JPS6041700A - 免疫系刺激物質の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、免疫反応の発現に関与する可溶性因子（５ｏ
ｌｕｂｌｅ　１Ｍ＋ａｔｏｒ）の産生を亢進する作用を
有する新しい蛋白物質の製造法に関する。

最近の免疫学の進展に伴い、Ｔｌ胞、Ｂ細胞、マクロフ
ァージ等の役割が次第に解明されると共に、これら各細
胞等がある種の刺激を受けることにより、免疫反応の発
現に抑制的又は増強的に動く各種の可溶性因子を遊出す
ることが明らかになってきた。上記可溶性因子としては
、マクロファージ及び単球より産生されるモノカイン（
ｍｏｎｏｋｉｎｅ）　、ＩＪンパ球、主としてＴｌ１Ｉ
胞より産生されるリンフ才力イン（１ｙＩｌｐｌ＋ｏｋ
ｉｎｅ）等のサイトカイン（ｃＶｔｏ）ｔｔｎｅ）が知
られており、これらの中にはインターフェロン（１ｎｔ
ｅｒｆｅｒｏｎ）　、リンフ第１・キシン（＋１１１ｐ
Ｈ０ｔＯＸｉｎ）等が包含される。これら可溶性因子を
、均一に且つ多量に入手することが出来れば、殊にヒト
における免疫応答の調節機能の解析が可能となるのみな
らず、これらは臨床的にある種の悪性Ｒ痛疾愚、アレル
ギー性疾患、免疫異常症等に対する免疫療法の強力な武
器となり冑る。しかして上記可溶性因子は、一般にその
産生能力を有する各種細胞等を、刺激物質例えば赤イン
ゲン豆レクチン（Ｐ　ｈｙｔｏｌ＋ａｅｍａｇｇｌｕｔ
ｉｎ　：ＰＨＡ）　、タヂナタ豆しクヂン（Ｃ０ｎＣａ
ｎａＶａｌｉｎＡ：ＣｏｎＡ）アメリカやまごほうレク
チン（Ｐｏｋｅｗｅｅｄ　Ｍ　１ｔｏｏｅｎ：　ＰＷＭ
　）　、リボ多糖（ｌ１ｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｌ
ｄｅ　：　ｌ　ｐ　Ｓ）等を含む適当な動物血清添加培
地で生体外培養することにより収得されるが、その収量
は非常に微ｍである。本発明者らも上記可溶性因子の製
造入手を目的として鋭意研究を重ねてきたが、その過程
で、通常ｌｌＩ胞の増殖、維持の為に培地中に添加され
るが、それ自体では可溶性因子の産生を亢進する作用は
認められない動物血清成分中に、上記可溶性因子の産生
を著しく亢進する蛋白物質が存在することを見出し、こ
れを該血清中より分離収得するに成功した。該蛋白は、
通常の１ａ胞の生体外培養における血清添加培地では勿
論のこと、無血清培地に於いても、その添加により、該
Ｓ胞の可溶性因子産生能を著しく亢進することが出来、
またこの作用は生体内においても発現される。従来かか
る作用を有する蛋白物質は全く知られておらず、勿論血
清よりかかる作用を有する物質が分離された例の報告も
皆無である。本発明者らは、従って上記蛋白を生体の免
疫システムを刺激する効果を有する物質として、免疫刺
激物質（１＋ｎｍｕｎｏｓｔ＋ｍｕ＋ａｔｏｒｙＦａｃ
ｔｏｒ　：　Ｉ　Ｓ　Ｆ　）と命名した。

本発明は上記知見に基づいて完成されたものであり、そ
の要旨は、ｌ乳動物血清より、分子量が１０万以上であ
り、免疫反応の発現に関与する可溶性因子の産生を亢進
する作用を有する蛋白物質を分画採取することを特徴と
する免疫系刺激物質〈以下ｒＩｓＦＪと貯ぶ）の製造法
に係る。

