JPS60231168A - ヒトα２―プラスミンインヒビターに対するモノクローナル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット - Google Patents
ヒトα２―プラスミンインヒビターに対するモノクローナル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキットInfo
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- JPS60231168A JPS60231168A JP8610184A JP8610184A JPS60231168A JP S60231168 A JPS60231168 A JP S60231168A JP 8610184 A JP8610184 A JP 8610184A JP 8610184 A JP8610184 A JP 8610184A JP S60231168 A JPS60231168 A JP S60231168A
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- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
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- C07K14/8107—Endopeptidase (E.C. 3.4.21-99) inhibitors
- C07K14/811—Serine protease (E.C. 3.4.21) inhibitors
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/38—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against protease inhibitors of peptide structure
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
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- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
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- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
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- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
ａ、産業上の利用分野
本発明は、溶液状態にあるヒトα、−プラスミンインヒ
ビター（ａ、 −ｐｌａｓｍｉｎ １ｎｈｉｂｉｔｏｒ
ｇａ、−ａｎｔｉｐｌａｓｍｉｎ ） を免疫学的に
測定する試薬及びそのキットに関する。更に詳しくは、
ヒトαオープラスミンインヒビタ−のそれぞれ異なる抗
原決定部位を特異的′に認識して結合する２８Ｍの七ツ
クｐ−ナル抗体を用い、そのうちの１種類はヒトａ２−
プラスミンインヒビタ−におけるプラスミンの繊維素溶
解作用の阻止部位を特異的に認識して結合し得るモノク
ローナル抗体を用いるサンドインチ法によるヒトαオー
プラスミンインヒビタ−の免疫学的測定試薬及びそのキ
ットに関する。
ビター（ａ、 −ｐｌａｓｍｉｎ １ｎｈｉｂｉｔｏｒ
ｇａ、−ａｎｔｉｐｌａｓｍｉｎ ） を免疫学的に
測定する試薬及びそのキットに関する。更に詳しくは、
ヒトαオープラスミンインヒビタ−のそれぞれ異なる抗
原決定部位を特異的′に認識して結合する２８Ｍの七ツ
クｐ−ナル抗体を用い、そのうちの１種類はヒトａ２−
プラスミンインヒビタ−におけるプラスミンの繊維素溶
解作用の阻止部位を特異的に認識して結合し得るモノク
ローナル抗体を用いるサンドインチ法によるヒトαオー
プラスミンインヒビタ−の免疫学的測定試薬及びそのキ
ットに関する。
ｂ、従来技術
ヒトのα、−プラスミンインヒビタ−は、青水と諸井に
よって最初に単離・精製され、繊維素溶解酵素のプラス
ミン（ｐｌａｓｍｉｎ ）のエステラーゼ活性を瞬間的
に阻筈する強力なプラスミンインヒビタ−であり、１１
．７％の糖を含む分子量約６７，０００の１本鎖の糖蛋
白質であることが知られている（ Ｍｏｒｏｉ ＆ Ａ
ｏｋｉ ； ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏ
ｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ 、 ２５１ 、５９
５６−５９６５（１９７６）参照〕。
よって最初に単離・精製され、繊維素溶解酵素のプラス
ミン（ｐｌａｓｍｉｎ ）のエステラーゼ活性を瞬間的
に阻筈する強力なプラスミンインヒビタ−であり、１１
．７％の糖を含む分子量約６７，０００の１本鎖の糖蛋
白質であることが知られている（ Ｍｏｒｏｉ ＆ Ａ
ｏｋｉ ； ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏ
ｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ 、 ２５１ 、５９
５６−５９６５（１９７６）参照〕。
一方ヒトのα、−プラスミンインヒビタ−には３１１類
の活性部位があることが知られている。第１はプラスミ
ンの線維素溶屏作用を阻止する部位〔以下これを１リア
クテイブサイド”ということがある） ＣＢ、Ｗｉｍａ
ｎ ＆ Ｄ、Ｃｏ１１ｅｎ；Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＋２
５４ 、、９２９１〜９２９７（１９７９）参照〕であ
り、第２はカルボキシル基末端側のプラスミン結合部位
（Ｂ、Ｗｉｍａｎ ＆ Ｄ、Ｃｏ１１ｅｒ、 Ｅｕｒｏ
ｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙｔ ８４ 、５７３−５７８（１９７８）参照〕で
あり、第３はアミノ基末端のフイズリン結合部位である
