水素ナ
トリウム水溶液（ｐＨ４，０）１−に溶解し、これにセ
ルラーゼ１０９を加え、３７〜３８℃で４時間攪拌した
。　反応液中にギノサボニンＪおよびＮが生成している
ことを薄層クロマドグ２フ・ｆ−により＃！認【７た。

実施例９ 実施Ｖ！１１で得た粗ギノサポニンをスチレン系吸着樹
脂、サーバクロノ、ＸＡＤ−２で処理し、３０〜４０チ
メタノールで溶出した。　溶出液を減圧下蒸発乾固し、
淡黄色粉末２ｖを得だ。　これをシリカゲル（２００Ｆ
）カラムクロマトグラフィーにイ１し、クロロホルム・
メタノール譬水（６５＊　３５　：　１０下層）で分画
溶出し、さらにこの操作を２回繰返し、ギノサポニンｏ
（ｉｓｏｑ）を得だ。　本市の物性は後記の第１表およ
び第２表に示す通りでちる。

ギノザボニン０１５０キを０．００５Ｍ−燐酸２水素ナ
トリウム水溶液（ｐＨ４，０）　３０ｍｇに溶解し、こ
れにセルラーゼ（シグマ社製）１５０■を加え、３７〜
３８℃で２４時間攪拌した０　反応液を実施例２と同仔
に処理して、プロギノサボゲニン０１　（２０Ｆｖ）を
得た。　本市の物性は後記の表１および表２に示す通り
である。

なお、実施例５および６において原料として１史用した
ギノツーボニンＣの化学名は２０８−グロトパナキν−
ジオール−３−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（１→
２）−β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０−０−（β−
Ｄ−グルコピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド〕であって、ギンセノシドーＲｂ、　　と同定さ
れだ０　まだ、実施例７において原料として使用したギ
ノサポニンＤの化学名は２０８−プロトパナキザジオー
ルー３−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−
β−Ｄ−グルコピラノシド）−２０−０−［β−Ｄ−キ
シロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラノシド
〕であって、ギンセノシドーＲｈ。