本発明方法により製造されるＩ　Ｓ、Ｆは、上記の通り
可溶性因子の産生を亢進、増強する作用（免疫系刺激作
用）を有することをその最大の特徴としている。該ＩＳ
Ｆにより産生を１逆、増強される可溶性因子としては、
各種のリンホカイン、モノカイン、インターフェロン、
サイトカイン、リンフォトキシン等を例示することがで
きる。従って本発明方法により得られる上記ＩＳＦは、
これを公知の各ｔ！［！絽胞及び組織培養に利用するこ
とにより、上記各可溶性因子の生産ｐの著しい向上を計
り冑、また各因手の精製法をｉ略化することができる。

更に上記ＩＳＦは、それ特有の上記作用を利用して、生
体防御系の増強による各種感染症、免疫不全症等や癌等
の治療剤として：医薬品分野での応用も可能である。

本発明に用いられるｌｌ１Ｉ消は、哺乳動物に由来する
限り、特に限定はない。その具体例としては、例えばヒ
ト、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウサギ、マウス等に由
来する血清を例示することができる１之等而清は、その
起源とする哺乳動物の血液より、常法に従い分離されて
もよく、また各種方法により得られ、市販されているも
のを利用することもできる。殊に本発明に用いる血清は
、起源動物からの裸面及び分離に当り、事前に２等動物
乃至白液に特別な処置等を全く必要としない。即ちこれ
は通常の所謂正常Ｉｆａ清でよい。また本発明者らの研
究によれば、本発明方法では、上記原料血清のｆｌ類、
特にこれを提供するｍ＋ｊｔ動物のｆｌ類に拘わらず、
得られるＩＳＦは種特異性を有しないことが確認されて
いる。従って、本発明方法は、原料血清に特に制約を受
けない利点があり、また１９られるＩＳＦは種特異性が
ない点からも＠療分野での利用に好適である。

本発明方法に従う原料血清から“のＩＳＦの製造は基本
的には、この種血清等のバイオロジカル物質からの蛋白
物質の分館に利用される通常の方法と同様にして、目的
とするＩＳＦの物理的、化学的性質等を利用した各種処
理操作に従い□実施することができる（例えば、［生化
学データブック■」Ｐｌ　１７５〜１２５９、第１版第
１８ｇ、１９８０年６月２・３日、■東京化学同人発行
参照）。該方法としては具体的には例えば通常の蛋白沈
澱剤による処理、限外濾過、分子ふるいクロマトグラフ
ィー（ゲル濾過）、遠心分離、電気泳動、アフィニティ
ークロマトグラフィー、透析法、これらの組み合せ等が
挙げられる。一般には、血清を、分子量１０万以１の蛋
白物質が分画範囲に含まれるゲルＩ濾過剤によるゲル２
１通に付すことにより目的のＩＳＦが収得される。該ゲ
ル濾過剤としては、特に限定はなく、例えば、通常のデ
キストランゲル、ポリアクリルアミドゲル、アガロース
ゲル、ポリアクリルアミド−アガロースゲル、セルロー
ス等を素材にとするものをいずれも使用することができ
る。これらの具体例としては例えば、セファデックスＧ
タイプ、同ＬＨタイプ、セファロースタイブ、セファク
リルタイプ（以上、ファルマシア社）、セルロファイン
（チッソ■）、バイオゲルＰタイプ、同Ａタイプ（バイ
オ−ラド社）ウルトロゲルＡＯＡタイプ（ＬＫＢ社）、
ＴＳＫ−Ｇタイプ（東洋曹達工業曲）等の市販品を例示
することができる。上記ゲルＩ濾過に際し、血清は、特
に必要ではないが、好ましくは事前にこれを当該分子量
両分を含む蛋白成分に部分特製しておくのがよい。この
部分精製は、例えばアセＩ・ン、メタノール、エタノー
ル、プロパツール、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）等
の有機溶媒、酢Ｗｆｆ、過ｊ８素酸（ＰＣＡ）、ｌ−リ
クロロ酢酸（ＴＣＡ）等の酸などの蛋白沈澱剤を用いる
処理、硫酸アンモニウム、硫酸ナトリウム、リン１１ナ
トリウム等の塩析剤を用いる処理及び／又は透析膜、平
板膜、中空尭維膜等を用いる限外濾過処理等により行な
われる。これら各処理の操作及び条件は、通常の、この
種方法のそれらと同様のものとすればよい。