（ Ｙ、５ａｋａｔａ＋ｅｔ ａｌ、＋ Ｔｈｒｏｒｎ
ｂｏｇｉｓ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、 １６ ２７９〜２８
２（１９７９）参照〕。
の活性部位があることが知られている。第１はプラスミ
ンの線維素溶屏作用を阻止する部位〔以下これを１リア
クテイブサイド”ということがある） ＣＢ、Ｗｉｍａ
ｎ ＆ Ｄ、Ｃｏ１１ｅｎ；Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＋２
５４ 、、９２９１〜９２９７（１９７９）参照〕であ
り、第２はカルボキシル基末端側のプラスミン結合部位
（Ｂ、Ｗｉｍａｎ ＆ Ｄ、Ｃｏ１１ｅｒ、 Ｅｕｒｏ
ｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙｔ ８４ 、５７３−５７８（１９７８）参照〕で
あり、第３はアミノ基末端のフイズリン結合部位である
（ Ｙ、５ａｋａｔａ＋ｅｔ ａｌ、＋ Ｔｈｒｏｒｎ
ｂｏｇｉｓ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、 １６ ２７９〜２８
２（１９７９）参照〕。
一方ヒトα、−プラスミンインヒビタ−は、臨床医学的
忙みて、肝実質細胞障害のときにその血中レベルが低下
する現象が知られており、％に非代償期の肝硬変、激症
肝炎などの時にはその血中レベルは非常Ｋｉｔ著に低下
することが報告されている〔例えばＮ、Ａｏｋｉ ＆Ｔ
、Ｙａｍａｎａｋａ＋ Ｃ１１ｎ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａ
ｃｔａ ８４ 、９９−１０５（１９７８）参照〕。
忙みて、肝実質細胞障害のときにその血中レベルが低下
する現象が知られており、％に非代償期の肝硬変、激症
肝炎などの時にはその血中レベルは非常Ｋｉｔ著に低下
することが報告されている〔例えばＮ、Ａｏｋｉ ＆Ｔ
、Ｙａｍａｎａｋａ＋ Ｃ１１ｎ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａ
ｃｔａ ８４ 、９９−１０５（１９７８）参照〕。
また最近、ヒトα２−プラスミンインヒビタ−の理学的
、生物学性質の解明が進み、ヒトαオープラスミンイン
ヒビタ−は線維素溶解機構に対してＩＮ異的に制御と調
節を行なっており、その機構に対して重要な作用をして
いることが知られている〔例えば青水延雄、Ｗ学のあゆ
み、１２６，１４７−１５５（１９８３）参照〕。
、生物学性質の解明が進み、ヒトαオープラスミンイン
ヒビタ−は線維素溶解機構に対してＩＮ異的に制御と調
節を行なっており、その機構に対して重要な作用をして
いることが知られている〔例えば青水延雄、Ｗ学のあゆ
み、１２６，１４７−１５５（１９８３）参照〕。
従って、血液中のヒトαオープラスミンインヒビタ−の
量を正確且つ簡便Ｋ（ｌｌ！Ｉ定することができれば、
種々の病気に対しその予防１診断に極めて役立つことで
ある。
量を正確且つ簡便Ｋ（ｌｌ！Ｉ定することができれば、
種々の病気に対しその予防１診断に極めて役立つことで
ある。
従来知られたヒトαオープラスミンインヒビタ−の測定
方法として第１の方法は、ヒトα。
方法として第１の方法は、ヒトα。
−プラスミンインヒビタ−に対する抗血清を用いる免疫
拡散法であり、第２の方法は検体資料に一定過剰のプラ
スミンを加えヒトａ、 −プラスミンインヒビタ−と結
合していない残存プラスミン活性を測定する方法である
。
拡散法であり、第２の方法は検体資料に一定過剰のプラ
スミンを加えヒトａ、 −プラスミンインヒビタ−と結
合していない残存プラスミン活性を測定する方法である
。
しかし、前者の方法は、動物抗血清を用いるために一定
の活性を有する抗血清を安定して得ることが極めて困難
であり標準物質によって活性を補正して使用しなければ
ならないという煩給さがあった。また免疫拡散に長時間
を要するという欠点があった。さらに彼者は、加えたプ
ラスミンの残存量を調べることによりヒト央−プラスミ
ンインヒビターの量を間接的に測定する方法であり、検
体資料中に存在する稲々のプラスミン活性阻害物質の影
替を受け易く、ヒトαオープラスミンインヒビタ−の量
を直接測定していないから誤差を避けるのは不可能と云
ってよく、またこの方法では使用するプラスミンの純度
や安定性に屯注意を払う必要があった。
の活性を有する抗血清を安定して得ることが極めて困難
であり標準物質によって活性を補正して使用しなければ
ならないという煩給さがあった。また免疫拡散に長時間
を要するという欠点があった。さらに彼者は、加えたプ
ラスミンの残存量を調べることによりヒト央−プラスミ
ンインヒビターの量を間接的に測定する方法であり、検
体資料中に存在する稲々のプラスミン活性阻害物質の影
替を受け易く、ヒトαオープラスミンインヒビタ−の量
を直接測定していないから誤差を避けるのは不可能と云
ってよく、またこの方法では使用するプラスミンの純度
や安定性に屯注意を払う必要があった。
Ｃ０発明の構成
そこで本発明者らは、ヒトα、−プラスミンインヒビタ
ーに対するモノクローナル抗体について研究を重ねたと
ころ、ヒトαオープラスミンインヒビタ−におけるプラ
スミンの線維系溶解作用阻止部位を特異的に認識し、ヒ
トαオープラスミンインヒビタ−の線維銅溶解阻止作用
を抑制する活性を有する七ツクｐ−ナル抗体を見出し、
またこの七ツクｐ−ナル抗体を産生ずるノ・イブリドー
マ細胞を創作し得、既に提案した。
ーに対するモノクローナル抗体について研究を重ねたと
ころ、ヒトαオープラスミンインヒビタ−におけるプラ
スミンの線維系溶解作用阻止部位を特異的に認識し、ヒ
トαオープラスミンインヒビタ−の線維銅溶解阻止作用
を抑制する活性を有する七ツクｐ−ナル抗体を見出し、
またこの七ツクｐ−ナル抗体を産生ずるノ・イブリドー
マ細胞を創作し得、既に提案した。
本発明者らは、か〜る新しく見出した前記モノクローナ
ル抗体の特異的な作用を利用すれば、溶液状態にあるヒ
トα２−プラスミンインヒビタ−の量を直接に且つ正確
に測定し得ることを見出し本発明に到達した。
ル抗体の特異的な作用を利用すれば、溶液状態にあるヒ
トα２−プラスミンインヒビタ−の量を直接に且つ正確
に測定し得ることを見出し本発明に到達した。
すなわち、本発明は、サンドインチ法による免疫学的測
