JPS60224634A - 吸入アレルゲンを含有するアレルギー治療用リポソーム - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、アレルイー治療用吸入アレルデ／を含むリポ
ソーム、その製造方法、およびそれを含有する医薬組成
物に関する。

所望（よりコレステロールとあらかじめ混合していても
よいレシチンを有機溶媒ＫＷ！！解し、この溶媒を蒸発
させると、よく知られているように、がラス容器上に脂
質−ミセル層を形成する。これらの脂質を水の存在下に
、振動させるかまたは超音波処理すると、第１図に示す
ような二重層小胞が形成する。第１図は二重層小胞の断
面図で、（ａ）は脂質二重層、（ｂ）は水浴性分子であ
る。二分子膜を有する同心円状の、閉鎖的小胞、すなわ
ちリポソームが形成され、リポソームはその内部、すな
わち中心層内部および各層間に水相コンパートメントを
有する。水相コンパートメント内には、リポソームの製
造に用いた水の中に溶解されていた物質も含有する。す
なわち、物質、たとえは活性物質をリポソーム中に保持
させうろことは公知であった。これらの物質は、多くの
化学療法剤のように低分子物質でも、また蛋白質のよう
に高分子物質でもよい。

リポソームの生成に際し、コレステルールは必須ではな
いが、コレステロールの添加により、リポソーム膜の安
定性が増大する。

リポソームの製造については、とくに、デンビュールほ
か［０，Ｚｕｍｂｕｅｈｌ　＆　Ｈ，Ｇ、Ｗｅｄｅｒ　
：ビオシミーカ・エト・ビオフイジーカ・アクタ （Ｂｉｏｃｈｉｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ａｃｚａ　）
　＋　６４０　：　２５２〜２６２（１９８１））およ
びダレボリアディスほか（Ｇ、Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉａ
、　Ｄ、Ｐｕｚｍａｎ、　Ｌ、Ｌｏｕｉｓ　＆Ｄ、Ｎｅ
ｅｒｕｎｊｕｎ　：ジャーナル・オプ・バイオケミスト
　リ　−　（Ｊ、ＢｉＯＣｈ８ｍ、　）　１　４０：！
１２３　〜３３０（１９７４））によって詳細に報告さ
れている。

これまで、多くの物質がリポソームに封入されてきた。

たとえば、インシュリン、細胞分裂抑制剤、酵素、ビタ
ミン、キレート剤等である。接触アレルゲンもこの方法
で封入されている〔コルヒーほか（Ｓ、Ｌ、Ｃｏ１ｂｙ
　ａｔ　ａｌ、）　：ジャーナル・オプ・インベステイ
デイテイプ・ダーマトロジー（Ｊ、Ｉｎｖｅｓｚ、Ｄｅ
ｒｍ、　）、８０　：　１４５〜１４９（１９８３）参
照〕。このリポソーム中への封入の目的は、封入された
物質な動物またはヒト生体内の特定の受容体に輸送する
ことにあった。このため、リポソーム膜は、たとえば特
定の組織に対する抗体で標識された。しかしまた、リポ
ソームへの封入は、物質の早期代謝の防止、ある種の物
質の毒性の遮蔽のための防御方法としても利用されてき
た。

樹木、草木、草類の花粉、あるいは動物の上皮のような
吸入アレルゲンを、アレルギー傾向のあるヒトが吸い込
むと、これらのアレルゲンに対する抗体を生じる。これ
らの抗体はＩｇＫ　＠のもので肥満細胞や好塩基球中に
存在する。アレルゲンがこのＩｇＥ型抗体に遭遇すると
、第６図に示すようにヒスタミンが放出される。そして
これが引き金となって、喘息、鼻炎および結膜炎のよう
な相当するアレルギー症状が起こる。