本発明方法により得られるＩＳＦは、原料血清中に存在
しているにもかかわらず、該血清自体では、可溶性因子
の産生亢進作用は認められず、これを上記の如く分画す
ることにより初めてその活性が得られるものであり、Ｉ
ｔｈ清を例えば硫酸アンモニウムを用いた塩析処理する
ことにより、５０％以上の両分、特に７０〜８０％で析
出する両分に高澹度で存在し、またＡＯＡ５４ウル１〜
ロゲル（ＬＫＢ、スエーデン）によるゲルＩＰ’Ａ法で
は、分子量１０万以上の間隙容積中に活性成分が存在す
る。

かくして得られるＩＳＦは、哺乳動物の面消由来であり
、ゲル濾過法による推定分子帯が１０万以上であり、極
めて強い免疫系刺激作用を有づる蛋白物質として特定さ
れる。またその作用活性は、正処理（グリシン−塩酸１
１暫液、１１　Ｈ＝２）及び熱処理（５６℃、３０分間
）に安定である。

該ＩＳＦは、毒性が極めて低く、＠薬品として有用であ
り、これを医薬として利用するに当っては、その有効岳
を含有する各種形態に調整され、該形態に応じた各種投
与経路により投与される。

その製剤形態としては通常液状溶液、Ｉｌ！！閂液、乳
岡液等を例示でき、これらは一般に静脈、皮下又は筋肉
内に投与される。これらはまた使用前に適当な担体の添
加によって液状になし得る乾燥品として提供することも
できる。該医薬としての投与ｍは、疾患の程度、患者の
年齢、性別等によって異なるが、通常、蛋白量として約
０．１〜１，００１１（１／　ｋｏ／日を１〜数回に分
けて投与するのが好ましい。

以下に実施例及び試験例を示し、本発明をより具体的に
述べるが、本発明はこれらに限定されるものではない。

実施例１ ５６℃で３０分間熱処理したヒトＡＢ型血清８７ｍＱに
、０．０１Ｍリン酸緩！！液３４８ｍを加え血清を５倍
に希釈する。次に硫酸アンモニウム粉末１２６．６＋＋
を撹拌下に徐々↓加え、５０％ｔ＠　ｆ［］　”／ｌ　
酸７　ンＴニー　ニウムｒＦＪ液トシ、１００００回転
、１０分間の遠心分離により沈澱物を除く。次に上澄液
を静かに撹拌しながら、５６．３（＋の＠酸アンモニウ
ム粉末をすこ−しづつ加え、遠心分鶴法により５０〜７
０％飽和硫酸アンモニウム沈澱物を除く。最終的に得ら
れた上澄液−にｉ酸アンモニウム粉末２９．３ｏを加え
、遠心分ｌｌ法（巳より７０〜８０９６飽和硫酸アンモ
ニウム沈澱物を回収し、次に生理食塩水溶液を加えて沈
澱物をｒＦＪ解し、低温室内で生理食塩水に対して３日
間透析する（Ｓｐｅｃｔｒａｐｏｒ　ｍｅｍｂｒａｎｅ
　ｔｕｂｉｎｏ、　ｐｏｒｅ３　：Ｓｐｅｃｔｒｕｍ　
Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｉ　ｎｄｕｓｔｒｌｅｓ　、Ｉ　ｎｃ
、　）。

透析内液を浩縮した後、この４−をウルトロゲルＡｃＡ
３４（、ＬＫＢ、スエーデン、カラムサイズ２．２Ｘ９
０ｃｍ、流出液０．５ＭｇＡ化ナトジナトリウム、０５
％ポリエチレングリコールを含む０、ＯＩＭ！Ｊンｍｆ
ｉ１１ｊｌ　（Ｄ　Ｈ−７，４＞、ｎ速１９ｍＱ／ｈｒ
）によるゲルクロマ１〜グラフイーを行ない、２諧ずつ
の各両分を得た。