定試薬にお（・て、不溶性担体に結合した抗体と標識抗
体とは、ヒトαオープラスミンインヒビタ−のそれぞれ
異なる抗原決定部位を特異的に認識するものであり且つ
そのいずれか一方の抗体はヒトα２−プラスミンインヒ
ビタ−におけるリアクティブサイトを特異的に％！！識
して結合し得るモノクローナル抗体であることを特徴と
するヒトαオープラスミンインヒビタ−に対する千／り
ｐ−ナル抗体を用いたヒトαオープラスミンインヒビタ
−の免疫学的測定試薬であり、またそのキットである。
定試薬にお（・て、不溶性担体に結合した抗体と標識抗
体とは、ヒトαオープラスミンインヒビタ−のそれぞれ
異なる抗原決定部位を特異的に認識するものであり且つ
そのいずれか一方の抗体はヒトα２−プラスミンインヒ
ビタ−におけるリアクティブサイトを特異的に％！！識
して結合し得るモノクローナル抗体であることを特徴と
するヒトαオープラスミンインヒビタ−に対する千／り
ｐ−ナル抗体を用いたヒトαオープラスミンインヒビタ
−の免疫学的測定試薬であり、またそのキットである。
一般に抗原の２つの異なった位置に結合した抗体を作っ
て抗原の有無又はその量を測定する方法は、サンドイン
チ法と呼ばれ、例えばワイド（Ｗｉｄｅ）の［放射線免
疫検定法（Ｒａｄｉｏｉｍｕｎｏａｓａａｙ Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ） Ｊ １９９−２０６（１９７０）に記載され
ている。
て抗原の有無又はその量を測定する方法は、サンドイン
チ法と呼ばれ、例えばワイド（Ｗｉｄｅ）の［放射線免
疫検定法（Ｒａｄｉｏｉｍｕｎｏａｓａａｙ Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ） Ｊ １９９−２０６（１９７０）に記載され
ている。
か〜る本発明の免疫学的測定試薬は、使用する２種類の
モノクローナル抗体として、ヒトαオープラスミンイン
ヒビタ−のそれぞれ異なる抗原決定部位を認識するもの
を使用し、特にその１種はヒトαオープラスミンインヒ
ビタ−におけるリアクティブサイトを特異的に認識し得
る七ツクｐ−ナル抗体を使用する。
モノクローナル抗体として、ヒトαオープラスミンイン
ヒビタ−のそれぞれ異なる抗原決定部位を認識するもの
を使用し、特にその１種はヒトαオープラスミンインヒ
ビタ−におけるリアクティブサイトを特異的に認識し得
る七ツクｐ−ナル抗体を使用する。
か（して本発明によれば、試薬の品質差がなく、恒常的
に精度よく溶液状態の（例えば血漿中の）ヒトαオープ
ラスミンインヒビタ−を測定することが可能となる。ま
た直接ヒト、α。
に精度よく溶液状態の（例えば血漿中の）ヒトαオープ
ラスミンインヒビタ−を測定することが可能となる。ま
た直接ヒト、α。
−プラスミンインヒビタ−を測定するので他の挾雑物の
影響は全く受けず正確に且つ短時間に測定することがで
きる。従って、本発明によれば、従来には存在しなかっ
たヒト−−プラスミンインヒビタ−を正確且つ迅速に測
定し得る試薬及びそのキットが提供される。
影響は全く受けず正確に且つ短時間に測定することがで
きる。従って、本発明によれば、従来には存在しなかっ
たヒト−−プラスミンインヒビタ−を正確且つ迅速に測
定し得る試薬及びそのキットが提供される。
次に本発明による測定試薬及びヒトα２−プラスミンイ
ンヒビタ−の含有量の測定方法を具体的に説明する。
ンヒビタ−の含有量の測定方法を具体的に説明する。
ヒトαオープラスミンインヒビタ−に対する七ツクｐ−
ナル抗体（第１抗体）を適当な不溶性担体（例えばプラ
スチック容器）に固定化する（以下これを６固定北枕体
”という）。
ナル抗体（第１抗体）を適当な不溶性担体（例えばプラ
スチック容器）に固定化する（以下これを６固定北枕体
”という）。
ついで不溶性担体と測定しようとする試薬又は検体資料
との非特異的結合を避ゆるために；姦嘉すＣ酬暫「＠１
シぼ小面櫓フルブＦソ）弔木溶性担体の表面を被覆する
。
との非特異的結合を避ゆるために；姦嘉すＣ酬暫「＠１
シぼ小面櫓フルブＦソ）弔木溶性担体の表面を被覆する
。
このようにして得られた第１抗体が固定化された不溶性
担体な検体資料と一定時間及び温度で接触させ反応させ
る。この間に固定化抗体ＩＲＩ抗体）と検体資料中のヒ
トαオープラスミンインヒビタ−が結合する１０、つい
で適当な洗浄液で洗った後、適当な標識物質で標識した
ヒトα２−プラスミンインヒビタ−に対するモノクロー
ナル抗体（第２抗体）の溶液（例えば水溶液）を、不溶
性担体における固定化抗体に結合したヒトαオープラス
ミンインヒビタ−と一定時間及び温度で接触させ第２抗
体と反応させる。これを適当な洗浄液で洗い、次いで不
溶性担体上に存在する第２抗体に標識された標識物質の
倉を測定する。かくしてその値から検体資料中のα、−
プラスミンインヒビタ−の量を算出することができる。
担体な検体資料と一定時間及び温度で接触させ反応させ
る。この間に固定化抗体ＩＲＩ抗体）と検体資料中のヒ
トαオープラスミンインヒビタ−が結合する１０、つい
で適当な洗浄液で洗った後、適当な標識物質で標識した
ヒトα２−プラスミンインヒビタ−に対するモノクロー
ナル抗体（第２抗体）の溶液（例えば水溶液）を、不溶
性担体における固定化抗体に結合したヒトαオープラス
ミンインヒビタ−と一定時間及び温度で接触させ第２抗
体と反応させる。これを適当な洗浄液で洗い、次いで不
溶性担体上に存在する第２抗体に標識された標識物質の
倉を測定する。かくしてその値から検体資料中のα、−
プラスミンインヒビタ−の量を算出することができる。
かくして本発明の測定試薬は、第１抗体が不溶性担体忙
結合した固定化抗体と標識化された第２抗体とより王と
して構成される。この試薬を能率よく且つ簡像に利用す
るために、これら抗体以外に種々の補助剤を含めてキッ
トを形成することができる。か〜る補助剤としては、例
えば固体状の試薬を溶解させるための溶解剤、不溶化担
体を洗浄するために使用される洗浄剤、抗体の標識物質
として酵素を使用した場合、酵素活性を測定するための
基質、その反応停止剤などの免疫学的測定試薬のキット
として通常使用されるものが挙げられる。
結合した固定化抗体と標識化された第２抗体とより王と
して構成される。この試薬を能率よく且つ簡像に利用す
るために、これら抗体以外に種々の補助剤を含めてキッ
トを形成することができる。か〜る補助剤としては、例