多くの人々は、たとえば、懺皮鳩Ａ　（Ｄｅｒｍａ−ｚ
ｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ　ｆａｒｉｎａａ、　Ｄｅｒｍａ
ｚｏｐｈａｇｏｉｄｅｓｐｚｅｒｎｏｙａｓｉｎｕｓ　
）、大麦（ｂａｒｌｅｙ　）、ヤナギ（ｗｉｌｌｏｗ　
）、ベーゼル（ｈａｚｅｌ　）、／１ツノ中（ａｌｄｅ
ｒ　）およびそのハイブリッド、ヨモギ（ｍｕｇＷＯｒ
％　）　〜アカザ（ｇｏｏｓｅｆｏＯＺ　）、アラケシ
がオ（ｃｏｎｖｏｌｖｕｌｕｓ　）、ウシノケグサ（ｆ
ｅａｃｕｅｇｒａｓｓ　）、ライグラス（ｒｙｅ　ｇｒ
ａｓｓ　）、円錐孔（ｐａｎｉｃｌｅ　）、ハニーグラ
ス（ｈａｎｅｙ　ｇｒａａｓ　）、チモシー（ｚｉｍｏ
ｚｈｙ　ｇｒａｓｓ　）、スモークグラス（ｓｍｏｋｅ
　ｇｒａｓｓ　）、カタクリ（ｄｏｇ’ａｔｏｏｚｈｇ
ｒａａａ　）およびそのハイブリッド、かび、酵母、ミ
ツバチやスズメバチの毒、ゴキブリ、ならびにイヌ、ネ
コ、ウマ、モルモットおよびヒツジの上皮に対して著し
い感受性を示す。

このようなアレルギーの、吸入アレルゲン（ＩｇＲ誘発
アナフィラキシ−）による治療は、これまで、患者な、
もつとも広い意味でアレルギーに対し非感受性にする目
的で、少量の、アレルギーを起こさない用量のアレルｒ
／を投与することによって行われてきた。

アレルｒ／は患者に、皮下または経口ルートで投与され
る。経口投与の場合は、大部分のアレルデンが胃腸管内
で破壊されることに留意しなければならない。

いずれの投与方法（皮下および経口）の場合も次のよう
な欠点がある。

１）天然アレルゲンの投与は副作用を生じることが多い
。

２）経口治療は、アレルゲンの吸収が不完全なことと、
消化のために無効な場合が多い。

６）皮下注射は、患者が治療計画を遵守しないという問
題を生じ、これが治療の有効性に影譬する。

４）可溶性の高いアレルゲンの皮下投与では、それが標
的側＠（免疫感応細胞）に到達して、細胞に受容される
かどうかは疑わしい。すなわち、獲得された免疫はわず
かかまったく疑問な場合が多い。

本発明の目的は、吸入アレルゲンもしくはアレルゲン分
画（主アレルｒン）の場合の減感作療法を、より安全、
より有効、より快適にする方法を見出すことにある。

この目的は、吸入アレルゲンもしくはアレルゲン分画を
リポソームの水相コンパートメントに封入する本発明に
よって達成された。すなわち、アレルゲンもしくはアレ
ルゲン分画の封入により、アレルゲンはリポソームの水
相コンパートメント内に存在するので、好塩基球のＩｇ
ｇとの直接接触は不可能となった。

しかしながら、同様に相当する免疫応答を生じる網内系
の細胞によって吸入アレルデン負荷すボンームが好んで
受け入れられ、それが篤くべきことに、減感作療法の有
効性を増大させることが発見された。また、アレルゲン
含有リポソームは経口投与してもよいという特徴を示す
。この場合、リポソームは、バイエルのゾラークに受容
され、リンパ排出管を経て血流中に放出される。

要約すれば、吸入アレルゲンもしくはアレルゲン分画含
有り示ソームは、これらのアレルゲンもしくはアレルゲ
ン分画の吸収を増大させ、免疫応答細＠（たとえばファ
ゴサイト）を刺激して十分な応答を生じさせる（３ｍｍ
断体または耐容性の産生）。好塩基球または顆粒球およ
び肥満細胞との直接接触は、アレルゲンのリポソーム水
相コンパートメント中への封入により妨止される。すな
わち、アレルギー傾向のあるヒトおよび動物ではアレル
ゲンはＩｇＢ５Ｑのアナフィラキシ−反応性免疫グロブ
リンの生成を誘発するが、リポソームの水相コンパート
メントにアレルゲンを封入することにより、この特異的
免疫性はまったく変化し、ＩｇＧｆｉの遮断性免疫グロ
ブリンが産生される。

