JPS6013712A - 抗アレルギ−薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、カフェー酸メチルエステルを有効成分とする
抗アレルギー薬剤に関するものである。

近年、生体機能、特に呼吸器系並びに炎症、免疫につい
てグロスタグランジン（ＰＧ）及びその関連物質の関与
が明らかにされている。ＰＧ及びその関連物質は、アラ
キドン酸から特定の酵素によって作られ、アラキドン酸
カスケードと呼ばれる代謝系を構成している。そこで、
アラキドン酸代謝異常を来たすと、脈管系、呼吸器系、
免疫系等の諸疾患を惹起することも知られている。

本発明者は、アラキドン酸功スケートの酵素系に作用す
る化合物を追求し、その薬効がアラキドン酸カスケード
の調節に基づいて発現する可能性を研究した結果、カフ
ェー酸、ニーバチリン及びｑ′−デメチルニーバチリン
の各化合物が抗アレルギー薬剤として有用であることを
見出した。

ＰＧは、羊の精のり腺に多量に含まれ、この発見を契機
にＰＧＥ□、Ｅ２、Ｅ３、Ｆ工。、Ｆ２ａ、Ｆ３ａの乙
種のＰＧが抽出、単離され、その化学構造も明らかにさ
れた。これらのＰＧは、平滑筋の収縮及び弛緩に対する
作用、血小板凝集に対する作用、アデニル酸シクラーゼ
に対する作用、胃酸分泌に対する作用、生殖生理に対す
る作用等の生理活性を有する脂溶性物質で、安定である
ため、比較的作用の強いＰＧＥ工、Ｅ、及びＦ２ａ等が
すでに製剤化され、末梢血管拡張剤、抗血栓薬剤及び分
娩促進剤として用いられている。

また、不安定なエンドイルオキシド（ＰＧＧ２及びＰＧ
Ｈ２）が単離され、その化学構造も解明されて、ＰＧの
生合成経路が明らかにされるに至った。

更に、生理活性物質として知られるトロンボキサンＡ２
．ゾロスタサイクリン及びロイコトリエン等のＰＧ関連
物質は前記ＰＧと共にすべて細胞膜の燐脂質中に蓄えら
れているアラキドン酸から生合成されており、アラキド
ン酸の生体機能の調節に果す役割は極めて大きい。アラ
キドン酸の一部は、リポキシｒナーゼ（Ｌｌｐｏｘｙｇ
ｅｎａｓｅ）にヨッてヒドロペロキシエイコサテトラエ
ンｐ（Ｈｙｄｒｏ−ｐｅｒｏｘｙｅｌｃｏｓａｔｅｔｒ
ａｅｎｏｌｃ　ａｃｌｃｌ　）　（ＨＰＥＴＥ　）を経
てヒドロキシエイコサテトラエン酸（ＨｙｄｒＯＸｙ−
ｅｌｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｌｃ　ａｃｌｄ　）　（
ＨＥＴＥ）と称される生理活性物質へと変換され、その
うち、Ｓ−Ｖポキシダナーゼによって、！−−ＨＰＥ丁
Ｅを介してロイコトリエン群が作られる。ロイコトリエ
ン（Ｌｅｕｋｏｔｒｌθｎθ）は、喘息の発作時に肺で
作られ、肺、気管支筋を強く収縮する活性がある他に、
血管透過性の九進作用、白血球遊送作用等の炎症反応と
深い係りをもつ生理活性があり、実際に炎症組織にロイ
コトリエンの生成活性があることも知られている。この
ようにロイコトリエンと喘息、炎症との関係が明らかに
なっている。従って、末梢循環促進作用及び動脈硬化予
防、治療作用等のあるＰＧ合成酵素活性を抑制すること
なく、Ｓ−リポキシダナーゼ活性を阻害する５　１Ｊボ
キシグナーゼの特異的阻害剤を見出すことは、喘息、炎
症等のアレルギー性疾患の原因療法にりなカ玉る重要な
事柄である。

このような背景から、Ｓ−リポキシダナーゼ阻害活性及
びロイコ）　ＩＪエン生成阻害活性を有する化合物を探
索した結果、本発明者らは、先に下記化学構造式の化合
物、カフェー酸、ニーバチリン及びダ′−デメチルニー
バチリンが前記阻害活性を示すことを明らかにし、特許
出願を行なった。