えば固体状の試薬を溶解させるための溶解剤、不溶化担
体を洗浄するために使用される洗浄剤、抗体の標識物質
として酵素を使用した場合、酵素活性を測定するための
基質、その反応停止剤などの免疫学的測定試薬のキット
として通常使用されるものが挙げられる。
本発明の測定試薬に使用される不溶性担体としては、例
えばポリスチレン、ポリエチレン、ポリプルピレンポリ
エステル、ポリアクリルニトリル、弗素樹脂、架橋デキ
ストラン。
えばポリスチレン、ポリエチレン、ポリプルピレンポリ
エステル、ポリアクリルニトリル、弗素樹脂、架橋デキ
ストラン。
ポリサッカライドなどの高分子、その他紙。
ガラス、金属、アガロース及びこれらの組合せなどを例
示することができる。
示することができる。
また不溶性担体の形状としては、例えばトレイ状１球状
、繊維状、棒状、盤状、容器状。
、繊維状、棒状、盤状、容器状。
セル、試験管などの種々の形状であることができる。
また標識物質としては放射性物質、酵素又は螢光物質を
使用するのが有利である。放射性物物質としては１２５
工、 １３１■、 １４ｃ 、 ３Ｈなどを、酵素とし
てはアルカリ性フォスファターゼ、パーオキシターゼ、
β−Ｄ−ガラクトシターゼなと、また螢光物質としては
フルオレツセインインチオシアネート、テトラメチルｐ
−ダミンイソチオシアネートなどを使用することができ
るが、これらは例示したものに限らず、免疫学的測定方
法に使用されているものであれば、他のものでも使用で
きる。
使用するのが有利である。放射性物物質としては１２５
工、 １３１■、 １４ｃ 、 ３Ｈなどを、酵素とし
てはアルカリ性フォスファターゼ、パーオキシターゼ、
β−Ｄ−ガラクトシターゼなと、また螢光物質としては
フルオレツセインインチオシアネート、テトラメチルｐ
−ダミンイソチオシアネートなどを使用することができ
るが、これらは例示したものに限らず、免疫学的測定方
法に使用されているものであれば、他のものでも使用で
きる。
前述したように１本発明の測定試薬及びキラ）Ｋ使用さ
れる抗体の１つである１α、−プラスミンインヒビタ−
におけるプラスミンの線維素溶解作用の阻止部位を特異
的忙認識して結合し得るモノクローナル抗体”は、本発
明者らによって初めて見出され、先に特許出願された（
昭和５９年４月１７日出ＪＩ：発明の名称“モノクロー
ナル抗体、ハイプリドーマ細胞及び七ツクｐ−カル抗体
の製造方法″λ本発明の前記モノクローナル抗体及びそ
の製造方法については前記特許出願明細書に詳細に説明
されているが、以下にその内容を簡単に説明する。
れる抗体の１つである１α、−プラスミンインヒビタ−
におけるプラスミンの線維素溶解作用の阻止部位を特異
的忙認識して結合し得るモノクローナル抗体”は、本発
明者らによって初めて見出され、先に特許出願された（
昭和５９年４月１７日出ＪＩ：発明の名称“モノクロー
ナル抗体、ハイプリドーマ細胞及び七ツクｐ−カル抗体
の製造方法″λ本発明の前記モノクローナル抗体及びそ
の製造方法については前記特許出願明細書に詳細に説明
されているが、以下にその内容を簡単に説明する。
抗原に用いるヒト４−プラスミンイン
ヒビタ−は、前記青水と諸井の方法によりヒト血漿中よ
り単離精製された。
り単離精製された。
雄Ｂａ１ｂ／ｃマウスを用いるが、他の系（ｓｔｒａｉ
ｎｓ）のマウスを使用することもできる。その際、免疫
計画及びヒトαオープラスミンインヒビタ−の濃度は十
分な量の抗原刺激を受けたリンパ球が形成されるよう選
ばれるべきである。例えばマウスに少量のヒトαヨープ
ラスミンインヒビさらに数回静脈に投与した。最終免疫
の数日後に融合の為に膵臓細胞を取り出す。
ｎｓ）のマウスを使用することもできる。その際、免疫
計画及びヒトαオープラスミンインヒビタ−の濃度は十
分な量の抗原刺激を受けたリンパ球が形成されるよう選
ばれるべきである。例えばマウスに少量のヒトαヨープ
ラスミンインヒビさらに数回静脈に投与した。最終免疫
の数日後に融合の為に膵臓細胞を取り出す。
Ｃ１細胞融合
膵臓を無菌的に取り出し、それから単
細胞懸濁液を調製する。それらの膵臓細胞を適当なライ
ンからのマウス骨髄腫細胞と適当な融合促進剤の使用に
より細胞融合させる。膵臓細胞対骨髄腫細胞の好ましい
比率は約２０＝１〜約２：１の範囲である。約１０’個
の膵臓細胞について０．５〜１．５１Ｅｊの融合媒体の
使用が適当である。
ンからのマウス骨髄腫細胞と適当な融合促進剤の使用に
より細胞融合させる。膵臓細胞対骨髄腫細胞の好ましい
比率は約２０＝１〜約２：１の範囲である。約１０’個
の膵臓細胞について０．５〜１．５１Ｅｊの融合媒体の
使用が適当である。
細胞融合に用いる骨髄匙細胞は多く知
られているが、本発明では、Ｐ３−Ｘ６３− Ａｇ ８
− ［Ｊ １細胞（以下Ｐ３−Ｕｌと略記する） （Ｙ
ｅｌｔｏｎ＋ Ｄ、Ｅ ｅｔ ａｌ、＋ Ｃｕｒｒｅｎ
ｔＴｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａ
ｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ８１．１（１９７Ｂ）参照
〕を用いた。これは８−７ザグアニン耐性の細胞ライン
であれ 塾番し謳永→ソにソー／／７−ｖキ１ポリポシ
ルトランス７エラーゼ （ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ−ｇｕａｎｉｎｅ ｐｈｏ
ｓｐｈｏｒｉｂｏａｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）が欠
失しており、それゆえにＨＡＴ（ヒボキサンチン、７ミ
ノブテリン、チミジン）培地中では生存しない。
− ［Ｊ １細胞（以下Ｐ３−Ｕｌと略記する） （Ｙ
ｅｌｔｏｎ＋ Ｄ、Ｅ ｅｔ ａｌ、＋ Ｃｕｒｒｅｎ
ｔＴｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａ
ｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ８１．１（１９７Ｂ）参照
〕を用いた。これは８−７ザグアニン耐性の細胞ライン
であれ 塾番し謳永→ソにソー／／７−ｖキ１ポリポシ
ルトランス７エラーゼ （ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ−ｇｕａｎｉｎｅ ｐｈｏ
ｓｐｈｏｒｉｂｏａｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）が欠
失しており、それゆえにＨＡＴ（ヒボキサンチン、７ミ
ノブテリン、チミジン）培地中では生存しない。
また、この細胞ラインはそれ自体抗体を分泌しない、い
わゆる非分泌型である。
わゆる非分泌型である。
好ましい融合促進剤としては、例えば
平均分子量が１０００〜４０００のポリエチレングリコ
ールを有利に使用できるが、この分野で知られている他
の融合促進剤を使用することもできる。
ールを有利に使用できるが、この分野で知られている他
の融合促進剤を使用することもできる。
Ｄ、融合した細胞の選択；
別の容器内（例えばマイクルタイター
プレート）で未融合の膵臓細胞、未融合の骨髄腫細胞お
よび融合した細胞の混合物を、未融合の骨髄腫細胞を支
持しない選択培地で希釈し、未融合の細胞を死滅させる
のに十分な時間（約１週間）培養する。培地は薬物抵抗
性（例えば８−アザグアニン抵抗性）で未融合の骨髄腫
細胞を支持しないもの（例えば前記ＨＡＴ培地）が使用
される。この選択培地中では未融合の骨髄腫細胞は死滅
する。また未融合の肺臓細胞は非腫瘍性細胞なのである
一定期間後（約１週間後）死滅する。
よび融合した細胞の混合物を、未融合の骨髄腫細胞を支
持しない選択培地で希釈し、未融合の細胞を死滅させる
のに十分な時間（約１週間）培養する。培地は薬物抵抗
性（例えば８−アザグアニン抵抗性）で未融合の骨髄腫
細胞を支持しないもの（例えば前記ＨＡＴ培地）が使用
される。この選択培地中では未融合の骨髄腫細胞は死滅
する。また未融合の肺臓細胞は非腫瘍性細胞なのである
一定期間後（約１週間後）死滅する。
これらに対して融合した細胞は骨髄腫の親細胞の腫瘍性
と親牌臓細胞の性質をあわせ持つために選択培地中で生
存できる。
と親牌臓細胞の性質をあわせ持つために選択培地中で生
存できる。
かくしてハイシリドーマが細胞が検出
された後、その培養上清を採取し、ヒトα、−フラスミ
ンインヒビターに対する抗体について酵素免疫定量法（
ＥｎｚｙｍｅＬｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏ ５ｏｒｂｅ
ｎｔ Ａｓ１ａＰ）Ｋよりスクリーニングする。
ンインヒビターに対する抗体について酵素免疫定量法（
ＥｎｚｙｍｅＬｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏ ５ｏｒｂｅ
ｎｔ Ａｓ１ａＰ）Ｋよりスクリーニングする。
ヒトαオープラスミンインヒビタ−に対する抗体を産生
じているハイプリドーマ細胞を、無血清培地で培養して
得られた抗体を含んだ培養上澄液を濃縮し、ヒト、 α
、−プラスミンインヒビタ−と共に一定時間インキユベ
ートした。さらにこのα。
じているハイプリドーマ細胞を、無血清培地で培養して
得られた抗体を含んだ培養上澄液を濃縮し、ヒト、 α
、−プラスミンインヒビタ−と共に一定時間インキユベ
ートした。さらにこのα。
−プラスミンインヒビターに対する抗体の混合液にプラ
スミンを加え、フィブリンプレート上にのせ、フィブリ
ン溶解面積を測定した。このようにして、α、−プラス
ミンインヒビタ−に対る活性を持つ抗体を産生ずるハイ
プリドーマ細胞を選択する。
スミンを加え、フィブリンプレート上にのせ、フィブリ
ン溶解面積を測定した。このようにして、α、−プラス
ミンインヒビタ−に対る活性を持つ抗体を産生ずるハイ
プリドーマ細胞を選択する。
目的の抗体を産生ずるハイプリドーマ
細胞を適邑な方法（例えば限定希釈法）でクローン化す
ると、抗体は２つの異なった方法で産生される。その第
１の方法によればハイプリドーマ細胞を一定時間適当な
培地で培養することによりその培養上清から、そのハイ
プリドーマ細胞の産生ずる化ツクローナル抗体を得るこ
とができる。第２の方法によればハイプリドーマ細胞は
同質遺伝子又は半同質遺伝子を持つマウスの腹腔に注射
することができる。一定時間後の宿主動物の血液中及び
複水中より、そのハイプリドーマ細胞の産出するモノク
ローナル抗体を得ることができる。
ると、抗体は２つの異なった方法で産生される。その第
１の方法によればハイプリドーマ細胞を一定時間適当な
培地で培養することによりその培養上清から、そのハイ
プリドーマ細胞の産生ずる化ツクローナル抗体を得るこ
とができる。第２の方法によればハイプリドーマ細胞は
同質遺伝子又は半同質遺伝子を持つマウスの腹腔に注射
することができる。一定時間後の宿主動物の血液中及び
複水中より、そのハイプリドーマ細胞の産出するモノク
ローナル抗体を得ることができる。
上記の如くして得られた（ツクｐ−ナル抗体は、ヒトα
オープラスミンインヒビタ−におけるプラスミンの線維
素溶解作用の阻止部位を特異的に認識し、その部位に選
択的に結合する。
オープラスミンインヒビタ−におけるプラスミンの線維
素溶解作用の阻止部位を特異的に認識し、その部位に選
択的に結合する。
本発明の測定試薬においては、が瓦るモノクローナル抗
体を第１抗体或いは第２抗体のいずれかに使用する。す
なわち、前記モノクローナル抗体は、不溶性担体に結合
させて固定化抗体として使用することもできるし、また
標識物質を付けて標識抗体としても使用することもでき
る。
体を第１抗体或いは第２抗体のいずれかに使用する。す
なわち、前記モノクローナル抗体は、不溶性担体に結合
させて固定化抗体として使用することもできるし、また
標識物質を付けて標識抗体としても使用することもでき
る。
前記モノクローナル抗体と共に使用される他の抗体とし
ては、偽−プラスミンインヒビタ−における綜維素浴解
作用阻止部位以外の部位を認識し、結合し得るものであ
ればよい、。
ては、偽−プラスミンインヒビタ−における綜維素浴解
作用阻止部位以外の部位を認識し、結合し得るものであ
ればよい、。
以上本発明によれば、ヒトαツープラスミンインヒビタ
−を含む検体（例えばヒト血漿）−中のそのインヒビタ
ーの量を正確に且つ容易に測定することが可能である。
−を含む検体（例えばヒト血漿）−中のそのインヒビタ
ーの量を正確に且つ容易に測定することが可能である。
以下実施例を掲げて本発明を詳述する。
実施例１
本実施例で使用した第１及び第２抗体は、本発明者らが
先に出願した明細書（昭和５９年４月１７日付出願；発
明の名称６モノクローナル抗体、）・イブリドーマ細胞