吸入アレルゲンは、ジアシルグリセロールホスファチジ
ルコリン（レシチン）、レシチン誘導体または炭素原子
８個から２４個までを有するジアシルグリセロールホス
ファチジルエタノールアミンおよびコレステロールから
構成されるリポソーム中に封入される。

し７チンおよびレシチン誘導体は、次の一般式％式％ （式中ＲユおよびＲ２は炭素原子８個から２４個までを
有する脂肪族アシル基であるが、Ｒ２は炭素原子１個か
ら８個までを有するアルキル基であってもよく、基−０
Ｒ１、−０Ｒ２および−０−ＰＯ３ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ
（ＣＨ３）ｓは互いに交換可能である）を有する。しか
しながら、さらに、一般式ｌのアシユバ／トレンチン、
すなわち一般式ＩにおいてＲ１ｆたはＲ２が水素原子で
あり、Ｒ１またはＲ２の他の基は炭素原子８個から２４
個までを有する脂肪族アシル基または炭素原子８個から
２４個までを有するアルキル基である化合物も使用でき
る。

一般式■においてＲ２がアルキル基である化合物は、レ
シチンとの混合物中の成分として添加すると、たとえば
、レシチンのとくに胃腸管内での分解に対して遅延効果
を示すので興味がある。

食作用や免疫応答は置換基Ｒ１やＲ２の性質（よって変
イ１゛させることができる。一般式Ｉの純粋なレシチン
もしくは誘導体または純粋なジアシルグリセロールホス
ファチジルエタノールアミンとは異なり、これらの物質
の混合物は各成分の個々の望ましい性質を強化するため
にも使用できる。いわゆるホスファチド酸（脂肪族アフ
ル基が８個から２４個までの炭素原子を有するジアシル
グリセロールリン酸エステル）の添ｍＫより、リポソー
ム内に分極が起こるが、これは極性分子の封入に有利で
ある。

アレルゲンが封入されたリポソームの製造に際しては、
一般に、一般式Ｉのジアシルグリセロールホスファチジ
ルコリンもしくはその誘導体またはこれらの物質の混合
物を、コレステロールおよびホスファチド酸と、モル比
１　：　（０，１〜０．４）：　（０，１〜０．４）の
割合に混合する。ホスファチド酸の添加量は、封入する
アレルゲンの電荷により決定される。脂質類は溶媒、た
とえばクロロホルムまたはメタノール中に浴解し、溶媒
はロータリーエバポレーターを用いて再び除去する。次
にあらかじめアレルゲンと混合した等優性リン酸緩衝液
、たとえばリン酸水素二ナトリウム／１ノン酸二水素ナ
トリウムを加える。一般には、このアレルゲン含有等張
性リン酸緩衝液１５〜３０１Ｌｌを、使用したレシチン
またはレシチン誘導体１ｍＭＫ添加し、アレルゲン濃度
を０．１〜１．０〜／−とする。

リポソームは振盪または超音波処理によって調製する。

しかしながら、アレルゲンを、デソキシコール酸ナトリ
ウム、コール酸ナトリウムまたｔ−１ｎ−オＩｆｋ−β
−Ｄ−グルコピラノシドのような界面活性剤の等優性リ
ン酸緩衝液とともに、好ましくはアレルゲン濃度０．１
〜１．ＯＭ９／−で脂質セルにＤ口え、ついでリポソー
ムを透析によって単離することもできる。

多量のコレステロールの導入を可能にするとくに好まし
いリポソームの製法にお１１で（家、レシチンまたはそ
のコレステロールとの混合物を高圧たとえば、１，５０
０気圧までに付し、その後に、屑望により超音波に曝露
する。この方法（フレンチプレス法としても知られてい
る）Ｋよれば、比較的多量のコレステロールを容易に導
入することができ、したがってリポソームに望ましい高
い安定性を付与することができる。

リポソームの製造に際しては、ステアリルおよびパルミ
チルグリセロールホスファチジルコリンを用いるのが好
ましいが、ジペラルゴノイルレシチン、シカプリノイル
レシチンおよびジベヘニルレシチンならびに多数の他の
医薬的に許容されるレシチン類も同様に適当である。