（カフェー酸） ０Ｈ３ （ニーバチリン） （ｔ′−デメチルニーバチリン） 本発明者らは、鋭意研究の結果、下記化学構造式の化合
物、カフェー酸メチルエステル（以下、「前記化合物」
という。）がこれらの化合物に比し、更に選択的に３−
リポキシダナーゼ活性のみを阻害するすぐれた生理活性
を有することを新たに見出し、こ＼に本発明を完成する
に至った。

Ｕ このような生理活性を示す前記化合物は、強力な喘息治
療薬剤、抗炎症薬剤、免疫賦活剤等の抗アレルギー薬剤
として、その安全性と相まって極めて有用である。

前記化合物は既知物質であり、王な理化学的性質は、次
のとおりである。

本発明の薬剤の製剤化については後に詳述するが、注射
用、点滴用、経口用の用途によってそれぞれ剤型を決定
すればよい。即ち、水溶剤の場合は、前記化合物を有効
成分として通常の製剤化方法により注射用、点滴用水溶
剤、油剤等とする他、経口用としてカプセル剤、錠剤、
顆粒剤、細粒剤、散剤、エアゾール剤等とするには、通
常の製剤化方法で製剤化すればよい。

次に、前記化合物の抗アレルギー作用及び急性毒性につ
いて記載する。

（１）　抗アレルギー作用 試験例１　（５−リポキシゲナーゼ阻害活性）／）左−
リポキシゲナーゼ活性のアッセー帰化肥満細胞腫のマス
トサイトーマ （Ｍａｓｔｏｃｙｔｏｍａ　）　Ｐ　−ｇ　／　Ａ；細
胞をＩｎ　ＶｌｔｒＯの浮遊培養の系に移し、クローニ
ングを行って得たＳ−リポキシゲナーゼ活性の高い細胞
株、コーＥ−乙株［ＫａＷａｍｕｒａ、Ｍ、　ａｔ　ａ
ｌ　：ＰｒｏｓｔａｇｌａｎｄＩｎｓ、／９　：　ｂ　
３　ｑ（／　９　ｇ　Ｏ）参照〕を、グ０時間、ｎ−酪
酸処理してＳ−リポキシゲナーゼ活性を顕著に増大させ
た〔にｏｓｈｌｈａｒａ、Ｙ、　ｅｔ　ａｌ　：　Ｊ、
　Ｂｌｏｌ、　Ｃｈｅｍ、　。

２３７．７３θコ、（１９ｇ２）参照〕。

第１図（ａ）に示すように、前記癌化肥満細胞腫の場合
は、Ｓ−リポキシゲナーゼ（Ｓ−）−ＩＥＴＥ　）活性
よりも／２−リポキシゲナーゼ（／２−＋−＋ＥｖＥ）
活性がはるかに高いが、第１図（Ｅｌ）のように、前記
２−Ｅ−１，株ではその比が完全罠逆転している。

２）５−リポキシゲナーゼ阻害活性 ｎ−酪酸処理した前記２−Ｅ−１，株から得た５θｍＭ
燐酸緩衝液（ｐＨ２４Ｌ）、／ｍＭＥＤＴＡ及び０．７
％ゼラチンのホモジネートの１０．０θ０×２上清を酵
素源として用い、その５−　ＩＪポキシグナーゼ活性に
対する前記化合物の薬効を、カフェー酸を対照化合物と
して比較し、調べたところ、前記化合物は、広範囲の濃
度依存的に５−リポキシゲナーゼ活性を顕著に阻害した
。

第２図（ａ）は、前記化合物のＳ−リポキシゲナーゼに
対する阻害効果を、対照化合物のカフェー酸の効果と比
較して示すグラフであり、！　−ＩＪポキシグナーゼ活
性を３μ間の濃度で３７％、／θμＨの濃度で９乙チ阻
害した。

図中、０−−−−−−−う　前記化合物対照化合物 即ち、対照化合物であるカフェー酸の５−リポキシゲナ
ーゼ活性に対する阻害率は、６ １０　Ｈの濃度で３θ％であり、濃度が高くなるにした
がって順次上昇し、１０−’ｘの濃度で９左俤を示すの
に対し、前記化合物のＳ−リポキシゲナーゼ活性に対す
る阻害率は、３Ｘ１０　Ｍ＋７）濃１ｆ”Ｃ−＆／％、
１０　’Ｍノ濃度で９６チである。

なお、前記化合物及び対照化合物以外のそのメチルエス
テル誘導体について、Ｓ−リポキンゲナーゼ活性を調べ
た結果は第１表のとおりであり、前記化合物の極めて強
い阻害活性が明らかにされた。