及びモノクローナル抗体の製造方法″）に記載された方
法によって得られた下記のものを使用した。
先に出願した明細書（昭和５９年４月１７日付出願；発
明の名称６モノクローナル抗体、）・イブリドーマ細胞
及びモノクローナル抗体の製造方法″）に記載された方
法によって得られた下記のものを使用した。
第１抗体
前記出Ｉｌ明細書の実施例３において得られた抗体名”
ＩＤｌ０ＣＩ”を使用し、これを下記の如く不溶性担体
（マククータイタープレート）Ｋ固定化させて用いた。
ＩＤｌ０ＣＩ”を使用し、これを下記の如く不溶性担体
（マククータイタープレート）Ｋ固定化させて用いた。
この抗体は一−プラスミンインヒビターにおけるプラス
ミンの線維素溶解作用の阻止部位（リアクティブサイト
）を特異的に認識し得るモノクローナル抗体である。
ミンの線維素溶解作用の阻止部位（リアクティブサイト
）を特異的に認識し得るモノクローナル抗体である。
第２抗体
前記出願明細書の実施例３において得られた抗体名″’
ＩＢＩＯＣＩＩ″を使用した。この抗体は一−プラスミ
ンインヒビター忙おけるリアクティブサイト以外の部位
を特異的に認識する七ツクｐ−ナル抗体であり、アルカ
リ性フォスファターゼで標識化して使用した。
ＩＢＩＯＣＩＩ″を使用した。この抗体は一−プラスミ
ンインヒビター忙おけるリアクティブサイト以外の部位
を特異的に認識する七ツクｐ−ナル抗体であり、アルカ
リ性フォスファターゼで標識化して使用した。
濃度２０μｇ／ｌのヒトαツープラスミンインヒビタ−
におけるリアクティブサイトを特異的に認識するモノク
ー−ナル抗体（ＩＤ１ｏｃ１）をマイクロタイタープレ
ート上に４℃で一晩放置し固定化した。これに１−牛血
清アルブミンを含む緩衝液（１５ｍＭ ＮａｔＣＯａ
＋ ３５ ｍＭＮ＆ＨＣＯ＠ ＋ ３ ｍ Ｍ ＮａＮ
ａ ）を加え室温で４時間放置した後、ｌチ牛血清アル
ズミンを含む洗浄液（２０ｍＭリン酸緩衝液＋ ０．１
３５ Ｍ ＮａＣＡｆ ｔ２ ｍＭ ＮａＮｇ ＋ ０
．０５５Ｇ Ｔｖｅｅｎ ２０ ）で５回洗浄した。次
に希釈用溶液（２０ｍＭ’！Ｊン酸緩衝液、 ０．１３
５ Ｍ ＮａＣＡｆ ）で種々の濃度となるよ５に希釈
したａ、−プラスミンインヒビタ−を加え、室温で４時
間放置した。
におけるリアクティブサイトを特異的に認識するモノク
ー−ナル抗体（ＩＤ１ｏｃ１）をマイクロタイタープレ
ート上に４℃で一晩放置し固定化した。これに１−牛血
清アルブミンを含む緩衝液（１５ｍＭ ＮａｔＣＯａ
＋ ３５ ｍＭＮ＆ＨＣＯ＠ ＋ ３ ｍ Ｍ ＮａＮ
ａ ）を加え室温で４時間放置した後、ｌチ牛血清アル
ズミンを含む洗浄液（２０ｍＭリン酸緩衝液＋ ０．１
３５ Ｍ ＮａＣＡｆ ｔ２ ｍＭ ＮａＮｇ ＋ ０
．０５５Ｇ Ｔｖｅｅｎ ２０ ）で５回洗浄した。次
に希釈用溶液（２０ｍＭ’！Ｊン酸緩衝液、 ０．１３
５ Ｍ ＮａＣＡｆ ）で種々の濃度となるよ５に希釈
したａ、−プラスミンインヒビタ−を加え、室温で４時
間放置した。
その後前Ｉ洗浄液で５回洗浄し、さらにアルカリ性ファ
スファターゼで標識したα、−プラスミンインヒビタ−
におけるりアクティブサイト以外の部位を認識するモノ
クローナル抗体（ＩＢＩＯＧＩＩ）をａ ２ ｓ ｎ１
Ａｄ の濃度で加え４℃で一晩放置した。前記洗浄液で
洗浄後アルカリ性フォスファターゼ基質溶液を１〜／コ
ノ濃度で加え、ＥＬＩＳＡ ＡＮＡＬＹＺＥＲ（東洋側
器■ＨＥＴＹ−９６）で４０５ ｎｍの波長における１
分間当りの吸光摩臂什８ｆ測安Ｌ？−，，Ｊ−の結果を
添付図面第１図に示した。この図面からα、−プラスミ
ンインヒビタ−の濃度と吸光度変化との関係は直線関係
になることが理解できる。従って４−プラスミンインヒ
ビタ−におけるリアクティブサイトを特異的ｋｉｌ１ｍ
するモノクローナル抗体をサンドイツチ法における一つ
の抗体として使用することＫよって、α、−プラスミン
インヒビタ−の景を容易に測定することができる。
スファターゼで標識したα、−プラスミンインヒビタ−
におけるりアクティブサイト以外の部位を認識するモノ
クローナル抗体（ＩＢＩＯＧＩＩ）をａ ２ ｓ ｎ１
Ａｄ の濃度で加え４℃で一晩放置した。前記洗浄液で
洗浄後アルカリ性フォスファターゼ基質溶液を１〜／コ
ノ濃度で加え、ＥＬＩＳＡ ＡＮＡＬＹＺＥＲ（東洋側
器■ＨＥＴＹ−９６）で４０５ ｎｍの波長における１
分間当りの吸光摩臂什８ｆ測安Ｌ？−，，Ｊ−の結果を
添付図面第１図に示した。この図面からα、−プラスミ
ンインヒビタ−の濃度と吸光度変化との関係は直線関係
になることが理解できる。従って４−プラスミンインヒ
ビタ−におけるリアクティブサイトを特異的ｋｉｌ１ｍ
するモノクローナル抗体をサンドイツチ法における一つ
の抗体として使用することＫよって、α、−プラスミン
インヒビタ−の景を容易に測定することができる。
実施例２
濃度２０ ｕｌｌ−のヒトαツープラスミンインヒビタ
−におけるリアクティブサイトをＩＦ＃異的Ｋｉｌ！臓
するモノクローナル抗体ＣＩＤｌ０ＣＩ）をマイクロタ
イタープレート上に４℃で一晩放置し固定化した。これ
に１チ牛崩清フルプミンを含む緩衝液（１５ｍＭ Ｎａ
１ＣＯｓ １３５ ｍＭＮａＨＣＯ，１３ｍＭ ＮａＮ
、 ）を加え、室温で４時間放置した後、１１６牛血清
フルプミンを含む洗浄液（２０ｍＭリン酸緩衝液、 ０
、１３ ’５ Ｍ ＮａＣｌ ＋２ｍＭ ＮａＮ３
＋ ０．０５１６ Ｔｗｅｅｎ ２０ ）で５回洗浄し
た。次に希釈用溶液（２０ｍＭ！Ｊン酸緩衝液、０．１
３５示ＮａＣＡＩ）で極々の濃度となるように希釈した
検体（ヒト血漿）を加え、室温で４時間放置した。
−におけるリアクティブサイトをＩＦ＃異的Ｋｉｌ！臓
するモノクローナル抗体ＣＩＤｌ０ＣＩ）をマイクロタ
イタープレート上に４℃で一晩放置し固定化した。これ
に１チ牛崩清フルプミンを含む緩衝液（１５ｍＭ Ｎａ
１ＣＯｓ １３５ ｍＭＮａＨＣＯ，１３ｍＭ ＮａＮ
、 ）を加え、室温で４時間放置した後、１１６牛血清
フルプミンを含む洗浄液（２０ｍＭリン酸緩衝液、 ０
、１３ ’５ Ｍ ＮａＣｌ ＋２ｍＭ ＮａＮ３
＋ ０．０５１６ Ｔｗｅｅｎ ２０ ）で５回洗浄し
た。次に希釈用溶液（２０ｍＭ！Ｊン酸緩衝液、０．１
３５示ＮａＣＡＩ）で極々の濃度となるように希釈した
検体（ヒト血漿）を加え、室温で４時間放置した。
その後前記洗浄液で５回洗浄し、さらにアルカリ性フォ
スファターゼで標識したヒトα。
スファターゼで標識したヒトα。