と同定された。

第　　１　−５ 元宋５）−析 ジ７°ボニン名　　ｍｐ（’Ｃ）　　　分子式　　　理
論値　　実験イ、！ＩＣ係　　Ｔｌ外　　Ｃチ　　■１
ク ギノーリ゛ボニンＡ　　２（１１−２０３Ｃ６ｏＩ（、
。、、０２□’３Ｈ２０５５，０３８３１５４，７８Ｂ
、５：ギノνボニンＪ（１９Ｇ−１９８Ｃ６（１）［１
，，２０２６ａ３１’１２０　５５．７１　Ｒ，４２５
５，６３ｆｌ、５＋ギノリボニンＥ　　１９９−２０１
　　Ｃ１４Ｔｌ、２ｏ２□弓馬０　５６．５２８．１’
ｉ１．　５６．３３　ＲＱイギ人す゛ボニンＪ’　　１
．９１−１９３　　（１：ｓ４．ｊ［，２（’）２２”
：３Ｂ、＋０　５６．５２　ａｔ；ｔ　　５（’ｉ、１
１　Ｒ，ＬＨギノザボニン（÷　１９２−１９４　　Ｃ
，４ｉ、２０２．・３１１２０　５７．３　、ｉ　Ｊｌ
、７３５７．目８７コギノリーボニンＩ　　ＨＩＩ−１
８５（シ４７”ＲＯＯ１７・３　Ｂ２０　５８．１３［
’、９３５７．７７８．７　’ｒギノザボニンＪ　　１
８９−１９Ｉ　　Ｃ，、ＩＴ８□０□７−４１１２０　
５７．４７９ＪＴ　４５７．５８８．ｑ／ギノリ゛ボニ
ンＩ（１１１’／−１８９Ｃ４８Ｈ８２０，７・３１Ｔ
２０　５　Ｂ−５２９０１＋　５　Ｒ，４１，８，Ｒ＜
ギノ°リーボニンＭ　　１５１１−１６０　　Ｃ４，Ｅ
１７ｏＯ，□争３／２■１．．Ｏ（ｉ　２．９７　９．
４０　６３．２０　！１６（ギノザボニンＮ　　１６５
−１６７　　Ｃ４□ＩＩ７□０１□”　２１１２（，１
６２，６６（ン！ｉ２　（：２．８り’　９Ｊ！Ｊギノ
サボニン０　２０２−２０５　　Ｃ６ｏＩＩ、ｏ、０２
．＊４ＪＴ２０　５４．２８　＋１．：（５５４２１，
１ｎ、１＋’プロギノリボク°ニンＡ２　１８８−１９
０．　　Ｃ，１１ｇ２０２２−馬０　　　５８．３　（
逼　８．ＦＴ３　５＄１．．３２　１１．ｆｉ！□フ猶
ギノリ”’ＸｆＸＴ１　１８３−１［１５Ｃ１６ｇ１−
Ｂ２０ｙ”馬０　　　　に０．７４　８．９２　６１１
．３＄３　９．１１６）ロギノリボグ＝ｙＱ、　　　１
６７−１６９　　Ｃ３６Ｈ６２０９すＪ、２０　　　　
６　！；、８２　９．１１２　６　（ｉ、＋１５　　（
１，Ｑ　！ｉ〕ｒ）岬）′ｆ、度 １．０７Ｌｌ）、、１１１１５．９９０−−：（３７５
，１６３５，１１６１１，１（１７１１１、（１４０，
１，（１２（１，９１０）第　　２ ＰＭＴＬ　　スペクト、ル ザボニン名　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
Ｃ−２＝１メチル １．２５Ｅ３，１．６１ｓ、１．７１Ｂ、１．’／１１
１グーク ＦＴ　　　　　　７ノメリンク　プロトン（、Ｊ＝７）
（Ｊ）７）　　Ｌ、Ｊ　＝’／ジサボニ／名　　　　　
　　　メチル ゾＴ１ギノリボゲニンＡ−＾ＴＩ　　Ｉｔ　）　　０１
１２ｒ、　、　０．９６ｓ　、　１．（１４ｐ　、　］
、、０８１．２６＊　、　１３９ｓ　、　］Ｊｉ４　Ｅ
ｌ　、　１．６６注１）：ｐｙ　−（１５ Ｉｆ）：ｐｙ　　−ｄ□／Ｉ）２０ 半：化学ジノ）　１１、シグナル市 川　２’ｊ”％　ｊシ“き ＰＭＩ七ス・へ゛りトルデーク ｃ−２４ｒｘ　　　　　　丁ツメリック　、７０トンを
縛に上り不明瞭 次に本発明のキノサポニン類の薬理効果について述べる
。

人間を含めた哺乳動物は、外より取入れた脂肪とか糖質
の過剰分を脂肪細胞に変換して貯え、外からの補給がな
い場合これを脂肪分解して脂肪酸やグルコースに変えて
エネルギー源として利用する。　この脂肪細胞の脂肪分
解には、脳下垂体ホルモンである副腎皮質刺戟ホルモン
（ＡＣＴＨ）や副腎皮質ホルモンであるアドレナリンが
大きく作用し、分カフを促進する。　逆に、脂肪細胞の
脂肪分解を抑制し、血液中の血糖遣が増大しないように
する働きを持つものが、糖尿病薬として有名な膵臓ホル
モンのインシュリンである。　この発明によるキノサポ
ニン類は脂肪細胞に対して、インシュリン様の作用をも
ちＡＣＴＩ（の脂肪分解促進を抑制する。　その効果は
ギノサボニンＢの抑制率１８裂からギノ・す゛ボニンＮ
の３８％抑制率まで、ＡＣＴＩＩの脂肪分解促進作用を
、平均２８％抑制する効力をもつ。