実施例２ 実施例１においてヒトＡＢ型ＩｆｎＷＩｉに代え牛脂児
血１（ＩＲＶＩＮＥ　５ＣＩＥＮＴＩＦＩＣ社）を用い
、同様にして２Ｗｌ１２ずつの各両分を得る。

試藺例１　インターロイキン２活性試験ワトソン（Ｗａ
ｔｓｏｎ　）らの方法（Ｊ、Ｅｘｐ。

Ｍｅｄ、、１５０．８４９　（１９７９））　に従い測
定した。すなわち６〜７週齢のＢＡＬＢ／ｃ系マウス（
静岡系実験動物協同組合）よりｒＰ４ｆｆｌ！細胞を得
、２回ＭＥＭｒ洗浄後、１０％ＦＣ８を含むＲＰＭ１１
６４０ｊ８地ニテ、５ｘ１０５／ｍＧ１度の細胞液を調
製した。この胸飽細胞浮Ｍ波０．２ｒａ（１（Ｉ　Ｘ　
Ｉ　Ｃ）５個細胞）に上記実施例１及び２で得た各両分
の１０μＱを加え、平底マイクロプレー　ｌ−（Ｃｏｓ
ｔａｒ社）内で１１１　／噌のｃｏｎＡ（Ｓ　ｉｏｍａ
社）刺激下で７２時間、３７℃の炭酸ガスｊｒＳ養器内
で培養した。培養開始６６時時間和３日−チミジンを０
．５μＣｉ／ウェル加え、３Ｈ−チミジンのＤＮＡへの
取り込み丹をＴｍ胞増殖の！Ｕ標として、インターロイ
キン２活性を回定した。

結果を第１図に示す。第１図において横＠はフラクショ
ンＮｏ、を、ＩＩは３日−チミジン取り込みＭ’（ｃｐ
ｍ）をそれぞれ示す。また図中（１）はヒト血清両分を
、（２）は牛ｎ！１児血清両分を示す。

第１図には各フラクションの分子量の指標として同一ゲ
ルクロマ１ヘゲラフイーにおける標準物質（、ＢＳΔ；
ウシ自消アルブミン、分子量６７　Ｋ及びＯ■Δ；卵ア
′ルブミン、分子ＦＷ４３Ｋ）の溶出位置を矢印を付し
て示す。■０は間隙容積を示す。

第１図よりヒト自消分画（１）及び牛胎児１１ｈＷｇ分
画（２）中のＩＳＦはいずれもＡ’ｃ　Ａウルト○ゲル
の間隙容積中に存在することが判る。

試験例２　ヒト末梢血リンパ球によるＴＩ胞増殖因子（
Ｔｃｅｌｌ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆａｃｔｏｒ　：ＴＣＧＦ
＞産生に及ぼすＩＳＦの効果 開田らの方法（Ｐ　ｒｏｃ、Ｎ　ａｔｌ、Ａ　Ｏａｄ、
Ｓ　Ｏｉ、。

ＵＳＡ　、７８．７７１７　（１９８１））に従い測定
した。すなわち正常人末梢血よりフィコールパック（フ
ァルマシア　スエーデン）を使用した比重密度勾ｌ￥ｉ
！遠心法により、分離したリンパ球を１×１０’　ｌ／
ｍＱ（７）濃度５ＲＰＭＩ’ｌ　６４０＋１９６ＦＣ８
培地で調整し、その１瞠ずつを組織培養クラスターディ
ツシュ（Ｃｏｓｔａｒ社　（ＪＳＡ）内で０．１％ＰＨ
Δ−Ｐ（Ｄｉｆｃｏ社　ＵＳＡ＞ＥｒＵ実施例１で得た
各分画５０μＱを加えて炭酸ガス培養器内で２日間培養
した。遠心分離により培養上清を分取し、産生されたＴ
ＣＧＦ１度を、ヒトＴＣＧＦ要求輯胞株を用いて測定し
た。

結果を第２図に示づ。図において横軸はフラクションＮ
ｏ、を、縦軸はＴＣＧＦ活性（単位／ＦＱ）を示す。第
２図よりＩＳＦが共存しない場合（コン］−ロール）、
産生きれたＴＣＧＦＩＩＦＩ度は約１．８単位／ｍＱで
あるが、ＩＳＦが５％添加された場合には、ＴＣＧＦ活
性は約３０単位／―Ｑ（分画５５〜分両５９）と著明に
増加することが刊る。