−プラスミンインヒビタ−におゆるリアクティブサイト
以外の部位を認識するモノクローナル抗体（ＩＢｌｏＧ
ｌｔ）をａ ２９ ｎ１７ｗの濃度で加え、４℃で一晩
放置した。前記洗浄液で洗浄後アルカリ性７オスフアタ
ーゼ基質溶液Ｉ Ｉｋｇ／ ＩＬｔを加え、前記ＥＬＩ
ＳＡ ＡＮＡＬＹＺＥＲヲ用いて４０５ ｎｍの波長Ｋ
ｔ＝ｊｆｆる１分間当りの吸光度変化を測定した。その
結果を添付図面第２図に示した。この第２図から検体（
ヒト血漿）の希釈率と吸光度変化とは直線関係にあるこ
とが理解できる。検体６００倍希釈標品の吸光度変化の
値が６．２ Ｘ １０ であることから、この検体中の
ヒトαヨープラスミンインヒビタ−濃度は７４．０μｇ
／Ｍｔ（１，１μＭ）であった。
以外の部位を認識するモノクローナル抗体（ＩＢｌｏＧ
ｌｔ）をａ ２９ ｎ１７ｗの濃度で加え、４℃で一晩
放置した。前記洗浄液で洗浄後アルカリ性７オスフアタ
ーゼ基質溶液Ｉ Ｉｋｇ／ ＩＬｔを加え、前記ＥＬＩ
ＳＡ ＡＮＡＬＹＺＥＲヲ用いて４０５ ｎｍの波長Ｋ
ｔ＝ｊｆｆる１分間当りの吸光度変化を測定した。その
結果を添付図面第２図に示した。この第２図から検体（
ヒト血漿）の希釈率と吸光度変化とは直線関係にあるこ
とが理解できる。検体６００倍希釈標品の吸光度変化の
値が６．２ Ｘ １０ であることから、この検体中の
ヒトαヨープラスミンインヒビタ−濃度は７４．０μｇ
／Ｍｔ（１，１μＭ）であった。
＠１図及び第２図は、いずれも本発明の実施例における
検体中のヒトαオープラスミンインヒビタ−の濃度で吸
光度変化との関係を示すものである。 手続補正書 昭和５９年６月７日 特許庁長官殿 １、事件の表示 特願昭 ５９ − ８６１０１ 号 ２ 発明の名称 ヒトループラスミンインヒビタ−に対するモノクローナ
ル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット３ 補正を
する者 事件との関係 特許出願人 大阪市東区南本町１丁目１１番地 （３００）帝人株式会社 代表者岡本佐四部 ５ 補正の対象 ＋１１ 明細書第１２頁３〜４行の「放射性動物質」を
「放射性物質」と訂正する。 （２） 同第２０頁３〜４行の「（マククロタイタープ
レート）」を「（マイクロタイタープレート）」 と訂
正する。 （３） 同第２１頁１２行の「フォスファターゼ」を「
フォスファターゼ」と訂正する。 （４） 同第２２頁下から９行の「濃１［２０ｕｌＡｌ
」を「濃度２０μｌ／ ＷＬＩＪと訂正する。 以 上 手続補正書 昭和６０年２月２７日 特許庁長官殿 １、事件の表示 特願昭 ５９ − ８６１０１ 号 ２ 発明の名称 ヒト侑−プラスミンインヒビターに対するモノクローナ
ル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット３、補正を
する者 事件との関係 特許出願人 大阪市東区南本町１丁目１１番地 （３０の帝人株式会社 代表者岡本佐四部 ６、補正の内容 （１１Ｆ！Ａ細書第６頁１行の「資料」を「試料」と訂
正する。 （２） 同第６頁１２行の「検体資料中」を「検体試料
中」と訂正する。 （３） 同第１０頁の３行、５行及び１６行の「検体資
料」をそれぞれ「検体試料」と訂正する。 以 上
検体中のヒトαオープラスミンインヒビタ−の濃度で吸
光度変化との関係を示すものである。 手続補正書 昭和５９年６月７日 特許庁長官殿 １、事件の表示 特願昭 ５９ − ８６１０１ 号 ２ 発明の名称 ヒトループラスミンインヒビタ−に対するモノクローナ
ル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット３ 補正を
する者 事件との関係 特許出願人 大阪市東区南本町１丁目１１番地 （３００）帝人株式会社 代表者岡本佐四部 ５ 補正の対象 ＋１１ 明細書第１２頁３〜４行の「放射性動物質」を
「放射性物質」と訂正する。 （２） 同第２０頁３〜４行の「（マククロタイタープ
レート）」を「（マイクロタイタープレート）」 と訂
正する。 （３） 同第２１頁１２行の「フォスファターゼ」を「
フォスファターゼ」と訂正する。 （４） 同第２２頁下から９行の「濃１［２０ｕｌＡｌ
」を「濃度２０μｌ／ ＷＬＩＪと訂正する。 以 上 手続補正書 昭和６０年２月２７日 特許庁長官殿 １、事件の表示 特願昭 ５９ − ８６１０１ 号 ２ 発明の名称 ヒト侑−プラスミンインヒビターに対するモノクローナ
ル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット３、補正を
する者 事件との関係 特許出願人 大阪市東区南本町１丁目１１番地 （３０の帝人株式会社 代表者岡本佐四部 ６、補正の内容 （１１Ｆ！Ａ細書第６頁１行の「資料」を「試料」と訂
正する。 （２） 同第６頁１２行の「検体資料中」を「検体試料
中」と訂正する。 （３） 同第１０頁の３行、５行及び１６行の「検体資
料」をそれぞれ「検体試料」と訂正する。 以 上
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 サンドインチ法による免疫学的測定試薬において
、不溶性担体に結合した抗体と標識抗体とは、ヒトαオ
ープラスミンインヒビタ−のそれぞれ異なる抗原決定部
位を特異的に認識するものであり且つそのいずれか一方
の抗体はヒトαオープラスミンインヒビタ−におけるプ
ラスミンの線維素溶解作用の阻止部位を特異的に認識し
て結合し得る七ツクｐ−ナル抗体であることを特徴とす
るヒトαオープラスミンインヒビタ−に対する七ツクｐ
−ナル抗体を用いたヒトαオープラスミンインヒビタ−
の免疫学的測定試薬。 ２ 該不溶性担体が、プラスチック容器、プラスチック
ビーズ、ガラスピーズ又は金属粒子である第１項記載の
測定試薬。 ３、＃標識抗体が、酵素、放射性同位元素又は螢光物質
で標識化された抗体である第１項記載の測定試薬。 ４、 不溶性担体に結合した抗体と標識抗体を含み、こ
れら抗体はヒト偽−プラスミンインヒビターのそれぞれ
異なる抗原決定部位を特異的に％！諏するものであり且
つそのいずれか一方の抗体はヒトαオープラスミンイン
ヒビタ−におけるプラスミンの線維素溶餌作用の阻止部
位を特異的に認識して結合し得るモノクローナル抗体で
あり、これＫ （ａ）溶解剤、（ｂ）洗浄剤及び酵素で
標識化した抗体を用いる場合には、（ｅ）酵素活性を測