脂肪細胞におけるアドレナリｙの脂肪分解促進作用に対
してのキノサポニン類の抑制力は全体的にＡＣＴＩｆに
対する場合に比べで弱いが、ギノサポニンＢおよびＥの
みは３０％以上のアドレナリン脂肪分解抑制効力をもつ
。

また脂肪細胞は、グルコースを中性脂肪に変換して貯え
る作用を有するが、脂肪細胞のグルコースから中性脂肪
を合成する能力を上記キノサポニン類はいずれも抑制す
る作用を有し平均約５０％の抑制力をもつ。

従って本発明のキノサポニン類は、脂肪細胞に＞−（１
）る脂肪分解抑制剤および脂肪合成抑制剤としての新し
い脂質代謝剤としての医薬品の用途が期待される。　次
に本発明のキノサポニン類の薬理試験結果を示す。

摂理試験結果 ■、試験用脂肪細胞の調整 使用動物は体重１５０〜１８０ｆのｗｉｓｔｅｒ系雄ラ
ットを使用し、このラットから副キ九脂肪組織をとり出
し、Ｒｏｄｈｅｌｌの方法ＣＭ−１’ｔｏｄｂｅｌｌ：
　Ｊ−１１ｉｏＬ（ｊｌｅｍ、２３９，３７５　　（１
９６４））によシ脂肪細胞を得だ。　この脂肪組織４？
を小切片にし、Ｋｒｅｂｏ　Ｒｉｎｇｅｒ　Ｂｉｃａｒ
ｂａｎａｔｅ　Ｂｕｆｆｅｒ　　１０　ｍｌ　（アルブ
ミン０．４ｆ、コラゲナーゼ１０可、グルコース５グを
含む。　ｐＨ７，４）に入れ３７℃で５０分間加温し、
３００　ｒ、ｐ、ｍ、で遠心分離し浮上する脂肪πｍ胞
層を分取する。　この脂肪細胞に前記緩衝液１０ｒｎｅ
（ｐＩＩ　７．４　）を加えよくふりまぜて洗い３００
　ｒ−ｐ、ｍ、で３０秒間遠心分離する。　この操作を
２回繰返し、脂肪細胞を完全に洗い、この脂肪細胞を試
験に用いた。　検体液はギノサボニンＡ、　Ｂ、　Ｅ、
、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｊ、に、Ｍ、Ｎ、０およびグロギノーリ
゛ボゲニンＡ２．　Ａ−ＡＨ、０，のそれぞれを水溶液
とし、ｐＨ７，４に調整したものを用いた。

■、試験方法および結果 １）　　ＡＣＴＨによる脂肪細胞の脂肪分解に及１１す
ギノザボニンジ８の影響 ａ、試験方法 コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫｒｅｂｓＲｉｎ
ｇｅｒＢｉｃａｒｂｏｎｑｔｅＢｕｆｆｅｒ　ＣＩＣＲ
ＢｅｐＨ７，４）中に懸濁し、その溶液０．３　ｍｅ　
（脂肪細胞１００η相当）。

ＡＣＴＪＩ溶液０．１　ｍｇ　（１μｆのＡＣＴＨを含
む）、各サポニン溶液０．１　ｍｅ　（５００μｍのサ
ポニンを含む）および５チアルプミン溶液０．３　ｍｇ
　（ＫＲＢにとかし、ｐＪｌ　７．４に調整した溶液）
を共栓試験管に入れ、３７℃で２時間加温し、Ｄｏｌｅ
の方法［Ｖ、　Ｐ　。

１）ｏｌｅ：Ｊ、Ｂｉｏｌ−ｅｈｅｍ−，３５，１５０
（１９５８））に従って遊離する脂肪酸を測定した。

すなわち、反応系にＤｏｌｅの抽出液３ｒｔを分取し、
チモールブルー溶液１πＣを加える。　この溶液に窒素
ガスを吹込んで攪拌しながら０．００８　＋ａ定水酸化
プ」・リウノ・水溶液で滴定し、検ｔ、十線よシ遊〜（
を脂肪酸分を測定する。