いずれの場合も、封入されなかったアレルゲンからのリ
ポソームの分離は、たとえば、セファデックス（８ｅｐ
ｈａｄｅｘ　）　−Ｇ’または４７７０−ス（８ｅｐｈ
ａｒｏａｅ　）　４　ＢＯのカラムを使用して行うのが
有利である。セファデックス−ＧｏはデΦストランの線
状巨大分子を架橋することによって得られる三次元架橋
ポリサツカライドであり、とくにデルクロマトグラフィ
ーに使用される。セファロース４Ｂ［Ｆ］は、改良アが
ロースをベースとした水浴液中でデルクロマトグラフィ
ーに用いられるビーズ様材料の一種で、そのポリサンカ
ライド鎖は架橋され、三次元ネットワークを形成してい
る。

かくして得られたリポソームは滅菌し、０．６〜２Ｔｏ
ｒｒの圧力で凍結乾燥する。経口投与用には、胃液およ
び十二指腸液から保躾するため、胃液抵抗性カプセルに
リポソームな充填する。

動物実験 例５において製造されたリポソームは、このプレバレー
ジョンが銹発する免疫刺激の程度なＩｇＲ抗体の産生に
ついて調べるため、ブラックマウス（ＣＨ３種）を用い
て試験した。

使用したアレル）ｆノは表皮４　稿（Ｄｅｒｍａｔｏｐ
ｈａ−ｇＯｉｄＱ＆　ｐｚｅｒｏｎｙｓａｉｎｕｓ　）
　抗原である〇方法 次の対照群を用いた。

Ａ　空のリポソーム Ｂ　例５の方法によるアレルｒノ封入すボンーム Ｃ遊離アレルｒン＋水醒化アルミニウムＤ　遊離アレル
ゲン Ｅ　空のリポソーム Ｆ　空のリポソームと一緒にアレルｒン注射関隔：１日
月、１４日目、２５日目、２８日目 血液サンプル採取：３１日目 用量＝７レルデン６０μｙ ＩｇＫ力価はＰＣＡ　（受身皮膚アナフィラキシ−反応
）によりマウスで測定した。

上述の計画にしたがってマウスにアレルゲンを皮下注射
し、３１日目に血液を採取し、それから血清を得た。

血清希釈液１：１．１　：１０，１　：３０および１：
９０を５０μ！取り、ラットに皮肉注射した。

２４時間後、遊離アレルゲン７ｏμＮ　ヲ０．５　％エ
バンスゾルー溶液０．５ｄとともに、ラットに静脈注射
した。６０分後に動物を層殺し、血清を皮肉注射した場
所で反応面積を測定した。

群Ａ（空のリポソーム）および群Ｂ（アレルゲン封入リ
ポソーム）では、ＩｇＥは検出できなかった。群Ｃ（ア
レルｒン＋水酸化アルミニウム）では１：６０希釈液で
、群Ｄ（遊離アレルゲン）では１；１０希釈液で、Ｉｇ
Ｒが検出された。

第４図は、受身皮膚アナフィラキシ−を示すラットの皮
膚である。

ＩＲＧ力価の測定 特異的Ｉｇ（）は放射免疫法で測定した。ｐｖｃ管に表
皮鳩ＪＪ！　（Ｄｅｒｍａｚｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ　ｐ
ｚｅｒｏｎｙａａｉｎｕｓ　）抗原を負荷した。これに
血清希釈液１０°、１０−入１０−２．１０−３および
１０１を加えた。ついで１２５ニ一抗マウスＩｇＧとイ
ンキュベートし、洗浄し、カウント率を測定した（第２
図）。

要約 例５にしたがつ℃リポソームに封入したアレルゲンの皮
下注射後には、ＩｇＥば検出できなかったが、高レベル
の特異的ＩｇＧが検出された。

同用量の遊離アレルゲンおよび水酸化アルミニウム吸着
アレルゲンの注射では、高力価のアナフィラキシ−Ｉｇ
Ｒ力価が誘発され、特異的ＩｇＧ力価は水酸化アルミニ
ウム吸着アレルゲンの場合、リポソーム封入アレルゲン
の１４　ＩＣすぎなかった。