試験例３　ヒ１〜末梢血リンパ球によるインターフェロ
ン産生に及ぼすＴＳＦの効宋 試験例２と同様にして得た正常人末梢血リンパ球を、Ｒ
ＰＭ　Ｉ　１　（３４０＋１９６ＦＣ８培地で′１×１
０８個／脱の細胞数に調整し、その１ｎずつを相転培養
用クラスターディツシュに分注し、ｏ、１ｏｇｐＨＡ−
ｐ及び実施例１で１ｑたＩＳＦ活性分ｉｉ！ｉ（分ｗＵ
５５〜５９　）　ヲｎ々（０８度で加え、３７℃の炭酸
ガス培養器内で４日間培養した。培養上清を遠心分離し
、産生きれたガンマ−型インターフェロン（γ−ＩＦＮ
）吊を、ヒ］−羊膜由来ＦＬＩＩＩＩＩＩとシンドビス
　ウィル’：１　（Ｓ　ｔｎｄｂｌｓＶｌｒｕｓ）を使
用した系において測定した（須鵡哲夫、大久保礼子、飯
塚薄厚、小林茂保、第４２回ウィルス抑制因子研究会、
１９８２年〕。

結果を第３図に示す。図においてＩ！ｔＩＰＩ！ｌはＩ
ＳＦ濃度（％）を、縦軸はＩＦＮ活性（単位／ｍＱ）を
示す。第３図よりＩＳＦが存在しない場合、Ｐ　ｌ−１
Δ−Ｐ刺激により産生されたγ−ＩＦＮＩｌは２０００
Ｑ’位／制であるのに対しＩＳＦが数バーセン１へｌｌ
’３地に加えられた場合、１ｏｏｏｏ単位／ｍ２以上の
γ−ＩＦＮが産生されることがＷｌ認される。この結果
よりＩＳＦはγ−ＩＦＮの産生を著しく亢進する活性を
有することが判明した。−試験例４　ヒトリンパ球によ
るリン、フォトキシン産生に対するＩＳＦの効果 アイフェル（Ｅ　１ｆＮ）らの方法（Ｃｅｌｌ。

Ｉｍｍｕｎｏｌ、、１５　．２０８　（１９７５）　）
に従い測定した。すなわち試験例２と同じ方法によりヒ
ト末梢血よりリンパ球を分離し、ＲＰＭ１１６４０十１
０％ヒトＡＢ型血清培地で１Ｘ１０”個／−の細胞数に
調整する。組織培養用クラスターディツシュ中に１割ず
つ上記リンパ球浮遊液をいれ、０　、１９６　Ｐ　ＨＡ
　−Ｐ又は０．０５％ＰＨ八−Ｐとへ々の濃度で実施例
１で得たＩＳＦ活性分画く分画５５〜５９）を加え、突
門ガス培養器内で３７℃で３日間培養し、遠心分画１に
より１７）格上清液を集め、産生されたリンフォトキシ
ン量をＬ９２９′細胞に対する細胞障害性活性により測
定する。

結果を第４図に示す。図においてｔＩｌｔＩｒｌＩＩは
ＩＳＦ濃度（９６）’を、縦軸はリンフ第１−キシン（
ＬＴ）活性（単位／ｍＱ）を示す。また図において〈１
）はＰＨＡ−Ｐの０．１％添加の場合を、（２）は０．
０５％添加の場合をそれぞれ示ｔ、、第４図よりＩＳＦ
が存在しない場合には、１０〜２０単位／ｍＱのＬＴが
産生されるにすぎないのに対し、ＩＳＦを培地中に加え
た場合には濃度依存的にＬ　Ｔ産生昂が増加し、その１
０９６添加では６０〜８０単位／ｍＱのＬＴが産生する
ことが認められる。′試験例５　ヒトリンパ球の分裂、
増殖に対するＩＳＦの効果□ スミス（Ｓ　１ｔｈ）らの方法（Ａ　ｄｖａｎｃｅｓ　
ｔ　ｎＩＩａｍｕｎｏｌｏａＬＶｏｌ、　３１．１１１
３７　（１９８１））に従い測定した。すなわち試験例
２と同じ方法により、ヒ１〜末梢血よりリンパ球を分離
し、ＲＰＭ１１６４０＋１０％ウシ胎児面消培地で１×
１０胎児面前培地胞数に調整覆る。組織培養用クラスタ
ーディツシュにリンパ球浮Ｍ”ａを０．１噌ずつ分注し
、更に０．０１％ＰＨ八−Ｐとへ種３度の実施例１で得
たＩＳＦ活性活性分力画５５〜５９）を加え、７１容Ｍ
Ｏ，２ｍＱにし、３７℃で３日間ｍｎａガス培養器内で
培養する。細胞を回収する６峙門前にそれぞれのウェル
に０．５μＣｉの３日−サイミジンを加え、ＤＮＡ両分
への取り込み岳を液体シンチレーションカウンターで測
定し、リンパ球の分裂、増殖の指標とする。