なお、脂肪分解抑制率は次式により求められるＯＡ　：
　ＡＣＴＩｉ　（１μｆ／ｍｅ　）のみの添加により生
じた遊離脂肪ｒＩｌ量 Ｂ：　ＡＣＴＩＩ　（１１１９／ｍｅ　）＋サボ＝　７
　（２０１１ｆ／ｍｅ　）の添加により生じた遊離脂肪
酸量 ｂ・試（吟結果 ＡＣＴＩＩによる脂肪細胞の脂肪分解に対するギノサボ
ニン類の抑制率の測定結果を第３表に示した。

第３表 無添加　　　　　　０　− ＡＣＴＩＴ（１／ｉｆ／ｍ／り　　　　　　８．４　　
ｇ（＃）＋ギｌす°ボニ７ｋ　（２０７Ｊｆ／ｍ／）　
　６．１　　　２　７（＃）−１−＃　　Ｂ、（Ｎ　　
）６．９１８（１）→−＃　　Ｅ（＃　　）５．９３０
（＃）−４−＃　　Ｆ（ｓ　　）６．３２５（’）十ｓ
　　　Ｇ（’　　　）５．８　３１（＃）＋　＃　　Ｉ
（＃　　）６．６２１（＃）−１−ｔｔ　　Ｊ（＃　　
）５．３３７（Ｉ）＋Ｉ　　　Ｋ（１）６．１　　２７
（＃）＋　＃　　Ｍ（＃　　）６．４２４（＃）十＃　
　　Ｎ（＃　　　）５．２　３８ＡＣＴＩＩ（ｌμｆ／
＊つ＋ギ／？ボ＝ン０（２０／ｆ／＊ｇ）　　　５．６
　　３　３＃（−）−１グロギノ−リボゲニンＡ２（１
）　　　　６．２　　　２６＃　Ｃｌ）　十＃　Ａ−Ａ
Ｈ（＃　）　６．３　２５Ｉ　　　　（＃）＋　　　　
Ｉ　　　　　　Ｏ，（＃　　　）　　　　５．９　　　
３０以上のどと＜　ＡＣＴｆＩ　１μｆ／ｒｎｔを脂肪
細胞に作用させ３７℃で２時間保つとき脂肪を分解して
８．４μＥｑ／ｆの遊離脂肪酸を生成するが、ギノザボ
ニン類をそれぞれ２０μｍ／−添加すると上記のごとく
明らかにＡＣＴＨの脂肪分解作用を抑制し、遊離脂肪酸
の生成風が減少する。　その平均抑制率は２８％である
。

２）アドレナリンによる脂肪細胞の脂肪分解に対するギ
ノサボニン類の影響 ａ、試験方法 コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＫ　ｒｅ　ｂ　ｓ
Ｒｉｎｇｅｒ　Ｐｈｏｓｂａｔｅ　Ｂｕｆｆｅｒ　（Ｋ
ＲＰ　、　ｐＨ７，４）に懸濁し、その溶液０．３　ｔ
ｎｔ　（脂肪細胞１００ｖｔ相当）、アドレナリン溶液
０．１　ｔｎｅ　（１μｍのアドレナリンを含む）各サ
ポニン溶液０．１　ｍｅ　（２０／Ｉｆのサポニンを含
む）および５％アルブミン溶液０．５　ｔｒ＝ｅ　（Ｋ
ＲＰにｎ解しｐＪＩ７．４にＢ１整した溶液）を共栓試
験管に入れ、３７℃で２時間加温し、Ｄｏｌｅの方法（
前記１）と同様）に従って遊離する脂肪酸量を測定した
。　すなわち反応系にＤｏｌｅの抽出液３−を加え５分
間振とう後、ヘプタン３−を分取し、チモールブルー溶
液１−を加える。　この溶液を窒素ガスで攪拌しながら
ｏ、ｏｏｓ規定水酸化ナトリウム水溶液で滴定し検量線
よシ遊離脂肪酸量を求める。