ＩｇＥ＝アナフィラキシ−抗体 ＩｇＧ＝遁断抗体 次に、リポソームのいくつかの製造方法を例示する。

例１ ジステアリルグリセロールホスファチジルコリン１　ｍ
Ｍ　ｆｔコレステロール０．１１ｎＭト混合シ、クロロ
ホルムまたはメタノールに溶解する。ロータリーエバポ
レーターを用い、溶媒を２０〜４０℃で蒸発させ、つい
で室温で、アレルゲン含有等張性り／酸水素二ナトリウ
ム／リン酸二水素ナトリウム２０１７を加えて草アレル
ｒン０．１　ａｇ／ｍ／または酵母アレルゲン１．０′
１１ｇ／１１７の濃度とし、超音波処理して相当するリ
ポソームを製造する。吸入アレルゲン含有リポソームを
セファデックス−Ｇｏで精製し、滅菌し、ＱＪ３　Ｔｏ
ｒｒで凍結乾燥する。

例２ ジステアリルグリセロールホスファチジルコリン１ｍＭ
とジステアリルグリセロールホスファチジルエタノール
アミン１ＴｎＭをコレステロール０．６　ｍＭと混合し
、クロロホルムまたはメタノール２０−に溶解する。ロ
ータリーエバポレーターを用いて溶媒を蒸発させる。以
下、例１に記載したと同様に処理する。

例６ ジステアリルグリセロールホスファチゾルエタノールア
ミン１ｍＭを、　コレステロールまたはホスファチド酸
を用いないで、クロロホルムマタはメタノール２０ゴに
溶解し、ロータリーエバポレーターを用いて溶媒を蒸発
させる。以下、例１に記載したと同様に処理する。

例４ シバルミチルグリセロールホス７アチゾルコリン１ｍＭ
をコレステロールＱ、４ｍＭおよびジステアリルグリセ
ロールリン酸エステルまたはシバルミチルグリセロール
リン酸エステルＱ、８ｍＭと混合し、クロロホルムまた
はメタノール２０ゴに溶解する。ついで、ロータリーエ
バポレーターを用いて溶媒を蒸発させる。等優性リン酸
二水素す）　ＩＪウム／リン酸酸水素ナナトリウム緩衝
水溶液、デソキシコール酸ナトリウム（緩衝液１００１
Ｌｌに１１）を加え、ついでヨモヤ、アカザ、アラケシ
ソウ、オオバコおよびスヵンボからのアレルゲンからな
る草アレルｒン混合物を０．５１１ｖ／ｄの濃度になる
ように加える。大麦、ヒース（ｈｅａｚｈｅｒ　）、ベ
ーゼルおよびハンノキからのアレルゲンの混合物の場合
は、緩衝液１００１罠０．１１１ｖの濃度で十分テする
。この緩衝液をロータリーエバポレーター中の脂質セル
にＭＪλ４、内容物を攪拌し、ついでセファロース４Ｂ
■を用い、たとえばフラスコの内容物をセファロース床
に那えて、封入されなかったアレルゲンを除去する。ま
た、リポソームは透析によって’！ＲＨしてもよい。精
製リポソームを滅菌し、２Ｔｏｒｒ　の圧力下に凍結乾
燥する。

例５ ジパルミトイルホスファチジルコリ／をコレステロール
とモル比６０　：　４０の割合でジエチルエーテル溶媒
に溶解する。両物質の濃度が５０算１／ｄを越えないよ
うに十分なムのジエチルエーテルを使用する。溶媒を蒸
発させたのち、脂質な相変換温度以上の４０〜４５℃に
加温し、アレルゲン含有水溶液と混合し、１４００気圧
の圧力をかけ、超音波処理する。アレルゲンは脂質の加
圧処理後に添加してもよい。次にセファデックス上でろ
過して封入されなかったアレルゲンからリポソームを分
離し、口径り、２μｍのフィルターを通して滅菌ろ過す
る。

次に、医薬組成物の例を示す。

例１　カプセル 凍結乾燥したリポソームを、胃液および十二指腸液から
保２！するため、胃液抵抗性カプセルに充填する。１カ
ツセル中のリポソームの量は、所望の感作の程度により
決定される。特定のアレルゲンまたはアレルゲン混合物
の性質および感作程度に応じて、１カプセル中にリポソ
ーム１０〜１０．０００蛋白窒素単位（ＰＮＵ　）を充
填する。通常、１日１カプセルを経口投与する。