第　／　表 注：前記化合物を加えない場合の酵素活性な１００％と
した。

なお、上記の実数では、標準アツセー ＜１０ｔｌ＞により、上清θ９１をθコμＣ１〔１４Ｃ
〕アラキドン酸、１０　ｍＭ　Ｃａα２及び２×１０　
Ｍ濃度のインドメサシンで３りＣ１Ｓ分間攪拌してイン
キュベートした。

また、前記化合物の存在下でｎ−酪酸処理した前記、２
−Ｅ−４株のＰＧ合成酵素活性を調べてみると、Ａｘｌ
ｏ　Ｍ濃度まではＰＧの産生な全く阻害せず、むしろ促
進活性があった（第２図（ｂ）　）　。

第２図（ａ）、Ｏ））の結果より、前記化合物はＰＧ合
成酵素を阻害することなく、リポΦシｒナーゼ活性のみ
を完全に阻害した。

即ち、前記化合物は、５−リポキシダナーゼ活性の特異
的阻害剤であることが明らかにされた。

前記化合物の５θチ阻害濃度（ＩＤ５０　）は、’Ａｇ
Ｘ１０　Ｍであり、対照化合物の３．ｑｘｌｏ’ｌ＜に
比しはるかに強い阻害活性がみられた。

なお、前記化合物の細胞におけるロイコトリエン産生の
阻害活性は、対照化合物が１０　’Ｍ濃度で完全な阻害
活性を示すことから、同等以上の阻害活性効果が当然に
見込まれる。

以上の実験舶来から、前記化合物は喘息治療薬剤及び抗
炎症薬剤等の有効成分として用い得ることが確認された
。

（２）急性毒性 前記化合物の急性毒性は、ＬＤ５ｏで＞　、：２４０ｗ
ｑＡｙであり、低毒性である。

次に、前記化合物の投与量及び投与方法について述べる
。本発明の薬剤は、錠剤、カプセル剤、エアゾール剤等
の経口投与剤として、又注射（静脈内、皮下）、点滴用
製剤、座薬製剤等の非経口投与剤として投与され、有効
量は、症状、投与経路、剤型、投与回数等によって変え
得るが、成人の治療に用いられる場合の有効量は、通常
、経口投与剤では７日当松、有効成分の前記化合物とし
てはｙθ００！？−１００〜／体重Ｋｇの範囲で、好ま
しくはａ２〜左Ｏｑ／体重Ｋｇ、更に好ましくは０、！
；−１０ｑ／体重匂が適当であり、また非経口投与剤で
は／１轟り、有効成分の前記化合物としてはソθ００２
〜２００１１／体重Ｖｇの範囲で、好ましくはθθコ〜
／θ０Ｒ９７体重Ｋｇ、更に好ましくはθノル２０ｕｉ
／体重Ｋｇが適当である。

前記化合物を注射、点滴用製剤とするときは、単位投与
量アングル或いは添加剤と共に投与量の容器中で供し得
る。この製剤は、懸濁液、溶液、油性又は水性ビヒクル
中の乳液の如き形態でもよく、懸濁化剤、安定化剤又は
分散剤の如き処方剤を含有させることも可能である。

懸濁化剤としては、グルコース、ゼラチン、ステアリン
酸アルミニウムグル等、安定化剤としては、レシチン、
リノール酸、モノオレイン酸ンルビタン等、非水性ビヒ
クルともてアーモンド油、ココナツト油、精製ゴマ油、
油性エステル等、防腐剤としては、Ｐ−ヒドロキシ安息
香酸メチル、ソルビン酸等が用いられる。

前記化合物を経口投与用製剤とする場合は、カプセル剤
のように腸管からの吸収に好適な形態で投与されること
が望ましい。

経口投与用のカプセルでは、結合剤、例えばゼラチン、
ソルビット等、賦形剤、例えば乳糖、砂糖、澱粉、グリ
シン等、安定剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ア
スコルビン酸等、崩壊剤として馬鈴薯澱粉等を適宜含有
させることができる。

前記化合物の経口投与製剤の調製に当っては、更に医薬
用に許容し得る腸溶性皮膜形成物質を用いて皮膜を施す
ことができる。この皮膜形成物質としては、セルロース
、糖類等の炭水化物誘導体として酢酸フタル酸セルロー
ス（ＣＡＰ）、又アクリル酸系共重合体、二塩基酸モノ
エステル類等のポリビニル誘導体としてアクリル酸メチ
ル・メタアクリル酸共重合体、メタアクリル酸メチル・
メタアクリル酸共重合体が挙げられる。