なお、上記抑制率は前記ｌ）に用いた式と同じ式を用い
た。

ｂ、試験結果 アドレナリンによる脂肪細胞の脂肪分解に対するギノザ
ボニン類の抑制率の測定結果を第４表に示した。

（以下余白次頁につづく） 第４表 無添加　　　　　　　Ｏ− アドレナリン（ＡＤ）　　（１μｆ／ｍ／）　　　　　
　　　１４．１　　　　　０ＡＤ（１ｔｔｔ／ｍす＋ギ
ノサボ＝７ｋ（２０／Ｉｆ／ｍＱ　　１３．４　　　　
　５ＩＩＩ　）−１−＃　　Ｂ（＃　）　　９．１　３
５１（＃）→−＃　　ｇ（＃　）　　９．４　３３＃（
＃　　）十＃　　　Ｆ（＃　　）１３．４　　　５＃（
＃　）４−　　ｐ　　Ｇ（ｐ　）１．３．８　　２＃（
１）十＃　　　Ｉ（＃　　）１２．７　　１０ＩＣＩ　
’）＋　　＃　　Ｊ（ｒ　）Ｊ３．１　　７＊（ｘ　）
＋　　ｚ　　Ｋ（’　）１３．８　　２＃（＃　）＋　
　＃　　Ｍ（−）１３．５　　４＃（＃　　）十＃　　
　Ｎ（Ｉ　　）１３．３　　　６１（＃）→−＃Ｏ（＃
）１３．９１ １　（＃　　）、＋７１フギノーカｆグ巨ンＡ２（＃　
　　）　　１３．０　　　　　　　　ｓ＃（＃　）＋　
　＃　　Ａ−Ｍｌ（＃　）　１２．４　１２＃（１）＋
　　Ｉ　　　　Ｏ，（＃　　）１２．６　　　１１以上
のごとくアドレナリン１μｆｆ　／ｍｅを脂肪細胞に作
用させ３７℃で２時間保つとき、脂肪を分解して１４．
１μＦ２ｑ／Ｖの遊離脂肪酸を生じる。　このときギノ
ーリ゛ボニン類をそれぞれ２０μｔ／ｍｅ共存さぜると
いずれの場合も脂肪分解を抑制し、遊離脂肪酸の生成は
減少する。　しかしＡ　ＣＴ　Ｈによる脂肪分解に対す
るギノザボニン類の抑制率と比べると小さい。　ただギ
ノザボニンＢおよびＥのみはＡＣＴＴＩに対するときよ
り強い効果を示す。

３）脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪合成におよ
ぼすギノサボニン類の影響 ａ、試験方法 拳法はカーボンに放射能マークしだ　Ｃ−グルコースを
脂肪細胞に作用させ、脂肪合成にくシこまれ、中性脂肪
として脂肪細胞にとりこまれだグルコース量を放射能カ
ウント量により測定、その脂肪合成能に及ばずギノザボ
ニン類の影′脣を試、験す為。

すなわち、コラゲナーゼ処理して得た脂肪細胞をＩＣＲ
Ｂ中に懸濁し、その溶液０．３５　ｍｌ　（脂肪細胞１
００７相当）、各サポニン溶液０．１　ｍｇ　（２０ｔ
ｒｙのサポニンを含む）、５チアルプミン溶液０、５　
ｍｌ　（ＫＲＢ　溶液１０ｍＭグルコースを含む、ｐｆ
Ｉ　７．４　）、１４Ｃ−グルコース溶液０．０５ｍ／
（０，５μＣｉ　、ＫＲＰ溶液Ｔ　ｐＩＩ’Ｉ−４ｖ　
１０　ｒｒ＋　Ｍグルコースを含む）を共栓試験管に入
れ、３７℃で３０分加温し、Ｄｏｌｅ　の抽出液５　ｍ
ｅを加え５分間振とう後、ヘゲタン３　、ｅおよび水２
　ｍｇを加え５分間振とうする。　ヘプタン層３づを分
取し、アルカリ性エタノール溶液（０，５規定水酸化ナ
トリウム溶液、５０チエタノール溶液）を３　ｍｅ加え
５分間振とうする。