例■　アンプル アンプルに滅菌した感温または凍結乾燥リポソームを充
填する。リポソームの量は、患者の感作程度およびアレ
ルデン筐たはアレルゲン混合物の性質により、１アンプ
ル中１〜１．０００　ＰＮＵが含有されるようにする。

【図面の簡単な説明】

第１図はリポソームの断面図であって、ａは脂質二重層
、ｂはリポソームの水相コンパートメントに封入された
アレルゲンである。 第２図は動物実験の項に記載の方法により生成した特異
的ＩｇＧ力価を放射免疫法で１２５１一抗マウスＩｇ［
）への結合として測定した結果を示すグラフで、横軸は
血清の希釈度、縦軸はカラン）＆（ｃｐｍ）である。）
ＩＩ　：　Ｂ　、リボンーム封入アレルｐｆン（力価：
　１．０００　）、０−０　：　Ｆ、　空ノリ＄ソーム
とアレルゲン（２００）、ｘ−ｘ：ｐ、遊離アレルｒｙ
（１８１）、Ｄ（ｌ　：　Ｃ，アレｋＰｆ７＋水酸化ア
ルミニウム（１１１） 第３図はアレルゲンがＩｇＥｆｊ＆抗体と遭遇した場合
のヒスタミンの放出機構を示す図である。 第４図は動物実験の項に記載の特異的Ｉｇｌｌｅ力価の
測定において、受身皮膚アナフィラキシ−反応を示した
ラットの皮膚である。群Ａは空のリポソーム、群Ｂはア
レルゲン封入リポソーム、群Ｃはアレルダン＋水酸アル
ミニウム、群りは遊離アレルデ／における結果で、下段
に血清の希釈率を示す。 代理人　浅　村　皓 第１図 第２図 立１シ責４款牢