結果を第５図に示す。図において横軸はＩＳＦ扇度（％
）を、縦軸は３日−サイミジン取り込み曇（ｃｐｍ　ｘ
ｌ　０−　’　）を示す。尚、ＩＳＦＳ爪無添加群ント
ロールとしておいた。第５図よりＩＳＦを加えることに
より、用量依存的に３Ｈ−サイミジンのＤＮＡ画分への
取り込み舟が増列し、このことよりＩＳＦはマイ１−−
ジエンと共存する　。

ことによりその分裂作用を促進させることが判る。

試験例６　無血清培地でのインターロイキン２（ＴＣＧ
Ｆ活性）産生に間するＩＳＦ の効果 試験例２と同じ方法により、と１・末梢血よりリンパ球
を分画し、ハンクス液で３回洗浄後、１×１０６Ｒ／ｍ
Ｑ１７）ｌｌｌｌｌａｆｆｉｌｌ’ｔニＲＰＭ　Ｉ−１
６４０１３地で調整づる。これに０　、１９Ｇ　Ｐ　Ｈ
Ａ　−Ｐを加え、１１０培養プレートに２ｄずつ分注す
る。実施例１で１！！ＪたＩＳＦ活性分画（分画５５〜
５９）を、１．２５．２．５又は５９６となる梯に加え
、２４．４８又は９６時間培養し、その培養上清のＴＣ
ＧＦ活性を、前記試験例２と同様にしてＰ’ｌ定した。

結果を第６図に示す。図において、横軸は、ＩＳＦ濃度
（％、）を、縦軸はＴ　ＣＧ　、Ｆ活性（単位／ｍｔ？
）を示す。尚第６図には、ＩＳＦ無添加のコントロール
群及び１％ＦＯ８添加群における結果を併せて示した。

第６図より、本試験に係る如き無血清培地中では、ｊｆ
ｌ養時開時間わらず、インク−ロイキン２の産生はほと
んど認められず（コントロール群参照）、１％ＦＣ８添
加でもインターロイキン２の産生はほとｌυど亢進し得
ない（１９６ＦＣ３添加むＹ参照）のに対し、本発明に
より轡られるＩＳＦ両分を加えることにより、その添加
−に比例して、インターロイキン２の産生が、培養時間
の延長とともに顕著に亢進することが認められる。殊に
ＩＳＦ両分の５％添加では、４８蒔間及び９６Ｒ間培養
で、３０単位Ｊメ上のインターロイキン２の産生が認め
られることが判る。

【図面の簡単な説明】

第１図は、インターロイキン２活性試験の結果を示すグ
ラフであり、第２図乃至第６図は、本発明により得られ
るＩＳＦが、それぞれＴＣＧＦの産生、γ−ＩＦＮの産
生、ＬＴの産生、ヒトリンパ球の分裂、増殖及びインタ
ーロイキン２の産出を亢進させることを示すグラフであ
る。 （以　上） 代理人　弁理士　三　枝　門　二□′　゛・第　１　図 フラクショレＮ。 第　２　１７１ コシトｎ−ＩＬ　フラ２＞タレＮ。 第　３　１Ｔｊｌ ＩｓＦ　ｍ　度　（ｊし≦ｒ） 第４ド１ 、ＩｓＦう虐ル（×） 第５図 １斗＋１−Ｌ　Ｉ　Ｓ　Ｆ濃Ｌ（刺 第６図 コートロー１シ１％′ＦＣ８１２５２，５５ＩｓＦ傭度
（Ｋ）

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ■　哺乳動物自消より、分子県が１０万以上であり、免
   疫反応の発現に関与する可溶性因子の産生を亢進する作
   用を有する蛋白物質を分画採取することを特徴とする免
   疫系刺激物質の製造法。