エタノール層を１−分取し、トルエンシンチレーション
溶液１０ｍｅを加え、５ｋｉｐｓｌｃｉ　ｅｔ　ａｌの
方法〔Ｂｉｏｃｂｅｍ−Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔａ、　
１０６　、３８６　（１９６５）〕によシ測定した。

ｂ）試験結果 脂肪細胞におけるグルコースからの脂肪合成にお上にす
ギノサボニン類の促進率を測定し第５表に示した。

第５表 な　　し　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２
１５００　　　　１００ギノサボ＝ｙＡ（２０／Ｉｆ／
ｍ６）　　　　　８０１３　　　　３７’　　　Ｂ（ｐ
　　）　　　　１２３０８　　　５７Ｆ（＃　　　）　
　　　１０２４８　　　４８Ｆ（＃　　　）　　　　　
１１６２０　　　　５４Ｇ（＃　　　）　　　　　８９
２５　　　４２Ｉ（ｓ　　　）　　　　　１０５６４　
　　４９Ｊ（＃　　　）　　　　１１６５０　　　　５
４Ｋ（ｔ　　　）　　　　　１３６００　　　６３Ｍ（
＃　　　）　　　　　１２６５０　　　５９Ｎ（＃　　
　）　　　　　９８７０　　　４６０（＃　　　）　　
　　　８２６３　　　３８フ１ギノツポかンＡ２（ｌ　
　　　　）　　　　　　　　１２６５０　　　　　　５
９’　　Ａ＝Ａｆ（（＃　　　）　　　　　１０５５０
　　　　４９０、（ｚ　　　）　　　　１１２００　　
　５２以上のごとくギノサボニン類の共存しない場合に
比べ、脂肪細胞におけるグルコースの中性脂肪としての
とり込みは、はとんどが半分以下となり、ギノ〜す“ボ
ニン１．）′ｉがそれぞれ脂肪細胞におけるグルコース
からの脂肪合成を抑制する作用のあること（弓、明らか
である。

特許出願人　竹本常松 日本商事株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 〔式中Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル基　Ｒ２がβ−
   Ｄ−キシロピラノシル（ｌ→６）−β−Ｄ−グルコビラ
   ノシル貼もしくはα−Ｌ−ラムノピラノシル（１−６）
   −β−ｐ−グルコピラノシル糸、Ｒ８が水素原子〕で表
   される化合物。 ２、アマチャヅルを水または含水低級アルコールで抽出
   し、抽出液を非イオン性吸着樹脂で処理したのち被吸着
   物質を低級アルコールで溶出し、この溶出ｒ（娠をアル
   ミナで・シワ、理したのち被吸着物質を低級アルコール
   または含水低級アルコールで溶出して粗ギノザボニン類
   を得、これ分次いでスチレン系＋１＋＞着口１肘および
   シリガゲルでそれぞれ処理して分離、精製して、 〔式中Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル基　Ｒ２がβ−
   Ｄ−キシロピラノシル（１→６）−β−Ｄ−グルコピラ
   ７ノシル辺：もしくはα−Ｌ−ジムノビラノシル（１′
   ｈ−Ｊ−６）−β−Ｄ−グルコピラノシノトオｊ１１１
   ８が水素原子〕で表されるギノーリ°ボニン：ｌ′１を
   得ることを特徴とするギノサボニン類の製造法。 （以下余白、次頁に続く）