定するための基質及びその反応停止剤を組合せてなる免
疫学的測定のためのキット。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8610184A JPS60231168A (ja) | 1984-05-01 | 1984-05-01 | ヒトα２―プラスミンインヒビターに対するモノクローナル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット |
| NO851518A NO171169C (no) | 1984-04-17 | 1985-04-16 | Monoklonale antistoffer eller fragmenter derav, spesifikke for alfa2-plasmininhibitor |
| DK170485A DK166627B1 (da) | 1984-04-17 | 1985-04-16 | Monoklont antistof, der er specifikt over for human-alfa-2-plasmininhibitor, fremgangsmaade til fremstilling af et hybridom, der producerer antistoffet, anvendelse af antistoffet til immunologisk analyse for human-alfa-2-plasmininhibitor og anvendelse af antistoffet til fraskillelse og udvinding af human-alfa-2-plasmininhibitor |
| EP85104629A EP0159025B1 (en) | 1984-04-17 | 1985-04-17 | Monoclonal antibody specific to human alpha2-plasmin |
| DE3587714T DE3587714T2 (de) | 1984-04-17 | 1985-04-17 | Menschliches alpha 2-Plasmin spezifischer monoklonaler Antikörper. |
| US07/716,694 US5534255A (en) | 1984-04-17 | 1991-06-17 | Monoclonal antibody specific to human α2 -plasmin inhibitor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8610184A JPS60231168A (ja) | 1984-05-01 | 1984-05-01 | ヒトα２―プラスミンインヒビターに対するモノクローナル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60231168A true JPS60231168A (ja) | 1985-11-16 |
| JPH0441782B2 JPH0441782B2 (ja) | 1992-07-09 |
Family
ID=13877314
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8610184A Granted JPS60231168A (ja) | 1984-04-17 | 1984-05-01 | ヒトα２―プラスミンインヒビターに対するモノクローナル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60231168A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61286753A (ja) * | 1985-06-14 | 1986-12-17 | Teijin Ltd | モノクロ−ナル抗体を用いた免疫学的測定方法およびそのためのキツト |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5716355A (en) * | 1980-04-25 | 1982-01-27 | Hoffmann La Roche | Immunological method |
| JPS57136165A (en) * | 1981-02-18 | 1982-08-23 | Mochida Pharmaceut Co Ltd | Immunological measuring reagent |
| JPS5954966A (ja) * | 1982-09-22 | 1984-03-29 | Mochida Pharmaceut Co Ltd | 免疫学的測定試薬 |
-
1984
- 1984-05-01 JP JP8610184A patent/JPS60231168A/ja active Granted
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5716355A (en) * | 1980-04-25 | 1982-01-27 | Hoffmann La Roche | Immunological method |
| JPS57136165A (en) * | 1981-02-18 | 1982-08-23 | Mochida Pharmaceut Co Ltd | Immunological measuring reagent |
| JPS5954966A (ja) * | 1982-09-22 | 1984-03-29 | Mochida Pharmaceut Co Ltd | 免疫学的測定試薬 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61286753A (ja) * | 1985-06-14 | 1986-12-17 | Teijin Ltd | モノクロ−ナル抗体を用いた免疫学的測定方法およびそのためのキツト |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0441782B2 (ja) | 1992-07-09 |
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