本発明の有効成分の崩壊、溶出を良好ならしめるために
、界面活性剤、例えばアルコール、エステル類、ポリエ
チレングリコール誘導体、ソルビタン脂肪酸エステル類
等の１種又は２種以上を添加することができる。また、
賦形剤として、例えハｌｉ　糖、乳糖、澱粉、結晶セル
ロース、マンニツト、軽質無水珪酸、アルばン酸マグネ
シウム、メタ珪酸アルばン酸マグネシウム、炭酸カルシ
ウム、炭酸水素ナトリウム等の１種又は、２種以上を組
合せて添加することができる。滑沢剤としては、例えば
ステアリン酸マグネシウム、メルク、硬化油等を１種又
はコ種以上添加することができ、また矯味剤又は矯臭剤
として、食塩、サッカリン、糖、マンニット、オレンジ
油、カンゾウエキス、クエン酸、ブドウ糖、メントール
、ユーカリ油、リンゴ酸等の甘味剤、香料、着色剤、保
存料等を含有させてもよい。懸濁剤、湿潤剤の如き佐剤
としては、例えばココナツト油、オリーブ油、ゴマ油、
落花生油、乳酸カルシウム、ベニバナ油、大豆燐脂質等
を含有させることができる。

本発明の薬剤を経口投与する場合は、懸濁剤、軟・硬カ
ッセル剤又は錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、エアゾール
剤として投与され、非経口投与する場合は、固体状又は
懸濁粘稠液状として持続的な粘膜吸収が維持できるよう
に投与される。

次に、本発明の薬剤の製剤例を挙げる。

製剤例／、（注射・点滴剤） 前記化合物５００ηを含有するように粉末ブドウ糖５ｖ
を加えてバイアルに無菌的に分配し、密封して保存する
。使用前に、ａｇｓ％生理的食塩水Ｓθ０ｒＩＬｌを添
加して静脈内注射剤とし、１日、１Ｏ−５００ｄを症状
に応じて静脈内注射剤をｉ点滴で投与する。

製剤例、２．（錠剤） 以下の成分組成で大人用錠剤１００個を調製した。

〔八〕

前記化合物　ｉｏｙ 乳　糖　９．９’ｌｆ ヒドロキシプロビルセ　０．０４　ｆ ルロース ＢＥ 酢酸フタル酸セルロース　ｏ、ｔｐｔ Ａの成分をとり、よく混合し、これを直接加圧するか、
又はよく練合した後、押し出し型製粒機のスクリーンを
通して顆粒成形を行い、十分乾燥した後、加圧して錠剤
を調製した。

更に、必要に応じ、成形した錠剤によく溶解した８の基
材を被覆して腸溶性錠剤とする。

製剤例３．（カプセル剤） 以下の成分で大人用カプセル剤１００個を調製した。

〔八　〕

前記化合物　／θ２ 乳　糖　、２．４ＬＡ　グ ＣＢ） 酢酸フタル酸セルロース　１９ 上記のへ成分をとり、よく混合した後、常法に従って粒
状に成形し、これをよく乾燥して篩別し、カプセル用に
適した顆粒剤とし、これをカプセルに充填してカプセル
剤を調製した。更に、必要に応じ、この顆粒剤を浮遊流
動させながら溶解したＢの基材を被覆し、腸溶性の顆粒
剤として、これをカプセルに充填して腸溶性カプセル剤
とする。

【図面の簡単な説明】

第１図は、癌化肥満細胞腫マストサイトーマＰ−ｇｉｓ
＜ａ＞及びそのクローン株培養細胞２−Ｅ−６株（１）
）のりポキシダナーゼ活性を示す薄層クロマトグラフィ
ーのラジオスペクトラムであり、第２図は、本発明の化
合物の３−リポキシダナーゼ阻害効果（ａ）とグロスタ
グランノン合成活性促進効果（１））をそれぞれ示すグ
ラフである。 特許出願人　理化学研究所 同　上　財団法人　東京都老人総合研究所ＣｐｍＸｉＱ
’ （α）　第２図 東京都板橋区栄町３５番地の２

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）　カフェー酸メチルエステルを有効成分とする抗
   アレルギー薬剤。
2. （２）非経口投与形態による特許請求の範囲第１項記載
   の抗アレルギー薬剤。
3. （３）経口投与形態による特許請求の範囲第１項記載の
   抗アレルギー薬剤。