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　水相コンパートメントに吸入アレルゲンまたは
   アレルゲン分画を含有するリポソーム（２）脂肪族アシ
   ル基に炭素原子８個から２４個までヲ有スるジアシルグ
   リセロールホスファチジルエタノールアミンおよび／ま
   たは一般式％式％ （式中Ｒ１およびＲ３は炭素原子８個から２４個までを
   有する脂肪族アシル基であるが、Ｒ２は炭素原子１個か
   ら８個までを有するアルキル基でありてもよく、基−Ｏ
   Ｒよ、−〇Ｒ２および−０−ＰＯ３ＣＨ２−Ｃ！Ｈ２−
   Ｎ（ＣＨ５）　３は交換可能である）で示されるレシチ
   ンもしくはレシチン誘導体から、所望により、脂肪族ア
   シル基に炭素原子８個から２４個までを有するジアシル
   グリセロールリン酸エステルおよび／または一般式Ｉに
   おいてＲ１またはＲ２が水素原子、Ｒ１またはＲ２の他
   方が炭素原子８個から２４個までを有する脂肪族アシル
   基または炭素原子８個から２４個までを有するアルキル
   基であるアジュバントレシチンの存在下、また所望によ
   りコレステロールの存在下に形成され、その水相コンパ
   ートメント内に等偏性すン酸緩衝液中吸入アレルｒンま
   たはアレルゲン分画を含有する特許請求の範囲第１項記
   載のリポソーム。 （３）　ジアシルグリセロールホスファチゾルエタノー
   ルアミンおよび一般式Ｉの他のレシチンまたはレシチン
   誘導体ならびに任意成分のアジュバントレシチンは、単
   一成分で用いられた場合はそれ単独でまた混合して用い
   られた場合は混合物としてモル比が１　＋　０．１〜０
   ．４の割合になるようにコレステロールを存在させる特
   許請求の範囲第２項記載のリポソーム。 （４）ジアシルグリセロールホスファチジルエタノール
   アミンおよび一般式Ｉの他のレシチンまたはレシチン誘
   導体ならびに任意成分のアジュバントレシチンは、単一
   成分で用いられた場合はそれ単独でまた混合して用いら
   れた場合は混合物として、モル比が１　：　（０，１〜
   ０．４　）　：　Ｃ０，１〜０．４）の割合になるよう
   に、コレステロールと脂肪族アシル基に炭素原子８個か
   ら２４個までを有するジアシルグリセロールリン酸エス
   テルを存在させる特許請求の範囲第２項および第３項の
   いずれかに記載のリポソーム。 （５）使用したジアシルグリセロールホスファチジルエ
   タノールアミンまたは式Ｉのレシチンもしくはレシチン
   誘導体１ｍＭに対して、　リン酸緩衝液洛液１ｗＬｔあ
   たり０．１〜１〜のｌｌｆのアレルゲンまたはアレルゲ
   ン分画を含むアレルデン含有尋張性リン酸緩衝水溶液１
   ５〜３０１１１７を含む特許請求の範囲第２項から第３
   項までのいずれかに記載のリポソーム。 （６）吸入アレルゲンまたはアレルデノ分画が封入され
   たリポソームを含有する医薬組成物。 （７）吸入アレルゲンまたはアレルゲン分画を含有する
   リポソームを製造するにあたり、脂肪族アシル基に炭素
   原子８個から２４個までを有するジアシルグリセロール
   ホスファチジルエタノールアミンおよび／または一般式
   ｌ ＣＨ３−０−Ｒ１ １ （式中Ｒ１およびＲ２は炭素原子８個から２４個までを
   有する脂肪族アシル基であるが、　Ｒ２は炭素原子１個
   から８個までを有するアルキル基であってもよく、基−
   ０ＲＩ、−〇Ｒ２および−０−ＰＯ３Ｃ１２−ＣＨ２−
   Ｎ（ＣＨ５）３は交換可能である）で示される他のレシ
   チンもしくはレシチン誘導体、所望により脂肪族ジアシ
   ル基に炭素原子８個から２４個までを有するジアシルグ
   リセロールリン酸エステルおよび／または一般式Ｉにお
   いてＲ１またはＲ２が水素原子、Ｒ１またはＲ２の他方
   が炭素原子８個から２４個までを有する脂肪族アシル基
   または炭素原子８個から２４個までを有するアルキル基
   であるアジュバントレシチン、および／またはコレステ
   ロールを混合し、溶媒に溶解し、所望により溶解混合物
   を高圧に＊真し、いずれの場合も溶媒を除去し、ついで
   残留物をアレルゲンまたはアレルゲン分画を含有する等
   偏性リン酸緩衝液と混合し、振盪または超音波処理によ
   りリポソームを産生させるかあるいは残留物をアレルｒ
   ／またはアレルゲン分画をあらかじめ界面活性剤の存在
   下に分散させたリン酸緩衝水溶液と混合し、生成したリ
   ポソームを透析によって単離し、いずれの場合も封入さ
   れなかったアレルゲンを有利にはカラムを用いて除去し
   、精製リポソームを滅菌し、所望により凍結乾燥するこ
   とを特徴とする製造方法。 （８）　シアシルグリセロールホスファチジルエタノー
   ルアミンおよび／または一般式■のレシチンもしくはレ
   シチン誘導体をコレステロールとモル比１：０．１〜０
   ．４の割合に混合し、溶媒を蒸発させたのち、ジアシル
   グリセロールホスファチジルエタノールアミンまたは一
   般式Ｉのレシチンもしくはレシチン誘導体あるいはこれ
   らの成分の混合物１ｍＭに対して、緩衝液１ゴ中０．１
   〜１．０■のアレルゲン濃度を有するアレルｒン含有等
   張性リン酸緩衝液１５〜６０−をｍえる特許請求の範囲
   第７項記載の製造方法。 （９）　シアフルグリセロールリン酸エステルヲ、し７
   チ／成分に対して、モル比０．１〜０．４　：　１の割
   合で添加する特許請求の範囲第７：！Ｊおよび第８虫の
   いずれかに記載の製造方法。 α〔界面活性剤としてデソキシコール酸ナトリウム、コ
   ール酸ナトリウムまたはｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコ
   ピラノシドな用いる特許請求の範囲第７項記載の製造方
   法。